Efectul terapeutic al Cistanche Deserticola asupra defecației la modelul șobolanului cu constipație senilă
Mar 27, 2022
A lua legatura:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Abstract
FUNDAL
Constipația este una dintre bolile funcționale gastro-intestinale cronice. Afectează grav calitatea vieții. Cistanche deserticola (C. deserticola) poate trata evident constipatia, dar mecanismul ei nu a fost clarificat. Am presupus că mecanismul acestuia a îmbunătățit motilitatea intestinală prin stimularea celulelor Cajal interstițiale (ICC). Activarea receptorului C-kit de pe suprafața ICC este strâns legată de funcția ICC, iar căile de semnalizare a factorului celulelor stem (SCF)/C-kit joacă un rol important în aceasta. Pentru a investiga mecanismul modului în care C. deserticola tratează constipația, acest studiu și-a propus să stabilească un model de constipație la șobolani și să exploreze rolul căii de semnalizare SCF/C-kit în tratament.
SCOP
Pentru a explora căile de semnalizare SCF/C-kit în rolul C. deserticola de tratare a constipației printr-un model de șobolan constipație.
METODE
Patruzeci și opt de șobolani Sprague-Dawley de 8-luni au fost împărțiți în 4 grupuri prin metoda greutății aleatorii: grup normal (n=12), grup model (n=12), grup C. deserticola (n=12) și grupul de blocare (n=12). Grupul normal a primit ser fiziologic normal prin gavaj; grupul model a primit loperamidă prin gavaj; grupul blocant a primit loperamidă și C. deserticola prin gavaj, iar STI571 a fost injectat intraperitoneal. În timpul tratamentului, greutatea, granulele fecale și calitatea fecalei au fost înregistrate la fiecare 10 zile. În ziua 20 după inducția modelului, țesuturile de colon ale fiecărui grup au fost îndepărtate. Colorația cu hematoxilină și eozină a fost utilizată pentru a observa modificări patologice. Nivelurile de expresie ale genelor SCF, C-kit și Aquaporin au fost detectate prin imunohistochimie, western blot și reacție cantitativă în lanț a polimerazei în timp real. Mitocondriile epiteliale ale colonului și celulele caliciforme au fost observate prin microscopie electronică cu transmisie.
REZULTATE
În comparație cu grupul normal, pe măsură ce tratamentul a progresat, greutatea șobolanilor din grupele model și blocante a scăzut semnificativ, greutatea scaunului a scăzut și calitatea scaunului a fost uscată (P < {{0}}.{{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" a="" inversat="" scăderea="" greutății="" corporale="" și="" a="" scaunului="" și="" a="" îmbunătățit="" calitatea="" scaunului.="" analiza="" histopatologică="" a="" indicat="" că="" epiteliul="" mucoasei="" colonului="" din="" grupul="" model="" a="" fost="" incomplet,="" iar="" aranjamentul="" glandelor="" a="" fost="" neregulat="" sau="" deteriorat.="" tratamentul="" cu="" c.="" deserticola="" a="" îmbunătățit="" integritatea="" și="" continuitatea="" celulelor="" epiteliale="" și="" aranjarea="" regulată="" a="" glandelor.="" agenții="" de="" blocare="" au="" inhibat="" efectele="" c.="" deserticola="" imunohistochimia="" și="" reacția="" cantitativă="" în="" lanț="" a="" polimerazei="" în="" timp="" real="" a="" arătat="" că="" expresia="" scf="" și="" a="" proteinei="" c-kit="" sau="" a="" genelor="" în="" țesutul="" colonic="" al="" grupului="" model="" a="" fost="" scăzută="" (p=""><0,05), în="" timp="" ce="" tratamentul="" cu="" c.="" deserticola="" a="" crescut="" expresia="" proteinei="" sau="" a="" genei="" (p="">< 0,05).="" western="" blotting="" a="" arătat="" că="" expresia="" acvaporinei="" apq3="" a="" fost="" crescută,="" în="" timp="" ce="" expresia="" cx43="" a="" scăzut="" în="" grupul="" model.="" tratamentul="" cu="" c.="" deserticola="" a="" inhibat="" expresia="" apq3="" și="" a="" promovat="" expresia="" cx43.="" microscopia="" electronică="" cu="" transmisie="" a="" arătat="" că="" mitocondriile="" epiteliului="" colonic="" din="" grupul="" model="" erau="" umflate="" și="" dispuse="" dezordonat,="" iar="" microvilozitățile="" erau="" rare.="" starea="" a="" fost="" mai="" bună="" la="" grupul="" c.="" deserticola.="" șoarecii="" tratați="" cu="" blocant="" sti571="" au="" confirmat="" că="" blocarea="" căii="" scf/c-kit="" a="" inhibat="" îmbunătățirea="" constipației="" de="" către="" c.="">
CONCLUZIE
C. deserticola a îmbunătățit defecarea la șobolanii cu constipație, iar calea de semnalizare SCF/C-kit, care este o legătură cheie a funcției ICC, a jucat un rol important în tratament.
