Neuronii amigdalei bazolaterale anterioare cuprind o engramă de memorie a fricii la distanță partea 1

Introducere:

Indiciile amenințătoare ale mediului generează adesea amintiri de frică durabile, dar modul în care acestea sunt formate și stocate rămâne investigat în mod activ.

Memoria fricii este o formă de memorie în creierul nostru. Este o formă cu totul specială de memorie, care adesea ne face să ne simțim speriați, înfricoșați și nervoși. Dar relația dintre această amintire a fricii și memoria noastră este foarte complexă.

În primul rând, amintirile de frică nu au nimic de-a face cu memoria noastră pe termen scurt. Majoritatea amintirilor de frică sunt stocate în băncile noastre de memorie pe termen lung. Acesta este motivul pentru care uneori avem amintiri de demult care plutesc în mintea noastră.

În al doilea rând, amintirile de frică nu ne afectează neapărat memoria. Deși poate provoca schimbări în atenția și starea noastră de spirit, nu există dovezi că provoacă pierderea memoriei. Mulți oameni încă pot afișa amintiri foarte puternice după ce au experimentat niște lucruri groaznice.

În cele din urmă, nu ar trebui să permitem amintirilor înfricoșătoare să devină o temă în viața noastră. Trebuie să luăm măsuri pozitive pentru a procesa aceste amintiri și a merge într-o direcție mai pozitivă. Aceasta include obținerea terapiei, a fi activ social, a vă exercita corpul și creierul și menținerea unei mentalități pozitive și a sănătății mintale.

Deci, deși amintirile înfricoșătoare ne pot provoca mult stres și disconfort, trebuie să avem încredere în abilitățile și eforturile noastre. Putem să ne confruntăm cu aceste amintiri înfricoșătoare, să ne întărim memoria, să creștem și să devenim oameni mai buni și mai încrezători. Se poate observa că trebuie să ne îmbunătățim memoria. Cistanche deserticola poate îmbunătăți semnificativ memoria deoarece Cistanche deserticola este un material medicinal tradițional chinezesc cu multe efecte unice, dintre care unul este îmbunătățirea memoriei. Eficacitatea cărnii tocate vine din diferitele ingrediente active pe care le conține, inclusiv acid, polizaharide, flavonoide etc. Aceste ingrediente pot promova sănătatea creierului într-o varietate de moduri.

Faceți clic pe Cunoașteți memoria pe termen scurt cum să vă îmbunătățiți

Se crede că amintirea unei amintiri recente a fricii reflectă reactivarea neuronilor, în mai multe regiuni ale creierului, activate în timpul formării memoriei, indicând faptul că ansamblurile neuronale distribuite anatomic și interconectate cuprind engrame ale memoriei fricii.

Măsura în care engramele de reactivare a activării specifice din punct de vedere anatomic persistă în timpul rememorării fricii pe termen lung, totuși, rămâne în mare parte neexplorată. Am emis ipoteza că neuronii principali din amigdala bazolaterală anterioară (BLA), care codifică valența negativă, se reactivează în mod acut în timpul amintirii de la distanță a fricii pentru a determina comportamentul fricii.

Metode:

Folosind descendenții adulți de șoareci TRAP2 și Ai14, expresia tdTomato persistentă a fost folosită pentru a „PRINCA” neuronii aBLA care au suferit activare Fos în timpul condiționării fricii contextuale (șocuri electrice) sau condiționării numai în context (fără șocuri) (n=5/grup) . Trei săptămâni mai târziu, șoarecii au fost expuși din nou la aceleași indicii de context pentru rememorarea de la distanță și apoi sacrificați pentru fosimunohistochimie.

Rezultate:

Ansamblurile neuronale TRAPed (tdTomato +), Fos + și reactivate (dublă etichetate) au fost mai mari în frică decât șoarecii condiționate de context, subregiunea mijlocie și cadranele dorsomediale medii/caudale ale aBLA afișând cele mai mari densități dintre toate cele trei populații de ansamblu.

