Cistanche Tubulosa protejează neuronii dopaminergici prin reglarea apoptozei și a factorului neurotrofic derivat din celulele gliale: in vivo și in vitro-Ⅱ

Teste de comportament

Test de înot (Zhu și colab., 2014)

Coordonarea mișcării corpului la șoareci a fost măsurată prin testul de înot. Șoarecii au fost plasați individual într-un rezervor de apă (25 cm înălțime și 10 cm în diametru) care conține 10 cm de apă și testați într-un mediu liniștit pentru a înregistra durata lor staționară de peste 5 minute.

Test în câmp deschis (Kawai și colab., 1998)

Activitatea locomotorie a fost măsurată utilizând testul în câmp deschis. Șoarecii au fost testați într-un mediu liniștit și slab iluminat și plasați individual într-un recipient acrilic transparent de 30 cm × 30 cm × 15 cm, cu o grilă de separare de 6 cm × 6 cm în partea de jos. Șoarecilor li s-a dat 10 minute pentru a se adapta la mediul înconjurător și apoi deplasarea numărului de grilă și frecvența de creștere a șoarecilor individuali au fost măsurate de cinci ori consecutiv pentru a obține valori medii.

TUBULOSĂ NATURALĂ DE CISTANCHE PENTRU ÎMBUNĂTĂŢIREA FUNCŢIEI SEXUALE PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Prelevarea de probe de țesut cerebral

Înainte de prelevarea de țesut, șoarecii au fost hrăniți ad libitum cu acces liber la apă și au primit intervenție medicamentoasă timp de 14 zile consecutive. Patru șoareci din fiecare grup au fost selectați și decapitați rapid. SN (Bregma: -2,75 mm -2,92 mm) de la fiecare animal a fost izolat și plasat pe gheață. Țesuturile creierului au fost clătite cu soluție de clorură de sodiu 0,9% rece ca gheața pentru a îndepărta orice sânge și au fost uscate pe hârtie de filtru înainte de a fi depozitate la -80◦C. Patru șoareci din fiecare grup au fost anesteziați intraperitoneal și le-au deschis pieptele. Un ac de perfuzie a fost apoi introdus în ventriculul stâng al fiecărui animal. Pentru a elimina sângele din sistemul circulator, apendicele atrial drept a fost tăiat și animalul a fost perfuzat cu ser fiziologic normal la 4°C până când ficatul a devenit palid pentru a asigura perfuzia succesivă. Odată ce efluentul atriului drept a devenit clar, fiecare animal a fost perfuzat cu fixativ de paraformaldehidă 4%. După perfuzie, țesutul cerebral al fiecărui animal a fost apoi disecat cu atenție și post-fixat în paraformaldehidă 4% timp de 24 de ore. Țesuturile creierului fixate au fost apoi clătite sub apă curentă, deshidratate într-o serie gradată de soluții de etanol și curățate în soluție de xilen. Aceasta a fost urmată de imersie și înglobare cu parafină.

Modificări ale cantității DA măsurate prin HPLC

SN nanopulbere din fiecare grup a fost plasat într-o baie de gheață care conține 0, 9% soluție de clorură de sodiu (raport 1:9). Țesutul creierului a fost omogenizat folosind un disruptor de celule cu ultrasunete și centrifugat la 1200 rpm timp de 20 de minute la 4 °C pentru a obține supernatantul. Pentru HPLC, a fost utilizată o coloană Hypersil AA-ODS (2,1 mm × 200 mm, 5 um) la temperatura coloanei de 30°C. Detectarea fluorescenței a fost efectuată la 280 nm λex și 340 nm λem. Volumul de injectare a fost de 10 uL.

