Partea a II-a-Cistanches Herba reduce creșterea în greutate la șoarecii obezi induși de dieta bogată în grăsimi, posibil prin decuplarea mitocondrială
Mar 25, 2022
Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Hoi Shan Wong, Jihang Chen, Pou Kuan Leong, Hoi Yan Leung, Wing Man Chan, Kam Ming Ko
* Division of Life Science, Hong Kong University of Science and Technology, Hong Kong, China.
4. Discuții
Tratamentul cu HCF1 a suprimat creșterea în greutate corporală indusă de HFD atât la șoarecii masculi, cât și la femele. Pierderea în greutate indusă de HCF1-a fost asociată cu reduceri semnificative ale creșterilor de grăsime induse de HFD, în special în grăsimea viscerală. Grăsimea viscerală, care este un țesut activ metabolic, participă la reglarea diferitelor funcții neuroendocrine (Cefalu și colab., 1995; Ibrahim, 2010; Nguyen-Duy, Nichaman, Church, Blair, & Ross, 2003; Wozniak, Gee, Wachtel. , & Frezza, 2009; Zhang și colab., 2012), în care secreția de citokine proinflamatorii joacă un rol important în declanșarea unuiinflamatorrăspuns (Ibrahim, 2010). Prin urmare, capacitatea HCF1 de a suprima creșterea indusă de HFD a grăsimii viscerale are implicații în prevenirea tulburărilor metabolice legate de obezitate. Tratamentul pe termen lung cu HCF1 a suprimat, de asemenea, depunerea de grăsime ectopică indusă de HFD, așa cum este evidențiată de scăderea semnificativă a nivelului hepatic de TG la șoarecii hrăniți cu HFD cotratați cu HCF1-. Depunerea de grăsime ectopică, care se găsește în mod obișnuit la persoanele obeze (Iacobellis, Barbarini, Letizia și Barbaro, 2013), are loc atunci când aportul de lipide alimentare depășește capacitatea de stocare a țesutului adipos (Bays, Mandarino și DeFronzo, 2004) , cu acumularea rezultată de lipide în țesuturile non-adipoase, cum ar fi mușchii scheletici șificat(Lettner & Roden, 2008). Studiile clinice au arătat o corelație puternică între depunerea de grăsime ectopică și dezvoltarea diabetului de tip 2. S-a constatat că un astfel de efect patogen este mediat de acumularea de intermediari ai metabolismului lipidic. De exemplu, intermediarii din oxidarea incompletă pot duce la funcționarea defectuoasă a receptorilor de insulină prin semnalizarea diacilglicerolului (Snel și colab., 2012). Prin urmare, descoperirile sugerează că HCF1 poate reduce acumularea de grăsime ectopică prin scăderea disponibilității lipidelor și, prin urmare, poate produce un efect benefic asupra sensibilității la insulină.
Cistanche herbaeste bun pentrugreutateControl
Chengdu Wecistanche produce în principal produse Cistanche pentru o viață sănătoasă.
Creșterile induse de HFD ale nivelurilor plasmatice de TG și glucoză, care indică rezistența la insulină, se datorează probabil deteriorării în reglarea sintezei TG mediate de insulină și a absorbției de glucoză (Koo, 2013; Leto & Saltiel, 2012; Moore, Coate, Winnick, An și Cherrington, 2012). Creșterile nivelurilor plasmatice de TG și glucoză sunt probabil atribuite dereglării anabolismului hepatic TG/glucoză mediată de calea fosfoinozitid-3-kinazei/protein kinazei B în semnalizarea insulinei (Farese, Sajan și Standaert, 2005). Capacitatea HCF1 de a inhiba creșterea indusă de HFD a nivelurilor plasmatice de TG și glucoză sugerează efectul său benefic asupra sensibilității la insulină. Efectul de sensibilizare la insulină a fost susținut în continuare de modificările metabolice induse de HCF1- atât în condiții de ND, cât și de HFD. Tratamentul cu HCF1 părea să stimuleze glicoliza la șoarecii hrăniți cu ND, așa cum este indicat de stimularea activității PFK, sugerând utilizarea crescută a glucozei ca molecule de combustibil. Pe de altă parte, hrănirea HFD a declanșat o schimbare a metabolismului energetic de la glucoză la oxidarea acizilor grași, ceea ce indică un răspuns adaptativ la creșterea nivelului plasmatic de TG, probabil prin mecanismul de detectare a acizilor grași receptor-alfa activat de proliferarea peroxizomilor (PPAR). (Georgiadi & Kersten, 2012; Poulsen, Siersbak și Mandrup, 2012). În acest proces, legarea acizilor grași sau a derivaților de acizi grași activează PPAR. Translocarea nucleară rezultată a PPAR promovează expresiile genelor legate de metabolismul acizilor grași, cu creșterea ulterioară a