În timp ce ansamblurile dTomato + au fost predominant glutamatergice în context și grupuri de frică, comportamentul de înghețare în timpul rememorării de la distanță nu a fost corelat cu dimensiunile ansamblurilor în niciunul dintre grupuri.

Discuţie:

Concluzionăm că, deși o engramă de memorie a fricii care include aBLA se formează și persistă la un moment îndepărtat, plasticitatea care afectează răspunsurile electrofiziologice ale neuronilor engramei, nu dimensiunea populației lor, codifică memoria fricii și conduce manifestări comportamentale ale amintirii fricii pe termen lung.

Introducere

Stimulii care provoacă frică formează adesea amintiri asociative robuste și durabile care conectează indicii de mediu cu evenimentele amenințătoare ale vieții.

Întâlnirile ulterioare cu amenințări percepute în mod similar au ca rezultat comportamente de protecție mai robuste, reflectând amintirea fricii. Erorile în procesarea asocierii fricii pot produce rezultate psihiatrice cu valență negativă, inclusiv anxietatea și tulburarea de stres post-traumatic (PTSD) (Tovote și colab., 2015).

Înțelegerea întregii complexități a mecanismelor care stau la baza memoriei fricii este esențială pentru identificarea anomaliilor circuitelor funcționale care promovează bolile psihiatrice legate de frică și sugerează noi ținte terapeutice pentru a restabili procesarea normală a fricii.

În ultimele decenii, cercetarea memoriei fricii s-a concentrat în mare parte pe formarea, stocarea și rememorarea memoriei pe termen scurt (Kimand Jung, 2006; Kim și Cho, 2020; Lee și colab., 2021).

Studiile au implicat ansamblurile neuronale ale SNC interconectate distribuite pe scară largă ca fiind responsabile pentru formarea și stocarea memoriei fricii (Ramirez și colab., 2013; Liu și colab., 2014; Roy și colab., 2022). Activarea acestor ansambluri prin amenințări percepute are ca rezultat o transmisie sinaptică potențată, reprezentând o amprentă fizică persistentă cunoscută sub numele de engramă a memoriei (Yuan și colab., 2011; Miyawaki și Mizuseki, 2022).

Se crede că retragerea memoriei pe termen scurt reflectă reactivarea acelorași ansambluri neuronale care au fost activate inițial în timpul formării memoriei, cu dovezi care indică faptul că chiar și activarea parțială a unui singur ansamblu neuronal poate evoca comportamente legate de frică, ceea ce indică amintirea memoriei (Roy et al., 2022). ). În timp ce engramele de circuit potențate stabile din punct de vedere stanatomic pot explica memoria fricii pe termen scurt, măsura în care acestea participă la memoria fricii pe termen lung rămâne neclară.

Deși se crede că consolidarea memoriei fricii pe termen lung depinde de consolidarea progresivă sau sporadică a memoriei pe termen scurt, mai multe studii recente sugerează că ansamblurile neuronale ale memoriei fricii pe termen scurt sunt supuse unei organizări dependente de timp, ceea ce duce la migrarea memoriei stocate către un ansamblu neuronal diferit, fie în cadrul aceeași regiune a creierului (DeNardo și colab., 2019) sau regiuni ale creierului diferite cu totul (Frankland și Bontempi, 2005; Do Monte și colab., 2016).

Amigdala bazolaterală (BLA) este o regiune a creierului parte integrantă a memoriei fricii și a fost implicată atât în ​​amintirea recentă, cât și la distanță a memoriei fricii (Maren și colab., 1996; Gale și colab., 2004; Kitamura și colab., 2017; Liu și colab. ., 2022).

În mod special, rapoartele au descris o engramă specifică pe termen scurt a memoriei fricii în BLA care este (1) activată în timpul formării memoriei, (2) reactivată în timpul retragerii memoriei și (3) capabilă să conducă comportamente asemănătoare fricii în contexte fără frică ( Royet al., 2022; Zaki et al., 2022). Cu toate acestea, măsura în care ansamblul neuronal aBLA activat în timpul formării memoriei este reactivat în timpul retragerii memoriei de la distanță rămâne nedeterminată.

