Celulele dendritice de tip 1 (DC) în bolile de rinichi

pentru mai multe informații:ali.ma@wecistanche.com

Celulele dendritice convenționale de tip 1 (cDC1) în bolile renale umane: corelații clinico-patologice

Titi Chen, Qi Cao și colab.

ABSTRACT

Fundal: Celulele dendritice de tip 1(cDC1) este un subset de DC convenționale, a căror funcție cea mai recunoscută este prezentarea încrucișată la celulele CD8 plus T. Am efectuat acest studiu pentru a investiga numărul și locațiaCelulele dendritice de tip 1(cDC1s) la diferite persoaneboli de rinichiprecum şi corelarea lor cu caracteristicile clinicopatologice şi celulele T CD8.

Metode: Am analizat 135rinichiprobe de biopsie.Boli de rinichiau inclus: necroză tubulară acută (ATN), nefrită interstițială acută (AIN), glomerulonefrită proliferativă (GN) (nefropatie cu IgA, nefrită lupică, GN pauci-imună, boală anti-GBM), GN neproliferativă (boala modificări minime, nefropatie membranoasă ), și nefropatie diabetică. Colorarea prin imunofluorescență indirectă a fost utilizată pentru a cuantifica cDC1s (Celulele dendritice de tip 1), CD1ct DC și celule T CD8 plus.

Rezultate:Celulele dendritice de tip 1(cDC1s) au fost rareori prezente în condiții normalerinichi. Numărul lor a crescut semnificativ în ATN și GN proliferativ, proporțional mult mai mult decât CD1ct DC. cDC1s (Celulele dendritice de tip 1)au fost găsite în principal în interstițiu, cu excepția nefritei lupice, a GN pauci-imună și a bolii anti-GBM, unde au fost proeminente în glomeruli și regiunile periglomerulare. Numărul de cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)corelat cu severitatea bolii în ATN, numărul de semilune în GN pauci-imunitar, fibroza interstițială în nefropatia IgA și nefrita lupusă, precum și prognosticul în nefropatia IgA. Numărul de celule CD8 plus T, de asemenea, a crescut semnificativ în aceste condiții și cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)număr corelat cu numărul de celule CD8 plus T în nefrita lupică și GN pauci-imună, multe dintre ele strâns co-localizate. Concluzii: cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)număr corelat cu diverse caracteristici clinicopatologice și prognostic reflectând un posibil rol în aceste afecțiuni. Asocierea lor cu celulele CD8 plus T sugerează un mecanism combinat în conformitate cu rezultatele la modelele animale.

INTRODUCERE

Celulele dendritice(DC) sunt orchestratorii centrali ai imunității eficiente. Aceste celule sunt eterogene și pot fi împărțite în subseturi distincte pe baza fenotipului și funcției lor. Celulele dendritice pot fi clasificate pe scară largă în DC-uri plasmacitoide (Celulele dendritice)(pDC) și DC convenționale (Celulele dendritice)(cDC).cDC este format din două subseturi majore: cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)(CD141* DC-uri (Celulele dendritice) la om și CD103t sau CD8ot la rozătoare) și cDC2 (CD1c la om și CD1 lbt la rozătoare) (1).cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)au fost descoperite mai întâi la șoareci și apoi la oameni și sunt caracterizate prin capacitatea lor superioară de a fagocita celulele necrotice prin receptorul Clec9A (DAMP) asociat cu modelul molecular și de a prezenta încrucișat la celulele T CD8 plus. În schimb, cDC2-urile sunt activatori eficienți ai celulelor T CD4*, dar inferioare la activarea celulelor T CD8t (2).

DC-uri (Celulele dendritice)au fost studiate la omboală de rinichiiar numărul lor s-a dovedit a fi crescut în glomerulonefrita(GN)(3, 4). După descoperirea cDCl, studiile acumulate pe animale au arătat că acestea joacă un rol esențial înboli de rinichi, cum ar fi nefropatia adriamicină și GN semilună, prin interacțiunea cu celulele T (5-8). Cu toate acestea, astfel de studii lipsesc la omboală de rinichi, cu un singur studiu care demonstrează un număr crescut de CDC (ConvenţionalCelulele dendritice)în GN (9). Am efectuat acest studiu pentru a oferi o analiză a subseturilor cheie de CDC, cDC1 (Celulele dendritice de tip 1), și cDC2, într-o gamă largă de oameniboli de rinichiinclusiv boli neglomerulare [necroză tubulară acută (ATN), nefrită interstițială acută (AIN)], GN proliferativă (nefropatie cu IgA, nefrită lupică, GN pauci-imună, boală anti-GBM), GN neproliferativă (boală cu modificări minime ( MCD), nefropatie membranoasă) și nefropatie diabetică. Am descoperit că CDC trebuie să fie semnificativ corelat cu caracteristicile patologice, inclusiv severitatea ATN, formarea semilunei în GN pauci-imun și fibroza interstițială în GN mediată imun. În plus, în concordanță cu capacitatea lor specializată de a activa celulele CD8 plus T la animale. modele, am demonstrat, de asemenea, corelarea lor cu celulele T CD8t din aceste probe. Aceste descoperiri oferă un impuls pentru a explora noi ținte terapeutice care manipulează aceste celule pentru tratamentulrinichiboli.

