Reducerea leziunilor de conservare/reperfuzie renală prin hipertermie controlată în timpul perfuziei cu mașină Ex Vivo

A lua legatura:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Thomas Minor1,*,† și Charlotte von Horn1,†

Posibilul efect reno-protector al unui tratament scurt controlat de șoc termic în timpul perfuziei izolate ex vivo a grefelor donatoare înainte dereperfuzietrebuie investigat într-un studiu primar in vitro.Porcinrinichi(n=14) au fost extrase după 20 de minute de oprire cardiacă a donatorului și supuse la 20 de ore de depozitare statică la rece în soluția de la Universitatea din Wisconsin. Înainteareperfuzie, rinichiau fost supuși la 2 ore de perfuzie la mașină de recondiționare cu o creștere treptată a temperaturii de perfuzie până la 35 de grade. În jumătate dinrinichi(n=7), un scurt impuls hipertermic (10 minute perfuzie la 42 de grade) a fost implementat în perioada de perfuzie a mașinii. Recuperarea funcțională a grefelor a fost observată la reperfuzia normotermă in vitro. Tratamentul hipertermic a dus la o creștere cu 50% a proteinei de șoc termic (HSP) 70 și HSP 27 ARNm și a fost însoțită de o îmbunătățire cu ~ 50% a reabsorbției tubulare a sodiului și glucozei la reperfuzie, în comparație cu martorii. În plus, pierderea renală a aspartat aminotransferazei a fost redusă semnificativ la o treime din controale, la fel ca și pierderea de proteine ​​urinare, evaluată prin raportul albumină la creatinina. S-a ajuns la concluzia că tratamentul cu șoc termic ex vivo pare a fi o opțiune ușor de implementat și promițătoare pentru a îmbunătăți mecanismul de autoapărare renală împotrivareperfuzierăniredupă conservare care merită investigații suplimentare în modele preclinice.

Cistanche dr vita opceste foarte bun pentrurinichireperfuzie

Repere ale studiului

CARE SUNT CUNOȘTINȚELE ACTUALE PE TEMA?

✔ Inducerea proteinelor de șoc termic (HSP) în țesuturile locale este un mecanism de apărare binecunoscut ca răspuns la stresul mediului. Reglarea în sus a acelor chaperone moleculare induce mecanisme de reparare și toleranță față de celulele ulterioarerănire. Clinicrinichitransplantul se bazează din ce în ce mai mult pe utilizarea organelor donatoare cu criterii extinse care prezintă o susceptibilitate sporită la ischemie/reperfuzierănire. Perfuzia automată ex vivo a grefelor de organe marginale oferă acces privilegiat la grefă și o nouă perspectivă pentru o aplicare ușoară și controlată a unei stimulări hipertermice la organul izolat pentru a declanșa răspunsuri la șoc termic și a declanșa căi de semnal care afectează favorabil exacerbarea consecutivă a țesutului rănire și îmbunătățirerenalrecuperare după transplant.

CE ÎNTREBARE A ADRESAT ACEST STUDIU?

✔ Examinăm un potențial efect protector al unui scurt stimul hipertermic în timpul pre-transplantului ex vivorinichiperfuziepe rezultatul funcțional după postischemicreperfuzie.

CE ADAUGĂ ACEST STUDIU LA CUNOȘTINȚELE NOASTRE?

✔ Acest studiu oferă câteva indicii că tratamentul hipertermic în timpul perfuziei cu aparate renale ex vivo acționează ca un posibil instrument nou pentru îmbunătățirea rezultatelor funcționale ale conservate marginal.rinichila reperfuzie postischemică. Datele susțin un rol relevant al HSP-urilor în reducerea distrugerii celulare și îmbunătățirea funcției renale tubulare posttransplant.

CUM POATE SCHIMBA ACEASTA FARMACOL CLINIC

OGI SAU ȘTIINȚĂ TRANSLAȚIONALĂ?

✔ Adăugarea de hipertermie controlată scurtă la un protocol de perfuzie normotermic stabilit este o metodă ușor de implementat pentru aplicare clinică și poate contribui la îmbunătățirea recuperării organelor după transplant.

Transplantul clinic de rinichi se bazează din ce în ce mai mult pe utilizarea organelor donatoare cu criterii extinse care au fost deteriorate înainte de extragere sau care sunt probabil mai puțin decât optime.

calitate. Împreună cu proporția în creștere a acelor organe care prezintă o susceptibilitate sporită la factorii declanșatori vătămatori la conservarea ischemică, 1,2 modificări tisulare

legate de ischemia/leziunea de reperfuzie reprezintă o problemă majoră în creștere în transplantul renal, care declanșează disfuncția celulară la reperfuzie.

