Efectele extractului apos de Cistanche Tubulosa asupra microbiotei intestinale a șoarecilor cu tulburări intestinale

1. Introducere

Microorganismele intestinale colonizează în principal lumenul intestinal și stratul mucoasei și se mutualizează cu gazda prin schimb de materiale și energie, transformare și alte procese [1]. Sunt centre de semnalizare care integrează mesajele de mediu, cum ar fi dieta, cu semnale genetice și imunitare, afectând în consecință metabolismul gazdei, imunitatea, sistemul nervos și răspunsul la infecții [2]. In mod normal, exista un echilibru dinamic intre flora intestinala si gazde; cu toate acestea, disbioza intestinală poate duce la modificări ale echilibrului sănătate/boală, tulburări ale sistemului imunitar și o multitudine de boli [3]. Modificările moderate ale microbiotei intestinale sunt acceptabile pentru gazdă; cu toate acestea, acest lucru poate oferi în continuare oportunități de a amplifica modificările altor factori agravanți, cum ar fi bacteriofagi, bacteriocine și stresul oxidativ [4].

CISTANCHE TUBULOSĂ PENTRU ÎMBUNĂTĂȚAREA INTESTINALĂ MICROBIOTA INTESTINALE PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Studiile anterioare au arătat căextractul etanolic de Cistanche tubulosa(CT), o formulă tradițională din plante din China, poate regla compoziția microbiană intestinală la șobolani [5], iar glicozidele totale ale CT ajustează microbiota intestinală dezordonată [6]. Speciile de Cistanche, care parazitează în principal pe rădăcinile speciilor Tamarix, sunt numite și „ginseng al deșertului”, iar un tonic format din tulpini de Cistanche deserticola (CD) și Cistanche tubulosa (CT) este folosit ca remediu pe bază de plante [7]. ].ThPrincipalele componente chimice ale glicozidelor de feniletanol CT (PHG), care sunt substanțe antioxidante [8, 9], s-au dovedit a îmbunătăți disfuncția reproductivă [10], suprimă activarea celulelor stelate hepatice, blochează conducerea căilor de semnalizare în TGF{{3} }/ SMAD [11] și previne fibroza hepatică indusă de albumina serică bovină la șobolani [12]. Dintre cele peste 100 de componente din CT, polizaharida este, de asemenea, una dintre substanțele importante cu conținut abundent [13, 14]. Studiile anterioare au demonstrat că polizaharidele C. deserticola induc melanogeneza în melanocite, reduc stresul oxidativ [15], atenuează disfuncția cognitivă prin reglarea proceselor antioxidante și antiinflamatorii la șobolani [16], protejează celulele PC12 împotriva leziunilor induse de OGD/RP [17] ],îmbunătățește absorbția echinacozidelor in vivoși afectează microbiota intestinală [18].

Probioticele sunt microorganisme vii nepatogene care au beneficii pentru sănătate și conferă echilibru microbian în tractul gastrointestinal atunci când sunt administrate în cantități adecvate [19].ThAcestea pot îmbunătăți răspunsurile imune celulare nespecifice caracterizate prin activarea macrofagelor, a celulelor natural killer (NK) și a limfocitelor T citotoxice specifice antigenului și eliberarea diferitelor citokine într-o manieră specifică tulpinii și dependentă de doză [20]. Tulpinile probiotice îmbunătățesc proprietățile epiteliului intestinal prin modularea TJ și s-a demonstrat că tulpinile probiotice specifice reglează expresia mucinei, influențând astfel proprietățile stratului de mucus și reglând indirect sistemul imunitar intestinal [21]. Tulpinile de bacterii lactice (LAB) și Bifidobacterium sunt probiotice majore care au fost utilizate în multe domenii [22-26].ThBeneficiile lor pentru sănătate sunt numeroase, capacitatea lor antioxidantă fiind un factor important în funcțiile lor legate de sănătate [27]. Probioticele pot chela ionii metalici pentru a-i împiedica să catalizeze oxidarea [28, 29]; de asemenea, pot crește expresia enzimelor antioxidante [30, 31], pot produce diferiți metaboliți cu activitate antioxidantă [32, 33], pot media căile de semnalizare antioxidante [34-36] și pot regla enzimele producătoare de specii reactive de oxigen (ROS) și răspunsul microorganismelor intestinale la stresul oxidativ [37].

