Studiu asupra specificației optime a pieselor Herba Cistanches Fuju
Aug 19, 2024
Cistanche deserticola a fost înregistrată pentru prima dată în Shennong's Herbal Classic. Are efecte deyang rinichi hrănitor, reumplerea esenței și sângelui și umezirea intestinelor șiameliorarea constipatiei. A fost folosit în practica clinică ca atonic medicina chineza. Ediția din 2020 a Farmacopeei Republicii Populare Chineze (denumită în continuare „Farmacopeea Chineză”) prevede că Cistanche deserticola este derivată din tulpinile cărnoase uscate cu frunze solzoase ale Cistanche deserticola sau Cistanche tubulosa, plante din familia Orobanchaceae. Specificațiile materialelor medicinale Cistanche deserticola sunt de obicei de 2 până la 8 cm în diametru și 3 până la 15 cm în lungime.
Conform „Regulilor generale de prelucrare 0213” din Farmacopeea Chineză, Cistanche deserticola este formată în felii groase neregulate în timpul procesului de prelucrare, cu o grosime de 2 până la 4 mm. Majoritatea feliilor de Cistanche deserticola tăiate sunt felii mari groase, cu un diametru de 2 până la 8 cm și o grosime de 2 până la 4 mm [1].
EXTRACT DE TUBULOSA DE CISTANCHE DE INALTA CALITATE DE VANZAT
Această bucată tradițională de decoct are dimensiuni neuniforme și are o mare diferență de calitate. Este dificil de controlat în timpul ajustării clinice. În plus, ingredientele eficiente sunt greu de dizolvat uniform în timpul decoctului, rezultând o diferență mare în calitatea fiecărui decoct.
În plus, studii relevante au raportat că conținutul de compoziție chimică a diferitelor părți de Cistanche deserticola este destul de diferit și capacitatea diferitelor părți de a elimina radicalii liberi 1,1-difenil-2-trinitrofenilhidrazină (DPPH) în vitro este, de asemenea, diferit [2], ceea ce face dificilă garantarea eficacității clinice a feliilor tradiționale de Cistanche deserticola. Printre metodele de îmbunătățire a eficacității clinice, feliile de medicină chineză sunt un fel de felii moștenite și inovatoare care urmează teoria medicinei tradiționale chineze și metodele de prelucrare a medicinei tradiționale chineze, selectează materiale medicinale de înaltă calitate din sursă și sunt procesate și procesate cu caracteristici speciale. Au o rată de utilizare ridicată, o calitate uniformă, o eficacitate stabilă și sunt ușor de ajustat și pregătit. Ele păstrează caracteristicile de identificare ale feliilor tradiționale.
Mărimea feliilor de medicină chineză este clasificată în principal în funcție de partea medicinală a materialului medicinal, de caracteristicile texturii și de aplicarea clinică [3]. De exemplu, specificațiile feliilor tradiționale sunt descrise ca „ca boabele de soia”, „ca fasolea ma”, „pulbere grosieră”, etc. [4].
Cistanche deserticola este un material medicinal special de tulpină cărnoasă. După uscare, materialul medicinal este mare și lung. Este potrivit pentru a fi tăiat în bucăți sau cubulețe folosind tehnologia modernă de tăiere, care poate nu numai să îmbunătățească rata de utilizare a Cistanche deserticola și să uniformizeze calitatea acestuia, dar și să păstreze caracteristicile de identificare ale pieselor medicinale tradiționale. Acest studiu folosește bucăți medicinale tradiționale de Cistanche deserticola ca punte și mestecă Cistanche deserticola în bucăți și blocuri de diferite specificații. Cele mai bune specificații ale pieselor medicinale mestecate de Cistanche deserticola sunt optimizate pe baza proprietăților piesei medicinale, unghiul de repaus, rata decoctului și rata de transfer a verbascozidei și echinacozidei ca indicatori de evaluare. În același timp, se compară uniformitatea și consistența atributelor de calitate ale pieselor medicinale tradiționale și ale pieselor medicinale mestecate, pentru a oferi o referință pentru selecția caietului de sarcini și prelucrarea și producerea pieselor medicinale mestecate Cistanche deserticola.