Inducerea însoțitorilor celulari și declanșarea unui fenotip de semnal de protecție (de exemplu, prin stres termic subcritic), este un mecanism binecunoscut pentru a reduce modificările tisulare relevante pentru o situație de stres ulterioară și pentru a provoca homeostazia tisulară.3,4.

Apariția mașinilor de perfuzie izolate ca alternativă sau adjuvant la depozitarea la rece ischemică a grefelor donatoare marginale a deschis o nouă perspectivă pentru o aplicare ușoară și controlată a unei provocări hipertermice la organul izolat pentru a declanșa un răspuns la șoc termic și a declanșa semnalul. căi care afectează favorabil exacerbarea consecutivă a leziunii tisulare și îmbunătățesc recuperarea renală după transplant.

Efectul de precondiționare al răspunsului la șocul termic a fost evidențiat experimental a fi legat de o creștere temporară supra-normală a citorezistenței5 și este operativ prin îmbunătățirea mecanismelor secundare de reparare celulară.6 Mai recent s-a demonstrat că inducerea proteinele de șoc termic (HSP) pot conferi protecție chiar și atunci când sunt induse devreme după ce a avut loc deja insulta inițială a țesutului.7

Accesul privilegiat la organul izolat exclude cerințe greoaie pentru încălzirea întregului corp și provoacă efecte secundare adverse asupra organismelor donatoare sau primitoare.

Prin urmare, acest studiu a fost intenționat ca o investigație pilot pentru a verifica dovezile primare ale tratamentului hipertermic în timpul perfuziei cu aparate renale ex vivo pentru a acționa ca un posibil instrument nou pentru îmbunătățirea rezultatului funcțional al rinichilor conservați marginal la reperfuzia postischemică.

METODE

Toate experimentele au fost efectuate pe rinichi care au fost prelevați de la femele de porci Landrace germane morți (vârsta: 10-12 săptămâni, greutate: 25 și 30 kg). Au fost respectate legea federală privind protecția animalelor și principiile îngrijirii animalelor de laborator (publicația National Institutes of Health (NIH) nr. 85-23, revizuită în 1985). Animalele au fost tratate conform regulilor și după aprobarea autorităților locale.

Rinichii au fost îndepărtați la 20 de minute după oprirea circulației și spălați pe masa din spate cu o greutate de 100 cm cu soluție rece (4 grade) de la Universitatea din Wisconsin până când efluentul a devenit limpede. Nu a fost administrată heparină în niciun moment.

Grefele au fost ulterior depozitate timp de 18 ore într-un pahar umplut cu o soluție de la Universitatea din Wisconsin și o temperatură reglată la 4 grade prin intermediul unui criotermostat.

În grupul de control, rinichii au fost apoi supuși la 2 ore de perfuzie mașină normotermă oxigenată (95% O2; 5% CO2) cu soluție Aqix RS I suplimentată cu 40 g/L albumină serică bovină. După cum sa propus mai devreme, perfuzia 8,9 a fost începută în hipotermie urmată de o creștere graduală până la 35 de grade în primele 60 de minute, controlată de un criotermostat circulant programabil.

În grupul experimental, o perioadă scurtă de hipertermie controlată (CH) a fost inclusă în perfuzia izolată

Tratamentul cu șoc termic ex vivo al grefelor de organe Minor și protocolul von Horn. După ce a atins 35 de grade, temperatura perfuzatului a fost crescută temporar la 43 de grade timp de 10 minute (Figura 1) înainte de continuarea perfuziei la 35 de grade pentru restul perioadei de 2-oră. Timpul și înălțimea creșterii temperaturii au fost obținute din experimentele anterioare de screening incremental care au scopul de a obține un efect consistent.

În trei experimente, presiunea parțială a oxigenului în țesut a fost controlată prin utilizarea unui senzor de oxigen optic tip ac din microfibră, conectat la un contor de oxigen cu fibră optică compensată cu temperatură (Microx 4, PreSens precision sensing, Regensburg, Germania), care simultan a înregistrat temperatura corespunzătoare cu ajutorul unei sonde cu termistor.

Acul a fost plasat în regiunea corticală interioară a rinichiului pentru a documenta oxigenarea adecvată a țesuturilor chiar și în perioadele hipertermice de perfuzie.