Expresia TH, GDNF, GFR 1 și Ret detectată prin imunohistochimie

Secțiuni de parafină (5 µm grosime) de țesut cerebral individual au fost izolate de la fiecare animal și plasate într-o baie de apă caldă la 40◦C pentru aplatizare și aderență la lamele de sticlă. Toate lamelele de țesut au fost incubate într-un cuptor la 60◦C timp de 3-6 ore, urmate de deparafinarea cu xilen, deshidratarea etanolului în gradient și recuperarea antigenului prin incubare într-un tampon de acid citric și încălzire într-un cuptor cu microunde timp de 20 de minute. Lamelele de țesut au fost apoi incubate într-o soluție 3% H2O2 la temperatura camerei timp de 10 minute. După ce au fost spălate de trei ori în PBS, lamelele de țesut au fost incubate cu ser normal într-o cameră închisă la temperatura camerei timp de 20 de minute. Colorația imunohistochimică a fost efectuată conform instrucțiunilor producătorului. Un analizor de imagine Motic Med 6.0 a fost utilizat pentru a calcula valoarea densității optice integrate în celulele colorate pozitiv.

Analiza Western Blot în țesuturile cerebrale ale șoarecilor

Acest studiu a evaluat expresia proteinei tirozinhidroxilazei (TH), GDNF, GFR 1, Ret, Bcl2 și Bax. Lizatul cerebral din fiecare grup a fost omogenizat timp de 3{{10}} min pe gheață, urmat de centrifugare la temperatură joasă, 20, 000 rpm, la 4 ◦C pentru 5 min pentru a colecta supernatantul. Probele de proteine ​​au fost separate sub presiune constantă folosind un gel SDS-PAGE 10% așa cum este descris mai sus. Concentrația de anticorpi primari: TH 0,15 mg/ml, GDNF 0,5 mg/ml, GFR 1 0,8 mg/ml, Ret 0,63 mg/ml, Bcl{-2 0,34 mg/ml și Bax 0,11 mg/ml. Procedura a fost aceeași ca mai sus.

TUBULOSĂ NATURALĂ DE CISTANCHE PENTRU ANTIÎMBĂTRÂNIREA ANTI-ALZHEIMER PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Analiza Statistică

Acest studiu a folosit software-ul statistic SPSS 20.0 pentru procesarea și analiza datelor. Valorile parametrilor au fost exprimate ca medie ± abatere standard (¯x ± S). ANOVA a fost utilizată pentru analiza datelor cu un singur factor. LSD sau testul Games-Howell a fost folosit pentru a compara grupurile. P< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

REZULTATE

Componentele active ale nanopulberei de C. tubulosa

În intervalul de scanare 200-400 nm, ECH în C. tubulosa și VER în 330 nm au avut vârful maxim de absorbție, care a apărut în 20 de minute. ICA a avut vârfuri maxime de absorbție la 270 nm și a apărut după 20 de minute (Figura 1A). Rezultatele au arătat că probele negative nu au interferat cu detectarea (Figura 1B). Probele și controlul au avut aceleași vârfuri cromatografice, iar proba negativă nu a avut niciuna. Aceasta a arătat că celelalte ingrediente din probă nu au interferat cu componenta măsurată. Mai mult, cele trei componente și vârfurile adiacente pot atinge linia de bază de separare și gradul de separare a fost mai mare de 1,5.

C. tubulosa Nanopulbere MPP redusă+ -Citotoxicitate indusă în celulele MES23.5

Viabilitatea celulelor MES23.5 a fost redusă semnificativ odată cu creșterea concentrațiilor de MPP+. Figura 2F arată citotoxicitatea semnificativă a diferitelor concentrații de MPP+.

Nanopulbere de C. tubulosa a redus citotoxicitatea indusă de MPP+-și a îmbunătățit viabilitatea celulelor MES23.5. Figura 2G arată că dozele de nanopulbere de C. tubulosa de 10–250 µg/mL au exercitat efecte de protecție dependente de doză asupra celulelor MES23.5 tratate cu MPP+-.

