Efectele Cistanche Deserticola Deserticola și Kaempferol asupra dezvoltării celulelor granuloasei în foliculii pre-agregați de pui

Rezumat:Pentru a explora efectele Cistanche deserticola și Kaempferol asupra dezvoltării foliculare a puiului, experimentul a analizat efectele diferitelor concentrații de Cistanche deserticola și Kaempferol asupra activității celulelor granuloasei pre-clasificate de pui prin metoda MTT și a determinat concentrația optimă. PCR cantitativ fluorescent în timp real a fost utilizat pentru a detecta efectele Cistanche deserticola și Kaempferol asupra antigenului nuclear al celulelor de proliferare (PCNA), receptorului hormonului foliculo-stimulator (FSHR) și receptorului de estrogen al celulelor granuloasei pre-gradate de pui (ER) impactul exprimării ARNm; Efectele Cistanche deserticola și kaempferol asupra dezvoltării foliculare ovariene au fost analizate prin cultura in vitro a țesutului ovarian. Rezultatele au arătat că atât Cistanche deserticola, cât și Kaempferol la o concentrație de 1 × At 10-4 mol/L , poate promova în mod semnificativ proliferarea celulelor granuloasei, în timp ce promovează, de asemenea, PCNA, FSHR și ER în expresia ARNm a celulelor granuloase (P<0.01); Cistanche deserticola and Kaempferol significantly increased the number of follicles in ovarian tissue, and granulosa cells proliferated from monolayer to multilayer. Studies have shown that Cistanche deserticola and Kaempferol can promote the proliferation of aggregate granulosa cells, and promote FSHR and ER α MRNA expression promoting the development of pre-grade follicles towards grade follicles.

Cuvinte cheie: Cistanche deserticola; Kaempferol; Pui; Celule granulare înainte de grad; Țesutul ovarian

Cistanche din plante chinezești

Pentru fermele de găini ouătoare pe scară largă, nivelul producției de ouă îi afectează beneficiile economice, iar dezvoltarea foliculilor ovarieni afectează direct performanța de producție a găinilor ouătoare. Foliculii sunt împărțiți în trei etape în funcție de starea lor funcțională: foliculi primari, foliculi secundari și foliculi maturi [1]. În fiecare zi, un folicul este selectat pentru a se dezvolta până la maturitate, iar ovulul este expulzat în trompele uterine, trecând prin pâlnie, mărire, istm, uter și vagin, formând o structură asemănătoare unui ou [2-3]. Inițierea foliculilor primitivi este legată de dezvoltarea celulelor granuloasei foliculare. Hormonul foliculostimulant (FSH) se leagă de receptorul hormonului foliculostimulant (FSHR) de pe celulele granuloasei, inducând formarea receptorului hormonului luteinizant (LHR) și stimulând sinteza hormonilor steroizi [4-6]. FSH și hormonul luteinizant (LH) acționează sinergic asupra celulelor granuloasei pentru a promova dezvoltarea și maturarea foliculară, participând la selecția foliculilor dominanti. Cercetările au descoperit că, deși foliculii primordiali lipsiți de celule granuloase au fost activați, în cele din urmă toți dezvoltă atrezie [7]. În timpul dezvoltării foliculare, estrogenul poate promova proliferarea celulelor granuloasei ovariene, cooperând în același timp cu FSH și LH pentru a promova proliferarea și diferențierea celulelor granuloasei ovariene. Atunci când conținutul de estrogen din plasmă crește, acesta va fi alimentat negativ la hipotalamus prin sistemul de circulație periferică, inhibând astfel secreția de hormon de eliberare a gonadotropinei (GnRH) din hipotalamus. GnRH poate stimula adenohipofiza să sintetizeze și să secrete FSH și LH pentru a promova dezvoltarea foliculului ovarian. Când secreția de GnRH este scăzută, poate inhiba secreția de FSH și LH, conducând în cele din urmă la inhibarea dezvoltării foliculare [8-9].

Studiile anterioare au descoperit că Cistanche deserticola și Cuscuta chinensis au avut un efect bun de reparare asupra oviductelor atrofice și a oviductelor deteriorate după recuperare și ar putea îmbunătăți rata de ouat a găinilor ouătoare joase [10]. În producția de zootehnie, aplicarea flavonoidelor poate îmbunătăți semnificativ performanța producției animale, poate îmbunătăți rezistența la bolile animalelor și poate îmbunătăți funcția imunitară a animalelor.