1 Material
1.1 Instrumente
Thermo U3000 HPLC; Coloană cromatografică XBridge C18 (250,0 mm × 4,6 mm, 5μm); Seria SQW CNC de tăiat medicamente alternativ (Kanghua Pharmaceutical Machinery Co., Ltd.); Moara de tăiere de tip AM300S (Ant Source Scientific Instrument Co., Ltd.); Aparat de curățat cu ultrasunete inteligent de tip DL-60J (Shanghai May Instrument Co., Ltd.); Aparat electric cu abur de tip QM-Q5-H30DW (Changsha Quanmin Electric Co., Ltd.); Balanță analitică electronică de tip MS204S de zece miimi (Mettler Toledo); Balanță electronică de tip XPE26 miliona (Mettler Toledo).
1.2 Testați medicamente
Substanță de referință echinacozidă (Institutul de Inspecție pentru Alimente și Medicamente din China, număr de lot 111670-201907, puritate 91,80%), substanță de referință verbascozidă (Institutul de Inspecție pentru Alimente și Medicamente din China, număr de lot 111530-201914, puritate 95,2%), metanol ( grad cromatografic); Wahaha apa purificata; alți reactivi sunt de grad analitic.
Materialele medicinale Cistanche deserticola au fost colectate de echipa de cercetare din Alxa, Mongolia Interioară, Bayannur, Mongolia Interioară și Jiuquan, Gansu și au fost identificate drept tulpini cărnoase uscate cu frunze de solzi de Cistanche deserticola de către profesorul Liu Shoujin de la Universitatea Anhui de Chineză Tradițională. Medicament.
2 Metode
2.1 Metoda de preparare a probei
Cistanche deserticola a fost împărțită în 7 porții, fiecare cântărind aproximativ 500 g. Impuritățile au fost îndepărtate, feliile au fost spălate, iar amestecul a fost înmuiat. Feliile au fost tăiate în felii tradiționale și felii groase de 2- până la 4- mm. Feliile grosime de 2- până la 4-mm au fost tăiate în fire cu lățimea de 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm și 4 mm × 4 mm și cuburi cu lungimi laterale de 5 mm , 8 mm și, respectiv, 10 mm.
2.2 Determinarea componentelor principale
Conform Farmacopeei Chineze, cele două componente ale feniletanolglicozidelor reprezentative, verbascozida și echinacozida, au fost utilizate ca indicatori pentru determinare [1].
2.2.1 Condiții cromatografice și test de adecvare a sistemului
Ca umplutură a fost utilizat silicagel legat cu octadecilsilan; metanolul a fost utilizat ca fază mobilă A și soluția de acid formic 0,1% a fost utilizată ca fază mobilă B. Eluarea cu gradient a fost efectuată conform cerințelor din Tabelul 1; lungimea de undă de detecție a fost de 330 nm. Numărul de plăci teoretice calculat pe baza vârfului echinacozidului nu trebuie să fie mai mic de 3000. Spectrul HPLC este prezentat în Figura 1.
2 Metode
2.1 Metoda de preparare a probei
Materialul medicinal Cistanche deserticola a fost împărțit în 7 porții, fiecare de aproximativ 500 g, și s-au îndepărtat impuritățile. Materialul a fost spălat și umezit, apoi tăiat în felii tradiționale și felii feliate. Feliile tradiționale erau în principal felii groase de 2-4 mm, iar feliile feliate au fost tăiate în filamente cu o lățime × grosime de 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm și 4 mm × 4 mm și cuburi cu lungimi laterale de 5 mm, 8 mm și, respectiv, 10 mm.
2.2 Determinarea componentelor principale
S-a făcut referire la Farmacopeea Chineză, iar cele două componente, verbascozidă și echinacozidă, care erau componente reprezentative ale glicozidelor de feniletanol, au fost utilizate ca indicatori pentru determinare [1].
2.2.1 Condiții cromatografice și test de adecvare a sistemului
Ca umplutură a fost folosit silicagel legat cu octadecilsilan; metanolul a fost utilizat ca fază mobilă A, iar soluția de acid formic 0,1% a fost utilizată ca fază mobilă B. Eluarea cu gradient a fost efectuată conform prevederilor din Tabelul 1; lungimea de undă de detecție a fost de 330 nm. Numărul teoretic al plăcii calculat pe baza vârfului echinacozidului nu trebuie să fie mai mic de 3000. Spectrul HPLC este prezentat în Figura 1.