Efectul citomorfologic al nanopulberei de C. tubulosa

Celulele normale MES23.5 au avut o bună aderență celulară și au fost în formă de fus, cu limite clare ale celulelor și sinapse. Celulele MES23.5 deteriorate cu MPP+-au prezentat o aderență celulară și o contracție slabă, iar multe au fost suspendate în medii cu sinapsele contractate. Aceste celule au fost agregate, micșorate și rotunde cu vacuole în interior, iar nucleele au fost dezintegrate sau prăbușite. Nanopulbere de C. tubulosa în diferite doze a îmbunătățit citomorfologia celulelor MES23.5 în grade diferite prin îmbunătățirea aderenței celulare și clearance-ul sinaptic al grupului vehicul. Celulele MES23.5 din grupul de tratament cu doze mari C. tubulosa au prezentat o morfologie similară cu grupul de control normal (Figurile 2A-E).

Efectul nanopulberei de C. tubulosa asupra expresiei TH și apoptozei în celule

Figura 3 arată o reducere semnificativă a expresiei proteinei TH în grupul vehicul. Expresia proteinei TH a crescut diferit în grupurile tratate cu diferite doze de C. tubulosa. Cu toate acestea, testul LSD a arătat că nu a existat nicio diferență semnificativă între cele trei grupuri tratate.

Figura 4 prezintă rezultatele evaluării apoptozei folosind citometria în flux. Rata apoptozei în grupul vehicul a fost semnificativ mai mare decât în ​​celelalte grupuri. Celulele tratate cu doze diferite de nanopulbere de C. tubulosa au prezentat grade diferite de scădere a ratei apoptotice în comparație cu grupul de vehicul. Celulele din grupul de tratament cu C. tubulosa cu doze medii și mari au avut cea mai semnificativă îmbunătățire a ratei apoptotice în comparație cu celelalte grupuri de tratament cu C. tubulosa. Testul LSD a arătat că nu a existat nicio diferență semnificativă între cele două grupuri tratate, dar o diferență semnificativă și între grupul cu doză mică.

Efectul nanopulberei de C. tubulosa asupra expresiei proteinei Bcl2/Bax în celule

Figura 5 arată că expresia proteinei Bcl2 în celulele grupului vehicul a fost semnificativ mai scăzută comparativ cu grupul de control normal. În schimb, expresia proteinei Bax în celulele grupului vehicul a fost semnificativ mai mare decât în ​​grupul de control normal. Grupurile de tratament cu C. tubulosa au arătat o expresie crescută a proteinei Bcl2 și o scădere a expresiei proteinei Bax în celulele MES23.5 tratate cu MPP+-. Între cele trei grupuri tratate, au existat diferențe semnificative în testul LSD. Aceste efecte au fost dependente de doză.

Teste de comportament

Rezultatele testului de înot au sugerat că șoarecii din grupul vehiculului au avut durate staționare relativ lungi, care au crescut în timp. În ziua 14, șoarecii din grupul vehicul au avut o durată staționară semnificativ mai lungă decât șoarecii din grupul normal de control. Durata staționară a șoarecilor în

doza micăC. tubulosagrupul de tratament nu a fost semnificativ diferit de cel al șoarecilor din grupul vehicul. Cu toate acestea, durata staționară a șoarecilor din grupul de tratament cu C. tubulosa cu doză mare a fost semnificativ mai mică decât cea a șoarecilor din grupul vehicul.

Rezultatele testului în câmp deschis sugerează că, după deteriorarea indusă de MPTP la șoareci, șoarecii din grupul vehicul au demonstrat o scădere semnificativă a capacității lor de activitate spontană, așa cum arată frecvența de creștere. După o administrare de 14-zi aC. tubulosa nanopulbere, șoarecii din grupurile de tratament cu doze moderate și mari au avut frecvențe de creștere semnificativ mai mari în comparație cu șoarecii din grupul vehicul (Figurile 6A, B).