În acest studiu, am testat ipoteza că reactivarea unui ansamblu de memorie BLAfear este observată la un moment îndepărtat la 3 săptămâni după condiționarea fricii. De o importanță deosebită, circuitele BLA contribuie atât la comportamentul aversiv, cât și la cel de căutare a recompensei (Hu, 2016), cu neuroni cu valență negativă care răspund la stimulii de frică localizați în mod specific la nivelul BLA anterior (aBLA) (Goosensand Maren, 2001; Kim et al., 2016, 2017; Zhang și colab., 2020).

Concentrându-ne pe aBLA, am folosit a doua generație de șoareci transgenici TargetedRecombination in Activated Populations (TRAP2) (DeNardo și colab., 2019), în care activitatea Cre-recombinazei este legată de elementele de amplificare imediate a promotorului genei timpurii c-fos prin intermediul unui Cre îmbunătățit. -complexul receptorilor de estrogeni (ER). Acest complex neuron care exprimă poate suferi recombinare persistentă Cre, adică poate fi „TRAPED”, prin administrarea de agonistamoxifen ER sau a analogului său cu acțiune mai scurtă 4-hidroxitamoxifen (4-OHT), permițând exprimarea persistentă a Cre. -molecule raportoare efectoare dependente.

Aici, am încrucișat șoarecii TRAP2 și linia de reporter tdTomato dependentă de Cre Ai14 (Madisen și colab., 2010) și am cuantificat măsura în care neuronii aBLA TRAPed (tdTomatopozitive) în timpul condiționării fricii contextuale sunt reactivați (exprimă proteina imunoreactivă Fos) în timpul memoriei de la distanță. 3 saptamani mai tarziu.

Ca și în memoria fricii pe termen scurt, descoperirile noastre susțin prezența ansamblurilor neuronale ale memoriei fricii glutamatergice pe termen lung în aBLA.

În mod remarcabil, totuși, dimensiunea ansamblurilor neuronale aBLA, indiferent dacă au fost activate în timpul condiționării sau a amintirii de la distanță a memoriei sau ambelor, nu a fost corelată cu comportamentul fricii, ceea ce indică faptul că natura plasticității asociate învățării fricii și impactul său eventual asupra memoriei fricii la distanță amintesc de răspunsurile electrofiziologice asociate ale neuronilor ansamblului. , nu dimensiunea populației ansamblului, determină în primul rând comportamentul de memorie frică la distanță.

Materiale și metode

Aprobare etică

Procedurile experimentale au fost aprobate de Comitetul Instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor de la Universitatea din Texas Health SanAntonio și s-au conformat cu Ghidul Consiliului Național de Cercetare pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator.

Animale

Perechi de reproducere de șoareci homozigoți Fos2A-iCreER/2A-iCreER knockin (TRAP2, #030323) și R26Ai14/+ (Ai14, #007914) (Jackson Laboratories) au fost încrucișați pentru a produce hemizygousTRAP2:Ai14Ai14. După înțărcare, șoarecii au fost grupați și găzduiți în cuști de plastic (29 × 18 × 13 cm) care conțineau așternut de rozătoare (Sani-chips; Harlan Teklad, Madison, WI, SUA). :10 h ciclu lumină-întuneric (lumini aprinse la 0600 h). Mâncarea și apa erau disponibile ad libitum. Experimentele au fost inițiate când șoarecii au ajuns la vârsta de 3 luni.

Obișnuirea comportamentală

Ca și în studiile publicate anterior (DeNardo și colab., 2019), șoarecii au fost supuși cinci zile consecutive de antrenament de obișnuire imediat înainte de condiționarea fricii contextuale pentru a minimiza inducerea CFO ca răspuns la condițiile experimentale care nu sunt investigate (de exemplu, manipulare, explorare nou context etc.)( Figura 1B).