Medicamente chinezești precum ginseng, Cistanche deserticola și astragalus

Flavonoidele totale din Cistanche deserticola pot promova în mod semnificativ proliferarea celulelor granuloasei foliculare pre-grad și gradul de pui in vitro, nivelul de transcripție al proteinei de reglare rapidă steroidogenă (StAR), ARNm a enzimei de scindare a lanțului lateral al colesterolului (CYP11A1) și secreția. de progesteron. Componenta reprezentativă a totalului de flavonoide din Cistanche deserticola este Cistanche deserticola. Greutatea sa moleculară este mică și are avantajul de a trece prin bariera hematoencefalică. În același timp, are efecte antiinflamatorii, antitumorale și asemănătoare estrogenului [11]. Componenta chimică principală a Cuscuta chinensis este totalul de flavonoide din Cuscuta chinensis. În prezent, din Cuscuta chinensis au fost izolate o varietate de flavonoide, în principal Quercetin și Kaempferol, care au activitate antioxidantă ridicată.

Aplicarea extractului de flavonoid din semințe de dodder la femelele de șobolan prezintă activitate estrogenică, care are un anumit efect asupra promovării îmbunătățirii funcției receptorului hCG/LH ovarian; Are un efect de gonadotropină asupra șoarecilor tineri și poate promova dezvoltarea sistemului lor reproducător [12-14].

În acest experiment, am selectat celule de granuloză foliculară de pui și am explorat efectul de promovare al Cistanche deserticola și Kaempferol asupra proliferării celulelor granuloase foliculare de la pui și al expresiei aferente receptorilor prin efectul Cistanche deserticola și Kaempferol asupra dezvoltării foliculare a puiului. pentru a oferi o referință teoretică pentru cercetarea și dezvoltarea de aditivi furajeri siguri, eficienți și fără reziduuri pentru a îmbunătăți performanța producției de ouă.

Efectele rinichiului Cistanche-Tonifiant

1 Material și metode

1.1 Materiale de testare

Cistanche deserticola (puritate mai mare sau egală cu 98 la sută) a fost achiziționată de la Shanghai Jizhi Biochemical Technology Co., Ltd; Kaempferol (puritate mai mare sau egală cu 98 la sută) a fost achiziționat de la Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.

1.2 Principalii reactivi și instrumente

Reactivi principali: colagenaza de tip II și DMEM au fost achiziționate de la Thermo Fisher Technology (China) Co., Ltd; DMSO a fost achiziționat de la Beijing Solebao Technology Co., Ltd; Setul M5 Super qPCR RT cu kitul de transcriere inversă pentru eliminarea gDNA a fost achiziționat de la Beijing Jumei Biotechnology Co., Ltd. Instrument principal: BCM-1300Un banc de lucru pentru purificare achiziționat de la Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. Medical Equipment Factory; Centrifuga de congelare de mare viteză AXTGL20M a fost achiziționată de la Hunan Hexi Instrument Equipment Co., Ltd; Incubatorul cu temperatură constantă Heracell 150i GP a fost achiziționat de la Bingshan Songyang Biotechnology (Dalian) Co., Ltd; LightCycle ® Instrumentul PCR cantitativ cu fluorescență de tip 96 și instrumentul de etichetare a enzimelor de tip DR-200BS au fost ambele achiziționate de la Bole Life Medical Products (Shanghai) Co., Ltd.

1.3 Izolarea și extracția celulelor granuloasei din foliculi înainte de clasificarea puiului

Au fost selectate treizeci de 150-zi de găini ouătoare brune Hailan sănătoase (furnizate de Hebei Baoding Dingnong Company) care au fost ucise prin sângerarea arterei carotide, iar ovarele le-au fost extrase aseptic (testele de cercetare in vivo pe animale au fost conform ghidurilor aprobate de Comitetul de Etică Animală al Universității Agricole Hebei). Foliculii pre-grad pot fi împărțiți în foliculi albi mici (SWF,<2 mm), large white follicles (LWF, 3-5 mm), small yellow follicles (SYF, 6-8 mm), and large yellow follicles (LYF, 9-12 mm). Collect granulosa cells from pre-graded follicles with a diameter of 6-8 mm and prior stages. The grading of follicles (see Figure 1). 