Cuvinte cheie:Cistanche deserticola; Constipație senilă; Factori de celule stem; C-kit
materie prima cistanche proaspata
INTRODUCERE
Constipația senilă (SC) este una dintre bolile funcționale gastrointestinale cronice frecvente la pacienții geriatrici, care induce sau agravează evenimentele cerebrovasculare și alte boli și afectează grav calitatea vieții populației în vârstă[1,2].Conform medicinei tradiționale chineze, principalul etiologia și patogeneza SCare căldura gastro-intestinală, deficiența de Yin și Jin și de-umedarea intestinală[3,4], în timp ce Cistanche deserticola (C. deserticola) poate încălzi rinichii și relaxa intestinele. Cercetătorii au raportat că efectul intestinal Îmbunătățirea motilității și tratamentul SC sunt clare, dar mecanismul său nu a fost clarificat[5,6]. Celulele Cajal interstițiale (ICC) sunt un tip special de celule mezenchimale din tractul gastrointestinal. Activarea receptorului C-kit de pe suprafața ICC-urilor este strâns legată de proliferarea, diferențierea și funcționarea celulelor. ICC participă la patogeneza multor disfuncții motorii gastrointestinale [7,8]. Activarea C-kitului depinde de legarea factorului său de celule stem ligand (SCF) [9]. Pentru a investiga efectul și mecanismul de acțiune al C. deserticola pe SC, acest studiu și-a propus să stabilească un model SC la șobolani indus de loperidol pentru a explora rolul căii de semnalizare SCF/C-kit în tratamentul constipației de către C. deserticola.
MATERIALE ȘI METODE
Materiale experimentale
Animale experimentale:Animalele experimentale au fost 48 de șobolani Sprague Dawley masculi de 8-luni cântărind 500-550 g; toate achiziționate de la Changsha Tianqin BiotechnologyCo. Ltd. Șobolanii au fost crescuți în laboratorul de animale Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., având lumină normală de zi și noapte, mâncare și băutură. Toate procedurile au respectat instrucțiunile de management emise de Comitetul de etică al Spitalului de Medicină Tradițională Chineză Chongqing.
Reactivi primari:Reactivii primari au inclus loperamida (Sigma, St. Louis, MO, Statele Unite), C. deserticola de la Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine DecoctionCo. Ltd., STI571 de la Chinese Selleck Co. Ltd. și SCF, C-kit, connexin 43 (Cx43), aquaporin 3 (AQP3) și anticorpi -actin (Abcam, Cambridge, MA, Statele Unite), PrimeScript II 1st Strand cDNA Kit de sinteză și Premix Taq™ (Ex Taq™ Versiunea 2.0) (Takara Co. Ltd., Japonia).
suplimente cu extract de ierburi de cistanche
Metode
Pregatirea si gruparea modelului SC:Pentru a evita influența factorilor de confuzie, cum ar fi greutatea corporală asupra rezultatelor experimentale, șobolanii au fost grupați aleatoriu prin metoda de grupare aleatorie bloc. Patruzeci și opt de șobolani au fost hrăniți adaptiv timp de 1 săptămână, iar șobolanii au fost numerotați în ordinea greutății de la ușor la greu. În funcție de ordinea greutății corporale, șobolanii au fost împărțiți în 12 zone (greutatea șobolanilor în fiecare zonă a fost similară), cu 4 șobolani în fiecare zonă. Cele 12 zone au fost împărțite în 4 grupuri de 12 (normal, model, C. deserticola și blocant). Șobolanii din grupul model au primit loperamidă (0.0625/100 g, 1{0 mL/kg) prin gavaj. Prima doză de gavaj a fost dublată, iar medicamentul a fost administrat la ora 10:00 în fiecare zi, o dată pe zi, timp de 20 de zile consecutive. Grupului normal i s-a administrat aceeași cantitate de soluție salină normală prin gavaj. în plus, grupul model a fost tratat cu C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 ml/kg) prin gavaj. Grupului blocant i s-a administrat C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 mL/kg) prin gavaj și STI571 (25 mg/mL, 1 mL/kg) prin injecție intraperitoneală. În timpul experimentului, greutatea corporală, greutatea scaunului și starea scaunului au fost înregistrate la fiecare 10 zile. La niciunul dintre șobolani nu a avut loc nicio moarte accidentală. Douăzeci de zile mai târziu, șobolanii au fost uciși și țesutul colonic a fost îndepărtat pentru examinare și conservare a azotului lichid. Părțile rămase au fost fixate și încorporate.
