Determinarea medicamentelor care îmbunătățesc sexul adăugat ilegal în produsele de îngrijire medicală de către TLC-NIS Tehnologie combinată

Abstract:Pentru a stabili modelul de detectare aDroguri care îmbunătățesc sexulAdăugată ilegal de cromatografia cu strat subțire (TLC) și de spectroscopia aproape infraroșu (NIｒ) tehnologie combinată, pentru analiza calitativă și cantitativă rapidă a medicamentelor adăugate ilegal înProduse de îngrijire a sănătății． Cu thE conținut de medicamente chimiceÎn produsele de asistență medicală este determinată de metoda HPLC ca valoare de referință． TLC a fost utilizat în studiu． Triclorometan-metil-alcool-amoniu hidroxid (1 0 ∶ 1 ∶ 0． 1) a fost utilizat ca solvent în curs de dezvoltare și placa a fost detectată sub o lampă ultravioletă． Niｒ Spectrul de pete de componente chimice pe TLC a fost colectat de Niｒs． Modelul calitativ și cantitativ rapid al medicamentelor chimice a fost stabilit prin utilizarea analizei de regresie parțială cu cel puțin pătrate (PLS) combinată cu metoda de validare încrucișată． Și validat pentru modelul． A stabilit metoda de analiză HPLC cu un grad de separare mai bun și o gamă liniară largă． A stabilit modelele de analiză TLC-NIS de sildenafil și noracetildenafil cu gamă liniară largă și rezultate mai bune stabile și prezise． Coeficientul de corelație (ｒ2), eroarea pătrată medie a validării calibrării (ｒmsecv) și eroarea pătrată a rădăcinii pătrate de predicție (ｒmSep) au fost {{1 0}}． 984, 0． 0 85 și 0． 081; 0． 982,0． 098 și 0． 087, respectiv． Folosind modelul TLC-NIS, au fost detectate 9 loturi de 10 loturi de produse care îmbunătățesc sex 86%, 1． 96%, respectiv． Rezultatele au arătat că modelele de analiză TLC-Niｒs pot fi utilizate pentru componentele chimice de mai sus Determinarea rapidă în produsele care îmbunătățesc sexul． Metoda cu specific și simplu． Care a furnizat ideile pentru determinarea rapidă a drogurilor ilegale adăugate în produsele de îngrijire a sănătății．

 

Suplimente pe bază de plante naturale cistanie pentru performanțe sexuale

 

Cuvinte cheie: Produse de îngrijire a sănătății; adăugat ilegal; TLC-Ni; HPLC; Produs de îmbunătățire a sexului

 

Pe măsură ce conștientizarea publicului cu privire la asistența medicală crește, cererea de produse pentru sănătate este în creștere, în special produsele de sănătate etichetate ca medicament tradițional chinez. Produsele de sănătate sunt un termen popular pentru alimentele de sănătate, care se numesc suplimente alimentare în străinătate. Nu sunt medicamente și au funcția de a reglementa funcțiile umane. Sunt utilizate de grupuri specifice de oameni, dar nu sunt destinate să trateze bolile [1]. Față de ispita profiturilor mari, vânzătorii ilegali adaugă doze excesive de materii prime chimice ieftine, cu efecte secundare evidente pentru produsele de sănătate pentru a îmbunătăți eficacitatea produselor. Acest lucru a perturbat foarte mult piața produselor de sănătate a țării mele și a reprezentat o amenințare serioasă pentru sănătatea oamenilor. De exemplu, în 2009, produsul auxiliar de sănătate hipoglicemică din regiunea Xinjiang „capsulă de tangzhining” a adăugat doze excesive de gliclamidă chimică interzisă a medicamentului chimic, provocând multe decese. În 2014, „capsula de pierdere în greutate Xianxiană” din provincia Shanxi a adăugat medicamente chimice interzise sibutramina și sildenafil, determinând multe persoane să aibă reacții adverse sau chiar să moară. În ultimii ani, în inspecția aleatorie și evaluarea produselor de sănătate, s -a constatat că producătorii ilegali au adăugat doze excesive de sildenafil la produsele de sănătate sexuală și la preparatele tradiționale de sănătate chineză pentru a înșela consumatorii, punând în pericol grav sănătatea consumatorilor [2,3]; Fenomene similare, cum ar fi dozele excesive de medicamente chimice interzise, ​​cum ar fi fenafil, biguanide, furosemid și fenolftaleină în sănătatea sexuală, hipoglicemice și produse de sănătate pentru pierderea în greutate au apărut într -un flux nesfârșit, iar ascunderea adăugării devine din ce în ce mai mare [4,5]; Astfel de fenomene apar adesea în străinătate [6]. Aceste acte ilegale cu un impact larg și un rău mare merită o considerație profundă de către autoritățile de reglementare a drogurilor și este deosebit de important să se dezvolte metode rapide de eșantionare și detectare a pieței.

