Analizele proteomice și citokinelor disting cazurile de encefalomielita mialgică/sindrom de oboseală cronică de controale Partea 3

De ce vom fi obositi? Cum putem rezolva problemele de oboseală?

【Contact】E-mail: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501

Cistanche poate acționa ca un amplificator anti-oboseală și rezistență, iar studiile experimentale au arătat că decoctul de Cistanche tubulosa ar putea proteja eficient hepatocitele hepatice și celulele endoteliale deteriorate la șoarecii care înotă care poartă greutatea, să regleze expresia NOS3 și să promoveze glicogenul hepatic. sinteza, exercitand astfel eficacitate anti-oboseala. Extractul de Cistanche tubulosa bogat în glicozide feniletanoide ar putea reduce semnificativ creatinkinaza serică, lactat dehidrogenază și nivelurile de lactat și ar putea crește nivelul de hemoglobină (HB) și glucoză la șoarecii ICR, iar acest lucru ar putea juca un rol anti-oboseală prin scăderea leziunilor musculare. și întârzierea îmbogățirii cu acid lactic pentru stocarea energiei la șoareci. Compusul Cistanche Tubulosa Tabletele a prelungit semnificativ timpul de înot de suportare a greutății, a crescut rezerva hepatică de glicogen și a scăzut nivelul seric de uree după exercițiu la șoareci, arătând efectul său anti-oboseală. Decoctul de Cistanchis poate îmbunătăți rezistența și accelera eliminarea oboselii la șoarecii care se antrenează și poate reduce, de asemenea, creșterea creatinkinazei serice după exercițiul de încărcare și poate menține ultrastructura mușchiului scheletic al șoarecilor normală după exercițiu, ceea ce indică faptul că are efecte. de sporire a forței fizice și anti-oboseală. De asemenea, Cistanchis a prelungit semnificativ timpul de supraviețuire al șoarecilor otrăviți cu nitriți și a sporit toleranța la hipoxie și oboseală.

Faceți clic pe Întotdeauna obosit

Niveluri mai ridicate ale unei alte proteine ​​asociate cu hemostaza, PROS1, sunt corelate cu o sănătate mai proastă la controale, dar nu au asociere semnificativă cu cohorta ME/CFS (Fig. 7a). PROS1, cunoscută și sub numele de Protein S, este un regulator bine-cunoscut al hemostazei, cu efecte anticoagulante importante [62]. Faptul că nu se corelează cu starea de sănătate a pacienților cu ME/SFC poate reflecta controlul perturbat al hemostazei în boală.

Niveluri mai ridicate de CETP, proteine ​​de transfer de ester de colesteril, sunt asociate cu oboseală crescută pe IMF-20 (Fig. 7a). Această proteină controlează schimbul de esteri de colesteril și trigliceride între HDL și lipoproteinele cu densitate joasă (LDL), iar CETP mai mare ar fi de așteptat să aibă ca rezultat un raport LDL/HDL mai puțin favorabil, care este asociat cu boli de inimă [63]. S-a observat că celulele imune la pacienții cu ME/CFS prezintă o oxidare alterată a acizilor grași, care ar putea fi legată de diferențele în compoziția acizilor grași din plasmă [64].

Niveluri mai mari de SERPINA5 au fost asociate cu scoruri mai bune pe scalele de sănătate generală și funcționare socială SF-36 (Fig. 7b). SERPINA5 este un inhibitor secretat de serin protează ale cărui funcții nu sunt complet înțelese [65]. A fost identificat inițial ca un inhibitor al proteinei C activate de protează anticoagulante [66]. În timp ce acest fapt sugerează că SERPINA5 mai mare ar putea crește coagularea, un studiu in vitro a demonstrat că SERPINA5 poate servi atât ca anticoagulant, cât și ca pro-coagulant, în funcție de prezența trombomodulinei [67]. Trombocitele conțin ARNm SERPINA5 și pot prelua și proteina din mediul extern [68]. Finanțarea noastră a unei corelări a stării de sănătate a ME/CFS cu o proteină implicată în hemostaza poate fi relevantă pentru descoperirile recente ale trombocitelor activate și microcheaguri în ME/CFS [69], precum și profilele modificate de expresie a genei trombocitelor [52]. Mai mult, variantele din gena SERPINA5 au fost asociate anterior cu ME/CFS [70].

Corelațiile cu mai multe proteine ​​au fost detectate prin regresie liniară robustă care nu a fost găsită prin corelația Spearman (Tabelul 3). CSF3, cunoscut și ca factor de stimulare a coloniilor de granulocite, crește odată cu vârsta în cohorta ME/CFS, dar este mai scăzută cu vârsta în cohorta totală, indicând probabil o stare inflamatorie în cohorta de pacienți. Chemokina EV CXCL1, care atrage neutrofilele în regiunile de infecție sau leziune, scade odată cu vârsta în întreaga cohortă. PFN1, profilina-1, care reglează polimerizarea actinei, este estimată a fi mai mare la bărbați în cohorta totală, dar mai mică la bărbații cu ME/SFC.

