Regimurile de vaccinare multicomponente Prime-boost Chlamydia Trachomatis induc răspunsurile anticorpilor și celulelor T și accelerează eliminarea infecției într-un model de primate non-umane
Jul 10, 2023
Este o prioritate internațională dezvoltarea unui vaccin împotriva transmiterii sexualeInfecții cu Chlamydia trachomatispentru a combate răspândirea globală continuă a infecției. Theimunizare optimăstrategia rămâne încă de elucidat pe deplin. Scopul acestui studiu a fost evaluareastrategii de imunizareîntr-un model de primate non-umane (NHP). Macacii Cynomolgus (Macaqua fascicularis) au fost imunizați în urma diferitelor componente multipleimunizare prime-boostprograme și ulterior provocate cu C. trachomatis SvD în tractul genital inferior. Antigenele de imunizare au inclus antigenul proteic recombinant CTH522 adjuvantat cu CAF01 sau hidroxid de aluminiu, antigen ADN MOMP și antigene vector MOMP (HuAd5 MOMP și MVA MOMP).
Toate constructele de antigen au fost înalt imunogene, generând răspunsuri IgG sistemice specifice C. trachomatis semnificative. În special, grupele vaccinate cu proteina CTH522 au crescut un IgG specific rapid și puternic în ser. Cartografierea epitopilor specifici de celule B din MOMP a arătat că toate grupurile vaccinate au recunoscut epitopi în apropierea sau în cadrul domeniilor variabile (VD) ale MOMP, cu un răspuns VD4 consistent la toate animalele. În plus, serul din toate grupurile vaccinate ar putea neutraliza in vitro atât SvD, SvE, cât și SvF. Răspunsurile anticorpilor s-au reflectat pe mucoasa vaginală și oculară, care au arătat niveluri detectabile de IgG. Vaccinurile au indus, de asemenea, răspunsuri mediate de celule specifice C. trachomatis, așa cum se arată prin stimularea in vitro și colorarea intracelulară cu citokine a celulelor mononucleare din sângele periferic (PBMC). În general, grupele vaccinate cu proteine (CTH522) au stabilit un răspuns multifuncțional al celulelor T CD4, în timp ce grupurile vaccinate cu ADN și Vector au stabilit, de asemenea, un răspuns al celulelor T CD8. După provocarea vaginală cu C. trachomatis SvD, mai multe dintre grupurile vaccinate au arătateliminarea accelerată a infecției, dar mai ales grupul ADN, stimulat cu CAF01 adjuvantat CTH522 pentru a obține oechilibrat CD4/CD8Răspunsul celulelor T combinat cu unRăspunsul IgG, a arătateliminarea accelerată a infecției.
CUVINTE CHEIE vaccin, infecție,imunologie, bacterii, limfocite CD4/CD8,Chlamydia trachomatis
Introducere
Infecțiile genitale cu Chlamydia trachomatis cauzează anual aproximativ 131 de milioane de cazuri noi în întreaga lume (1) și constituie o problemă majoră de sănătate globală prin potențial inducerecomplicatii severeprecum pelvinboala inflamatorie, sarcini extrauterine, șiinfertilitate(2, 3). Antibioticele oferă încă un tratament eficient al infecțiilor cu C. trachomatis. Cu toate acestea, deoarece infecția este asimptomatică în până la 75 la sută din cazuri,majoritatea infecțiilor sunt lăsate netratate, iar transmisia nu este întreruptă (3). În general, este de acord că cea mai eficientă armă împotriva răspândirii continue a infecțiilor cu Chlamydia este vaccinul profilactic (4).
În ciuda câțiva ani de cercetări, un vaccin nu este încă pe piață. Acest lucru se datorează parțial stilului de viață bifazic complex al C. trachomatis. Ciclul de viață bifazic unic al C. trachomatis, cu o etapă atât intracelulară, cât și extracelulară, provoacă sistemul imunitar. Se crede că imunitatea de protecție ar trebui să constea din răspunsuri imune mediate de celule (CMI), în plus față de anticorpii specifici pentru serotip (5-13). Mai mult, generarea imunității mucoase în tractul genital reprezintă o provocare suplimentară pentru un vaccin.