Fiecare sesiune zilnică de obișnuire a durat 3 minute și a constat în expunerea la camera de condiționare (HabitestModular System, Coulbourn Instruments). Indiciile senzoriale ale camerei au constat din (1) etanol 70% (indiciu olfactiv), (2) podea cu grilă metalică (indiciu haptic), (3) fundal modelat (indiciu vizual) și (4) lumină vizibilă (indicație vizuală).

În plus, toți șoarecii au fost ținuți cu mâna timp de un minut înainte de a fi plasați în camera de condiționare și au fost ușor „scrufled” timp de 10 secunde la ieșirea din cameră. Sesiunile de obișnuire au fost concepute pentru a imita manipularea pe care șoarecii ar experimenta în ziua condiționării, cu excepția faptului că nu au fost efectuate injecții intraperitoneale (IP).

Condiționarea contextuală a fricii

Soarecii au fost apoi repartizați aleatoriu în grupuri condiționate de frică (șoc) și condiționate de context (fără șoc/doar context). Condiționarea a început în ziua 0 și a constat în plasarea șoarecilor în camera de condiționare și lăsată să exploreze timp de 2 min. Pe parcursul celor 4 minute ulterioare, șoarecii condiționati de frică au primit o serie de șocuri de 1,5 metri cu o durată de 1 s și o intensitate de 0,75 mA.

Șocuri au fost furnizate la intervale imprevizibile șoarecilor, dar consecvente între șoareci. Șoarecii condiționați de context au suferit un protocol identic, excluzând șocurile piciorului (Figura 1C). La terminarea sarcinii, fiecare șoarece a primit o injecție de 4-hidroxitamoxifen (4-OHT, 100 mg/kg, IP) dizolvat într-un cocktail 4:1 de floarea soarelui și ulei de ricin preparat așa cum a fost descris anterior (DeNardo și colab., 2019).

Șoarecii au fost apoi înapoiați în cuștile lor de acasă, unde au fost lăsați netulburați în camera adiacentă suită de comportament timp de cel puțin 72 de ore înainte de a relua adăpostul normal.

La trei săptămâni după condiționarea fricii (Ziua 21), șoarecii au fost supuși testării memoriei de la distanță (Figura 1D) constând în reexpunerea la camera de testare cu indicii senzoriali identici cu cei prezenti în timpul condiționării. Șoarecii au fost lăsați să exploreze camera timp de 5 minute, timp în care comportamentul de frică (înghețare posturală) a fost marcat folosind software-ul de urmărire video FreezeFrame 4 (ActiMetrics, Wilmette IL, SUA).

Fixarea creierului și histologie

La nouăzeci de minute după testarea memoriei, șoarecii au fost anesteziați profund cu izofluran (5% în oxigen) și apoi au fost supuși perfuziei transcardiace cu 30 ml de soluție salină izotonică heparinizată (100 U/ml), urmată de 100 ml de paraformaldehidă 4% (PFA). )în tampon fosfat 0,1 M.

Creierele au fost îndepărtate, post-fixate în 4% PFA timp de 6 ore la temperatura camerei (~22°C) și crioprotectedin 30% zaharoză-0.01 M tampon fosfat salin (PBS) timp de cel puțin 2 zile.

Creierele au fost apoi tăiate în secțiuni coronale de 30 µm grosime pe microtom de congelare (Leica Microsystems, Wetzlar, Germania) și secțiuni care conțineau aBLA (Paxinos și Franklin, 2019), au fost depozitate în crioprotector polivinilpirolidonă (PVP) la -20◦C.

Imunohistochimie

Imunocolorarea a fost efectuată așa cum a fost descris anterior (Mitchell și colab., 2018; Maruyama și colab., 2019).

