Nanopurtători niosomali pentru livrarea îmbunătățită a pielii de quercetină cu funcții de anti-tirozinază și antioxidant

Abstract:

Acest studiu și-a propus să selecteze un flavonoid eficient cu capacități promițătoare de albire și antioxidante și să proiecteze niozomi încărcați cu flavonoizi pentru a-și îmbunătăți solubilitatea, stabilitatea și penetrarea. Au fost efectuate experimente in vitro de captare a radicalilor liberi cu antitirozinaza și 1,1-difenil{-2-picrilhidrazil (DPPH) pentru a investiga capacitățile de albire și antioxidante ale mai multor flavonoide, inclusiv quercetină, morin, festin, miricetin, rutina și breviscapină.

Conductivitatea, vâscozitatea și dimensiunea particulelor formulării bazate pe Span{{{0}}RH{40-a veziculelor de surfactant neionic (niozomi) cu diferite rapoarte de masă au fost studiate pentru a determina cea mai potrivită formulare. Niozomii încărcați cu medicamente au fost caracterizați pentru dimensiune, potențial zeta, morfologie și eficiență de captare. De asemenea, au fost studiate fotostabilitatea, solubilitatea, comportamentul de eliberare, penetrarea ex vivo a medicamentului și retenția pielii. Rezultatele au arătat că quercetina are capacități considerabile de albire și antioxidante, iar Span60-RH40 la un raport de masă de 9:11 formează niozomi sferici sau ovali de 97,6 ± 3,1 nm cu un interval potențial zeta de 31,1 ± 0,9 mV și medicament eficiență de captare până la 87,3 ± 1,6 la sută. Niosomii au îmbunătățit remarcabil solubilitatea și fotostabilitatea quercetinei.

În plus, comparativ cu soluția de quercetină, lipozomii de quercetină au avut avantajele unei eliberări susținute și o penetrare transdermică îmbunătățită, cu retenție a pielii de 2,95 ori mai mare decât soluția de quercetină.

Un antioxidant este orice substanță care poate inhiba eficient reacția de oxidare a radicalilor liberi la concentrații scăzute. Mecanismul său de acțiune poate fi să acționeze direct asupra radicalilor liberi, sau să consume indirect substanțe care sunt ușor de generat radicali liberi pentru a preveni reacțiile ulterioare. În timp ce corpul uman produce inevitabil radicali liberi, el produce în mod natural și substanțe antioxidante care rezistă radicalilor liberi pentru a contracara atacurile oxidative ale radicalilor liberi asupra celulelor umane. Studiile au demonstrat că sistemul antioxidant al corpului uman este un sistem cu funcții complete și complexe comparabile cu sistemul imunitar. Cu cât capacitatea antioxidantă a organismului este mai puternică, cu atât este mai sănătos și cu atât durata de viață este mai lungă. În cercetările noastre, am descoperit că Cistanche deserticola are și un efect antioxidant. Cistanche deserticola este bogată în polizaharide, flavonoide, alcaloizi, glicozide flavonoide, acizi flavoni și alte componente, iar aceste substanțe au efecte antioxidante puternice. Ele pot rezista stresului oxidativ și pot reduce deteriorarea celulelor prin captarea radicalilor liberi, reducerea reacțiilor de oxidare și creșterea activității enzimelor antioxidante, jucând astfel un rol antioxidant.

Click cistanche deserticola supliment produs

Cuvinte cheie:

anti-tirozinaza; antioxidant; niozomi; fotostabilitate; livrare transdermică.

1. Introducere

Flavonoidele sunt larg distribuite în fructe, legume și ierburi și au activități biologice extinse, inclusiv antivirale, antiinflamatorii, anticancerigene, antioxidante și antitirozinaze [1,2]. Recent, căutarea unui nou inhibitor sigur de tirozinază a primit multă atenție în domeniul cosmeticelor, deoarece unii dintre inhibitorii cunoscuți, cum ar fi acidul kojic, hidrochinona și corticosteroizii, pot declanșa probleme de sănătate, cum ar fi dermatita și iritația pielii. , ocronoză, citotoxicitate și cancer de piele [3]. Datorită toxicității lor scăzute și activităților lor antioxidante și anti-tirozinaze considerabile, flavonoidele au atras un mare interes ca potențiali agenți naturali de albire și antioxidanți pentru utilizare în produsele de îngrijire a pielii [4-6].

Cu toate acestea, flavonoidele au multe structuri diferite, inclusiv configurații diferite cu același nucleu mamă, dar încă nu este clar ce tipuri de structuri posedă atât capacități puternice anti-tirozinaze, cât și antioxidante. În plus, majoritatea flavonoidelor au solubilitate și liposolubilitate slabe în apă, iar lipofilitatea moderată și greutatea moleculară scăzută sunt factori cunoscuți pentru a promova o mai bună penetrare. Un alt factor semnificativ care influențează eficacitatea componentelor este barierele biologice ale pielii în sine, cum ar fi stratul cornos. Deși metodele fizico-chimice, inclusiv iontoforeza, ultrasunetele, microneedle, sistemele de injectare fără ace și potențiatorii de penetrare, pot promova pătrunderea ingredientelor active prin stratul cornos, aceste metode pot fi invazive, irita pielea și sunt costisitoare.

Pe de altă parte, au apărut unele noi sisteme de eliberare a ingredientelor active mediate de purtători, incluzând emulsie, micele, vezicule și ciclodextrină, pentru a îmbunătăți eficacitatea ingredientelor existente, în special a celor cu solubilitate și biodisponibilitate slabe. Veziculele au primit mai multă atenție pentru livrarea transdermică. Printre vezicule, transferzomii sunt lipozomi bine deformabili cu permeabilitate percutanată îmbunătățită și pot îmbunătăți solubilitatea și stabilitatea medicamentului. Transferzomii sunt alcătuiți dintr-un raport specific de fosfolipide și agenți tensioactivi, în timp ce fosfolipidele sunt scumpe și ușor de oxidat.

Prin urmare, căutarea altor vezicule stabile și înlocuibile este un obiect de cercetare interesant. Niozomii sunt sisteme veziculare cu surfactanți neionici, raportate pentru prima dată în 1979 când sunt aplicate în industria cosmetică [7], dar de atunci au fost studiate ca sistem de administrare a medicamentelor în farmaceutică [8-13]. Proprietățile fizice, tehnicile de preparare și structurile niozomilor sunt foarte asemănătoare cu cele ale lipozomilor. Cu toate acestea, niosomii au, de asemenea, avantaje în administrarea transdermică a medicamentelor, cum ar fi eliberarea susținută a medicamentului, o penetrare mai bună și o retenție mai mare a pielii [14], sunt mai puțin costisitoare de preparat și sunt mai stabile [15]. Prin urmare, niosomii pot fi aplicați în industria cosmetică [16–18].

Veziculele timpurii de surfactant au fost preparate folosind surfactanți ionici [19–22]. Studiile cuprinzătoare de toxicitate asupra agenților tensioactivi au indicat că surfactanții cationici sunt cei mai toxici, urmați de agenții tensioactivi anionici, în timp ce agenții tensioactivi neionici sunt cei mai puțin toxici. Prin urmare, luând în considerare siguranța și aplicarea industrială, utilizarea lipozomilor care cuprind agenți tensioactivi neionici este o opțiune mai bună pentru livrarea transdermică. Datorită structurii straturilor duble amfifile, un interval de scară de echilibru hidrofil-lipofil (HLB) de la 4 la 8 va fi mai ușor de format niozomi din [14,23,24].