Analiza histopatologica:Șobolanii ținuți peste noapte au fost anesteziați prin injecție intraperitoneală cu 7% hidrat de clor (5 ml/kg) în ziua următoare. Abdomenul a fost deschis pentru a separa țesutul colonic și 8-10 mm din colon a fost îndepărtat. Conținutul intestinal a fost îndepărtat prin agitare ușoară în polibutilenuccinat prerăcit și fixat timp de 24 de ore într-o soluție de fixare de paraformaldehidă 4%. S-a realizat încorporarea convențională de parafină. Secțiunile de țesut (5 μm) au fost îndepărtate pentru colorarea cu hematoxilină și eozină, iar morfologia histopatologică a fost observată la microscop.
Detectarea expresiei SCF și C-kit prin colorare imunohistochimică:Țesuturile de parafină examinate prin histopatologie de mai sus au fost secționate, rehidratate cu etanol gradient deparafinat cu xilen secționat, antigenul remediat prin căldură și etanșat timp de 1 oră cu ser de capră la temperatura camerei. Anticorpii primari SCF și C-kit au fost adăugați în picături, iar țesuturile au fost păstrate peste noapte la 4 grade. După clătire cu polibutilensuccinat, peroxidaza de hrean a fost picurată pentru a marca anticorpul secundar, clătită cu polibutilen succinat timp de 5 minute, picătură 2,4-soluție cromogenă de acid diaminobutiric, re-vopsire cu hematoxilină, deshidratare cu alcool în gradient invers, transparentizat cu xil sigiliu din rășină. Din punct de vedere microscopic, nucleele au fost de culoare violet-albastru, iar produsele rezultate pozitive au fost particule galben-maronie sau galbene.
Detectarea exprimării ARNm C-kit în țesutul colonic prin reacția în lanț a polimerazei cantitative în timp real (RT-qPCR):Țesutul colonic de șobolan congelat a fost măcinat cu un omogenizator și s-a adăugat 1 mL RNAiso Plus. ARN-ul total al țesutului colonic a fost extras prin metoda cloroform/izopropanol, iar calitatea ARN a fost detectată prin electroforeză pe gel. După ce a fost identificat de către un aparat de imagini cu gel Bio-Rad, 1 ug ARN a fost reverscris în cADN de către Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit. Conform bazei de date NCBI Gene ID: 64030, regiunea CDS a genei C-kit a fost găsită și combinată cu NCBI Primer-Blast design Secvență de primer, care a fost sintetizată de Sangon Biotech Co. Ltd, secvența de primer C-kit, catenă de sens 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', catena antisens 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT{-3', - catenă de sens actină 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', catenă antisens 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. Amplificarea PCR a fost efectuată pe un instrument de PCR în timp real Bio-RadCFX90. Condițiile pentru testul PCR au fost denaturarea inițială la 95 grade timp de 5 minute, 30 de cicluri de 95 grade timp de 30 s, 60 grade timp de 30 s și 72 grade timp de 1 min, urmată de o extensie finală la 72 grade timp de 10 minute. 2-ΔΔCt (ΔCt=valoarea Ct - -actina Ctvaloarea) a fost luată pentru a analiza expresia relativă a genei.
