Efectul echinacozidei asupra șobolanilor cu ischemie cerebrală

Abstract: Obiectiv A studia efectulEchinozida(ECH) asupra neurotransmițătorilor de monoamine din fluidul extracelular al striatului la șobolani cu ischemie cerebrală focală și pentru a explora posibilul mecanism al efectului neuroprotector al ECH asupra creierului. Metode Șobolanii SD au fost împărțiți aleatoriu într-un grup de control, grup model, grupuri ECH cu doze mari și mici și grup cu ligustrazină (CXQ). Șobolanii din fiecare grup au primit medicamentele corespunzătoare sau soluție salină fiziologică intraperitoneal o dată pe zi timp de 7 zile. În a treia zi de administrare, manșonul sondei a fost încorporat în striatul creierului. La o oră după ultima administrare, a fost realizat modelul de ischemie cerebrală focală (MCAO) la șobolan. După realizarea modelului, s-a efectuat imediat microdializă. Dializatul a fost injectat în detectorul electrochimic de cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC-ECD) pentru a determina conținutul de norepinefrină (NE), dopamină (DA), 5-hidroxitriptamina ({5-HT), 3 ,4-acidul dihidroxifenilacetic (DOPAC), acidul homovanilic (HVA), 5-acidul hidroxi indol acetic (HIAA) în lichidul extracelular al striatului fiecărei grupe. Rezultate Comparativ cu grupul de control, nivelurile de NE, DA și 5-HT în grupul model au crescut, iar metaboliții acizi DOPAC, HVA și HIAA au crescut, de asemenea. În comparație cu grupul model, conținutul a șase substanțe din grupele cu doze mari și mici de ECH (30, 15 mg · kg - 1 · d - 1) și CXQ a scăzut. Concluzie Efectul neuroprotector al ECH poate fi legat de creșterea neurotransmițătorilor monoamine după ischemia cerebrală.

Pudra de Cistanche

Cuvinte cheie: Echinozida; ischemie cerebrală; Striat; HPLC-ECD; Neurotransmițători și metaboliți monoamine

Echinaceozidă(ECH) este o componentă eficientă a glicozidelor feniletanoide izolate și purificate dinCistanche deserticola, o fabrică specială în Xinjiang. Studiile au arătat că ECH are efecte neuroprotectoare, cum ar fi antioxidarea [1-2], protecția nervilor [3-4], anti-îmbătrânire [5] și îmbunătățirea învățării și a memoriei [6-8]. Rezultatele lui Chen Hong et al. a confirmat că ECH are un efect protector asupra neuronilor DA din boala Parkinson [9]. Neurotransmițătorii monoamine sunt un fel de substanțe importante care reglează activitățile fiziologice ale organismului.Conținutul din țesut poate reflecta procesele de biosinteză, eliberare, absorbție și inactivare a neurotransmițătorilor [10-11]. În prezent, nu există un raport relevant despre efectul ECH asupra transmițătorilor de monoamine din creierul șobolanilor cu ischemie cerebrală. În acest studiu, efectul ECH asupra conținutului de neurotransmițători monoamine în lichidul extracelular al striatumului șobolanilor cu ischemie cerebrală a fost investigat prin utilizarea tehnologiei de microdializă a creierului și a fost explorat preliminar mecanismul posibil al ECH asupra neuroprotecției creierului.

Pudră de extract de Cistanche tubulosa

1.Material

1.1 Animale experimentale

Șobolani SD, ♂, masa corporală 250~300g (achiziționat de la Xinjiang Experimental Animal Center, numărul de licență: 2009-0053).

