Nucleii talamici anteriori: un substrat critic pentru memoria asociată pereche non-spațială la șobolani Partea 2

2|MATERIALE ȘI METODE

2.1|Animale și condiții de adăpostire

Șobolani masculi Long-Evans (12 luni; medie 630 g) au fost găzduiți în grupuri de trei sau patru în cuști Makrolon (48 28 22 cm) pe un ciclu inversat de 12-h lumină-întuneric (luminile aprinse la ora 20:00). ).

Testele comportamentale au avut loc în faza întunecată a ciclului luminii, cinci sesiuni pe săptămână; observațiile au confirmat că șobolanii au fost relativ mai activi în timpul fazei întunecate. Șobolanii au fost menținuți la 85% din greutatea corporală pentru hrănire liberă cu apă ad libitum; hrana a fost ad libitum înainte și după operație pentru recuperarea postoperatorie.

Chirurgia este procesul de tratare a bolii și de îmbunătățire a sănătății fizice. Procesul de recuperare după intervenție chirurgicală necesită o atenție specială. Pe lângă recuperarea fizică, a te simți bine necesită și concentrarea pe recuperarea memoriei. Există o legătură puternică între recuperarea postoperatorie și memorie.

În timpul operației, factori precum răspunsul la adversitate al organismului și efectele medicamentelor anestezice afectează adesea funcția de memorie a creierului. După ce corpul își revine, acordați atenție menținerii unei alimentații bune, exercițiilor fizice moderate și somnului adecvat. În perioada de recuperare în afara spitalului, trebuie să continuați să evitați activitățile excesive și să mențineți o stare confortabilă a corpului.

Pe lângă obiceiurile de viață, ajustările psihologice rezonabile sunt, de asemenea, utile în restabilirea sănătății și a memoriei. Relaxați-vă, mențineți o minte liniștită și ajutați-vă să vă adaptați la recuperarea memoriei. În același timp, ar trebui să participați activ la activități recreative și să comunicați cu rudele și prietenii pentru a vă menține creierul activ și pentru a vă îmbunătăți abilitățile cognitive și de memorie. Această activitate poate fi crescută treptat și se poate face practic o dată pe săptămână.

Pe scurt, procesul de recuperare după intervenție chirurgicală necesită o atenție completă. Menținerea unor bune obiceiuri de viață și ajustări psihologice joacă un rol foarte important în promovarea recuperării fizice și a memoriei. Să o înfruntăm pozitiv, cu deplină încredere și speranță. Trebuie să îmbunătățim memoria, iar Cistanche deserticola poate îmbunătăți semnificativ memoria, deoarece Cistanche deserticola poate regla și echilibrul neurotransmițătorilor, cum ar fi creșterea nivelului de acetilcolină și a factorilor de creștere. Aceste substanțe sunt foarte importante pentru memorie și învățare. În plus, carnea poate, de asemenea, să îmbunătățească fluxul sanguin și să promoveze livrarea de oxigen, ceea ce poate asigura că creierul primește suficiente nutrienți și energie, îmbunătățind astfel vitalitatea și rezistența creierului.

Faceți clic pe cunoașteți modalități de îmbunătățire a funcției creierului

Toate procedurile au respectat ghidurile aprobate de Comitetul de etică a animalelor de la Universitatea din Canterbury. Patru grupuri de șobolani au fost stabilite prin repartizare aleatorie după familiarizarea preoperatorie în labirintul brațului radial (RAM) și pista. Cele patru grupuri au fost leziuni ATN bilaterale cu sau fără urmă între miros și stimuli obiect atunci când au fost antrenate în sarcina asociată pereche și cele două grupuri corespunzătoare de leziune Sham.

Dimensiunile finale ale eșantionului au fost (1) Sham-No Trace=7 (adică un grup Sham-leziune fără interval între mirosul și stimulii obiectului utilizați în sarcina asociată cu pereche); (2) Sham-Trace=7 (Grupul Shamlesion ia dat o urmă 10-s între prezentarea mirosului și stimulii obiectului); (3) ATN-No Trace=8; și (4) ATN-Trace=9. O leziune suplimentară ATN a fost exclusă pentru neîndeplinirea criteriilor de leziune (vezi mai jos).