Un studiu recent a demonstrat că polizaharidele CD ar puteastimulează creșterea unor bacterii lactice, care ar putea aduce beneficii sănătății umane [38]. Cu toate acestea, conținutul de polizaharide din CD este diferit de cel din CT [7, 39], iar această diferență poate duce la efecte diferite asupra microorganismelor intestinale. În plus, deși polizaharidele CD pot reduce stresul oxidativ prin activarea căii NRF2/HO-1 [15], efectele unei singure polizaharide pot diferi de efectul general al compozițiilor multiple în CT.Thnoi, este necesar să se definească cu precizie efectele extractelor apoase CT asupra microorganismelor intestinale. În plus, PHG pot rezista, de asemenea, stresului oxidativ [40] și suprima răspunsurile inflamatorii mediate de lipopolizaharide prin activarea căii Keap1/Nrf2/HO-1 [41].Thprin urmare, determinarea efectului extractului apos CT este de mare valoare. În plus, efectele anumitor constituenți ai extractului apos de CD asupra stresului oxidativ și florei intestinale sugerează că rezistența la stresul oxidativ ar putea fi corelată cu modificările florei intestinale.

Pentru a umple golurile din cunoștințele despre subiectele menționate mai sus, am investigat efectele extractului apos CT asupra microbiotei intestinale la șoareci cu tulburări ale florei intestinale.ThAceste rezultate vor oferi informații valoroase despre posibilele mecanisme prin care CT modifică flora intestinală și conferă rezistență intestinală la stresul oxidativ.

2. Materiale și metode

2.1. Animale experimentale.

Un total de 18 șoareci masculi C57BL/6J din clasa SPF, cu o greutate de 18-22 g, au fost achiziționați de la Centrul pentru animale experimentale al Universității Medicale din Xinjiang cu numărul de licență SCXK (nou) 2018-0003.ThAu fost găzduiți în cuști în condiții standardizate: 12 h fotoperioadă lumină/întuneric, temperatură de 23 ± 2 grade și umiditate de 55 ± 5%.ThAnimalele au fost hrănite cu o dietă comercială (51% extract fără azot, 25% proteină brută, 4,6% grăsime brută, 6,5% cenușă brută, 4,0% fibre brute și 8,9% umiditate) și apă de la robinet.ThAnimalele au fost tratate conform recomandărilor descrise în Ghidul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator al National Institutes of Health.

TUBULOSĂ NATURALĂ DE CISTANCHE PENTRU ÎMBUNĂTĂȚAREA IMUNITĂȚII PHGS75% ECH 30% ACT 12%

2.2. Extragerea extractului apos.

Felii uscate de C. tubulosa, furnizate de Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd., au fost măcinate în pulbere și au fost selectate granule cu dimensiuni ale particulelor între 20 și 40 de ochiuri.ThCondițiile de extracție au fost următoarele: raport solid lichid de 1:19, temperatură de 80 de grade, timp de microunde de 6 min, timp de ultrasunete de 16 min, putere de microunde de 400 W și putere de ultrasunete de 400 W.ThConținutul componentelor principale ale extractului apos a fost măsurat prin HPLC (Agilent 1260 Infinity II, California, SUA). Pe scurt, substanțele standard de echinacozidă (0,2 mg/mL) și actozidă (0,2 mg/mL) au fost dizolvate în metanol 50% pentru a servi ca soluție de substanță de referință.Thro, 1 g de extract apos CT a fost dizolvat în 100 ml metanol 50% și lăsat să se stabilească timp de 30 min.ThSoluția de extract a fost tratată cu ultrasunete la 250 W și 35 kHz timp de 10 minute și ulterior centrifugata la 12,000 rpm/min.ThSupernatantul a fost filtrat printr-o membrană filtrantă microporoasă de 0.45 μm.ThSoluția de substanță de referință și filtratul au fost apoi detectate prin HPLC în următoarele condiții: gel de silice legat cu octadecil silan ca umplutură, metanol ca fază mobilă A și acid formic 0,1% ca fază mobilă B.ThTemperatura coloanei a fost setată la 30 de grade, lungimea de undă de detecție a fost setată la 330 nm și volumul de injecție a fost de 10 μL.

