Efectele anti-hiperglicemiante și hipopolipidemice ale Cistanche Tubulosa

Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Efectele anti-hiperglicemiante și hipolipidemiante ale șoarecilor cu diabet zaharat de tip 2 Cistanche tubulosain db/db

Wen-Ting Xiong, și colab

Abstract

Relevanță etnofarmacologică:Tulpina suculenta uscata aCistanchetubulosa (Schenk) R. Wight este o componentă a prescripțiilor de medicină tradițională chineză pentru diabet. Cu toate acestea, până acum nu au existat rapoarte științifice moderne care să confirme această afirmație tradițională pentru specia Cistanche. Astfel, am investigat efecteleCistanchetubulosaprivind homeostazia glucozei și lipidele serice la șoareci masculi BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db), un model de diabet de tip 2.

Materiale și metode:Conținutul de verbascozid și echinacozid alCistanchetubulosapulberea a fost evaluată utilizând HPLC. Conținutul total de fenolici, conținutul de polizaharide și activitatea antioxidantă aCistanchetubulosaau fost evaluate si pulberea. Apoi, diferite doze deCistanche tubulosa(echivalent cu 120,9, 72,6 sau 24,2 mg verbascozidă/kg) au fost administrate oral o dată pe zi timp de 45 de zile la șoareci masculi db/db. Șoarecii db/þ potriviți în funcție de vârstă au fost utilizați ca martori normali. În timpul experimentului au fost măsurate testele de greutate corporală, glicemia a jeun, glicemia postprandială și toleranța la insulină. La momentul sacrificiului, sângele a fost colectat pentru măsurarea nivelului de insulină, modelul homeostatic de evaluare a rezistenței la insulină (HOMA-IR) și a nivelurilor de colesterol total, trigliceride, HDL-c, LDL-c și VLDL-c; ficatul și mușchii au fost recoltați pentru măsurarea nivelurilor de glicogen.

Rezultate: Cistanchetubulosaa suprimat semnificativ glicemia a jeun crescută și nivelurile de glucoză din sânge postprandial, a îmbunătățit rezistența la insulină și dislipidemia și a suprimat pierderea în greutate corporală la șoareci indb/db. In orice caz,Cistanchetubulosanu a afectat în mod semnificativ nivelurile de insulină serică sau nivelurile de glicogen hepatic și muscular.

Concluzie:Acest studiu oferă dovezi științifice pentru utilizarea tradițională aCistanchetubulosapentru a trata diabetul, sugerând căCistanchetubulosaare potențialul de dezvoltare într-un ingredient alimentar sau medicament funcțional pentru a preveni hiperglicemia și a trata hiperlipidemia.

Cuvinte cheie:Cistanchetubulosa, diabet de tip 2,Efect anti-hiperglicemiant, Efect hipopolipidemic

1. Introducere

Diabetul zaharat (DZ) este o tulburare metabolică progresivă și complexă, care se caracterizează în principal prin niveluri anormal de ridicate de glucoză din sânge (hiperglicemie) (Tiwari și Rao, 2002; Stumvollet al., 2005; Nathan și colab., 2009). Aproximativ 90% dintre cei 347 de milioane de pacienți cu diabet din întreaga lume au diabet zaharat de tip 2 (non-insulino-dependent) (Danaei și colab., 2011). Trei defecte metabolice majore contribuie în mod constant la hiperglicemie la pacienții cu DZ de tip 2: secreție deficitară de insulină, debitul hepatic ridicat de glucoză și rezistența la insulină (Bavenholm et al., 2001). DZ de tip 2 poate scurta speranța de viață și reprezintă o povară medicală și economică semnificativă (Gakidou și colab., 2011)

Patogenia DZ de tip 2 este multifactorială și a fost legată atât de factori genetici, cât și de stilul de viață (Stumvoll et al., 2005).anti-hiperglicemicmedicamentele sunt metoda tipică de gestionare a DZ de tip 2. Medicamente pe cale oralăanti-hiperglicemicefect fie prin ameliorarea celor trei defecte metabolice majore care provoacă hiperglicemie, fie prin reducerea creșterii postprandiale a nivelului glicemic prin împiedicarea digestiei și absorbției carbohidraților în intestin.

Deși mai multe clase de medicamente eficiente au devenit opțiuni recunoscute pentru terapia medicală la majoritatea pacienților cu DZ de tip 2, câteva dintre aceste medicamente sintetice au efecte secundare grave. De exemplu, rosiglitazona și pioglitazona cresc incidența infarctului miocardic, insuficienței cardiace congestive și edemului periferic și sunt asociat cu un risc crescut de carcinogeneză și chiar de deces după utilizarea pe termen lung (Nissen și Wolski, 2007; Zhang et al., 2007; Home et al., 2009). Prin urmare, există o nevoie critică pentru descoperirea agenților alternativi care să exercite activitate antihiperglicemică, dar să exercite mai puține efecte secundare. Comparativ cu substanțele chimice de sinteză, derivate în mod naturalanti-hiperglicemiantagenți, cum ar fi plantele medicinale și medicamentele tradiționale, au o istorie lungă de utilizare și pot reprezenta, în general, surse potențiale sigure de noianti-hiperglicemiantmedicamente (Yeh et al., 2003).

Cistanche, un gen de plante parazitare care aparțin familiei Orobanchaceae, este folosit în mod obișnuit ca medicament tradițional pentru vindecarea tulburărilor renale și a infertilității, conform Farmacopeei Chineze (Chinese Pharmacopeia Commission, 2010). După cum se consemnează în cărțile de medicină chineză, cum ar fi BenCao TuJing și Nature ofDrug, genul Cistanche a fost, de asemenea, fiert cu carne de oaie, cartofi sau orez pentru a produce un aliment tonic pentru tratarea deficiențelor induse de suprasolicitare, sugerând că genul Cistanche este sigur pentru ia oral.

În medicina tradițională chineză, DM este denumit simptomul „Xiao Ke” și a fost tratat de secole folosind ierburi chinezești. Tulpina suculentă uscată a speciei Cistanche este folosită în mod tradițional ca componentă a nouă rețete anti-diabet ("Xiao Ke Fang") în cartea de medicină tradițională chineză Sengji Zonglu. Cu toate acestea, până acum, nu au existat rapoarte științifice moderne care să confirme această afirmație tradițională pentru specia Cistanche.

Cistanchetubulosa(Schenk) R. Wight, o specie Cistanche care parazitează rădăcinile plantei Tamarix – care este cultivată în principal în deșertul Taklamakan – a fost folosită recent pentru a produce un ceai instant pentru a fi folosit ca aliment funcțional (DaZhongWeiShengBao, 2010; Baidu Pedia, 2011) .

