Decoctul Tongluo Digui tratează leziunile renale la șobolanii diabetici prin promovarea autofagiei podocitelor

A lua legatura:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

HAN Jiarui, ZHANG Yage, SHI Xiujie, PENG Zining, XING Yufeng, PANG Xinxin

Abstract

OBIECTIV:

Pentru a investiga efectele decoctului Tongluo Digui asupra leziunii renale și autofagiei podocitelor induse de streptozotocină la șobolanii diabetici.

METODE:

Șobolanii masculi Sprague-Dawley au fost împărțiți aleatoriu în șase grupuri: normal, model, decoct Tongluo Digui (doză mare, medie și mică) și valsartan. Streptozotocina a fost injectată intraperitoneal pentru a reproduce modelul animal diabetic. După 8 săptămâni, proteinuria a fost evaluată pentru a stabili modelul de nefropatie diabetică. Tratamentele au fost administrate zilnic pe cale intragastrică. La 16 săptămâni după gavaj, am determinat concentrația de proteine ​​​​în urină de 24 de ore, glucoza din sânge, creatinina serică și concentrațiile de azot ureic. Apoi, șobolanii au fost sacrificați, iar rinichii au fost recoltați și colorați cu acid-Schiff periodic pentru a evalua modificările patologice ale glomerulilor, inclusiv podocitele glomerulare prin microscopie electronică cu transmisie. Analiza Western blot a fost utilizată pentru a determina expresia proteinei nefrinei, podocinei, p62, beclin-1, LC3Ⅱ/Ⅰ și p-mTOR/mTOR în țesuturile renale.

REZULTATE:

În comparație cu grupul model, decoctul Tongluo Digui a fost asociat cu scăderea concentrației proteinelor din urină de 24 de ore, a glicemiei, a hemoglobinei A1c, a creatininei serice, a concentrațiilor de azot ureic, a proteinei serice totale și a albuminei. Concomitent, procesele de lărgire mezenteric mezangial și fuziunea piciorului au fost reduse, membrana bazală glomerulară nu a fost îngroșată semnificativ, iar numărul de podocite și numărul de autofagozomi din podocite a fost crescut. În plus, expresia proteinei nefrinei, podocinei, LC3Ⅱ și beclin-1 în țesutul renal a fost reglată în sus, în timp ce expresia proteinei p62 a fost reglată în jos și fosforilarea mTOR a fost inhibată.

CONCLUZIE:

Decoctul Tongluo Digui poate inhiba progresia nefropatiei diabetice prin inhibarea fosforilării mTOR, crescând astfel autofagia pentru a proteja podocitele și reducerea proteinuriei.

Cuvinte cheie:nefropatii diabetice; autofagie; podocit; Tongluo Digui decoct

beneficii cistanche stempentrufunctie renala

INTRODUCERE

Nefropatia diabetică (DN) este una dintre complicațiile microvasculare severe ale diabetului, 30% -40% dintre pacienții diabetici suferă de boli de rinichi. Odată cu creșterea incidenței diabetului, DN a devenit principala cauză a bolii renale în stadiu terminal la nivel mondial.1 Aceasta este o povară economică grea atât pentru familii, cât și pentru societate.

Leziunile podocitelor sunt o cauză importantă a progresiei DN. Ca celulă diferențiată terminal, autofagia joacă un rol important în menținerea funcției fiziologice a podocitelor.2,3 Într-o stare fiziologică normală, există un grad ridicat de autofagie în interiorul podocitelor care îndepărtează proteinele și organelele deteriorate.4 Cu toate acestea, la diabetici. mediu, autofagia podocitelor este inhibată, ceea ce sugerează că autofagia podocitelor joacă un rol important în patogeneza DN.5 DN aparține categoriilor „Xiao Ke”, „Guan Ge” și „edem” din Medicina Tradițională Chineză. Teoria Medicinii Tradiționale Chineze este că staza sângelui șiYin deficientasunt cele mai importante cauze ale DN.6 Prin urmare, tratamentul DN ar trebui să promoveze circulația sângelui și să hrănească yin-ul, iar decoctul Tongluo Digui a fost stabilit pentru aceasta. Am descoperit anterior că decoctul Tongluo Digui a avut un efect benefic de tratament în DN. În acest studiu, ne-am propus să folosim modelul de șobolan DN de tip 1 indus de streptozotocină (STZ) pentru a evalua efectul decoctului Tongluo Digui asupra leziunii renale, autofagiei și căii de semnalizare mTOR. De asemenea, am explorat mecanismul molecular de bază al decoctului Tongluo Digui în întârzierea progresiei DN și am furnizat dovezi pentru prevenirea și tratamentul clinic al DN.