Am folosit clasificatoare de învățare automată pentru a identifica proteinele care fac distincție între cazuri și controale. Anterior, setul de date de proteomică a fost supus unei analize similare folosind LASSO, Random Forest și XGBoost [14]. Șapte proteine ​​sunt comune în primele 20 de liste ale tuturor celor trei metode de învățare automată. Pe lângă EV IL2, au existat CAMP, IGLV1-47, CRTAC1, LRG1, IGF1 și TUBA1. Patru dintre acestea au fost, de asemenea, în grupul de 8 proteine ​​care au fost comune celor trei metode din studiul anterior, care a analizat doar datele de proteomică a plasmei [14]. IGF1 și TUBA1ABC nu erau în primele 20 atunci când cohorta totală a fost luată în considerare în studiul anterior. Dintre cele șapte proteine ​​comune, doar EV IL2 și CAMP (Cathelicidin AntiMicrobial Protein) au fost crescute în cazuri față de martori și ambele sunt proinflamatorii. Semnificația unei reduceri a ILGVI- 47 (variabila imunoglobulinei Lambda 1-47) în cazuri este dificil de prezis, dar ar putea reflecta un efect genotipic necunoscut asupra susceptibilității la ME/SFC. CRTAC1 (Cartilage Acidic Protein 1) este o proteină din matricea extracelulară cu funcție necunoscută, dar creșterea îmbunătățită a fibroblastelor dermice in vitro, astfel încât nivelurile mai scăzute ar putea fi dăunătoare. LRG1 (Leucin Rich Alpha-2-Glycoprotein 1) este secretată de hepatocite și neutrofile, iar nivelurile mai mari sunt asociate cu funcții benefice (promovarea vindecării rănilor), dar și cu o varietate de boli; astfel, semnificația reducerii sale este necunoscută [71]. Nivelurile mai scăzute de IGF1 (Insulin-Like Growth Factor 1) sunt susceptibile de a fi nefavorabile pentru sănătate, având în vedere proprietățile sale de stimulare a creșterii și efectele asupra metabolismului [72, 73]. Genele TUBA1A, TUBA1B și TUBA1C codifică tubulina, o componentă esențială a citoscheletului [74]. Semnalizarea tubulinei este perturbată în urma chimioterapiei și se presupune că are un rol în afectarea neurocognitivă care rezultă adesea în urma tratamentului [75].

IL2 localizat în EV se găsește în toate cele trei liste. IL2 a fost singura citokină EV care a distins cazurile și controalele la q<0.05 (Fig. 3). In our prior pilot study of EV cytokines in 35 cases and 35 controls, we did not find any significant difference in IL2 between cohorts [25]. Other EV cytokines that featured in the top 20 are VEGF, NGFB, IL15, CXCL8, CXCL10, CCL5, and CCL7, although VEGF, IL15, and CXCL10 did not discriminate cases and controls at q<0.2, according to Wilcoxon tests  (Fig. 3). Plasma cytokines IL7, TNFα, IL12p70, and IL22 were included on one or two of the top 20 lists. While no significant differences in any plasma cytokines were detected following correction for multiple testing, before correction TNFα was increased in cases at p=0.016 [26]. Previously, Hornig et al. [41], who performed a larger study, with 298 cases and 348 controls, did not find significant differences between cases and controls for these cytokines. The cytokine profiling literature in ME/CFS has not resulted in consistent conclusions regarding altered cytokine levels between ME/CFS and controls.

Această lucrare are unele limitări. În primul rând, studiul nostru are o dimensiune mică a eșantionului, mai ales având în vedere eterogenitatea simptomelor bolii și când se măsoară un număr mare de variabile. Soliditatea constatărilor noastre trebuie verificată în cohorte mai diverse și mai mari.

Deși ME/CFS are o sarcină mai mare a bolii la femei [76] și un număr tot mai mare de diferențe de sex în fiziopatologia sa au fost descoperite recent [77, 78], nu am putut raporta date dezagregate despre sex în studiul nostru din cauza limitărilor de dimensiunea eșantionului. (8 și 9 bărbați comparativ cu 41 și 40 de femele pentru populațiile de control și, respectiv, ME/CFS). Prin urmare, comparațiile statistice între sexe nu au fost fezabile în studiul nostru actual.