Cistanchetubulosaconține cantități apreciabile de glicozide feniletanoide (PhG), iridoide, lignani, alditoli, oligozaharide, polizaharide și compuși volatili precum acidul palmitica și acidul linoleic (Song și colab., 2000; Jiang și Tu, 2009). Se consideră că principalele componente active ale speciei Cistanche sunt PhG (Xie și colab., 2006; Jiang și Tu, 2009).Cistanchetubulosași componentele sale, cum ar fi PhG, polizaharide și polifenoli, au fost raportate că prezintă un bun antioxidant (Denget al., 2004; Pellati și colab., 2004; Frum și colab., 2007; Sui și colab., 2011; Wang și colab., 2011), efecte anti-hipertensiune (Ahmad și colab., 1995) și hipocolesterol (Shimoda și colab., 2009). Numeroase rapoarte au indicat faptul că PhG, polizaharidele și polifenolii exercităanti-hiperglicemiantare efecte sau au o influență benefică în DM de tip 2 prin captarea radicalilor liberi și modularea stresului oxidativ indus de glucoză (Pinto et al., 2010; Saltiel, 2001; Gulati et al., 2012). Aceste componente și bioactivități aleCistanchetubulosasugerează că poate fi utilizat pentru tratamentul DM de tip 2. Din cauza absenței rapoartelor care să descrie efecteleCistanchetubulosaîn tratamentul DZ, ne-am gândit că merită să investigăm activitatea antidiabetică aCistanchetubulosa. Astfel, am examinat efecteleCistanchetubulosaprivind hiperglicemia și dislipidemia la șoarecii BKSdb/db (BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J, Jackson Laboratory stocknumber 00642), un model de tip 2 DM care prezintă multe caracteristici ale DM uman, inclusiv hiperglicemia progresivă, rezistența la insulină și obezitatea (Hummel și colab., 1966; Nishina și colab., 1994; Uchida și colab., 2005; Srinivasan și Ramarao, 2007).

2. Materiale și metode

2.1. Produse chimice

Verbascozidul (puritate 493 la sută) și echinacozidul (puritate 493 la sută) au fost achiziționate de la Institutele Naționale pentru Controlul Alimentelor și Drogurilor (Beijing, China). Metanolul de calitate HPLC a fost achiziționat de la Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SUA). Acarbose a fost achiziționat de la Bayer (West Haven, CT, SUA). Apa purificată a fost produsă utilizând un sistem Millipore Milli-Q Integral 3 și un sistem Q-POD Milli-Q (Bedford, MA, SUA).

2.2. Preparat de pulbere de Cistanche tubulosa

Tulpinile suculente uscate aleCistanchetubulosa(Cod eșantion109092, cultivat în Hetian, Xinjiang, China) au fost achiziționate de la Xinjiang Guru Biology Co. Ltd. (Hetian, Xinjiang, China). Rădăcinile uscate au fost zdrobite într-o pulbere, cernute printr-o200-sită cu plasă, amestecate bine, sigilat în pachete mici pentru a izola pulberea de lumină și umiditate și depozitat la 4 1C.

2.3. Identificarea Cistanche tubulosa

Tulpina suculentă uscată a probei 109092 a fost identificată după caracteristicile lor morfologice de Prof. DeXiang Gu și Prof. Xin Liu, care sunt experți în speciile Cistanche. Probele au fost identificate în continuare prin secvențierea ADN. ADN-ul genomic total a fost izolat din proba 109.092 folosind kitul AxyPrep™ MultisourceGenomic DNA (Axygen, CA, SUA). Regiunea ITS care conține fragmentul de ADNr 5.8S a fost amplificată folosind secvențe de primer de ITS1/ITS2 5′ CGT AAC AAG GTT TCC GTA GAA 3′ și 5′ TTA TTG ATA TGCTTA AAC TCA GCG GG 3′ (BGI Genomics, Shenzhen, China), cu o metodă descrisă de Schneeweiss et al. (Schneeweiss și colab., 2004). ADN-ul amplificat a fost secvențiat de BGI (BGI Genomics, Shenzhen, China), iar rezultatul a fost comparat cuCistanchetubulosaSecvență de ADNr de 5,8 s pe GenBank.

2.4. Analiza HPLC

Două PhG, echinacozidă și verbascozidă, au fost utilizate ca standarde de calitate pentruCistanchetubulosa, conform Farmacopeei Chineze (Chinese Pharmacopeia Commission, 2010). HPLC este cel mai frecvent utilizat pentru calitativa și cuantificarea PhG. Astfel, conținutul de verbascozidă și echinacozidă aCistanchetubulosaau fost determinate urmând metoda HPLC publicată anterior (Zhao și colab., 2011). Pe scurt, 0,1 gCistanchetubulosapulberea a fost adăugată la 1{{10}} ml apă purificată și agitată intens în vortex pe un agitator orbital (Vortex-Genie 2, Scientific Industries, Bohemia, New York, SUA) timp de 10 min la temperatura camerei. Solidul a fost re-extras de două ori în aceleași condiții. Extractele au fost combinate, ajustate la 50 ml și centrifugate la 12,000g timp de 5 minute. Supernatantul a fost filtrat printr-un filtru de seringă de politetrafluoretilenă (PTFE) cu pori de 0,45 μm (Pall, Ann Arbor, MI, SUA). Apoi, 20 ul de supernatant au fost injectați în sistemul HPLC (Binary HPLC Pump 1525, RefractiveIndex Detector 2414, Photodiode Array Detector 2996; Waters, Milford, MA, SUA) care a inclus o coloană Symmetry C18 (4,6 mm 250 mm, 5 μm; Ape) și o coloană de gardă (3,9 mm 20 mm, 5 mm; Ape); sistemul a fost controlat folosind software-ul EmpowerPros (Waters, Milford, MA, SUA) cu un debit de 1 ml/min la 30 1C. Faza mobilă a fost realizată prin amestecarea solventului A (soluție apoasă de acid acetic 0,5% (V/V)) și solventului B (metanol) pentru a forma un gradient liniar de 25-40% B în 0-10 min. Timpii de retenție pentru echinacozidă și verbascozidă au fost de 10,4 min și 13,6 min, la o absorbanță UV maximă de 330 nm.

2.5. Analiza conținutului total de fenolici, a conținutului de polizaharide și a activității antioxidante a Cistanche tubulosa

2.5.1. pregătirea unei mostre

Cistanchetubulosaextractul a fost preparat cu apă purificată folosind metoda noastră publicată anterior (Zhao et al., 2011) cu modificări minore, pentru determinarea conținutului total de fenolici, conținutului de polizaharide și a activității antioxidante (Fig. 1). Pe scurt, 1 gCistanchetubulosapulberea a fost adăugată în 15 ml apă purificată la temperatura camerei, agitată intens în vortex folosind un agitator orbital timp de 5 minute, iar supernatantul a fost recuperat prin centrifugare la 3000 g timp de 15 minute. Precipitația a fost reextrasă de două ori în aceeași condiție. Supernatantul combinat a fost ajustat la 50 ml cu apă purificată și trecut printr-un filtru de seringă PTFE cu pori de 0,45 μm (Pall) înainte de analiză.