oxidării acizilor grași (Georgiadi & Kersten, 2012; Poulsen și colab., 2012), așa cum a fost cazul șoarecilor hrăniți cu HFD. . HCF1 a inhibat oxidarea acizilor grași stimulați de HFD, probabil mediată de sensibilitatea sporită la insulină la șoarecii hrăniți cu HFD. Mai mult, hrănirea cu HFD a provocat dislipidemie, după cum evidențiază creșterile semnificative ale nivelurilor hepatice și plasmatice de TC, precum și o scădere a raportului HDL față de LDL (Klop, Elte și Cabezas, 2013). Având în vedere faptul că metabolismul colesterolului este parțial reglat de nivelul plasmatic/hepatic de TG și de calea de semnalizare dependentă de insulină (Dickson-Humphries, Bottenberg și Kuntz, 2013; Ruderman, Carling, Prentki și Cacicedo, 2013), capacitatea a HCF1 pentru a modula metabolismul colesterolului oferă dovezi pentru a susține în continuare rolul său benefic în sensibilitatea la insulină.
Deșertul Cistanche
Pentru a investiga mecanismul care stă la baza reducerii în greutate indusă de HCF1-, a fost examinat efectul HCF1 asupra decuplării mitocondriale. Inducerea decuplării mitocondriale în mușchiul scheletic al șoarecelui, așa cum este indicată de reducerea RCR mitocondrială și expresia crescută a UCP3 mitocondrială, a fost asociată cu scăderea greutății corporale și a indicilor de grăsime totală în HCF1-co-tratat cu HFD. soareci. Descoperirea sugerează posibila implicare a decuplării mitocondriale în producerea efectului de reducere a greutății la șoareci, în special în condițiile HFD. În timp ce HCF1 a indus decuplarea mitocondrială la șoarecii masculi și femele atât în condiții ND cât și HFD, o măsură mai mare a reducerii greutății induse de HCF1-a fost observată la șoarecii masculi. Diferența de gen se datorează probabil masei musculare scheletice mai mari la masculi decât la șoarecii femele. Efectul supresor diferențial asupra creșterii de grăsime subcutanată și viscerală indusă de HFD prin co-tratamentul cu HCF1 oferă, de asemenea, sprijin pentru implicarea decuplării mitocondriale în pierderea în greutate. În plus, descoperirea că HCF1 a provocat o reducere mai proeminentă a grăsimii viscerale a fost probabil legată de conținutul mitocondrial relativ ridicat din grăsimea viscerală în comparație cu țesutul adipos subcutanat (Krauneoe și colab., 2010). Pe de altă parte, în timp ce HCF1 a produs un efect dependent de doză asupra reducerii greutății la șoarecii hrăniți cu ND și hrăniți cu HFD, efectul său asupra decuplării mitocondriale s-a dovedit a fi autolimitat. Observația discrepantă poate fi atribuită altor factori decât inducerea decuplării mitocondriale. De exemplu, creșterea masei musculare slabe după co-tratamentul cu HCF1 ar putea duce la o măsură mai mare a consumului de energie indus de decuplarea mitocondrială la șoarecii hrăniți cu HFD. În plus, rezultatele obținute din studiul comparativ între efectele HCF1 și CT asupra obezității induse de HFD au exclus, de asemenea, posibila implicare a inhibării absorbției grăsimilor alimentare în pierderea în greutate indusă de HCF1-. În studiu, atât tratamentele cu CT, cât și cu HCF1 au cauzat scăderea în greutate atât la șoarecii hrăniți cu ND, cât și la șoarecii hrăniți cu HFD. Interesant, efectul de reducere a greutății mediat de CT a fost asociat cu scăderi semnificative ale nivelurilor plasmatice de LDL și creșterea rezultată a raportului dintre HDL și LDL, dar nu și inducerea decuplării mitocondriale în mușchiul scheletic. Descoperirea sugerează că efectul de scădere în greutate al CT poate fi legat în principal de capacitatea sa de a sechestra acidul biliar care împiedică absorbția grăsimilor din dietă (Chen și colab., 2010; Yamato și colab., 2012). De asemenea, spre deosebire de HCF1 care a îmbunătățit fluxul glicolitic pentru generarea de energie, CT nu a reușit să producă niciun efect detectabil asupra metabolismului energetic. Îmbunătățirea metabolismului glucozei și lipidelor prin co-tratamentul CT la șoarecii hrăniți cu HFD sunt evenimente secundare reducerii induse de CT a absorbției grăsimilor alimentare și, prin urmare, scăderii în greutate. Efectul diferențial dintre HCF1 și co-tratamentul CT sugerează că reducerea greutății indusă de HCF1-este puțin probabil mediată de afectarea absorbției grăsimilor din dietă.