Pe scurt, secțiunile au fost spălate în PBS pentru a îndepărta crioprotectorul PVP și incubate timp de 30 min în PBS care conține borohidrură de sodiu (0,5%) pentru a îndepărta aldehidele auto-fluorescente generate în timpul fixării. După spălări suplimentare cu PBS, secțiunile au fost incubate în tampon de blocare (ser de capră 3%, 0,05% Triton-X-100 în PBS) timp de 2 ore la ~22 °C, urmată de incubare la 4 °C în tampon de blocare care conține iepure apoliclonal c - Anticorp primar Fos (Ab) timp de 72 de ore (1:1.500, sisteme sinaptice #226 003) sau monoclonal de șoarece CaMKII primaryAb timp de 24 de ore (1:500, Enzo Life Sciences, #ADI-KAM-CA002).

După spălare ulterioară, secțiunile Fos și CaMKII au fost incubate separat timp de 2 ore la ~22◦C în Ab secundar IgG anti-iepure de capră biotinilat (1:250 EMD Millipore #AP132B) urmată de spălare în serie în 0. Soluție salină tamponată tris 05 M (TBS) și acetat de sodiu 0,1 M apoi expuse la streptavidin-Alexa Fluor 488 (1:250, Invitrogen #S11223) timp de 1 oră în soluție de blocare pe bază de TBS.

În cele din urmă, secțiunile au fost spălate în tampon Tris și montate pe lame cu Fluoromount-G (Invitrogen, #00-4958-02).

Imagistica si analiza

Un tub fotomultiplicator de A{{{0}}bit interfațat cu un microscop confocal de scanare laser Zeiss LSM710, echipat cu linii laser adecvate, a fost folosit pentru a captura imagini aBLA folosind un obiectiv de 20× (NA 0,8) și o dimensiune a orificiului de cap de scanare de 47,5 µm. Pentru fiecare imagine, software-ul ImageJ (NIH, Bethesda, MD) a fost folosit pentru a genera hărți de pixeli separate ale fluorescenței tdTomato (adică, TRAPed, roșu) și Alexa-488(Fos, verde).

Intensitatea pragului de pixeli și detectarea suprapunerii lungimii de undă pentru etichetarea duală au fost determinate prin compararea secțiunilor de țesut procesate cu și fără Ab primar al lui Fo, așa cum este descris anterior (Mitchell și colab., 2018; Maruyama și colab., 2019). Datele de numărare a celulelor și co-localizare au fost obținute folosind acest plugin ImageJ semi-autonom EzColocalization (Stauffer et al.,2018).

Imaginile aBLA au fost împărțite în trei subregiuni rostro-caudale de dimensiuni aproape egale, fiecare subregiune fiind definită de un interval specific de coordonate stereotaxice rostral-caudale relativ tobregma: rostral, −0.8 până la −1,1 mm; mijloc, −1,2 până la −1,5 mm; și caudal, -1,6 până la -1,9 mm (Paxinos și Franklin, 2019). Managerul regiunii de interes (ROI) din ImageJ a fost apoi utilizat pentru a împărți aBLA de-a lungul cadranelor dorsal-ventrale și medial-laterale în raport cu perimetrul său. Acest șablon a fost aplicat ulterior tuturor imaginilor din fiecare subregiune rostral-caudală specificată.

Demarcarea aBLAperimeter a fost utilizată cu ImageJ EzColocalizationplug-in pentru a genera o diagramă spațială 2-D a tuturor numărurilor de neuroni în fiecare imagine. Parcele spațiale din subregiunile rostral, mijlociu și caudal au fost apoi suprapuse separat. Acest lucru a dus la 10 diagrame de frică și 10 diagrame de context pentru subregiunea rostrală, 10 diagrame de frică și 13 diagrame de context pentru subregiunea mijlocie și 12 diagrame de frică și 13 diagrame de context pentru subregiunea caudală.