2.2|Interventie chirurgicala

Sobolanii au fost anesteziati cu izofluran (inductie 4%; intretinere 2,5%) si plasati intr-un aparat stereotaxic cu bare atraumatice pentru urechi (Kopf, Tujunga, CA). Bara incisivă a fost setată la 7,5 mm sub linia interaurală pentru a minimiza deteriorarea fornixului.

În fiecare emisferă, două perfuzii au fost direcționate către nucleul anteroventral (AV; superior și inferior), iar o perfuzie a fost direcționată către nucleul anteromedial (AM). Fiecare intervenție chirurgicală a folosit câte o coordonată anterior-posterior (AP) în raport cu distanța Bregma-Lambda a unui șobolan individual (toate valorile în mm). Pentru leziunile AV, coordonatele AP au fost: 2,20 pentru B–L 6,9–7,2; 2,25 pentru B–L 7,3 până la 7,6; 2,30 pentru B–L Mai mare sau egal cu 7,7. Perfuziile AV au fost făcute la 5,68 și 5,73 sub dura și 1,52 lateral față de linia mediană.

Perfuzia AM a fost făcută cu {{0}}.1 mm mai înainte decât coordonatele AV, la 5,76 sub dura și 1,16 lateral; prima leziune AM a fost făcută după finalizarea tuturor AVinfuziilor și a început contralaterală față de ultimul leziune AV. 0.15 M N-metil-d-aspartat (NMDA; Sigma, CastleHill, NSW) în 0.1 M tampon fosfat (pH 7,20) a fost perfuzat în fiecare loc la 0,04 ul pe minut printr-un 2.5-Seringă ulHamilton (Reno, NV, SUA) folosind o pompă de microperfuzie (Stoelting, Wood Dale, IL).

Site-ul AV din emisfera a primit {{0}},12 și, respectiv, 0,10 ul pentru locurile dorsale și ventrale; S-au utilizat 0,06 ul pentru fiecare site AM. Acul seringii a rămas in situ timp de 3 minute pe partea, după perfuzie.
Operațiile cu leziuni simulate au folosit aceeași procedură, dar acul a fost coborât la 1 mm deasupra locurilor superioare ale leziunilor AV și AM cu administrarea neinfuziei.

2.3|Sarcini comportamentale

Un RAM cu opt brațe a confirmat afectarea memoriei spațiale la șobolanii cu leziune ATN după operație. Un aparat de pistă a fost folosit pentru a antrena șobolanii în toate sarcinile non-spațiale, adică discriminarea mirosului simplu și a obiectului simplu și sarcinile asociate cu pereche de miros-obiect și miros-urme-obiect.

Înainte de operație, șobolanii cu restricții alimentare au fost obișnuiți cu RAM cu opt brațe, descris mai jos, pentru a prelua 0,1 g bucăți de ciocolată (Foodfirst LTD Auckland, NZ) și pentru a se adapta la deschiderea și închiderea ușilor brațelor. Pe o pistă roșie din Perspex (Figura 1), șobolanii au fost, de asemenea, modelați pentru a împinge cu nasul un capac de plastic alb circular de 2-cm care se afla la 10 cm deasupra nivelului podelei și în centrul unui burete subțire pe o inserție transparentă din Perspex care a fost atașată la peretele de capăt.

Ele au fost, de asemenea, modelate pentru a împinge (folosind un nas sau o labe) un obiect articulat în spatele bazei sale în partea superioară a unei puțuri de hrană care era îngropată în centrul unui bloc de lemn de 5 8,5 3 cm. Mâncarea conținea bucăți de ciocolată (și deținea alimente inaccesibile sub niș). Obiectul folosit pentru antrenament preliminar nu a fost folosit din nou. În urma intervenției chirurgicale, șobolanii de recuperare au fost refamiliarizați atât cu RAM, cât și cu pista.