2.5.2. Analiza conținutului total de fenolici

Conținutul fenolic total a fost determinat folosind Folin-Ciocalteureagent și acid galic ca compus de referință, așa cum este descris de Singleton și Rossi (Dubois și colab., 1956; Singleton și Rossi, 1965) cu modificări minore. Pe scurt, 0,1 ml deCistanchetubulosaextractul a fost amestecat cu {{0}},9 mL apă purificată și 5 mL reactiv Folin-Ciocalteu (prealabil diluat de 10-ori cu apă distilată), lăsat să stea la 25 1C timp de 3,5 min, apoi 4 mL de soluție de bicarbonat de sodiu (7,5 procente g/v) au fost adăugate la amestec și incubate la {{10}}C timp de 60 de minute. Absorbanța a fost măsurată la 765 nm folosind un spectrofotometru (Perkin Elmer λ 25 UV-vizibil, Waltham, MA, SUA). Conținutul total de fenolici a fost determinat utilizând o curbă standard creată cu acid galic (0–0,6 mg/mL) ca standard. Rezultatele au fost calculate ca miligram echivalenți de acid galic (GAE)/1 gCistanchetubulosapulbere brută. Toate testele au fost replicate de patru ori.

2.5.3. Analiza conținutului de polizaharide

Conținutul de polizaharide alCistanchetubulosaa fost măsurat prin metoda fenol-acid sulfuric (Dubois et al., 1951; Duboiset al., 1956). Pe scurt, 1 ml de extract de Cistanchetubulosa diluat corespunzător și 0,5 ml soluție de fenol au fost plasate în tuburi cu capac filetat, care au fost acoperite și agitate în vortex. Apoi, 2,5 ml de acid sulfuric concentrat s-au adăugat direct la suprafața lichidului în 5 s. Tuburile au fost apoi închise, agitate în vortex timp de 5 secunde, incubate timp de 2 minute la 100 1C și lăsate să se răcească la temperatura camerei înainte de analiză. Absorbanța a fost măsurată la 490 nm folosind un spectrofotometru (Perkin Elmer λ25 UV-vizibil) față de un martor de metanol de 70%. Conținutul de polizaharide a fost determinat folosind o curbă standard creată cu glucoză (0-100 mg/mL) ca standard. Rezultatele au fost calculate ca procent de polizaharidă/Cistanchetubulosapulbere brută. Toate testele au fost replicate de trei ori.

2.5.4. Analiza activității antioxidante totale

Activitatea antioxidantă aCistanchetubulosaextractul, acarboza și rosiglitazona au fost determinate prin testul 2,2′-amino-di(2-etil benzotiazolin sulfonic-6)sare de amoniu (ABTS) și testul de reducere a puterii antioxidante a ionilor ferici (Fe3þ) ( FRAP) folosind truse comerciale (Beyotime, Haimen, China). Cu oxidanții corespunzători, ABTS poate fi oxidat în ABTS verde þ; antioxidantii pot inhiba acest proces. Activitatea antioxidantă totală a antioxidanților poate fi reflectată de absorbanța ABTS þ la 734 nm. Absorbanța a fost măsurată la 734 nm (ABTS) folosind un microplatereader (Epoch, Bio-Tek, Richmond, VT, SUA), cu Trolox (ABTS) ca un standard antioxidant. Rezultatele testului ABTS au fost calculate ca Capacitate Antioxidantă Echivalentă Trolox (TEAC) mM/1 g pulbere.

În condiții acide, antioxidanții pot restabili ferrictripiridiltriazina (Fe3+-TPTZ) în Fe2+-TPTZ albastru. Activitatea antioxidantă totală a antioxidanților poate fi reflectată de absorbanța Fe2+-TPTZ la 593 nm. Absorbanța a fost măsurată la 593 nm (FRAP) folosind un cititor de microplăci (Epoch), cu FeSO4 (FRAP) ca standard antioxidant. Rezultatele testului FRAP au fost calculate ca Capacitate Antioxidantă Echivalentă FeS04 mM (FEAC)/1 g pulbere. Toate testele au fost replicate de patru ori.

2.6. Efectele Cistanche tubulosa asupra hiperglicemiei la șoarecii db/db

2.6.1. Animale și grupuri de tratament

Șoarecii masculi BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) și tovarășii lor heterozigoți non-diabetici de vârstă potriviți (db/þ) au fost furnizați din nou la vârsta de 5-6 săptămâni de către Centrul național de resurse pentru modelul șoarecilor mutanți Centrul de Cercetare Animală al Universității Nanjing (Nanjing, China). Îngrijirea animalelor și procedurile experimentale au fost aprobate de Comitetul de etică a animalelor de laborator al Școlii de Științe ale Vieții, Universitatea Sun Yat-sen (cod de aprobare 0046500) și au fost efectuate în conformitate cu Regulamentele pentru experimentele pe animale din China. Animalele au fost găzduite într-o cameră cu grad 2272 1C specific fără patogen (SPF) la o umiditate de 6075 la sută, sub un ciclu lumină-întuneric de 12 ore, și au fost hrănite cu o dietă purificată AIN-93G (Hranaj pentru animale trofice înalt tech Co., Ltd., Nantong, China) și a furnizat apă purificată ad libitum.

La șapte zile după sosire, șoarecilor nediabetici db/þ li s-a administrat apă purificată (vehicul) ca grup normal de control pentru grupurile de diabetici (n¼7), în timp ce șoarecii diabetici db/db au fost cântăriți și împărțiți aleatoriu în 6 grupuri (n¼8) pentru a investiga. efectele deCistanchetubulosala șoarecii db/db diabetici de tip 2 (Tabelul 1). Șoarecilor db/þ li s-a administrat vehiculul pe cale orală, iar șoarecii db/db li s-a administrat pe cale oral vehiculul, rosiglitazonă (0,52 mg/kg/zi), acarboză (19,5 mg/kg/zi) sau trei doze deCistanchetubulosa(echivalent cu 120,9, 72,6 sau 24,2 mg verbascozidă/kg/zi și denumit CT120.9, CT72.6 sau CT24.2, respectiv) pentru o durată de 45 de zile. Dozele deCistanchetubulosaau fost stabilite în funcție de doza de pulbere brută recomandată de Farmacopeea Republicii Populare Chineze (PPRC);Cistanchetubulosadoze de 120,9, 72,6 și 24,2 mg verbascozidă/kg/zi corespunzând diluțiilor de 5-ori, 3-ori și 1-ori ale dozei de pulbere brută recomandată de PPRC. Toate probele de testat pentru administrare orală au fost dizolvate în apă purificată la concentrații adecvate pentru a administra volume similare de probe de testat la șoareci cu aceeași greutate corporală. Volumele totale administrate au fost de 01 ml, iar probele de testat au fost administrate oral fiecărui grup de șoareci în fiecare zi, între orele 16:30 și 17:30, timp de 45 de zile. Greutatea corporală și nivelurile de glucoză din sânge au fost monitorizate pe tot parcursul perioadei experimentale. La sfârșitul experimentului (ziua 50), șoarecii au postit timp de 14 ore și au fost colectate probe de sânge din vena oftalmică, incubate la temperatura camerei timp de 30 de minute, centrifugate și probele de ser au fost păstrate la 70 1C timp de analiză suplimentară. Ulterior, șoarecii au fost eutanasiați. Ficatul și mușchiul scheletic au fost recoltate, spălate în soluție salină rece ca gheață pentru a îndepărta sângele, congelate rapid în azot lichid și depozitate la 70 1C pentru analize suplimentare.

