Glicozidele totale din tulpinile de Cistanche Tubulosa atenuează comportamentele asemănătoare depresiei: interacțiunea bidirecțională a fitochimicelor și microbiotei intestinale

pentru mai multe informații:ali.ma@wecistanche.com

Li Fan și colab

ABSTRACT

fundal: Fiind cea mai utilizată plantă de tonifiere a rinichilor-yang în medicina tradițională chineză, tulpinile suculente uscate deCistanchetubulosa(Schenk) Wight (CT) s-a dovedit a fi eficient în tratamentul depresiei. Cu toate acestea, componentele antidepresive și mecanismul lor de bază rămân neclare.

Scop: Pentru a explora componentele active ale CT(Cistanchetubulosa)împotriva depresiei, precum și a mecanismelor potențiale. Designul și metodele studiului: au fost utilizate teste de disperare comportamentală pentru a evalua activitățile antidepresive ale polizaharidelor, oligozaharidelor și diferitelor fracții îmbogățite cu glicozide separate de CT, precum și metaboliții tipici din microbiota intestinală, inclusiv acidul 3-hidroxifenilpropionic ({{2} }}HPP) și hidroxitirosol (HT). În plus, efectele fracțiilor bioactive și ale metaboliților asupra modelelor de stres cronic impredictibil (CUMS) au fost explorate cu multiple farmacodinamice și analize biochimice. Modificări ale histologiei colonului și ale barierei intestinale au fost observate prin colorare și analiză imunohistochimică. Caracteristicile microbiene intestinale și metabolismul triptofan-chinureninei au fost explorate folosind secvențierea ARNr 16S și, respectiv, western-blotting.

Rezultate: Totalglicozide(TG) a atenuat dramatic comportamentele asemănătoare depresiei în comparație cu diferite fracții separate, reflectându-se în efectele sinergice ale glicozidelor feniletanoide și iridoide asupra hiperactivarii axei hipotalamo-hipofizo-suprarenale (HPA), inflamații neuro-și periferice severe și deficiențe. în 5-hidroxitriptamina (5-HT) și factorul neurotrofic derivat din creier din hipocamp. Mai mult, TG(glicozide totale)a atenuat inflamația de grad scăzut în colon și întreruperea barierei intestinale, iar abundența mai multor genuri bacteriene s-a corelat puternic cu axa HPA și inflamația la șobolanii CUMS. În mod constant, expresia indoleaminei 2, 3-dioxigenazei 1 (IDO1) în colon a fost redusă semnificativ după TG(glicozide totale)administrare, însoțită de suprimarea metabolismului triptofan-chinurenin. Pe de altă parte, HT a exercitat, de asemenea, un efect antidepresiv marcat prin ameliorarea funcției axei HPA, eliberarea de citokine proinflamatorii și metabolismul triptofan-chinurenin, în timp ce nu a fost în măsură să ajusteze în mare măsură microbiota intestinală dezordonată în același mod ca TG. În mod surprinzător, superioare fluoxetinei, TG și HT ar putea îmbunătăți și mai mult disfuncția axei hipotalamo-hipofizo-gonadale și metabolismul anormal al nucleotidelor ciclice.

Cuvinte cheie: Cistanchetubulosa, glicozide totale, hidroxitirosol, depresie, microbiota intestinală

Click pentru a cistanche deserticola ma produs

Introducere

Depresia este o tulburare mentală cronică, recurentă și care poate pune viața în pericol, care afectează până la 20% din populația lumii (Nabavi et al., 2017). În prezent, deși au fost aprobate numeroase antidepresive, efectele secundare sunt îngrijorătoare. În special, tratamentul pe termen lung cu inhibitori selectivi ai recaptării serotoninei (ISRS), cum ar fi fluoxetina, agentul farmacologic major pentru depresie, probleme exacerbate, cum ar fi disfuncția sexuală cronică (Bijlsma și colab., 2014); acest lucru a atras din ce în ce mai mult atenția asupra descoperirii de noi antidepresive din plante naturale (Wang et al., 2019). În teoria medicinei tradiționale chineze (MTC), deficiența rinichilor-yang are ca rezultat caracteristici de performanță similare cu simptomele clinice ale depresiei, cum ar fi senzația de cădere în gropi, pierderea interesului și sentimentalismul (Yang et al., 2020), promovând gândurile. pentru a atenua comportamentele asemănătoare depresiei prin tonifiere yang-ul rinichilor. Întâmplător, multe ierburi tonificante pentru rinichi-yang au avantajul de a îmbunătăți funcția sexuală (Wu et al., 2015). Astfel de studii ne fac să fim atenți la potențiala aplicare acistanciHerba, care este cea mai frecvent utilizată plantă de tonifiere a rinichilor-yang în MTC și este eficientă în tratarea disfuncției sexuale masculine (Wang et al., 2020), în ceea ce privește evoluțiile antidepresive.cistanciHerba, înregistrată oficial ca tulpinile suculente uscate aleCistanchetubulosa(Schrenk) Wight (CT) șiCistanchedeserticola(YC Ma) din Farmacopeea Chineză (Wang et al., 2017), a fost utilizat în China și alte țări din Asia de Est încă din secolul al XV-lea pentru a trata afecțiuni precum deficiența rinichilor-yang, impotența și infertilitatea feminină. Studiile farmacologice moderne indică faptul căcistanciHerba are multiple bioactivități, cum ar fi îmbunătățirea imunității, neuroprotecția, efectele antioxidante, antiîmbătrânire și antioboseală (Wang et al., 2017). Proprietățile neuroprotectoare alecistanciHerba sugerează potențialul său terapeutic în bolile cognitive, cum ar fi accidentul vascular cerebral, depresia și boala Alzheimer (Wang și colab., 2020). În studiul nostru anterior, am constatat că CT(Cistanchetubulosa)extractul a atenuat comportamentele asemănătoare depresiei ale șobolanilor de stres cronic imprevizibil (CUMS) (Li et al., 2018). Până în prezent, analiza chimică a CT(Cistanchetubulosa)a arătat că principalele sale constitutive includ glicozide feniletanoide, glicozide iridoide, polizaharide și oligozaharide (Jiang și Tu, 2009), cu toate acestea, tipul de compus care joacă un rol dominant în efectul său antidepresiv rămâne neclar.