Notă: SWF reprezintă foliculi albi mici, LWF reprezintă foliculi mari albi, SYF reprezintă foliculi mici galbeni, LYF reprezintă foliculi mari galbeni și F1, F2, F3, F4 și F5 reprezintă cinci foliculi maturi.

Foliculii colectați au fost spălați de trei ori cu alcool 75% și în cele din urmă spălați o dată cu PBS. Acul steril a fost folosit pentru a elibera lichidul de gălbenuș în PBS care conține 3% penicilină și streptomicină, pentru a îndepărta stratul de celule membranare și pentru a separa stratul de celule granulare. S-au luat 15 ml de tub EP pentru a adăuga stratul de celule granuloase tăiate al foliculilor și s-au adăugat 4 ml de colagenază de tip II 0,1%. S-a agitat într-un agitator la 37 de grade timp de 3 minute. După terminarea oscilației, adăugați o cantitate egală de soluție de cultură care conține 0,5% FBS pentru a termina digestia. Se filtrează cu o sită de 200 de ochiuri și, respectiv, o sită de 400 de ochiuri. Se centrifughează filtratul la temperatura camerei la 1200 r/min timp de 5 minute și se repetă centrifugarea de două ori. Aruncați supernatantul, adăugați mediul de cultură, suflați și aspirați uniform și diluați suspensia celulară la 5 × 106 bucăți/mL și adăugate uniform într-o cutie Petri cu un diametru de 100 mm și cultivată la 37 de grade și 5% CO2. .

1.4 Efectele Cistanche deserticola și Kaempferol asupra activității celulelor granuloase

Celulele granulare au fost cultivate în mod obișnuit într-un mediu DMEM care conține 10% ser fetal bovin. Celulele în faza de creștere logaritmică au fost luate și digerate cu 2,5 g/L tripsină. Celulele au fost răspândite uniform în plăci cu 96 de godeuri. Fiecare placă a fost împărțită în 10 grupuri cu 6 găuri repetate în fiecare grup. Adăugați 200 în găurile din jurul plăcii de cultură μ L PBS servește ca por de hidratare. Concentrația de Cistanche deserticola este setată la 1 × 10-4 mol/L, 1 × 10-5 mol/L, 1 × 10-6 mol/L, 1 × 10-7 mol/L L, 5 × 10-8 mol/L, 1 × 10-8 mol/L, 5 × 10-9 mol/L, 1 × 10-9 mol/L, 1 × {{ 24}} mol/L. Setați un grup de control necompletat. După co-cultura celulelor cu Cistanche deserticola timp de 24 de ore, se adaugă 10 procente în fiecare godeu μ 5 mg/mL MTT de L. După cultivare suplimentară timp de 4 ore, se adaugă 150 în fiecare godeu μ L DMSO și se oscilează timp de 3 minute în un agitator de temperatură constantă la 37 de grade. Se măsoară absorbanța la 450 nm. Experimentul a fost repetat de trei ori, iar procesul de screening a dozei optime sigure de Kaempferol pentru celulele granuloase a fost același ca mai sus.

Desert living cistanche-Tonifiant rinichi

1.5 Efectele Cistanche deserticola și Kaempferol asupra antigenului nuclear celular în proliferare, receptorului de hormon foliculo-stimulator și receptorului de estrogen în celulele granuloasei