Acest studiu a examinat doar sângele periferic și nu a analizat alte compartimente, cum ar fi lichidul cefalorahidian. Cu toate acestea, în ciuda unei dimensiuni reduse a eșantionului, anomalii ale proteinelor pacienților cu ME/SFC au fost identificate în studiile cu lichidul cefalorahidian [9, 46, 79]. Cercetările viitoare proteomice asupra sângelui periferic al pacienților cu ME/SFC ar trebui să se străduiască să stabilească corelații cu aceste constatări.

Aici, măsurarea citokinelor în plasmă și EV a fost efectuată folosind diferite teste multiplex. Mai exact, un 61-plex de la Affymetrix a fost folosit pentru a analiza citokinele din probele de plasmă, în timp ce un 48-plex de la Biorad a fost folosit pentru a măsura conținutul de citokine în EV.

Am optat pentru o metodă de precipitare pentru izolarea EV datorită volumelor limitate de probă (500 ul) și pentru a permite analiza întregii populații EV. Utilizarea reactivului de precipitare ExoQuick tinde să producă o puritate mai mică pentru fracțiile izolate EV în comparație cu alte metode, cum ar fi ultracentrifugarea și cromatografia de excludere a dimensiunii. Studiile viitoare care compară aceste metode în analiza citokinelor vor fi informative pentru a ne asigura că rezultatele noastre sunt reproductibile folosind alte metode de izolare EV. În plus, EV-urile nu au fost separate în fracții diferite după dimensiune sau prin prezența unor molecule de suprafață speciale pentru a permite o analiză separată a acestor fracții. Vor apărea cu siguranță modele distincte care indică ambalarea selectivă a proteinelor specifice în EV-uri specifice.

Trebuie remarcat faptul că corelațiile raportate în acest studiu nu indică relații cauză-efect și sunt necesare cercetări suplimentare pentru a stabili cauzalitatea. De exemplu, deoarece dieta subiecților nu a fost controlată în acest studiu, discrepanțe în profilurile de citokine între diferite grupuri ar putea fi atribuite diferențelor în dietele lor [80-82]. Astfel, nu putem exclude posibilitatea ca factorii dietetici să fi influențat rezultatele noastre.

În cele din urmă, deoarece acest studiu a folosit o abordare transversală; examinarea modificărilor longitudinale ale vehiculelor electrice ar necesita o explorare suplimentară. Mai mult, colectarea unică a probei împiedică determinarea dacă asocierile dintre simptome și profilurile proteice din plasmă și EV ale pacienților cu ME/CFS provin din progresia bolii. Cercetările viitoare sunt cruciale pentru a stabili dacă pacienții cu ME/SFC prezintă în mod constant o semnătură specifică de citokină și o clasificare a severității bolii în timp sau dacă acești factori fluctuează.

Concluzii

Această lucrare demonstrează importanța colectării datelor clinice pentru a determina dacă anumite molecule sunt corelate cu condițiile subiecților, permițând să se tragă concluzii despre acestea, chiar dacă valorile lor mediane diferă puțin între cazuri și martori. Am demonstrat din nou că rețelele de semnalizare citokine/chemokine din circulație sunt modificate între cazurile ME/CFS și controale. În cele din urmă, am identificat 20 de proteine ​​ale căror niveluri au oferit sensibilitate și specificitate foarte ridicate pentru distingerea ME/CFS și probele de control. Un subset mai gestionabil de 7 din cele 20 de proteine ​​încă permite o separare considerabilă a pacienților de martori (AUROC=0.891, Fig. 8). Aceste descoperiri așteaptă confirmarea într-un set de date mai mare pentru a determina dacă pot fi utile din punct de vedere clinic pentru diagnostic sau monitorizarea răspunsului la tratament.

Abrevieri

ME/CFS Encefalomielita mialgică/sindrom de oboseală cronică

EVs Vezicule extracelulare

Analiza de urmărire a nanoparticulelor NTA

Analiza componentelor principale PCA

Sondaj de sănătate SF-36 Formular scurt 36

Scala de inventar de oboseală multidimensională MFI-20

AUC Zona sub curbă

IMC Indicele de masă corporală

IBS Sindromul intestinului iritabil

LASSO Operator de contracție și selecție minimă absolută

Rata de descoperire falsă a FDR

AUROC Aria de sub curba caracteristică de funcționare a receptorului

Mulțumiri

Această lucrare a folosit echipamente de la Cornell NanoScale Science & Technology Facility (CNF), un membru al National Nanotechnology Coordinated Infrastructure NNCI), care este sprijinit de National Science Foundation (Grant NNCI-2025233). Mulțumim experților ME/CFS Dr. Lucinda Bateman, Nancy Klimas, Susan Levine și Daniel Peterson pentru identificarea subiecților ME/SFC și controale și colectarea sângelui. Le mulțumim tuturor subiecților pentru participare.