Prin urmare, agenții tensioactivi formulați, neionici, cu diferite valori HLB, vor fi mai ușori pentru formarea niozomilor. Span, Tween și Brij sunt agenți tensioactivi neionici obișnuiți utilizați pentru prepararea lipozomilor [15,25–34]. Agenții tensioactivi neionici cu lanțuri lungi de hidrocarburi fără legături duble sunt candidați eligibili deoarece se pot forma niozomi stabili cu potențialul de încărcare crescută a medicamentului. Span60, cu o valoare HLB scăzută, a fost utilizat pe scară largă pentru a forma niozomi [15,29,31,33,34]. Agenții tensioactivi neionici cu valori ridicate de HLB, cum ar fi Tween20, Tween60, Tween80, Brij35 și Brij58, nu formează ușor niozomi singuri sau fără o cantitate optimă de colesterol [28,35,36], din cauza hidrofilului lor voluminos. capete și lanțuri scurte de hidrocarburi. Prin urmare, ei sunt capabili să formeze niozomi numai cu adăugarea de colesterol sau atunci când sunt formulați cu alți agenți tensioactivi [10,27,31,37–39]. Cremophor RH40 este foarte hidrofil și are toxicitate scăzută și este utilizat pe scară largă în formulările de medicamente orale, dar nicio raportare nu a indicat utilizarea Cremophor RH40 în formularea lipozomilor.

În acest studiu, am analizat flavonoidele cu efecte bune de albire și antioxidante și am investigat Span60-RH40, un sistem de surfactant neionic cu diferite proporții de lipide pentru a forma niozomi. Niozomii încărcați cu quercetină au fost caracterizați pentru dimensiunea veziculelor, potențialul zeta, eficiența încapsulării și microscopia electronică de transmisie (TEM), iar solubilitatea și fotostabilitatea lor au fost, de asemenea, investigate. În plus, șobolanii au fost utilizați pentru a investiga penetrarea transdermică a niozomilor încărcați cu quercetină.

2. Rezultate

2.1. Inhibarea tirozinazei a flavonoidelor

Este bine cunoscut faptul că flavonoidele posedă mai multe grupări hidroxil (Figura 1) care sunt importante pentru activitatea anti-tirozinazei. Se raportează că numărul și poziția grupărilor hidroxil, precum și prezența fragmentelor de zahăr sunt legate de inhibarea tirozinazei. În tabelul 1, Myricetin nu a arătat activitate anti-tirozinază, deoarece formează cu ușurință legături puternice de hidrogen intermoleculare care pot împiedica chelarea cu tirozinaza. Rutina și breviscapina nu au prezentat activitate anti-tirozinazică promițătoare, în timp ce quercetina, morinul și festinul au prezentat o activitate anti-tirozinază considerabil mai mare decât arbutina, care este un agent de albire comun utilizat în produse cosmetice.

2.2. Activitatea antioxidantă a flavonoidelor

Flavonoids can scavenge free radicals as antioxidants by donating a hydrogen atom. The antioxidant activity of flavonoids is related to the number of hydroxyl groups and their structure. This includes (i) the presence of an ortho-hydroxyl group in the B ring; (ii) the presence of a C2-C3 double bond in the C ring; (iii) or the presence of a C-3 hydroxyl group [40–42]. As shown in Table 2, the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity of the six compounds is in the following order: quercetin = fest in>myricetin=morin > rutina > BHT ≈ breviscapină. Quercetina și festinul au avut cea mai puternică capacitate de captare a radicalilor.

2.3. Formularea niosomilor

2.3.1. Conductibilitatea sistemului Span60-RH40

Transferzomii sunt instabili deoarece sunt alcătuiți în principal din fosfolipide care pot fi oxidate cu ușurință, provocând scurgeri de medicamente. Niozomii au fost identificați ca o alternativă pentru transferzomi în livrarea transdermică. Deși mulți agenți tensioactivi neionici pot forma niozomi [15,26,28], agenții tensioactivi neionici cu lanțuri de hidrocarburi nesaturate sunt mai puțin stabili decât agenții tensioactivi neionici cu lanțuri de hidrocarburi saturate [37]. Prin urmare, în acest studiu, am ales Span60 și RH40, ambele nu posedă legături duble, pentru a forma niozomi pentru a le îmbunătăți stabilitatea.

Au fost efectuate măsurători de conductivitate pentru a determina comportamentul de agregare a agenților tensioactivi neionici într-o soluție apoasă. Conductivitatea lui Span60-RH40 dispersat în apă a crescut treptat de la un raport de masă de 4:16 la 9:11, apoi a scăzut între rapoartele de masă de 9:11 la 13:7 și a scăzut de la 13:7 la 16 :4 (Figura 2a). Două puncte de întrerupere pot sugera modificări în microstructura agregatelor. După cum se arată în Figura 3, la raportul de masă de 9:11, au început să se formeze niozomi.

2.3.2. Dimensiunea sistemului Span60-RH40

Dimensiunea particulelor este indicele important al evaluării particulelor nanometrice. Măsurarea dimensiunii sistemului Span60-RH40 cu diferite rapoarte de masă ale surfactantului ar putea reflecta și mai mult modificarea microstructurii agregatelor din sistem. După cum se arată în Figura 2b, inițial, dimensiunea agregatului a fost relativ mică și constantă la raportul de masă de 4:16 la 9:11. Ulterior, dimensiunea agregatului a crescut foarte mult la raportul de masă de 9:11 până la 13:7 și apoi a crescut continuu brusc la raportul de masă de 13:7 la 16:4, care a fost chiar până la ~1 µm. Tranziția structurală spontană a agregatelor Span60/RH40 a fost confirmată în continuare de mărimea agregatului combinată cu conductivitatea și vâscozitatea.

2.3.3. Vâscozitatea sistemului Span60-RH40

Vâscozitatea sistemului Span60-RH40 prezentat în Figura 2c a prezentat modificări corespunzătoare. În primul rând, vâscozitatea sistemului Span60-RH40 a fost scăzută și constantă la raportul de masă de 4:16 la 9:11. Apoi, la raportul de masă de 9:11 la 13:7, vâscozitatea s-a schimbat semnificativ, vâscozitatea crescând și apoi scăzând. Conductivitatea și dimensiunea discutate mai sus au apărut, de asemenea, corespunzând cu modificări la acest interval de raport de masă al Span60-RH40. Ulterior, la raportul de masă de 13:7 până la 16:4, vâscozitatea a crescut brusc.

2.4. Dimensiunea, potențialul zeta, morfologia și eficiența de captare a quercetinei-niozomilor

Quercetina a fost încărcată de niozomi Span60-RH40 și apoi omogenizată cu 1500 bar. După cum se arată în Tabelul 3, diametrul hidrodinamic al niozomilor martor și al quercetin-lipozomilor a fost de 146,4 ± 5,4 nm și, respectiv, 97,6 ± 3,1 nm.

Potențialul zeta a fost studiat pentru a înțelege sarcinile de suprafață ale niozomilor. Potențialul zeta al niozomilor martor și al Quercetin-niozomilor a fost de -41,2 ± 0,6 mV și, respectiv, -31,1 ± 0,9 mV (Tabelul 3). Imaginea TEM din Figura 4b a arătat că quercetin-niozomii erau sferici sau ovali. Eficiența de captare a quercetinei-lipozomilor a fost de 87,3 ± 1,6 la sută, ceea ce a fost mai mare decât cele din intervalul de la 48,4 la 78,4 la sută în lucrările anterioare [37,43,44]. Eficiența crescută a captării medicamentelor poate fi atribuită afinității dintre medicamente și straturile duble ale niozomilor [45].

2.5. Solubilitatea în apă și solubilitatea în echilibru a quercetinei

După cum se arată în Figura 5, solubilitatea quercetinei în apă a fost extrem de scăzută. Solubilitatea sa nu a avut nicio diferență semnificativă (P > 0.05) în tamponul fosfat cu pH diferit în comparație cu cel din apă. Rezultatul solubilității de echilibru a quercetinei a arătat că quercetina este o componentă foarte liposolubilă. După cum se vede în figurile 6 și 7, solubilitatea la echilibru a quercetinei a rămas stabilă în diferite rapoarte apă/n-octanol, dar a scăzut la pH 8,0 deoarece structura quercetinei s-a schimbat în condiții de bază, determinând o creștere a solubilității în apă.