2.6.2. Analiza glicemiei a jeun (FBG), testul de toleranță la insulină interperitoneal (ITT) și a nivelului de insulină serică a jeun (FINS)

Nivelurile de glucoză din sânge au fost măsurate după un post de 14 ore înainte de începerea experimentului pe animale (0 zile), în ziua 1{{10}} și la fiecare 5 zile în timpul zilelor 20-45 ale experimentului folosind un sistem de monitorizare a glicemiei (ACCU-CHEK Active, Roche DiagnosticsGmbH, Mannheim, Germania). Creșterile procentuale ale valorilor FBG (valori de creștere procentuală FBG: FBG-procent de creștere) în ziua x (ziua 20–45) au fost calculate utilizând (Ziua BG x Ziua BG 0)/Ziua BG0 100, pentru a reprezenta creșterile valorilor FBG pentru fiecare grup în comparație cu valorile lor inițiale FBG. Nivelurile postprandiale de glucoză din sânge au fost determinate la 120 de minute după administrarea orală de glucoză (2 g/kg BW) în ziua 40.

ITT a fost efectuat în ziua 45 a experimentului, după un post de peste noapte (14 ore). Nivelurile de glucoză din sângele din vena coadă au fost măsurate înainte de injectarea insulinei (0 min) și la 30 min, 60 min după injectarea interperitoneală de insulină (0,1 UI/kg BW). Răspunsurile glucozei în timpul ITT-urile au fost exprimate ca zone integrate sub curbele pentru insulină (AUCinsulină), calculate folosind trapezoidru (Vishwakarma et al., 2003). La sfârșitul experimentului, nivelurile de insulină serică de jeun au fost analizate utilizând kitul ELISA de insulină de șobolan/șoarece de la Millipore (Bedford, MA, SUA); probele de ser au fost preparate urmând instrucțiunile trusei. Indicele model homeostatic de evaluare a rezistenței la insulină (HOMA-IR) a fost calculat folosind următoarea formulă: HOMA-IR=insulină a jeun (ng/ml) glucoză din sânge (mmol/L)/22,5 (Matthews și colab., 1985).

2.6.3. Determinarea nivelului lipidelor serice

Concentrațiile serice de colesterol total (TC), colesterol de lipoproteine ​​de înaltă densitate (HDL-c) și trigliceride (TG) au fost determinate utilizând truse enzimatice comerciale (Biosino Biotechnology & Science Inc., Beijing, China). Nivelurile de colesterol al lipoproteinelor cu densitate joasă (LDL-c) au fost calculate ca TC-TG/5 – HDL-c, în timp ce nivelurile de colesterol al lipoproteinelor cu densitate foarte scăzută (VLDL-c) au fost calculate ca TG/5, conform ecuației lui Friedewald (Friedewald et al., 1972). Indicele aterogen a fost calculat ca (TC HDL-c)/HDL-c.

2.6.4. Analiza nivelurilor de glicogen la nivelul ficatului și mușchilor scheletici

Ficatul și mușchii scheletici înghețați au fost procesați pentru analiza glicogenului imediat după scoaterea din congelatoarele 70 1C. Conținutul de glicogen din ficat și mușchii scheletici a fost măsurat utilizând un kit comercial de glicogen (Jiancheng, Nanjing, China) bazat pe metoda Keppler și Decker (Keppler și Decker, 1974). Absorbanța probelor la 505 nm a fost măsurată după răcirea tuburilor la temperatura camerei. Cantitatea de glicogen din fiecare probă de țesut a fost exprimată ca mg de glucoză per g de țesut.

2.7. analize statistice

Toate rezultatele sunt exprimate ca medie 7SEM și au fost analizate cu ANOVA a pachetelor statistice Social Science Software (SPSS 16.0, Chicago, IL, SUA) sau GraphPad Prism 5 (La Jolla, CA, SUA). Indicii HOMA-IR au fost, de asemenea, evaluați folosind testul t independent cu două eșantioane după transformarea logaritmică. Valorile AUC au fost calculate folosind GraphPad Prism 5. Valorile P mai mici de 0,05 au fost considerate a indica diferențe semnificative statistic.

3. Rezultate

3.1. Identificarea probei de Cistanche

Rezultatele alinierii secvenței indică faptul că secvența amplificată este aceeași cuCistanche tubulosagene pentru secvența parțială și completă de ADNr 5.8S (614 nucleotide; numărul de acces Gen-Bank AB217871). Pe baza caracteristicilor sale morfologice și a secvenței genei ADNr 5.8S, proba 109.092 este identificată caCistanchetubulosa.

3.2. Determinarea cantitativă a conținutului de verbascozide și a conținutului de echinacozide din Cistanche tubulosa

Conținutul de verbascozid și echinacozid înCistanchetubulosaau fost cuantificate prin utilizarea standardelor adecvate. Conținutul de verbascozidă și echinacozidă deCistanchetubulosaau fost de 2,66 la sută, respectiv 11,59 la sută. Cromatograma HPLC aCistanchetubulosaextract este prezentat în Fig. 2.

3.3. Conținutul total de fenolici, conținutul de polizaharide și activitatea antioxidantă a Cistanche tubulosa

Conținutul total de fenolici deCistanchetubulosaa fost de 66,2970,44 mg GA/g. Conținutul de polizaharide alCistanche tubuli a fost10,1570,26 la sută . Testele ABTS și FRAP au indicat că activitățile antioxidante au fost 1,3970,06 mM TEAC/g și 1,6170,04 mM FEAC/g pentruCistanchetubulosa, {{0}},157{0.01 mM TEAC/gand 0,1270,01 mM FEAC/g pentru acarboză și 0,1670,01 mMTEAC/g și 0,1370,01 mM FEAC/g pentru rosiglitazonă, respectiv.

3.4. Efectele anti-hiperglicemiante ale Cistanche tubulosa la șoarecii db/db

Rezultatele noastre au arătat astaCistanche tubulosaar putea suprima nivelurile crescute ale glicemiei a jeun și nivelurile crescute ale glucozei din sânge postprandial, să crească sensibilitatea la insulină și să atenueze pierderea în greutate corporală (BW) la șoarecii diabetici db/db. În general,Cistanchetubulosaa fost mai eficient la scăderea hiperglicemiei decât acarboza în timpul experimentului și, în plus, Cistanche tubulosa a fost superioară acarbozei pentru îmbunătățirea rezistenței la insulină (valorile p sunt indicate mai jos).