Faceți clic pe tulpina Cistanche pentru boală de rinichi

MATERIAL SI METODE

Pacienți și probe de țesut

Studiul a fost realizat în conformitate cu principiile Declarației de la Helsinki și a fost aprobat de Comitetul de etică a cercetării umane din districtul de sănătate local din Western Sydney. A fost obținut consimțământul informat al pacientului. Am analizat 176 de diagnosticare înghețaterinichibiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 ani) între 18 iunie 2016 și 30* iunie 2017 în Westmead Hospital, Sydney, Australia.Rinichițesuturile au fost congelate rapid în compusul OCT (Tissue-Tek Sakura, SUA) și depozitate la gradul de -80 . Patruzeci și unu (41) de probe au avut o calitate slabă a țesuturilor și au fost excluse din studiu. Datele inițiale ale pacientului, inclusiv vârsta, sexul, rata estimată de filtrare glomerulară (eGFR) și gradul de proteinurie au fost colectate la momentulrinichibiopsie.eGFR a fost calculat folosind formula CKD-EPI. Diagnosticul a fost pus de un patolog renal, bazat pe lumină, imunofluorescență (IF) și microscopie electronică, precum și pe istoricul clinic.

Au fost analizate o varietate de boli, inclusiv boli non-glomerulare (ATN, AIN), GN proliferative (nefropatie cu IgA, nefrită lupică, GN pauci-imună, boala anti-GBM), GN neproliferativă (MCD, nefropatie membranoasă) și diabet. nefropatie. Pentru ATN, am inclus doar cazurile non-septice, deoarece ATN septic are o fiziopatologie diferită. ATN a fost clasificat în continuare în boală ușoară-moderată (definită ca<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 procente de tubuli corticali care prezintă leziuni). Nefropatia IgA a fost clasificată în funcție de scorul Oxford MEST (hipercelularitate M mezangială, E hipercelularitate endocapilară, glomeruloscleroza segmentară S, atrofie tubulară T/fibroză interstițială). De asemenea, am analizat corelația dintre cDC1 (Celulele dendritice de tip 1) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>=15). Nefrita lupică a fost clasificată în 2 grupe în funcție de nivelul de fibroză interstițială (<25%,>=25 procente de implicare interstițială corticală). GN pauci-imun a fost clasificat in 2 grupe in functie de procentul de glomeruli cu semiluna(<40%,>=40 procente).

Ca de obiceirinichimartori, am folosit 5 corteze renale normale din probe de nefrectomie, precum și 2 donatoririnichinu este potrivit pentru transplant. Pentru nefrectomiile tumorale au fost prelevate probe de la polul opus tumorii și la cel puțin 5 cm de marginea tumorii. Aceste țesuturi aveau un aspect macroscopic normal. Microscopic, niciuna dintre acestearinichiprobele au avut dovezi de inflamație sau leziune glomerulară sau tubulointerstițială semnificativă. Am folosit țesut splenic normal de la donator adult ca martor pozitiv pentru testarea anticorpilor.

Colorare prin imunofluorescență

Secțiunile de criostat în serie au fost tăiate la 5 μm și plasate pe lame de sticlă Superfrost Ultra Plus (Thermo Scientific, SUA). Diapozitivele au fost stocate la -80 grade . Secțiunile de țesut au fost fixate cu 100% metanol la grade -20 timp de 10 minute și apoi uscate la aer. Colorarea prin imunofluorescență indirectă a fost efectuată folosind următoarea metodă: secțiunile de țesut au fost spălate în DPBS (Lonza, SUA) și blocate cu 2% albumină serică bovină (Sigma-Aldrich, SUA) timp de 15 minute; apoi au fost colorați cu anticorp primar la 4 grade peste noapte, urmat de anticorpi secundari timp de 40 de minute la temperatura camerei. Tabelul 1 este o listă de anticorpi primari și secundari utilizați și diluțiile acestora. Nucleii au fost colorați cu DAPI (1:250,000, ThermoFisher, SUA) înainte ca probele să fie montate pe lamele cu mediu de montare fluorescent (Dako, SUA). Au fost verificate și excluse colorația nespecifică și reactivitatea încrucișată între diferiți anticorpi primari și secundari.