Model izolat de reperfuzie renală

Recuperarea renală după leziuni de conservare/reperfuzie a fost evaluată folosind un model de reperfuzie in vitro stabilit, așa cum a fost descris anterior.10

Pe scurt, rinichii au fost spălați la rece cu 100 ml de soluție salină la sfârșitul perioadei de recondiționare a mașinii și apoi ținuți la temperatura camerei timp de 20 de minute pentru a simula a doua perioadă de ischemie caldă în timpul implantării chirurgicale in vivo. Acest timp a fost folosit și pentru canularea ureterului cu un tub mare pentru a permite colectarea urinei la reperfuzie.

Rinichii au fost plasați într-o cameră de plexiglas controlată termostatic și perfuzați prin artera renală la o presiune pulsatilă medie de 90 mmHg. Efluentul venos s-a scurs liber în rezervor. Oxigenarea perfuzatului a fost efectuată cu 95% O2/5% CO2 utilizând un oxigenator cu fibre goale termocontrolat. Presiunea arterială a fost menținută prin intermediul unei pompe cu role servo-controlate în combinație cu un traductor de presiune conectat la canula de perfuzie arterială. Urina a fost colectată din tubul PE introdus în ureter care a fost ghidat spre exteriorul rezervorului. Fiecare 100 ml de urină colectată a fost filtrată și re-infuzată în rezervor pentru

figura 1RenalpO2 țesutului cortical (linia punctată) în timpul perfuziei cu mașina ex vivo în raport cu temperatura respectivă a perfuzatului (linia continuă).

pentru a menține constantă compoziția electrolitică a perfuzatului în timp.

Proceduri analitice

Presiunea parțială a oxigenului și concentrațiile de perfuzat de glucoză și electroliți au fost măsurate într-un analizor pH-gaz din sânge (laboratorul ABL 815flex acid-bază, Radiometer, Copenhaga).

Activitățile enzimatice ale aspartat aminotransferazei (AST) și concentrațiile de creatinină au fost determinate în mod obișnuit prin fotometrie de reflexie pe o unitate de îngrijire Reflotron Plus (Roche Diagnostics, Mannheim, Germania).

Renalclearance-ul a fost calculat pentru intervalele respective ca creatinină urinară × flux urinar/creatinina perfuzată.

Concentrația de albumină în fracția de urină la sfârșitul experimentului a fost măsurată fotometric folosind testul de legare a colorantului cu verde de bromocrezol la centrul de laborator al spitalului universitar și cantitatea de proteină a fost normalizată față de concentrațiile corespunzătoare de creatinina ca albumină urinară. raportul creatininei.

Sarcina filtrată de sodiu (FL Na) a fost calculată ca

FL=GFR × Na

FRNa=(FLNa − Na(urină) ×urineflow)∕FLNa

Sarcina filtrată și reabsorbția fracționată a glucozei au fost calculate în consecință.

Transcriere inversă și reacție ulterioară a polimerazei în lanț

ARN-ul total a fost izolat din probe de țesut congelate rapid din cortexul exterior și analizat așa cum s-a descris anterior.8

Valorile de referință au fost calculate din probe de țesut care au fost prelevate de la vitalrinichiex vivo. Rezultatele au fost cuantificate folosind metoda ΔΔCt. Genele țintă au fost normalizate la gliceraldehidă 3-fosfat dehidrogenază ca standard intern. Valorile expresiei genei de pliere au fost calculate pentru fiecare probă individuală, așa cum a fost normalizat față de valorile de bază.

Următorii primeri (achiziționați de la Qiagen GmbH, Hilden, Germania) au fost utilizați în studiu: gliceraldehidă 3-fosfat dehidrogenază (nr. PPS00192A), HSP72 (nr. PPS00074A), HSP27 (nr. PPS01262) și HO{{ {6}} (nr. PPS01191A).

Western Blot

Imunoblotarea proteinelor a fost efectuată din lizate de celule întregi din exteriorrenalcortexul prin electroforeză pe gel de dodecil sulfat-poliacrilamidă de sodiu și transfer electroforetic pe membrana de nitroceluloză, așa cum s-a descris anterior.8 Colorarea a fost efectuată cu uniformitatea verificată a încărcăturii și transferului proteinelor Ponceau S.

Incubarea cu anticorpi primari a fost efectuată peste noapte la 4 grade (kinaza reglată de semnal extracelular anti-fosfo de iepure (ERK, Thermo Fisher, #MA5-15174—1:500) sau anti HSP 72 (StressMarq Bioscience, #SCM). -100—1:300). După incubarea cu anticorp secundar cuplat cu peroxidază de hrean (1:1,000) timp de 1 oră la temperatura camerei, proteina a fost detectată prin chemiluminiscență îmbunătățită utilizând un C-Digit Blot Scaner (Li-COR).