Numeroase studii au confirmat că acțiunea fiziologică a intestinului (în special microbiota comensală) joacă un rol important în dezvoltarea depresiei și poate regla sistemul neuroendocrin, sistemul nervos autonom și sistemul imunitar (Yang et al., 2020). Mai mult, relația care leagă metabolismul triptofanului, microbiota intestinală și depresia a atras treptat multă atenție. Microbiota intestinală alterată poate activa calea triptofan-chinurenină, reducând ulterior disponibilitatea triptofanului periferic și cerebral, ceea ce duce la deficiența de 5-HT (Agus și colab., 2018). Studiul nostru anterior a arătat că glicozidele feniletanoide în CT(Cistanchetubulosa)în general, exercită o biodisponibilitate scăzută și poate fi metabolizat rapid în 3-acid hidroxifenilpropionic (3-HPP) și hidroxitirosol (HT) de către microbiota intestinală (Li et al., 2016). În plus, CT(Cistanchetubulosa)S-a raportat că extractul restabilește homeostazia microbiotei intestinale la șobolanii CUMS (Li et al., 2018). Pe baza unor astfel de cercetări, am dedus că interacțiunea bidirecțională a fitochimicelor și microbiota intestinală ar putea guverna efectele antidepresive ale componentelor bioactive specifice ale CT.(Cistanchetubulosa). Mai exact, compușii ar putea fi transformați în metaboliți absorbibili (cum ar fi 3-HPP și HT) în tractul gastrointestinal de către microbiota intestinală și, ulterior, să exercite efecte antidepresive. La rândul lor, modificările structurale ale microbiotei intestinale induse de componente bioactive pot juca simultan un rol vital în activitatea antidepresivă.

În studiul nostru, am folosit teste de disperare comportamentală pentru a evalua activitățile antidepresive ale polizaharidelor, oligozaharidelor și diverselor fracții îmbogățite cu glicozide separate de CT.(Cistanchetubulosa)extract apos (CTE) și metaboliții tipici din microbiota intestinală (inclusiv 3-HPP și HT), pe care i-am confirmat în continuare în modelul de stres cronic imprevizibil (CUMS) cu multiple farmacodinamice și analize biochimice. Ulterior, am investigat dacă mecanismul său împotriva depresiei a fost relevant pentru interacțiunea bidirecțională a fitochimicelor și microbiota intestinală.

Materiale și metode

Materiale

Toate standardele utilizate pentru analiza chimică au fost achiziționate de la Durst (Sichuan, China). 3-HPP, HT, fluoxetină și imipramină au fost achiziționate de la Aladdin (Shanghai, China). Trusa cantitativă pentru proteine ​​BCA a fost achiziționată de la Boster (Wuhan, China). Nanjing Jiancheng (Nanjing, China) a furnizat 5-HT, BDNF, factor de necroză tumorală-alfa (TNF-), interleukina-1beta (IL{-1) și interferon-gamma (IFN-). ) truse de test imunosorbent legat de enzime (ELISA). Trusele ELISA pentru corticosteron (CORT), hormon adrenocorticotrop (ACTH) și hormon de eliberare a corticotrofinei (CRH) au fost achiziționate de la MultiSciences (Hangzhou, China). Trusele ELISA de adenozină monofosfat ciclic (cAMP), guanozin monofosfat ciclic (cGMP), testosteron (T) și hormon de eliberare a gonadotropinei (GnRH) au fost achiziționate de la Enzyme-linked Biotechnology (Shanghai, China). Trusele ELISA pentru triptofan și chinurenină au fost obținute din anticorpi cu molecule mici (Bordeaux, Franța). Anticorpii primari/secundari, inclusiv zonula occludens 1 (ZO-1), indoleamină 2, 3-dioxigenaza 1 (IDO1), -actină și IgG anti-iepure de capră HRP (H plus L) au fost achiziționați de la Proteintech (Wuhan, China). Toți ceilalți reactivi de grad analitic sau puritate mai mare au fost obținuți de la furnizori comerciali.

Prepararea diferitelor fracții separate din CTE(Cistancheextract de tubulosa)

CT(Cistanchetubulosa)a fost colectat în noiembrie 2015 în Hetian, Xinjiang, China și autentificat de prof. Xiaobo Li. Exemplarul de voucher (20151108) a fost depus la Școala de Farmacie de la Universitatea Jiao Tong din Shanghai.

Probele zdrobite au fost extrase de trei ori cu apă distilată (1:10, w/v) timp de 2 ore la 80~90 ◦C pentru a obține CTE(Cistancheextract de tubulosa)(randamentul a fost de 57,1 la sută). CTE a fost dizolvat în apă distilată și apoi agitat încet cu etanol (1:4, v/v) și plasat la 4 °C timp de 24 de ore. Apoi, precipitatul și supernatantul au fost colectate prin centrifugare la 4000 rpm timp de 20 min. Polizaharidele totale (TP; randamentul a fost de 5,7 la sută) au fost obţinute prin spălare cu 80 la sută etanol şi deproteinizare cu reactiv Savage de trei ori din precipitatul colectat. Supernatantul rămas a fost apoi cromatografiat pe o coloană de rășină microporoasă D101 și eluat cu apă distilată și etanol 40%. Fracțiunile de apă eluate și 40% etanol au conținut oligozaharide totale (TO; randamentul a fost de 35,1%) șitotalglicozide(TG; randamentul a fost de 12,1 la sută), respectiv. TG(glicozide totale)a fost mai eluat cu apă distilată și 5%, 10% și 40% etanol prin rășină microporoasă D101 din nou, iar fracțiunile eluate de 5% și 40% etanol au fost glicozide iridoide totale (TG-IrG; randamentul a fost de 2,7%) și glicozide feniletanoide totale (TG-PhG; respectiv randamentul a fost de 8,7 la sută).

Analiza chimica

În primul rând, principalii constituenți chimici ai diferitelor fracții s-au separat de CTE(Cistancheextract de tubulosa)au fost caracterizate prin UPLC-QTOF-MS. În al doilea rând, conținutul relativ de carbohidrați și glicozide totale a fost determinat prin metoda UV-Vis. În al treilea rând, componentele majore (echinacozida, verbascozida, este verbascozida, 8-acidul epiloganic și acidul teniposid) au fost cuantificate printr-o metodă HPLC validată. Parametrii detaliați și validarea metodei sunt afișați în Materialele suplimentare.