Efectul nanopulberei de C. tubulosa asupra conținutului de DA la șoareci

Modificările în conținutul de DA al SN au fost determinate prin HPLC. Sa constatat că conținutul de DA din creierul grupului de vehicule a fost redus semnificativ. Conținutul de DA din creierul șoarecilor PD din grupul de tratament cu C. tubulosa cu doză mică nu a diferit semnificativ de șoarecii din grupul vehicul. Cu toate acestea,Tratamentul C. tubulosaa crescut nivelurile DA în creierul șoarecilor PD într-o manieră dependentă de doză. Creierele șoarecilor PD tratați cu C. tubulosa în doză mare au avut un conținut de DA semnificativ mai mare decât creierul șoarecilor din grupul vehicul (Figura 6C).

Efectul nanopulberei de C. tubulosa asupra expresiei TH la șoareci

Numărul de celule TH-pozitive și nivelul de expresie a proteinei TH în SN al șoarecilor PD induși de MPTP au fost mai mici în comparație cu șoarecii din grupul de control. După tratamentul cu C. tubulosa, numărul de celule TH-pozitive și nivelul de exprimare a proteinei TH în SN al șoarecilor PD induși de MPTP au crescut, cu o diferență semnificativă între grupul de tratament cu C. tubulosa cu doză mare și grupul vehicul prin test LSD; și au existat diferențe semnificative între cele trei grupuri tratate (Figura 7).

Efectul nanopulberei de C. tubulosa asupra expresiei proteice a GDNF și a receptorilor săi, GFR 1 și Ret la șoareci

Expresia proteinei GDNF și receptorii săi, GFR 1 și Ret, în celulele colorate pozitiv, a fost evaluată utilizând imunohistochimie. Analiza Western blot a fost utilizată pentru a evalua nivelurile de expresie a proteinei în SN ale diferitelor grupuri de șoareci. Constatările pentru diferitele grupuri au fost similare utilizând cele două metode de detectare. Expresia GDNF și proteinele sale receptor, GFR 1 și Ret, în celulele colorate pozitiv din SN al șoarecilor din grupul vehicul, a fost semnificativ mai mică decât la șoarecii din grupul normal de control. Doze diferite de tratament cu C. tubulosa au crescut numărul de celule GDNF-, GFR 1- și Ret pozitive (Figurile 8A-S).

Expresia proteinei GDNF, GFR 1 și Ret în SN al șoarecilor din grupul vehicul a fost semnificativ mai mică decât la șoarecii din grupul martor. Creșterea concentrațiilor de tratament deC. tubulosa nanoputerea îmbunătățit semnificativ expresia acestor proteine. Expresia proteinei GDNF, GFR 1 și Ret în SN al șoarecilor din grupul de tratament cu doze mari C. tubulosa a fost semnificativ mai mare decât la șoarecii din grupul vehicul (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Efectul nanopulberei de C. tubulosa asupra expresiei proteinelor Bcl2/Bax la șoareci

Expresia proteinei Bcl2 a fost redusă semnificativ, iar expresia proteinei Bax a fost îmbunătățită semnificativ în SN-ul șoarecilor din grupul vehicul (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

DISCUŢIE

PD și apoptoză

PD este o tulburare neurodegenerativă. Potrivit lui Zhang și colab. (2005), prevalența este de 10,7% la populația chineză în vârstă de peste 55 de ani și de 1,67% la cea de peste 65 de ani. și societatea în general. În creier, neuronii dopaminergici sunt implicați în principal în sinteza și secreția DA. Sunt larg răspândiți în sistemul nervos central și localizați în principal în SN (80%). TH este enzima cheie limitatoare a ratei pentru sinteza DA. Astfel, inhibarea activității TH reduce sinteza DA (Huot și Parent, 2007). Principalele modificări patologice și biochimice ale PD sunt apoptoza neuronilor dopaminergici din SN, o reducere semnificativă a DA nigrostriatale și formarea corpilor Lewy în neuronii dopaminergici (Dexter și Jenner, 2013). Etiologia PD implică factori genetici asociați, factori de mediu și îmbătrânirea sistemului nervos (Allam et al., 2005). Patogenia PD rămâne neclară în medicina modernă. De la sfârșitul anilor 1960, terapia de substituție cu levodopa a fost utilizată cu succes pentru a trata PD și a fost recunoscută ca un punct de cotitură major în tratamentul PD. Cu toate acestea, aplicarea pe termen lung a acestei terapii provoacă reacții adverse, iar terapia nu tratează cauzele care stau la baza PD (Del Sorbo și Albanese, 2008). Prin urmare, cercetarea activă pentru noi medicamente sau metode de tratament care vizează protecția neuronilor dopaminergici este crucială pentru tratarea PD.