2.4|Memoria de lucru spațială în RAM

După operație, memoria de lucru spațială a fost testată folosind RAM-ul situat în centrul unei încăperi fără ferestre (3 3 m). Labirintul avea un butuc central din lemn vopsit în gri, cu lățimea de 35 cm, cu opt brațe de aluminiu (65 cm lungime, 8,6 cm lățime, cu margini de 4,5 cm înălțime), ridicate la 67,5 cm deasupra podelei camerei. Pereții clari din Perspex (19 cm lungime și 25 cm înălțime) s-au extins de-a lungul unei laturi a fiecărui braț de la butuc pentru a împiedica șobolanii să sară între brațe.

La capatul fiecarui brat a fost asezata un godeu de hrana din lemn negru (5 8,5 3 cm), cu hrana inaccesibila dedesubt. In timpul testului, 2 0,1 g bucati de ciocolata au fost prezente in fiecare godeu de hrana la inceputul fiecarui aliment. proces. Ușile clare din ghilotină din Perspex, care puteau fi ridicate de sub butuc printr-un sistem de scripete, controlau accesul la brațele brațelor.

Zece zile consecutive de instruire formală în RAM au fost folosite pentru a testa memoria de lucru spațială. Șobolanul a fost plasat în butucul central și 10 secunde mai târziu, toate cele opt brațe au fost deschise și șobolanului i s-a permis să facă o alegere definită ca ambele picioare din spate peste un prag de braț. Odată ce șobolanul a intrat într-un braț, toate ușile au fost închise și a fost limitat la braț timp de 15 secunde, indiferent dacă a făcut o alegere corectă.

Șobolanul a fost apoi permis înapoi în butucul central și ținut acolo timp de 10 secunde înainte ca toate ușile să fie redeschise pentru a permite o altă alegere a brațului. Procesul s-a încheiat când rata a vizitat toate cele opt brațe, au fost făcute 20 de alegeri de brațe sau au trecut 10 minute.

2,5|Sarcini non-spațiale: Discriminare simplă și învățare asociată în pereche

Atât discriminarea simplă, cât și sarcinile asociate perechi au folosit aceeași pistă roșie din Perspex (93 26 26 cm) plasată pe o masă de 75- cm înălțime (Figura 1). Pista ar putea fi împărțită prin trei uși detașabile vertical (redPerspex, 26 26 cm) care au fost selectate în funcție de sarcina comportamentală specifică. În ceea ce privește familiarizarea, buretele subțire de 6,5 6 8 mm cu capacul în centru a ținut o recompensă alimentară de ciocolată (Figura 1).

Buretele a fost atașat la o ușă detașabilă din pistă (pentru sarcinile asociate perechi) sau pe peretele de capăt al pistei (pentru sarcina simplă de discriminare). Pentru fiecare miros a fost folosit un burete doorplus diferit, care a fost infuzat lângă recipient cu 5 ml de ulei de floarea soarelui amestecat cu 20 ul de substanță uleiuri esențiale din Noua Zeelandă.

Mirosurile erau de lămâie și cuișoare pentru sarcinile asociate în pereche și scorțișoară și lămâie pentru sarcinile simple de discriminare, sau invers în grupurile contrabalansate. Obiectele ușoare și distincte vizual (Figura 1) au fost atașate printr-o balama din spatele bazei sale de partea superioară a puțului pentru hrană, astfel încât un șobolan să poată împinge cu ușurință obiectul înapoi (fie nas sau labe) pentru a căuta în fântână recompensă alimentară.

Un cadru din lemn (1,8 m înălțime de la podea cu 1,3 m lățime), acoperit cu perdele negre, închide toate părțile zonei de testare pentru a reduce indicațiile spațiale în timpul testării.

Discriminările simple (numai mirosul; numai obiectul) și sarcinile asociate perechi au folosit o procedură „go/no-go”.

Prima încercare pentru fiecare sesiune a început prin reținerea șobolanului în zona de pornire timp de 120 s pentru a se reaclimatiza la labirint; încercările ulterioare au folosit 20 s în această zonă de pornire. Allrats au primit 12 teste în masă pe sesiune zilnică, cu sixgo (recompensate) și șase încercări no-gos (nerecompensate) în ordine apseudo-randomizată. Nu s-au desfășurat mai mult de trei probe sau trei încercări fără acces consecutiv într-o sesiune.

