Studiu experimental al diferențierii direcționale a celulelor stem mezenchimale osoase (BMSC) la osteoblaste ghidate de ser care conține Cistanche Deserticola

ZENG Jian chun,FAN Yue guang＊,LIU Jian ren,ZENG Yi rong,YI Chun zhi, YAN Liang． ＊

Primul spital afiliat al Universității de Medicină Tradițională Chineză din Guangzhou, Guangzhou 510405, Guangdong, China

A lua legatura:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanchepoate preveniosteoporozașipromovaoscelulă creştere

ABSTRACT

Obiectiv: Studierea diferențierii direcționale a BMSC-urilor ghidate de DesertlivingCistanche（Herba Cistanches） care revigorează rinichii. Metode: BMSC-urile primare au fost obținute prin cultură de măduvă osoasă întreagă și subcultivate până la a patra generație prin digestia cu tripsină și apoi inoculate în două plăci cu șase godeuri la 5×106 celule pe mililitru, toate plăcile au fost împărțite în trei grupuri ca un grup martor, grupul Dexametazonă (DXM) și grupul Herba Cistanches, trei godeuri în fiecare grup, mediul a fost schimbat în ziua a 2-a. Grupul gol a fost schimbat cu L－DMEM care conține 10% FBS．. Grupul DXM a fost schimbat cu un mediu care conține 10 mmol ／ L glicerofosfat de sodiu, 0．1 μmol ／ L DXM și 50 mg ／ L vitamina C． Herbacistancigrupul a fost schimbat cu un mediu care conține 10% ser de sânge care conține Herba Cistanches și L－DMEM． Una dintre plăcile cu șase godeuri a fost colorată cu fosfatază alcalină （AKP） în a zecea zi, cealaltă a fost colorată cu alizarina Bordeaux în a douăzecea zi. Rezultate: În a zecea zi, grupul DXM și grupul Herba Cistanches au fost colorați pozitiv cu ALKP; din ziua a 12-a, la suprafața puțurilor se vedea nodul alb de calciu; care alizarina sa colorat pozitiv până în a douăzecea zi.

Concluzie: Mediul care conține Herbacistancipoate ghida BMSC-urile să se diferențieze în osteoblast, ceea ce promite o perspectivă favorabilă pentru tratamentul osteoporozei și dezacordului fracturilor osoase.

CUVINTE CHEIECistanchedeserticola; Măduvă osoasă; celule stem mezenchimale; Osteoblaste; Diferențierea celulară

Celulele stem mezenchimale (MSC) sunt un fel de celule stem adulte pluripotente, care se găsesc în principal în măduva osoasă, dar și în țesuturile extraoase derivate din origine mezenchimală în timpul perioadei embrionare, cum ar fi fibroblastele pielii, celulele stem adipoase, celulele satelite ale mușchilor scheletici și vasele de sânge Celulele endoteliale și așa mai departe. MSC-urile măduvei osoase (BM SC) sunt componente ale stromei măduvei osoase. După ce au fost izolate și cultivate in vitro, în anumite condiții inductoare, au capacitatea de a se diferenția în osteoblaste, condrocite, celule nervoase, adipocite, cardiomiocite etc. Principalele surse de celule semințe în ingineria țesutului osos sunt osteoblastele și BMSC. Deși osteoblastele au o activitate osteogenă bună, au surse limitate, greu de separat și de obținut în cantități mari și au un potențial insuficient de expansiune pe scară largă in vitro, ceea ce este greu de îndeplinit nevoile aplicațiilor clinice în ingineria țesutului osos. BMSC nu numai că au un potențial bun de diferențiere a osteoblastelor, ci și un potențial ridicat de creștere. Activitatea osoasă, potențialul puternic de proliferare și sursa convenabilă pot satisface ingineria țesuturilor autologe și pot deveni punctul central al cercetării.

Medicina chineză crede că rinichiul controlează oasele și produce măduva. Studiile farmacologice moderne au arătat că medicamentele de tonifiere a rinichilor au grade diferite de excitare a sistemului pituitar-suprarenal-gonadal și sunt strâns legate de metabolismul osos. Estrogenul are ca efect intensificarea osteogenezei.

Medicina chineză crede că rinichiul controlează oasele și produce măduva. Studiile farmacologice moderne au arătat că medicamentele de tonifiere a rinichilor au grade diferite de excitare a sistemului pituitar-suprarenal-gonadal și sunt strâns legate de metabolismul osos. Estrogenul poate îmbunătăți formarea osoasă, iar androgenul poate promova sinteza proteinelor, poate promova creșterea matricei osoase și depunerea de calciu și fosfor. efect.cistanci(Herbacistanci) conțin glicozide totale de alcool fenetilic, glicozide de ergot și betaină toate au efecte asemănătoare androgenilor. Acest experiment își propune să studieze efectul medicinei tradiționale chineze de tonifiere a rinichilorCistanche-conținând ser privind diferențierea BMSC-urilor în osteoblaste.

