Efectul și mecanismul glicozidelor feniletanoide Cistanche asupra șobolanilor cu fibroză hepatică imunologică

Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

TU Shu-ping1, ZHAO Jun2, MA Long1, Mukaram TUDIMAT1, ZHANG Shi-lei1, LIU Tao1
(1. Departamentul de Toxicologie, Colegiul de Sănătate Publică, Universitatea Medicală Xinjiang, Urumqi 830011,
China; 2. Institutul de Materia Medica, Regiunea Autonomă Uygur Xinjiang, Urumqi 830004, China)

Abstract:

OBIECTIV Studierea efectului antifibrotic alCistancheglicozide feniletanoide(CPhG) în albumina serică bovină (BSA) - fibroza hepatică indusă la șobolani și posibilul său mecanism METODE: Șaptezeci și cinci de șobolani SD au fost împărțiți aleatoriu în șase grupuri: control normal (tratat cu apă distilată), model (tratat cu BSA), medicament pozitiv [tratate cu BSA plus comprimate Biejiarangan (BJRG) 0,6 g・kg「'〕 și tratate cu BSA plus CPhG (0,125, {{10 }},25 și 0,5 g-kg"1) grupuri. Au existat treisprezece șobolani în fiecare tratat cu BSA plus CPhG (0,125, 0,25 și 0,5 g-kg'1) și doisprezece șobolani în alte grupuri. Pentru inducerea modelului de fibroză hepatică de șobolan s-au folosit injecția subcutanată și injectarea în vena cozii a imunității BSA. Între timp, la șobolani s-au administrat ig diferite medicamente terapeutice. După perioada experimentală, șobolanii au fost ținuți timp de 12 ore înainte de administrarea de hidrat de clor 10% și imediat eutanasiați.Ficatul a fost cântărit pentru a calcula indicele hepatic.Transaminaza glutamico-piruvică (GPT), transaminaza glutamicoxalat (GOT), fosfatază alcalină ( ALP), proteina totală (TP) și albumina (ALB) au fost evaluate de analizorul biochimic automat Mind-Ray. Densitatea hidroxiprolinei (HyP) în țesuturile hepatice a fost determinată folosind o metodă spectrofotometrică conform instrucțiunilor kiVs. Modificările și expresiile histopatologice ale colagenului de tip I și III în țesuturile hepatice au fost, de asemenea, determinate prin colorare imunohistochimică. REZULTATE În comparație cu grupul de control normal, fibrele de colagen ale țesuturilor hepatice din grupul model și-au extins legăturile și au învăluit întregul lobul, provocând leziuni structurale lobulare și formarea de pseudolobuli. Indicele hepatic (P<0.05), gpt,="" got,="" alp,="" tp,="" and="" alb="" serum="" levels=""><0.05), hyp="" content=""><0.01) were="" significantly="" increased,="" so="" was="" the="" expression="" of="" type="" i="" collagen="" and="" type="" iii=""><0.01) in="" the="" model="" group.="" compared="" with="" the="" model="" group,="" various="" doses="" (0.125,="" 0.25="" and="" 0.5="" g="" •="" kg"1)="" of="" cphg="" significantly="" reduced="" the="" bsa-induced="" elevation="" of="" the="" liver="" index="" gpt,="" got,="" alp,="" tp,="" and="" alb="" serum="" levels=""><0.05), and="" hyp="" content=""><0.01) the="" morphology="" of="" the="" pathological="" tissue="" sections="" was="" close="" to="" that="" of="" the="" normal="" control="" group,="" and="" cphg="" significantly="" reduced="" the="" expression="" of="" two="" types="" of="" collagens=""><0.01). conclusion:="" cphg="" can="" significantly="" reduce="" the="" degree="" of="" bsa-induced="" liver="" fibrosis="" in="" rats.="" the="" mechanism="" may="" be="" associated="" with="" the="" down-regulation="" of="" two="" types="" of="" collagens="" and="" suppression="" of="" the="" activation="" of="" hepatic="" stellate="">