Contribuții ale autorului

Cercetare proiectată (LG, MRH); experimente efectuate (JL, LG); analiza datelor (JL, LG); scrierea manuscriselor (JL, LG, DR, MRH). MH și WIL au revizuit și editat manuscrisul și au furnizat seturile de date de citokine și proteomice. JL a efectuat analize statistice sub supravegherea LG și DR. LG a revizuit analiza lui JL și a pregătit manuscrisul. Ordinea de autor în rândul co-primilor autori a fost atribuită în funcție de cantitatea de muncă. Toți autorii au citit și au aprobat manuscrisul final.

Finanțarea

Mulțumim Inițiativei de oboseală cronică a Hutchins Family Foundation pentru sprijinirea colectării de probe de sânge și a datelor de sondaj de la subiecții ME/ CFS și de control. Analiza datelor raportate aici a fost finanțată de NIH U54NS105541 către Cornell University ME/CFS Center.

Disponibilitatea datelor și materialelor

Datele privind dimensiunea veziculelor extracelulare, cuantificarea și conținutul de citokine sunt disponibile la cerere pentru autori. Datele proteomice ale spectrometriei de masă au fost depuse la Consorțiul ProteomeXchange prin intermediul depozitului partener PRIDE cu identificatorul setului de date PXD016622.

Declarații

Aprobarea etică și acordul de participare

Consimțământul scris a fost obținut de la toți participanții și toate protocoalele au fost aprobate de Consiliul de revizuire instituțional de la Columbia University Irving Medical Center.

Consimțământ pentru publicare

Toți autorii au revizuit și au aprobat versiunea finală pentru depunere.

Interese concurente

Autorii declară că nu au interese concurente.

Detalii autor

1 Departamentul de Biologie Moleculară și Genetică, Universitatea Cornell, 323 Biotechnology Building, 526 Campus Road, Ithaca, NY 14853, SUA. 2 Departamentul de Statistică și Știința Datelor, Universitatea Cornell, Ithaca, NY, SUA. 3 Centrul pentru Infecție și Imunitate, Universitatea Columbia Mailman School of Public Health, New York, NY, SUA. 4 Departamentul de Epidemiologie, Universitatea Columbia Mailman School of Public Health, New York, NY, SUA. 5 Departamente de Neurologie și Patologie, Colegiul Medicilor și Chirurgilor, Universitatea Columbia, New York, NY, SUA. 6 School of Operations Research and Information Engineering, Cornell University, Ithaca, NY, SUA.

Referințe

1. IoM C. Dincolo de encefalomielita mialgică/sindromul de oboseală cronică: redefinirea unei boli. Washington: National Academies Press; 2015.

2. Chia JKS. Rolul enterovirusului în sindromul de oboseală cronică. J Clin Pathol. 2005;11:1126.

3. O'Neal AJ, Hanson MR. Teoria enterovirusului a etiologiei bolii în encefalomielita mialgică/sindromul de oboseală cronică: o revizuire critică. Front Med. 2021;8:688486.

4. Hanson MR, Germain A. Scrisoare către editorul de metaboliți. Metaboliți. 2020;10(5):216.

5. Davis HE, Assaf GS, McCorkell L, Wei H, Low RJ, Re'em Y, et al. Caracterizarea COVID lung într-o cohortă internațională: 7 luni de simptome și impactul lor. EClinicalMedicine. 2021;38:101019.

6. Sukocheva OA, Maksoud R, Beeraka NM, Madhunapantula SV, Sinelnikov M, Nikolenko VN, et al. Analiza stării post-COVID-19 și suprapunerea acesteia cu encefalomielita mialgică/sindromul de oboseală cronică. J Adv Res. 2022;40:179–96.

7. Giford EJ, Vahey J, Hauser ER, Sims KJ, Efrd JT, Dursa EK și colab. Boala Războiului din Golf în cohorta și biodepozitul din epoca Războiului din Golf: Kansas și centrele pentru definițiile de control al bolilor. Life Sci. 2021;278:119454.

8. Baraniuk JN. Revizuirea nucleelor ​​rețelei de excitare ascendentă a creierului mijlociu și a implicațiilor pentru encefalomielita mialgică/sindromul oboselii cronice (ME/CFS), Boala Războiului din Golf (GWI) și Malaise postexertionale (PEM). Brain Sci. 2022;12(2):132.

9. Baraniuk JN, Casado B, Maibach H, Clauw DJ, Pannell LK, Hess SS. Un proteom legat de sindromul oboselii cronice în lichidul cefalorahidian uman. BMC Neurol. 2005;5(1):1–19.

