Efectele Cistanche asupra modificărilor ATPazei în mitocondriile hepatice ale șobolanilor septicemie

Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Wang Zhiqiang Yin Gang

Rezumat: Obiectiv:Pentru a studia schimbarea luiActivitatea ATPazei mitocondriilor hepatice în sepsisiar efectul deCistanchepe el.Metode:40 de șobolani SD au fost împărțiți aleatoriu în grup de operații simulate, 12-grup de control pe oră, 12-grup de administrare pe oră, 16-grup de control pe oră și 16-grup de administrare pe oră. Thesepticemiemodelul a fost replicat prin ligatură și perforație cecală (C LP) și comparat. Rata de supraviețuire a grupului, presiunea arterială medie (MAP), ficatmitocondriale ATPazase modifică activitatea.Rezultate:După ce șobolanii au replicat modelul de sepsis,ATPazaactivitatea ficatuluimitocondriilea scăzut, iar rata de supraviețuire în 24-oră a scăzut semnificativ. TheATPazaactivitatea mitocondriilor hepatice după administrarea deCistanchea fost semnificativ îmbunătățită în comparație cu grupul de control (P<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">Concluzie:Scăderea mitocondrialăActivitatea ATPazei în sepsis, supraîncărcarea celulară cu calciu și edemul și necroza sunt cauzele directe de deces înșobolani septici. Cistanche îmbunătățește activitatea ATPazeieste un mecanism important pentru tratamentulsepticemie.

Cuvinte cheie: Cistanche, cistanche sepsis mitocondrii Enzima ATP

Septicemieeste o boală critică clinic. Deși antibioticele au fost actualizate în ultimii 30 de ani, rata mortalității prin sepsis nu a scăzut semnificativ și este încă la 50% [1]. Tratamentul antibacterian occidental „eliminând răul” singur nu îmbunătățește prognosticulsepticemie.În patogeneza MTC, sepsisul aparține „neprihănirii deficienței și a răului”, tratamentul trebuie să se bazeze pe principiul „întăririi corpului” și „eliminării răului”. Medicina tradițională chineză a demonstrat un mare potențial în tratamentul sepsisului.Septicemiecomplicată de insuficiență multiplă de organe este cauza principală a ratei ridicate de mortalitate, iar deteriorarea structurii celulare este baza patologică microscopică a insuficienței multiple de organe [2]. Cistanche este un medicament tradițional chinezesc pentru tonic, studiile farmacologice moderne au arătat căCistancheare efectul de a rezista la peroxidarea esterilor membranei și de a proteja funcția celulară [3]. Funcția deenergie mitocondrialămetabolismul este una dintre funcțiile de bază ale celulelor, iar activitatea deATPazaeste un indicator important pentru măsurarea funcțieienergie mitocondrialămetabolism. În acest experiment, am observat modificări aleATPazaactivitatea celulelor hepatice înșobolani septiciși relația dintre efecteleCistancheasupra acestuia și asupra mortalității șobolanilor și a avut ca scop să ofere o bază teoretică și o explorare eficientă pentru tratamentul clinic de „întărire” asepticemie.

Cistanche

1. Materiale și metode

1.1 Reactivi

Cistanchea fost achiziționat din Xinjiang (identificat de profesorul Tan Defu de la Școala de Medicină a Universității Three Gorges). S-au luat 200 g de Cistanche uscată și au fost decoctate de două ori în apă distilată. Filtratul a fost evaporat şi concentrat la o concentraţie de 1 g/ml. Pentobarbital de sodiu (001104), China National Pharmaceutical Group Shanghai ChemicalReactivCompanie;Reactiv ATPaza(20030108), Institutul de Cercetare în Bioinginerie Nanjing Jiancheng.

1.2 Model animal experimental și grupare

40 de șobolani masculi SD (achiziționați de la Centrul pentru animale experimentale al Colegiului Medical Tongji, Universitatea de Știință și Tehnologie Huazhong), au fost împărțiți aleatoriu în 5 grupuri: grup de operații simulate (n=8), 12-control oră grup (n=8), 12-grup de administrare de oră (n=8), 16-grup de control de oră (n=8), 16-oră grup de administrare (n=8). Grupului de operație simulată și grupului de control li sa administrat soluție salină normală prin gavaj, iar grupului de administrare i s-a administrat gavaj cu 1 g/ml Cistanche, de două ori pe zi, timp de până la 15 zile. Themodel de sepsisa fost replicat prin ligatura cecală și perforație [4]. Înainte de operație, animalele au fost libere să bea apă și au postit timp de 12 ore.