Experimente pe animale

Programele experimentale specifice animalelor sunt prezentate în Fig. 1. Toate animalele experimentale au fost găzduite și aclimatizate timp de 1 săptămână înainte de experimente în Centrul pentru animale de laborator al Universității Jiao Tong din Shanghai (Shanghai, China), la temperaturi controlate ale camerei (25 ± 2). ◦C; 55 ± 10 la sută umiditate relativă) cu un ciclu de 12: 12 h lumină-întuneric. Această cercetare a fost efectuată în conformitate cu Ghidurile pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator ale SJTU. Facilitățile și protocoalele pentru animale au fost aprobate de Comitetul de etică a animalelor al SJTU (nr. A2019008).

O sută cincizeci de șoareci masculi ICR (cu greutatea de 18-20 g, 6 săptămâni) au fost achiziționați de la Shanghai Slack Biotechnology Company (Shanghai, China) și împărțiți aleatoriu în 10 grupuri (n=15/grup). Subiecții și dozele pentru șoarecii cu disperare comportamentală din fiecare grup sunt prezentate în Tabelul 1. Dozele de CTE(Cistancheextract de tubulosa) iar fracțiile sale separate au fost calculate prin următoarea formulă: doza=4.55 g/kg.d.bw × randament, care a fost determinată conform a trei calcule de doză echivalentă umană bazate pe suprafața corpului. Dozele de medicament pozitiv imipramină și metaboliții microbiotei intestinale (3-HPP și HT) au fost stabilite conform studiilor anterioare (Gupte și colab., 2016; Pablos și colab., 2019). După administrarea intragastrică o dată pe zi timp de 7 zile, testul în câmp deschis (OFT), testul suspensiei cozii (TST) și testul înot forțat (FST) au fost efectuate în a 8-a, a 9-a și, respectiv, a 10-a zile. Metodele specifice ale testelor comportamentale sunt prezentate în Materialele suplimentare.

Șaptezeci și doi de șobolani Sprague-Dawley masculi (cu o greutate de 160-180 g, 6 săptămâni) au fost achiziționați de la Shanghai Slack Laboratory Animal Company (Shanghai, China). Înainte de experimentele formale, toți șobolanii au fost supuși testului de preferință pentru zaharoză (SPT) după antrenamentul corespunzător. Șobolanii au fost împărțiți în 8 grupuri (n=9/grup) în funcție de preferința lor de zaharoză (Fig. S1 suplimentară). Subiecții și dozele pentru șobolani din fiecare grup sunt prezentate în Tabelul 1. Dozele au fost stabilite conform coeficientului de conversie între șoarece și șobolan pe baza dozelor lor eficiente la șoarecii cu disperare comportamentală. Și doza de medicament de control pozitiv fluoxetină a fost în concordanță cu studiul anterior (Hou și colab., 2017). Toate grupurile au primit o serie de stres cronic impredictibil ușor (CUMS), cu excepția grupului de control. Factorii de stres au fost aplicați continuu și aleatoriu timp de 4 săptămâni (a se vedea tabelul suplimentar S1 pentru detalii). Hrana și apa au fost disponibile gratuit pentru șobolanii de control, care au rămas netulburați într-o altă cameră, cu excepția testelor comportamentale. Subiecții au fost administrați intragastric cu 1 oră înainte de procedura CUMS pe parcursul a 4 săptămâni. După 28 de zile de stresori continui și administrare de medicamente, OFT, SPT și FST au fost efectuate în zilele de 29, 31 și, respectiv, 33. Metodele specifice ale experimentelor comportamentale sunt prezentate în Materialele suplimentare.

Colectarea probelor și analiza biochimică

După testele comportamentale, șobolanii aflați în jeun au fost anesteziați cu pentobarbital de sodiu și s-a recoltat sânge integral pentru a obține probe de ser. După perfuzia inimii cu soluție salină, conținutul de hipocamp, colon și cecal a fost colectat și stocat în -80 ◦C. Segmentele colonice distale au fost îndepărtate și fixate în paraformaldehidă 4%. Nivelurile de CORT, CRH, ACTH, TNF- , IL-1 , IFN- , cAMP, cGMP, T, GnRH, triptofan și chinurenină în ser, 5-HT, BDNF și TNF- în hipocamp, și TNF- și IFN- în colon au fost măsurate conform instrucțiunilor furnizate cu kiturile ELISA corespunzătoare.

Histologie, imunohistochimie și test Western-blotting

Pentru a observa modificările patologice în țesutul colonului s-au folosit colorații cu hematoxilină și eozină (H&E) și cu acid Alcian-periodic-Schiff (AB-PAS). În plus, au fost efectuate evaluări imunohistochimice ale acestor secțiuni pentru a observa expresia proteinei ZO-1 în celulele epiteliale colonice (Ding și colab., 2020). Detalii privind prepararea probei și testul Western-blotting pentru a determina expresia proteinei IDO1 în colon și hipocamp sunt, de asemenea, descrise în Materialele suplimentare.

Analiza profilului compozițional al microbiotei intestinale

Secvențierea cu randament ridicat 16S rRNA a fost efectuată de MajorBio Co., Ltd. (Shanghai, China), iar metoda detaliată și prelucrarea datelor sunt prezentate în Materialele suplimentare.

analize statistice

Datele sunt exprimate ca medie ± eroarea standard a mediei (SEM). Analiza unidirecțională a varianței (ANOVA) a fost utilizată pentru a compara mai multe grupuri utilizând software-ul SPSS 20.0. O diferență a fost considerată semnificativă la p < 0,05.="" corelațiile="" dintre="" microbii="" intestinali="" și="" anumiți="" factori="" fiziologici="" legați="" de="" depresie="" au="" fost="" analizate="" folosind="" coeficientul="" de="" corelație="" spearman="" bazat="" pe="" analiza="" hărții="">

Rezultate

Analiza chimică a diferitelor fracții separate de CTE(Cistancheextract de tubulosa)

Componentele principale au fost caracterizate folosind UPLC-QTOF-MS (Tabelul suplimentar S2 și Fig. S2) și au fost identificați un total de 21 de constituenți, inclusiv 16 constituenți ai glicozidelor feniletanoide, 2 constituenți ai glicozidelor fenolice în CTE(Cistancheextract de tubulosa), TG şi TG-PhG; și 3 constituenți ai glicozidelor iridoide în CTE(Cistancheextract de tubulosa), TG și TG-IrG. În general, conținutul relativ de carbohidrați totali în TP și TO a fost de 60,3 la sută și, respectiv, 80,8 la sută. Conținutul relativ altotalglicozideîn TG au fost 87,7 la sută. În mod corespunzător, glicozidele feniletanoide și iridoide au reprezentat 86,7% și, respectiv, 53,4% din TG-PhG și, respectiv, TG-IrG. Conținutul de echinacozidă, verbascozidă, este verbascozidă, 8-acid epiloganic și acid teniposid în fiecare fracție este prezentat în tabelul 2, iar cromatograma HPLC și datele de validare a metodei sunt enumerate în tabelul suplimentar S3 și Fig. S3.