Niciuna dintre cele patru perechi diferite de stimuli miros-obiect nu a fost repetat în încercări consecutive. Elementele corecte din sarcinile de discriminare simple și perechile corecte de stimuli din sarcinile asociate perechi au fost contrabalansate între șobolani.

Pentru discriminarea simplă a mirosului, un răspuns a fost definit ca o împingere a nasului în capacul din centrul buretelui teodorizat; adulmecare numai buretele a fost considerată un răspuns interzis. Mâncarea a fost întotdeauna prezentă în capacul din centrul buretelui pentru sarcinile asociate miros-obiect; aspectul go/no-go aici se referă la dacă obiectul a fost împins pentru a dezvălui dacă o recompensă alimentară a fost sub el, la capătul pistei.

Pentru obiecte, un răspuns a fost definit ca orice împingere cu nasul sau cu laba care înclina obiectul înapoi. Latența din momentul în care ultima ușă a fost ridicată și când șobolanul a interacționat cu mirosul (înțepărea nasului în capac; pentru o simplă discriminare a mirosului) sau cu obiectul (împins înapoi pe balama, pentru discriminarea simplă a obiectelor și sarcinile asociate cu perechi) a fost măsurată folosind un cronometru silențios (Dick Smith, Noua Zeelandă).

Observatorul s-a așezat în draperii și lângă pistă pentru a acționa ușile și a înregistra comportamentul. Un studiu a fost desemnat drept „corect” dacă șobolanul a răspuns în mai puțin de 8 s sau nu a răspuns înainte de 8 s la încercările fără acces.

2,6|Discriminari simple

Jumătate dintre șobolani au primit instruire în sarcina simplă de discriminare a mirosului, urmată de discriminarea simplă a obiectelor și invers pentru cealaltă jumătate. A fost înregistrată latența dintre Ușa X (Figura 1a) și interacțiunea cu obiectul miros de la capătul pistei. Șobolanii au fost antrenați la sarcina simplă de discriminare a mirosului și a obiectelor până când au atins criteriul (80% corecte în 2 zile consecutive).

Pentru sarcina simplă de discriminare a mirosului, a fost prezentat un singur miros la fiecare probă. Șobolanul a trebuit să discrimineze care dintre cele două mirosuri a fost asociat cu o recompensă alimentară prezentată în buretele de la capătul compartimentului B (Figura 1a).

În sarcina de discriminare simplă a obiectelor, un singur obiect a fost prezentat la fiecare încercare la sfârșitul compartimentului B (nu este prezentat în Figura 1). Therat a trebuit să învețe care dintre cele două obiecte a fost asociat cu o recompensă alimentară prezentată sub obiect.

2,7|Sarcini asociate cu pereche (urmă și fără urmă) Aceste sarcini au folosit un nou aspect de uși detașabile vertical (Figura 1). Șobolanii au învățat care dintre cele două perechi miros-obiect vor fi recompensate (de exemplu, Miros 1 + Obiect A și Miros 2 + Obiect B) și care perechi nu au fost recompensate (de exemplu, Miros 1 + Obiect B și Miros 2 + Obiectul A).

Indiferent de pereche, șobolanii au primit întotdeauna o recompensă pentru prezentarea mirosului atunci când era permisă în al doilea compartiment al pistei. Acesta a fost compartimentul C pentru starea „fără urme” în care compartimentul A nu a fost folosit și compartimentul B a fost compartimentul de pornire. Mirosul era la capătul compartimentului B pentru starea „urme”, pentru care compartimentul A a fost folosit ca casetă de pornire.

Șobolanii aflați în starea de urme au fost supuși unei întârzieri de 10- între prezentările de miros și stimulii obiectului, fiind ținuți în compartimentul C, în timp ce șobolanii în starea fără urme au fost expuși la obiect imediat după interacțiunea lor cu mirosul (după mâncând recompensa). Atât în ​​condițiile de urmărire, cât și în condițiile fără urme, am înregistrat latența de a traversa Compartimentul D, din momentul în care DoorZ a fost ridicată până când șobolanul a interacționat cu obiectul sau s-a abținut de la a interacționa cu acesta timp de 8 secunde.