3.4.1. Efectele Cistanche tubulosa asupra greutății corporale și ficatului

În grupul de control cu ​​diabet zaharat, BW a crescut constant în primele 25 de zile. Cu toate acestea, odată cu progresia diabetului, BW al șoarecilor de control diabetic a scăzut ușor până în ziua 30 (Tabelul suplimentar 1). ÎnCistanchetubulosagrupuri, toate cele trei doze deCistanchetubulosaa redus rata de pierdere în greutate în comparație cu șoarecii de control diabetici (fără semnificație, Tabelul suplimentar 1). În grupul martor pozitiv, rosiglitazona a condus la o creștere semnificativă a greutății corporale din ziua 20 comparativ cu grupul de control cu ​​diabet zaharat (po0.05). În schimb, acarboza a încetinit rata pierderii în greutate în comparație cu grupul de control cu ​​diabet zaharat. În grupul de control normal, greutatea corporală a crescut constant în timpul experimentului și a fost semnificativ mai mică decât grupul de control diabetic (po0,001).

La sfârșitul experimentului, greutatea ficatului și raportul ficat/greutate corporală au crescut doar semnificativ în grupul cu rosiglitazonă (po{0}},001) comparativ cu grupul de control cu ​​diabet zaharat.

3.4.2. Efectul Cistanche tubulosa asupra nivelului de glucoză din sânge

Cistanchetubulosaafișatanti-hiperglicemiantefectuează șoarecii indb/db după 20 zile de administrare orală și ar putea controla nivelul FBG și valoarea procentuală de creștere a FBG pentru o perioadă lungă de timp pe șoarecii db/db într-o manieră dependentă de doză, așa cum este indicat de scăderea semnificativă a postului și postprandial nivelurile de glucoză din sânge (Fig. 3, Tabelul 2). În grupul de control cu ​​diabet zaharat, nivelul FBG a crescut constant în timpul experimentului și a fost de aproximativ 6 ori mai mare decât grupul de control normal în ziua 45 (28,3071,027 mmol/L față de 4,6670,350 mmol/L; po0,001). Toate cele trei doze deCistanchetubulosaa inhibat semnificativ tendința FBG de a crește în șoareci db/db pe parcursul întregului experiment, CT120.9 arătând efectul tiroglicemic puternic (ziua 20, 35 și 45: po{{1{{ 16}}}}.001; ziua 40: po{0.{05 vs. controlul diabetului). În grupurile de control pozitiv, rosiglitazona (0,52 mg/kg) și acarboza (19,5 mg/kg) au inhibat, de asemenea, în mod semnificativ tendința FBG de a crește în șoareci db/db pe parcursul întregului experiment (ziua 2{{41} } până la 45: po0.001, ziua 10: po0,05, rosiglitazonevs. control diabetic; ziua 35: po0,001, ziua 40: po0,01, ziua 20 și 45: po0. 05, acarboză vs control diabetic). Cu toate acestea, acarboza (19,5 mg/kg) a fost mai puțin eficientă decât rosiglitazona (ziua 20: po0.05; ziua 30: po0.01; ziua 35-45: po0.001) și CT120.9 (ziua 45: po0.001) . În grupul de control normal, nivelul FBG a rămas constant pe parcursul întregului experiment și a fost semnificativ mai mic decât cel al grupului de control diabetic (po0,001).

După administrare timp de 20 de zile,Cistanche tubulosaa inhibat semnificativ creșterea nivelului de glucoză din sânge la șoarecii db/db (Fig. 3). Valorile procentuale de creștere a FBG ale grupului de control diabetic și grupului de acarboză (19,5 mg/kg BW) au crescut în timpul experimentului. FBG-crește valorile procentuale din cele treiCistanchetubulosagrupurile au crescut doar ușor în ziua 30. Valorile procentuale de creștere a FBG ale grupului CT120.9 au rămas constante între ziua 30 și ziua 45, în timp ce CT72.6 și CT24.2 au crescut nesemnificativ (p40.05) în ziua 45. Până la sfârșitul zilei de 45. experimentul, cele trei doze deCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 și CT24.2) au suprimat semnificativ creșterea valorilor procentuale de creștere a FBG cu 181,5%, 151,72% și 123,58% în comparație cu grupul de control cu ​​diabet zaharat (PO{{{{ 24}}.001), respectiv. Din ziua 20 până în ziua 40, valorile procentuale de creștere a FBG ale celor trei grupuri de Cistanche tubulosa au fost mai mici sau similare cu grupul cu acarboză (p40.05). În ziua 45, procentul de creștere a FBG din grupul CT120.9 a fost semnificativ mai mic decât grupul cu acarboză (po0.01).

Cistanchetubulosaau prezentat efecte hipoglicemice dependente de doză (Tabelul 2). La sfârșitul experimentului, nivelurile FBG ale grupului CT120.9 au fost semnificativ mai mici decât controlul diabetic, acarboză și alte două.Cistanchetubulosagrupuri (CT120.9 vs. acarboză, CT72.6 și CT24.2, po{0.01; CT120.9 vs. control diabetic, po0.001; Tabelul 2). Până la sfârșitul experimentului, nivelurile FBG ale celor treiCistanchetubulosagrupurile (CT120.9, CT72.6 și CT24.2) au crescut cu 53,41 la sută, 83,19 la sută și, respectiv, 111,33 la sută, comparativ cu nivelurile inițiale de FBG, în timp ce nivelurile de FBG ale grupului de control cu ​​diabet zaharat și ale grupului de acarboză au crescut cu 23491. la sută şi 150,76 la sută . Dintre cele trei doze de Cistanche tubulosa testate, numai CT120.9 a condus la niveluri de FBG constant mai scăzute pe parcursul întregului experiment. CT72.6 și CT24.2 au fost mai puțin eficiente în reducerea nivelului FBG decât CT120.9 (Tabelul 2, Fig. 1 suplimentară). Nivelurile FBG ale grupului CT120.9 au crescut doar din ziua 30, în timp ce nivelurile FBG ale celorlalte douăCistanchetubulosagrupele și gruparea acarbozei au crescut mai rapid. Din ziua 10 până în ziua 40, nivelurile FBG ale celor treiCistanchetubulosagrupurile au fost mai mici sau similare cu grupul cu acarboză (19,5 mg/kg BW); aceste diferențe nu au fost semnificative statistic (p40,05).

În ziua 40, CT120.9 a suprimat semnificativ creșterea nivelului de glucoză din sânge postprandial (po0,05, Tabelul 2) la 2 ore după o singură doză orală de glucoză (2 g/kg). Efectul CT120.9 asupra nivelului de glucoză din sânge postprandial la șoarecii db/db a fost comparabil cu 19,5 mg/kg acarboză (p40,05). Efectul CT72.9 și CT24.2 a fost mai puțin eficient decât rosiglitazona (po0,001).