MATERIALE ȘI METODE

animale

Șobolani Sprague-Dawley fără agent patogen specific (SPF) [n=60, masculi, (150 ± 10) g; numărul certificatului de calificare: SCXK (Yu) 2017-0001] au fost achiziționate de la Centrul pentru animale experimentale Henan (Zhengzhou, China). Ciclu standard de lumină (14 ore de lumină, 10 ore de noapte), temperatura din interior (23 ± 2) grade, umiditate (40 la sută -50 la sută), adăpostire (trei animale per cușcă) și hrănire (hrană sterilizată și apă potabilă) au fost folosite. Experimentul a fost finalizat în laboratorul Centrului de imagistică celulară al Spitalului de Medicină Tradițională Chineză din Henan (Zhengzhou, China). Toate experimentele au fost efectuate conform ghidului pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator publicat de National Institutes of Health.

Droguri

Capsulele de Valsartan (Val) au fost achiziționate de la Novartis Pharma Schweiz AG (X2307 CN-b, Beijing, China). Decoctul Tongluo Digui constă din Shuichi (Hirudo) 12 g, Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) 30 g, Dihuang (Radix Rehmanniae) 20 g, Huangqi (Radix Astragali Perparata) 20 g, Danggui (Radix Angelicae Sinensis, Zexima) 30 g Alismatis) 10 g, Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei) 15 g, Gancio (Radix Glycyrrhizae) 6 g. Ierburile chinezești au fost achiziționate de la Spitalul Henan de Medicină Tradițională Chineză (Zhengzhou, China).

Design experimental

Șobolanii au fost împărțiți aleatoriu în șase grupuri, fiecare constând din 10 șobolani: grup de control (Ctrl), grup model DN (STZ), model DN cu grup de tratament Val (Val), model DN cu grup de tratament cu decoct Tongluo Digui cu doză mare (HTL) , model DN cu grup de tratament cu doză medie decoct Tongluo Digui (MTL) și model DN cu grup de tratament cu doză mică decoct Tongluo Digui (LTL). Cele șase grupuri de șobolani au fost sacrificate la 16 săptămâni după gavaj și rinichii au fost colectați.

Val (10 mg·kg-1·d-1) și decoctul Tongluo Digui în trei doze diferite au fost administrate prin gavaj o dată pe zi timp de 16 săptămâni. Dozele administrate s-au bazat pe ecuația de conversie a dozelor de medicament între animale și oameni. Doza la șobolan (mg/kg)=doză la om adult (mg/kg) × factor de conversie (6,25). Grupurilor cu doză mare, doză medie și doză mică de decoct Tongluo Digui au primit gavaj gastric de 5,4, 2,7 și, respectiv, 1,35 g·kg - 1·d - 1. Șobolanii erau cântăriți săptămânal. Urina de 24-h a fost colectată prin utilizarea cuștilor metabolice la sfârșitul săptămânii 0, 12 și 24. După încheierea tratamentului (la 24 de săptămâni), șobolanii au fost anesteziați prin injecție subcutanată cu hidrat de cloral, iar probe de rinichi și țesut sanguin au fost recoltate și depozitate la -80 de grade. Șobolanii au avut acces gratuit la o dietă normală pentru animale de laborator și la apă curată (cu excepția celor descrise mai jos).