Efectul exprimării ARNm a fost observat în celulele granuloasei din faza de creștere logaritmică, inoculate în trei vase de cultură cu o densitate celulară de 5 × 106 bucăți/mL. Cutiile Petri au fost împărțite în grup martor; Grupa Cistanche deserticola, adică după 24 de ore de cultură celulară, se adaugă 1 × 10-4 mol/L Cistanche deserticola; În grupul Kaempferol, adăugați 1 după 24 de ore de cultură celulară × 10-4 mol/L Kaempferol; Grupa cu estrogen, se adaugă 5 după 24 de ore de cultură celulară × Se tratează cu 10 până la 8 mol/L de estrogen. După 24 de ore de cultivare, aruncați tot mediul de cultură, clătiți cu PBS, adăugați 1 ml de enzimă pancreatică pentru digestie și, după câteva minute, adăugați o cantitate egală de mediu de cultură pentru a termina digestia. Se centrifugă suspensia celulară la 1000 r/min timp de 5 minute, se aruncă supernatantul și se adaugă reactiv Trizol într-o cutie de gheață. Ulterior, s-a adăugat cloroform și s-a agitat energic, s-a plasat într-o cutie de gheață timp de aproximativ 3 minute și s-a centrifugat la 4 grade la 12000 r/min timp de 10 minute. Transferați ARN într-un tub EP nou, adăugați un volum egal de izopropanol, amestecați ușor bine și lăsați să stea într-o cutie de gheață timp de 10 minute. După centrifugare la 4 grade timp de 10 minute la 12 000 r/min, se aruncă supernatantul și se spală precipitatul cu 80% etanol. Se centrifugă la 10 000 r/min și 4 grade timp de 5 minute, se aruncă etanolul, se usucă la aer timp de 5-10 minute și se adaugă apă DEPC pentru suflare și aspirare pentru a dizolva precipitatul. Măsurați concentrația de ARN folosind un spectrofotometru UV.

Utilizați kitul M5 Super plus qPCR RT cu kitul de îndepărtare a ADNg pentru transcripție inversă pentru a obține ADNc. Detectarea antigenului nuclear celular în proliferare, a receptorului de hormon foliculo-stimulator și a receptorului de estrogen în celulele granuloasei prin nivelul de transcripție relativ cantitativ fluorescent PCR MRNA în timp real. Informațiile despre primer sunt prezentate în Tabelul 1, iar primerii au fost proiectați și sintetizați de Shenggong Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd. Grupul de referință intern - Actină, nivelul relativ de transcripție al ARNm pentru fiecare genă este determinat de 2- ΔΔ Calculat prin Ct.

Tabelul 1 Informații despre primer

1.6 Cultura in vitro și observarea morfologică a țesutului ovarian

Luați țesutul ovarian de la 30 40-găini ouătoare brune Hailan de o zi și clătiți-l de trei ori cu alcool 75%. Tăiați țesutul ovarian în bucăți mici de 1-2 mm3 într-o masă ultra-curată, cu o rată de 500 per godeu μ L adăugat la mediu DMEM și ITS (10 μ G/mL insulină, 5 μ G/mL transferină și 30 nmol/L selenit de sodiu). După 72 de ore de cultivare în incubator, tratați conform situației de grupare. Țesutul ovarian a fost împărțit într-un grup martor, grupul Cistanche deserticola, grupul Kaempferol și grupul cu estrogeni. După 72 de ore de cultivare, țesutul ovarian a fost fixat cu 4% formaldehidă și secțiunile de țesut au fost pregătite în mod obișnuit pentru observare la microscop optic.

1.7 Statistică și analiză

Datele qPCR au fost analizate folosind software-ul Biorad CFX Manager 2.0 și software-ul Microsoft Excel, iar software-ul SPSS 21.0 a fost utilizat pentru ANOVA unidirecțional. Metoda lui Duncan a fost folosită pentru comparații multiple. Rezultatele sunt reprezentate ca „medie ± abatere standard” și reprezentate grafic folosind software-ul GraphPad Prism 5.0. P<0.05 indicates significant differences, while P<0.01 indicates extremely significant differences.

2 Rezultate și analiză

2.1 Efectele Cistanche deserticola și Kaempferol asupra proliferării celulelor granuloasei

Se poate observa din figurile 2 și 3 că atât Cistanche deserticola cât și Kaempferol pot promova proliferarea celulelor granuloasei. La 1 × 10-4~1 × Într-un gradient de concentrație de 10-10 mol/L, în comparație cu grupul martor, concentrația este de 1 × 10-4 mol/L, 1 × {{ 9}} mol/L, 1 × 10-6 mol/L, 1 × La 10-7 mol/L, diferența a fost extrem de semnificativă (P<0.01), with a concentration of 5 × The difference was significant at 10-8 mol/L (P<0.05).

Notă: „* *” indică o diferență semnificativă în comparație cu grupul martor (P<0.01), and "*" indicates a significant difference compared to the blank control group (P<0.05), the same below.