În studiul de față, am testat diferite strategii de vaccin într-un model de infecție cu chlamydia NHP. Strategiile au vizat inducerea de anticorpi, celule T CD4 și/sau un răspuns al celulelor T CD8. În plus, unele dintre vaccinuri au vizat generarea unui răspuns la nivelul mucoasei. Antigenele alese pentru acest studiu s-au bazat pe proteina majoră a membranei exterioare. În primul rând, a fost generat un antigen MOMP consens (Con E) bazat pe aproximativ 1500 de secvențe serovar E ompA pentru a oferi o acoperire mare a epitopului împotriva celor mai răspândite tulpini de C. trachomatis (14). În al doilea rând, a fost utilizată o proteină de fuziune sintetică, CTH522. CTH522 este o versiune recombinantă, concepută de MOMP, care cuprinde imunorepetări heteroloage ale regiunilor VD4 din patru serovare genitale Ct (D, E, F și G) (11). Strategia din spatele proteinei de fuziune recombinantă este de a induce răspunsuri amplificate la epitopii de protecție și de a induce protecție încrucișată a serovarului (11).
O altă caracteristică cheie a experimentului actual a fost o evaluare paralelă a CTH522 în două sisteme adjuvante semnificativ diferite (AlOH și CAF01), combinate cu un rapel intranazal. Această combinație a fost testată la șoareci și mini-porci unde s-a dovedit a fi foarte imunogenă prin inducerea de titruri mari de anticorpi neutralizanți, celule CD4 plus T producătoare de IFN-g și eliminarea accelerată a unei infecții genitale cu C. trachomatis (11–13). , 15). În plus, această comparație a reflectat un studiu clinic recent, primul la om, în care ambele formulări s-au dovedit a fi imunogene și în care CAF01 a fost superior în inducerea anticorpilor seric neutralizanți și a răspunsurilor imune mediate de celule Th1 (16). Pentru a induce răspunsuri imune celulare puternice și în special răspunsuri la celulele T CD8 combinate cu răspunsurile la celulele T CD4, o parte dintre animale au fost stimulate cu imunogenul CT522/CAF01 după amorsarea cu un vector Adeno pAL1112 (HuAd5-MOMP), un Vector de variolă MVA sau un ADN plasmidic pcDNA3.1 care eliberează antigenul MOMP Con E (14, 17). Toți cei trei vectori s-au dovedit imunogeni în NHP și s-a demonstrat recent că o strategie de imunizare care combină aceste trei vaccinuri și vaccinarea finală de rapel cu răspunsuri imune superioare induse de antigen proteic cu adjuvant și a îmbunătățit în mod constant clearance-ul intravaginal de C. trachomatis la un șoarece C. model de infecție cu trachomatis (14).
În studiul de față, demonstrăm că diferite combinații de strategii de imunizare cu mai multe componente atât cu vaccinuri proteice, vaccinuri ADN, cât și vaccinuri cu vector viral recombinant într-un model de primată neumană (NHP) au ca rezultat răspunsuri imune distincte. Mai mult, observăm că un regim care folosește amorsarea ADN-ului și proteine (CTH522/ CAF01) a stimulat clearance-ul bacterian accelerat în urma unei provocări genitale cu Chlamydia trachomatis.
Rezultate
Toate regimurile de vaccinare s-au dovedit sigure și au indus răspunsuri sistemice semnificative de anticorpi
Un total de 30 de macaci cynomolgus au fost vaccinați urmând diferite regimuri de vaccinare prime-boost, inclusiv vaccinuri cu proteine, ADN și vector și diferite căi de administrare, așa cum se arată în Figura 1 și în figurile suplimentare 6-10). Toate animalele au rămas sănătoase în timpul studiului și nu au dezvoltat efecte adverse măsurabile la imunizări. În plus, nu am observat fluctuații semnificative ale greutății sau temperaturii animalelor (Figurile suplimentare 1, 2).