planta cistanche

Stabilirea modelului DN

STZ (Sigma, St. Louis, MO, SUA) a fost folosit pentru a induce diabetul, așa cum a fost descris anterior.7 Toți cei 6 0 șobolani au avut acces limitat la apă timp de 12 ore înainte de experimente. Dintre aceștia, la 50 de șobolani li s-a administrat o singură injecție intraperitoneală de STZ 60 mg/kg dizolvată în tampon citrat (0,1 mol/L, pH 4,5). Diabetul a fost confirmat prin măsurarea concentrațiilor de glucoză din sânge la 72 de ore după injectarea STZ. Animalele cu o concentrație de glucoză mai mare sau egală cu 16,7 mmol/L timp de trei zile consecutive au fost considerate diabetice. După 8 săptămâni, șobolanii au fost găzduiți în cuști metabolice separate, iar urina a fost colectată timp de 24 de ore pentru măsurarea microalbuminei urinare (UAE). Modelul DN a fost confirmat la obținerea UAE mai mare sau egal cu 30 mg/ 24 h.

Indicatori biochimici

Evaluările serice și urinare au fost utilizate pentru a evalua funcția renală a animalelor. Urina de șobolan a fost evaluată folosind cușca metabolică. Probele de sânge de șobolan au fost obținute folosind metoda tăierii cozii.8 Probele de ser și urină au fost congelate la -80 de grade până la utilizare. Concentrațiile serice ale creatininei, azotului ureic din sânge, albuminei și proteinelor din urină au fost măsurate prin radioimunotest. Nivelurile de hemoglobină A1c (HbA1c), peptida C și insulină au fost măsurate utilizând kitul ELISA HbA1c (Crystal Chem INC, Elk Grove Village, IL, SUA), kitul Elisa cu peptida C (Kainuo Bio Ltd., Beijing, China) și insulină Kit Elisa (Merck Millipore Co., Ltd., Bed Ford, MA, SUA) urmând instrucțiunile producătorului respectiv. Acidul uric, proteina totală a serului (TP), albumina (ALB), alanina aminotransferaza (ALT) și aspartat aminotransferaza (AST) la șobolani au fost determinate de un analizor biochimic automat.

Examen histopatologic

Țesutul renal fixat cu formol a fost încorporat în parafină, tăiat în secțiuni groase de 3-4 μm și colorat cu acid periodic Schiff (PAS). Modificările morfologice ale țesutului renal, inclusiv proliferarea celulelor mezangiale, infiltrarea celulară și modificările matricei mezangiale, au fost examinate pentru fiecare secțiune colorată prin microscopie luminoasă (NIKON D3100) (× 400).

Microscop pentru transmisie de electroni

TEM a fost folosit pentru a observa morfologia podocitelor și a celulelor mezangiale din țesutul renal. Țesuturile proaspete ale rinichilor au fost împărțite în blocuri (< 1="" mm3="" ),="" were="" quickly="" fixed="" in="" 2%="" phosphate-buffered="" glutaraldehyde="" for="" at="" least="" 2="" h,="" washed="" three="" times="" with="" pbs,="" fixed="" in="" 1%="" osmium="" tetroxide="" for="" 2="" h,="" and="" then="" embedded="" in="" acetone="" wrap="" after="" dehydration.="" specimens="" were="" sliced="" in="" 50-60="" nm="" ultrathin="" sections,="" double-stained="" with="" 3%="" uranyl="" acetate="" and="" lead="" citrate,="" and="" then="" examined="" under="" a="" tem="" (jeol-jem-1400="" plus,="" japan="" electron="" optics="" laboratory,="">