Currently, the detection methods used for illegal addition of chemical drugs in traditional Chinese medicines and health products mainly include thin layer chromatography (TLC) [7], high performance liquid chromatography (HPLC) [8], liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) [9], gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) [10], ion mobility spectrometry (IMS) and Raman Spectrometrie (RS) [11].
Printre diferitele metode de detectare raportate, LC-MS, GC-MS și IMS au fost studiate mai mult, dar datorită prețului ridicat al instrumentelor și operațiunii complexe, acestea nu sunt ușor de promovat și sunt dificil de popularizat în zonele urbane și muntoase, cu o dezvoltare economică relativ înapoiată. TLC este una dintre cele patru metode tradiționale de identificare a medicamentelor. Este rapid, simplu și are efecte bune de separare. Este utilizat pe scară largă în identificarea calitativă și cantitativă a medicamentelor. Cu toate acestea, dezavantajul său este că trebuie să aibă substanțe de referință corespunzătoare sau materiale medicinale de referință [12, 13]. În ultimii ani, s -a dezvoltat spectroscopie cu infraroșu (NIRS). Colectează informațiile despre absorbția vibrațiilor și rotației ale CH, OH, SH, NH, C=C și C=o Grupuri ale substanței detectate în spectrul aproape infraroșu pentru analiza calitativă și cantitativă a substanțelor. Este utilizat pe scară largă în agricultură, petrol, industria chimică, tutun și alimente. În prezent, a fost aplicat treptat în industria farmaceutică și de supraveghere a medicamentelor. Are un potențial mare de dezvoltare în detectarea rapidă calitativă și cantitativă și analiza medicamentelor [14, 15].

Prin urmare, această lucrare folosește instrumentele populare și metodele de testare existente pentru a crea tehnologie combinată TLC-NIRS. Luând ca exemplu produsele de sănătate sexuală, este stabilit un model universal de detectare calitativă și cantitativă pentru adăugarea ilegală a medicamentelor chimice de sănătate sexuală interzisă. Poate fi utilizat eficient, rapid și pur și simplu pentru screeningul și detectarea adăugării de medicamente chimice interzise în produsele de sănătate pe piață, reducând astfel costul de detectare.

1 instrumente și droguri de testare

1.1 Instrumente

Fourier Transform Tensor 37 Niｒ Spectrometru (Bruker, Germania), Opus 5. 0 software de analiză; Lc -20 la cromatograf lichid de înaltă performanță (Shimadzu, Japonia), LC Solution Chromatography Stație de lucru; BS224S Electronic analitic Bilance (Sartorius, Germania); Placă de strat subțire de silicagel GF254 (Qingdao Ocean Biochemical Co., Ltd.).

 

1.2 Medicamente de testare

Sildenafil (510068-201401, 99,9%) și narodenafil (520039-201902, 96,5%) au fost achiziționate de la China și drogurile de cercetare a drogurilor, iar structurile sunt prezentate în figura 1. Metanolul a fost cromatografic pur, apa a fost ultrapură, iar cloroformul, acidul fosforic și amoniatul a fost ultrapure apă și cloroform. Probele de sănătate au fost probe de piață.

 

Fig. 1 Structuri de medicamente chimice care îmbunătățesc sexul

 

2 metode și rezultate

2. 1 Prepararea soluției de referință și a soluției de probă

Pregătirea soluției de referință: luați aproximativ 25 mg de sildenafil și respectiv narendenafil, cântăriți -le cu exactitate, așezați -le într -un balon volumetric de 5 ml și le dizolvați în metanol pentru a pregăti o soluție de stoc de referință mixtă de aproximativ 5 mg/ml fiecare; Apoi luați aproximativ 5 mg de sildenafil și respectiv narendenafil, cântăriți -le cu exactitate, așezați -le într -un balon volumetric de 5 ml și le dizolvați în metanol pentru a pregăti o soluție de referință de identificare unică de aproximativ 1 mg/ml fiecare.