Cu toate acestea, solubilitatea slabă în apă a quercetinei a fost limitată la aplicarea acesteia. Pe baza tabelului 4, solubilitatea quercetinei s-a îmbunătățit în agenții tensioactivi discutați mai jos, în special în 0,6 procente Tween80 (P <0,05). Cu toate acestea, solubilitatea sa a fost îmbunătățită în continuare prin încărcarea lui în niozomi. Quercetina (300 µg/mL) a fost încărcată în niozomi, iar încapsularea mare a zgomotoasă Span60-RH40 a fost de 87,3 ± 1,6 la sută, prin urmare, solubilitatea quercetinei în niozomi a fost de 261,9 ± 4,8 µg/mL, ceea ce a fost {{ 17}}ori mai mare decât cea din apă (P < 0,05).

2.6. Fotostabilitatea Quercetin-Niosoms

Quercetina are o fotostabilitate slabă și se degradează rapid sub expunerea la lumina soarelui sau la iradierea UV [46–48], posibil pentru că quercetina suferă fotooxidare la iradierea UV [49]. Cu toate acestea, fotostabilitatea este necesară pentru ca quercetina să-și arate activitățile. După cum se arată în Figura 8, niosomii au îmbunătățit în mod eficient fotostabilitatea Quercetinei și au rămas la 88,06% după 10 zile de expunere la iluminare puternică. Quercetina a fost protejată de iradierea UV deoarece a fost încapsulată în straturile duble ale niozomilor. Molecule 2019, 24, x PENTRU EXAMINARE DE PARTEA 8 din 18 de expunere la iluminare puternică. Quercetina a fost protejată de iradierea UV deoarece a fost încapsulată în straturile duble ale niozomilor.

2.7. Comportamentul de eliberare in vitro al Quercetin-Niosomes

Mediul de eliberare adecvat a fost verificat pentru a menține condițiile de scufundare, prin urmare a fost evaluată solubilitatea quercetinei în diferite medii. Rezultatele din tabelul 5 demonstrează că quercetina a avut o solubilitate mai mare în Tween80 apoasă și solubilitatea sa a crescut treptat odată cu creșterea concentrației de Tween80. Solubilitatea quercetinei a crescut la 76,07 ± 3,11 µg/mL în condiții acide. Prin urmare, având în vedere pH-ul pielii umane, 0,8% Tween80 (pH 5,0) a fost ales ca mediu de eliberare pentru a studia comportamentul de eliberare a quercetinei libere și a quercetinei-niozomilor.

După cum se vede în Figura 9, în comparație cu quercetina-niozomi, quercetina liberă s-a eliberat mult mai rapid în mediul de eliberare, demonstrând că niosomii au avut un efect de eliberare susținută. Eliberarea susținută reduce timpul de aplicare, reduce toxicitatea și menține concentrația eficientă a medicamentului.

2.8. Studii ex vivo de permeație și retenție a pielii

O soluție de {{0}},6 procente Tween80 a fost utilizată ca mediu de eliberare prin penetrare în acest studiu. În studiul nostru de penetrare exvivo, quercetina nu a putut fi determinată în mediul de eliberare prin penetrare, ceea ce a ilustrat că quercetina nu a pătruns în dermă și nu a ajuns în mediul de eliberare, dar niosomii au îmbunătățit remarcabil retenția cutanată a quercetinei (P < 0.{ {20}}5). După cum se arată în Tabelul 6, retenția cutanată a quercetin-niozomilor (1,92 plus 0,74 ug/cm?), quercetin-niozom-1 procente propandiol (2,34 plus 0,40 ug? /cm?), iar transferzomii de quercetină (2,53 plus 0,40 ug/cm-) au fost semnificativ mai mari în comparație cu cei ai Quercetin-propandiol (0,65 plus 0,10 ug/cm2) (P <0,05).

3. Discuție

Studiile anterioare au determinat că gruparea hidroxil liberă din poziția C-3 a jucat un rol important în inhibarea tirozinazei [50–52]. În schimb, 3-O-glicozidele pot împiedica legarea lor la situsurile active ale tirozinazei și poate fi motivul pentru care rutina nu a prezentat activitate anti-tirozinază. În schimb, fragmentul de zahăr situat în poziția C-7 a avut un efect redus asupra activității anti-tirozinazei și nu a blocat chelarea cu tirozinaza [51].

Cu toate acestea, prezența unei grupări hidroxil suplimentare în poziția C-30 a inelului B a crescut inhibarea tirozinazei [53,54]. Breviscapina nu a prezentat activitate anti-tirozinază, deoarece nu avea grupa hidroxil C-3 și gruparea hidroxil C{-30 care ar fi putut avea un efect asupra activității anti-tirozinazei, mai degrabă decât prezența 7- O-glicozide. În analiza relației structură-activitate a quercetinei și a morinei, am observat că valoarea IC50 a morinei este de aproximativ 1/3 din cea a quercetinei și singura diferență dintre structura quercetinei și morinei este poziția grupărilor hidroxil în inelul B.

Prin urmare, prezența grupărilor o-dihidroxil în inelul B a crescut activitatea anti-tirozinazei. Valoarea IC50 a festinului a fost de aproximativ 1/20 cea a quercetinei și singura diferență dintre structura quercetinei și a festinului este că festinul este absența unei grupări C-5 hidroxil în inelul A. Gruparea hidroxil din poziția C-5 joacă, de asemenea, un rol important în creșterea activității de inhibare a tirozinazei, deoarece poate chela Cu2 plus la locul activ al tirozinazei cu un carbonil în poziția C-4 [50]. ]. Quercetina posedă grupări hidroxil libere, nu numai în pozițiile C-3 și C-5 ale inelului C, ci și în poziția C-30 a inelului B. Astfel, quercetina prezintă o inhibare mult mai puternică a tirozinazei în comparație cu celelalte flavonoide.

Flavonoidele nu numai că au activitate anti-tirozinazică promițătoare, dar au și o activitate antioxidantă puternică. Quercetina are o grupare hidroxil C-5 suplimentară; cu toate acestea, atât quercetina, cât și fisetina au avut aceeași capacitate antioxidantă, ceea ce sugerează că gruparea hidroxil C-5 a avut un impact redus asupra captării radicalilor. Miricetina posedă mai multe grupări hidroxil în inelul B, dar nu a prezentat o activitate antioxidantă mai puternică decât quercetina sau fisetina. Acest lucru se poate datora faptului că miricetina poate forma legături de hidrogen intermoleculare puternice și poate reduce donarea de atom de hidrogen.

În mod similar, morin a arătat o capacitate antioxidantă mai mică decât quercetina și festinul din cauza configurației hidroxil inelului B, care a ilustrat că o-dihidroxilul din inelul B este important pentru creșterea capacității de captare a radicalilor. Cu toate acestea, rutina și breviscapina au avut capacități antioxidante semnificativ mai mici, deoarece rutina are glicozide în poziția C-3 producând obstacole sterice. Breviscapina are o singură grupare hidroxil la inelul B și are mai puține grupări hidroxil libere. În consecință, rezultatele din această lucrare indică faptul că configurația hidroxil a inelului B a fost semnificativă pentru capacitatea antioxidantă a flavonoidelor, în timp ce inelul A a avut un impact redus asupra capacității de captare a radicalilor. În plus, blocarea sau îndepărtarea grupării hidroxil în poziția C-3 poate reduce capacitatea de captare a radicalilor a flavonoidelor.

Span60 și RH40 nu sunt capabile de ionizare. Prin urmare, încărcăturile par să provină din interacțiunea dintre grupările cap hidrofile ale Span60 și RH40 formând legături de hidrogen [55], atunci când agregatele încărcate se formează între Span60 lipofil și RH40 hidrofil.