Cuantificarea conținutului de proteine ​​a fost efectuată densitometric cu gel UN-SCAN-IT versiunea 6.1 (Silk Scientific, Orem UT) normalizat față de expresia ERK totală (Thermo Fisher, #MA5-15174) sau ß-actină (Thermo Fisher). , #PA1-46296).

Statistici

Toate valorile sunt exprimate ca medii ± SD pentru n {{0}} animale per grup și diferențele dintre grupuri au fost testate prin test t nepereche, cu două fețe, utilizând corecția lui Welch pentru variațiile inegale, dacă nu este indicat altfel. Semnificația statistică a fost stabilită la P <>

REZULTATE

Perfuzie la mașină

În timpul încălzirii controlate cu oxigen a grefelor perfuzate de mașină, hipertermia temporară a dus la o scădere tranzitorie vizibilă arenalpO2 a țesutului cortical (Figura 1), care, totuși, a rămas întotdeauna peste 200 mmHg și, prin urmare, a respectat în mod clar cerințele fiziologice în timpul perfuziei normoterme care fuseseră raportate a fi 30–50 mmHg.11,12.

Renaleliberarea de AST în perfuzatul circulant a fost chiar ușor mai mică în grupul cu hipertermie decât în ​​condițiile de control (19,8 ± 12,1 vs. 33,3 ± 25,9 U/L; CH vs. martor, nesemnificativ).

Citirea moleculară a hipertermiei tranzitorii în timpul perfuziei cu mașină ex vivo

Conservarea și reperfuzia duc la o inducere notabilă a HSP chiar și în condiții de control, cu o creștere de ~ 2-, 8- ori chiar și chiar 100- ori a transcriptelor ARNm ale hemoxigenazei 1, HSP 27 , și respectiv HSP 72.

Cu toate acestea, hipertermia tranzitorie controlată în timpul perfuziei automate a îmbunătățit în mod eficient această creștere a inducției genelor cu aproximativ 50 la sută în toate cazurile. Efectul s-a dovedit a fi foarte semnificativ pentru HSP 27, precum și pentru HSP 72, în timp ce nu a putut fi evidențiată o semnificație statistică în ceea ce privește inducerea hemoxigenazei 1 (Figura 2).

Fosforilarea ERK reprezintă un eveniment semnal de protecție rapid și receptiv care poate promova, de asemenea, expresia HSP 72.13

A fost investigat ca repercusiuni precoce a stresului termic asupra nivelului de proteine. Analizele Western blot au arătat că hipertermia tranzitorie în timpul perfuziei cu mașina a îmbunătățit semnificativ cantitatea de fosforilare ERK în țesut în comparație cu grupul de control (Figura 3). În mod corespunzător, expresia proteinei HSP 72 a fost, de asemenea, semnificativ crescută peste valorile de control după hipertermie controlată în timpul perfuziei la aparat.

Hipertermia tranzitorie se amelioreazărenalrecuperare după conservare

Fluxul de perfuzie în timpul reperfuziei a fost în medie între 300 și 400 ml/minut, fără diferențe între cele două

grupuri. Producția de urină a fost, de asemenea, similară în ambele grupuri, cu 897 ± 354 față de 601 ± 280 ml/90 minute (control vs. CH).

Renaleliberarea AST a fost luată ca parametru al leziunii celulare globale și urmată în timpul reperfuziei (Figura 4). Se vede că tratamentul hipertermic a dus la valori inițial mai scăzute la debutul reperfuziei și a atenuat și mai mult creșterea progresivă în timpul perfuziei în curs.

RenalFuncția celulelor tubulare a fost evaluată prin analiza reabsorbției de sodiu și glucoză din ultrafiltrat (Figura 5). S-a constatat că ratele de reabsorbție fracționată de larinichi, supus anterior la hipertermie controlată în timpul perfuziei cu mașina, le-a depășit semnificativ pe cei din grupul de control cu ​​~ 40 la sută.

Pentru a exclude posibilitatea ca controlulrinichiar fi putut fi încărcat cu încărcături absolut mai mari de sodiu sau glucoză în ultrafiltrat, am determinat, de asemenea, sarcina totală de filtrare a ambelor substanțe, care, totuși, nu diferă între cele două grupuri cu FL Na în valoare de 2,7 ± {{3 }}.7 și 2.5 ± 0.8 mmol/minut și FL glu la 24.8 ± 12.1 și respectiv 28.6 ± 9.4 mg/min (control față de CH, respectiv).