Detectarea nivelului de expresie a proteinei Cx43 și AQP3 în țesutul colonic prin Western blot:Aproximativ 1 cm de țesut colonic înghețat a fost colectat și lizat cu lichid de piroliză puternic RIPA (100 μL). Țesutul a fost omogenizat cu un omogenizator de sticlă de 20 de ori și transferat într-un tub de centrifugă de 1,5 ml. Supernatantul a fost extras după centrifugare la 12000 rpm la 4 grade timp de 5 minute, iar concentrația proteinei totale în supernatant a fost determinată prin metoda BCA. Am îndepărtat 25 ug de proteină denaturată pentru a efectua electroforeza pe gel de dodecil sulfat-poliacrilamidă de sodiu și apoi am transferat proteinele din gel pe membrană de fluorură de poliviniliden la un curent constant de 200 mA, apoi am sigilat cu 5% lapte degresat timp de 2 ore la temperatura camerei. Anticorpii primari corespunzători au fost diluați cu fluid de etanșare, incubați la 4 grade peste noapte, apoi s-au spălat rezistența membranei și s-au adăugat anticorpi secundari. După adăugarea fluidului ECL, acestea au fost puse sub expometru pentru testare printr-o analiză de densitate optică.
Microscopia electronică cu transmisie:Am luat aproximativ 1 cm de țesut colonic proximal, l-am fixat în 2,5% glutaraldehidă timp de 24 de ore, l-am deshidratat cu acetonă gradată, l-am încorporat în Epon812 și am tăiat secțiuni ultrasubțiri de 50 nm pe un ultramicrotom. Secțiunile au fost colorate cu acetat de dioxid de uraniu și lichid de vopsire cu citrat de plumb la temperatura camerei timp de 10 minute. Am observat vilozități colonice, mitocondrii cu celule epiteliale și celule caliciforme la microscopul electronic cu transmisie Philips Tecnai-10.
analize statistice
Software-ul SPSS 19.0 a fost folosit pentru analiza datelor, iar software-ul GraphPad Prism8.4 a fost folosit pentru reprezentarea grafică a rezultatelor. Testul Shapiro-Wilk a fost utilizat pentru testarea normalității. Datele cu distribuție normală au fost reprezentate prin medie ± SD. Elementele de eroare au fost utilizate pentru a reprezenta media ± SD a hemoglobinei după tratament. Testul t al elevului a fost folosit pentru compararea între două grupuri. Analiza varianței a fost utilizată pentru compararea între mai multe grupuri. Metoda Student-Newman-Keuls a fost utilizată pentru compararea între mai multe grupuri în perechi, iar testul lui Dunnett a fost folosit pentru a măsura diferențele dintre fiecare grup experimental și grupul de control în secvență. condus. Dacă testul de sfericitate a arătat P > 0.{{10}}5, a fost utilizată analiza de varianță a datelor de măsurare repetată. Dacă P < 0,05,="" a="" fost="" luată="" ecuația="" de="" estimare="" generalizată.="" datele="" care="" nu="" s-au="" conformat="" unei="" distribuții="" normale="" au="" fost="" reprezentate="" de="" m="" (p25,="" p75),="" iar="" testul="" kruskal-wallis="" h="" a="" fost="" utilizat="" pentru="" compararea="" între="" grupuri.="" testul="" χ2="" a="" fost="" folosit="" pentru="" a="" compara="" între="" grupuri="" atunci="" când="" datele="" erau="" date="" neordonate,="" iar="" testul="" χ2="" al="" lui="" pearson="" a="" fost="" utilizat="" dacă="" proporția="" de="" celule="" cu="" frecvență="" teoretică="">< 5="" a="" fost="">< 20="" la="" sută.="" dacă="" proporția="" de="" celule="" cu="" frecvență="" teoretică="">< 5="" a="" fost="" mai="" mare="" sau="" egală="" cu="" 20="" la="" sută,="" a="" fost="" folosit="" testul="" exact="" al="" lui="" fisher.="" p="">< 0,05="" a="" fost="" utilizat="" pentru="" a="" determina="" că="" diferența="" a="" fost="" semnificativă="">
Figura 1 Modificări histopatologice ale colonului.