2.3. Experimente.

După o săptămână de adaptare, cei 18 șoareci au fost împărțiți aleatoriu în șase grupuri: A (normal cu extract apos CT în doză medie adăugată), B (normal fără extractul apos CT), C (model fără extract apos), D ( model cu extract apos CT în doză mare adăugată), E (model cu extract apos CT în doză medie adăugată) și F (model cu extract apos CT în doză mică adăugat).ThGrupurile au fost tratate după cum urmează: grupul normal a fost udat cu soluție salină normală, grupul model a fost udat cu cefiximă (30 mg/kg, Shiyao Group Ouyi Pharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, China) și soluție salină normală, mare -grupul cu doză a fost udat cu cefiximă și 221,14 mg/kg de extract apos CT, grupul cu doză medie a fost udat cu cefiximă și 165,54 mg/kg din extract apos, iar grupul cu doză mică a fost udat cu cefixim și 110,57 mg/kg a extractului apos.The Un grup a fost udat cu 165,54 mg/kg de extract apos și nu s-a adăugat cefixim. Cefixima a fost administrată zilnic la ora prânzului, iar alte substanțe au fost administrate zilnic la ora 15:00 h. În timpul experimentelor, grupurile C, D, E și F au fost menținute în starea model de tulburări intestinale.ThFecalele au fost colectate la fiecare șapte zile pe o masă sterilă operabilă și depozitate la -20 de grade.

2.4. Observarea histopatologică a colonului de șoareci.

La sfârșitul experimentului, șoarecii au fost uciși prin luxație cervicală, iar conținutul lor de colon a fost colectat pe o masă operabilă sterilă și depozitat la -80 grade C; în același timp, probele de țesut colonic au fost fixate în formol neutru 10%.Thro, probele au fost deshidratate folosind o concentrație de gradient de etanol, hialinizate folosind xilen, încorporate în parafină, seccționate și colorate cu hematoxilină-eozină. Modificările morfologice ale mucoasei colonului au fost observate și comparate folosind un microscop optic. Au fost măsurate lungimea vilozităților și adâncimea criptei în colon și a fost calculat raportul dintre lungimea vilozităților și adâncimea criptei (valoarea V/C) (51).

2.5. Extragerea ADN-ului și construcția bibliotecii.

ADN-ul a fost extras din fecale folosind kitul EZNA® Soil DNA (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, SUA) conform protocolului producătorului. Calitatea ADN-ului a fost determinată folosind un fluorometru (QuantiFluor™–ST, Promega Corporation, SUA). Primerii perechi din regiunea V3-V4 a ADNr-ului 16s au fost proiectați pentru a amplifica regiunea și a produce fragmente de ADN de 466 bp.ThPrimerul direct a fost 341F (-5- CCTACGGGNGGCWGCAG-3-), iar primerul invers a fost 806R (-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-). Fiecare volum PCR a fost de 25 μL, conținând 2,5 μL de 10 × tampon PCR, 2 μL de dNTP, 1 μL din fiecare primer și 20-30 ng de ADN șablon.Thro, adaptoarele indexate au fost atașate la capătul ampliconilor pentru a genera biblioteci de secvențiere.ThBibliotecile au fost validate folosind un fluorometru QuantiFluor™ și cuantificate la 10 nmol.

2.6. Secvențierea genei ARNr 16s și analiza comunității microbiene.

ThPlatforma Illumina (Illumina MiSeq) a fost utilizată pentru a obține date de 2 × 250 bp la capătul pereche. Unitățile taxonomice operaționale (OTU) au fost obținute folosind software-ul Uparse prin clustering standard cu 97% similaritate.ThAlgoritmul naiv de atribuire bayesian al clasificatorului RDP a fost utilizat pentru a alinia OTU-urile cu baza de date Greengene Versiunea 13.5 și pentru a efectua adnotarea speciilor.ThDiversitatea alfa a microbiotei intestinale a fost calculată utilizând indicii Shannon și Simpson, iar diferențele dintre grupuri au fost analizate prin Analiza liniară discriminantă a mărimii efectului (LEfSe).ThDiversitatea beta a fost analizată prin analiza coordonatelor principale (PCoA) a disimilarităților Bray-Curtis. PICRUSt2 a fost utilizat pentru a estima capacitatea metabolică microbiană a microbiomului intestinal [42].

2.7. Analiza Statistică a Datelor.

SPSS 20 a fost utilizat pentru ANOVA unidirecțional, iar datele experimentale au fost exprimate ca X ± S; X indică valoarea medie, iar S indică abaterea standard.

TUBULOSĂ NATURALĂ DE CISTANCHE PENTRU MODERAREA MODĂRILOR METABOLICE PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3. Rezultate

3.1. 8e Efectul extractului apos CT asupra morfologiei colonului.