Ratele de filtrare glomerulară au fost, de asemenea, echivoce în ambele grupuri; valorile clearance-ului creatininei s-au ridicat la {{0}},25 ± 0.{06 mL/g/minut în grupul de control și la 0,24 ± 0,08 mL/g/minut după CH.

Prin contrast, scurgerile de proteine ​​urinare au fost semnificativ reduse înrinichicare au fost supuse CH (Figura 6).

DISCUŢIE

Utilizarea mașinii de perfuzie ex vivo reprezintă o tendință în evoluție în managementul conservării grefei înainte de transplantul de organe.

În ultimul deceniu, perfuzia cu mașini hipotermice a fost stabilită ca o metodă superioară de conservare în comparație cu depozitarea statică la rece simplă14,15 și a devenit populară pentru conservarea organelor cu risc mai mare, precum și a organelor cu criterii extinse.14–16.

Stimularea pulsatilă a vasculaturii în timpul perioadei extra-corporale17, precum și prezența oxigenului18 s-au dovedit a menținerenalhomeostazie și îmbunătățirefuncţionalrezultate după transplant.

Progresele tehnice recente au favorizat o nouă tendință către perfuzia mașină normotermă ca alternativă mai fiziologică la tehnologiile de perfuzie hipotermică, care compensează cheltuielile mai mari printr-o menținere îmbunătățită a homeostaziei metabolice și o oportunitate mai autentică de a evalua grefa conservată. anterior transplantului.19,20

Dincolo de aceasta, perfuzia mașină normotermă reprezintă o platformă ideală pentru intervenții terapeutice la organul izolat, care poate servi în scopuri de condiționare, având ca scop atenuarea consecințelor prejudiciului premergător de recuperare/conservare sau pentru a precondiționa leziunile ulterioare de reperfuzie după a doua ischemie caldă și reperfuzie la transplant.

cistanche kidney wirkung

S-a constatat că tratamentul cu șoc termic ca abordare terapeutică promovează mecanisme de protecție foarte eficiente la nivelul rinichilor și induce toleranța la insulte specifice prin stabilizarea structurii proteinelor și a integrității celulare. Acest efect se bazează în principal pe sinteza HSP-urilor specifice, care sunt exprimate constitutiv în rinichi și pot fi puternic reglate ca răspuns la o varietate de condiții de stres.4

Acest studiu arată că o scurtă provocare hipertermică în timpul perfuziei renale izolate determină în mod eficient o reacție moleculară de șoc termic, așa cum este evidențiată de pre-transcripție și la nivel de proteine, și activează semnalizarea de supraviețuire prin calea ERK. Prin urmare, procedura descrisă nu a fost asociată cu hipoxia tisulară aparentă, în ciuda perfuziei izolate fără purtători suplimentari de oxigen.

S-a stabilit anterior că inducerea HSP poate începe în < 1 oră21 și că expresia HSP 72 crește la mulțimi deja după 3 ore.22 HSP 70 este cea mai proeminentă însoțitoare care răspunde la stresul hipertermic și joacă un rol esențial. rol în protecția țesuturilor prin creșterea mașinilor de autoapărare celulară.5

HSP 72 previne plierea greșită a proteinelor5, facilitează îndepărtarea proteinelor deteriorate6 și participă la replierea și repararea proteinelor. În sprijinirea proceselor de reparare celulară care sunt mult mai puțin costisitoare decât sinteza de novo. HSP 72 reduce astfel nevoile metabolice în timpul situației critice la reperfuzie după leziuni celulare21 și, prin urmare, ajutărecuperare celularădin insultă.

Stabilizarea membranelor lizozomale23 reduce leziunea celulară de către hidrolazele acide și inducerea consecutivă a morții celulare. La nivel molecular, studiile anterioare indică faptul că HSP 72 activează calea MEK/Erk, iar efectul protector relevant este legat de fosforilarea Raf, MEK și Erk și de supraviețuirea celulară.24,25 În consecință, în modelul nostru, CH a condus la o creștere semnificativă. reducerea eliberării globale de AST, care a fost luată ca parametru al daunelor celulare generale. Mai mult, creșterea progresivă a AST în timpul reperfuziei în curs a fost, de asemenea, atenuată în mod semnificativ de tratament.

