Persoană de contact: emily.li@wecistanche.com

Efectul polizaharidelor Cistanche Desertica asupra funcțiilor de învățare și memorie și ultrastructura neuronilor cerebrali la șoarecii de îmbătrânire experimentală

SUN Yun et al

Obiectiv ABSTRACTPentru a observa efecteleCistanchedeserticapolizaharide(CDP) pefuncții de învățare și memorieși ultrastructura cerebrală la șoarecii de îmbătrânire experimentală. Metode: CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)a fost administrat intragastrically 50 sau 100 mg/kg pe zi, timp de 64 de zile succesive la șoareci model de îmbătrânire experimentală induse de D-galactoză, apoifuncții de învățare și memoriedintre șoareci au fost estimați prin testul step-down și testul labirintului Y; organitele țesutului cerebral și ale ultrastructurii cerebrale au fost observate prin microscop electronic de transmisie, iar forța fizică a fost determinată prin testul de înot. Rezultate: CDP ar putea îmbunătăți, evident,funcții de învățare și memorie(FV0. 01) și prelungi timpul de înot (P<0. 05),="" de­crease="" the="" number="" of="" lipofuscins="" and="" slow="" down="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" in=""><0.05), and="" improve="" the="" degeneration="" of="" cerebral="" ultra-structure="" in="" aging="" mice.="" qmdusion:="" cdp="">(Cistanchedeserticapolizaharide)ar putea îmbunătăți funcția fiziologică afectată și ar putea atenua schimbările morfologice cerebrale la șoarecii de îmbătrânire experimentală.

CUVINTE CHEIEîmbătrânirefuncții de învățare și memorie,Cistanche desertica polizaharide, ultra-structură, D-galactoză

Cistanchedesertica, un medicament pe bază de plante aplaudat ca "ginseng din deșert", are un efect special în consolidarea oaselor și măduvei și prelungirea duratei de viață, iar efectul său anti-îmbătrânire a fost confirmat de studiile farmacologice moderne"). Procesul natural de imbatranire incepe cu invatarea si degradarea memoriei, urmata de modificarile degenerative ale structurilor biologice si morfologice. În acest articol, D-galactoză induse de îmbătrânire model de mouse-ul a fost folosit pentru a observa efectul deCistanchedeserticapolizaharide(CDP) pefuncții de învățare și memorieși forța fizică, precum și ultra-structura țesuturilor cerebrale. Rezultatele au fost raportate după cum urmează.

Cistanche are multe funcții. Click aici pentru a afla mai multe

METODE

Animal

Șoarecii ICR, în vârstă de 2 luni, din sticlă transparentă, jumătate mascul și jumătate femelă, cântărind 20 - 22g, au fost achiziționați de la Centrul experimental pentru animale al Universității Yangzhou (nr. certificare nr. 98002). Zece șoareci erau ținuți în fiecare cameră și toate animalele erau libere să aibă acces la hrană și apă.

Reactivi

D-galactoza, achizitionata de la Shanghai Nr. 2 Pharmaceutical Factory, a fost compusa cu soluție salină normală la 5 g/L și rezervată în frigider la 4°C. CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)a fost furnizat de Nanjing Institute of Wild Plant, folosind apă distilată pentru a o compune la 2,5 g/ L și 5. 0 g/L. Kit step-down și aparate Y-labirint au fost produsele Shanghai Haodun Medical Apparatus Company.

Îmbătrânirea duplicarea modelului și proiectarea experimentală1,3,

Șoarecii ICR au fost împărțiți aleatoriu în 4 grupe: grupul de control ( șoarecii normali), grupul model de îmbătrânire; doza mare de CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)grup, și cdp doză mică(Cistanchedeserticapolizaharide)grup, 55 de șoareci în fiecare grupă. Pentru grupul de control, 10 ml - kg-1. d_1 soluție salină normală a fost injectată subcutanat pe fiecare șoarece. În ceea ce privește celelalte grupuri, 50 mg. kg-1 - d_1 D-galactoză a fost injectat hipodermic în fiecare animal timp de 42 de zile pentru a duplica modelul de îmbătrânire. De la începutul duplicării, 20 ml - kg-1 - d-1 soluție salină normală a fost administrată intragastrically fiecărui animal din grupul de modele de îmbătrânire și 50 mg • kg-1 • d_1and 100 mg - kg-1 - d-1 CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)au fost administrate intragastrically la fiecare șoarece în doză mică CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)grup (Grupa de tratament I ) și CDP cu doze mari(Cistanchedeserticapolizaharide)grup (Grupa de tratament U ) respectiv timp de 64 de zile.