beneficiile pentru sănătate ale deșertuluicistanche
După cum a fost evaluat prin cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) și cromatografie lichidă-spectrometrie de masă (LC-MS), constatările preliminare au arătat că fitosterolii, cum ar fi -sitosterolul (BSS), sunt constituenții chimici majori ai HCF1. Am demonstrat în continuare că atât HCF1, cât și BSS au fost eficiente în inducerea decuplării mitocondriale în celulele H9c2 in vitro și în inimile de șobolan ex vivo printr-un mecanism mediat de ROS (Wong, Chen, Leong și Ko, 2013), sugerând BSS ca componentă activă. de HCF1. BSS, care împărtășește o structură chimică similară cu colesterolul, s-a dovedit a fi capabil să fluidizeze membrana mitocondrială interioară prin perturbarea membranei, cu o creștere rezultată a transportului de electroni mitocondriali (Shi, Wu și Xu, 2013). Prin urmare, postulăm că fitosterolii din HCF1, în special BSS, pot crește fluiditatea membranei mitocondriale interioare prin interacțiunile hidrofobe dintre scheletul pentaciclic și membrana interioară mitocondrială. Creșterea asociată a transportului de electroni mitocondriali, așa cum a fost observată și în studiile noastre anterioare (Wong și colab., 2013; Wong & Ko, 2013) poate provoca o creștere paralelă a producției de ROS mitocondrial, care poate, la rândul său, induce decuplarea mitocondrială. și în cele din urmă duce la pierderea în greutate in vivo.
beneficii cistanche pentru sănătate
5. Concluzie
Luat împreună, s-a descoperit că tratamentul cu HCF1 exercită un efect de reducere a greutății la șoarecii obezi induși de HFD, probabil prin creșterea metabolismului energetic in vivo, în special în mușchiul scheletic prin inducerea decuplării mitocondriale. Thegreutate reducereefecta fost, de asemenea, asociat cu o sensibilitate îmbunătățită la insulină. Vor fi efectuate studii suplimentare folosind 6-cetocolestanolul ca cuplaj pentru a confirma implicarea decuplării mitocondriale induse de HCF1-în producereagreutatereducereefect. În plus, studiile privind efectele BSS asupragreutate Controlsunt garantate. Descoperirile sugerează utilizarea potențială a HCF1 pentru prevenirea obezității induse de dietă și a tulburărilor metabolice asociate.
Beneficiul extractului de Cistanche
Conflict de interese
Declarăm că nu avem niciun conflict de interese.
Referinţă:
Bays, H., Mandarino, L. și DeFronzo, RA (2004). Rolul adipocitelor, acizilor grași liberi și grăsimii ectopice în patogenia diabetului zaharat de tip 2: agoniştii receptorilor activați de proliferatori peroxizomali oferă o abordare terapeutică rațională. Jurnalul de Endocrinologie Clinică și Metabolism, 89, 463–478.
Brand, MD, Pakay, JL, Ocloo, A., Kokoazka, J., Wallace, DC și Brooks, PS (2005). Conductanța bazală a protonilor mitocondriilor depinde de conținutul de adenin nucleotidă translocază. The Biochemical Journal, 392, 353–362.
Carter, SL, Rennie, CD, Hamilton, SJ și Tarnopolsky, MA (2001). Modificări ale mușchilor scheletici la bărbați și femei după antrenamentul de anduranță. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology, 79, 386–392.