Odată cu aceasta a mers o atenuare semnificativă adisfuncție renalădeoarece capacitatea de reabsorbție a celulelor tubulare a fost crescută cu ~ 50% față de valorile de control.

HSP 27 este un HSP cu greutate moleculară mică, care s-a dovedit, de asemenea, a fi un jucător important în răspunsul protector la șoc termic în rinichi.4 Studiile asupra celulelor tubulare de șobolan arată că acumularea de HSP 27 în celulele tubulare proximale este asociată cu supraviețuire crescută și regenerare.26

Pe baza rezultatelor studiului pilot prezent, implementarea unei scurte provocări hipertermice în protocolul de perfuzie ex vivo pare a fi o modalitate ușoară de a condiționa grefele de rinichi conservate marginal, care promovează rezistența la leziunile de reperfuzie prin îmbunătățirea autoapărării celulare. utilaje. Controversa există încă dacă perfuzia automată ar trebui făcută în avans, imediat după procurarea grefei27, în ciuda inconvenientelor logistice, sau dacă o perioadă scurtă de perfuzie final-ischemică după transportul organului prin depozitare la rece statică ar fi suficientă și mai ușor de implementat în rutina clinică.28,29 Condiționarea ex vivo a grefei de către CH ar fi posibilă în oricare dintre modalități.

Cu toate acestea, trebuie luată precauție în ceea ce privește concluziile finale premature. Rinichiul izolat perfuzat (IPK) este un instrument util pentru studiile de screening funcțional30, iar corelațiile dintre datele IPK și rezultatele clinice fac din modelul IPK un instrument potențial util pentru evaluarea funcției renale.17,31 Cu toate acestea, capacitatea funcțională destul de constantă a modelului este limitat la câteva ore,32 ceea ce exclude observațiile pe termen lung.

Întrucât o expresie maximă a HSP-urilor poate apărea încă dincolo de acest timp22, o potențială creștere suplimentară a efectului protector al tratamentului hipertermic (de exemplu, în ceea ce privește regenerarea îmbunătățită după insulta ischemică) nu va fi luată în considerare în configurația noastră pilot. Mai mult, este bine cunoscut din studiile anterioare din alte modele că tratamentul cu șoc termic sau supraexprimarea HSP 27 indusă de lentiviral poate duce la atenuarea reactivității inflamatorii a organelor țintă lezate.

împreună cu o reducere semnificativă a infiltraţiei neutrofile în ţesut.33,34

Infiltrarea leucocitelor, la rândul său, este cunoscută a fi un fenomen de tip acut principal care declanșează reacții inflamatorii vătămătoare după ischemia renală și reperfuzia in vivo.

Cu toate acestea, pentru a exclude efectele adverse concomitente ale activării celulelor sanguine pe suprafețele tubulare artificiale, care ar fi inevitabile într-un model in vitro extins, transplantul efectiv și reperfuzia în condiții fiziologice, inclusiv morfologia vaselor naturale, par a fi obligatorii pentru a aborda cu exactitate celulele celulare. efectele inflamatorii, care, prin urmare, nu au fost abordate în prezenta investigație pilot.

În cele din urmă, descoperirile recente s-au dovedit substanțialediferențe de sexîn transcrierile exprimate în celulele tubulare proximale ale masculilor față de femele, care pot reflecta diferențe legate de sex în boala renală cronică sau modulele genelor proinflamatorii.35 În studiul nostru, au fost utilizate numai animale de sex feminin, eludând astfel disparitățile presupuse legate de sex în reacții de șoc termic. Pe de altă parte, un eventual comportament diferit al țesutului masculin nu a fost abordat și, prin urmare, nu poate fi luat în considerare în acest studiu.

În concluzie, datele noastre de până acum arată că perfuzia ex vivo hipertermică scurtă este o modalitate ușoară de inducere a însoțitorilor în grefa renală izolată care conferă protecție parenchimatosă la reperfuzia precoce și justifică confirmarea suplimentară folosind modele de transplant in vivo cu timpi de observare prelungi.

Mulțumiri. Autorii recunosc cu recunoștință pentru ajutorul tehnic valoros al lui Bastian și al Reginei Lüer.

Finanțarea. Nu s-a primit nicio finanțare pentru această lucrare.

Conflict de interese. Autorii nu au declarat interese concurente în această lucrare.

Contribuții ale autorului. TM și CvH au scris manuscrisul. TM și CvH au conceput cercetarea. TM și CvH au efectuat cercetarea. TM și CvH au analizat datele.