Două grupuri de șobolani (leziunea simulată și leziunea ATN) au fost antrenate pe sarcini asociate perechi miros-obiect (grupuri fără urme), iar două grupuri corespunzătoare au fost antrenate pe sarcina asociată pereche miros-urme-obiect (grupuri Urme) până când criteriul atins (80% încercări corecte pe parcursul a 3 zile) sau maximum 50 de zile.

2,8|Test de retenție post-achiziție

Reținerea sarcinii asociate perechi pentru orice șobolan a fost efectuată la 5 zile după atingerea criteriului sau după 50 de zile de antrenament. Această sesiune a folosit 12 încercări în masă cu recompensă/nerecompensă într-o singură zi într-un mod identic ca cel utilizat anterior pentru acel șobolan.

2,9|Histologie

2.9.1|Perfuzie și colectare de țesuturi

În cele 3 zile înainte de testul de retenție, șobolanii singuri au fost familiarizați cu o cușcă goală, curată, timp de 90 de minute, într-o cameră întunecată și liniștită. Imediat după ultima încercare în testul de intenție, șobolanul a fost plasat în cușca sa în camera întunecată și familiară, cu 90 de minute înainte de perfuzie.

Șobolanii au fost anesteziați profund cu pentobarbital de sodiu (125 mg/kg) și perfuzați transcardial cu soluție salină urmat de paraformaldehidă [4% PFA în 0.1 M tampon fosfat (PB)] pentru a fixa creierul. Creierele au fost post-fixate în 4% PFA, urmat de un minim de 48 de ore într-o soluție pe termen lung (20% glicerol în 0.1 M PB). Secțiunile coronale 40-μm au fost colectate folosind un microtom de congelare (Thermo Fisher, Marea Britanie) și stocate într-o soluție de crio-protector (30% glicerol, 30% etilenglicol în 0,1 M PB) la 20 ° C până la procesarea pentru imunohistochimie.

Secțiunile coronale au fost colectate în două serii separate. Prima serie a capturat secțiuni consecutive în cinci criofiale pentru imunohistochimie (adică una din cinci). Această serie a inclus un bloc anterior de secțiuni de la cortexul prefrontal până la zona septală (aproximativ {{0}},7 până la 0,6 mm de Bregma) și un bloc posterior de la talamusul mediodorsal (aproximativ 3,5 mm de Bregma) până la caudal. cortexul retrosplenial.

A doua serie a surprins secțiuni consecutive pentru verificarea leziunilor. Aceste secțiuni au fost colectate în patru criovioane de la imediat anterior față de ATN până la talamusul mediodorsal posterior (aproximativ 0.6 până la 3,5 mm de Bregma).

2.9.2|Colorarea Neu-N și verificarea leziunilor ATN

Secțiunile care plutesc liber în întreaga regiune ATN au fost spălate (3 10 min) în soluție salină tamponată cu fosfat 0,1 M cu Triton-X (0,2%; PBSTx) înainte de incubare în tampon de blocare a peroxidazei endogen timp de 30 min [1% peroxid de hidrogen (H2O2), 50% metanol (CH3OH) în 2%PBSTx].

Secțiunile au fost incubate peste noapte la 4C anticorp primar inanti-NeuN (1:5000; monoclonal-MouseCat # MAB377; Millipore, California USA) în PBSTx cu 1% ser normal de capră (NGS; Life Technologies, NZ).

Excesul de tampon de anticorpi a fost îndepărtat cu PBSTx și urmat de incubare în anticorp secundar de capră anti-șoarece biotinilat (1:1000 Cat # BP-9200-50: VectorLaboratories, California USA) peste noapte la 4°C în PBSTx și 1% NGS. Secțiunile au fost plasate în ExtrAvidin (conjugat cu peroxidază; 1:1000; Sigma, NSW Australia), PBSTx și 1% NGS timp de 2 ore la temperatura camerei.