Efectele diferitelor fracții separate de CTE(Cistancheextract de tubulosa)și metaboliții tipici de microbiota intestinală pe teste de disperare comportamentală la șoareci

După cum se arată în Fig. 2, în comparație cu grupul de control, șoarecii supuși la 7 zile de administrare de imipramină (control pozitiv) au prezentat reduceri semnificative ale timpilor de imobilitate atât în ​​FST, cât și în TST și nu au arătat niciun efect semnificativ asupra distanței totale parcurse în OFT. . Modificări similare au fost observate și în CTE(Cistancheextract de tubulosa), TG și HT, indicând faptul că CTE, TG(glicozide totale), iar HT a exercitat activitate antidepresivă, iar efectele nu au fost legate de excitabilitate. Prin urmare, TG(glicozide totale)și HT au fost fracția bioactivă dominantă separată de CTE și, respectiv, metaboliții tipici de microbiota intestinală. Interesant, nu s-au evidențiat modificări semnificative ale timpilor de imobilitate în FST după administrarea TG-PhG și TG-IrG în comparație cu cele ale controalelor sau în TST după administrarea TG-PhG, indicând faptul că prezența glicozidelor feniletanoide și iridoide ar putea fi esențială în activitatea antidepresivă a CTE.

Efecte farmacodinamice și modificări biochimice ale diferitelor fracții îmbogățite cu glicozide și HT la șobolanii CUMS

După cum se arată în Tabelul 3, șobolanii supuși la 28 de zile de paradigmă CUMS au prezentat reduceri semnificative (p <0.0{01) în="" preferința="" de="" zaharoză="" în="" spt,="" distanța="" totală="" parcursă,="" și="" numărul="" de="" creștere="" în="" oft,="" precum="" și="" o="" creștere="" semnificativă="" (p="">< 0,01)="" a="" timpului="" total="" de="" imobilitate="" în="" fst="" în="" comparație="" cu="" martorii,="" sugerând="" inducerea="" fenotipurilor="" asemănătoare="" depresiei="" la="" șobolanii="" cums.="" performanțele="" depresive="" au="" fost="" inversate="" în="" grupul="" flx="" (control="" pozitiv).="" în="" mod="" similar,="" tratamentul="" cu="" cte,="" tg,="" tg-phg,="" tg-irg="" și="" ht="" a="" dus="" la="" restabilirea="" preferinței="" de="" zaharoză="" la="" niveluri="" normale="" la="" șobolanii="" cums,="" care="" au="" fost="" 102,7%,="" 94,1%,="" 89,8%,="" 91,9%="" și="" 94,3%="" din="" controale,="" respectiv.="" în="" mod="" constant,="" în="" grupurile="" fst,="" cte="" și="" tg="" au="" prezentat="" efectele="" cele="" mai="" evidente,="" iar="" timpii="" de="" imobilitate="" au="" ajuns="" la="" 103,3%="" și,="" respectiv,="" 93,4%="" din="" cei="" ai="" grupului="" de="" control,="" în="" timp="" ce="" timpii="" de="" imobilitate="" ai="" grupurilor="" tg-phg,="" tg-irg="" și="" ht="" tocmai="" a="" ajuns="" la="" 62,1="" la="" sută,="" 73,2="" la="" sută="" și="" 69,9="" la="" sută="" dintre="" cei="" din="" grupul="" de="" control.="" creșteri="" semnificative="" similare="" (p="">< 0,05)="" au="" fost="" observate="" în="" distanța="" totală="" parcursă="" și="" numărul="" de="" creștere="" în="" oft="" după="">(Cistancheextract de tubulosa)administrarea , TG și HT și tratamentul cu TG-PhG și TG-IrG au avut tendința de a revizui numărul de creștere la șobolanii CUMS. Rezultatele au indicat că TG a fost fracția antidepresivă bioactivă dominantă separată de CTE, iar glicozidele feniletanoide și iridoide au fost indispensabile în exercitarea efectului său antidepresiv. Mai mult, s-a demonstrat că HT este unul dintre metaboliții activi ai TG in vivo.

În mod constant, suferința de CUMS a crescut semnificativ nivelurile de CORT, CRF, ACTH, TNF-, IL-1 și IFN- în ser și TNF- în hipocampul șobolanilor în comparație cu cele ale grupului de control (p.< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(Cistancheextract de tubulosa), TG și HT, indicând că CTE, TG(glicozide totale), iar HT a arătat efecte de ameliorare asupra hiperactivării axei HPA, inflamație periferică și neuronală severă și deficiențe în {{0}}HT și BDNF. De asemenea, tratamentul cu TG-IrG și TG PhG a redus semnificativ nivelurile serice de CORT, TNF- , IFN- și TNF- hipocampal și a crescut nivelul de 5-HT hipocampal la șobolanii CUMS (p < {{8}="" }.05).="" scăderi="" semnificative="" (p="">< 0.05)="" ale="" nivelurilor="" serice="" de="" crf="" și="" acth="" au="" fost="" observate="" și="" în="" grupul="" tg-irg="" comparativ="" cu="" grupul="" cums.="" interesant="" este="" că="" nivelurile="" serice="" de="" cort,="" tnf-,="" acth="" și="" crf="" în="" grupurile="" tg-phg="" și="" tg-irg="" au="" fost="" semnificativ="" mai="" mari="" decât="" cele="" din="" grupul="" tg="" (p="">< 0,05),="" iar="" nivelurile="" de="" 5-ht="" hipocampului="" iar="" bdnf="" a="" prezentat="" modelul="" de="" expresie="" opus="" (p="">< 0,05).="" aceste="" rezultate="" au="" arătat="" că="" efectele="" tg-phg="" și="" tg-irg="" asupra="" hiperactivității="" axei="" hpa,="" a="" inflamației="" periferice="" și="" neuronale="" și="" a="" deficitului="" de="" 5-ht="" au="" fost="" clar="" inferioare="" tg,="" indicând="" faptul="" că="" glicozidele="" feniletanoide="" și="" iridoide="" ar="" putea="" exercita="" efecte="" sinergice="" asupra="" multiplelor="" aspecte="" menționate="" mai="">