În studiile anterioare, aplicarea etichetării terminale de deoxinucleotidil transferază mediată de dUTP a indicat că 0.6%-4,8% dintre neuronii dopaminergici din SN la pacienții cu PD au prezentat apoptoză (Mochizuki și colab., 1996). Microscopia electronică a arătat caracteristici apoptotice, inclusiv condensarea cromatică și corpurile apoptotice în celulele dopaminergice (Anglade și colab., 1997). Tompkins et al. (1997) au efectuat o analiză ultrastructurală a autopsiilor de țesut cerebral de la pacienți cu PD, AD și boala difuză cu corp Lewy (DLBD). Ei au găsit corpuri apoptotice în stratul dens al SN la pacienții cu PD și DLBD, oferind dovezi concludente ale apoptozei neuronale în PD și bolile asociate. Prin urmare, reducerea sau suprimarea apoptozei în neuronii dopaminergici este fundamentală pentru tratamentul PD.

Studiile anterioare au arătat că MPTP a indus simptome asemănătoare PD. MPTP traversează bariera hemato-encefalică și este metabolizat de monoaminoxidazele de tip B din astrocite. Ulterior este transformat în MPP+ toxic, care se acumulează în mitocondriile neuronilor dopaminergici prin aportul de proteine ​​al transportorului DA. Astfel, generează exces de radicali liberi de oxigen care inhibă activitatea complexului I a lanțului respirator mitocondrial și sinteza ATP. Aceste evenimente promovează în continuare formarea de radicali liberi și reacțiile de stres oxidativ și în cele din urmă duc la degenerarea și moartea neuronilor dopaminergici. Prin urmare, acest studiu a folosit MPP+ pentru a stabili un vehicul in vitro în neuronii dopaminergici MES23.5 și MPTP pentru a induce un șoarece vehicul pentru verificarea reciprocă. Conform rezultatelor testului MTT, MPP+ a redus semnificativ viabilitatea celulelor MES23.5, sugerând că MPP+ a fost citotoxic pentru neuronii dopaminergici. Rezultatele au demonstrat, de asemenea, că C. tubulosa a îmbunătățit în mod eficient expresia proteinelor anti-apoptotice și a inhibat creșterea apoptozei induse de MPP+-.

PD și GDNF

GDNF este un factor neurotrofic, care a fost izolat pentru prima dată de Lin și colab. (1993). Lin şi colab. (1993) au arătat, de asemenea, că GDNF a avut efecte nutriționale specifice asupra neuronilor dopaminergici din creierul mijlociu al șobolanilor. GDNF, neurturin (NTN), persephin (PSP) și artemin (ART) constituie familia GDNF. Sunt proteine ​​secretoare similare structural și înrudite funcțional (Kotzbauer și colab., 1996; Baloh și colab., 1998; Milbrandt și colab., 1998; Woodbury și colab., 1998).