10. Schutzer SE, Angel TE, Liu T, Schepmoes AA, Clauss TR, Adkins JN, et al. Proteoamele distincte ale lichidului cefalorahidian diferențiază boala Lyme post-tratament de sindromul de oboseală cronică. Plus unu. 2011;6(2):e17287.

11. Germain A, Ruppert D, Levine SM, Hanson MR. Profilul metabolic al unei cohorte de descoperire a encefalomielitei mialgice/sindromului oboselii cronice dezvăluie tulburări în metabolismul acizilor grași și al lipidelor. Mol BioSyst. 2017;13(2):371–9.

12. Germain A, Ruppert D, Levine SM, Hanson MR. Biomarkerii potențiali din metabolomica plasmatică a encefalomielitei mialgice/sindromul de oboseală cronică implică dezechilibrul redox în simptomatologia bolii. Metaboliți. 2018;8(4):90.

13. Nagy-Szakal D, Barupal DK, Lee B, Che X, Williams BL, Kahn EJ și colab. Perspective asupra fenotipului encefalomielitei mialgice/sindromului de oboseală cronică prin metabolomică cuprinzătoare. Sci Rep. 2018;8(1):10056.

14. Milivojevic M, Che X, Bateman L, Cheng A, Garcia BA, Hornig M, et al. Profilul proteomic din plasmă sugerează o asociere între expansiunea celulelor B clonale determinată de antigen și ME/CFS. Plus unu. 2020;15(7):e0236148.

15. Fleshner M, Crane CR. Exozomi, DAMP și miARN: caracteristici ale fiziologiei stresului și homeostaziei imune. Trends Immunol. 2017;38(10):768–76.

16. Barnes BJ, Somerville CC. Modularea producției de citokine prin ambalare selectată și secreție din veziculele extracelulare. Front Immunol. 2020;11:1040.

17. Rajendran L, Honsho M, Zahn TR, Keller P, Geiger KD, Verkade P, et al. În boala Alzheimer, peptidele -amiloide sunt eliberate în asociere cu exozomi. Proc Natl Acad Sci. 2006;103(30):11172–7.

18. Słomka A, Urban SK, Lukacs-Kornek V, Żekanowska E, Kornek M. Mari vezicule extracelulare: am găsit Sfântul Graal al inflamației? Front Immunol. 2018;9:2723.

19. Yoon YJ, Kim OY, Gho YS. Vezicule extracelulare ca comunicatori intercelulari emergenti. BMB Rep. 2014;47(10):531.

20. Jung KH, Chu K, Lee ST, Park HK, Bahn JJ, Kim DH și colab. Microparticulele endoteliale circulante ca marker al bolii cerebrovasculare. Ann Neurol Of J Am Neurol Assoc Child Neurol Soc. 2009;66(2):191–9.

21. König L, Kasimir-Bauer S, Bittner AK, Hofmann O, Wagner B, Santos Manvailer LF și colab. Nivelurile crescute de vezicule extracelulare sunt asociate cu eșecul terapiei și cu progresia bolii la pacienții cu cancer de sân care urmează chimioterapie neoadjuvantă. Oncoimunologie. 2018;7(1):e1376153.

22. Lee CH, Im EJ, Moon PG, Baek MC. Descoperirea unui biomarker de diagnostic pentru cancerul de colon prin profilarea proteomică a veziculelor extracelulare mici. BMC Cancer. 2018;18(1):1–11.

23. Castro-Marrero J, Serrano-Pertierra E, Oliveira-Rodríguez M, Zaragozá MC, Martínez-Martínez A, Blanco-López MC, et al. Veziculele extracelulare circulante ca potențiali biomarkeri în sindromul oboselii cronice/encefalomielita mialgică: un studiu pilot explorator. J Vezicule extracelulare. 2018;7(1):1453730.

24. Eguchi A, Fukuda S, Kuratsune H, Nojima J, Nakatomi Y, Watanabe Y, et al. Identificarea proteinelor din rețeaua de actină, talin-1 și flamin-A, în veziculele extracelulare circulante ca biomarkeri de sânge pentru encefalomielita mialgică umană/sindromul de oboseală cronică. Brain Behav Immun. 2020;84:106–14.

25. Giloteaux L, O'Neal A, Castro-Marrero J, Levine SM, Hanson MR. Profilul de citokine a veziculelor extracelulare izolate din plasmă în encefalomielita mialgică/sindromul oboselii cronice: un studiu pilot. J Transl Med. 2020;18(1):387.

26. Nagy-Szakal D, Williams BL, Mishra N, Che X, Lee B, Bateman L, et al. Profiluri metagenomice fecale la subgrupuri de pacienți cu encefalomielită mialgică/sindrom de oboseală cronică. Microbiomul. 2017;5(1):44.