Pentru a elimina excesul de ExtrAvidin și Triton X{{{0}}, secțiunile au fost spălate în PBS, PB și apoi tampon Tris (pH 7,4 în H20 distilat) pentru a pregăti secțiunile pentru vizualizare cu diaminobenzidină proaspăt preparată ( DAB 0,05%; Sigma, în 0,01% H2O2 în tampon Tris).

Reacția DAB (aproximativ 5 min) a fost oprită utilizând tampon Tris (1 10 min de spălare) și secțiunile au fost plasate în PB la 4°C peste noapte înainte de montare pe lame gelatinizate și lăsate să se usuce. Lamelele au fost deshidratate prin alcool gradat (70%-100%) înainte de a fi curățate cu inxilen și montate cu DPX (06522; Sigma-Aldrich) și o lamelă.

Numărul de celule Neu-N-pozitive din ATN a fost utilizat pentru a determina extinderea leziunii. Aceasta a folosit secțiuni din emisfera stângă și dreaptă pentru fiecare secțiune din patru 40-μm în întreaga ATN și zona cuantificată folosind ImageJ (NIH, SUA). Colorarea celulelor NeuN-pozitive a fost fotografiată la 5 obiective pe un microscop vertical LeicaDM6 B și cameră DFC7000T (Leica Microsystems, Germania).

Numărările automate ale celulelor au fost obținute prin ImageJ (software de analiză a imaginii, Institutul Național de Sănătate, NIH, SUA). Zona care înconjoară neuronii din regiunea ATN a fost selectată manual, iar imaginile au fost convertite la o scară de gri {{{0}}biți, fundalul a fost scăzut (rulând=40), convertit în mască și a fost aplicată funcția de bazin, și toate celulele neuronale peste prag (pragul „MaxEntropy”, circularitate 0.5–1.0) au fost numărate.

Pragul de detecție a fost același pentru toate secțiunile. Nucleele de celule colorate cu NeuN automat au fost numărate la nouă dintre șobolanii simulați (cinci în grupul Sham-Trace și patru în grupul Sham-No Trace) pentru a exprima numărul de celule în ATN.

Numărările automate ale nucleelor ​​colorate cu NeuN ale celulelor economisite la toți șobolanii cu leziuni ATN au fost comparate în raport cu numărul mediu de celule NeuN observate la șobolanii simulați. Leziunile acceptabile au fost definite ca atingând criteriul de pierdere de 50% de celule în ATN, cu un minim de 25% pe emisferă. Acest lucru este în concordanță cu criteriile de leziune ATN din studiile anterioare (Mitchell & Dalrymple-Alford, 2005, 2006; Perryet al., 2018).

2.9.3|Zif268 imunohistochimie

Secțiunile plutitoare au fost procesate într-un mod similar ca pentru NeuN, dar incubate în anticorp primar policlonal Zif268 de iepure (Egr-1; 1:1000 Cat# sc{-110; Santa CruzBiotechnology, SUA) timp de 72 de ore la 4 C în PBSTx cu 1% NGS, urmată de incubare în anticorp secundar de capră antiiepure biotinilat (1:1000: Vector LaboratoriesBA-1000) peste noapte în PBSTx și 1% NGS.

După vizualizarea DAB (18 min), colorarea celulelor pozitive Zif268-în fiecare regiune de interes a fost fotografiată cu un obiectiv de 10 cu un microscop cu lumină (Leica, Germania). Numărările automate ale celulelor au fost obținute prin ImageJ ( NIH, SUA) în același mod ca și celulele NeuNpozitive, cu excepția faptului că circularitatea a fost setată la 0.65–1,0.

Numărările de celule Zif268-pozitive pentru toate regiunile au folosit același algoritm de prag, cu între două și șase secțiuni per regiune de interes pentru fiecare șobolan cuantificat. A fost utilizat numărul mediu de celule pozitive Zif268-per mm2 în secțiuni (din ambele emisfere) dintr-o regiune de interes.

2.10|Analiza datelor

ANOVA folosind Statistica (v13; Dell Inc.) a fost efectuat pentru a testa diferențele medii între cele patru grupuri de șobolani (Sham-No Trace, Sham-Trace, ATN-No Trace și ATNTrace). Au fost adăugați factori de măsură repetate timp de zile (RAM și discriminare simplă), blocuri de încercări (sarcini asociate perechi) și numărări Zif268 în regiuni sau subregiuni de interes înrudite.