3.4.3. Efectul Cistanche tubulosa asupra nivelului de insulină serică a jeun și toleranței interperitoneale la insulină

Rezultatele FINS au arătat că, după administrarea orală timp de 45 de zile, CT120.9 a crescut nesemnificativ nivelul insulinei serice (p40,05) la șoarecii db/db cu 40,73%, în timp ce rosiglitazona a crescut semnificativ nivelul insulinei serice cu 58,90. procente (po0,05 față de controlul diabetic; Tabelul 3).

Indicele HOMA-IR a fost calculat pentru a evalua cantitativ contribuțiile rezistenței la insulină și ale funcției celulare deficitare la hiperglicemia a jeun. Comparativ cu grupul de control pentru diabetici, CT120.9 a îmbunătățit nesemnificativ indicele de sensibilitate la sisteminsulină HOMA-IR cu 15,30% (p40,05), în timp ce rosiglitazona a îmbunătățit semnificativ indicele HOMA-IR cu 35,30% (PO0,001 vs. control diabetic; Tabelul 3). ITT a fost folosit pentru a evalua efectulCistanchetubulosaasupra sensibilității la insulină după injectarea de insulină exogenă. Rezultatele au arătat că CT120.9 a îmbunătățit răspunsul la insulină la șoarecii diabetici db/db. Efectul CT120.9 a fost comparabil cu rosiglitazona și a fost superior acarbozei. injecție,po0.001 față de controlul diabetic) și 30 min (po{0,01 pentru CT120.9,po0,001 pentru rosiglitazonă) după injectarea insulinei (fig. 4). CT120.9 și rosiglitazona au scăzut AUC insulină cu 27,92 la sută și 43,89 la sută comparativ cu controlul diabetic. Nu a existat nicio diferență semnificativă între nivelurile de glucoză din sânge în grupurile CT120.9 și rosiglitazonă în orice moment în timpul ITT. Nivelurile de glucoză din sânge ale grupului CT120.9 au fost semnificativ mai mici decât acarboza la 0 min (înainte de injectarea insulinei, po0.01: CT120.9 vs. acarboză), 30 min (po0.01:CT120.9 vs. acarboză) și 60 min (po0,05: CT120,9 vs. acarboză) după injectarea insulinei (Fig. 4). CT120.9 a scăzut AUCinsulină cu 28,79 la sută în comparație cu acarboză. Acarboza, CT72.6 și CT24.2 nu au avut efecte semnificative asupra AUCinsulinei sau nivelurilor de glucoză din sânge în niciun moment al ITT. Atât rezultatele FIN, cât și ITT ale grupului de control normal au fost semnificativ mai mici decât cele ale grupului de control diabetic (po0,05: FIN; po0,001: ITT).

3.4.4. Efectul Cistanche tubulosa asupra nivelului de glicogen al ficatului și al mușchilor scheletici

Nivelurile de glicogen din diferite țesuturi sunt o reflectare directă a sensibilității la insulină, deoarece insulina promovează depunerea intracelulară de glicogen. Rosiglitazona a scăzut semnificativ nivelul glicogenului hepatic cu 59,61 la sută (po0.001) și a crescut nivelul glicogenului muscular cu 33,93 la sută (po0,05 față de controlul diabetic). CT24.2 a scăzut nivelul de glicogen hepatic cu 30,41% (po0,05 față de controlul diabetic). Dozele mai mici de Cistanche tubulosa nu au avut un impact semnificativ asupra nivelului de glicogen al ficatului sau al mușchilor scheletici.

3.5. Efectele hipopolipidemice ale Cistanche tubulosa la șoarecii db/db

Pentru a evalua efecteleCistanchetubulosape dislipidemie, am determinat nivelurile de colesterol total, TG, HDL-c, LDL-c și VLDL-c la șoarecii db/db. Rezultatele noastre demonstrează astaCistanchetubulosapoate îmbunătăți dislipidemia prin creșterea nivelurilor de HDL-c, reducerea nivelurilor de TG, LDL-c și VLDL-c în plus față de reducerea nivelului de colesterol la șoarecii db/db. CT120.9 (po{0.{05) și CT24.2(po{{0.001) au scăzut semnificativ nivelul TC la șoarecii db/db diabetici (Tabelul 3) ) comparativ cu controlul diabetic. Dintre toate grupurile experimentale, numai CT24.2 a scăzut semnificativ nivelurile de TG(po0.05) și VLDL-c (po0.05) în comparație cu controlul diabetic. Toate cele trei doze deCistanchetubulosaa scăzut semnificativ nivelul de LDL (po0.{01 pentru CT120.9, po0.05 pentru CT72.6, po0.001 pentru CT24.2, comparativ cu controlul diabetic) . Toate cele trei doze deCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 și CT24.2) au crescut nesemnificativ nivelul HDL cu 9,78%, 7,32% și 7,78% (p40,05 față de controlul diabetic).

Dintre acești parametri lipidici, un nivel scăzut de HDL-c/TC este cel mai semnificativ factor de risc independent pentru boala coronariană.CT120.9 (po0.05) și CT24.2 (po0.001) vs. controlul diabetic) a crescut semnificativ nivelul HDL-c/TC. Indicele aterogen, care este un factor de risc pentru boala coronariană, a fost scăzut cu toate cele trei doze deCistanchetubulosa(po{{0}}.001 pentru CT120.9 și CT24.2, po0.01 pentru CT72.6 față de controlul diabetic).

În grupul martor pozitiv, rosiglitazona a crescut semnificativ nivelurile de TC (po{{0}}.001) și LDL-c (po0,01) în comparație cu controlul diabetic. De asemenea, rosiglitazona a crescut semnificativ nivelul de HDL c cu 57,32 la sută (po0,001), dar nu a avut niciun efect benefic asupra nivelului HDL-c/TC sau indicelui aterogen. Acarboza nu a avut niciun efect semnificativ asupra indicilor lipidelor serici la șoarecii db/db.

4. Discutie

Prezentul studiu a fost conceput pentru a investiga potențiala activitate antihiperglicemică și hipolipidemică aCistanchetubulosa.