La momente fixe după imunizări, serul a fost colectat și nivelurile de IgG specifice CTH522 din ser au fost evaluate prin ELISA. Toate cele 5 grupuri vaccinate au stabilit un răspuns semnificativ CTH522 IgG seric (Figura 2). Cu toate acestea, cinetica a fost ușor diferită în cele 5 loturi vaccinate. Toate animalele din grupurile CTH522/AlOH plus IN, CTH522/CAF01 și CTH522/CAF01 plus IN au crescut un titru semnificativ de IgG după doar 1 imunizare intramusculară (IM), iar titrul de IgG a rămas semnificativ până la ultimul punct de prelevare (Figurile 2A- C). Nivelurile serice de IgG au crescut ușor mai lent în grupurile ADN plus CTH522 și vectori plus CTH522, unde toate animalele au fost seroconvertite în săptămâna 8 și, respectiv, în săptămâna 4 (Figurile 2D, E).
Grupurile CTH522/AlOH plus IN, CTH522/CAF01 plus IN și CTH522/CAF01 au crescut semnificativ IgG seric după cel de-al treilea vaccin de rapel IM în săptămâna 16 (Figurile 2A C). Grupurile ADN plus CTH522 și vectorii plus CTH522 au crescut semnificativ nivelurile serice de IgG după boosterul IM proteină/CTH522/CAF01 în săptămâna 20 (Figurile 2D, E). Nu s-au observat diferențe semnificative în răspunsurile anticorpilor serici după vaccinări IM de trei ori cu CTH522 formulat fie cu adjuvant CAF01, fie cu AlOH (Figurile 2A, B) și imunizările de rapel fără adjuvant intranazal (IN) în CTH522/AlOH plus IN și Grupurile CTH522/CAF01 plus IN nu au indus nicio creștere semnificativă a titrurilor de anticorpi IgG seric (Figurile 2A, B).
Cinetica răspunsului IgG seric a reflectat cinetica/nivelurile din fluidele vaginale, ceea ce indică faptul că anticorpii detectați pe suprafața vaginală erau probabil derivați din circulație. În mod similar, nivelurile de IgG oculare au urmat, de asemenea, nivelurile de IgG serice și, așa cum s-a observat în ser, a arătat că amplificatorul IM din grupurile ADN/vector a crescut titrul IgG ocular (Figura suplimentară 3).
Răspunsurile anticorpilor serici sunt direcționate împotriva domeniilor variabile 1, 3 și 4 din secvența MOMP
Elucidarea suplimentară a recunoașterii epitopului specific de către anticorpii serici, în urma diferitelor regimuri de vaccinare, a fost apoi evaluată. Serul a fost analizat în săptămâna 24, adică după vaccinurile de rapel intranazal în loturile 1 și 2 și după vaccinurile de rapel IM în grupele ADN și vector (grupele 4 și 5). Aceste analize au fost efectuate cu o matrice de peptide care acoperă CTH522, constând din 15 peptide mer cu suprapunere de 14 aminoacizi.
FIGURA 1 Proiectarea studiului. Figura prezintă grupurile, vaccinurile și căile de administrare (intramusculară, IM sau intranazală, IN) utilizate
FIGURA 2 (A–F) Răspunsuri serice ale anticorpilor IgG CTH522. Macacii Cynomolgus au fost imunizați urmând diferite regimuri de prime-boost (n=5 per grup) și serul a fost colectat la fiecare două săptămâni. Anticorpii specifici CTH522 IgG din ser au fost evaluați prin ELISA și exprimați aici ca titru pe o scară log10. Vârfurile de săgeți gri indică vaccinări. Fiecare linie reprezintă un animal. Semnificația statistică este indicată cu asteriscuri *p < 0,05 și **p < 0,01.