Figura 1 Cromatograme HPLC ale echinacozidelor și verbascozidelor de referință și probe de testare
2.2.2 Prepararea soluției de referință
Luați cantitățile adecvate de referință de echinacozidă și referință de verbascozidă, cântăriți cu precizie și adăugați soluție de metanol 50% pentru a obține o soluție mixtă de 1 ml care conține 0,2 mg de echinacozidă și, respectiv, verbascozidă.
2.2.3 Prepararea soluției de testare
Se ia aproximativ 1 g de pulbere din acest produs (trecut prin sita nr. 4), se cântărește cu precizie, se pune într-un balon cotat maro de 100 ml, se adaugă cu precizie 50 ml soluție de metanol 50%, se oprește, se agită bine, cântăriți-l, înmuiați-l timp de 30 de minute, tratați-l cu ultrasunete timp de 40 de minute (putere: 250 W, frecvență: 35 kHz), lăsați-l să se răcească, cântăriți-l din nou, adăugați soluție de metanol 50% pentru a compensa greutatea pierdută, agitați-l bine, se lasa sa stea, se ia supernatantul, se filtreaza si se ia filtratul pentru a-l obtine.
2.2.4 Investigarea relațiilor liniare
Aspirați cu precizie {{0}}.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 mL de soluție de referință de verbascozidă , puneți în baloane cotate de {{10}} mL și adăugați metanol la cântar. Aspirați cu precizie 0.1, 0}.2, 0.5, 1.0, 2.0 ml de soluție de referință de echinacozidă, puneți în baloane cotate de 5 10 ml și adăugați 50% soluție de metanol la scară, măsurați conform metodei „2.2.1” și înregistrați zona vârfului corespunzătoare.
2.2.5 Test de precizie
Aspirați cu precizie soluțiile de referință de verbascozidă și echinacozidă, injectați de 6 ori continuu și măsurați RSD-ul zonelor de vârf ale verbascozidei și echinacozidei.
2.2.6 Test de stabilitate
Aspirați cu precizie aceeași soluție de testare și măsurați-o conform metodei de la „2.2.1”. Măsurați-l o dată la 4 ore și testați-l timp de 24 de ore. Calculați RSD-ul ariei de vârf a verbascozidei și echinacozidei.
2.2.7 Test de repetabilitate
Conform metodei de preparare a soluției de testare, se prepară 6 soluții de testare, respectiv se măsoară conform metodei „2.2.1” și se calculează RSD-ul lor în funcție de aria de vârf a verbascozidei și echinacozidei.
2.2.8 Test de recuperare a probei
Se cântăresc cu precizie 6 soluții de testare cu conținut cunoscut de verbascozidă și echinacozidă, se adaugă 1 ml de soluție de referință de verbascozidă și, respectiv, soluție de referință de echinacozidă, se măsoară conform metodei „2.2.1” și se calculează rata de recuperare.
2.2.9 Determinarea unghiului de repaus
Utilizați metoda de înclinare. Umpleți o cutie dreptunghiulară cu materialul medicinal până la un grad moderat de slăbire și înclinați treptat cutia până când pulberea începe să curgă. Unghiul de înclinare este unghiul de repaus. Fie înălțimea unghiului de înclinare H și partea inferioară L. Formula pentru calcularea unghiului de repaus θ este:
tanθ=H/L
2.2.10 Determinarea ratei decoctului
Se iau 50 g felii de Cistanche deserticola, se pun într-un balon cu fund rotund de 1000 ml, se adaugă de 10 ori cantitatea de apă, se înmoaie timp de 30 min, se decoctează 45 min, se filtrează cu pânză filtrantă de 200 ochiuri cât timp este fierbinte, se adaugă de 8 ori cantitatea de apă până la reziduu, se decoctează timp de 30 de minute, se filtrează cu pânză de filtru de 200 de ochiuri cât timp este fierbinte, se combină filtratul; se concentrează sub presiune redusă (60 de grade) pentru a extrage, se liofilizează pentru a obține pulbere liofilizată de Cistanche deserticola și se calculează rata de decoct conform următoarei formule [5]:
Unde, Y este rata decoctului; Wa este greutatea pulberii liofilizate; Wb este greutatea feliilor.
2.2.11 Determinarea ratei de transfer
Conform condițiilor cromatografice de la „2.1.1”, s-au determinat fracțiile de masă de verbascozidă și echinacozidă în felii și pulberea liofilizată de Cistanche deserticola, iar viteza de transfer a fost calculată după următoarea formulă:
Unde, Z este rata de transfer; Wc este fracția de masă a verbascozidei și echinacozidei în pulbere liofilizată; Wd este fracția de masă a verbascozidei și echinacozidei din felii.