Rezultatele testului in vitro au indicat căCistanchetubulosacontine o cantitate apreciata de fenolici si polizaharide si prezinta o buna activitate antioxidanta. Conținutul fenolic total deCistanche tubulosaeste mai mic decât conținutul fenolic total al ceaiului (Ankolekar și colab., 2011) și al cafelei (Chu și colab., 2011) și mai mare decât multe altele.hiperglicemicierburi precum merișorul (Pinto și colab., 2010), algele marine (Nwosu și colab., 2011), năutul (Sreerama și colab., 2012) și unele dintre plantele medicinale tradiționale utilizate în gestionarea DM de tip 2 (Gulatiet colab., 2010). 2012). Conținutul de polizaharide din Cistanche tubulosa este mai mic decât conținutul de polizaharide din Panax ginseng (Wanget al., 2011) și ceaiului (Chu et al., 2011) și mai mare decât multe altele.anti-hiperglicemiantplante precum Aloe vera L. (Hu et al., 2003), jujuba (Sun și colab., 2011), Polyporus umbellatus (Tian și colab., 2007), Rheum palmatum (Ni și colab., 2007) și unele dintre ele plantele medicinale tradiționale utilizate în gestionarea DM de tip 2 (Gulatiet al., 2012). Plantele cu un conținut ridicat de antioxidanți, cum ar fi aspolifenoli și glicozide feniletanoide (PhG), sunt frecvent identificate ca având activitate anti-diabet, care se datorează cel puțin parțial capacității lor de a reduce stresul oxidativ (Pinto et al., 2010; Saltiel, 2001; Gulati et al., 2012). Rezultatul testului nostru antioxidant este în concordanță cu rapoartele anterioare (Arthur et al., 2011;anti-Baoet al., 2010; Funes et al., 2009) care a indicat căCistanchetubulosaposedă proprietăți antioxidante semnificative. Valoarea TEAC și valoarea FRAP a Cistanche tubulosa au fost mai mari decât varza verde, morcovul, castraveții, salata verde, țelina (Pellegrini și colab., 2003) și unele alte plante cu efecte antioxidante bune care au folosit pentru a trata diabetul (Rahimi și colab. , 2005), și a fost mult mai mare decât acarboza și rosiglitazona. Studiile clinice anterioare au demonstrat că acidul -lipoic (Konrad și colab., 1999) sau alți antioxidanți (Paolisso și colab., 1992) ar putea îmbunătăți sensibilitatea la insulină la pacienții rezistenți la insulină și/sau diabetici. Astfel, Cistanchetubulosa este o sursă de antioxidanți care pot exercita efecte protectoare împotriva diabetului și a complicațiilor diabetului pe termen lung.

Speciile de Cistanche au fost folosite ca hrană tonică sau medicament de sute de ani, ceea ce sugerează că sunt sigure de administrat oral. Un raport anterior de 14 zile de test de toxicitate acută a arătatCistanchetubulosaextractul aparține unei doze netoxice reale: doza maximă tolerată (MTD) aCistanchetubulosas-a constatat că extractul este de 410 g/kg la șoareci. Nu a fost înregistrată nicio mortalitate pe parcursul a 14 zile de monitorizare, iar șoarecii testați din fiecare grup nu au prezentat semne de toxicitate în timpul 24 de ore și 14 zile de observare (Zhang și colab., 2012). Cea mai mare doză din experimentul nostru, 5,084 g CTAE/kg BW/zi, care este echivalent cu 9,10 g pulbere brută/kg la șoareci, este mult mai mică decât MTD. Astfel, doza este sigură în experimentul nostru.

DZ de tip 2 este una dintre cele mai răspândite și grave boli metabolice din lume și se caracterizează în principal prin hiperglicemie. În acest studiu, am adoptat șoarecii BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J(db/db) ca model de tip 2 DM pentru a investiga efecteleCistanchetubulosaasupra metabolismului glucozei și lipidelor in vivo. db/dbmice sunt un model genetic de rozătoare bine acceptat al bolilor metabolice legate de stilul de viață, care este util în special pentru evaluarea agenților anti-diabetici și anti-obezitate. Această tulpină de șoareci poartă amutare în gena receptorului de leptine, prezintă hiperglicemie, hiperlipidemie, rezistență la insulină și obezitate până la vârsta de 6-7 săptămâni (Hummel și colab., 1966; Nishina și colab., 1994; Uchida și colab., 2005; Srinivasan și Ramarao, 2007).

Odată cu progresia diabetului, scăderea ușoară a greutății corporale a grupului de control cu ​​diabet zaharat (Tabelul suplimentar 1) s-ar putea datora scăderii nivelului de insulină plasmatică care apare la șoarecii diabetici db/db în vârstă de 10-12 săptămâni (Hummel și colab., 1966) și eficiență metabolică crescută la șoarecii diabetici db/db (Trayhurn, 1979). Rata redusă de pierdere în greutate în toate cele trei doze deCistanche tubulise poate datora faptului căCistanchetubulosaa crescut, de asemenea, nivelurile de insulină din acestea (Tabelul 3), ceea ce este benefic pentru DZ. Rosiglitazona a dus la o creștere semnificativă a greutății corporale, care este un efect secundar cunoscut al rosiglitazonei. Creșterea semnificativă a greutății ficatului și a raportului hepatic/greutate corporală în grupul cu rosiglitazonă (po0.001) a indicat că rosiglitazona poate induce acumularea de lipide și modificări funcționale în ficat.

Rezultatele testului in vivo au arătat căTubulii Cistanche ar puteasuprima nivelurile crescute de glucoză din sânge a jeun și nivelurile crescute de glucoză din sânge postprandial și sensibilitatea crescută la insulină a șoarecilor db/db. În general,Cistanchetubulosaa fost mai eficient în scăderea hiperglicemiei și a dislipidemiei și în îmbunătățirea rezistenței la insulină decât acarboza în timpul experimentului.

După 20 de zile de administrare orală,Cistanchetubulosaa inhibat în mod semnificativ tendințele de creștere ale nivelului FBG și creșterea valorii procentuale FBG la șoarecii db/db în mod constant. La sfârșitul experimentului,Cistanchetubulosași-a arătatanti-hiperglicemiantefect într-o manieră dependentă de doză. Aceste rezultate indică faptul căCistanchetubulosapoate acționa potențial ca un potențial agent de scădere a glicemiei atunci când este administrat la doza adecvată. Cea mai mare parte a eliminării glucozei are loc în mușchiul scheletic după masă, în timp ce nivelurile FBG sunt determinate în primul rând de cantitatea de glucoză din ficat. Rezultatele FBG au arătat astaCistanchetubulosaa îmbunătățit semnificativ producția hepatică de glucoză a șoarecilor db/db; Debitul slab de glucoză hepatică este unul dintre cele trei defecte metabolice majore ale DZ de tip 2 care contribuie la hiperglicemie (Bavenholm et al.,2001). În ziua 30, valorile procentuale de creștere a FBG ale grupului de control cu ​​diabet zaharat au fost mai mici decât nivelurile așteptate, ceea ce ar putea explica faptul că numai CT72,6 (po0,01), acarboză (po0,05), androsiglitazonă ( po0,001) a scăzut semnificativ creșterea FBG în comparație cu grupul de control cu ​​diabet zaharat.

În mod colectiv, rezultatele din tabelul 2 indică faptul căCistanchetubulosaa controlat eficient nivelul crescut de glucoză din sânge postprandial după încărcarea cu glucoză, sugerând că Cistanche tubulosa este un agent candidat pentru atenuarea hiperglicemiei postprandiale. Un nivel ridicat de glucoză din sânge postprandial este un factor de risc independent pentru complicațiile cardiovasculare asociate cu DZ de tip 2 (Ceriello, 2005; Blaak și colab., 2012). CT120.9 a suprimat semnificativ creșterea nivelului de glucoză din sânge postprandial, sugerând că CT120.9 a îmbunătățit toleranța afectată la glucoză a șoarecilor diabetici db/db, iar efectul a fost comparabil cu 19,5 mg/kg acarboză. Cu toate acestea, efectul anti-hiperglicemic al CT120. 9 a fost mai puțin intens decât cel al rosiglitazonei.