Pentru a corecta un număr mai mare de diagrame de imagine subregiune în grupul de context, factori de corecție de 1.0(1{0/1{0), 0,77 (10/13) și 0,92 (12/13) au fost aplicate, respectiv, parcelelor subregiunii rostrale, mijlocii și caudale ale grupului de context. Pentru a evita influențarea distribuției topografice a numărului în datele de context, a fost utilizat un generator de numere aleatorii în MS Excel pentru a identifica ce numărători specifice să fie excluse din fiecare subregiune aBLA.

Apoi, am împărțit în continuare subregiunile aBLA în cadrane, desemnate 1-4 (a se vedea Figura 2D). Pentru a face acest lucru, coordonatele de intersecție (0,0) a fost determinată în MS-Excel ca punctul din planul2-D la care aria fiecărui cadran a fost aproximativ egală cu un sfert. din suprafaţa totală a fiecărei subregiuni rostral-caudale. Axele de cadran și coordonatele xy ale fiecărei numărări au fost determinate și rotite cu 30◦ în sensul acelor de ceasornic, aliniindu-le astfel la axa anatomică a aBLA.

Pentru a ține seama de micile variații ale dimensiunii subregiunilor și a cadranelor acestora, datele de numărare au fost normalizate la suprafața (numărări/mm2), astfel încât valorile raportate să reprezinte densitatea numărărilor pe subregiune sau cadran.

Pentru a evalua fenotipul excitator al neuronilor capturați de sistemul nostru TRAP2, co-localizarea tdTomatoexpresiei condiționate-TRAPed cu protein kinaza II dependentă de calciu-calmodulină (CaMKII), un marker stabilit al neuronilor glutamatergici (McDonald și colab., 2002), a fost cuantificată din imagini de cel puțin trei secțiuni aBLA per mouse folosind plug-in-ul pentru contor de celule ImageJ.

Statistici

Testarea statistică a fost efectuată cu software-ul Prism 9.5.1 (GraphPad, San Diego, CA, SUA) și a inclus testarea pentru distribuția normală a tuturor seturilor de date folosind un test Shapiro-Wilk. teste t sau prin ANOVA cu două sau trei căi, urmată de testul de comparație multiplă al lui Sidak și, respectiv, al lui Tukey, pentru comparații pe perechi în urma interacțiunilor ANOVA semnificative.

Analiza corelației în cadrul grupului a fost efectuată pentru a determina coeficientul r al lui Pearson și valoarea P corespunzătoare. Corelațiile au fost comparate între grupuri folosind transformarea Fisher Z (Tabelul suplimentar 1). Datele de grup sunt exprimate ca medie ± SEM. Semnificația statistică a fost stabilită la P < 0.05.

Rezultate

Condiționarea fricii induce o engramă de memorie frică la distanță

Pentru a stabili măsura în care neuronii aBLA activați în timpul formării memoriei fricii sunt reactivați în timpul rememorării de la distanță, șoarecii au suferit o condiționare a fricii (n=5) sau a contextului (n=5), urmată de injectarea de 4-OHT (Figurile 1A-C).

Examinând formarea memoriei fricii (adică, învățarea fricii), a fost observată o interacțiune semnificativă a tratamentului (șoc vs. fără șoc) și interval de timp (interval de 30 s după fiecare șoc) asupra comportamentului de îngheț [ANOVA bidirecțională, F(5, 40)=6.733, P=0.0001]. Șoarecii condiționați de frică au arătat o creștere a timpului de îngheț față de valoarea inițială după șoc 3 (275 ± 68% din BL, P=0.0203), 4 (486 ± 76% din BL, P < 0,0001) și 5 (402 ± 26) % din BL, P < 0,0001) și în raport cu șoarecii condiționati de context după șoc 4 (251 ± 38% din context, p < 0,0001) și 5 (375 ± 25% din context, p < 0,0001).

După cum era de așteptat, reexpunerea la camera de condiționare pentru retragerea memoriei de la distanță în ziua de 21 după condiționarea a dezvăluit că șoarecii condiționați de frică au prezentat mult mai mult timp petrecut în congelare în comparație cu controalele contextului[346 ± 18%, test t neîmperecheat, t(8) {{7} }.16, P <0.0001] (Figura 1D).
În mod colectiv, datele din Figura 1 indică faptul că protocolul nostru de condiționare a fricii a cauzat formarea robustă a memoriei fricii și amintirea la distanță a fricii.