1.2 Medicamente și reactivi

ECH este donat de profesorul Tu Pengfei, Facultatea de Farmacie, Universitatea din Peking (puritate peste 95%); Noradrenalina (NE), dopamina (DA), 5-hidroxitriptamina (5-HT), 3,4-acidul dihidroxifenilacetic (DOPAC), acidul homovanilic (HVA)

5-acidul hidroxi indol acetic (HIAA) este Sigma; Clorhidrat de tetrametilpirazină pentru injecție (CXQ, Harbin Sanlian Pharmaceutical Co., Ltd.); Ciment de fosfat de zinc (produs Shanghai Medical Instruments Co., Ltd., compus din lichid și pulbere, amestecat cu timpul); 1-alchil sulfat de sodiu (DIKMA); Hidrat de acid citric (Tianjin Jinke Fine Chemical Research Institute); Citrat trisodic (Acros); Acid disodic etilendiamin tetraacetic (JTTakerChemicalco); metanol (DIKMA); Acetonitril (DIKMA); Fluidul de perfuzie de microdializă cerebrală este injecție compusă cu clorură de sodiu (Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.); Toată apa folosită este apă re-aburată.

1.3 Instrumentul

Aparat stereotactic pentru creier de șobolan american BAS4100; Sondă CMA/12 și manșon pentru sondă; Dispozitiv pentru animale conștient CMA/120; micropompa CMA/402; Colector automat de probe la temperatură joasă CMA/150. Pompa de perfuzie Esa 5600A; Pompa de perfuzie Esa 5600A; Dispozitiv automat de injectare a probei Esa 542; Detectorul electrochimic CoulArray de la Esa; Electrod de lucru din carbon sticlos și electrod de referință Ag/AgCl; Coloana C18 (DIKMA, ODS5 μ m, 150 mm × 4,6 mm); Stația de lucru pentru cromatografie CoulArraywin (compania Esa); Mixer vortex (tip QL-861); Tester de aciditate de birou (HANNA-211); Centrifugă de mare viteză de birou (tip XYJ-2).

2.Metodă

Cistanche supliment lângă mine—Imdovedesc memoria

Faceți clic aici pentru a vedea produsele Cistanche Improve Memory

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1 Gruparea și administrarea animalelor

Treizeci de șobolani au fost împărțiți aleatoriu în cinci grupuri: ① Grupul martor: 1ml · kg-1 · d-1 soluție salină normală; ② Grupa model: ser fiziologic normal 1ml · kg-1 · d-1; ③ Model+ligustazină (CXQ) 30mg · kg-1 · d-1; ④ - ⑤ Model+ECH grupe cu doze mari și mici (ECHB, ECHS): 30, 15 mg · kg-1 · d-1; Toate animalele din fiecare grup au fost injectate intraperitoneal timp de 7 zile.

2.2 Metoda modelării și microdializă

Fiecare șobolan a fost îngropat cu o canulă în a treia zi de administrare: șobolanii au fost anesteziați cu 10% hidrat de clor (3,5 ml · kg{-1), fixați pe aparatul stereotactic al creierului BAS4100 și cateterul cu sondă a fost implantat în striatul stâng (coordonatele AP:+0.2mm; ML: - 3.0mm; DV: - 3.5mm) referitor la „Harta stereotactică a creierului de șobolan” a lui GeorgePaxinos. După ultima administrare, șobolanii au fost anesteziați 1 oră mai târziu, iar șobolanilor li s-a făcut un model de ischemie cerebrală focală (model MCAO) utilizând metoda îmbunătățită de sutură Longa a lui Yang Zanzhang [12]. Linia de pește din grupul de control a fost introdusă doar 10 mm, iar ceilalți pași au fost la fel ca cei din grupul de operație. După modelare, introduceți sonda de microdializă în stare de mișcare conștientă și liberă și utilizați soluția Ringer la μ Microdializatul cerebral a fost colectat la 4 grade și un tub de dializat a fost colectat la 20 de minute. După ce fiecare tub de dializat este colectat, acesta trebuie depozitat imediat într-un frigider de - 20 grade și transferat într-un frigider de - 70 grade după dializă. Rata de recuperare a sondei a fost măsurată înainte de utilizare, care a fost utilizată pentru a converti concentrația de neurotransmițători de monoamine din dializat.

ce face cistanche tubulosa — Îmbunătățirea memoriei

2.3 Analiza HPLC-ECD

Configurația fazei mobile: faza mobilă conține 829 ml de 0.15mol · L-1 tampon acid citric-citrat de sodiu per litru; 0.1mol · L-1 EDTA disodic 1ml; Metanol 150ml; {{1{0}}alchil sulfat de sodiu 0.283 g. Setați debitul fazei mobile la 0.7ml · min-1 și temperatura cuptorului cu coloană la 28 de grade . Tensiunea de lucru a detectorului electrochimic este de 200mV, 400mV și 600mV, cu 2, 3 și, respectiv, 4 canale; Câștigul este de 2nA. Volumul de injectare este de 25 μ l. Curba standard este trasată cu 0,025, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 mg · L-1 soluție standard mixtă cu gradient.