Cuvinte cheie: Cistanche; glicozide feniletanoide; fibroza hepatică; albumină serică bovină; tip colagen

Cistancheglicozide feniletanoide

CistanchePlanta (Cistanche) este un renumit și valoros medicament chinezesc. Datorită efectului curativ precis și proprietăților medicinale ușoare, a fost considerată o medicină chineză puternică și hrănitoare încă din cele mai vechi timpuri și are reputația de „ginseng din deșert”. În ultimii ani,Cistanchea atras atenția oamenilor pentru activitatea sa biologică remarcabilă. Studiile chimice și farmacologice au arătat căCistancheglicozide feniletanoide(CPhG) sunt una dintre principalele baze materiale pentru efectele medicinale ale Cistanche]. CPhG are o varietate de activități biologice, cum ar fi antioxidant, antidepresiv, antiinflamator, antiviral, antitumoral, antibacterian și reglarea imunității]. Peter a descoperit pentru prima dată în 1989 că echinacozidul compus CPhG are un efect protector semnificativ asupra ficatului și, ulterior, a trezit interesul oamenilor pentru cercetarea CPhG împotriva fibrozei hepatice. Studiile preliminare ale acestui grup de cercetare au descoperit că extractele de tulpini suculente aleCistancheau o bună protecție hepatică și hepatoprotecție împotriva modelelor de leziuni hepatice imune in vitro și modelelor de celule HepG2.2.15. Efectul virusului anti-hepatitei B, dar mecanismul specific al inhibării fibrozei hepatice de către CPhG și mecanismul specific al fibrozei anti-ficat nu este încă clar. În acest studiu, șobolanii au fost injectați subcutanat și în vena cozii cu albumină serică bovină (albumină serică bovină, BSA) pentru a pregăti un model de fibroză hepatică imună, a evalua gradul de leziune hepatică și a fibrozei și a explora efectele CPhG asupra protecției ficatului și anti- fibroza hepatică. Posibil mecanism de acțiune.

1 Material și metode

1.1 Reactivi și instrumente.

Tulpini carnoase proaspete aleCistanche(C. tubulosa) 6,0kg, 70% etanol au fost refluxate de 3 ori, fiecare 3 ore, iar extractele au fost combinate. AB. 8 Rășina a fost purificată pentru a obține extracte de glicozide feniletanoide, și anume CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide), care au fost identificați ca CPhG de către un cercetător de la Institutul de Cercetare Farmaceutică din Regiunea Autonomă Uygur Xinjiang de către Zhao Jun utilizând cromatografia în fază lichidă de înaltă eficiență cu o puritate de 70 la sută. Utilizați 0,5% carboximetil celuloză de sodiu (CMC-Na) pentru a formula medicamentul în diferite concentrații și păstrați-l la frigider la 4 grade pentru utilizare ulterioară. Comprimate compuse din gama Biejia (comprimate compuse din gama Biejia, BJRG) (Inner Mongolia Furui Technology Co., Ltd., număr de lot: 20131006), BSA (produs al companiei americane Sigma, CAS: 9048-46.8, importat) cu ambalaj original), lanolină (Shanghai Yuanye Biological Technology Co., Ltd.), parafină lichidă (Tianjin Fuyu Fine Chemical Co., Ltd.), soluție tampon fosfat [Fisher Biochemical Products (Beijing) Co., Ltd., număr de lot : NZD1132]. Reactiv de detectare a hidroxiprolinei (Hyp) țesutului hepatic (Institutul de Bioinginerie Nanjing Jiancheng, număr de lot: 20140526), ​​anticorp anti-colagen de iepure de tip 1 0,2 ml (Compania americană Abcain, număr de lot: 140619), anticorp de iepure anti-colagen de tip 11 20}}mL (compania China Bioss, număr lot: 98O788W). Incubator cu încălzire electrică cu temperatură constantă (Shanghai Yixie Technology Co., Ltd.), sterilizator cu abur cu presiune verticală (Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. Medical Equipment Factory), centrifugă de echilibrare automată cu rack multituburi L-530 (Changsha Xiangyi Centrifuge Instrument Co., Ltd.), analizor biochimic automat (Mindray, număr de serie: A086A0182), analizor de chemiluminiscență (Tiger Technology, număr de serie: mp2808).