27. Klimas NG, Ironson G, Carter A, Balbin E, Bateman L, Felsenstein D, et al. Constatări dintr-o bază de date clinică și de laborator dezvoltată pentru descoperirea mecanismelor patogene în encefalomielita mialgică/sindromul de oboseală cronică. Oboseală Biomed Health Comport. 2015;3:75–96.

28. Fukuda K, Straus SE, Hickie I, Sharpe MC, Dobbins JG, Komarof A. Sindromul de oboseală cronică: o abordare cuprinzătoare a definiției și studiului său. Grupul internațional de studiu pentru sindromul oboselii cronice. Ann Intern Med. 1994;121(12):953–9.

29. Carruthers BM, Jain AK, De Meirleir KL, Peterson DL, Klimas NG, Lerner AM și colab. Encefalomielita mialgică/sindrom de oboseală cronică: definirea cazului clinic de lucru, protocoale de diagnostic și tratament. J Sindromul de oboseală cronică. 2003;11:7–115.

30. Ware JE Jr, CD Sherbourne. Sondajul MOS 36-articolul pe scurt de sănătate (SF-36): I. Cadrul conceptual și selecția articolelor. Med Care. 1992;30(6):473–83.

31. Smets EM, Garssen B, Bonke B, De Haes JC. Calitățile psihometrice ale inventarului multidimensional de oboseală (MFI) ale unui instrument de evaluare a oboselii. J Psihosom Res. 1995;39(3):315–25.

32. Fitzgerald W, Freeman ML, Lederman MM, Vasilieva E, Romero R, Margolis L. Un sistem de citokine încapsulate în vezicule extracelulare. Sci Rep. 2018;8(1):8973.

33. Huber PJ. Statistici robuste. New York: John Wiley & Sons; 1981.

34. Huber PJ. Estimarea robustă a unui parametru de locație. Ann Math Stat. 1964;35:73–101.

35. Benjamini Y, Hochberg FH. Controlul ratei de descoperire falsă: o abordare practică și puternică a testării multiple. JR Stat Soc. 1995;57(1):289–300.

36. Benjamini Y, Krieger AM, Yekutieli D. Adaptive linear step-up procedures that control the false discovery rate. Biometrica. 2006;3(3):491–507.

37. Breiman L. Random forests. Mach Learn. 2001;45:5–32.

38. Chen T, Guestrin C, editori. XGBoost: un sistem scalabil de creștere a arborilor. În: Proceedings of the 22nd ACM SIGKDD international Conference on knowledge discovery and data mining KDD 16; 2016.

39. Tibshirani R. Contracția regresiei și selecția prin laso. J Roy Stat Soc Ser B. 1996;58:267–88.

40. Yanez-Mo M, Siljander PR, Andreu Z, Zavec AB, Borras FE, Buzas EI, et al. Proprietățile biologice ale veziculelor extracelulare și funcțiile lor fiziologice. J Vezicule extracelulare. 2015;4:27066.

41. Hornig M, Montoya JG, Klimas NG, Levine S, Felsenstein D, Bateman L și colab. Semnăturile imune plasmatice distincte în ME/CFS sunt prezente la începutul cursului bolii. Sci Adv. 2015;1(1):e1400121.

42. Castro-Marrero J, Serrano-Pertierra E, Oliveira-Rodriguez M, Zaragoza MC, Martinez-Martinez A, Blanco-Lopez MDC, et al. Veziculele extracelulare circulante ca potențiali biomarkeri în sindromul oboselii cronice/encefalomielita mialgică: un studiu pilot explorator. J Vezicule extracelulare. 2018;7(1):1453730.

43. Montoya JG, Holmes TH, Anderson JN, Maecker HT, Rosenberg-Hasson Y, Valencia IJ, et al. Semnătura citokinelor asociată cu severitatea bolii la pacienții cu sindrom de oboseală cronică. Proc Natl Acad Sci USA. 2017;114(34):E7150–8.

44. Jason LA, Gaglio CL, Furst J, Islam M, Sorenson M, Conroy KE, et al. Analiza rețelei de citokine într-un eșantion pediatric comunitar de pacienți cu encefalomielită mialgică/sindrom de oboseală cronică. Boala cronică. 2022.

45. Strawbridge R, Sartor ML, Scott F, Cleare AJ. Proteinele inflamatorii sunt modificate în sindromul de oboseală cronică - o revizuire sistematică și meta-analiză. Neurosci Biobehav Rev. 2019;107:69–83.

46. ​​Hornig M, Gottschalk G, Peterson D, Knox K, Schultz A, Eddy M și colab. Analiza rețelei de citokine a lichidului cefalorahidian în encefalomielita mialgică/sindromul de oboseală cronică. Mol Psihiatrie. 2016;21(2):261–9.