Analiza Western blot

Proteina totală a fost extrasă din țesutul renal prin tampon de liză a proteinelor (Solarbio Biotech, Beijing, China). Concentrațiile de proteine ​​din supernatant au fost testate printr-un kit de testare BCA (Solarbio Biotech, Beijing, China, PC0020). Probele care conțin 40 ug de proteină au fost separate prin electroforeză în gel de poliacrilamidă SDS 12% (SDS PAGE) (Applygen, Beijing, China, B1004) și apoi transferate într-o membrană de filtru de nitroceluloză (Solar bio Biotech, Beijing, China). După blocarea cu lapte degresat 5% la temperatura camerei timp de 2 ore, -actină (Proteintech, număr articol: 60008-1-lg), LC3II/I (Cam Ab, număr articol: ab48394), P62 (Proteintech, număr articol: 18420-1-AP), beclin-1 (tehnologie pentru proteine, număr articol: 11306-1-AP), p-mTOR (CST, număr articol: #5536), mTOR (CST, număr articol: # 2983), nefrină (Abcam, număr articol: ab58968) și podocină (proteină fiecare, număr articol: 20384 -1-AP) au fost adăugate și incubate la 4 grade peste noapte. Acest amestec a fost apoi spălat de cinci ori cu TBS plus 0,05% Tween-20 (Solar bio Biotech, Beijing, China) (TBS-T) timp de 5 minute înainte de a adăuga anticorpul secundar (1∶2000) înainte de incubare în cameră. temperatura timp de 1 oră, spălând de cinci ori cu TBST timp de 5 minute, supus dezvoltării culorii cu chemiluminiscență îmbunătățită (ECL, Millipore, Billerica, MA, SUA) și expunere folosind software-ul ImageJ pentru analiza în tonuri de gri a benzilor.

analize statistice

Datele au fost analizate folosind software-ul SPSS (IBM SPSS Statistics pentru Windows, versiunea 23.0. 2014, Armonk, NY, SUA). Diferențele dintre grupuri au fost testate folosind o analiză unidirecțională a varianței, urmată de testul Tukey. Datele au fost exprimate ca medie ± abaterea standard. P < 0,05="" a="" fost="" considerat="">

luteolină

REZULTATE

Efectul protector al decoctului Tongluo Digui asupra rinichilor de șobolan DN

Indicatorii biochimici, cum ar fi glucoza din sânge, hemoglobina glicata, creatinina serică, concentrația de azot din ureea din sânge și concentrația de proteine ​​​​în urină în {{{0}}oră au fost măsurați la 16 săptămâni după gavaj. (Tabelul 1). Rezultatele au arătat că, în comparație cu grupul normal, glucoza din sânge, hemoglobina glicata, creatinina serică, concentrația de azot din ureea din sânge, concentrația de proteină în urină pe 24-oră, TP și ALB au fost semnificativ mai mari în grupul model (P < {{="" 7}}.01),="" indicând="" astfel="" că="" grupul="" model="" a="" avut="" funcția="" renală="" afectată.="" în="" grupul="" val,="" atât="" concentrația="" serică="" a="" creatininei,="" cât="" și="" concentrația="" proteinelor="" din="" urină="" de="" 24="" de="" ore="" au="" fost="" scăzute="" (p="">< 0,05).="" mai="" mult,="" în="" grupul="" cu="" doză="" mare="" de="" decoct="" tongluo="" digui="" a="" fost="" observată="" o="" reducere="" semnificativă="" a="" concentrațiilor="" de="" glucoză="" din="" sânge,="" hba1c,="" creatininei="" serice="" și="" azot="" ureic,="" precum="" și="" excreție="" urinară="" de="" 24="" de="" ore="" (p="">< 0,01).="" aceste="" efecte="" au="" fost="" dependente="" de="" doză.="" nu="" au="" existat="" diferențe="" semnificative="" în="" nivelurile="" de="" acid="" uric,="" insulină,="" alt="" și="" ast="" la="" fiecare="" grup="" de="" șobolani.="" luate="" împreună,="" constatările="" noastre="" au="" arătat="" că="" decoctul="" tongluo="" digui="" a="" atenuat="" afectarea="" rinichilor="" și="" a="" îmbunătățit="" funcția="" renală="" la="" șobolanii="" dn="" într-o="" manieră="" dependentă="" de="">