Secreția deficitară de insulină și rezistența la insulină sunt două dintre cele trei defecte metabolice majore în DZ de tip 2 care contribuie la hiperglicemie (Bavenholm și colab., 2001). Rezultatul analizei noastre a FINS a arătat că o doză mare deCistanchetubulosaa restabilit într-o oarecare măsură secreția deficitară de insulină la șoarecii db/db. Prin urmare, Cistanchetubulosa a suprimat în mod eficient nivelurile crescute de glucoză din sânge a jeun și postprandial (Tabelul 2) parțial prin stimularea secreției de insulină. Hiperglicemia și hiperlipidemia exercită stres oxidativ suplimentar asupra celulelor beta și mitocondriilor în afară de diabetpatogeneza primară. Există dovezi in vitro și in vivo că expunerea cronică la niveluri ridicate de glucoză din sânge și lipide sunt celulele tobeta dăunătoare, provocând secreție deficitară de insulină, afectarea expresiei genei insulinei și inducerea morții celulare prin apoptoză (Pitocco și colab., 2010). Deoarece antioxidanții ar putea proteja liniile de celule beta și insulele izolate împotriva efectelor adverse de la expunerea la concentrații mari de glucoză (Kaneto și colab., 1996, Tajiri și colab., 1997), Cistanche tubulosa poate îmbunătăți secreția de insulină prin efectul său antioxidant.

Toleranța severă la insulină a grupului de control diabetic a confirmat starea rezistentă la insulină a șoarecilor db/db. Rezultatele ITT au arătat că doza mare deCistanchetubulosaa îmbunătățit rezistența la insulină la șoarecii db/db, care a fost comparabilă cu rosiglitazona și superioară acarbozei, sugerând căCistanchetubulosaposedă proprietăți puternice de sensibilizare la insulină.

Homeostazia glucozei este reglată în principal de ficat și de mușchii scheletici. Cea mai mare parte a eliminării glucozei are loc în ficat și în mușchii scheletici, glicogenul fiind forma primară intracelulară a glucozei stocabile (Saltiel, 2001). Nivelurile de glicogen din diferite țesuturi sunt o reflectare directă a sensibilității la insulină, deoarece insulina promovează depunerea intracelulară de glicogen. Conținutul de glicogen stimulat de insulină este semnificativ redus la animalele cu rezistență la insulină, proporțional cu gradul de deficiență de insulină (Chandramohan et al., 2008).Cistanchetubulosanu a avut efecte benefice asupra stocării glicogenului în ficat sau muşchi scheletici.

Profilul metabolic al diabetului zaharat de tip 2 este caracterizat de metabolismul afectat al glucozei și rezistența la insulină, frecvent combinate cu dislipidemie (Cha et al., 2005). Dislipidemia este unul dintre factorii de risc majori pentru bolile cardiovasculare în DZ. Trăsăturile caracteristice ale dislipidemiei diabetice sunt o concentrație ridicată de trigliceride (TG) în plasmă, o concentrație scăzută de lipoproteine ​​de înaltă densitate (HDL-c), concentrație crescută de colesterol de lipoproteine ​​cu densitate joasă (LDL-c) și creșterea lipoproteinei cu densitate foarte mică. concentrația de colesterol (VLDL-c) (Mooradian, 2009). După ce a fost tratat cuCistanchetubulosatimp de 45 de zile, nivelurile de colesterol total, TG, LDL-c și VLDL-c la șoarecii db/db au fost scăzute, în timp ce nivelurile de HDL-c au crescut, indicând faptul căCistanchetubulosaa avut un efect benefic asupra dislipidemiei și poate scădea puternic riscul de ateroscleroză, boli coronariene și complicații diabetice (Tabelul 3). Cistanche tubulosa a scăzut semnificativ nivelul TC, ceea ce este în concordanță cu un raport anterior (Shimoda și colab., 2009). Mecanismul prin care Cistanche tubulosa ameliorează dislipidemia poate fi legat de medierea exprimării ARNm hepatice legate de transportul și metabolismul colesterolului (Shimoda și colab. ., 2009). Deși prevalența hipercolesterolemiei nu este crescută în DZ, scăderea nivelului de colesterol poate reduce riscul relativ de boli cardiovasculare la pacienții cu DZ (Mooradian, 2009). Cistanche tubulosa a crescut semnificativ nivelul HDL-c/TC și a scăzut aterogenul indicele, care sunt factori de risc pentru boala coronariană, indicând faptul că Cistanche tubulosa este benefică atât pentru gestionarea diabetului zaharat, cât și a bolilor cardiovasculare. Medicamentul de control pozitiv rosiglitazona a crescut semnificativ nivelul TC, ceea ce este relevant pentru un risc crescut de progresie a diabetului zaharat și a bolilor cardiovasculare.

5. Concluzie

În concluzie, oferim prima demonstrație a antihiperglicemiantului șihipolipidemicefectedeCistanchetubulosașoareci db/db diabetici de tip 2.Cistanchetubulosahiperglicemia normalizată a restabilit sensibilitatea la insulină și a redus dislipidemia. Într-o oarecare măsură,Cistanchetubulosaa îmbunătățit toate cele trei defecte metabolice majore care contribuie la hiperglicemie în DZ de tip 2. Astfel,Cistanchetubulosaa demonstrat un potențial ridicat de prevenire a progresiei DZ de tip 2 și de scădere a riscului de ateroscleroză, boli coronariene și complicații diabetice. Ca medicament tradițional chinezesc și aliment tonic, Cistanchetubulosa ar putea fi dezvoltată în continuare în medicamente, alimente farmaceutice sau suplimente alimentare în viitor. Cu toate acestea, sunt necesare cercetări suplimentare pentru a identifica componenta bioactivă și a elucida mecanismele responsabile pentru anti-hiperglicemic șihipolipidemicefectedeCistanchetubulosa.

Mulțumiri

Această activitate a fost susținută de Granturi din Programul național de cercetare și dezvoltare în domeniul tehnologiei cheie în cel de-al 11-lea plan cincinal al Chinei (2007BAI32B06) și Biroul pentru reducerea sărăciei și dezvoltarea grupului de conducere al Consiliului de Stat (2008-3A).

Anexa A. Material suplimentar

Date suplimentare asociate cu acest articol pot fi găsite în versiunea online la http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2013.09.027.

Din: „Efectele anti-hiperglicemice și hipolipidemiante ale Cistanche tubulosa” deWen-Ting Xiong, și colab

---W.-T. Xiong și colab. / Journal of Etnopharmacology 150 (2013) 935–945