Discuţie

Cistancheserul medicamentos induce BMSC. Cistanche are efecte de hrănire a mijlocului, de revigorare a ficatului, de hrănire a rinichilor, de întărire a yangului, de hidratare a intestinelor și de laxativ. Studiile farmacologice moderne au arătat că medicamentele de tonifiere a rinichilor au grade diferite de excitare a sistemului pituitar-suprarenal-gonadal și sunt strâns legate de metabolismul osos. Estrogenul poate îmbunătăți formarea osoasă, iar androgenul poate promova sinteza proteinelor, poate promova creșterea matricei osoase și depunerea de calciu și fosfor. Rolul [1]. Glicozidele feniletanoide totale, ergosterozidul și betaina din Cistanche au efecte asemănătoare androgenilor. Acest experiment a constatat că serul medicamentos alCistanchepoate induce BMSC-urile să se diferențieze în osteoblaste. Deși medicina chineză unică sau medicina chineză compusă a fost folosită pentru a induce BMSC să se diferențieze în osteoblaste, mecanismul molecular specific nu a fost încă raportat. Cercetarea în proteomică poate analiza diferențele dintre proteomica aferentă acestui proces și poate stabili proteomica funcțională, în vederea unei noi interpretări a teoriei osului care guvernează rinichi.

Densitatea celulară joacă un rol important în procesul de diferențiere a BMSC în osteoblaste. Formarea nodulilor osoși nu necesită doar agenți osteoinductivi, ci depinde și de densitatea celulelor inoculate. Densitatea celulelor trebuie să atingă o anumită densitate și celulele pot fuziona. Diferențierea osteoblastelor. În acest experiment, când celulele de generația a 4-a proliferează până la confluență de peste 90%, inductorul este adăugat pentru cultură. Când densitatea celulară este prea mică, celulele vor prolifera lent și nu există nicio tendință de agregare și creștere. În același godeu de cultură cu densitate celulară neuniformă, zona densă celulară are limite celulare neclare și structură neclară, iar celulele se agregează în aglomerări. Colorația AKP și colorarea roșie cu alizarina sunt pozitive, dar nu există o densitate celulară în zona cu densitate celulară mai mică. Celulele s-au agregat în aglomerări, iar colorarea AKP și colorarea cu roșu alizarina au fost negative. Prin urmare, utilizarea micropurtătorilor în ingineria țesutului osos combinată cu metode de cultură in vitro mai eficiente, cum ar fi cultura tridimensională (RCCS), pentru a obține mai multe celule, are un impact semnificativ asupra succesului transplantului de celule.

Semnificația clinică aCistancheser medicat pentru a induce BMSC Ingineria țesutului osos are perspective largi de aplicare clinică și a devenit un punct fierbinte de cercetare în ortopedia modernă. BMSC-urile sunt în prezent cele mai ideale celule de semințe pentru ingineria țesutului osos. Sarcina centrală a cercetării asupra efectelor lor este cum să le diferențiem în osteoblaste în cele mai simple condiții posibile și apoi să le transforme în celule osoase mature.

În prezent, inductorii utilizați în mod obișnuit pentru diferențierea direcționată a BMSC sunt compuși din dexametazonă, vitamina C și glicerofosfat de sodiu. Cultura in vitro, dexametazona are un efect inhibitor asupra proliferării celulare [2], după cum s-a observat în acest experiment, clinic, dexametazona are reacții adverse precum infecția, osteonecroza și osteoporoza, care vor limita transplantul de BMSC. După aplicarea ca inductor în organism. Cistanche are efecte de revigorare a rinichilor și de întărire a oaselor și mușchilor. Acest experiment a constatat că Cistanche are ca efect promovarea proliferării BMSC-urilor și inducerea diferențierii BMSC-urilor în osteogene. În aplicarea clinică pe termen lung, nu a fost observată nicio reacție adversă a Cistanche, iar utilizarea sa ca inductor in vivo are perspective largi de aplicare clinică.

Pe scurt, cea mai mare parte a cercetării actuale privind BMSC ca celule semințe pentru ingineria țesutului osos este încă în stadiu experimental. Cum să obțineți suficiente BMSC într-o perioadă relativ scurtă de timp și să utilizați metode simple pentru a le determina să se diferențieze în osteogenic este punctul central al cercetării actuale. Deși mecanismul Cistanche cistanche, care are funcția de revigorare a rinichilor și de întărire a oaselor și mușchilor, în inducerea diferențierii osteogene a BMSC rămâne de studiat în continuare, utilizarea lui ca inductor de diferențiere a BMSC pentru tratamentul consolidarii întârziate, non-uniunii. , iar osteonecroza fracturilor cu transplant de MSC are un viitor strălucit.

Cistanchepoate preveniosteoporozasi promoveazacelula osoasacreştere