La șase ore după ultimul medicament, 30 de șoareci au fost luați din fiecare grup, respectiv pentru a testafuncții de învățare și memorieprin test pas în jos și test Y-labirint, 15 pentru fiecare test. Testul de înot pentru evaluarea toleranței fizice a șoarecilor a fost efectuat la 2 ore după ultimul medicament cu 15 șoareci din fiecare grupă. În plus, 10 șoareci din grupul de control, grupul model și, respectiv, grupul de tratament H au fost uciși la sfârșitul experimentului pentru examinarea histo-morfologică.

Pas-jos de testare (4)

Șoarecii au fost puși în camera de răspuns pentru a se adapta la mediu timp de 3 minute, apoi antrenamentul a fost început prin conectarea energiei electrice la cameră. Mouse-ul a fost în siguranță atunci când a fost pe platformă, dar când a sărit în partea de jos a camerei (o greșeală), stimularea electrică de 36 V ar forța mouse-ul să sară înapoi la platformă. Antrenamentul a durat 5 min, s-a înregistrat numărul cumulat de timpi de greșeală în decurs de 5 min. Testul oficial a fost efectuat 24 de ore mai târziu pentru a testa capacitatea mouse-ului de a căuta o zonă sigură pentru a scăpa de stimularea electrică. Mouse-ul a fost pus pe platformă, iar timpul latent înainte de prima greșeală (momentul șederii la platformă) și numărul acumulativ de timpi de luare a greșelilor în decurs de 5 minute au fost înregistrate.

Testul labirintului Y

Labirintul Y este o cutie de labirint cu trei camere dispuse radial, cu partea inferioară din bare de cupru și deschizându-se unul în celălalt. O lampă este așezată în partea de sus și o sursă electrică este legată de partea inferioară a fiecărei camere. Lampa va fi aprinsă atunci când circuitul electric este rupt, iar apoi camera este o zonă sigură pentru animal. Con- trarily, atunci când circuitul electric este energizat, camera întunecată devine o zonă de stimulare electrică, care va provoca daune electrice animalului. Mouse-ul a fost plasat mai întâi în labirintul Y timp de 2 minute pentru a se adapta la mediu, apoi circuitul (36 -40 V) din camera în care a stat mouse-ul a fost conectat pentru a forța mouse-ul să scape în zona de siguranță. Antrenamentul a fost repetat de 15 ori pentru a consolida memoria zonei sigure în funcție de lumină din mouse. Apoi s-a înregistrat numărul de timpi corecți și incorecti de 10 teste pentru a estima rata corectă.

Test de înot(1)

Șoarecele era așezat într-un recipient, înalt de 28 cm, și umplut cu apă, la temperatura de 15°C, și înota în apă până se epuiza și se îneca. Timpul de la punerea acestuia în apă până la scufundarea sa a fost considerat timp de înot, care a fost folosit pentru a evalua toleranța fizică a mouse-ului.

Pregătirea probei de evaluare histomorfologică (3)

Zece șoareci prelevați din grupul de control, grupul model de îmbătrânire și respectiv grupul de tratament II au fost decapitați, iar cortexul cerebrumului stâng al fiecărui șoarece a fost scos, de două ori fixat cu 4% glutaral și 1% acid osmic, deshidratat gradient prin acetonă, încorporat de Epon 812, colorat prin colorare Pb-U. Organitele majore au fost observate la microscopul electronic de transmisie (TEM, Hitachi H-300, Japonia).

Analiza statistică

Datele au fost exprimate ca x +s. Comparațiile statistice ale rezultatelor au fost efectuate cu testul t asociat.

REZULTATELE

Efectele CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)referitor la funcțiile de învățare și memorie

Testul pas cu pas în jos a arătatfuncții de învățare și memoriedintre șoarecii în vârstă au scăzut mai semnificativ în comparație cu cei din grupul de control, manifestându-se ca timp de latență scurtat și timpi de creștere a greșelilor acumulate. Timpul de latență prelungit, iar timpii de luare a greșelilor acumulate au scăzut în grupa de tratament I și U; o diferență semnificativă a fost găsită în comparație cu grupul de modele de îmbătrânire. Rezultatele au arătat că CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)ar putea îmbunătăți, evident,funcții de învățare și memorie. A se vedea tabelul 1.

Rezultatele testului Y-labirint au fost similare cu cele ale testului step-down, care a arătat că rata de memorie de siguranță corectă a fost redusă la șoarecii în vârstă. O diferență semnificativă a existat atunci când grupurile de tratament I și H au fost comparate cu grupul de modele, sugerând rata de memorie de siguranță corectă ridicată după CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)tratament.

Efectul CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)referitor la toleranța fizică

Timpul de înot la șoarecii în vârstă a fost scurtat semnificativ în comparație cu cel din grupul de control. S-a demonstrat că doar o doză mare de CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)ar putea prelungi semnificativ timpul de înot, astfel, au funcția anti-oboseală. A se vedea tabelul 2.