1.2 Animale, pregătirea modelului și administrarea

Masculi de șobolani SD sănătoși, clasa SPF, greutate corporală {{0}}g, furnizați de Centrul pentru animale experimentale al Universității Medicale din Xinjiang, numărul de licență de producție animală SCXK (nou) 2011.{{13 }}004. Numărul licenței de utilizare a animalelor de laborator de mediu SPF: SYXK (nou) 2011-0004, hrănire în condiții de mediu controlate (25 de grade și ciclu de lumină/întuneric de 12 ore), șobolanii mănâncă și beau liber, hrăniți cu pelete standard și utilizați după hrănire regulată pentru 3 zile. Toate procedurile relevante pentru experimentele pe animale au fost aprobate de Comitetul de etică a animalelor al Primului Spital Clinic Afiliat al Universității Medicale Xinjiang. 75 de șobolani SD au fost împărțiți aleatoriu în 6 grupuri, și anume grupul de control normal, grupul model, grupul de control pozitiv al medicamentului BJRG (0,6 g·kg), CPhG 0,125, 0,25 și 0,5 g·kg. Grupul CPhG are 13 animale în fiecare grup, iar ceilalți au 12 animale în fiecare grup. Consultați instrucțiunile medicamentului pentru a seta raportul de doză echivalentă a conversiei suprafeței corporale între om și șobolan pentru a seta doza grupului de control pozitiv al medicamentului BJRG. Pentru CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide) doză, consultați literatura [8] și rezultatele pre-experimentale. În plus față de grupul de control normal, șobolanii au folosit Zhu Qigui și colab. . Metode A fost pregătit modelul imun de fibroză hepatică. Modelul a fost împărțit în faza de sensibilizare și faza de atac al venei cozii. Etapa de sensibilizare: în plus față de grupul de control normal, șobolanii din fiecare grup au fost injectați cu 0,5 ml de soluție salină normală. Şobolanilor din celelalte grupuri li s-au administrat mai multe puncte de SC cu BSA 9 g·L adjuvant incomplet Freund, 0,5 ml de fiecare dată, de 5 ori în total. Intervalul dintre primele 2 injecții a fost de 14 zile, iar intervalul dintre ultimele 3 injecții a fost de 7 zile. La o săptămână după ultima injecție de sensibilizare, sângele a fost colectat din plexul venos intraocular al fiecărui șobolan și anticorpul anti-BSA din serul de șobolan a fost detectat prin metoda difuziei bidirecționale. Etapa de atac: Ca grup model și grup de administrare, șobolanii cu anticorpi pozitivi continuă să injecteze BSA în vena cozii de două ori pe săptămână timp de 5 săptămâni. Doza de injectare este crescută treptat de la 2 ml fiecare la 4 ml fiecare; grupul de control normal primește saramură injectabilă în vena cozii fiziologice. Dozare: Modelul este administrat la doza stabilită ig în același timp (grupului martor martor și grupului model ig li se administrează apă distilată) o dată pe zi; după finalizarea modelului, tratamentul se continuă timp de 4 săptămâni, la fiecare H1, iar perioada experimentală este de 15 săptămâni în total.

1.3 Determinarea indicelui hepatic

Fiecare grup a postit timp de 24 de ore după ultimul ig (nu poate ajuta la apă), a cântărit și a sacrificat prin luxație cervicală. A fost prelevat ficatul, sângele de la suprafața organului a fost șters cu hârtie de filtru, iar grăsimea și mezangiu au fost tăiate și apoi cântărite. Indice hepatic. Indice hepatic=calitatea organului (g)/f această calitate (g) × 1O0.