1.3 Determinarea presiunii arteriale medii

Vena jugulară a fost introdusă cu un ac al scalpului, heparina a fost folosită pentru anticoagulare, artera carotidă comună stângă a fost canulată la arcul aortic, iar cateterul autofabricat a fost conectat la instrumentul biologic multicanal, iar media.presiunea arterială(MAP) a fost înregistrată. Experiment după ce MAP se stabilizează.

1.4 Determinarea activității ATPazei mitocondriale

Luați 6 g de ficat de șobolan și puneți-l rapid în mediu de separare de 0 grade [250mmol de zaharoză, 2mmol de acid etoxi-etil piperazină 2-etil sulfonic, 0,1 mmol de acid etilendiaminotetraacetic, pH 7,4], se deschide și se spală impuritățile, Se separă suspensia de mediu (1:10), se omogenizează cu un omogenizator electric de teflon (1200r/min), se centrifughează la 2000r/min timp de 10 minute, se reține supernatantul, se centrifughează la 10000r /min timp de 15 minute, aruncați supernatantul, luați precipitatul și suspendați-l în 2 ml de mediu de separare pentru a obține osuspensie mitocondrială. Întregul proces este efectuat la 0 până la 4 grade . Pentru măsurare a fost utilizată metoda de determinare a fosforului [5].Activitatea ATPazei(kitul a fost achiziționat de la Institutul de Inginerie Biologică Nanjing Jiancheng).

1.5 Prelucrare statistică

Datele experimentale sunt toate exprimate ca medie ± abatere standard (X ± S), iar software-ul SPSS efectuează o analiză unidirecțională a varianței și a corelației.

Extract de Cistanche

2. rezultate

2.1 Efectul Cistanche asupra presiunii arteriale medii și mortalității 24-oră la șobolani

Tensiunea arterială a grupului de control a scăzut semnificativ la 12 ore după ligatura și perforarea cecalei și a devenit mai evidentă la 16 ore. În comparație cu grupul de operațiuni simulate, a existat o diferență semnificativă. Tensiunea arterială aTratament cu Cistanchegrupul a fost îmbunătățit. Rata de deces a grupului de control a fost semnificativ mai mare decât cea a grupului de operație simulată, iar rata de deces a grupului de administrare a fost semnificativ mai mică decât cea a grupului de control corespunzător.

2.2 Efectul Cistanche asupra activității ATPazei mitocondriale

Activitățile deATPaza de sodiu-potasiu, ATPaza de calciu, ATPaza de magneziu și ATPaza de calciu-magneziuîn grupul de administrare au fost semnificativ mai mari decât cele din grupul de control corespunzător, atingând nivelul grupului de operație simulată, care a fost corelat semnificativ pozitiv cu reducereamortalitatea șobolanilor (r=0.834) ).

Cistanche

3. Discuție

Na plus -K plus -ATPaza, cunoscută și sub numele de pompă de sodiu-potasiu, joacă un rol fiziologic important în menținerea activităților fiziologice ale celulelor, a temperaturii corpului și a metabolismului normal și în reglarea echilibrului ionilor din interiorul și din exteriorul celulei.În sepsis, există o disfuncție severă a pompei de sodiu în membrana mitocondrială interioară, provocândmitocondrialeedem. TheNa plus -K plus -ATPenzima este deteriorată, dezechilibrul demitocondrialeconcentrația ionilor crește, activitatea enzimatică a metabolismului energetic este inhibată, alimentarea cu energie celulară este epuizată și este cauzat edem citotoxic. În același timp, permeabilitatea membranei crește, ceea ce duce în cele din urmă la moartea celulelor. În experiment, am descoperit că mitocondrialulNa plus -K plus -ATPazaactivitatea hepatocitelor septice a fost semnificativ redusă (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na plus -K plus -ATPazaactivitatea demitocondriile hepaticea crescut semnificativ (P<0.05), and="" the="" mortality="" of="">șobolani septicis-a redus semnificativ. Rezultatele experimentale sugerează că scăderea deNa plus -K plus activitate -ATPazaeste semnificativ pozitiv corelat cu dezvoltareasepsis la șobolani. Inhibarea deNa plus -K plus activitate -ATPaza, edemul celular și moartea care duce la insuficiență multiplă de organe pot fi dezvoltarea rapidă a sepsisului. Unul dintre mecanismele importante. În ultimii ani, au existat multe rapoarte despreNa plus -K plus -ATPazași multe boli, care au atras atenția lucrătorilor clinici și de bază. Este de mare însemnătate să studiem legea schimbărilor în activitatea deNa plus -K plus -ATPazași reglementarea acesteia [6]. Se cunosc puține despre mecanismul specific alNa plus -K plus -ATPazaîn dezvoltarea și rezultatulsepticemie,și sunt necesare cercetări suplimentare.