Prin urmare, conductivitatea se poate datora combinației dintre Span60 și RH40. Conductivitatea a crescut inițial, posibil pentru că adăugarea de Span60, care se asociază cu RH40, formează micelii mixte încărcate. Creșterea Span60 a crescut și numărul de agregate încărcate, iar conductivitatea a crescut treptat. Un punct de întrerupere a avut loc la raportul de masă de 9:11. Schimbarea bruscă sugerează că microstructura agregatelor se poate schimba și se pot forma niozomi. Ulterior, conductivitatea a scăzut ușor și a rămas relativ constantă, ceea ce poate indica formarea niozomilor, deoarece sarcinile au fost închise. Un alt punct de întrerupere a avut loc la raportul de masă de 13:7 și conductivitatea a scăzut drastic, cu toate acestea, dimensiunea agregatelor a crescut odată cu creșterea Span60, posibil din cauza grupărilor dense de niozomi multilamelari mai mari care se formează și apariției precipitatului alb [56]. ,57], determinând scăderea agregatelor cu taxe gratuite.

Tranziția structurală spontană a agregatelor Span60-RH40 a fost confirmată în continuare de dimensiunea agregatului combinată cu conductivitate și vâscozitate. Când fracția de masă a RH40 a fost dominantă, dimensiunea agregatului a fost relativ constantă și mică. Sistemul avea o vâscozitate asemănătoare apei și se pot forma micelii mixte. Cu o fracție de masă în creștere a Span60, hidrofobicitatea sistemului a crescut, iar vâscozitatea și dimensiunea agregatului au crescut. Creșterea Span60 poate induce formarea de niozomi. Cu toate acestea, odată cu o creștere suplimentară a Span60, vâscozitatea și dimensiunea au crescut, de asemenea, brusc datorită existenței unor niozomi multilamelari abundenți mai mari, care au cauzat formarea de precipitate. Formarea niozomilor a fost verificată și prin TEM (Figura 3).

Când concentrația de Span60 a fost scăzută, sistemul Span60-RH40 a avut o vâscozitate asemănătoare apei, iar dimensiunea agregatului a fost relativ mică, ceea ce indică formarea de micelii mixte. De la raportul de masă de 9:11 la 13:7, vâscozitatea și turbiditatea sistemului au crescut simultan. Modificarea evidentă a vâscozității poate fi legată de tranziția micelului la un zgomotos rigid și vâscos, deoarece agenții tensioactivi sunt strâns împachetati și se formează straturi duble; această observație a fost în concordanță cu literatura de specialitate [57,58]. Între rapoartele de masă de 13:7 și 16:4, vâscozitatea a crescut semnificativ, posibil din cauza existenței unor niozomi multilamelari abundenți mai mari care determină formarea de precipitate.

În mod interesant, quercetin-niozomii aveau dimensiuni mai mici decât niosomii martor, ceea ce a fost prin studii publicate anterior [43]. S-a ilustrat că, dacă moleculele care prezintă o bună afinitate cu agenții tensioactivi constituenți ai niozomilor ar fi încorporate în straturile duble, ar provoca o reducere a dimensiunii veziculelor. Această observație se poate datora efectului unei afinități puternice pentru medicamente și niozomi asupra menținerii diferitelor lamele împreună, făcând membrana mai rigidă [14]. Valoarea absolută a potențialului zeta pentru quercetin-lipozomi a fost mai mică decât cea a lipozomilor gol (Tabelul 3). Acest lucru se poate datora interacțiunii quercetinei cu grupul principal de surfactanți care neutralizează sarcinile negative de pe suprafața niosomilor. Această observație a fost raportată și anterior; că medicamentele ar putea reduce sarcinile negative de suprafață [59].

Am stabilit că quercetina este insolubilă în apă și tampon fosfat. În studiile anterioare, pentru a menține o stare de absorbție a medicamentelor slab solubile într-un mediu de eliberare prin penetrare, cosolvenții, inclusiv alcooli și agenți tensioactivi, sunt adesea utilizați [14], prin urmare, o soluție Tween80 de 0,6 la sută a fost utilizată ca soluție. mediu de eliberare prin penetrare pentru a menține starea chiuvetei.

Totuși, având în vedere eficacitatea, pentru îngrijirea pielii și tratamentul bolilor de piele, este mai eficient și mai sigur să rețină componentele sau medicamentele adânc în piele decât să intre în circulația sângelui. În studiul nostru, deși quercetina nu a pătruns prin derm în mediu, experimentele de retenție a pielii au arătat că, în comparație cu quercetina liberă, niosomii au îmbunătățit pătrunderea quercetinei în epidermă.

Prin urmare, niozomii pot fi un sistem de livrare promițător pentru scopuri cosmetice și pentru tratamentul bolilor de piele. Quercetina este foarte liposolubilă și solubilitatea sa scăzută în apă a limitat dezvoltarea și aplicarea acesteia. Niosomii încărcați cu quercetină nu numai că au îmbunătățit solubilitatea în apă, ci și absorbția transdermică a quercetinei. Quercetin-niozomii au avut o creștere de 3-ori a retenției pielii față de soluția de quercetină-propandiol. După adăugarea a 1% propandiol, un amplificator de penetrare, în formula originală a niozomilor Span60-RH40, absorbția transdermică sa îmbunătățit, comparabilă cu cea a transferzomilor de quercetină.

4. Materiale și Metode

4.1. Materiale

Quercetina, morin, festin, miricetină, rutina și breviscapina au fost achiziționate de la DATIAN Biology Co (Shanxi, China), -arbutina de la Beijing Brilliance Biochemical Co, Ltd (Beijing, China) și 1,1-difenil{{ 3}}picrylhydrazil (DPPH) de la Guangzhou Qiyun Bio-technology Co (Guangzhou, China). Fosfatul dihidrogen de sodiu, fosfatul acid disodic, dimetilsulfoxidul (DMSO) și alcoolul etilic absolut au fost achiziționate de la DAMAO CHEMICAL REAGENT FACTORY (Tianjin, China). Span60 a fost achiziționat de la Tianjin Kemiou Chemical Reagent Co, Ltd (Tianjin, China) și Cremophor RH40 de la Guangzhou Jiefu Trading Co, Ltd (Guangzhou, China). Au fost utilizați și furnizați șobolani masculi Sprague-Dawley (200 ± 20 g) de către Centrul de experimente pe animale din Guangdong (Guangzhou, China). Șobolanii au fost ținuți în condiții standard de temperatură, umiditate și lumină, cu o dietă standard pentru rozătoare și apă. Cercetarea a fost aprobată de Comitetul de etică experimentală a animalelor de la Universitatea Farmaceutică Guangdong (NR. SPF2017120, Guangzhou, China).

4.2. Activitatea de inhibare a tirozinazei in vitro a flavonoidelor

Testul de inhibare a tirozinazei a fost efectuat pe baza unui studiu anterior cu mici modificări [2]. Activitatea de inhibare a tirozinazei a fost determinată utilizând un spectrofotometru prin monitorizarea formării dopacromului la 493 nm. Sistemul de reacție, așa cum se arată în tabelul 7, conținea 0,5 ml de diferite concentrații de flavonoide, inclusiv arbutină, quercetină, morin, festin, rutina și breviscapină și 0,5 ml tirozinază (120 unități/mL în tampon fosfat, pH 6,8), care au fost combinate cu 1,5 ml de tampon fosfat (pH 6,8). După incubare la 30°C timp de 10 minute, s-au adăugat la sisteme 0,5 ml de l-tirozină. Sistemele de reacție au fost incubate la 30 °C timp de 20 de minute și absorbanța a fost determinată la 493 nm. Arbutina a fost utilizată ca martor pozitiv. Gradul de inhibare al probei a fost exprimat ca o concentrație de inhibare de 50% (IC50).