Modificările în patologia renală a șobolanului DN au fost evaluate prin colorarea PAS după tratamentul cu decoct Tongluo Digui (Figura 1). Comparativ cu grupul normal, s-a observat o creștere semnificativă a celulelor mezangiale glomerulare și a stromei mezangiale împreună cu o lărgire a zonei mezangiale în grupul model. Zona mezangială glomerulară a crescut în fiecare dintre cele trei niveluri de doză de decoct Tongluo Digui și în grupul Val. În plus, aceste patru grupuri de tratament au redus lățimea matricei mezangiale în comparație cu grupul model, iar zona mezangială glomerulară în grupul cu decoct Tongluo Digui cu doză mare a fost mai mică decât în ​​grupul Val. Aceste constatări au indicat că decoctul Tongluo Digui a întârziat progresia leziunilor glomerulare DN.

Efectul decoctului Tongluo Digui asupra leziunii podocitelor glomerulare la șobolanii DN

Analiza Western blot a fost utilizată pentru a determina expresia proteinelor marker podocite nefrină și podocină (Figura 2). În comparație cu grupul normal, expresia ambelor proteine ​​în grupul model a fost semnificativ scăzută (P <0.01), indicând="" leziuni="" ale="" podocitelor.="" în="" plus,="" expresia="" nefrinei="" și="" podocinei="" a="" fost="" reglată="" în="" sus="" în="" grupurile="" cu="" decoct="" tongluo="" digui="" în="" comparație="" cu="" grupul="" model="" (p=""><>

Efectul decoctului Tongluo Digui asupra autofagiei podocitelor glomerulare la șobolanii DN

Modificări ale autofagozomilor din podocitele glomerulare au fost observate sub TEM (Figura 3). Rezultatele au arătat autofagozomi în podocitele glomerulare din grupul normal. Autofagozomii podocite au fost absenți în grupul model, iar procesele podocitelor au dispărut și ele. În cele trei grupuri de doze cu decoct Tongluo Digui și grupul cu valsartan, am observat autofagozomi podocite glomerulare, ceea ce a sugerat că decoctul Tongluo Digui a îmbunătățit autofagia podocitelor la șobolanii DN. Western blot a fost utilizat pentru a detecta expresia proteinelor legate de autofagie P62, beclin-1 și LC3 Ⅱ (Figura 4). În comparație cu grupul normal, expresia beclin-1 și LC3Ⅱ în grupul model a fost semnificativ scăzută (P < 0.01),="" în="" timp="" ce="" expresia="" lui="" p62="" a="" fost="" semnificativ="" crescută="" (p="">< 0.01).="" aceste="" constatări="" au="" indicat="" că="" autofagia="" a="" fost="" slăbită="" la="" șobolanii="" dn.="" în="" comparație="" cu="" grupul="" model,="" grupul="" cu="" doză="" mare="" de="" decoctură="" tongluo="" digui="" a="" avut="" expresia="" beclin-1="" și="" lc3ⅱ="" reglată="" în="" sus="" (p=""><0,05), împreună="" cu="" expresia="" reglată="" în="" jos="" a="" p62.="" împreună,="" aceste="" rezultate="" au="" arătat="" că="" efectul="" protector="" renal="" al="" decoctului="" tongluo="" digui="" la="" șobolani="" cu="" dn="" poate="" fi="" legat="" de="" autofagia="" îmbunătățită="" în="" celulele="">

Decoctul Tongluo Digui îmbunătățește autofagia podocitelor glomerulare la șobolanii DN prin inhibarea fosforilării mTOR

Inhibarea fosforilării mTOR îmbunătățește autofagia (Figura 5). În comparație cu grupul normal, fosforilarea mTOR în grupul model a fost îmbunătățită (P <{1}}.01), în="" timp="" ce="" în="" grupurile="" cu="" decoct="" tongluo="" digui="" a="" fost="" inhibată="" (p="">< 0,05).="" acest="" lucru="" a="" sugerat="" că="" decoctul="" tongluo="" digui="" a="" îmbunătățit="" autofagia="" podocitelor="" prin="" inhibarea="" activării="" căii="" de="" semnalizare="" mtor.="" studiile="" anterioare="" au="" arătat="" că="" autofagia="" protejează="" podocitele="" și="" îmbunătățește="" funcția="">