Thcompuși reprezentativi (echinacozid și acteozid) și concentrațiile lor de extract CT au fost validate prin HPLC (Figura S1). Pentru a determina efectul extractului apos asupra intestinului, am investigat lungimea vilozităților colonului și adâncimea adâncimii în urma tratamentului cu extractul apos CT.ThVilozitățile colonului din grupele cu doză normală și cu doză mare (A, B și D) erau mai lungi și asemănătoare cu degetele, în timp ce vilozitățile colonului din grupele model și cu doză mică (C și F) erau scurte, iar vârfurile colonului vilozitățile au fost sparte (Figura 1). În consecință, extractul apos CT în doză mare a crescut semnificativ lungimea vilozităților colonului și a redus adâncimea recesului la șoarecii cu tulburări intestinale în comparație cu șoarecii din grupul model (P <0.01). În schimb, adâncimea recesului nu a fost semnificativ diferită între grupul cu doză mare și grupul normal (P > 0,05) (Tabelul S1).ThAceste rezultate au indicat că doza mare de extract apos CT poate îmbunătăți morfologia în interiorul colonului la șoareci cu tulburări intestinale.

3.2. 8e Efectul extractului apos CT asupra diversității microbiotei intestinale.

Am efectuat secvențierea genei ARNr 16s pentru a investiga cauza potențială a modificărilor morfologice din interiorul colonului și a investiga modificările microbiotei intestinale în urma tratamentului cu extract apos CT. O medie de 100.553 de etichete efective, variind de la 77.734 la 125.144, a fost obținută din datele brute (Tabelul S2).ThAceste etichete au fost grupate în 4932 OTU-uri (Tabelul S3). Apoi am analizat diversitatea microbiotei intestinale pe baza acestor OTU.ThIndicii Shannon și Simpson nu au arătat nicio diferență între grupul A (normal cu extractul apos CT) și grupul B (normal fără extractul apos CT) (Figura 2(a)).Theste indicat că, la șoarecii fără tratament cu cefixim, extractul apos CT ar fi putut să nu fi avut efecte suplimentare benefice sau dăunătoare asupra diversității microbiotei intestinale. Totuși, diversitatea din grupul model (C) a arătat o tendință de scădere comparativ cu cea din grupurile normale.ThȘoarecii tratați cu extracte apoase CT cu doze mari și medii au prezentat semne de recuperare a diversității, în timp ce un astfel de fenomen nu a fost observat la șoarecii tratați cu extract apos CT în doză mică (Figura 2 (a)). Între timp, PCoA a arătat că grupurile normale (A și B) și grupurile cu tulburări intestinale cărora li s-au administrat extracte apoase CT în doză mare (D) și cu doză medie (E) au avut tendința de a avea distanțe intereșantionare mai scurte decât cele din grupul model și din grupul model. grupa de supliment cu extract apos CT cu doză mică (F) (Figura 2(b)).ThAceste rezultate au indicat că extractul apos CT ar putea ajutaîmbunătățește diversitatea microbiotei intestinalela soareci cu afectiuni intestinale.

3.3. Modificări în compoziția microbiotei intestinale tratate cu extract apos CT.

ThProfilurile compoziției microbiotei au fost comparate între diferite grupuri. La nivel de phylum, abundența relativă a Proteobacterii în grupul model a fost mai mare decât cea din celelalte grupuri (Figura 3 (a)).ThCreșterea Proteobacteria a sugerat că microbiomul șoarecilor model a fost modificat de cefixim și că extractul apos CT ar putea beneficia microbiota intestinală, deoarece prevalența crescută a Proteobacteria este un marker central al florei intestinale dezordonate [43-45]. În plus, la nivel de gen, abundența relativă de Lactobacillus în grupul model a scăzut în comparație cu cea din grupurile normale și cu doză mare; cu toate acestea, a crescut în comparație cu cea din grupul cu doză medie și mică (Figura 3(b)).ThAceste rezultate au indicat că extractul apos CT în doză mare ar putea promova creșterea unor bacterii din genul Lactobacillus.