În general, peptidele recunoscute au fost localizate în apropierea și în interiorul domeniilor variabile (VD 1, 3, 4) ale MOMP. Grupul CTH522/AlOH a arătat chiar o anumită recunoaștere a regiunii VD2. Toate animalele au stabilit un răspuns puternic împotriva regiunii VD4 care conține epitopul VD4 neutralizant conservat (11). Grupul de ADN a arătat cea mai îngustă recunoaștere în cadrul VD-urilor (Figura 3), în timp ce grupul de vectori a arătat un model de recunoaștere puțin mai larg. Grupurile CTH522/CAF01 și CTH522/AlOH au prezentat cea mai largă recunoaștere, în special împotriva SvF și SvG.
Anticorpii serici au fost capabili să neutralizeze SvD, SvE, SvF in vitro
Pentru a evalua capacitatea anticorpilor induși de vaccin de a inhiba infecția cu C. trachomatis a celulelor sale țintă, a fost efectuat un test de neutralizare in vitro. Folosind acest test, am examinat neutralizarea atât a SvD, SvE, cât și a SvF. Serul din săptămâna 24 a fost folosit pentru test, iar serul din grupul naiv a fost folosit ca martor. Toate cele cinci grupuri vaccinate au arătat o capacitate de a neutraliza toate cele trei serovare (Figura 4). Împotriva SvD, grupul CTH522/AlOH plus IN a prezentat cel mai mare titru de neutralizare de 50%, în timp ce împotriva SvE grupul ADN/CTH522, urmat îndeaproape de grupul CTH522/AlOH plus IN, a arătat cele mai mari titruri de neutralizare. Chiar dacă toate grupurile au reușit să neutralizeze SvF, titrurile de neutralizare de 50% au fost ușor mai mici pentru toate grupurile împotriva acestui serovar, în comparație cu SvD și SvE. Vectorii plus grupul CTH522 au prezentat cele mai mici titruri de neutralizare de 50% dintre toate grupurile vaccinate.
Regimuri de vaccinare diferite au indus profiluri distincte de celule T
Pentru a evalua răspunsurile celulelor T induse de vaccinare, PBMC au fost colectate în timpul perioadei de studiu și crioconservate. PBMC din săptămâna 0/linie de bază și din săptămâna 22 au fost restimulate cu pool-uri de peptide (MOMP) și evaluate pentru citokine intracelulare prin colorare intracelulară cu citokine (ICS) și citometrie colegială. PBMC-urile au fost colorate pentru următorii markeri celulari: CD3, CD4, CD8, CD154, CD137 și citokine: IFN-g, IL-2, TNF-a, IL-22, IL{{14} }A. Strategia de pornire este prezentată în figurile suplimentare 4, 5. Stimularea PBMC-urilor cu grupul de peptide MOMP a indus un răspuns semnificativ. Procentul de celule CD154 specifice antigenului plus CD4 plus celule T care exprimă combinații de IL2, IFN-g și TNF-a a crescut la 2 săptămâni după ultima imunizare (W22) în toate grupurile vaccinate (Figura 5). Majoritatea acestor celule T au fost multifuncționale în sensul că au exprimat mai multe citokine. Procentul de celule T CD137 plus CD8 specifice antigenului care produc citokine a fost crescut doar în grupul ADN și Vector (W22), (Figura 6, care arată multifuncționalitatea celulelor CD137 plus CD8 plus). În
FIGURA 3 Maparea epitopului seric în săptămâna 24. Macacii Cynomolgus au fost imunizați urmând diferite regimuri de prime-boost (n=5 per grup) și serul a fost colectat în săptămâna 24. Răspunsurile IgG ale matricei de peptide la CTH522 15mer se suprapun peptidele sunt prezentate ca semnal median pentru fiecare grup cu peptide VD1 (portocaliu), VD2 (verde), VD3 (albastru) și VD4 din SvD, E, F și G (roșu) evidențiate în culori.