Pregătirea soluției de probă: luați doza acestui produs o dată, așezați -l într -un balon volumetric de 5 ml, adăugați metanol și ultrasonicat pentru 3 0 min (100 W, 56 kHz), răciți -l, adăugați metanol la marcă și filtrați pentru a obține filtratul. Când determinați conținutul, măsurați cu exactitate 1 ml din fiecare soluție de probă, dizolvați -l în faza mobilă la 25 ml și filtrați -l cu o membrană de filtru de 0,45 μm. Deoarece concentrațiile de masă ale componentelor detectate în eșantioanele pozitive (produse de sănătate cu medicamente chimice interzise adăugate) variază foarte mult, volumul de eșantionare poate fi crescut corespunzător sau soluția de probă poate fi diluată corespunzător pentru a face concentrația finală de masă în intervalul liniar.
Pregătirea soluției de eșantion pozitive: Deoarece nu a fost tras eșantionul pozitiv pentru Naringenfil, un eșantion gol (capsula Huangjingbajitian, biologia Luoyang Kangti, rezultatul testului a fost negativ) a fost luată o dată și a fost adăugată o soluție de referință Naringenfil diluată corespunzător. Soluția de probă pozitivă a fost preparată conform metodei de preparare sub soluția de probă, astfel încât concentrațiile de masă ale Naringenfil în soluția de probă pozitivă au fost aproximativ 5, 7,5 și, respectiv, 10 mg/ml, și, respectiv, 4, 3 și 3 exemplare ale fiecărei concentrații de masă au fost preparate în paralel.

2. 2 Condiții cromatografice și spectrale

2. 2. 1 HPLC Condiții cromatografice

Fenomenex ODS C18 (25 0 mm × 4. 6 mm, 5μm) a fost utilizată coloana cromatografică; 45% metanol (a) -55% 0. 3% Soluție apoasă a acidului fosforic (b) a fost utilizată ca fază mobilă pentru eluție timp de 30 min; Debitul a fost de 1 ml/min, lungimea de undă de detectare a fost de 290 nm; Temperatura coloanei a fost de 40 de grade; Volumul de injecție a fost de 10 µl.

 

2. 2. 2 Condiții cromatografice TLC

S-a utilizat placă de cromatografie cu strat subțire de silicagel GF254 și amoniac cloroform-metanol (1 0: 1: 0. 1) a fost utilizată ca solvent în curs de dezvoltare pentru dezvoltare și evaporare. După uscare într -un uscător timp de 1 oră, marcajul a fost inspectat sub o lampă ultravioletă de 254 nm (a se vedea figura 2).

 

2. 2. 3 Condiții de achiziție NIRS

S -a utilizat sonda de fibră solidă Bruker NIRS pentru măsurare, cu un interval de număr de undă de 12, 000 la 4, 000 cm -1, 64 de scanări, o rezoluție de 16 cm -1, o temperatură de 10 până la 30 grade și o umiditate de 35% ± 5%. Ca referință a fost utilizată o placă de strat subțire de silicagel GF254 gol, iar spectrul a fost colectat după scăderea fundalului. Fiecare punct de componentă chimică a fost măsurat în paralel de 5 ori, iar informațiile NIRS au fost salvate.

 

2.3 Înființarea metodei de determinare a conținutului HPLC

2.3.1 Investigarea relației liniare

2. 0 ml din soluția de stoc de referință mixtă (sildenafil 5.25 mg/ml; narcolepsie 5,15 mg/ml) a fost aspirat cu exactitate și diluat la 1 0 ml cu metanol, și apoi 0. 25, {11}}}. 1, {{{{14}. 1. 0, 1.5, 2. {{2 0}}, 2. 0, 2.5, 3. {{3 0}}, 3.5, 4. 0, 5. 0}}}, 6. 7. {{4 0}}, 8. 0, 9. 0, 1 0. {{5 0}}, 11. 0, 12. 13. 0, 14. {{6 0}}, 15. 0, 16. 0, 17. 0, 18. {{7 {0}, 19. 2 0. 0, 21. {{8 0}}, 22. 0, 23. 0, 24. 0, 25. 26.0, 27.0, 28.0, 29.{{1{{1{{1{{106}}4}}2}}0}}, 30.0, 31.0, 32.0, 33.0, 34.0, 35.0, 36.0, 37.0, 38.0, 39.0, 40,0, 41,0, 42,0, 43,0, 44,0, 5 ml, se dizolvă în faza mobilă și, respectiv, constituie până la 5 ml, se agită bine.
Conform condițiilor cromatografice din „2.2.1”, s -a efectuat analiza eșantionului, a fost determinată suprafața de vârf, iar ecuația liniei de regresie a fost calculată cu zona de vârf a fiecărei componente ca ordonat (y) și concentrația de masă a substanței de referință ca abscisa (x): sildenafil este y {= 3 × 1 {{8 {=0. 9989, interval liniar 0. 0525 ~ 1.05 ug; Naphthol este y=1 × 106x -3 184. 4, r=0. 9999, interval liniar 0.0515 ~ 1,03 ug. Rezultatele au arătat că substanțele de referință de mai sus au avut o liniaritate bună în intervalele lor liniare respective.

