Glicozidă cistanche pentru inhibarea activității tirozinazei

 

2 rezultate și discuții

 

2.1 Efectele PHG -urilor, GLA și combinațiile lor asupra activității tirozinazei

Figura 1prezintă efectele inhibitoare aleSoluție PBS PBS, Soluție GLA PBS, șiSoluție PHGS/GLA PBScu privire la activitatea tirozinazei.

DinFigura 1a, concentrațiile de inhibiție la jumătate maximă (IC50) deSoluție PBS PBS, Soluție GLA PBS, șiSoluție ARB PBSpe activitatea tirozinazei au fost(2.192 ± 0.038) g/L, (1.376 ± 0. 025) ug/ml, și({{0}}. 101 ± 0,003) ug/ml, respectiv. Ordinea puterii de inhibare a tirozinazei a fostArb> gla> phgs.

DinFigura 1b, la o concentrare în masă de0. 4 mg/ml, ratele de inhibare a tirozinazeiPHGS/GLA (10: 1), PHGS/GLA (5: 1), șiPHGS/GLA (1: 1)Soluțiile PBS au fost88.06%, 92.93%, și94.37%, respectiv. Ultimele două au fost mai mari decât ratele de inhibare ale componentelor individuale la aceeași concentrație (36,92% pentru soluția PBS PHGSşi92,71% pentru soluția GLA PBS) Mai mult, rata de inhibare aPHGS/GLA (1: 1)Soluția PBS a fost comparabilă cu cea a controlului pozitivArb.

Pe baza calculelor:

Extract de cistanche cu glicozidă la nivel înalt pentru inhibarea activității tirozinazei

 

CI (indicele combinat)valori pentruPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)Soluțiile PBS au fostCI> 1, indicând efecte antagoniste.

Valori CIpentruPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Soluțiile PBS au fostCI <1, indicând efecte sinergice.

Acest lucru demonstrează că atunci când raportul în masă dintrePhgs to glaeste40: 1, 20: 1, 10: 1, 5: 1 sau 1: 1, combinația prezintă efecte sinergice semnificative în inhibarea activității tirozinazei.

 

 

Fig. 1 Inhibarea tirozinazei de către PHGS PBS soluții cu concentrații de masă diferite, soluție GLA PBS (A) și soluție PBS PBS, soluție GLA PBS și soluție PHGS/GLA PBS cu o concentrație de masă de 0. 4 g/L (B) și valoarea CI

 

2.2 Efectele PHG -urilor, GLA și a combinațiilor lor asupra scăpădării radicalilor liberi

Figura 2ilustrează abilitățile radicale DPPH și abts⁺ radicalSoluție de etanol PHGS, Soluție de etanol GLA, șiSoluție de etanol PHGS/GLA.

DinFigura 2a, valorile IC50 pentru scăderea radicală DPPH aPhgs, Gla, șiVCau fost(21.135 ± 1,164) ug/ml, (55.537 ± 5,230) UG/ml, și(2.852 ± 0. 252) ug/ml, respectiv. Ordinea abilității de epurare radicală DPPH a fostVc> phgs> gla.

DinFigura 2b, valorile IC50 pentru eliminarea radicală ABTSSoluție de etanol PHGS, Soluție de etanol GLA, șiSoluție de etanol VCau fost(22.7 0 9 ± 0,686) ug/ml, (11.677 ± 0. 120) ug/ml, și(3.237 ± 0. 345) ug/ml, respectiv. Ordinea abilității de epurare radicală ABTS⁺ a fostVc> gla> phgs.

DinFigura 2c, la o concentrare de0.4 g/L, ratele radicale de epurare a radicalilor DPPHPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Soluțiile de etanol au fost87.02% ~ 89.43%, care au fost mai mari decât ratele de epurare ale componentelor individuale (85,32% pentru soluția de etanol PHGşi83,31% pentru soluția de etanol GLA) și comparabil cu cel al controlului pozitivVC (84.54%)Valori CIpentruPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)Soluțiile de etanol au fostCI> 1, indicând efecte antagoniste, în timp ceValori CIpentruPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Soluțiile de etanol au fostCI <1, iar ratele de epurare radicale DPPH au fost deasupra85%, indicând o capacitate puternică de epurare radicală DPPH.

DinFigura 2d, la o concentrare de0.4 g/L, ratele radicale ale radicalilor ABTSPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Soluțiile de etanol au fost99.87% ~ 100.13%, care erau mai mari decât cele ale componentelor individuale (97,81% pentru soluția de etanol PHGSşi97,96% pentru soluția de etanol GLA) și comparabil cu controlul pozitivVC (99.92%)Valori CIpentruPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)Soluțiile de etanol au fostCI> 1, indicând efecte antagoniste, în timp ceValori CIpentruPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)Soluțiile de etanol au fostCI <1, indicând o capacitate puternică de epurare radicală.

În rezumat, printre cele nouă combinații dePHGS/GLA, PHGS/GLA (1: 1), PHGS/GLA (5: 1), șiPHGS/GLA (10: 1)Soluțiile PBS au fost selectate pentru experimentele celulare ulterioare, datorită inhibiției lor relativ mari a activității tirozinazei și a efectelor sinergice puternice în antioxidare.

Rate de inhibare a tirozinazei:94,37%, 92,93%și 88,06%, respectiv.

Rate de epurare radicală DPPH:89,44%, 88,72%și 88,10%, respectiv.

Abts⁺ rate radicale de epurare:100,13%, 100,01%și 99,87%, respectiv.

---

2.3 Efectele PHG -urilor, GLA și combinațiile lor asupra viabilității celulelor B16F10 și HACAT

Figura 3arată efecteleSoluție DMEM PHGS, Soluție GLA DMEM, șiSoluție PHGS/GLA DMEMcu privire la viabilitateaB16F10şiHacatcelule.

DinFigura 3A - C.:

Phgsla concentrații de78.125 ~ 625 ug/ml(Figura 3a) șiGlala concentrații de3.125 ~ 25 ug/ml(Figura 3B) nu a prezentat citotoxicitate față deCelule B16F10.

PHGS/GLA (1: 1), PHGS/GLA (5: 1), șiPHGS/GLA (10: 1)Soluții DMEM la o concentrare de25 ug/mlnu a prezentat citotoxicitate (figura 3C).