Microbiota diferențială între grupurile studiate a fost determinată în continuare conform analizei LEfSe.ThAceastă analiză a arătat că, după tratamentul cu cefixim, abundența relativă a Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales și Chloroflexi a crescut semnificativ, în timp ce abundența relativă a grupului Lactobacillus, Eubacterium_nodatum{_, Pseudonocardiales și grupul Christensenellaceae_R-7_a scăzut semnificativ în comparație cu cei din grupul normal (Figura 4(a)). În mod surprinzător, atunci când grupul model a fost suplimentat cu extract apos CT în doză mare, abundența relativă de Muribaculaceae, Lactobacillus, Kineosporiaceae, grupul Eubacterium nodatum și Pedobacter au fost semnificativ crescute în comparație cu cele din grupul model. Între timp, abundența relativă de Rhodobacter, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9 și Candidatus Stoquefichus a scăzut semnificativ în comparație cu cele din grupul model (Figura 4(b)).

3.4. Funcțiile microbiotei intestinale legate de tratamentul cu extract apos CT.

Am folosit software-ul PICRUSt2 pentru a prezice căile metabolice ale microbiotei intestinale, iar grupul normal a fost folosit ca referință pentru a analiza modificările din alte grupuri. Sub tratamentul cu cefixim, abundența relativă a degradării etilbenzenului, biosinteza peptidelor nonribozomale ale grupului siderofor și metabolismul xenobioticelor prin căile citocromului P450 a crescut; după tratamentul cu extracte apoase CT cu doze mari și medii, abundența lor relativă a revenit la niveluri normale. Între timp, abundența relativă a căii de metabolizare a cianoaminoacizilor a scăzut sub tratamentul cu cefixim; cu toate acestea, a crescut după tratamentul cu extract apos CT în doză mare. În plus, în general, modificările diferitelor căi ale metaboliților după tratamentul cu cefixim au fost semnificative în comparație cu cele din grupul normal; cu toate acestea, adăugarea extractului apos CT a fost capabilă să prevină modificări excesive (Figura 5).

4. Discutie

Morfologia colonului poate fi modificată prin creștere, digestie și absorbție, reglare imună și repararea leziunilor intestinale [46–50].ThRaportul V/C poate reflecta în mod cuprinzător starea digestivă a tractului intestinal și este direct proporțional cu capacitatea digestivă și de absorbție a tractului intestinal [51, 52]. În studiul de față, biopsia vilozităților și adâncituri și datele statistice au arătat că extractul apos în doză mare ar putea îmbunătăți parțial morfologia defectuoasă din interiorul colonului.

Pentru a investiga modul în care extractul apos modifică morfologia intestinală și afectează microbiota intestinală, am lucrat înapoi de la modificările florei intestinale. Am descoperit că abundența relativă a Proteobacterii, un marker central al florei intestinale dezordonate, a crescut sub tratamentul cu cefiximă, comparativ cu cea fără tratament cu cefixim.ThAbundența relativă a altor markeri hub, Bacteroidetes și Firmicutes, nu a avut modificări semnificative, deși acestea

grupurile sunt predominante în intestinul uman; s-a constatat că raportul dintre Bacteroidetes/Firmicutes a fost scăzut la persoanele obeze în comparație cu cel la persoanele slabe și s-a constatat că acest raport crește odată cu pierderea în greutate la persoanele care urmează două tipuri de dietă cu conținut scăzut de calorii [38, 41, 43-45, 48, 53, 54]. Între timp, Turicibacter, care este asociat cu obezitatea [55], a fost semnificativ crescut în grupul model în comparație cu cel din celelalte grupuri. În special, diversitatea microbiotei intestinale la șoarecii model a fost îmbunătățită prin adăugarea extractului apos CT. Am observat câteva bacterii intestinale specifice la șoareci sub diferite tratamente; de exemplu, Lactobacillus și Muribaculaceae au fost cele două genuri bacteriene principale care au crescut în grupul tratat cu extract apos CT în doză mare în comparație cu cei din grupul model (Figura 4). Studii recente au indicat că polizaharidele extractelor apoase CT posedă semnificative

creșterea unor bacterii lactice, care ar putea aduce beneficii sănătății gazdei [43]. În paralel, Muribaculaceae sunt organisme probiotice legate de longevitate [57].ThAcestea au sugerat că mecanismul prin care extractul apos CT îmbunătățește microbiota intestinală poate fi promovarea sau protecția creșterii organismelor probiotice. O altă bacterie demnă de remarcat a fost bacteria YE57. Deși extractul apos CT în doză mare a promovat abundența relativă a bacteriei YE57 în studiul de față (Figura 4), studiile anterioare au descoperit că abundența sa a fost mai mare în intestinul normal decât în ​​intestinul tratat cu reziduuri de ceai de plante cu concentrație mare. [58] și că abundența sa a fost redusă după intervenția cu Bacillus licheniformis combinat cu XOS (xilooligosaharide) [59].Thnoi, rolul acestei bacterii în microbiota intestinală merită un studiu suplimentar. În plus, numărul relativ mic de eșantion din acest studiu ar putea determina o măsură de fals pozitiv și fals negativ, iar un studiu viitor pe probe mai mari este sugerat pentru a valida markerii bacterieni identificați.