1.4 Colorație Masson pentru observarea fibrozei hepatice. Toți șobolanii au luat țesut hepatic din același loc, fixat cu paraformaldehidă 10 procente, încorporat în parafină convențională, secționat și colorat cu Masson și au observat modificări histologice la microscop. Clasificarea fibrozei hepatice este împărțită în 5 grade cu referire la literatura de specialitate [10]. Gradul 0: Fara fibroza; Gradul I: țesutul conjunctiv fibros este limitat la zona portală sau zona portală este mărită și tinde să se dezvolte spre lobuli; Grad ¨: Hiperplazie a țesutului conjunctiv fibros, mai mult de 2/3 din lobuli și însoțită de modificări de gradul I; Grad Sichuan: țesutul conjunctiv fibros intră în lobulii ficatului din jurul venei centrale; Grad lV: țesutul conjunctiv fibros prezintă multiple hiperplazii difuze în toți lobuli, cu formare de pseudo-lobuli, și modificări de gradul III.

1.5 Detectarea indicilor biochimici serici

Șobolanii din fiecare grup au ținut post (nu pot ajuta la apă) timp de 24 de ore după ultima administrare, au cântărit și s-a prelevat sânge după anestezie cu pentobarbital sodic (30 mg·kg-, ip) și s-a centrifugat la 12000xg timp de 10 minute. Separați serul și utilizați un analizor biochimic automat pentru detectarea transferazei glutamic-piruvice (GPT), transferazei glutamic-oxalactice (GOT), fosfatazei alcaline (ALP), proteinelor totale (TP) și proteinelor. Conținut de proteine ​​(albumină, ALB).

1.6 Determinarea conținutului de hidroxiprolină în omogenatul de țesut hepatic

Cântăriți cu precizie 0,1 g (greutate umedă) de țesut hepatic și puneți-l într-o eprubetă, adăugați cu precizie 1 ml de hidrolizat și amestecați bine. Urmați cu strictețe instrucțiunile setului de testare a țesutului hepatic HyP pentru a determina conținutul de țesut hepatic HyP.

1.7 Metodă imunohistochimică pentru determinarea expresiei colagenului de tip 1 și de tip Ⅲ a fibrozei țesutului hepatic

Secțiunile de țesut au fost observate cu microscopul biologic Nikon DIGITALSIGHTDS-Fi2, iar sistemul de cameră cu microscop K12320 a fost folosit pentru a selecta un câmp vizual clar la mărire mică și mare. Fotografie. Folosind software-ul de analiză a imaginilor color Motic Med6.0CMlAS, măriți de 200 de ori prin sistemul de cameră al microscopului, 3 câmpuri vizuale sunt selectate aleatoriu pentru fiecare câmp și 5 zone cu dimensiunea 2cmx3cm sunt selectate aleatoriu pentru fiecare câmp vizual. Colagenul de tip I și de tip Sichuan sunt imunohistochimic pozitivi. Produsul de reacție este colorarea granulară fină maro-gălbuie în citoplasmă și se măsoară valoarea medie a absorbanței. Cu cât valoarea este mai mare, cu atât este mai mare conținutul de colagen de tip I și de tip II din țesut. Formula de calcul: valoarea absorbanței=suprafața de colagen (cm) / suprafața țesutului hepatic (cm).

1.8 Analiză statistică

Utilizați software-ul statistic SPSS16.0 pentru analiza statistică, iar datele rezultatelor experimentale sunt reprezentate de X_S; compararea mediilor între mai multe grupuri utilizează analiza varianței ANOVA unidirecțională, iar compararea pe perechi a mediilor eșantionului pentru mai multe grupuri utilizează metoda LSD pentru statistici. Analiză științifică, folosind analiza Ridit pentru datele de clasificare ordonate, cu un nivel de testare de =0.05

2 rezultate

2.1 Efectul extractului de etanol Cistanche asupra masei corporale și indicelui hepatic al șobolanilor cu fibroză hepatică indusă de BSA

Se poate observa din Tabelul 1. În comparație cu grupul de control normal, masa corporală a grupului model a fost redusă și indicele hepatic a crescut (PO.05); comparativ cu grupul model, grupul BJRG și grupul CPhG 0.125, 0.25 și 0.5 g-kg'1 au fost mai mari. Greutatea șoarecilor a crescut și indicele hepatic a scăzut ( P<0.05), indicating="" that="" the="" liver="" cells="" of="" the="" rats="" were="" damaged="" after="" the="" injection="" of="" bsa,="" and="">(Cistancheglicozide feniletanoide) are un anumit efect protector asupra leziunilor hepatice ale șobolanilor.