47. Cheney PR, Dorman SE, Bell DS. Interleukina-2 și sindromul de oboseală cronică. Ann Intern Med. 1989;110(4):321.

48. Jason LA, Cotler J, Islam MF, Furst J, Sorenson M, Katz BZ. Analiza rețelelor de citokine descoperă diferențe suplimentare între cei care dezvoltă encefalomielita mialgică/sindrom de oboseală cronică în urma mononucleozei infecțioase. Oboseală Biomed Health Comport. 2021;9(1):45–57.

49. Chen D, Dorling A. Roluri critice pentru trombina în inflamația acută și cronică. J Tromb Haemost. 2009;7(Suppl 1):122–6.

50. Hercus TR, Broughton SE, Ekert PG, Ramshaw HS, Perugini M, Grimbaldeston M, et al. Familia receptorilor GM-CSF: mecanism de activare și implicații pentru boală. Factori de creștere. 2012;30(2):63–75.

51. Boyette LB, Macedo C, Hadi K, Elinof BD, Walters JT, Ramaswami B și colab. Fenotipul, funcția și potențialul de diferențiere al subgrupurilor de monocite umane. Plus unu. 2017;12(4):e0176460.

52. Ahmed F, Vu LT, Zhu H, Iu DSH, Fogarty EA, Kwak Y, et al. Transcriptomica unicelulară a sistemului imunitar în ME/CFS la momentul inițial și după provocarea simptomelor. BioRXiv. 2022.

53. Deshmane SL, Kremlev S, Amini S, Sawaya BE. Proteina chemoatractantă a monocitelor-1 (MCP-1): o prezentare generală. J Interferon Cytokine Res. 2009;29(6):313–26.

54. Stringer EA, Baker KS, Carroll IR, Montoya JG, Chu L, Maecker HT și colab. Fluctuațiile zilnice ale citokinelor, determinate de leptină, sunt asociate cu severitatea oboselii în sindromul de oboseală cronică: dovezi ale patologiei inflamatorii. J Transl Med. 2013;11:93.

55. Vazirinejad R, Ahmadi Z, Kazemi Arababadi M, Hassanshahi G, Kennedy D. Funcțiile biologice, structura și sursele CXCL10 și rolul său remarcabil în patofiziologia sclerozei multiple. NeuroImunoModulație. 2014;21(6):322–30.

56. Villeda SA, Luo J, Mosher KI, Zou B, Britschgi M, Bieri G, et al. Mediul sistemic de îmbătrânire reglează negativ neurogeneza și funcția cognitivă. Natură. 2011;477(7362):90–4.

57. Patarca R, Klimas NG, Lugtendorf S, Antoni M, Fletcher MA. Expresia dereglată a factorului de necroză tumorală în sindromul de oboseală cronică: interrelații cu sursele celulare și modele de exprimare a mediatorului imun solubil. Clin Infect Dis. 1994;18(Suppl 1):S147–53.

58. Moss RB, Mercandetti A, Vojdani A. TNF-alfa și sindromul de oboseală cronică. J Clin Immunol. 1999;19(5):314–6.

59. Fruhbeck G, Catalan V, Ramirez B, Valenti V, Becerril S, Rodriguez A, et al. Nivelurile serice de IL-1 RA cresc odată cu obezitatea și diabetul de tip 2 din cauza disfuncției țesutului adipos și sunt reduse după intervenția chirurgicală bariatrică în paralel cu adipozitatea. J Infamm Res. 2022;15:1331–45.

60. Luotola K. Nivelurile de antagonist al receptorilor IL{-1 (IL{-1Ra) și managementul tulburărilor metabolice. Nutrienți. 2022;14(16):3422.

61. Fletcher MA, Zeng XR, Barnes Z, Levis S, Klimas NG. Citokine plasmatice la femeile cu sindrom de oboseală cronică. J Transl Med. 2009;7:96.

62. Gierula M, Ahnstrom J. Proteina anticoagulantă S-Noi perspective asupra interacțiunilor și funcțiilor. J Tromb Haemost. 2020;18(11):2801–11.

63. Taheri H, Filion KB, Windle SB, Reynier P, Eisenberg MJ. Inhibitori ai proteinei de transfer al esterului de colesteril și rezultate cardiovasculare: o revizuire sistematică și meta-analiză a studiilor controlate randomizate. Cardiologie. 2020;145(4):236–50.

64. Maya J, Leddy S, Gottschalk C, Peterson D, Hanson MR. Modificarea oxidării acizilor grași în populațiile de limfocite ale encefalomielitei mialgice/sindromul de oboseală cronică. Int J Mol Med. 2023;24(3):2010.