FIGURA 4 Neutralizarea serică in vitro a C. trachomatis SvD, SvE și SvF. Macacii Cynomolgus au fost imunizați urmând diferite regimuri de prime-boost (n=5 per grup) și serul a fost colectat după terminarea programului de imunizare (săptămâna 24). C. trachomatis SvD, SvE și SvF au fost incubate cu ser de la fiecare animal și capacitatea anticorpilor serici de a inhiba infecția a fost evaluată prin incubarea amestecului anticorp-bacterii pe celule HaK și colorarea pentru incluziuni. Linia neagră arată SvD, linia gri arată SvE și linia punctată gri închis arată SvF. Linia roșie punctată indică titrul de neutralizare reciproc de 50% al fiecărui serovar.
FIGURA 5 Răspunsurile celulelor T CD4. Analize multifuncționale săptămâna 22. Producția de citokine de către celulele CD4 plus T testate de ICS. Sunt reprezentate răspunsuri multifuncționale după stimularea cu grupuri de peptide suprapuse din MOMP. Mărimea fiecărei plăcinte este proporțională cu procentul de celule CD154 plus CD4 plus T care exprimă cel puțin o citokină, inclusiv IFN-g, TNF-a și IL-2 și proporțiile de celule care exprimă IFN-g și /sau citokinele TNF-a și/sau IL-2 sunt afișate în fiecare plăcintă.
Eliminarea accelerată indusă de vaccinare a unei infecții vaginale cu C. trachomatis SvD
Pentru a evalua eficacitatea protectoare a răspunsurilor imune induse de vaccin, animalele au fost provocate cu o infecție vaginală cu 5x107 IFUs C. trachomatis SvD. După inoculare, încărcarea vaginală cu chlamydia a fost determinată prin detectarea PCR a ADN-ului chlamydia în tampoane vaginale (Figura 7). Infecția a fost eliminată la toate animalele până în săptămâna 5 în grupul ADN plus CTH522/CAF01 și în grupul Vector plus CTH522, până în săptămâna 6 în grupul CAF01/CTH522 și până în săptămâna 8 în grupul CTH522/Alum plus IN grup (Figura 7). În grupul de control, în săptămâna 8, 80% dintre animale au eliminat infecția și 1 animal a rămas pozitiv pentru PCR în săptămâna 9. Rapelul IN din grupul CTH522/CAF01 plus IN nu a crescut protecția (Figura 7). Un test Log-rank (Mantel-Cox), comparând toate grupurile, a arătat o valoare P de 0,0994 și, comparând fiecare dintre grupuri în mod individual cu grupurile de control, numai grupul DNA-CTH522 a arătat o valoare P sub 0,05 (P valoare=0.0257).
Discuţie
Prezentul studiu a fost conceput pentru a induce imunitatea celulară (CD4 și CD8) combinată cu imunitatea umorală și pentru a adapta fenotipul imunității adaptive cu vaccinurile Chlamydia pe bază de MOMP. Evaluăm imunogenitatea și eficacitatea protectoare a strategiilor combinate de imunizare cu mai multe componente atât cu vaccinuri proteice (CTH522, Con E), vaccin ADN și vector viral recombinat (MVA MOMP), cât și vaccinuri pe bază de vector adeno, la o primată non-umană ( modelul NHP).
Datele au arătat că toate regimurile de imunizare au fost imunogene și au indus atât un răspuns celular, cât și unul umoral constând din anticorpi neutralizanți (Figurile 2-4). Vaccinul proteic CTH522 formulat fie cu CAF01, fie cu AlOH a arătat o inducere rapidă a IgG specifică antigenului sistemic (Figura 2). Nu am observat diferențe semnificative între răspunsurile induse de vaccinurile cu adjuvant cu AlOH și CAF01, ceea ce este în acord cu răspunsurile observate la oameni cu acești adjuvanți (16). Regimurile de vaccinare cu ADN și vector au indus, de asemenea, titruri semnificative de anticorpi sistemici specifici antigenului, care au crescut semnificativ în urma imunizării de rapel proteic (Figura 2). În acord cu rezultatele noastre, un studiu anterior pe șoareci a arătat, de asemenea, că regimurile de vaccinare cu proteine au indus niveluri mai mari de anticorpi specifici antigenului în comparație cu ADN și antigenele vaccinului vector și, de asemenea, au sporit eficient titrurile pentru aceste grupuri (15).