Receptorul GDNF este format din două componente. Prima componentă, GFR, este fixată de membrana exterioară a glicozilfosfatidilinozitolului (GPI) și ancorată la suprafața conexinei. A doua componentă este proteina Ret. Cercetările au arătat că există patru tipuri diferite de GFR: GFR 1, GFR 2, GFR 3 și GFR 4. GFR 1 este un receptor de mare afinitate al GDNF (Onochie și colab., 2000; Chen și colab., 2001; Lindahl). et al., 2001). Proteina Ret este un receptor funcțional al GDNF. Molecula homodimer a GDNF se leagă direct de GFR 1 pentru a forma complexe și interacționează cu Ret, rezultând dimerizarea și activarea Ret. Datorită autofosforilării Ret, Ret activează mai multe căi comune de semnalizare a TH. În absența proteinei Ret, GDNF provoacă fosforilarea proteinei MAPK, PI-3 și PLC-, în plus față de expresia ARNm și activitatea funcțională a C-fos prin proteina sa receptoră, GFR 1 (He et al., 2008).

Studiile au demonstrat că GDNF a avut cel mai puternic efect protector asupra neuronilor dopaminergici (Rangasamy et al., 2010; Campos et al., 2012). În vehiculele care utilizează MPTP și 6-hidroxidopamină (6-OHDA) pentru a induce deteriorarea neuronilor dopaminergici, GDNF protejează neuronii dopaminergici prin reducerea apoptozei și promovarea creșterii axonale pentru a induce diferențierea celulelor stem (Lucas și colab., 2012; Littrell et al., 2013). Lin şi colab. (1993) au arătat că GDNF a promovat în mod specific viabilitatea, diferențierea și creșterea axonală a neuronilor dopaminergici pentru a promova absorbția DA în neuroni. Studiul a mai arătat că GDNF nu numai că a prevenit toxicitatea acută, ci și a atenuat toxicitatea pe termen lung a MPP+ sau 6-OHDA în neuronii dopaminergici, prevenind în plus moartea celulelor în celulele stresate sau deteriorate (Yu et al., 2010). În plus, GDNF a promovat proliferarea și diferențierea celulelor stem neuronale către neuronii dopaminergici din mijlocul creierului (Lindsay, 1995) pentru a salva neuronii dopaminergici de la degenerarea retrogradă (Hong-Juan și colab., 2011).

Studiile au arătat că expresia GDNF în SN a fost redusă semnificativ în vehiculele animale (Yang et al., 2010). Acest lucru sugerează că poate fi unul dintre mecanismele patogenezei la șobolanii PD. Injectarea a 5-15 µg/zi GDNF în ventriculul lateral sau striatul unui animal vehicul indus de MPTP timp de trei luni consecutive a promovat repararea nigrostriatală a sistemului dopaminergic la animalul vehicul (Grondin și colab., 2002). Studiile privind tratamentul cu GDNF pentru PD în vehicule animale au arătat că injectarea intracerebrală a GDNF în diferite regiuni ale creierului, cum ar fi SN, nucleul caudat și ventriculul lateral, a îmbunătățit tulburările de mișcare asociate cu modelele animale de PD, inclusiv scăderea activității motorii, rigiditatea musculară și tremor (Grondin et al., 2002). Cu toate acestea, GDNF nu poate trece direct prin bariera hemato-encefalică. Prin urmare, injectarea cerebrală locală de GDNF implică riscuri substanțiale și dificultăți în aplicarea clinică. Aplicațiile pentru introducerea GDNF exogen prin microsfere cu eliberare controlată, capsule cu eliberare susținută și gene virale sunt încă studiate (Liang și colab., 2010; Yang și colab., 2010; Qiao și colab., 2012). Având în vedere limitările diferitelor tehnici de introducere a GDNF exogen în creier, agenții neuroprotectori care promovează eliberarea GDNF endogen sunt semnificativi pentru aplicarea clinică.