Fig. 2 Valorile absorbanței celulelor granuloase expuse la Cistanche deserticola la diferite concentrații timp de 24 de ore

Fig. 3 Valorile absorbanței celulelor granuloase expuse la Kaempferol la diferite concentrații timp de 24 de ore

2.2 Efectele Cistanche deserticola și Kaempferol asupra antigenului nuclear celular în proliferare, receptorului de hormon foliculo-stimulator și receptorului de estrogen al celulelor pregranuloase de pui Impactul ARNm asupra nivelurilor relative de transcripție

Se poate observa din tabelul 2 că grupele Cistanche deserticola și Kaempferol au efecte asupra antigenului nuclear celular în proliferare, receptorului de hormon foliculo-stimulator și receptorului de estrogen al celulelor granuloasei pre-gradate de pui. Nivelul relativ transcripțional al ARNm a fost semnificativ mai mare decât cel al martor. grupul de control și grupul de estrogeni (P<0.05 or P<0.01), and the follicle-stimulating hormone receptor and estrogen receptor of chicken pre aggregate cells in the Kaempferol group α The transcription level of mRNA is the highest (P<0.01).

Tabelul 2 Efectele Cistanche deserticola și Kaempferol asupra antigenului nuclear celular în proliferare, receptorului de hormon foliculo-stimulator și receptorului de estrogen al celulelor pregranuloase de pui Impactul ARNm asupra nivelurilor relative de transcripție

2.3 Observarea histologică a ovarelor

Se poate observa din Figura 4 că, în comparație cu grupul martor, numărul de foliculi din țesutul ovarian tratat cu Cistanche deserticola și Kaempferol a crescut semnificativ, iar celulele granuloasei au proliferat de la monostrat la multistrat. În comparație cu grupul de estrogen, grupul Cistanche deserticola și grupul Kaempferol au o capacitate mai evidentă de a promova maturarea și dezvoltarea țesutului ovarian, iar grupul Cistanche deserticola și grupul Kaempferol au un efect mai evident decât grupul Kaempferol.

3 Discuție

3.1 Efectul Cistanche deserticola și Kaempferol

Întregul proces de dezvoltare foliculară este însoțit de proliferarea celulelor granuloase, care sunt de mare importanță pentru dezvoltarea foliculară. Ei inițiază creșterea foliculilor primitivi prin construirea de micromedii moleculare favorabile. În timpul dezvoltării foliculare, apoptoza celulelor granuloasei joacă un rol important în reglarea creșterii foliculare, maturarea celulelor ou și secreția de estrogen [15-16]. Cistanche deserticola, un medicament pe bază de plante chinezești, are un efect asemănător hormonilor sexuali, care poate promova dezvoltarea foliculilor animale și producția de spermatozoizi, promovează apariția normală a estrului, îmbunătățește funcția și activitatea ovariană și poate îmbunătăți funcția reproductivă. Cuscuta chinensis, ca medicament chinezesc tradițional de tonifiere a rinichilor, are efecte antioxidante, de reproducere și anti-îmbătrânire ca flavonoide componente eficiente. Studiile au arătat că o anumită doză de flavonoide din Cuscuta chinensis are un efect proliferativ asupra celulelor interstițiale testiculare de șoarece [17-18]. În acest experiment, Cistanche deserticola și Kaempferol, ca componente principale ale medicamentelor tradiționale chinezești, Cistanche deserticola și dodder, au fost selectate pentru a studia efectele acestora asupra capacității de exprimare a celulelor granuloasei foliculare de pui și a receptorilor aferenti acestora, precum și a țesutului ovarian, pentru a confirma efectele. a Cistanche deserticola și Kaempferol privind dezvoltarea sistemului reproducător a păsărilor de curte.