2.2 Efectul extractului de etanol de Cistanche asupra fibrozei hepatice la șobolani cu fibroză hepatică indusă de BSA

Din figura 1 se poate observa că țesutul hepatic al șobolanilor din grupul normal de control este normal, nu se observă infiltrații de celule inflamatorii, structura lobulului hepatic este intactă și clară, celulele hepatice sunt distribuite sub formă de cordon, există fără sinusoid neregulat, iar zona portalului nu este mărită. Grupul model de șobolani prezintă fibroză de gradul III-IV, cu fibre de colagen care se extind și se leagă, înconjurând întregi lobuli hepatici, distrugând structura lobulilor normali ai ficatului și formând pseudo-lobuli, dar mai ales pseudo-lobuli generoși. Grupul de droguri pozitive BJRG și CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide) grupul a avut efecte terapeutice semnificative, iar secțiunile de țesut patologic au arătat că morfologia a fost practic similară cu cea a grupului de control normal.

Conform scorului standard al fibrozei hepatice prin colorația Masson, în comparație cu grupul Shao Quchang, gradul de fibroză a ficatului model a fost semnificativ crescut (P<0.01); the="" degree="" of="" liver="" fibrosis="" in="" the="" positive="" drug="" bjrg="" group="" and="" cphg="" 0.125,="" 0.25="" and="" 0.5="" g-kg="" 1="" group="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.01) ridit="" analysis="" showed="" that="" cphg="" has="" a="" preventive="" and="" therapeutic="" effect="" on="" immune="" liver="" fibrosis="" (table="">

2.3 Efectele extractului de etanol de Cistanche asupra funcției hepatice la șobolani cu fibroză hepatică indusă de BSA

Tabelul 3 arată că, în comparație cu grupul de control normal, activitățile serice GPT, GOT și ALP și conținutul de TP al grupului model au crescut semnificativ (P

Tab.1 Efectul deCistancheglicozide feniletanoide(CPhG) asupra masei corporale și a indicelui hepatic la șobolanii cu fibroză hepatică indus de albumina serică bovină (BSA)

2.4 Efectul extractului de etanol de Cistanche asupra conținutului de HyP în țesutul hepatic al șobolanilor cu fibroză hepatică indusă de BSA

Rezultatele din Tabelul 4 arată că, comparativ cu grupul de control normal, conținutul de HyP în țesutul hepatic al grupului model a fost semnificativ crescut (PO.01); în comparație cu grupul model, conținutul HyP din CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide) a fost de {{0}}.125, 0.25 și grupul de mine de 0,5 gk, iar grupul BJRG a fost redus semnificativ ( P<0.05,><0.01)o shows="" that="" cphg="" reduces="" the="" extracellular="" matrix="" (extracellular="" matrix,="" ecm)="" deposition="" in="" the="">

2.5 Efectele extractului de etanol al rădăcinii de rizom asupra expresiei colagenului de tip I și de tip III în țesuturile hepatice ale șobolanilor cu fibroză hepatică indusă de BSA