2.2.12 Indicatori de observare
Randamentul extractului, rata totală de transfer al verbascozidei și echinacozidei cu diferite specificații ale feliilor 㕮抽 și feliilor tradiționale au fost înregistrate, iar rata de decoct, rata totală de transfer al verbascozidei și echinacozidei au fost evaluate prin metoda de punctare ponderată. Coeficientul de greutate al determinării ratei de decoct a fost {{0}},5, iar coeficientul de greutate al ratei de transfer total de verbascozid și echinacozid a fost de 0,5.
3 Rezultate și analiză
3.1 Rezultatele investigației metodologice a determinării componentelor principale
Folosind condițiile cromatografice din „2.2.1”, separarea cromatografică a verbascozidei și echinacozidei a fost mai mare de 1,5. Rezultatele investigației metodologice sunt prezentate în Tabelul 2. Această metodă are o bună precizie, stabilitate, repetabilitate, viteză de recuperare și efect de separare și poate fi utilizată pentru a determina conținutul de echinacozidă și verbascozidă în feliile de Cistanche deserticola și pulberea liofilizată.
Tabelul 3 Rezultatele testelor ale proprietăților diferitelor specificații ale feliilor de Cistanche deserticola (Cistanche deserticola)
3.3 Analiza rezultatelor diferitelor specificații ale bucăților tradiționale de decoct și ale bucăților de decoct Yuzui și selecția specificațiilor Yuzui
Din Tabelul 4 se poate observa că unghiurile de repaus ale diferitelor dimensiuni ale bucăților mestecate sunt mai mici decât cele ale pieselor tradiționale. Cu cât bucățile mestecate sunt mai mici, cu atât unghiul de repaus este mai mic. Cubul de 5 mm are cel mai mic unghi de repaus la 30 de grade, urmat de cubul de 8 mm la 31,2 grade, iar alte specificații sunt mai mari de 35 de grade.
În comparație cu bucățile tradiționale, cu cât dimensiunile bucăților sunt mai mici, cu atât rata decoctului este mai mare. Când dimensiunea este de 2 mm × 2 mm, rata de decoct este cea mai mare, 63,61%, 2 mm × 4 mm, 60,33%, urmată de cuburi de 5 mm. Pentru piese, este de 60,18%, iar alte specificații sunt mai mici de 60%. Când dimensiunea mestecatului este de 8 mm cuburi, este practic aceeași cu piesele tradiționale. Nu a existat un model semnificativ în conținutul total de verbascozidă și echinaceea în bucăți de decoct, conținutul total de verbascozidă și echinaceea în pulbere liofilizată și rata de transfer.
Spre deosebire de urmărirea unei rate mai mari a pastei uscate și a cantității de decoct de ingrediente active în bucățile de decoct fierte și pudră [6], principiul menținerii ratei de decoct și a ratei de transfer a bucăților de decoct Erzui este în concordanță cu cel al bucăților tradiționale de decoct. Metoda de scor ponderat a fost utilizată pentru a compara rata decoctului și rata totală de transfer a verbascozidei și echinaceei între diferite specificații. Rezultatele au arătat că scorul total al pieselor de dimensiunea unui cub de 8 mm a fost în concordanță cu cel al pieselor tradiționale. Prin urmare, această specificație poate fi folosită ca cea mai bună specificație pentru piesele Cistanche deserticola nuzui.
3.4 Analiza comparativă a uniformității calității feliilor tradiționale și 㕮嘴
Același lot de felii tradiționale și 㕮嘴 au fost prelevate aleatoriu de 7 ori conform ajustării clinice a 7 seturi ca curs de tratament și au fost comparate umiditatea, rata decoctului, conținutul total de verbascozidă și echinacozidă și rata de transfer a celor 7 felii. . După cum se arată în Tabelul 5, valorile RSD ale umidității, rata decoctului, conținutul total de verbascozidă și echinacozidă și rata de transfer ale celor 7 felii tradiționale au fost mai mari decât cele ale feliilor 㕮嘴, iar valorile RSD ale feliilor 㕮嘴 au fost toate sub 2%. Se poate observa că uniformitatea bucăților de 8 mm cubi de Cistanche deserticola 㕮嘴 felii este mai bună decât cea a feliilor tradiționale.