TG și HT reglează axa HPG și metabolismul ciclic al nucleotidelor la șobolanii CUMS

Au fost măsurate nivelurile de T, GnRH, cAMP și cGMP și raportul dintre cAMP și cGMP (cAMP/cGMP) în serul supus la CUMS, iar rezultatele sunt prezentate în Tabelul 4. Concentrațiile de T, GnRH, cAMP, și cAMP/cGMP în ser au fost semnificativ scăzute, iar nivelul cGMP a fost semnificativ crescut (p < 0.05)="" în="" grupul="" cums="" în="" comparație="" cu="" martorii,="" ceea="" ce="" indică="" faptul="" că="" supus="" la="" cums="" a="" dus="" la="" suprimarea="" axei="" hpg="" și="" disfuncția="" metabolismului="" nucleotidelor="" ciclice.="" comparativ="" cu="" grupul="" cums,="" nu="" au="" existat="" modificări="" semnificative="" în="" grupul="" flx.="" în="" mod="" surprinzător,="" după="">(glicozide totale)și tratamentul cu HT, creșteri semnificative (p < {{0}}.05)="" au="" fost="" prezentate="" în="" nivelurile="" serice="" de="" t,="" gnrh,="" camp="" și="" camp/cgmp,="" în="" timp="" ce="" nivelul="" de="" cgmp="" seric="" a="" fost="" redus="" semnificativ="" (p="">< 0,05).="" aceste="" rezultate="" au="" indicat="" că="">(glicozide totale)iar HT a reglat axa HPG și metabolismul ciclic al nucleotidelor, care a fost net superior controlului pozitiv al fluoxetinei.

TG și HT atenuează inflamația de grad scăzut la nivelul colonului și întreruperea barierei intestinale la șobolanii CUMS

Colorarea H&E a fost utilizată pentru a evalua deteriorarea morfologică a colonului și nu au fost observate diferențe semnificative în colon între grupurile experimentale (Fig. 4a). Mai mult, au fost analizate și efectele TG și HT asupra inflamației la nivelul colonului și a perturbării barierei intestinale (Fig. 4b-d). În comparație cu cele ale grupului de control, numărul de celule caliciforme și grosimea stratului de mucus au fost reduse în grupul CUMS. În mod constant, expresia proteinei ZO-1 și nivelurile de IFN- și TNF- în colon au fost semnificativ scăzute (p < 0.05)="" și="" crescute="" (p="">< 0,05).="" ),="" respectiv,="" sugerând="" că,="" deși="" nu="" a="" fost="" indusă="" nicio="" afectare="" histologică="" evidentă,="" supusul="" la="" cums="" a="" dus="" la="" o="" inflamație="" de="" grad="" scăzut="" la="" nivelul="" colonului="" și="" la="" perturbarea="" barierei="" intestinale.="" după="" fluoxetină,="">(glicozide totale), și tratamentul cu HT, numărul de celule caliciforme și grosimea stratului de mucus au fost crescute, iar nivelurile de IFN- și TNF- colonic au fost reduse semnificativ (p <0.05). în="" plus,="" tg="" și="" ht="" au="" crescut="" semnificativ="" (p="">< 0,05)="" expresia="" proteinei="" zo-1="" la="" un="" nivel="" similar="" cu="" cel="" al="" grupului="" de="" control.="" aceste="" rezultate="" au="" arătat="" că="">(glicozide totale)și HT ar putea atenua inflamația de grad scăzut în colon și întreruperea barierei intestinale la șobolanii CUMS.

Efectele TG și HT asupra compoziției microbiotei intestinale

După eliminarea secvențelor necalificate, s-au obținut un total de 1.874.721 de citiri efective. Rezultatele diversității alfa (Fig. 5a) și beta (Fig. 5b) au arătat că, deși bogăția (Chao) și diversitatea (Shannon) microbiotei intestinale în conținutul cecal nu diferă, structura generală a microbiotei intestinale în graficul analizei coordonatelor principale (PCoA) a indicat o diferență izbitoare între grupurile de control și CUMS. Mai mult, TG(glicozide totale)și tratamentul HT a crescut semnificativ bogăția bacteriană a șobolanilor CUMS și a indus diferențe marcate în diagrama PCoA în comparație cu cele ale șobolanilor CUMS, arătând asemănări clare cu martorii, în special atunci când TG(glicozide totale)a fost testat.

Modificările taxonomice ale microbiotei au confirmat în continuare că TG(glicozide totale)a exercitat un efect regulator dramatic asupra compoziției microbiotei intestinale. După TG(glicozide totale)administrare, abundența majorității taxonilor modificați la șobolanii CUMS a fost inversată la un nivel similar cu cel al grupului de control. O reducere semnificativă (14,2 la sută, p < 0,05)="" și="" o="" îmbogățire="" (53,6="" la="" sută,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(glicozide totale)grup comparativ cu grupul CUMS (Fig. 5c), respectiv. În mod constant, la nivel de familie (Tabelul suplimentar S4), TG a scăzut abundența Ruminococcaceae (filul Firmicutes) și Peptococcaceae (filul Firmicutes) cu 33,9% și, respectiv, 82,9%, în comparație cu grupul CUMS (p < 0).="" {{10}}5).="" în="" schimb,="" în="" ​​grupul="" tg="" au="" existat="" îmbogățiri="" semnificative="" în="" abundența="" familiei="" erysipelotrichaceae="" (filul="" firmicutes,="" 78,4="" la="" sută,="" p="">< 0,05)="" și="" muribaculaceae="" (filul="" bacteroidetes,="" 77,3="" la="" sută,="" p="">< 0,05).="" în="" mod="" constant="" la="" nivel="" de="" gen="" (fig.="" 5d),="" abundența="" de="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostri="" dium_9,="" neclasificat_f{_ruminococcaceae="" (membri="" ai="" familiei="" rumino-coccaceae)="" și="" peptococul="" (un="" membru="" al="" familiei="" peptococcaceae)="" a="" scăzut="" semnificativ="" în="" timp="" ce="" norank_f{_erysipelotrichaceae,="" allo="" baculum,="" dubosiella="" (membrii="" familiei="" erysipeltrichaceae)="" și="" norank_f{{24}="" }muribaculaceae="" (un="" membru="" al="" familiei="" muribaculaceae)="" au="" prezentat="" abundențe="" mai="" mari="" în="" grupul="" tg="" decât="" cei="" din="" grupul="" cums="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