65. Yang H, Geiger M. Cell penetrating SERPINA5 (inhibitor ProteinC, PCI): mai multe întrebări decât răspunsuri. Semin Cell Dev Biol. 2017;62:187–93.

66. Marlar RA, Grifn JH. Deficiența inhibitorului de proteină C în boala cu deficit combinat de factor V/VIII. J Clin Invest. 1980;66(5):1186–9.

67. Elisen MG, von dem Borne PA, Bouma BN, Meijers JC. Inhibitorul proteinei C acționează ca un procoagulant prin inhibarea activării induse de trombomodulină a proteinei C în plasma umană. Sânge. 1998;91(5):1542–7.

68. Prendes MJ, Bielek E, Zechmeister-Machhart M, Vanyek-Zavadil E, Carroll VA, Breuss J, et al. Sinteza și localizarea ultrastructurală a inhibitorului proteinei C în trombocite și megacariocite umane. Sânge. 1999;94(4):1300–12.

69. Nunes JM, Kruger A, Proal A, Kell DB, Pretorius E. Apariția trombocitelor hiperactivate și a microcheagurilor fibrinoide în encefalomielita mialgică/sindromul de oboseală cronică (ME/CFS). Produse farmaceutice. 2022;15(8):931.

70. Rajeevan MS, Dimulescu I, Murray J, Falkenberg VR, Unger ER. Evaluarea genetică axată pe cale a genelor imune și legate de inflamație cu sindrom de oboseală cronică. Hum Immunol. 2015;76(8):553–60.

71. Camilli C, Hoeh AE, De Rossi G, Moss SE, Greenwood J. LRG1: un jucător emergent în patogeneza bolii. J Biomed Sci. 2022;29(1):6.

72. Yakar S, Rosen CJ, Beamer WG, Ackert-Bicknell CL, Wu Y, Liu JL, et al. Nivelurile circulante de IGF-1 reglează direct creșterea și densitatea osului. J Clin Invest. 2002;110(6):771–81.

73. Clemmons DR. Rolurile relative ale hormonului de creștere și ale IGF-1 în controlul sensibilității la insulină. J Clin Invest. 2004;113(1):25–7.

74. Bittermann E, Abdelhamed Z, Liegel RP, Menke C, Timms A, Beier DR, et al. Cerințe diferențiate ale genelor tubulinei în dezvoltarea creierului anterior al mamiferelor. PLoS Genet. 2019;15(8):e1008243.

75. Sordillo PP, Sordillo LA. Misterul creierului chimioterapiei: kinurenine, tubulină și eliberare de biofotoni. Anticancer Res. 2020;40(3):1189–200.

76. Valdez AR, Hancock EE, Adebayo S, Kiernicki DJ, Proskauer D, Attewell JR, et al. Estimarea prevalenței, a datelor demografice și a costurilor ME/CFS utilizând date pe scară largă privind reclamațiile medicale și învățarea automată. Front Pediatr. 2019;6:412.

77. Germain A, Giloteaux L, Moore GE, Levine SM, Chia JK, Keller BA, et al. Metabolomica plasmatică dezvăluie răspuns întrerupt și recuperare după exercițiul maxim în encefalomielita mialgică/sindromul de oboseală cronică. JCI Insight. 2022.

78. Nkiliza A, Parks M, Cseresznye A, Oberlin S, Evans JE, Darcey T, et al. Profilele lipidelor plasmatice specifice sexului la pacienții cu ME/CFS și asocierea lor cu durere, oboseală și simptome cognitive. J Transl Med. 2021;19(1):1–15.

79. Peterson D, Brenu E, Gottschalk G, Ramos S, Nguyen T, Staines D, et al. Citokine în lichidul cefalorahidian al pacienților cu sindrom de oboseală cronică/encefalomielita mialgică. Mediat Infamm. 2015;2015:1–4.

80. Manning PJ, Sutherland WH, McGrath MM, De Jong SA, Walker RJ, Williams MJ. Concentrațiile postprandiale de citokine și compoziția mesei la femeile obeze și slabe. Obezitatea. 2008;16(9):2046–52.

81. Netea SA, Janssen SA, Jaeger M, Jansen T, Jacobs L, Miller-Tomaszewska G, et al. Consumul de ciocolată modulează producția de citokine la persoanele sănătoase. Citokină. 2013;62(1):40–3.

82. Solis-Pereyra B, Aattouri N, Lemonnier D. Rolul alimentelor în stimularea producției de citokine. Am J Clin Nutr. 1997;66(2):521S-S525.

Nota editorului

Springer Nature rămâne neutră în ceea ce privește revendicările jurisdicționale în hărțile publicate și afilierile instituționale.

【Contact】E-mail: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501