DISCUŢIE

DN se caracterizează în principal prin semne și simptome, cum ar fi prezența proteinelor urinare, glicemie crescută, polidipsie, polifagie și poliurie. Simptomele sunt similare cu cele ale medicinei tradiționale chineze, precum „Xiao Ke”, „Guan Ge” și „edem”. Apariția și dezvoltarea DN sunt inseparabile de baza patologică a deficienței de yin și a stazei sanguine.6 Odată cu dezvoltarea deficienței de Yin și a stazei sanguine, rinichiul este deteriorat treptat, arătând astfel pierderea proteinei urinare, ceea ce duce în continuare la formarea de microtrombi și fibroza rinichilor. Pacienții cu DN suferă inevitabil de boală renală în stadiu terminal.11

Decoctul Tongluo Digui a fost stabilit de Zhang Binghou, un renumit medic de medicină tradițională chineză, și pe baza anilor de experiență în tratamentul DN.12, 13 Decoctul Tougluo Digui constă din Shuichi (Hirudo), Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis), Dihuang (Radix Rehmanniae), Huangqi (Radix Astragali Perparata), Danggui (Radix Angelicae Sinensis), Ze Xie (Rhizoma Alismatis), Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei), Gancio (Radix Glycyrrhizae). Printre acestea, Shuizhi (Hirudo) și Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) sunt medicamente monarh, despre care credem că joacă un rol în hrănirea Yin-ului și în promovarea circulației sângelui în DN. Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) îmbunătățește imunitatea și starea secretorie a organismului și întârzie îmbătrânirea.14 Shuizhi (Hirudo) are efecte anticoagulante, antitumorale, antiinflamatoare și antifibrotice, printre alte acțiuni farmacologice și poate îmbunătăți rinichii. modificări patologice ale DN pentru a reduce semnificativ concentrațiile serice de creatinine și azot ureic din sânge și pentru a reduce excreția urinară de proteine.15,16 În DN, leziunea podocitelor joacă un rol important în bariera de filtrare a membranei bazale glomerulare și în formarea proteinuriei.17 Nefrina și podocina sunt ambele proteine ​​poro-membranare de pe suprafața podocitelor. Cele două proteine ​​interacționează pentru a forma un complex care joacă un rol cheie în funcția barierei de filtrare glomerulară.18 Distribuția anormală a expresiei proteinei duce la diferite grade de proteinurie.19 În acest studiu, șobolanii DN de tip 1 induși de STZ au arătat o creștere în excreția urinară de proteine ​​și afectarea funcției renale peste 24 de ore. Mai mult, colorarea PAS a arătat că numărul de celule mezangiale și matricea mezangială a crescut în grupul model, indicând astfel că modelul a fost stabilit cu succes. Diferite doze de decoct Tongluo Digui au redus concentrațiile de proteine ​​​​și creatininei serice din urină de 24 de ore și au îmbunătățit patologia renală a șobolanilor DN cu celule mezangiale și matrice reduse. Analiza Western blot a arătat că expresia nefrinei și podocinei în grupul cu decoct Tongluo Digui a fost mai mare în comparație cu cea din grupul model, indicând faptul că această formulă întârzie progresia DN la șobolani prin protejarea podocitelor.