Cefalu, WT, Wang, ZQ, Werbel, S., Bell-Farrow, A., Crouse, JR, 3rd, Hinson, WH, Terry, JG și Anderson, R. (1995). Contribuția masei grase viscerale la rezistența la insulină a îmbătrânirii. Metabolism: Clinical and Experimental, 44, 954–959.
Cerqueira, FM, Laurindo, FRM și Kowaltowski, AJ (2011). Decuplarea mitocondrială ușoară și restricția calorică cresc eNOS, Akt și biogeneza mitocondrială a postului. PLoS ONE, doi:10.137/journal.pone.0018433.
Chan, SL, Wei, Z., Chigurupati, S., & Tu, W. (2010). Adaptare și termoreglare respiratorie compromisă în îmbătrânirea și bolile legate de vârstă. Aging Research Reviews, 9, 20–40.
Chen, L., McNulty, J., Anderson, D., Liu, Y., Nystrom, C., Bullard, S., Collins, J., Handlon, AL, Klein, R., Grimes, A., Murray , D., Brown, R., Krull, D., Benson, B., Kleymenova, E., Remlinger, K., Young, A. și Yao, X. (2010). Colestiramina inversează hiperglicemia și îmbunătățește eliberarea peptidei 1 asemănătoare glucagonului stimulată de glucoză la șobolanii grasi cu diabet zaharat Zucker. Jurnalul de farmacologie și terapie experimentală, 334, 164–170.
Clapham, JC, Arch, JRS, Chapman, H., Haynes, A., Lister, C., Moore, GBT, Piercy, V., Carter, SA, Lehner, I., Smith, SA, Beeley, LJ, Godden , RJ, Herrity, N., Skehel, M., Changani, KK, Hockings, PD, Reid, DG, Squires, SM, Hatcher, J., Trail, B., Latcham, J., Rastan, S., Harper , AJ, Cadenas, S., Buckingham, JA, Brand, MD și Abuin, A. (2000). Șoarecii care supraexprimă proteina umană de decuplare-3 în mușchii scheletici sunt hiperfagi și slabi. Natura, 406, 415–418.
Coelho, WS, Costa, KC și Sola-Penna, M. (2007). Serotonina stimulează 6-fosfofructo-1-kinaza mușchilor scheletici de șoarece prin fosforilarea tirozină a enzimei, modificând localizarea acesteia intracelulară. Genetica moleculară și metabolismul, 92, 364–370.
Dickson-Humphries, T., Bottenberg, B. și Kuntz, S. (2013). Anomalii ale lipoproteinelor la pacienții cu diabet zaharat de tip 2 și sindrom metabolic. JAAPA, 26, 12–18.
Diehl, AM și Hoek, JB (1999). Decuplarea mitocondrială: Rolul decuplarii purtătorilor de anioni proteici și relația cu termogeneza și controlul greutății „beneficiile pierderii controlului”. Journal of Bioenergetics and Biomembranes, 31, 493–506.
Farese, RV, Sajan, MP și Standaert, ML (2005). Protein kinaze sensibile la insulină (protein kinaza C atipică și protein kinaza B/Akt): Acțiuni și înfrângeri în obezitate și diabet de tip II. Experimental Biology and Medicine (Maywood, NJ), 230, 593–605.
Finkelstein, EA, Khavjou, OA, Thompson, H., Trogdon, JG, Pan, L., Sherry, B. și Dietz, W. (2012). Obesity and severe journal of functional foods 10(2014)292-304 303, previziunile obezității până în 2030. American Journal of Preventive Medicine, 42, 563–570.
Georgiadi, A. și Kersten, S. (2012). Mecanisme de reglare a genelor de către acizi grași. Advances in Nutritional, 3, 127–134.
Harper, JA, Dickinson, K. și Brand, MD (2001). Decuplarea mitocondrială ca țintă pentru dezvoltarea de medicamente pentru tratamentul obezității. Obesity Reviews, 2, 255–265.
Holloway, GP, Bonen, A. și Spriet, LL (2009). Reglarea metabolismului acizilor grași mitocondriali ai mușchilor scheletici la persoanele slabe și obeze. The American Journal of Clinical Nutrition, 89, 455S–462S.