Efectul CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)pe Organite în neuronii cerebrali

La microscopul electronic, au fost observați 10 neuroni din fiecare probă și a fost măsurat numărul de organelle(4). Rezultatele au arătat că nivelurile de lipofuscin și lizozom crescut în neuroni, numărul de mitocondrii și complexul Golgi a scăzut în grupul de model de îmbătrânire. Cele două criterii au fost restabilite într-o anumită măsură după doze mari de CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)tratament. A se vedea tabelul 3.

Efectul CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)pe Brain Tissue Ultra-structura

S-a demonstrat că crista mitocondrială s-a destrămat și s-a distribuit rar cu degenerare vacuolară. Numărul corpului NissP a fost redus, iar degranularea a apărut în câteva dintre reticulul endoplasmatic de suprafață aspră, granulele de glicogen s-au redus, saccule aplatizate de Golgicomplex ușor dilatat, cu numărul de sinapse redus, iar numărul de vezicule sinaptice în componenta presinaptică redusă. A se vedea figura 1.

Fig. 1 Mitocondriile s-au umflat și sinapsa sa a dispărut în neuroni. Grupuri de modele de îmbătrânire 10.000

Modificările degenerative s-au atenuat ușor după CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)tratament cu nucleopori evident crescute, corpuri și procese NissPs și lipofuscin redus. A se vedea figurile 2 și 3.

Fig. 2 Nissl ~ s corpurile de neuroni au reapărut și unele lipofuscin pot fi încă văzute. Grupa de tratament II, X 10.000

Fig. 3 Porii nucleari au crescut și nucleolusul poate fi văzut în neuroni, citoplasma este bogată. Grupa de tratament K, X 10.000

DISCUȚIE

Mecanismul E>-galactoză în inducerea îmbătrânirii se bazează pe teoria radicalilor liberi a îmbătrânirii. Ca urmare, D-galactoză ar putea crește conținutul de radicali liberi în organisme și afecta funcțiile organelle prin deteriorarea oxidării. Mitocondriile ca "fabrica de energie" a celulelor, pot produce o mulțime de radicali liberi în procesul respirator și ar putea fi ușor atacate de acești radicali liberi. Mitocondriile unui organism îmbătrânit sunt ușor deteriorate de radicalii liberi, daunele nu au putut fi reparate din cauza lipsei capacității de reparare。 ), și ar fi agravată din ce în ce mai mult până la moartea finală. Lipofuscinul este o marcă importantă a îmbătrânirii, producția sa este strâns legată de deteriorarea radicalilor liberi, din acest motiv, este adesea folosită ca criteriu în evaluarea nivelului de îmbătrânire.

Rezultatele acestui studiu au arătat că CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)în doze mari ar putea spori toleranța fizică la șoareci îmbătrânirea și de a îmbunătăți lorfuncții de învățare și memorie, și de a atenua nivelul de deteriorare a ultra-structurii cerebrale. Toate aceste rezultate sunt în coincidență cu cercetarea noastră anterioară (1,2) și a indicat că CDP(Cistanchedeserticapolizaharide)poate prelungi durata de viață, efectul său anti-îmbătrânire poate fi legat de capacitatea sa anti-oxidantă și radicalii liberi scavenging efecte(2) pentru a stabiliza sistemul de membrană și să păstreze un mediu intracelular stabil.

De la: "Efectul Cistanche Desertica Polizaharide asupra funcțiilor de învățare și memorie și ultrastructura neuronilor cerebrali la șoareci experimentale imbatranire" de SUN Yun et al

---CJIM2001;7(4) =288--292

REFERINŢE

1. SUN Y, LIN AP, ZHANG HQ. Cercetare o £ XinjiangCistanchedeserticape daune anti-oxidare induse de radicalii liberi. China J chineză Material Medica 1994; 19 (7): 433.

2. SUN Y, WANG DJ, SHEN SQ, et al. Observarea XinjiangCistanche deserticape hepatocite și cortexul cerebral al șoarecilor îmbătrâniți prin microscop electronic de transmisie. Tradiționale chineză de droguri de cercetare 1997;8 (1) * 30.

3. GONG GQ, XU FB. Studiul de imbatranire Model la șoareci. J China Pharmaceutical University 1991;22(2):101.

4. LI YK. Metodologia experimentală a plantelor chinezești în farmacologie. Shanghai: Editura Știință și Tehnologie 1991: 172.

5. ZENG ZH, ZHANG ZY. Oxidarea daunelor ADN-ului mitocondrial și îmbătrânirea de către radicalii liberi. Progr Biochem și Biophys 1995;22(5): 430.