4.3. Activitatea antioxidantă in vitro a flavonoidelor

Activitatea antioxidantă a flavonoidelor a fost măsurată prin rata de albire a DPPH, raportată de Blois [60]. În forma sa radicală, DPPH se absoarbe la lungimea de undă de 515 nm, dar absorbția sa scade la reducerea cu un antioxidant sau un compus radical. Activitatea de captare a radicalilor DPPH a flavonoidelor a fost evaluată conform metodei descrise de Rui Yang, cu unele modificări [61]. Pe scurt, 5 mL de DPPH (30 µg/mL) au fost amestecați cu 0,1 mL de alcool etilic absolut și 0,1 mL de probe cu diferite concentrații. Apoi, absorbanța amestecurilor a fost determinată la 515 nm. Activitatea de captare a radicalilor DPPH a fost calculată după cum urmează:

4.4. Formularea niosomilor

Pe baza cercetărilor anterioare și a lucrărilor publicate care au arătat că Span60 este un surfactant comun utilizat pentru a forma niozomi [15,27,31], am proiectat un sistem de formulare de agenți tensioactivi neionici utilizând Span60 și RH40 la diferite rapoarte de masă. Conductivitatea, vâscozitatea și dimensiunea ca indici au fost investigate pentru a determina raportul adecvat al agenților tensioactivi neionici care formează lipozomi.

Rapoartele de masă ale Span60 și RH4{0 investigate au fost 4:16, 6:14, 8:12, 9:11, 10:10, 12:8, 13:7, 14:6 , 15:5 și 16:4 (greutate totală: 2 g). Span60 a fost topit la 80 °C și apoi amestecat cu RH40 printr-un agitator timp de 2 min. Apoi, amestecurile au fost hidratate cu 100 ml de apă la 80 ◦ C timp de 10 minute, respectiv. Conductivitatea (DDS-11A conductometru, Shanghai Ridao Scientific Instruments Co., Ltd., Shanghai, China), vâscozitatea (vâscozimetrul Ubbelode, 0,4–0,5 mm, Shanghai Liangjing Glass Instrument Factory, Shanghai, China) și dimensiune (Nano-ZS90, Malvern, Malvern, Marea Britanie) sistemelor de surfactanți neionici au fost măsurate la temperatura camerei.

4.5. Pregătirea și evaluarea niosomilor încărcați cu quercetină

4.5.1. Prepararea niosomilor încărcat cu quercetină

Pe baza imaginii TEM a sistemului Span{{0}}RH40 (Figura 3), Span60 și RH40 la un raport de masă de 9:11, par să se formeze niozomi sferici sau ovali. Prin urmare, niozomii încărcați cu quercetină au fost preparați cu raportul de masă Span60/RH40 de 9:11 folosind un aparat de agitare magnetică. Span60 (0,9 g), RH40 (1,1 g) şi quercetină (30 mg) au fost topite împreună. Apoi, la amestec s-au adăugat 100 ml apă purificată la 80 °C și s-au hidratat timp de 10 minute. Niozomii încărcați cu quercetină au fost formați și apoi s-au răcit la temperatura camerei. Niozomii clari au fost dobândiți prin prelucrare cu omogenizare la presiune înaltă la 1500 bar.

4.5.2. Dimensiunea, potențialul zeta și morfologia niosomilor încărcați cu quercetină

Mărimea și potențialul zeta al niozomilor goli și al niozomilor încărcați cu quercetină au fost măsurate folosind Malvern Zetasizer (ZS90 plus MPT-2, Malvern, Malvern, Marea Britanie). Morfologia niosomilor încărcați cu quercetină a fost caracterizată prin microscopie electronică cu transmisie. Probele de quercetină-niozomi au fost depuse pe o rețea de cupru și după 1 minut, proba în exces a fost îndepărtată cu hârtie de filtru. Un TEM a fost folosit pentru a observa probele după colorarea negativă cu acid fosfotungstic.

4.5.3. Eficiența captării drogurilor

Eficiența de captare a medicamentului a niozomilor încărcați cu quercetină a fost determinată folosind tehnica de centrifugare pe minicoloană. Minicoloana a fost preparată folosind dispersie Sephadex G50 hidratată într-o seringă de 5 ml, care a fost centrifugată timp de 30 s la 900 rpm. O alicotă de niozomi încărcați cu quercetină (400 uL) a fost luată în minicoloană și eluții au fost colectați prin centrifugare la 1500 rpm timp de 3 minute. Eluții au fost diluați la 10 ml cu metanol și agitați în vortex, iar 10 ui din probele filtrate au fost injectați în cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC). Apoi, quercetina liberă a fost eluată prin centrifugare cu 25 ml de metanol 80%, iar conținutul de quercetină a fost determinat prin HPLC.

4.6. Solubilitatea în apă și solubilitatea în echilibru a quercetinei

Solubilitatea în apă a quercetinei a fost măsurată cu 15 ml de apă purificată, tampon fosfat cu diferite valori ale pH-ului (pH 5.0, 6.0, 6.8, 7.4, 8.0) , și excesul de quercetină și introduse în flacoane. Flacoanele au fost agitate timp de 24 de ore într-o baie de apă la 37 °C și supernatantul a fost determinat prin HPLC după centrifugare.

Solubilitatea la echilibru a quercetinei a fost realizată folosind un sistem n-octanol-apă cu rapoarte de n-octanol/apă de 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1: 7 și 1:8. Apoi, s-au preparat 70 µg/mL de soluție de quercetină prin soluție saturată de apă de n-octanol și 1 mL de 70 µg/mL de soluție de quercetină a fost luat în opt flacoane și apoi 1 mL, 2 mL, 3 mL, 4 mL, 5 mL , 6 mL, 7 mL şi 8 mL apă purificată au fost adăugate la flacoanele respective.

Solubilitatea la echilibru a quercetinei în sisteme tampon n-octanol la diferite valori ale pH-ului a fost, de asemenea, studiată. Raportul de n-octanol-tampon a fost ales la 1:2 pe baza rezultatului solubilității de echilibru a quercetinei în sistemul n-octanol-apă. Un volum de 2 mL de 70 µg/mL de soluție de quercetină și 4 mL de soluții tampon de fosfat saturat de n-octanol la diferite valori ale pH-ului au fost adăugate în flacoane, iar flacoanele au fost agitate timp de 24 de ore la 37 ◦ C. baie de apă. Apoi, s-au luat 0,2 mL de soluție de quercetină în stratul de n-octanol și s-au diluat la 5 mL (aproximativ 2,8 pg/mL) utilizând fază mobilă (metanol-1 procente de acid fosforic=60:40). Probele au fost determinate prin HPLC. Soluția standard de quercetină n-octanol (70 pg/mL) a fost diluată și determinată așa cum este descris mai sus.

4.7. Fotostabilitatea Quercetin-Niosoms

Soluție de quercetină metanol (300 µg/mL) a fost adăugată în flacoane transparente și plasată sub lumina soarelui. Apoi, conținutul de quercetină a fost determinat prin HPLC la 0, 12, 24, 36, 48, 60 și 72 de ore. Quercetin-niozomii au fost alicoți în flacoane transparente și plasați în interiorul camerei de testare a stabilității la lumină (PTOP-500B, Zhejiang TOP Instrument Co., Ltd., Zhejiang, China) cu o iluminare de 4500 ± 500 LX timp de 10 zile. O probă de 0,2 g de quercetină-lipozomi a fost extrasă în zilele 0, 5 și 10 și dizolvată în 10 ml etanol. Probele au fost determinate prin HPLC după centrifugare și filtrare cu o membrană de filtru Millipore de 0,22 um. Fotostabilitatea a fost evaluată prin procentul de quercetină rămasă la diferiți timpi de iradiere, comparativ cu probele neexpuse.