Holloway, GP, Thrush, AB, Heigenhauser, GJF, Tandon, NN, Dyck, DJ, Bonen, A. și Spriet, LL (2006). Conținutul de FAT/CD36 mitocondrial al mușchilor scheletici și oxidarea palmitatului nu sunt scăzute la femeile obeze. Jurnalul American de Fiziologie. Endocrinologie și metabolism, 292, E1782–E1789. Iacobellis, G., Barbarini, G., Letizia, C., & Barbaro, G. (2013).
Grosimea grăsimii epicardice și boala ficatului gras nealcoolic la subiecții obezi. Obezitatea (Silver Spring), 22, 332–336. Ibrahim, MM (2010). Țesutul adipos subcutanat și visceral: diferențe structurale și funcționale. Recenzii de obezitate, 11, 11–18.
Jiang, N., Zhang, G., Qu, J., Ma, G., Cao, D., Wen, L., Liu, S., Ji, LL și Zhang, Y. (2009). Reglarea în creștere a proteinei de decuplare-3 în mușchiul scheletic în timpul exercițiului: o funcție antioxidantă potențială. Biologie și medicină cu radicali liberi, 46, 138–145.
Karlic, H., Lohninger, S., Koeck, T., & Lohninger, A. (2002). L-carnitina alimentară stimulează carnitina aciltransferazele în ficatul șobolanilor în vârstă. Jurnalul de histochimie și citochimie, 50, 205–212.
Klop, B., Elte, JW și Cabezas, MC (2013). Dislipidemia în obezitate: mecanisme și potențiale ținte. Nutrienți, 5, 1218–1240.
Koo, SH (2013). Boala ficatului gras nonalcoolic: mecanisme moleculare pentru steatoza hepatică. Hepatologie clinică și moleculară, 19, 201–215.
Korshunov, SS, Skulachev, VP și Starkoc, AA (1997). Potențialul protonic ridicat activează un mecanism de producere a speciilor reactive de oxigen în mitocondrii. Scrisori FEBS, 416, 15–18.
Krauneoe, R., Boushel, R., Hansen, CN, Schjerling, P., Qvortrup, K., Stockel, M., Mikines, KJ și Dela, F. (2010). Respirația mitocondrială în țesutul adipos subcutanat și visceral de la pacienții cu obezitate morbidă. Jurnalul de fiziologie, 588, 2023–2032.
Leong, PK, Leung, HY, Wong, HS, Chen, J., Ma, CW, Yang, Y. și Ko, KM (2013). Tratamentul pe termen lung cu o formulă din plante MCC reduce creșterea în greutate la șoarecii obezi induși de o dietă bogată în grăsimi. Medicina Chineză, 4, 63–71.
Leto, D. și Saltiel, AR (2012). Reglarea transportului de glucoză de către insulină: Controlul traficului GLUT4. Recenzii despre natură. Molecular Cell Biology, 13, 383–396.
Lettner, A. și Roden, M. (2008). Grăsimi ectopice și rezistență la insulină. Current Diabetes Reports, 8, 181–191.
Leung, HY și Ko, KM (2008). Extractul de Herba Cistanche îmbunătățește generarea mitocondrială de ATP în inimile de șobolan și celulele H9c2. Le Pharmacien Biologiste, 46, 418–424.
Li, B., Nolte, LA, Ju, J., Han, DH, Coleman, T., Holloszy, JO și Semenkovich, CF (2000). Decuplarea respiratorie a mușchilor scheletici previne obezitatea indusă de dietă și rezistența la insulină la șoareci. Nature Medicine, 6, 1115–1120.
McTigue, KM, Garrett, JM și Popkin, BM (2002). Istoria naturală a dezvoltării obezității într-o cohortă de tineri adulți din SUA între 1981 și 1998. Annals of Internal Medicine, 136, 857–864.
Moore, MC, Coate, KC, Winnick, JJ, An, Z. și Cherrington, AD (2012). Reglarea captării și stocării hepatice a glucozei in vivo. Advances in Nutritional, 3, 286–294.
Nguyen-Duy, TB, Nichaman, MZ, Church, TS, Blair, SN și Ross, R. (2003). Grăsimea viscerală și grăsimea hepatică sunt predictori independenți ai factorilor de risc metabolici la bărbați. Jurnalul American de Fiziologie. Endocrinologie și metabolism, 284, E1065–E1071.