Analiza corelației genurilor microbiene modificate afectate de TG(glicozide totale)și HT, hormoni legați de axa HPA, citokine proinflamatorii, 5-HT și BDNF

Pentru a elucida asocierile dintre modificările compoziției microbiotei intestinale afectate de TG(glicozide totale)și HT, și trăsăturile corespunzătoare legate de depresie, a fost efectuată analiza de corelație a lui Spearman. După cum se arată în Fig. 6, nivelurile de 5-HT și BDNF din hipocamp au fost corelate doar în mod semnificativ pozitiv cu norank_f{_Muribaculaceae. În caz contrar, ar putea fi identificate corelații clare între genurile microbiene modificate și hormonii legați de axa HPA. În special, Dubosiella, norank_f{_Muribaculaceae, norank_f{_ Erysipelotrichacea și Peptococcus au fost strâns legate de funcția axei HPA. CORT, CRF și ACTH serice au avut corelații negative cu Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae și norank{_f{_Erysipelotrichacea și asocieri pozitive cu Peptococcus. În plus, Dubosiella și norank_f{{_ Erysipelotrichacea au prezentat asocieri negative cu IFN-ul colonic și TNF- hipocampal, în timp ce relații similare existau în Allobaculum, Harryfinita și TNF- seric și hipocampal, precum și în norank. _f_Lachnospiracea și IFN- și TNF- seric. În contrast, Peptococcus a fost asociat pozitiv cu TNF-ul colonic și cu TNF- seric. De asemenea, norank_f{_Muribaculaceae a fost înrudit pozitiv cu IFN- și TNF- seric. Aceste rezultate au indicat că genurile microbiene modificate, în special anumite genuri aparținând familiei Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae și Muribaculaceae, care au fost afectate în mod specific de TG, au arătat asocieri puternice cu hormonii legați de axa HPA și citokinele proinflamatorii simultan, demonstrând rolul critic. a microbiotei intestinale în reglarea funcției axei HPA și a inflamației.

TG(glicozide totale)și HT inhibă metabolismul triptofan-chinurenin la șobolanii CUMS

Efectele TG(glicozide totale)și HT asupra nivelurilor de triptofan și chinurenină în serul șobolanilor, precum și expresia IDO1 în colon și hipocamp, au fost determinate. După cum se arată în Fig. 7 și Fig. 8, în comparație cu cel al grupului de control, nivelul de triptofan din ser a fost redus semnificativ în grupul CUMS, în contrast cu nivelul crescut de chinurenină și raportul chinurenină-triptofan (Kyn /Trp) și expresia proteinei IDO1 în colon și hipocamp. Comparativ cu grupul CUMS, Kyn/Trp seric în grupul FLX a fost semnificativ redus (p< 0.05).="" tg="">(glicozide totale)și tratamentul cu HT a dus la o creștere semnificativă a nivelului seric de triptofan la șobolanii CUMS (p < {{0}}.05)="" și="" o="" scădere="" a="" nivelurilor="" serice="" de="" chinurenină="" și="" kyn/trp="" (p="">< 0,05).="" în="" plus,="" tg="" a="" inhibat="" semnificativ="" expresia="" proteinei="" ido1="" în="" colonul="" șobolanilor="" cums="" (p="">< 0,05),="" în="" timp="" ce="" s-a="" observat="" o="" diferență="" nesemnificativă="" în="" exprimarea="" proteinei="" ido1="" în="" hipocamp="" între="" grupurile="" cums="" și="" tg.="" cu="" toate="" acestea,="" efectul="" ht="" asupra="" expresiei="" proteinei="" ido1="" în="" colon="" și="" hipocamp="" a="" fost="" contrar="" celui="" al="" tg,="" ceea="" ce="" indică="" faptul="" că="" tg="" și="" ht="" au="" inhibat="" metabolismul="" triptofan-chinureninei="" prin="" scăderea="" expresiei="" ido1="" în="" colon="" și,="" respectiv,="" în="" hipocampul="" șobolanilor="" cums.="">

Discuţie

În acest studiu, două modele animale diferite au fost utilizate pentru a detecta compuși bioactivi în CT(Cistanchetubulosa)care atenuează pentru prima dată comportamentele asemănătoare depresiei. TP și TO au fost cel mai probabil ingrediente ineficiente în CTE, în timp ce TG(glicozide totale)a prezentat cel mai mare potențial în tratamentul depresiei. Studii anterioare despre CT(Cistanchetubulosa), precum șiCistancheplantele, s-au concentrat mai ales pe bioactivitățile glicozidelor feniletanoide cu cel mai mare conținut și au neglijat importanța glicozidelor iridoide și a altor ingrediente mai puțin abundente. Interesant, studiul nostru a arătat că glicozidele feniletanoide și iridoide au arătat efecte sinergice asupra hiperactivității axei HPA, inflamație periferică și neuronală severă și deficiențe în 5-HT și BDNF hipocampale, care ar putea fi motivul critic al antidepresivului avantajos. efectul TG(glicozide totale). Aceste rezultate sugerează în continuare caracteristicile multicomponente și multițintă ale medicinei pe bază de plante și ne reamintesc că constituenții cu niveluri mai scăzute, chiar și urme de ingrediente ar putea juca, de asemenea, un rol cheie în efectele farmacologice.