4.8. Studiu de lansare in vitro

4.8.1. Solubilitatea quercetinei în mediu de eliberare diferit

Solubilitatea quercetinei a fost investigată în diferite medii de eliberare, inclusiv {{0}},1 la sută, 0,2 la sută, 0,3 la sută, 0,4 la sută la sută , {{10}},6 la sută și 0,8 la sută soluție apoasă Tween8{0, precum și 0,2 la sută , 0,4 la sută și 0,6% soluție apoasă SDS. O soluție apoasă de 15 ml de Tween80 și SDS la diferite concentrații și exces de quercetină au fost plasate în fiecare dintre fiole. Flacoanele au fost agitate într-o baie de apă la 32 ◦ C timp de 24 de ore. După 24 de ore, 5 mL suspensie au fost centrifugate la 3000 RMP timp de 15 min și 0,2 mL de supernatant au fost diluați la 2 mL și determinate utilizând HPLC.

4.8.2. Eliberarea de medicamente prin dializă

Studiul de solubilitate al quercetinei prezentat în Tabelul 5 a ilustrat că soluția apoasă de 0,8% Tween80 (pH 5.0) a îndeplinit condițiile de scufundare și a corespuns cu valoarea pH-ului pielii umane. Prin urmare, comportamentele de eliberare ale quercetinei libere și ale quercetinei-lipozomilor au fost investigate în soluția apoasă de 0,8% Tween80 (pH 5,0).

Punga de dializat (8000–14,000 limită de greutate moleculară) a fost procesată cu soluții de 2% NaHCO3 și 1 mmol/mL EDTA. S-au adăugat 10 mL de (300 µg/mL) quercetină-niozomi și soluție de quercetină-propandiol în pungi de dializat și au fost introduse în vase de dizolvare care conțineau 1000 mL de soluție apoasă 0,8% Tween80 (pH 5,0) la 32◦C. Vasele de dizolvare au fost plasate pe un agitator magnetic la viteza de 100 rpm. Mediul de eliberare (2 mL) a fost extras la 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 şi 24 de ore şi a fost înlocuit cu un mediu de eliberare martor (2 mL). Cei 2 mL de mediu de eliberare extrași au fost centrifugați la 3000 r/min timp de 15 min și filtrati. Quercetina eliberată a fost cuantificată prin HPLC.

4.9. Studii ex vivo de penetrare a medicamentelor și retenție a pielii

Șobolanii au fost sacrificați prin luxație cervicală, părul de pe abdomen a fost ras, iar apoi pielea abdominală a fost separată și plasată în soluție salină fiziologică. Ulterior, țesutul subcutanat (mușchi, grăsime și vascule) a fost îndepărtat folosind foarfece chirurgicale și pense hemostatice și apoi depozitat la 4 °C cu soluție salină fiziologică pentru investigații suplimentare.

Studiile de penetrare și retenție a pielii de droguri ale quercetin-niozomilor, quercetin-niozomilor-1 procente propandiol, quercetinei-transferzomilor (compuși din fosfolipide și Tween80 la un raport de masă de 9:11) și quercetină liberă Soluția de propandiol a fost efectuată pentru a investiga livrarea lor transdermică folosind dispozitivul de difuzie transdermică TK-20B cu o zonă de difuzie efectivă de 2,99 cm2. Apoi, soluția de 0,6 procente Tween80 a fost selectată ca mediu de eliberare prin penetrare. Țesuturile pielii au fost plasate între celula de difuzie și celula receptor și 0.4 ml de preparate de quercetină (echivalent cu 120 ug de quercetină) au fost aplicate pe piele. Mediul de penetrare (0,5 ml) a fost retras din celula receptor la 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 și 24 de ore cu înlocuirea mediului de penetrare proaspăt (0,5 ml). Mediile de penetrare retrase la diferite momente au fost diluate la 7 mL cu metanol și determinate prin HPLC după centrifugare și filtrare.

După experimentul de permeație, s-a efectuat experimentul de retenție a pielii de droguri. După 24 de ore, țesuturile pielii au fost izolate, apoi s-au forfecat complet în 7 ml de metanol după spălarea quercetinei de pe suprafață cu apă distilată și extras timp de 40 min cu ultrasunete. Apoi, probele au fost vortexate și centrifugate, iar supernatantul a fost analizat utilizând HPLC după filtrare printr-o membrană de filtru Millipore de 0,22 µm.

4.10. Metoda HPLC

Coloana analitică a fost Dimark C18 (150 mm × 4,6, 5 um). Faza mobilă a fost compusă din metanol și 1% H3PO4 (60:40, v/v). Debitul a fost setat la 1 ml/min la 30 ◦ C și un volum de injecție de 10 µL. Vârful quercetinei a fost detectat la 363 nm.

4.11. Analize statistice

Datele sunt exprimate ca medie a experimentelor ± abaterea standard (SD) și au fost analizate utilizând analiza unidirecțională a varianței (ANOVA), urmată de post-testul de comparație multiplă al lui Tukey. Diferențele statistice care produc P < 0.05 sunt considerate semnificative statistic.

5. Concluzii

Am analizat quercetina, un flavonoid natural care posedă capacități puternice de albire și antioxidante, și am formulat lipozomi folosind un sistem de surfactant neionic pentru a îmbunătăți solubilitatea, fotostabilitatea și capacitatea de penetrare a pielii a quercetinei.

Contribuții ale autorului:

Conceptualizare, WC și XL; metodologie, WC; software, YH; validare, BL, YH și ZC; analiza formală, BL; ancheta, JY; resurse, HX; curatarea datelor, BL; redactare—pregătire a proiectului original, BL; scriere — revizuire și editare, XL; vizualizare, WC; supraveghere, XL; achiziție de finanțare, XL

Finanțarea:

Această cercetare nu a primit finanțare externă.

Conflicte de interes:

Autorii nu declară niciun conflict de interese.

Referințe

1. Chhikara, N.; Kaur, R.; Jaglan, S.; Sharma, R.; Gat, Y.; Panghal, A. Compuși bioactivi și aplicații farmacologice și alimentare ale Syzygium cumini - O revizuire. Funcție alimentară. 2018, 9, 6096. [CrossRef] [PubMed]

2. Carol López de Dicastillo Carol López Bustos, F.; Valenzuela, X.; López-Carballo, G.; Vilariño, JM; Galotto,MJ boabe chiliane, Ugni molinae, Turcz. Extract de fructe și frunze cu proprietăți interesante antioxidante, antimicrobiene și inhibitoare ale tirozinazei. Alimentare Res. Int. 2017, 102, 119–128.

3. Chiari, ME; Vera, DM; Palacios, SM; Carpinella, MC Activitatea de inhibiție a tirozinazei a unei flavanone substituite cu izoprenoid izolată din Dalea elegans. Bioorg. Med. Chim. 2011, 19, 3474–3482. [CrossRef] [PubMed]

4. Sirat, HM; Rezali, MF; Ujang, Z. Izolarea și Identificarea Radical Scavenging și inhibarea tirozinazei polifenolilor din Tibouchina semidecandra. J. Agric. Food Chim. 2010, 58, 10404–10409. [CrossRef] [PubMed]

5. Xiong, Z.; Liu, W.; Zhou, L.; Chen, J. Ciuperca (Agaricus bisporus) polifenol oxidaza inhibată de apigenină: analize multi-spectroscopice și simulare de andocare computațională. Food Chim. 2016, 203, 430–439. [CrossRef] [PubMed]

6. Yan-Zhen, Z.; Da-Fu, C.; Geng, D.; Guo, R. Efectul substituent asupra activității de eliminare radicală a apigeninei. Molecules 2018, 23, 1989.