Autofagia este o cale de degradare a proteinelor lizozomale din celule și joacă un rol crucial în eliminarea proteinelor deteriorate sau supraexprimate care mențin homeostazia și integritatea celulelor.20 Autofagia este parte integrantă a homeostaziei lizozomiale podocitelor în diabet, iar autofagia îmbunătățită poate reduce leziunile podocitelor. .5 După eliminarea în mod specific a genei Atg5 asociată autofagiei din podocite, șoarecii au arătat treptat agregare ubicuă a proteinelor, leziuni mitocondriale și activitate de autofagie în podocite; podocitele s-au deteriorat și procesele piciorului au dispărut și s-au contopit, ceea ce a indicat că autofagia a fost menținută. Menținerea funcției normale a podocitelor este importantă.21,22 În acest studiu, am investigat efectul decoctului Tongluo Digui asupra autofagiei în podocite glomerulare utilizând analiza TEM și Western blot. TEM a arătat că numărul de autofagozomi podocite din fiecare grup de doză de decoct Tongluo Digui a crescut în comparație cu grupul model. Mai mult, Western blot a arătat expresia proteinelor legate de autofagie LC3, beclin-1 și p62. În comparație cu grupul model, expresia LC3Ⅱ și beclin-1 au fost semnificativ crescute în grupul cu decoct Tongluo Digui, în timp ce expresia proteinei p62 a fost semnificativ scăzută. Aceste descoperiri au indicat că decoctul Tongluo Digui a crescut nivelul de autofagie în podocitele glomerulare.

Rapamicin target protein (mTOR) este unul dintre principalii regulatori ai autofagiei.23 Este larg distribuită în cortexul renal și medular și joacă un rol în dezvoltarea leziunii podocitelor DN.24,25 În situații de glucoză ridicată și stres, mTOR este activat și fosforilat, ceea ce duce la fosforilarea țintelor sale din aval și la inhibarea autofagiei. Liu și colab. 26 au demonstrat că inhibitorul mTOR, rapamicina, s-a legat în mod specific de kinaza mTOR și a inhibat activitatea mTOR, a îmbunătățit autofagia podocitelor și a protejat funcția renală. Am descoperit că fosforilarea mTOR a fost îmbunătățită în grupul model și că decoctul Tongluo Digui a inhibat acest proces, ceea ce a sugerat că decoctul Tongluo Digui a îmbunătățit autofagia în podocite și poate inhiba activarea căii de semnalizare a mTOR.

În rezumat, decoctul Tongluo Digui poate inhiba autofagia în podocite, poate proteja podocitele glomerulare, poate menține integritatea membranei de filtrare glomerulară, poate reduce excreția proteinelor urinare în 24 de ore și poate întârzia progresia DN prin inhibarea activării mTOR. Aceste descoperiri oferă perspective asupra înțelegerii ulterioare a efectului protector al decoctului Tongluo Digui în DN, cu toate acestea, mecanismul de bază implicat rămâne de elucidat.