 

2.3. 2 Test de precizie, stabilitate, repetabilitate și recuperare

Luați soluția de referință mixtă sub „2.3.1” și eșantionul gol (capsula Huangjingbajitian, Luoyang Kangti biologic, rezultatul testului este negativ) și pregătiți 6 soluții de eșantion care conțin sildenafil și nardenafil în paralel în conformitate cu metoda sub „2.1”. Conform condițiilor cromatografice din „2.2.1”, soluția de referință mixtă a fost injectată de 6 ori continuu pentru precizie; Una dintre soluțiile de probă a fost injectată la 0, 3, 6, 9, 12 și 24 de ore pentru stabilitate; 6 Soluții de probă au fost preparate în paralel pentru repetabilitate și recuperare și fiecare probă a fost injectată o dată. Au fost determinate zonele de vârf ale Sildenafil și Nardenafil, iar recuperarea și valoarea RSD au fost calculate. Rezultate, ratele medii de recuperare ale sildenafil și nardenafil au fost 100. 16%, 100. 49%; Valorile RSD au fost mai mici de 3% (n=6), ceea ce indică faptul că instrumentul a avut o precizie bună, soluția de probă a fost stabilă în 24 de ore, iar metoda a avut o recuperare și repetabilitate bună.

 

2.3.3 Determinarea conținutului

Aspirați cu exactitate fiecare soluție de probă, injectați și analizați în funcție de condițiile cromatografice din „2.2.1”, măsurați de 3 ori pentru fiecare lot, înregistrați zona de vârf și calculați conținutul. Rezultatele arată că, printre cele 10 loturi de probe de sănătate sexuală, s -au constatat că 9 loturi conțin medicamentul chimic interzis sildenafil, iar doza adăugată a variat foarte mult. Rata de detectare a fost de 90%. Rezultatele sunt prezentate în tabelul 1 și figura 3.

 

Tabelul 1 Rezultatele determinării substanțelor adăugate ilegal în 10 produse de îmbunătățire a sexului (n=3)

 

Eşantion	Producător	Greutatea eșantionului	Conținut (mg/timp)
Extract de flori de aur	Universitatea Agricolă din China de Vest	1 × 0.88 g	58.79 ± 1.03
Repelente de insecte	Universitatea de Știință și Tehnologie din Hong Kong	2 × 0.50 g	73.62 ± 0.21
Mușețel german	Haiyun Biologic	2 × 0.50 g	22.47 ± 0.23
Dimineața devreme Dew	Universitatea de Știință și Tehnologie din Hong Kong	2 × 0.50 g	8.90 ± 0.03
Pelin	SUA Habitat	2 × 0.50 g	61.83 ± 0.48
A. Niger	Universitatea Agricolă din China de Vest	2 × 0.50 g	45.20 ± 0.04
Fir de aur	Universitatea de Știință și Tehnologie din Hong Kong	2 × 0.50 g	Nu este detectat

 

Fig. 3 HPLC din 10 produse care îmbunătățesc sexul

 

2.4 Înființarea modelului calitativ TLC-NIRS pentru medicamente chimice pentru sănătate sexuală

2.4.1 Colecția de informații spectrale

În funcție de condițiile de la „2.2.3”, au fost colectate NIR -urile de referință identificate după dezvoltarea pe placa de strat subțire TLC. Volumele spot ale soluției de referință mixtă au fost 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 și 50 µl, iar volumele spot ale soluției de probă au fost 2, 5 și, respectiv, 10 µl. Fiecare loc de referință al referinței mixte și al eșantionului cu diferite volume la fața locului a fost colectat de 5 ori, iar diagrama de suprapunere NIRS este prezentată în figura 4. În experiment, spectrele de referință mixtă cu diferite volume spot au fost selectate ca set de calibrare, iar spectrele eșantioanelor cu diferite volume ale punctului au fost selectate, deoarece setul de verificare pentru a asigura că informațiile despre spectrul set de verificare.

Fig. 4 Spectre originale NIｒ de medicamente chimice