7. Handjani-Vila, RM; Ribier, A.; Rondot, B.; Vanlerberghie, B. Dispersii de faze lamelare ale lipidelor neionice în produsele cosmetice. Int. J. Cosmet. Sci. 1979, 1, 303–314. [CrossRef] [PubMed]

8. Yoshida, H.; Lehr, CM; Kok, W.; Junginger, HM; Verhoef, JC; Bouwstra, JA Niosomi pentru administrarea orală de medicamente peptidice. J. Control. Lansarea 1992, 21, 145–153. [CrossRef]

9. Uchegbu, IF; Dublu, JA; Kelland, LR; Turton, JA; Florența, AT Activitatea niosomilor de doxorubicină împotriva unei linii celulare de cancer ovarian și a trei modele de tumori de șoarece in vivo. J. Țintă de droguri. 1996, 3, 399–409. [CrossRef]

10. Alsarra, IA; Bosela, AA; Ahmed, SM; Mahrous, GM Proniozomi ca purtător de medicamente pentru administrarea transdermică de ketorolac. EURO. J. Pharm. Biopharm. 2005, 59, 485–490. [CrossRef]

11. Hong, M.; Zhu, S.; Jiang, Y.; Tang, G.; Pei, Y. Direcționarea eficientă a tumorii a lipozomilor PEGilați încărcați cu hidroxi camptotecină modificați cu transferină. J. Control. Lansarea 2009, 133, 96–102. [CrossRef] [PubMed]

12. Tavano, L.; Muzzalupo, R.; Picci, N.; de Cindio, B. Co-încapsularea antioxidanților în purtători lipozomali: studii de eliberare gastrointestinală pentru aplicații nutraceutice. Coloid Surf. B Biointerface 2014, 114, 82–88. [CrossRef] [PubMed]

13. Sohrabi, S.; Haeri, A.; Mahboubi, A.; Mortazavi, A.; Dadashzadeh, S. Niosomi de moxifloxacin încorporați în gel Chitosan: Un sistem hibrid antimicrobian eficient pentru infecția cu arsuri. Int. J. Biol. Macromol. 2016, 85, 625–633. [CrossRef] [PubMed]

14. Kumar, N.; Goindi, S. Vezicule de surfactant neionic proiectate statistic pentru livrarea dermică a itraconazolului: Caracterizare și evaluare in vivo folosind un model de infecție standardizat Tinea pedis. Int. J. Pharm. 2014, 472, 224–240. [CrossRef] [PubMed]

15. Cerqueira-Coutinho, C.; Dos Santos, EP; Mansur, CR Niosomi ca sisteme nano-livrare în domeniul farmaceutic. Crit. Rev. Ther. Drug Carr. Syst. 2016, 33, 195. [CrossRef]

16. Da, MI; Huang, HC; Liaw, JH; Huang, MC; Huang, KF; Hsu, FL Livrarea cutanată prin niozomi a extractului de ceai negru ca agent de protecție solară. Int. J. Dermatol. 2013, 52, 239–245. [CrossRef] [PubMed]

17. Manconi, M.; Sinico, C.; Valenti, D.; Loy, G.; Fadda, AM Niosomi ca purtători pentru tretinoină. I. Preparare și proprietăți. Int. J. Pharm. 2002, 234, 237–248. [CrossRef] 18. Manconi, M.; Valenti, D.; Sinico, C.; Lai, F.; Loy, G.; Fadda, AM Niosomi ca purtători pentru tretinoină: II. Influența încorporării veziculare asupra fotostabilității tretinoinei. Int. J. Pharm. 2003, 260, 261–272. [CrossRef]

19. Kunitake, T.; Takahata, Y. O membrană cu două straturi sintetice. J. Am. Chim. Soc. 1977, 99, 3860–3861. [CrossRef]

20. Brady, JE; Evans, DF; Kachar, B.; Ninham, BM Vezicule spontane. J. Am. Chim. Soc. 1984, 106, 4279–4280. [CrossRef]

21. Kaler, E.; Murthy, A.; Rodriguez, B.; Zasadzinski, J. Formarea spontană a veziculelor în amestecuri apoase de surfactanți cu o singură coadă. Science 1989, 245, 1371–1374. [CrossRef] [PubMed]

22. Kaler, EW; Herrington, KL; Murthy, Alaska; Zasadzinski, JAN Comportamentul de fază și structurile amestecurilor de agenți tensioactivi anionici și cationici. J. Fiz. Chim. 1992, 96, 6698–6707. [CrossRef]

23. Uchegbu, IF; Vyas, SP Vezicule pe bază de surfactant neionic (niozomi) în administrarea medicamentelor. Int. J. Pharm. 1998, 172, 33–70. [CrossRef]

24. Mahale, NB; Thakkar, PD; Mali, RG; Walunj, DR; Chaudhari, SR Niosomi: Noi sisteme veziculare stabile neionice cu eliberare susținută - O prezentare generală. Adv. Interfață coloidă Sci. 2012, 183–184, 46–54. [CrossRef] [PubMed]

25. Udupa, N.; Chandraprakash, KS; Umadevi, P.; Pillai, GK Formularea și evaluarea niosomilor metotrexat. Drug Dev. comun. 1993, 19, 12. [CrossRef]

26. Uchegbu, IF; Florence, AT Vezicule de surfactant neionic (niozomi): chimie fizică și farmaceutică. Adv. Interfață coloidă Sci. 1995, 58, 1–55. [CrossRef]

27. Yoshioka, T.; Sternberg, B.; Florence, AT Prepararea și proprietățile veziculelor (niozomi) de monoesteri de sorbitan (Span 20, 40, 60 și 80) și a unui triester de sorbitan (Span 85). Int. J. Pharm. 1994, 105, 1–6. [CrossRef]

28. Manosroi, A.; Wongtrakul, P.; Manosroi, J.; Sakai, H.; Sugawara, F.; Yuasa, M.; Abe, M. Caracterizarea veziculelor preparate cu diverși agenți tensioactivi neionici amestecați cu colesterol. Coloid Surf. B Biointerface 2003, 30, 129–138. [CrossRef]

29. Alsarra, IA Evaluarea proteazomilor ca strategie alternativă pentru optimizarea administrării transdermice de piroxicam. J. Microcapsul. 2009, 26, 272–278. [CrossRef]

30. Sharma, S.; Das, A.; Dasgupta, A.; Lee, WM; Kim, JO; Oh, DH; Kim, DD; Kim, JS; Yoo, BY; Choi, HG; et al. Formularea și evaluarea in vitro a niozomilor minoxidil pentru o eliberare îmbunătățită pe piele. Int. J. Pharm. 2009, 377, 1–8.

31. Junyaprasert, VB; Singh, P.; Suksiriworapong, J.; Chantasart, D. Proprietăți fizico-chimice și permeație cutanată a niozomii de acid elagic Span 60/Tween 60. Int. J. Pharm. 2012, 423, 303. [CrossRef] [PubMed]

32. Manosroi, A.; Khanrin, P.; Lohcharoenkal, W.; Götz, F.; Manosroi, W.; Manosroi, J. Îmbunătățirea absorbției transdermice prin pielea de șobolan a galiderminei încărcate în lipozomi. Int. J. Pharm. 2010, 392, 304–310. [CrossRef] [PubMed]

33. Auda, SH; Fathalla, D.; Fetih, G.; El-Badry, M.; Shakeel, F. Niosomes ca sistem transdermic de eliberare a medicamentelor pentru celecoxib: studii in vitro și in vivo. Polim. Taur. 2016, 73, 1229–1245. [CrossRef]

34. Manosroi, A.; Jantrawut, P.; Manosroi, J. Activitatea antiinflamatoare a gelului care conține noi niozomi elastici prinși cu diclofenac dietil amoniu. Int. J. Pharm. 2008, 360, 156–163. [CrossRef] [PubMed]

35. Shahiwala, A.; Misra, A. Studii în aplicarea topică a Nimesulidei încapsulate în mod normal. J. Pharm. Farmacia. Sci. 2002, 5, 220–225. [PubMed]

36. Pardakhty, A.; Varshosaz, J.; Rouholamini, A. Studiu in vitro al niozomilor polioxietilen alchil eter pentru livrarea insulinei. Int. J. Pharm. 2007, 328, 130–141. [CrossRef] 37. Abdelbary, G.; El-Gendy, N. Gentamicină încapsulată în niosomi pentru livrare controlată oftalmic. Aaps Pharmscitech 2008, 9, 740–747. [CrossRef] [PubMed]