ce este o cistanchepentru boli de rinichi

REFERINȚE
1 Tesch GH. Nefropatie diabetică - este aceasta o tulburare imunitară? Clin Sci 2017; 131(16): 2183-2199.
2 Li JJ, Kwak SJ, Jung DS și colab. Biologia podocitelor în nefropatia diabetică. Kidney Int Suppl 2007; (106): S36-S42.
3 Liu N, Xu L, Shi Y, Zhuang S. Podocyte autophagy: o potențială țintă terapeutică pentru a preveni progresia nefropatiei diabetice. J Diabetes Res 2017; 2017(4): 1-6.
4 Mizushima N, Komatsu M. Autophagy: renovarea celulelor și țesuturilor. Cell 2011; 147(4): 728-741.
5 Tagawa A, Yasuda M, Kume S, et al. Deteriorarea autofagiei podocitelor exacerbează proteinuria în nefropatia diabetică. Diabet 2016; 65(3): 755-767.
6 Sun C, Xie QY, Meng QG. Studiu asupra legii de distribuție a sindromului TCM al nefropatiei diabetice. Beijing Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao 2015; 38(4): 266-270.
7 Szkudelski T. Mecanismul acțiunii alloxanului și streptozotocinei în celulele B ale pancreasului de șobolan. Physiol Res 2001; 50(6):537-546.
8 Dang WY, Hou LY, Wu HM, Yan XM, Zheng XF, Hao J. Eficacitatea decoctului Qingre Lishi Yishen asupra fibrozei glomerulare a nefropatiei imunoglobulinei A la modelul unui șobolan. J Tradit Chin Med 2019; 39(4): 516-523.
9 Lu MK, Gong XG, Guan KL. mTOR în funcția podocitelor: este rapamicina bună pentru nefropatia diabetică? Ciclul celular 2011; 10(20): 3415-3416.
10 Hartleben B, Godel M, Meyer-Schlesinger C, et al. Autofagia influențează susceptibilitatea bolilor glomerulare și menține homeostazia podocitelor la șoarecii în vârstă. J Clin Invest 2010; 120(4): 1084-1096.
11 Sun GD, Li CY, Cui WP, et al. Revizuirea medicinei tradiționale chineze pe bază de plante pentru tratamentul nefropatiei diabetice. J Diabetes Res 2016; 2016: 5749857.
12 Zhao WJ, Cai Z, Meng Y, et al. Aplicarea metodei nutritive Yin a rinichilor lui Zhang Binghou în tratarea bolilor cronice de rinichi. Beijing Zhong Yi Yao 2016; 35(4): 341-343.
13 Duan YF, Zhang HB. Introducerea experienței de aplicare a profesorului Zhang Binghou. Xin Zhong Yi 2012; 44 (4): 147-149.
14 Yu XJ, Chen SH, Lu GY. Un studiu al cercetării privind farmacodinamia coajelor de țestoasă „Ziyin Bushen”. Dang Dai Yi Xue 2009; 15(10): 15-17.
15 Pang XX, Tong Y, Li HP, Han JR. Progresul cercetării lipitoriei și extractelor sale în tratamentul nefropatiei diabetice. Guang Ming Zhong Yi 2019; 34(1): 168-171.
16 Zhang ZL, Dong H. Progresul cercetării lipitoriei și ingredientelor sale active în tratamentul nefropatiei diabeticeZhong Xi Yi Jie He Yan Jiu 2018; 10(02): 106- 110.
17 Dai H, Liu Q, Liu B. Progresul cercetării privind mecanismul epuizării podocitelor în nefropatia diabetică. J Diabetes Res 2017; 2017: 2615286.
18 Martin CE, Jones N. Semnalizarea nefrinei în podocit: o vedere actualizată a reglării semnalului la diafragma fantei și nu numai. Front Endocrinol (Lausanne) 2018; 9: 302.
19 Jaakko P, Karl T. Alcătuirea moleculară a barierei de filtrare glomerulară. Biochem Bioph Res Co 2010; 396(1): 164-169.
20 Noboru M, Beth L, Ana Maria C, Klionsky DJ. Autofagia luptă împotriva bolilor prin autodigestia celulară. Natura 2008; 451(7182): 1069.
21 Lenoir O, Jasiek M, Henrique C, et al. Celula endotelială
și autofagia podocitelor protejează sinergic de glomeruloscleroza indusă de diabet. Autofagie 2015; 11(7): 1130-1145.
22 Ilatovskaya DV, Levchenko V, Lowing A, Shuyskiy LS, Palygin O, Staruschenko A. Leziunea podocitelor în nefropatia diabetică: implicații ale activării dependente de angiotensină Ⅱ a canalelor TRPC. Sci Rep 2015; 5: 17637.
23 Rabanal-Ruiz Y, Otten EG, Korolchuk VI. mTORC1 ca poartă principală către autofagie. Eseuri Biochem 2017; 61 (6): 565-584.
24 Kim YC, Guan KL. mTOR: o țintă farmacologică pentru reglarea autofagiei. J Clin Invest 2015; 125(1): 25-32.
25 Li XY, Wang SS, Han Z, et al. Triptolida restabilește autofagia pentru a atenua fibroza renală diabetică prin calea miR-141-3p/PTEN/Akt/mTOR. Mol Ther Nucleic Acids 2017; 9: 48-56.
26 Liu L, Yang L, Chang B, Zhang J, Guo Y, Yang X. Efectele protectoare ale rapamicinei asupra autofagiei celulare în țesuturile renale ale șobolanilor cu nefropatie diabetică prin calea de semnalizare mTORS6K1-LC3 Ⅱ. Ren Fail 2018; 40(1): 492-497.