2.4 Prelucrare statistică

Datele experimentale sunt exprimate în câmpul x ± s, iar datele de măsurare repetate sunt analizate utilizând software-ul statistic SPSS13.0.

Fig. 1-6 prezintă modificările nivelurilor de NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA și 5-HT în lichidul extracelular al striatului de șobolan. Din figură se poate observa că, după ischemia cerebrală, neurotransmițătorii monoamine din lichidul extracelular al striatului au o tulburare metabolică, iar conținutul fiecărui neurotransmițător a crescut. Într-un anumit interval, creșterea este mai evidentă odată cu prelungirea timpului de ischemie. La 90 de minute de ischemie, concentrația de DA și NE în lichidul extracelular al striatului a fost de peste trei ori nivelul grupului de control. Nivelurile de NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA și 5-HT în grupul de control au scăzut de la mare la scăzut, ceea ce poate fi legat de ischemia temporară a creierului stâng după ligatura arterei carotide comune stângi. și deteriorarea cauzată de introducerea sondei. Din curba de modificare, ECH și CXQ pot reduce concentrația maximă de DA, DOPAC, HIAA, HVA și 5-HT după ischemia cerebrală, iar CXQ și ECH în doză mare sunt mai evidente. Deplasarea în jos a curbei timpului a fiecărui neurotransmițător indică faptul că ECH poate inhiba creșterea neurotransmițătorilor și a metaboliților acestora în creierul șobolanilor cu ischemie cerebrală.

                                                                           Fig2 Efectul echinozidei asupra nivelului extracelular al DA în striatul șobolanilor

Fig3 Efectul echinozidei asupra nivelului extracelular al DOPAC în striatul șobolanului Fig4. Efectul echinozidei asupra nivelului extracelular al HIVV în striatul șobolanilor

Fig5 Efectul echinozidei asupra nivelului extracelular al HVA în striatul șobolanului Fig6 Efectul echinozidei asupra nivelului extracelular al 5-HT instriatumului la șobolani

4.Discuţie

Superman cistancheiarbă— Improve memorie

【Cereți mai multe】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Mecanismul leziunilor cerebrale cauzate de ischemia cerebrală este complex. În cazul ischemiei cerebrale, neurotransmițătorii monoaminei din creier sunt dezordonați, iar conținutul de NE, DA și 5-HT este redus semnificativ. Cu cât ischemia cerebrală este mai severă, cu atât conținutul de NE, DA și 5-HT în țesutul cerebral este mai mic [13]. Metoda de microdializă intracerebrală a demonstrat că conținutul de neurotransmițători monoamine a crescut în lichidul extracelular în timpul ischemiei cerebrale, a durat toată perioada ischemică și a crescut în continuare odată cu prelungirea timpului ischemic. Rezultatele experimentale au fost în concordanță cu raportul [14].Echinozidaeste o componentă eficientă a glicozidelor feniletanoide izolate și purificate din Cistanche deserticola, o plantă specială din Xinjiang. Are multe efecte neuroprotectoare, cum ar fi anti-îmbătrânire, îmbunătățirea învățării și memoriei și apoptoza anti-neuronală.. În acest studiu, microdializa cerebrală avansată internă combinată cu tehnologia de detectare HPLC-ECD a fost utilizată pentru a explora în mod preliminar efectulEchinozidaasupra neurotransmițătorilor monoaminei și a metaboliților acestora în lichidul extracelular al striatului la șobolanii experimentali cu ischemie cerebrală. Rezultatele au arătat că ECH poate reduce creșterea neurotransmițătorilor de monoamine în lichidul extracelular al striatului cauzată de ischemia cerebrală și are un efect mai bun asupra îmbunătățirii leziunii țesutului ischemic cerebral.