REZULTATE
Conditii generale
La o zi după gavajul cu loperamidă comparativ cu grupul normal, greutatea corporală și greutatea scaunului în grupul model au fost semnificativ scăzute (P <{{0}},05), dar="" nu="" a="" existat="" nicio="" diferență="" semnificativă="" în="" calitatea="" scaunului.="" scor="" (p=""> 0,05). Tratamentul C. deșerticola în grupul model a încetinit scăderea greutății corporale și a scaunului (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">
Histopatologia colonului
Colorarea cu hematoxilină și eozină a țesutului colonic al șobolanilor este prezentată în Figura 1. În grupul normal, vilozitățile intestinale erau intacte, mucoasa intestinală era intactă și continuă, celulele și glandele au fost aranjate în mod regulat. Mucoasa și submucoasa nu au fost infiltrate de celule inflamatorii, iar structura tisulară a fost normală. În grupul model, vilozitățile intestinale și mucoasa au fost în mare parte distruse, vilozitățile locale au fost îndepărtate și aranjate lejer, iar o parte a structurii glandulare a dispărut. În grupul C. deserticola, colorația histopatologică a fost mai mică decât cea a grupului model, dar a existat necroză în celulele somegoblet. După injectarea intraperitoneală în grupul blocant, comparativ cu grupul C.deserticola, a existat încă pierderea locală a vilozităților intestinale și a existat fractură și pierderea mucoasei intestinale.
Figura 2 Exprimarea factorului de celule stem și a raportului de densitate optică relativă în țesutul colonic prin detectarea imunohistochimică.
Detectarea exprimării factorului de celule stem și a proteinei C-kit prin colorare imunohistochimică
Colorația imunohistochimică a arătat că SCF și C-kit au fost exprimate în colonul grupului de control. În comparație cu grupul de control, expresia SCF și C-kit în grupul model a fost semnificativ scăzută (P <0.05). în="" comparație="" cu="" grupul="" model,="" expresia="" scf="" și="" c-kit="" în="" grupul="" c.="" deserticola="" a="" fost="" semnificativ="" crescută="" (p="">< 0.05).="" nu="" a="" existat="" nicio="" diferență="" în="" exprimarea="" scf="" și="" c-kit="" între="" grupurile="" blocante="" și="" model="" (p=""><0,05, figurile="" 2="" și="">
RT-qPCR
RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Aceste rezultate au indicat că expresia C-kit ajustată de C. deserticola a participat la îmbunătățirea constipației, iar blocanții au inhibat eficacitatea C. deserticola.
beneficii salsa cistanche
Western blot
Western blot a arătat că proteina AQP3 a fost exprimată la un nivel scăzut în grupul de control normal, în timp ce a fost semnificativ crescută în grupul model în comparație cu grupul de control (Figura 5) (P <0.05) .="" expresia="" proteinei="" aqp3="" a="" fost="" scăzută="" după="" tratamentul="" cu="" c.="" deserticola,="" iar="" efectul="" inhibitor="" al="" c.deserticola="" asupra="" expresiei="" aqp3="" a="" fost="" inhibat="" prin="" tratamentul="" cu="" blocant="" (p="">< 0,05).="" exprimarea="" cx43="" a="" fost="" opusă="" celei="" a="" aqp3.="" aceste="" rezultate="" au="" sugerat="" că="" efectul="" farmacologic="" al="" c.="" deserticola="" asupra="" șobolanilor="" cu="" sc="" a="" fost="" obținut="" prin="" promovarea="" expresiei="" cx43="" și="" inhibarea="" expresiei="" aqp3="" (figurile="">
Microscopia electronică cu transmisie
După inducerea loperamidei, umflarea mitocondrială și autofagia au apărut în unele dintre celulele epiteliale ale mucoasei colonului din grupul model. Numărul și lungimea microvilozităților intestinale au scăzut și a apărut picnoza celulelor caliciforme (Figura 8). Posttratamentul cu C. deserticola a crescut numărul de microvilozități intestinale. Themicrovilli au fost aranjate îngrijit, iar structura a fost completă. Celulele caliciforme de lungime mai scurtă, morfologia neregulată a mitocondriilor și picnoza severă a celulelor caliciforme.
Figura 3 Exprimarea C-kit-ului și raportul de densitate optică relativă în țesutul colonic prin detectarea imunohistochimică.
DISCUŢIE
Constipația este frecventă la populația în vârstă și este unul dintre simptomele comune care afectează starea de sănătate și calitatea vieții persoanelor în vârstă[10,11]. Intermedii medicinei tradiționale chineze, Bai și colab.[12] credeau că patogeneza de bază a SC a fost disfuncția funcției de conducere a intestinului gros, insuficiența corpului senil, pierderea treptată a funcțiilor ficatului și rinichilor, lipsa qi-ului și a sângelui și pierderea lichidului corporal. ,care a dus la scaune uscate, ducând la constipație[13]. SC pune presiune asupra pacienților și familiilor lor în multe aspecte și este important să se exploreze patogeneza acesteia.