Poulsen, LI, Siersbak, M., & Mandrup, S. (2012). PPAR: Senzori de acizi grași care controlează metabolismul. Seminarii de biologie celulară și de dezvoltare, 23, 631–639.
Ricquier, D., & Bouillaud, F. (2000). Proteinele de decuplare mitocondriale: de la mitocondrii la reglarea echilibrului energetic. Jurnalul de fiziologie, 529, 3–10.
Rodriguez, AM și Palou, A. (2004). Proteine de decuplare: dependența de gen și relația lor cu controlul greutății corporale. Jurnalul Internațional de Obezitate (2005), 28, 500–502.
Rodriguez, AM, Quevedo-Coli, S., Roca, P., & Palou, A. (2001). Obezitatea alimentară dependentă de sex, inducerea UCP-urilor și expresia leptinei în țesuturile adipoase de șobolan. Cercetarea obezității, 9, 579–588.
Ruderman, NB, Carling, D., Prentki, M. și Cacicedo, JM (2013). AMPK, rezistența la insulină și sindromul metabolic. The Journal of Clinical Investigation, 123, 2764–2772.
Shi, C., Wu, F. și Xu, J. (2013). Încorporarea -sitosterolului în membrana mitocondrială îmbunătățește funcția mitocondrială prin promovarea fluidității membranei mitocondriale interioare. Journal of Bioenergetics and Biomembranes, 45, 301–305.
Shi, J., Finckenberg, P., Martonen, E., Ahlroos-Lehmus, A., Pilvi, TK, Korpela, R., & Mervaala, EM (2012). Efectele metabolice ale lactoferinei în timpul restricției energetice și refacerea greutății la șoarecii obezi induși de dietă. Journal of Functional Foods, 4, 66–78.
Siddiqua, M., Hamid, K., Ar-Rashid, MH, Akther, MS și Choudhuri, MSK (2010). Modificări ale profilului lipidic al plasmei de șobolan după administrarea cronică de laghobanondo Rosh (LNR) - o formulare ayurvedică. Biologie și Medicină, 2, 58–63.
Snel, M., Jonker, JT, Schoones, J., Lamb, H., de Roos, A., Pijl, H., Smit, JW, Meinders, AE și Jazet, IM (2012). Grăsimile ectopice și rezistența la insulină: patologic și efectul intervențiilor legate de dietă și stilul de viață. Jurnalul Internațional de Endocrinologie, 2012, ID articol 983814.
Wong, HS, Chen, N., Leong, PK și Ko, KM (2013). Β-sitosterolul îmbunătățește ciclul redox al glutationului celular prin speciile reactive de oxigen generate de respirația mitocondrială: protecție împotriva leziunilor oxidante în celulele H9c2 și inimile de șobolan.
Cercetare fitoterapie, doi:10.1002/ptr.5087; publicat online. Wong, HS și Ko, KM (2013). Herba Cistanches stimulează ciclul redox al glutationului celular de către speciile reactive de oxigen generate de respirația mitocondrială în cardiomiocitele H9c2. Le Pharmacien Biologiste, 51, 63–73.
Wozniak, SE, Gee, LL, Wachtel, MS și Frezza, EE (2009). Țesutul adipos: noul organ endocrin? Un articol de recenzie. Boli și științe digestive, 54, 1847–1856.
Yamato, M., Shiba, T., Ide, T., Seri, N., Kudo, W., Ando, M., Yamada, K., Kinugawa, S. și Tsutsui, H. (2012). Obezitatea indusă de dieta bogată în grăsimi și rezistența la insulină au fost ameliorate prin excreția sporită a acidului biliar fecal la șoarecii knockout al receptorului alfa de factor de necroză tumorală. Biochimie moleculară și celulară, 359, 161–167.
Zhang, Y., Yu, Y., Li, X., Meguro, S., Hayashi, S., Katashima, M., Yasumasu, T., Wang, J. și Li, K. (2012). Efectele băuturii de ceai verde îmbogățite cu catechine asupra pierderii de grăsime viscerală la adulții cu o proporție mare de grăsime viscerală: un studiu dublu-orb, controlat cu placebo, randomizat. Journal of Functional Foods, 4, 315–322.