Compoziția extractului apos CT ar putea fi importantă pentru efectele sale asupra compoziției și modificărilor funcționale în microbiota intestinală a șoarecilor cu tulburări intestinale. PHG-urile sunt componente active comune găsite în CD și CT, iar echinacozidul a fost identificat ca fiind principalul PHG în CT [60]. În ultimele decenii, s-a demonstrat că echinacozidul posedă multe activități farmacologice, cum ar fi efecte anti-îmbătrânire și neuroprotectoare, îmbunătățirea funcției cardiace, reducerea hiperlipidemiei și hiperglicemiei și prevenirea diabetului indus de obezitate și a sindromului metabolic [53, 61-65] . Am detectat modificări în căile metabolice ale microbiotei intestinale.ThTratamentul cu cefixim a condus la îmbogățirea bacteriilor legate de degradarea etilbenzenului și biosinteza peptidelor neribozomale din grupul siderofor, în timp ce tratamentele cu extract apos CT cu doze mari și medii ar putea atenua aceste modificări, indicând faptul că acest extract a moderat comunitatea bacteriană legată de la aceste funcţii. În plus, îmbogățirea bacteriană crescută legată de calea de metabolism al cianoaminoacizilor sub tratamentul cu extract apos în doză mare și îmbogățirea sa scăzută la șoarecii model au indicat că extractul apos CT poate promova metabolismul cianoaminoacidului.ThModificările metaboliților relevanți ar putea furniza acestui extract apos activități farmacologice.

Deși mecanismul prin care extractul apos CT modifică compoziția și funcția microbiotei intestinale este complex, există câteva indicii pentru a specula cu privire la mecanismul potențial. S-a raportat că atât bacteriile lactice, cât și extractele apoase CT pot antagoniza stresul oxidativ. Stresul oxidativ care apare în timpul inflamației este un factor comun care exacerbează tulburările intestinale prin reducerea puternică a diversității microbiene intestinale și prin promovarea creșterii bacteriilor specifice (4). Dimpotrivă, speciile reactive de oxigen promovează și creșterea selectivă a grupurilor bacteriene prin respirația cu nitrați și tetrationați [66–68]; de exemplu, bacteriile din familia Enterobacteriaceae pot crește rapid ca o consecință a modificărilor compoziției florei intestinale în condiții oxidative în timpul inflamației [69, 70]. Majoritatea organismelor vii dezvoltă apărare enzimatică, apărare antioxidantă neenzimatică și mecanisme de reparare pentru a elimina radicalii de oxigen [71]. Cu toate acestea, aceste sisteme antioxidante native nu sunt în general suficiente pentru a preveni deteriorarea oxidativă a organismelor vii. Mai mulți antioxidanți sintetici suplimentari, inclusiv hidroxianisol butilat și hidroxitoluen butilat, au fost utilizați pe scară largă pentru a reduce oxidarea, dar siguranța lor a fost pusă la îndoială [72, 73]. Prin urmare, cercetătorii s-au orientat spre găsirea de antioxidanți mai siguri și mai naturali obținuți din substanțe naturale. Datorită capacității atât a polizaharidelor, cât și a bacteriilor lactice de a elimina stresul oxidativ, determinarea mecanismului antioxidant precis al extractelor apoase CT asupra microbiotei intestinale necesită investigații suplimentare în viitor.

În concluzie, am constatat că extractul apos CT a fost capabilîmbunătățește microbiota intestinalăla șoarecii cu tulburări intestinale prin promovarea diversității,moderarea modificărilor metaboliceși remodelarea structurii microbiotei intestinale, iar aceste rezultate pot oferi o referință pentru dezvoltarea medicamentelor înrudite în viitor.

TUBULOSĂ NATURALĂ DE CISTANCHE PENTRU REMODELAREA STRUCTURII MICROBIOTEI INTESTINALE PHGS75% ECH 30% ACT 12%