C. deserticola are funcțiile de tonifiere a rinichilor Yang, de a aduce beneficii sângelui și de reglare a imunității organismului[14]. C. deserticola și decoct chinezesc din plante care conțin C. deserticola au fost utilizate pe scară largă în tratamentul constipației, iar efectul clinic este remarcabil. Du et al[15] au descoperit într-un model de șobolan de deficiență de Yang și constipație că C. deserticola a îmbunătățit amplitudinea contracției colonului izolat, a întărit contractilitatea tractului intestinal și a readus nivelul hormonilor gastrointestinali la normal. În plus, fibrele alimentare de C. deserticola, un produs secundar de prelucrare al C. deserticola, îmbunătățesc capacitatea de reținere a apei a fecalelor și are avantajul unei doze mici și efect bun în hrănirea intestinelor și îmbunătățirea defecației[16]. Studiul nostru a constatat că tratamentul cu C. deserticola a îmbunătățit umiditatea fecală și histopatologia colonică a șobolanilor cu constipație.
ICC-urile se găsesc în tot tractul intestinal și joacă un rol vital în controlul neuronal al mișcării intestinale ca stimulatoare cardiace și transmisie nervoasă intestinală. C-kit[18]. Sistemul SCF/C-kit este crucial în dezvoltarea ICC-urilor. Calea de semnalizare SCF/C-kit a fost analizată în timpul tratamentului constipației de transfer lent la șobolani prin acupunctură[19]. Electroacupunctura la punctul Tianshu a crescut numărul de ICC de colon la șoarecii tratați cu ACK2-, a reglat expresia proteinelor SCF și C-kit și a inversat fenotipul ICC. Prescripția pentru revigorarea qi-ului și a splinei poate crește expresia ICC în țesutul colonic și poate regla expresia C-kit și ARNm SCF, îmbunătățind astfel simptomele de constipație[20]. În studiul nostru, imunohistochimia a arătat că C. deserticola a reglat în mod semnificativ expresia SCF și a proteinei C-kit într-un model de șobolan de SC și RT-qPCR au arătat că C. deserticola a reglat în mod semnificativ expresia C-kitmARN. Blocantul C-kit a inhibat reglarea în sus a expresiei SCF și C-kit indusă de C. deserticola.
Conținutul de apă fecală și transportul apei colonice sunt strâns legate de AQP, care joacă un rol important în metabolismul apei intestinale[21]. Într-un studiu efectuat pe șobolani cu constipație cu transport lent, decoctul de defecare a îmbunătățit semnificativ simptomele constipației prin reglarea absorbției intestinale a apei prin reglarea în jos a AQP3 și AQP4[22]. Într-un model de șobolan al constipației funcționale, mecanismul de tratament al fluidului oral Xiaofu Tongjie pentru constipația funcțională poate fi realizat prin reglarea exprimării polipeptidei intestinale vasoactive și AQP3 în colon[23]. Gapjuncțiile joacă un rol esențial în mediarea contracției sincrone a celulelor musculare netede. Cx43 este cea mai importantă proteină în timpul acestui proces[24]. Pierderea expresiei Cx43 poate fi parțial responsabilă pentru disfuncția motorie a mușchiului neted[25]. Repararea structurii rețelei sistemului nervos intestinal la șobolanii cu constipație de tranzit lent poate îmbunătăți expresia Cx43 etc. și simptomele de constipație[26]. Aceste rezultate indică faptul că creșterea expresia AQP3 scade conținutul de apă fecală, ducând la constipație, care poate fi un mecanism important de constipație. Exprimarea Cx43 poate fi legată de contracția musculaturii netede intestinale și poate reduce apariția constipației. În studiul nostru, Western blotting a arătat că expresia Cx43 a fost crescută și expresia AQP3 a fost inhibată prin tratamentul cu C.deserticola, ceea ce a dus la creșterea contracției musculare netede și la scăderea absorbției de apă, iar tratamentul cu blocant a inversat aceste efecte.
Pentru mai multe informații, vă rugăm să faceți clic aici.
CONCLUZIE
În concluzie, C. deserticola poate inhiba expresia AQP3 și poate promova expresia Cx43 prin calea SCF/C-kit, îmbunătățind astfel constipația indusă de byloperamină și reducând deteriorarea țesutului colonic la șobolanii în vârstă. Acest studiu a oferit o bază teoretică bună pentru utilizarea clinică a C. deserticola.