Tabelul 5 arată că, comparativ cu grupul de control normal, expresia colagenului de tip I și de tip III în țesutul hepatic al grupului model a fost crescută (P<0.01). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" positive="" animal="" bjrg="" group="" and="" cphg="" 0.125,="" 0.25="" and="" 0.5="" g-="" the="" expression="" of="" type="" i="" and="" type="" iii="" collagen="" in="" the="" liver="" tissue="" of="" the="" kg-1="" group="" decreased=""><0.05,><0.01), and="" the="" cphg="" 0.5="" g•kg"1="" group="" was="" the="" most="" significant.="" it="" showed="" that="" cphg="" can="" prevent="" liver="" fibrosis="" in="" rats="" and="" the="" therapeutic="" effect="" can="" reduce="" the="" proliferation="" of="" collagen="" fibers="" in="" rats,="" which="" is="" consistent="" with="" the="" observation="" results="" of="" liver="" tissue="">

3 Discuție

Liver fibrosis is a process of damage and repair after repeated or chronic liver damage. It is mainly related to chronic inflammation and the chemical factors that cause chronic liver damage. It has become a world medical problem with high morbidity and mortality. Most of the various liver diseases eventually develop into advanced liver cirrhosis through liver fibrosis, which becomes the main cause of death from liver disease. In this study, a rat model of BSA-immune liver fibrosis was used. After BSA-immunized rats were injected with BSA through tail vein attacks 10 times, their liver tissue structure was severely damaged, inflammatory cells were infiltrated, and the fibrous septum composed of collagen fibers was in or Has formed. According to reports, liver fibrosis caused by BSA immune damage is closer to liver fibrosis caused by clinical chronic hepatitis and is suitable for liver fibrosis caused by antigen-antibody complex reaction, prevention and treatment, and screening of traditional Chinese medicine. According to research, fibrosis can be >260 d".

Rezultatele acestui studiu folosind modelul de fibroză hepatică imună indusă de BSA la șobolani sunt în concordanță cu rapoartele lui Ming Zhijun și colab. și Zhang Guiling și colab., sugerând că acest studiu a replicat cu succes modelul de fibroză hepatică imună. CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide) intervenția poate reduce nivelurile serice de GPT, GOT, ALP, TP și ALB și poate prezenta efecte anti-fibroză hepatică. Utilizarea pe termen lung a CPhG nu va provoca efecte adverse asupra funcției hepatice.

Rezultatele acestui studiu arată că administrarea preventivă a CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide) tratamentul poate inhiba eficient procesul de fibroză hepatică și poate reduce gradul de boală, iar îmbunătățirea este mai evidentă odată cu creșterea dozei. Acesta sugerează că CPhG are un efect mai bun de prevenire și tratament asupra fibrozei hepatice, ceea ce este echivalent cu efectul grupului de control pozitiv BJRG.

Liver fibrosis is also the central link in the development of liver cirrhosis. According to reports, cytokines are involved in the formation of portal hypertension and liver fibrosis. The salient feature of liver fibrosis is that the synthesis and degradation of type I and III collagen and hyaluronic acid (hyaluronic acid) are out of balance, which leads to ECM deposition, especially related to the deposition of type I and III collagen ⑶, accounting for the total amount of ECM>80 la sută o Raportul dintre colagenul de tip I și colagenul de tip III în ECM hepatică normală este 1; când fibroza hepatică, colagenul intrahepatic crește de mai mult de 5 până la 7 ori, colagenul de tip III apare de obicei în stadiul incipient al fibrozei, iar principiul adezivului de tip I este în stadiul târziu al fibrozei. Creșterea este cea mai semnificativă, astfel încât proliferarea colagenului de tip I și III este corelată pozitiv cu gradul de fibroză hepatică. Fibroza hepatică este un proces dinamic de sinteză a ECM și dezechilibrul de degradare. Acest studiu a constatat că CPhG a redus depunerea de ECM în ficat, indicând în continuare că CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide) are un efect preventiv și terapeutic asupra fibrozei hepatice experimentale.