PD șiC. tubulosaNanopulbere

PD este mai frecventă la adulții de vârstă mijlocie și la vârstnici. Teoria MTC consideră că PD este localizată în primul rând în creier și se datorează în principal deficienței hepatice și renale, pe lângă insuficiența energetică vitală și a sângelui. Conform acestei teorii, tratamentul PD ar trebui să se concentreze astfel pe revigorarea rinichilor și a măduvei osoase.Yang şi colab. (2010)au folosit studii clinice randomizate, dublu-orb și controlate cu placebo și au constatat că terapia combinată folosind Madopar și rețete de tonifiere a rinichilor a atenuat disfuncțiile motorii ale pacienților cu PD. Rezultatul tratamentului a fost mai bun decât o singură terapie cu Madopar. Eficacitatea tratamentului monoterapiei TCM sau prescripției de compuși în PD a fost confirmată în modelele animale de PD și aplicațiile clinice. Aplicațiile TCM pentru tonificarea rinichilor și promovarea circulației sângelui au redus doza de monoterapie pentru PD folosind Madopar. Unele studii au sugerat că TCM a îmbunătățit simptomele PD și a protejat neuronii dopaminergici, care ar fi putut fi strâns legate de promovarea expresiei GDNF endogene (Hong-Juan și colab., 2011; Qiao și colab., 2012).

Compusul de tonifiere a rinichilor utilizat în acest studiu,C. tubulosananopulbere, conținutăCistanche, epimedium, șiRhizoma polygonati. Cercetările moderne sugerează că compoziția chimică aCistancheeste ECH, care protejează neuronii dopaminergici din SN la șoarecii PD induși de MPTP și inhibă reducerea DA și a transportorului DA (Zhao și colab., 2010). În plus, previne 6-reducerea DA indusă de OHDA și protejează neuronii dopaminergici striatali (Chen și colab., 2007). Epimedium inhibă activarea caspazei-3 și exercită roluri neuroprotective (Liu și colab., 2011). Flavonoidele Epimedium promovează eficient proliferarea și diferențierea celulelor stem neuronale (Yao și colab., 2010).

În acest studiu,C. tubulosananopulbere a antagonizat creșterea MPP+-apoptoza indusă într-o manieră dependentă de doză. A îmbunătățit semnificativ expresia TH înin vitrovehicul și a avut efecte anti-apoptotice semnificative în neuronii dopaminergici. Șoarecii vehicul induși de MPTP au prezentat tulburări de comportament și au redus semnificativ expresia TH în țesuturile medii cerebrale și nivelurile DA, care sunt caracteristici patologice tipice ale PD. Doze diferite deC. tubulosananopulbere a scurtat durata staționară, a îmbunătățit activitățile autonome, a îmbunătățit tulburările de comportament, a crescut nivelul DA în creier și a crescut expresia TH în vehicule. Aceste rezultate au sugerat căC. tubulosananopulbere a exercitat efecte protectoare în neuronii dopaminergici, ameliorând astfel tulburările de comportament ale vehiculelor. Doze diferite deC. tubulosananopulbere a crescut expresia proteinei GDNF și a proteinelor sale receptori în creierul șoarecilor vehicul. Doza mareC. tubulosatratamentul a reglat în mod semnificativ expresia Bcl2 și a redus expresia Bax, ceea ce a sugerat căC. tubulosananopulberear putea promova expresia și secreția GDNF în creierul de șoarece deteriorat de MPTP. În plus, ar putea exercita efecte neuroprotective în neuronii dopaminergici și ar putea minimiza apoptoza neuronală prin rolurile de suport neurotrofice ale GDNF.

Acest studiu a demonstrat căC. tubulosananopulbere a exercitat efecte protectoare în neuronii dopaminergici în ambiiin vitroşiin vivoși creșterea expresiei TH pentru a îmbunătăți conținutul de DA. De asemenea, a îmbunătățit tulburările de comportament la șoarecii vehicul induse de MPTP, a reglementat expresia proteinei GDNF și proteinele sale receptori în SN și a avut efecte anti-apoptotice la șoarecii PD. Mecanismul care stă la baza efectelor clinice aleC. tubulosananopulbere în PD poate implica creșterea conținutului de GDNF endogen în creier și, prin urmare, reducerea daunelor neuronilor dopaminergici.

TUBULOSĂ NATURALĂ DE CISTANCHE PENTRU ÎMBUNĂTĂŢIREA FUNCŢIEI SEXUALE PHGS75% ECH 30% ACT 12