Stresul cronic induce hiperactivitatea axei HPA, care promovează apariția depresiei, precum și suprimarea axei HPG prin scăderea eliberării GnRH și/sau a sensibilității hipofizare a GnRH (Kirby și colab., 2009). Între timp, cAMP și cGMP sunt noduri intermediare importante care s-au bazat pe mulți neurotransmițători și hormoni pentru a-și exercita efectele fiziologice (Siawrys și colab., 2002). Studiile recente au arătat în mod constant că apariția deficienței rinichi-yang este strâns legată de disfuncția axei hipotalamus-hipofiză-glanda țintă (Zhang et al., 2019). În sindromul de deficiență de rinichi-yang, s-au observat, de asemenea, reduceri marcate ale nivelurilor serice de AMPc și cAMP/cGMP. În acest studiu, am constatat că TG(glicozide totale)ar putea inhiba nivelurile serice de CORT, CRF și ACTH și crește conținutul seric de T și GnRH la șobolanii CUMS, indicând recuperarea disfuncției axei HPA și HPG după administrarea TG. În plus, TG(glicozide totale)a inversat o scădere semnificativă a nivelului de cAMP/cGMP seric la șobolanii supuși la CUMS. Astfel, mecanismul potențial de bază al CT(Cistanchetubulosa) în tratamentul depresiei și deficienței rinichi-yang pot fi parțial similare și merită să fie explorate în continuare. Mai mult, producerea dorinței și comportamentelor sexuale este un proces reflex neuronal complex. Hormonii sexuali sunt surse majore de excitare sexuală centrală, iar lipsa hormonilor sexuali poate cauza mai puțină dorință sexuală sau disfuncție sexuală (Holloway și Wylie, 2015). În special, 5-HT excesivă inhibă eliberarea de GnRH, care este un motiv dominant pentru apariția disfuncției sexuale cronice după tratamentul pe termen lung cu ISRS (Prasad și colab., 2015). În studiul nostru, fluoxetina (reprezentant al ISRS) a fost ineficientă în disfuncția axei HPG. Cu toate acestea, deși TG(glicozide totale)a îmbunătățit semnificativ nivelul de 5-HT în hipocamp, au fost observate și modificări similare ale nivelurilor serice de T și GnRH, ameliorând astfel suprimarea axei HPG. Aceste rezultate demonstrează avantajul distinct al CT(Cistanchetubulosa) în tratamentul depresiei, iar mecanismul intrinsec responsabil pentru aceste efecte trebuie studiat în continuare.

Dovezile tot mai mari au arătat că intestinul este o țintă potențială pentru tratamentul bolilor cronice folosind compuși naturali cu biodisponibilitate scăzută (Zhou et al., 2020). Cercetări recente (Wei et al., 2019) au indicat că tratamentul cu CUMS induce modificări ale microbiomului fecal și defecte ale barierei intestinale, care facilitează invazia bacteriană în mucoasa colonului și exacerbează reacțiile inflamatorii la nivelul colonului. În concordanță cu acel raport, rezultatele noastre au arătat că 4 săptămâni de expunere la CUMS au indus o scădere extinsă a numărului de celule caliciforme și a grosimii stratului de mucus în colonul de șobolan, precum și apariția perturbării barierei intestinale reprezentată de creșterea permeabilității intestinale, care a fost determinată de măsurarea proteinei ZO-1. În plus, au fost observate expresii crescute ale factorilor proinflamatori (cum ar fi TNF- și IFN-) în colon. În consecință, aceste constatări au indicat că, deși nu au fost induse leziuni histologice evidente, tratamentul cu CUMS a inițiat inflamația colonului și perturbarea barierei intestinale. Studiile anterioare au raportat că CT a exercitat o eficacitate îmbunătățită în prevenirea colitei induse de DSS la șoareci (Jia și colab., 2014). Inconsecvent, TG(glicozide totale)s-a demonstrat, de asemenea, că atenuează inflamația de grad scăzut la nivelul colonului și perturbarea barierei intestinale a șobolanilor CUMS, ceea ce subliniază potențialul său pentru tratarea clinică a bolilor legate de inflamația colonului.