Folosirea imunohistochimiei pentru a detecta modificări ale conținutului de colagen al țesutului hepatic tip I și III poate observa în mod obiectiv și direct efectul terapeutic al CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide) împotriva fibrozei hepatice. Acest studiu a arătat că colagenul de tip I și III din țesutul hepatic al șobolanilor în CPhG(Cistancheglicozide feniletanoide) grupul a fost găsit doar în jurul venei centrale și în zona portalului. Colorarea a fost redusă și superficială și era filamentoasă. Colorația imunohistochimică a fost slab pozitivă, sugerând că CPhG poate reduce producția de colagen. Mecanismul de inhibare a procesului de fibroză hepatică poate fi prin inhibarea activării celulelor stelate hepatice și reducerea sintezei ECM, exercitând astfel un efect antifibrotic.

În rezumat, mecanismul de acțiune al CPhG împotriva fibrozei hepatice de șobolan poate fi acela de a inhiba producția de colagen, de a promova degradarea colagenului și de a reduce conținutul de colagen și HyP în țesuturile hepatice ale șobolanilor cu fibroză hepatică, inhibând astfel sinteza ECM și anti- fibroza hepatică. Rolul chimiei și mecanismul specific de acțiune trebuie încă studiate în profunzime.

referinte:

[1]Li Y, Song YY, Zhang HQ. Progrese în cercetarea constituenților chimici și a activității medicinale a Cistanche]. Chin Wild Plant ResouK China Wild Plant Resources), 2010, 29(1):7-12.

[2] Liu GK, Tu PF, Yang TX, Gao Q. Procesarea în cercetarea în biologie aCistanchetubulosa(Schenk) R. Wight[J]. Mod Chin Med (Modern Chinese Medicine), 2015, 17(4): 400-405.

[3]Ma H, Yin RX, Guo M, BaoY, Cui ZH, Li G. EfectulCistanche deserticolapolizaharide asupra expresiei CREB la șoarecii model de îmbătrânire indusă de D-galactoză [J]. Chin J Exp Tradit Med Form

[4] Chen HY, Hao CQ, Guo HY, Leng XH. Progresul cercetării dezvoltării și aplicăriiCistancheresurse medicinale [J ]. Valoarea E/g (值工程), 2012, 31(3):303-30

[5] Zhao W, Pan YN. Progrese în cercetarea activității [5]phar micologice a glicozidelor feniletanoide în Cistanche[J]. Asia-Pacific Tradit Med (Asia-Pacific Traditional Medicine), 2013, 9(5):77-79.

[6]Gao XX, Chen J, Peng YL. Situația cercetării efectelor farmacologice ale polizaharidelor Cistanche deserticola [J]. Food Deg, 2015, 17(2):136-139.

[7]Zhao J, Liu T, Ma L, Yan M, Zhao Y, Gu Z și colab. Efectul protector al actozidei asupra leziunilor hepatice imunologice induse de Bacilul Calmette-Guerin plus lipopolizaharidă[J]. Planta Med, 2009, 75 (14): 1463-1469.

[8]Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Efectele hipocolesterolemiante aleCistancheextract de tubulosa, un medicament tradițional chinezesc brut, la șoareci [J]. Am J Chin Med, 2009, 37(6): 1125-1138.

[9]Xu Y, Liu W, Fang B, Gao S, Yan J. Artesunatul ameliorează fibroza hepatică indusă de albumina serică bovină la șobolani prin reglarea metaloproteinazelor matriceale [J]. Eur J Pharmacol, 2014, 744:1-9.

[10]Tsai JH, Liu JY, Wu TT, Ho PC, Huang CY, Shyu JC și colab. Efectele silimarinei asupra rezoluției fibrozei hepatice induse de tetraclorura de carbon la șobolani [J]. J Viral Hepat, 2008, 15 (7):508-514.

[11]Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Starea actuală a noilor terapii antifibrotice la pacienții cu boală hepatică cronică [J]. Ther Adv Gastroenterol, 2011, 4 (6):391-417.

[12]Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Celule stelate hepatice și fibroză hepaticăfJ]. Compr Physiol, 2013, 3 (4):1473-1492.

[13]Hernandez-Gea V, Friedman SL. Pathogenesis of liverfibrosis[J]. >4nnu/7evPa^o/, 2011,6:425-456.