ANOVA atât pentru RAM, cât și pentru sarcinile de discriminare simplă a comparat patru grupuri pentru a confirma că cele două grupuri de leziuni Sham și două grupuri de leziuni ATN au fost consecvente unul cu celălalt, dar rețineți că nu a existat nicio componentă de urmă în RAM sau sarcini simple de discriminare. Atât pentru discriminarea simplă, cât și pentru sarcinile asociate perechi de pe pistă, a fost utilizată o transformare reciprocă a datelor de latență în teste individuale pentru a asigura omogenitatea varianței.

În orice zi de testare dată, latențele transformate au generat o latență medie pentru fiecare dintre cele șase încercări nerecompensate și cele șase încercări recompensate. Pentru sarcinile simple de discriminare, am analizat scorul diferenței de latență medie (media încercărilor recompensate minus media încercărilor nerecompensate), dar nu încercările recompensate și nerecompensate separat din cauza unei eșecuri de stocare a datelor.

Toate cele trei măsuri de latență au fost disponibile pentru sarcinile de memorie asociate cu perechi (încercări nerecompensate, încercări recompensate și diferență de latență). Pentru a lua în considerare comparațiile multiple și pentru a echilibra erorile de tip I și de tip II, am folosit nivelul de semnificație al p < 0.02 pentru analizele comportamentale, deoarece au existat trei măsuri asociate în sarcina asociată pereche (încercări nerecompensate, încercări recompensate). și diferența medie de latență).

Au existat șase analize primare pentru regiunile de interes pentru expresia Zif268, deci semnificația acestor analize a fost stabilită la p < 0.01. Testele posthoc Newman-Keuls (NK) au evaluat diferențele de grup pe perechi. Analiza simplă a efectelor principale a fost utilizată atunci când au existat interacțiuni semnificative care implică factori de măsuri repetate.

3|REZULTATE

3.1|Verificarea leziunilor

Toți cei 18 șobolani cu leziuni ATN, cu excepția unuia, au îndeplinit criteriul apriori de deteriorare bilaterală de 50% a ATN și minim 25% pe emisferă. Daunele bilaterale mediane a fost de 76% în ambele grupuri de leziuni ATN (interval: ATN-Fără urmă, 61%–93%; ATN-Trace, 63%–93%; Figura 2). Șobolanul exclus a avut o leziune satisfăcătoare doar într-o emisferă (48% total, 75% stânga și 20% dreapta).

Figura 2d arată că numărul NeuN pentru neuronii ATN din șobolanii cu leziuni ATN (M=3388, SD=2024) au fost cu mult sub valorile găsite la șobolanii cu leziuni simulate (M=15, 339, SD=1065; acest număr a fost similar cu cel raportat de Frost și colab., 2020). Opt dintre cei 17 șobolani leziuni (patru din grupul Trace și patru din grupul No-Trace) nu au avut nicio leziune nici la talamusul mediodorsal (MD) sau la reuniuni/romboizi (Re/Rh) nuclei și a existat daune relativ mici la aceste structuri la cei nouă șobolani rămași cu leziuni.

Când s-a produs deteriorarea MD, a fost în aspectele anterioare care se află adiacent ATN. Deci, deteriorarea MD a fost evaluată de la aproximativ {{0}},72 la +2,1{0 mm de la Bregma, unde a variat de la 0% la 41% pierderi de celule în întregul ansamblu. grup (mediana=21%). Când s-a produs deteriorarea Re/Rh, a fost, de asemenea, adiacent regiunii ATN, așa că a fost evaluată la aproximativ 1,08 până la 2,04 mm de Bregma, unde a variat de la 0% la 33% (mediana=6%). Rețineți că aceste valori procentuale de leziune nu reprezintă întreaga regiune MD și Re/Rh, deoarece regiunile posterioare ale ambelor nuclee au fost intacte la toți șobolanii cu leziune ATN.

For more information:1950477648nn@gmail.com