Efectele rinichiului Cistanche-Tonifiant

Faceți clic aici pentru a vedea produsele Cistanche pentru boli de rinichi

【Cereți mai multe】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

3.2 Antigenul nuclear celular proliferator, receptorul de hormon foliculo-stimulator și receptorul de estrogen Rolul

PCNA este un antigen nuclear celular în proliferare, care joacă un rol important în inițierea proliferării celulare și este un bun indicator al proliferării celulare. Prin urmare, creșterea PCNA în rezultatele testelor a confirmat că Cistanche deserticola și Kaempferol promovează proliferarea celulară atunci când acționează asupra celulelor granuloasei. FSH este principalul hormon care promovează dezvoltarea foliculară [19], iar locul de expresie al receptorului de hormon foliculo-stimulator (FSHR) este concentrat în principal în ovar și foliculi. Principalul mod în care FSH participă la activitățile de reproducere a găinilor este prin reglarea dezvoltării foliculilor. Când secreția de FSH crește, aceasta poate promova creșterea FSHR în celulele granuloasei, iar combinația celor două poate induce sinteza LHR prin activarea Aromatazei. Puiul poate induce ovulația sub efectul sinergic al FSH și LH [20-22]. Înainte de selecția foliculilor, celulele granuloasei exprimă doar niveluri bazale de FSHR, care sunt utilizate pentru a primi semnale FSH și pentru a produce niveluri scăzute de adenozin fosfat ciclic pentru a menține activitatea celulară. Când expresia FSHR este reglată în mod semnificativ în celulele granuloasei unui folicul pre-grad, aceasta sugerează că foliculul va fi selectat pentru a deveni un folicul de grad [23-24]. În acest studiu, în comparație cu grupul de control, expresia ARNm FSHR în grupurile Cistanche deserticola și Kaempferol a fost semnificativ crescută, indicând faptul că Cistanche deserticola și Kaempferol pot promova transcripția ARNm FSHR, crește secreția de FSH și promovează selecția. a foliculilor ca foliculi de grad. E2 este un fel de hormon steroidic secretat de celulele teca. Funcția sa este de a promova maturitatea sexuală a femelelor și de a arăta a doua caracteristică sexuală. Sub acțiunea FSH, aromataza produsă de celulele granuloasei ovariene transformă androgenul în E2, care este reglat de doi receptori de estrogeni (ER și ER) Are efecte asupra diferitelor organe ale animalelor femele și joacă un rol important în reproducerea animalelor, în special în fiziologic. activități precum dezvoltarea foliculară.În timpul creșterii foliculare, estrogenul este o moleculă cheie de reglare intracelulară care accelerează proliferarea celulelor granuloase și sporește efectele FSH și LH asupra proliferării și diferențierii celulelor ovariene.ER Principala ajustare este feedback-ul negativ, ER Dezvoltarea foliculilor este reglată atât prin căile interne cât și externe ale ovarului [26] ER Se exprimă în principal în țesuturi și organe precum glanda mamară, uter și vaginul animalelor, în timp ce ER este exprimată în principal în testicule. , ovare, prostată și hipotalamus [27].

În acest studiu, ER Nivelurile de expresie ale Cistanche deserticola și Kaempferol au fost semnificativ crescute în grupurile Cistanche deserticola și Kaempferol, sugerând că cistanche și kaempferol au efecte pozitive asupra dezvoltării, maturării și ovulației ovarelor de pui. Rezultatele acestui studiu au constatat că ER a fost măsurat. Nivelul de expresie este relativ scăzut. Acest lucru este în concordanță cu descoperirile cercetării lui Guo Miao [28] conform cărora, în dezvoltarea embrionară a găinilor, ovarele puiilor timpurii au locuri de legare specifice pentru ER. În foliculii albi, foliculii galbeni și celulele granuloasei de găină, ER Expresia este semnificativ mai mare decât ER. Flavonoidele din soia, ca estrogen pe bază de plante, pot crește rata de producție de ouă a găinilor ouătoare atunci când sunt adăugate în dietă [29], indicând o relație directă între nivelurile de hormoni estrogeni și rata de producție de ouă.

Figura 4 Țesutul ovarian după colorarea HE (10 ×)

3.3 Efectele Cistanche deserticola și Kaempferol asupra țesutului ovarian

În acest experiment, prin co-cultivarea Cistanche deserticola și, respectiv, Kaempferol cu ​​țesut ovarian, s-a constatat că numărul de foliculi din țesutul ovarian afectați de Cistanche deserticola și Kaempferol a crescut semnificativ, iar celulele granuloasei au proliferat de la monostrat la multistrat. Acest lucru demonstrează în continuare că Cistanche deserticola și Kaempferol pot promova dezvoltarea ovariană din perspectivă histologică. Antigenul celular în proliferare, receptorul de hormon foliculo-stimulator și receptorul de estrogen măsurați în rezultatele acestui experiment. Modificările indicatorilor au confirmat că Cistanche deserticola și Kaempferol au efecte asemănătoare estrogenului, ceea ce oferă o bază experimentală pentru explorarea țintei principalelor componente. de Cistanche deserticola si dodder.