38. Wadda Abbad, S.; Yu, F.; Munyendo, WLL; Wang, J.; Lv, H.; Zhou, J. Formularea, caracterizarea și farmacocinetica niozomilor hidrat de Morin preparați din diverși agenți tensioactivi neionici. Int. J. Pharm. 2013, 456, 446–458. [CrossRef]

39. Mishra, J.; Swain, J.; Mishra, AK Sondarea modificărilor dependente de temperatură ale hidratării interfeței și vâscozității Tween20: Colesterol (1:1) Membrana niozomului folosind Fisetin ca sondă moleculară fluorescentă. Fiz. Chim. Chim. Fiz. 2018, 20, 13279–13289. [CrossRef]

40. Procházková, D.; Boušová, I.; Wilhelmová, N. Proprietăți antioxidante și prooxidante ale flavonoidelor. Fitoterapia 2011, 82, 513–523. [CrossRef]

41. Cherrak, SA; Mokhtari-Soulimane, N.; Berroukeche, F.; Bensenane, B.; Cherbonnel, A.; Merzouk, H.; Elhabiri, M. Antioxidant in vitro versus proprietăți de chelare a ionilor metalici ale flavonoidelor: o investigație de structură-activitate. PLoS ONE 2016, 11, e0165575. [CrossRef] [PubMed]

42. Amic, D.; Davidovic-Amic, D.; Beslo, D.; Rastija, V.; Lucic, B.; Trinajstic, N. SAR și QSAR al activității antioxidante a flavonoidelor. Curr. Med. Chim. 2007, 14, 827–845. [CrossRef] [PubMed]

43. Machado, ND; Fernando, SO; De Rossi, RH; Fernandez, MA Ciclodextrina a modificat niozomii pentru a încapsula compuși hidrofili. RSC Adv. 2018, 8, 29909–29916. [CrossRef]

44. Imran, M.; Shah, domnule; Ullah, F.; Ullah, S.; Elhissi, AMA; Nawaz, W.; Ahmad, F.; Sadiq, A.; Ali, I. Nanopurtător lipozomal pe bază de glicozide pentru performanța îmbunătățită in vivo a Cefiximei. Int. J. Pharm. 2016, 505, 122–132. [CrossRef] [PubMed]

45. Hao, Y.; Zhao, F.; Li, N.; Yang, Y.; Li, K. Studii asupra unei încapsulări ridicate a colchicinei de către un sistem zgomotos. Int. J. Pharm. 2002, 244, 73–80. [CrossRef]

46. ​​Anandam, S.; Selvamuthukumar, S. Fabricarea nanoburetelor de ciclodextrină pentru livrarea quercetinei: caracterizare fizico-chimică, fotostabilitate și efecte antioxidante. J. Mater. Sci. 2014, 49, 8140–8153. [CrossRef]

47. Lv, X.; Liu, T.; Ma, H.; Tian, ​​Y.; Li, L.; Li, Z.; Gao, M.; Zhang, J.; Tang, Z. Prepararea de microemulsii pe bază de ulei esențial pentru îmbunătățirea solubilității, stabilității pH-ului, fotostabilității și permeabilității cutanate a quercetinei. AAPS PharmSciTech 2017, 18, 3097–3104. [CrossRef]

48. Azzi, J.; Jraij, A.; Auezova, L.; Fourmentin, S.; Greige-Gerges, H. Descoperiri noi pentru încapsularea și conservarea Quercetinei cu ciclodextrine, lipozomi și medicamente în ciclodextrină în lipozomi. Food HydroColloid 2018, 81, 328–340. [CrossRef]

49. Smith, GJ; Thomsen, SJ; Markham, KR; Andary, C.; Cardon, D. Fotostabilitățile 5-hidroxiflavonelor, flavonolilor, glicozidelor și complecșilor lor de aluminiu care apar în mod natural. J. Photochem. Fotobiol. Un Chim. 2000, 136, 87–91. [CrossRef]

50. Kubo, I.; Kinsthori, I. Flavonoli din floarea de șofran: activitate inhibitorie a tirozinazei și mecanism de inhibiție. J. Agric. Food Chim. 1999, 47, 4121–4125. [CrossRef]

51. Kim, YJ; Uyama, H. Inhibitori de tirozinază din surse naturale și sintetice: structură, mecanism de inhibiție și perspectivă pentru viitor. Celulă. Mol. Life Sci. 2005, 62, 1707–1723. [CrossRef] [PubMed]

52. Kim, D.; Park, J.; Kim, J.; Han, C.; Yoon, J.; Kim, N.; Seo, J.; Lee, C. Flavonoidele ca inhibitori ai tirozinazei de ciuperci: un studiu de stingere a fluorescenței. J. Agric. Food Chim. 2006, 54, 935–941. [CrossRef] [PubMed]

53. Fan, M.; Zhang, G.; Hu, X.; Xu, X.; Gong, D. Quercetin ca inhibitor al tirozinazei: activitate inhibitoare, schimbare conformațională și mecanism. Alimentare Res. Int. 2017, 100, 226–233. [CrossRef] [PubMed]

54. Didem ¸Söhreto ˘glu Suat, S.; Burak, B.; Özel, A. Inhibarea tirozinazei de către unele flavonoide: Activitatea inhibitoare, mecanismul prin studii in vitro și silico. Bioorg. Chim. 2018, 81, 168–174. [CrossRef] [PubMed]

55. Gopinath, D.; Ravi, D.; Karwa, R.; Rao, B.; Shashank, A.; Rambhau, D. Farmacocinetica zidovudinei după administrarea intravenoasă în bolus a unui nou preparat de niozom lipsit de colesterol. Arzneimittelforschung 2011, 51, 924–930. [CrossRef] [PubMed]

56. Ghosh, S.; Ghatak, C.; Banerjee, C.; Mandal, S.; Kuchlyan, J.; Sarkar, N. Tranziția spontană a micelului-veziculă-miculă într-un amestec de agent tensioactiv cationic și lichid ionic asemănător agentului tensioactiv anionic: un șablon pur vezicular unilamelar mic nonlipid utilizat pentru studiul de relaxare a solvenților și a rotației. Langmuir 2013, 29, 10066–10076. [CrossRef]

57. Sakai, T.; Ikoshi, R.; Toshida, N.; Kagaya, M. Formarea veziculelor stabile din punct de vedere termodinamic și tranziția veziculă la micelă a surfactantului anionic cu o singură coadă în apă. J. Fiz. Chim. B 2013, 117, 5081. [CrossRef]

58. Ghosh, S.; Mondal, S.; Pan, A.; Mitra, RK; Ghosh, S. Tranziția micelară la veziculă mediată de lichid ionic a unui surfactant cationic gemeni: O investigație spectroscopică. Soft Matter 2018, 14, 4185–4193.

59. Mukherjee, B.; Patra, B.; Layek, B.; Mukherjee, A. Eliberarea susținută de aciclovir din nano-lipozomi și nano-lipozomi: Un studiu in vitro. Int. J. Nanomed. 2007, 2, 213–225.

60. Blois, MS Determinări de antioxidanți prin utilizarea unui radical liber stabil. Natura 1958, 181, 1199–1200. [CrossRef]

61. Rui, Y.; Ying, G.; Weixin, W.; Chen, H.; El, Z.; Jia, A.-Q. Capacitatea antioxidantă a substanțelor fenolice din florile Camellia nitidissima Chi și identificarea lor prin HPLC Triple TOF MS/MS. PLoS ONE 2018, 13, e0195508.

Disponibilitatea eșantionului:

Probele de compuși nu sunt disponibile de la autori.

© 2019 de către autori. Licențiat MDPI, Basel, Elveția. Acest articol este un articol cu ​​acces deschis distribuit în conformitate cu termenii și condițiile licenței Creative Commons Attribution (CC BY) (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Primit: 2 aprilie 2019; Acceptat: 21 iunie 2019; Publicat: 24 iunie 2019

For more information:1950477648nn@gmail.com