Învățarea fricii induce o aBLA robustă specifică subregiunii pentru ansamblu

Analiza numărului TRAPed (tdTomato +) a evidențiat o populație aBLA activată prin fos semnificativ mai mare la șoarecii condiționati de frică (110 ± 6,2) decât de context (77 ± 3,1) [test t nepereche, t(8)=4 .782, P=0.0014] (Tabelul 1). După cum era de așteptat, ~ 70% dintre neuronii prinși în context și ~ 80% dintre neuronii prinși de frică (n=6 aBLAsecțiuni/grup) au fost CaMKII + (Figurile suplimentare 1A, B), indicând că au fost în primul rând neuroni de proiecție glutamatergică.

Similar cu rapoartele anterioare (Kim et al., 2016), am împărțit aBLA în trei subregiuni rostrocaudale: rostrală, mijlocie și caudale (Figurile 2A-C) și am comparat densitățile de numărare TRAPed (numărări/mm2) în subregiuni din și între grupurile de tratament (Figura 2D). ANOVA bidirecțional a evidențiat o interacțiune semnificativă între subregiune și tratament [F(2,24)=7.7099,P=0.0038].

Analizele în cadrul grupului au arătat că densitatea TRAPed a fost mai mare în subregiunea mijlocie aBLA în grupurile de frică (239 ± 9) și context (144 ± 12) în raport cu rostralul (frica: 86 ± 6,P < { {8}}.0001; context: 81 ± 9, P=0.0035) și caudal (frică: 123 ± 15, P < 0,0001; context: 90 ± 12, P {{20) }}.0132) subregiuni.

Analiza între grupuri a arătat că densitatea numărului TRAPed a fost semnificativ mai mare în subregiunea mijlocie a șoarecilor condiționat de frică (P < 0.0001).

Pentru a delimita în continuare locația neuronilor TRAPed, am subdivizat subregiunile aBLA rostrale, mijlocii și caudale în patru cadrane fiecare (Figura 2E). În subregiunea mijlocie, a fost observat un efect principal al tratamentului asupra densității numărului [ANOVA cu trei căi, F(1,32)=17.44, P=0.0002] cu densitate TRAPedcount mai mare în grupul de frică decât context în cadranele 3 (218 ± 29 față de 107 ± 17, P=0.0031) și 4 (240 ± 16 față de 101 ± 12, P < 0,0001).

Am evaluat în continuare densitățile numărului TRAPed în cadrul grupului și în cadrul cadranului în subregiuni aBLA (Figura 2E și Tabelul suplimentar 2). În special, în comparație cu subregiunea rostrală (59 ± 8), cadranul 2 al grupului de frică a avut o densitate TRAPed mai mare atât în ​​mijloc (245 ± 21, P < 0.0001) cât și în caudal (172 ± 23, P=0.0040) subregiune.

Apoi am evaluat relația dintre comportamentul de îngheț și dimensiunea ansamblului neuronal TRAPed în întregul aBLA, în subregiunea mijlocie și în cadranele subregiunilor mijlocii și caudale, unde densitățile numărului de ansamblu au diferit între context și grupurile condiționate de frică. Nu s-au observat corelații semnificative nici în grupul de frică, nici în grupul de context (Figura 2F), sugerând că comportamentul fricii nu reflectă dimensiunea fosansamblului de învățare a fricii în subregiunile aBLA.

În mod colectiv, constatările din Figura 2 indică faptul că condiționarea fricii a dus la un ansamblu fos mai mare în aBLA decât condiționarea contextului. Neuronii ansamblului au fost cel mai dens localizați în subregiunea mijlocie aBLA, dar comportamentul de frică nu s-a corelat cu mărimea populației ansamblului.

For more information:1950477648nn@gmail.com