4. Concluzie

Acest studiu a confirmat că Cistanche deserticola și Kaempferol pot promova proliferarea celulelor granuloase pregradate de pui și pot crește PCNA, FSHR și ER Nivelul de transcripție al ARNm poate promova în mod semnificativ dezvoltarea foliculilor.

Referinţă:

［1］Yang Pengyun, Song Beibei, Ma Jinrui și colab. The role of granulosa cells in egg formation [J] Poultry Science, 2021 (11): 50-54

［2］ HUO SY,LI YR,GUO Y etc. Îmbunătățirea efectelor flavonoidelor Epimedi⁃ um asupra caracteristicilor de reproducere selectate la găinile ouătoare după năpârlirea forțată［J］. Poultry Science,2020,99（5）: 2757-2765.

［3］ HUO SY,LI YR,ZHANG S, și colab. Funcțiile Epimediumului asupra oviductului regresat și a foliculilor de găinile stratificate mutate în forță ［J］. Jurnalul de cercetare mondială a păsărilor de curte, 2020,10（2）:326- 335.

［4］ RAJU GR,CHAVAN R,DEENADAYAL M,et al. Hormonul luteinizant și sinergia hormonului foliculostimulant: o revizuire a rolului în hiperstimularea ovariană controlată［J］. Journal of hu⁃ man reproductive ences,2013,6（4）:227-234.

［5］ SCHMIDT D. Factorul de transcripție Foxl2 murin înaripat-helix este necesar pentru diferențierea celulelor granuloase și menținerea ovarului［J］. Development,2004,131（4）:933-942.

［6］ SULLIVAN MW,STEWART-AKERS A,KRASNOW JS,et al. Răspunsurile ovariene la femei la hormonul recombinant de stimulare foliculară și hormonul luteinizant (LH): un rol pentru LH în etapele finale ale maturării foliculare［J］. Journal of clinica endocrinology & metabolism, 1999,84（1）:228-232.

［7］ GUO Y,LI YR,ZHANG S,et al. Efectul flavonoidelor totale din epimedium asupra dezvoltării celulelor granuloase la găinile ouătoare ［J］. Poultry Science,2020,99（9）:4598-4606.

［8］ ZHANG WD,LI N,DU ZR, et al. Receptorul IGF-1 este implicat în efectele reglatoare ale icariinei și icaritinei în astrocite în condiții bazale și după o provocare inflamatorie［J］. Jurnalul European de Farmacologie, 2021,906（5）:174269- 174278.

［9］ FREDERIQUE RZ,MIGUEL F,GE Y,et al. Arhitectura de reglare a celulei gonadotrope L T2 care stă la baza răspunsului la hormonul de eliberare a gonadotropinei［J］. Frontiere în endocrinol⁃ ogy,2018,9:34.

［10］ Huo Shuying, Kang Jingmin, Li Yurong, et al. Efectul „Yimu Powder” asupra reparației trompelor uterine și a performanței de ouat la găinile ouătoare [J] Chinese Poultry, 2018, 40 (19): 4

［11］ WANG S,WANG Q,WANG H etc. Inducerea senescenței dependente de deteriorarea ROS și ADN de către icaritin contribuie la activitatea sa antitumorală în celulele carcinomului hepatocelular［J］. Pharmaceutical biology,2019,57（1）:424-431.

［12］ Wang Jianhong, Wang Minzhang, Wu Qinghua și colab. Efectul flavonoidelor din Cuscuta chinensis asupra funcției endocrine ovariene la șobolani stresați [J] Chinese herbal medicine, 2002 (12): 46-48

［13］Miao Jiangxia Progresul cercetării privind componentele active și mecanismul de acțiune al semințelor de dodder în reglarea reproducerii//Proceedings of Academic Conference on Pharmaceutical Phytochemistry and Sustainable Development of Traditional Chinese Medicine Resources (I), 2009: 323-325

［14］ TAO CC, WU Y, GAO X etc. Efectele antitumorale ale staniului Icari⁃ împotriva cancerului de sân sunt legate de receptorii de estrogen［J］. Medicina moleculară actuală,2020,21（1）:73-85.