MOMP conține patru VD-uri care sunt expuse la suprafața formei infecțioase a Ct Aceste regiuni sunt ținta principală a imunității dependente de anticorpi, atât prin anticorpi neutralizanți, cât și prin imunitatea mediată de receptorul Fc (18). Studiile anterioare au arătat că transferul adoptiv de ser neutralizant indus de vaccin a redus semnificativ excreția bacteriană timpurie în urma unei infecții cu C. trachomatis (6, 11, 19-21). Astfel, anticorpii par să joace un rol în neutralizarea/controlul inoculului inițial, probabil în cooperare cu imunitatea celulară. Prin maparea detaliată a epitopului celulei B, am găsit recunoașterea regiunilor VD 1, 3, 4 în toate grupurile de vaccin. Grupurile ADN și vector au recunoscut, de asemenea, regiunile VD1, 3 și 4. Cu toate acestea, aceste grupuri au arătat o recunoaștere puțin mai restrânsă în cadrul acestor VD în comparație cu grupurile CAF01 și AlOH, reflectând probabil faptul că antigenul Con E din grupurile de vector nu conține regiunea VD4 a SvF și G (Figura 3). Recunoașterea regiunii VD4 a fost corelată cu capacitatea tuturor strategiilor de vaccin de a induce anticorpi neutralizanți împotriva SvD, SvE și SvF.
Imunizarea parenterală cu CTH522 în CAF01 și AlOH a indus niveluri semnificative de anticorpi mucoși (IgG) în tractul genital și ochi și niveluri corelate cu titrurile serice (Figura suplimentară 3, săptămâna 18). Numai vaccinurile cu ADN și vector nu au indus IgG mucoasei, ceea ce reflectă titrurile serice mai mici în comparație cu proteinele singure. Cu toate acestea, în urma rapelului IM CTH522/CAF01, aceste grupuri cresc semnificativ în Ab seric. nivelurile și ale IgG atât vaginale, cât și oculare, la egalitate cu proteina singură (Figura suplimentară 3, săptămâna 18). Evaluarea paralelă a CTH522 în diferitele sisteme adjuvante de amorsare (AlOH și CAF01) urmată de stimularea intranazală de două ori cu antigen nu a avut niciun efect de stimulare asupra nivelurilor de anticorpi mucoși (Figura suplimentară 3, săptămâna 22). Astfel, nivelurile globale de IgG serice se reflectă asupra mucoasei pentru toate grupurile. Un studiu recent de fază I pe om a evaluat, de asemenea, evaluarea paralelă a CTH522 în AlOH și CAF01, urmată de stimularea intranazală de două ori. Aici titrurile IgG ale mucoasei s-au corelat bine cu concentrațiile serice de IgG (16). Cu toate acestea, spre deosebire de constatările din modelul NHP, studiul uman a arătat efectul creșterii IN în grupul CAF01, ducând la niveluri crescute atât de IgG, cât și de IgA. Din păcate, evaluarea IgA nu a fost posibilă în studiul curent, din cauza materialului limitat și a semnalelor fals pozitive rezultate dintr-un anticorp secundar cu reacție încrucișată utilizat în test. Ambele studii au folosit dispozitivul VaxINator, care este conceput pentru a atomiza medicamentele nazale pentru adsorbția mucoasei. Cu toate acestea, cavitatea nazală a oamenilor este mult mai spațioasă decât în NHP și s-ar putea specula că acest lucru ar putea influența distribuția și absorbția uniformă a antigenului.