3.5 Comparația evaluării consistenței calității feliilor tradiționale și 㕮嘴
Pentru a permite feliilor 㕮嘴 să poarte atributele de calitate ale feliilor din medicina chineză, cum ar fi siguranța și eficacitatea, decoctul standard preparat din felii tradiționale a fost folosit ca punte pentru a efectua evaluarea consistenței calității feliilor 㕮嘴 și a feliilor tradiționale. Prin cercetare textuală pe bază de plante, cercetare literatură, zona de producție și cercetarea pieței, s-au determinat zona de producție autentică și zona principală de producție a Cistanche deserticola, iar apoi au fost recoltate probe. În fiecare zonă de producție au fost colectate nu mai puțin de 3 loturi de probe și au fost colectate în total 15 loturi. Diferite loturi de Cistanche deserticola au fost procesate în felii tradiționale și felii de 㕮 jiu și s-au determinat randamentul feliei, rata decoctului și rata de transfer de verbascozid și echinacozid.
După cum se arată în Tabelul 6, randamentul a 15 loturi de felii tradiționale a fost între 95,1% și 98,00%, cu o medie de 96,54%, rata decoctului a fost între 48,34% și 61,88%, cu o medie de 55,93%, iar rata de transfer a fost între 43,5% și 84,30%, cu o medie de 65,88%. Randamentul a 15 loturi de felii decoctate a variat de la 81,80% la 97,70%, cu o medie de 91,40%, rata decoctului a variat de la 52,20% la 59,39%, cu o medie de 58,46%, iar rata de transfer a variat de la 60,5% 72,80%, cu o medie de 8,15%. Se poate observa că atributele de calitate ale bucăților de 8 mm cubi de Cistanche deserticola decoctate sunt relativ în concordanță cu cele ale feliilor tradiționale.
3.4 Analiza comparativă a uniformității calității feliilor tradiționale și 㕮嘴
Același lot de felii tradiționale și 㕮嘴 au fost prelevate aleatoriu de 7 ori conform ajustării clinice a 7 seturi ca curs de tratament și au fost comparate umiditatea, rata decoctului, conținutul total de verbascozidă și echinacozidă și rata de transfer a celor 7 felii. . După cum se arată în Tabelul 5, valorile RSD ale umidității, rata decoctului, conținutul total de verbascozidă și echinacozidă și rata de transfer ale celor 7 felii tradiționale au fost mai mari decât cele ale feliilor 㕮嘴, iar valorile RSD ale feliilor 㕮嘴 au fost toate sub 2%. Se poate observa că uniformitatea bucăților de 8 mm cubi de Cistanche deserticola 㕮嘴 felii este mai bună decât cea a feliilor tradiționale.
3.5 Comparația evaluării consistenței calității feliilor tradiționale și 㕮嘴
Pentru a permite feliilor 㕮嘴 să poarte atributele de calitate ale feliilor din medicina chineză, cum ar fi siguranța și eficacitatea, decoctul standard preparat din felii tradiționale a fost folosit ca punte pentru a efectua evaluarea consistenței calității feliilor 㕮嘴 și a feliilor tradiționale. Prin cercetare textuală pe bază de plante, cercetare literatură, zona de producție și cercetarea pieței, s-au determinat zona de producție autentică și zona principală de producție a Cistanche deserticola, iar apoi au fost recoltate probe. În fiecare zonă de producție au fost colectate nu mai puțin de 3 loturi de probe și au fost colectate în total 15 loturi. Diferite loturi de Cistanche deserticola au fost procesate în felii tradiționale și felii de 㕮 jiu și s-au determinat randamentul feliei, rata decoctului și rata de transfer de verbascozid și echinacozid.
După cum se arată în Tabelul 6, randamentul a 15 loturi de felii tradiționale a fost între 95,1% și 98,00%, cu o medie de 96,54%, rata decoctului a fost între 48,34% și 61,88%, cu o medie de 55,93%, iar rata de transfer a fost între 43,5% și 84,30%, cu o medie de 65,88%. Randamentul a 15 loturi de felii decoctate a variat de la 81,80% la 97,70%, cu o medie de 91,40%, rata decoctului a variat de la 52,20% la 59,39%, cu o medie de 58,46%, iar rata de transfer a variat de la 60,5% 72,80%, cu o medie de 8,15%. Se poate observa că atributele de calitate ale bucăților de 8 mm cubi de Cistanche deserticola decoctate sunt relativ în concordanță cu cele ale feliilor tradiționale.