［15］ MONNIAUX,DANIELLE. Conducerea foliculogenezei prin dialogul oo⁃ cito-celule somatice: lecții din modelele genetice［J］. The⁃ riogenology,2016,86（1）:41-53.

［16］TAKASHI SHIMIZU A,NAOMICHI KOSAKA A,CHIAKIMU⁃ RAYAMA A,et al. Expresia receptorului Apelin și APJ în celulele granuloasei și tecăi în diferite stadii de dezvoltare foliculară în ovarul bovin: implicarea apoptozei și reglarea hormonală - sciencedirect［J］. Animal reproduction science, 2009,116（1-2）:28-37.

［17］ Lin Siwen, Chen Shaobo, Yin Changchang și colab. Efectul estrogenic al flavonoidelor totale din Cistanche deserticola deserticola asupra promovării diferențierii osteogene ［ J ］ Research and Development of Natural product, 2020, 32 (3): 373-378

［18］ Tao Jinliang, Wang Xiao, Wei Yuanyuan, et al Efectul protector al flavonoidelor din Cuscuta chinensis asupra secreției anormale induse de BPA a hormonilor masculini în celulele interstițiale testiculare de șoarece [J] Progress in Animal Medicine 2019, 40 (5): { {4}}

［19］ Wang Peng, Hou Deyu, Shi Liguang, et al Danzhou Chicken FSH Study on single-nucleotid polymorphism of gene ［ J ］ Heilongjiang Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2018, 10 (19): 19-22

［20］ ZHANG M,SHI H,SEGALOFF DL și colab. Exprimarea și localizarea receptorului hormonului luteinizant în tractul reproducător al șoarecelui femelei［J］. Biology of reproduction,2001,64（1）: 179-187.

［21］ Li Qin, Wang Qigui TGF- Progresul cercetării și perspectivele membrilor familiei care reglează dezvoltarea foliculară la păsări de curte ［ J ］ Chinese Poultry, 2019, 41 (19): 1-5

［22］Guan Hongbin, Li Qingzhang Progresul cercetării asupra hormonului foliculostimulant [J] Journal of Northeast Agricultural University, 2002, 8 (3): 306-311

［23］ Wu Xinpei, Wang Shuying Localizarea imunohistochimică a FSHR și LHR în ovarele caprei negre Laiwu ［ J ］ Life Science Research, 2006, 25 (4): 367-371

［24］ TISCHKAU SA, HOWELL RE, HICKOK JR, et al. Creșterea hormonului lu⁃ teinizant reglează expresia genei ceasului circadian în ovarul de pui［J］. Chronobiology International, 2011,28（1）:10-20.

［25］Tang Haifei, Wang Zhiwen, Zheng Xuesong, et al Progress in estrogen function research [J] Reproduction and Contraception, 2019, 39 (4): 334-340

［26］ Liu Lingbin Efectul luminii radiației monocromatice asupra receptorului de estrogen (ER, ER), Efectul exprimării receptorului de progesteron (PR-A, PR-B) în țesutul ovarian Ya'an: Universitatea Agricolă Sichuan, 2013

［27］ COUSE JF,LINDZEY J,GRANDIEN K,et al.Distribuția tisulară și analiza cantitativă a receptorului de estrogen-alfa (ERal⁃ pha) și a receptorului de estrogen-beta (ERbeta) mesager al acidului ribonucle⁃ ic de tip sălbatic și mouse-ul ERalpha-knockout［J］. En⁃ docrinologie,1997,138（11）:4613-4621.

［28］Guo Miao ER în țesutul ovarian al găinilor ouătoare Reglarea aparentă a modificărilor dinamice și screening-ul genei de reglementare Tai'an: Shandong Agricultural University, 2017. [Zhao Biqian Progresul cercetării privind aplicarea daidzeinei în producția de găini ouătoare [J ] Guangdong Feed, 2017, 26 (8): 31-33