Stabilitatea calciului și magneziului intracelular este baza materială necesară pentru menținerea răspunsului de eliberare intracelulară și transmiterea informațiilor [7]. În experiment, scăderea aActivitatea Ca2 plus -ATPazeiîn grupul de control afectează direct activitatea pompei de calciu, iar scăderea activității pompei de calciu slăbește rolul demitocondrialepompa de calciu pentru a excreta Ca2 plus din celulă și Ca2 plus supraîncărcare în interiormitocondriile. Supraîncărcarea cu calciu în mitocondrii este o cauză importantă amitocondrialetulburare de fosforilare oxidativă, leziuni structurale și necroză celulară [8, 9]. Ca2 plus supraîncărcarea reduce potențialul membranei mitocondriale și conținutul de ATP din țesut [10], iar utilizarea energiei celulelor țesuturilor este afectată. Ca2 plus poate activa fosfolipaza de pe mitocondrii, cauzand deteriorareamembrana mitocondrială, distrug funcția normală de sinteză a ATP a mitocondriilor și împiedică producția de energie mitocondrială [11]. Tulburări alemetabolismul mitocondrial al calciuluipoate afecta directfuncția respiratorie mitocondrială, provocândoxigen mitocondrialtulburări de captare și oxidare a protonilor în lanțul de transport de electroni [12]. În același timp, creșterea Ca2 plus poate agrava deteriorarea mitocondriilor cauzate de peroxidarea esterului [13]. Toate acestea duc direct sau indirect la eșecul aprovizionării cu energie celulară și la moartea țesuturilor și organelor și accelerează dezvoltarea modificărilor patologice în sepsis. În experiment, am constatat, de asemenea, că activitățile deM g2 plus -ATPază și Ca2 plus -M g2 plus -ATPază la șobolani septiciau fost, de asemenea, semnificativ scăzute.Mg2 plus -ATPază și Ca2 plus -M g2 plus -ATPazăsunt substante importante pentru mentinerea echilibrului intracelular de calciu si magneziu. Widner a raportat că scăderea ionilor de magneziu intracelular este factorul de inducere a leziunii celulare ireversibile, iar raportul Mg 2 plus /Ca2 plus este un indicator important care reflectă deteriorarea ireversibilă a celulelor [14]. TheMg2 plus -ATPază și Ca2 plus -M g2 plus -ATPazăactivități aleCistanche-grupul administrat au fost intensificate, A TPaza este o sulfhidrilază, șiCistancheare un efect de peroxidare a esterului antimembranar, care se poate datora intensificăriiATPazaactivitatea de Cistanche Baza de Chimie și Baza de Farmacologie [15].

În sepsis, mitocondrialetulburare de metabolism energetic, scazutActivitatea enzimei ATP, edemul mitocondrial, supraîncărcarea intracelulară de calciu și tulburarea echilibrului calciu-magneziu sunt cauzele directe ale morții celulelor sepsis și ale insuficienței multiple de organe.Cistancheantagonizează peroxidarea esterilor membranei, îmbunătățește activitatea ATPazei, menține homeostazia intracelulară a calciului și magneziului și protejează funcționarea normală a funcțiilor celulare.Cistancheeste un mecanism important de reducere a mortalitățiișobolani septici. Demonstrează perspectivele bune aleCistanche în tratamentul sepsisului