Studiile ample au demonstrat, de asemenea, că relația care leagă microbiota intestinală comensală, axa HPA și inflamația este complexă și joacă un rol crucial în dezvoltarea depresiei (Misiak, et al., 2020). Modificările compoziției microbiotei intestinale pot contribui la eliberarea îmbunătățită de citokine și la sinteza de molecule bioactive mici (Du et al., 2020). Anumite citokine (cum ar fi TNF-) ar putea trece prin bariera hemato-encefalică și sunt activatori puternici ai axei HPA (Misiak și colab., 2020). La rândul său, hiperactivarea axei HPA poate contribui la disbioza microbiotei intestinale, la inflamația cronică a colonului și la alterarea permeabilității intestinale (Misiak et al., 2020). În concordanță cu studiile anterioare, modificarea microbiotei intestinale cu medicamente TG este probabil responsabilă pentru efectele sale de ameliorare asupra depresiei. Am observat că TG(glicozide totale)a inversat abundența taxonilor microbieni la diferite niveluri la șobolanii supuși CUMS la un nivel similar cu cel al martorilor. În special, principalele genuri modificate aparținând familiei Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae și Muribaculaceae s-au dovedit a fi foarte corelate cu axa HPA și cu inflamația. În concordanță cu rezultatele noastre, s-a raportat că familia Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae și Muribaculaceae joacă un rol important în menținerea integrității barierei mucoase și în apariția inflamației (Kankoush, 2015; Borton și colab., 2017; Zhang și colab., 2020). Prin urmare, am presupus că TG ar putea modera abundența unor genuri atribuite familiei Erysipelotrichacea, Peptococcaceae și Muribaculaceae, atenuând ulterior inflamația de grad scăzut la nivelul colonului, hiperactivitatea axei HPA și perturbarea integrității barierei mucoase. Interesant este că în studiul nostru, doar un singur gen numit nor ank_f{_Muribaculaceae a fost corelat cu 5-HT și BDNF în hipocamp. Mecanismul specific al relației rămâne neclar și trebuie analizat în continuare. În caz contrar, descoperirile sugerează, de asemenea, că este extrem de dificil pentru majoritatea genurilor modificate cauzate de TG să afecteze direct nivelurile de 5-HT din hipocamp. Pentru a explica modul în care modificările compoziției microbiotei intestinale influențează nivelul 5-HT hipocampului după tratamentul cu TG, ne-a atras atenția relația complicată care leagă metabolismul triptofanului, axa HPA, citokinele inflamatorii și 5-HT. Triptofanul este un aminoacid esențial pentru oameni și mai puțin de 1 la sută este utilizat în sinteza proteinelor, majoritatea (peste 90 la sută) fiind convertite de IDO1 și triptofan 2,3-dioxigenaza 2 (TDO2) în chinurenine și aproximativ 5% sunt conduse de triptofan hidroxilază pe calea serotoninei (Duan, et al. 2018). Nivelul de 5-HT din creier depinde în mare măsură de disponibilitatea triptofanului periferic, având în vedere că triptofanul este transportat în creier prin intermediul transportoarelor neutre de aminoacizi (Duan și colab., 2018). IDO1, enzima care limitează viteza în prima etapă a căii chinureninei, este indusă în principal de IFN- și alte citokine proinflamatorii, cum ar fi IL-1 și TNF- (Kennedy și colab., 2017), care s-au dovedit a fi asociate cu microbiota intestinală în studiul nostru. După cum sa raportat, mai mult triptofan este metabolizat prin calea chinureninei, reducând astfel în mod competitiv conversia triptofanului în 5-HT și legându-se cu scăderea 5-HT întâlnită frecvent în depresie (O'Mahony și colab., 2015). Astfel, nivelurile mai mici de triptofan și Kyn/Trp mai ridicate sunt frecvente și coincid cu un risc crescut de stare depresivă. După administrarea de TG, supraexprimarea IDO1 în colon a fost inhibată, ceea ce a dus la creșterea nivelului de triptofan seric și o reducere a Kyn/Trp seric, ceea ce a relevat legătura potențială dintre microbiota intestinală și nivelul 5-HT din hipocampus afectat de TG. Între timp, BDNF, un membru al familiei neurotrofinelor, este esențial pentru diferențierea celulelor, supraviețuirea neuronală, formarea sinapselor și procesele de neuroplasticitate în depresie (Greenberg și colab., 2009). Studii recente au arătat că BDNF a fost strâns asociat cu funcția de barieră a mucoasei intestinale și cu microbiota intestinală (Maqsood și Stone, 2016). De asemenea, s-a raportat că modificările microbiotei intestinale au potențialul de a crește nivelurile de exprimare a BDNF și, astfel, de a influența dezvoltarea comportamentelor asemănătoare depresive (Du et al., 2020). Cu toate acestea, similar cu variația 5-HT, a fost extrem de imposibil ca majoritatea genurilor modificate cauzate de TG în studiul nostru să afecteze direct nivelurile de BDNF din hipocamp, iar conexiunea moleculară intrinsecă și mecanismul necesită o examinare suplimentară.

În schimb, HT, un metabolit al TG al microbiotei intestinale(glicozide totale), a prezentat, de asemenea, un efect antidepresiv în studiul de față, care este în concordanță cu activitatea sa neuroprotectoare avantajoasă (Hu et al., 2014). De îngrijorare, HT ar putea modera, de asemenea, citokinele proinflamatorii, hormonii legați de axa HPA și HPG și concentrațiile 5-HT hipocampale la un nivel similar cu cel al martorilor la șobolanii CUMS, în timp ce majoritatea genurilor microbiene modificate au afectat de HT a avut corelații slabe cu indicii fiziologici de mai sus, sugerând că microbiota intestinală ar putea să nu fie ținta activității antidepresive a HT. Mai mult, HT a suprimat supraexprimarea IDO1 în hipocamp, dar nu și în colon, însoțită de nivelurile crescute de triptofan seric. Apariția diferențelor aparente între TG(glicozide totale)și HT se poate datora absorbției excelente a HT în fluxul sanguin și capacității HT de a traversa bariera hemato-encefalică (Robles-Almazan et al., 2018), ceea ce indică, de asemenea, că capacitatea metabolică puternică a microbiotei intestinale este deosebit de important în activitatea antidepresivă a TG, pe lângă funcțiile sale fiziologice. Prin urmare, am demonstrat preliminar că interacțiunea bidirecțională a fitochimicelor și microbiota intestinală joacă un rol critic în tratamentul depresiei cu administrarea de TG (așa cum se arată în Fig. 9).

Concluzie

Pe scurt, TG(glicozide totale)a fost responsabil în principal pentru activitatea antidepresivă a CT(Cistanchetubulosa), reflectând efectele sinergice ale glicozidelor feniletanoide și iridoide asupra hiperactivării axei HPA, inflamații periferice și neuronale severe și deficiențe în 5-HT și BDNF în hipocamp. În plus, mecanismul molecular potențial al efectului antidepresiv al TG(glicozide totale)a fost realizat prin interacțiunea bidirecțională a fitochimicelor și microbiota intestinală. În plus, ameliorarea axei HPG suprimate și a anomaliei nucleotidelor ciclice de către TG(glicozide totale)și HT, care nu au fost reglementate prin tratamentul cu ISRS reprezentați de fluoxetină, au indicat avantajul distinct al CT în tratamentul depresiei. Astfel de modulații reprezintă o strategie promițătoare pentru tratamentul depresiei folosind CT(Cistanchetubulosa) și medicamente tradiționale similare pe bază de plante.

Contribuții ale autorului

XL, YP și LF au proiectat experimentele și au analizat datele. LF și JW au efectuat experimentul și au analizat datele. LF și XL au redactat manuscrisul. PM a contribuit la experimentul pe animale și la testarea probelor, iar LZ a contribuit la analiza compoziției microbiotei intestinale. Toate datele au fost generate intern și nu a fost folosită nicio fabrică de hârtie. Toți autorii sunt de acord să răspundă pentru toate aspectele muncii, asigurând integritatea și acuratețea.

Declarație de interese concurente

Autorii declară că nu există conflicte de interese.

Mulțumiri

Această lucrare a fost susținută de granturi din partea Proiectului național de cercetare și dezvoltare cheie (2017YFC1702400).

Materiale suplimentare

Materialul suplimentar asociat acestui articol poate fi găsit, în versiunea online, la doi:10.1016/j.phymed.2021.153471.

De la: 'glicozide totale din tulpini aleCistanchetubulosaatenuarea comportamentelor asemănătoare depresiei: interacțiunea bidirecțională a fitochimicelor și microbiota intestinală prinLi Fan și colab

---Phytomedicine 83 (2021) 153471/ https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471