Mai multe studii atât la oameni, cât și la rozătoare au demonstrat importanța imunității celulelor T Th1 și a citokinei efectoare IFN-g (8, 22-27). În schimb, se știe mai puțin despre rolul protector al celulelor T CD8 (28-33). Toate grupurile de vaccin au indus celule T CD4, dar numai grupurile ADN și Vector au prezentat un răspuns de celule T CD8 (Figurile 6 și 7). Pe baza citokinelor măsurate, celulele T CD8 au fost compuse dintr-un număr limitat de subseturi în comparație cu celulele T CD4, care ar putea fi împărțite în 6 sau mai multe subseturi, majoritatea producând mai multe citokine (Figura 7). Celulele T CD4 au prezentat mai multe subseturi care exprimă IL-2-decat celulele T CD8, care au inclus în principal doar un subset care exprimă IL-2-, cel care exprima IL-2 împreună cu IFN-g și TNF- a (Figura 6). Celulele T CD8 au fost dominate de o populație mare care produce numai IFN-g, în timp ce celălalt subset de celule T CD8 dominante a produs atât IFN-g, cât și TNF-a. Acest model de citokine printre celulele T CD4 și celulele T CD8 nu este diferit de ceea ce a fost observat la șoareci, atunci când se testează strategiile de vaccin capabile să induce atât celulele T CD4, cât și CD8 (34).
O strategie similară care implică vaccinarea ADN urmată de stimularea cu complexe imunostimulatoare (ISCOM) a proteinei MOMP (35) a indus o protecție puternică împotriva infecției pulmonare cu Chlamydia muridarum. În acel studiu, DNA MOMP (sau MOMP/ISCOMS) a indus o protecție semnificativ mai mică (35). Un alt studiu a arătat că vaccinarea șoarecilor cu plasmide ADN MOMP, fără un vaccin subunitate, nu a reușit să protejeze împotriva unei provocări genitale cu C. trachomatis (36), indicând că strategia ADN-ului beneficiază de a fi suplimentată cu un vaccin subunitar care induce celule T CD4 și anticorpi. . Trebuie remarcat faptul că vaccinurile ADN au arătat profiluri de imunogenitate relativ scăzute în studiile clinice pe oameni, care ar putea trebui abordate în studiile viitoare (37).
Deși doza de infecție cu Ct utilizată în acest studiu este mai mare decât doza experimentată de infecția naturală la oameni, a fost selectată pentru a se asigura că toate animalele au fost infectate, ceea ce este important având în vedere numărul mic de animale din fiecare grup. Doza este în conformitate cu doza utilizată în studiile anterioare, care a variat de la 106 la 108 (38, 39). Scăderea dozei în modelul nostru a condus la o variație crescută în ceea ce privește preluarea infecției (datele nu sunt afișate). Au fost de asemenea utilizate doze mai mici administrate în mod repetat (40, 41). Cu toate acestea, acesta nu este un protocol optim atunci când obiectivul este testarea eficienței de protecție a vaccinurilor, mai ales dacă imunitatea naturală mediază protecția înainte ca protocolul de infecție să fi fost finalizat. Se poate specula că utilizarea unei doze mari poate necesita un răspuns imun care conține toate brațele sistemului imunitar, cum ar fi celulele T CD4 specifice antigenului, celulele T CD8, precum și anticorpii neutralizanți, pentru a putea reduce nivelul bacterian. niveluri. Acest lucru ar explica, de asemenea, de ce anticorpii de neutralizare induși în toate grupurile nu au condus la o protecție semnificativă în toate grupurile [deși am observat o tendință de protecție timpurie în majoritatea grupurilor, unde se crede că anticorpii joacă un rol (Figura 7)] . În prezent, încercăm să dezvoltăm un model mai relevant din punct de vedere fizic.
Luate împreună, datele noastre au arătat că antigenul CTH522 formulat în adjuvantul CAF01 sau AlOH poate induce atât celule T multifuncționale, cât și anticorpi neutralizanți în NHP. Mai mult decât atât, rezultatele noastre au sugerat că o strategie de vaccin heterolog constând dintr-un vaccin ADN și un vaccin subunității CTH522/CAF01 reprezintă o strategie promițătoare de vaccin pentru inducerea unui răspuns imun cu mai multe fațete, cu un nivel ridicat de neutralizare Abs combinat cu răspunsuri puternice ale celulelor T CD4 și CD8 care poate accelera în mod semnificativ eliminarea unei infecții cu C. trachomatis.
Cere mai mult:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel: plus 86 15292862950
Wecistanche Magazin
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