TABEL 1|Anticorpi primari și secundari utilizați în studiu

cDCl-urile au fost identificate prin colorare pentru markerul Clec9A. La om, expresia Clec9A este foarte limitată la cDCl din sânge și țesuturi (10, 11). Pentru a confirma acest lucru înrinichi, am efectuat o colorare dublă a Clec9A și HLA-DRB1, precum și a Clec9A și CD1lc în condiții normale și bolnave selectate. Majoritatea, dacă nu toate Clec9A s-au suprapus cu HLA-DRB1 (Figura suplimentară 1) și CD1lc (Figura suplimentară 2).

FIGURA 1|Rinichi normal cDC1 (Celulele dendritice de tip 1), cDC2 și CD8 plus celule T.

DC-uri (Celulele dendritice)au fost rareori prezente în normalrinichiiar numerele de cDC2 au fost de aproximativ 7 ori mai mari decât numărul de cDC1 (Celulele dendritice de tip 1). (Bară=100 mm).

REZULTATE

Caracteristicile inițiale ale pacientului.Caracteristicile inițiale ale pacienților din cohortele de control și de boală sunt rezumate în Tabelul 2. Un total de 135 de pacienți au fost incluși în studiu. O gamă largă derinichiboliau fost analizate inclusiv boli non-glomerulare [ATN (22), AIN (10)], GN proliferativă [nefropatie gA (44), nefrită lupică (12), GN pauci-imună (12), boala anti-GBM (4)] , GN neproliferativă [MCD (5), nefropatie membranoasă (5)] și nefropatie diabetică (21). Au existat mai multe femei în grupul cu nefrită lupică și vârsta lor tinde să fie mai tânără în comparație cu celelalterinichiboli, ceea ce este în concordanță cu literatura de specialitate(12). Pacienții cu GN pauci-imună și boală anti-GBM au avut cel mai scăzut eGFR. Nivelul proteinuriei a fost cel mai ridicat în MCD și nefropatia membranoasă.

TABELUL 2|Caracteristici de bază.

Numărul și locația DC (Celulele dendritice)în Control și Boală.cDCl au fost rareori prezente în normalrinichi(Figura 1) și numerele cDC2 au fost de aproximativ 7 ori mai mari decât numărul cDC1 (Celulele dendritice de tip 1).Numărul de cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)a crescut semnificativ în ATN și GN proliferativ (Figura 2A), în timp ce numărul acestora a rămas neschimbat în comparație cu controlul în AIN, nefropatie membranoasă, MCD și nefropatie diabetică (Figura 3 suplimentară). Numărul de cDC2 a crescut, de asemenea, semnificativ în ATN și GN proliferativ (Figura 2B). A existat o reducere a cDC2 (Celulele dendritice de tip 2)/cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)raportul indicând cDCl (Celulele dendritice de tip 1)a crescut proporțional mai mult decât cDC2 (Figura 2C).

FIGURA 2|Numărul de cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)și cDC2, raportul cDC2/cDC1 și celulele T CD8 plus în bolile de control și selectate.

Valoarea p este calculată pentru fiecare boală față de control. Ambele cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)și cDC2 a crescut semnificativ în ATN, IgA, nefrită lupică, GN pauci-imună și boala anti-GBM (A, B)

cu cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)a crescut proporțional mai mult decât cDC2 în ATN, nefrita lupică, GN pauci-imună și boala anti-GBM (C).

Celulele CD8 plus T au crescut semnificativ în ATN, IgA, nefrită lupică, GN pauci-imună și boala anti-GBM (D).

Majoritatea CDC au fost localizate în interstițiu, cu excepția nefritei lupice, a GN pauci-imună și a bolii anti-GBM, unde au fost găsite și în regiunile periglomerulare și intraglomerulare (Figura 3A). numărul de celule T CD8t în regiunile peri-glomerulare și intra-glomerulare (Figura 3A) și multe dintre ele co-localizate cu cDCl (Figura 3B). Pe de altă parte, cDC2-urile au fost rareori găsite în regiunile intra-glomerulare și au existat co-localizare minimă cu celulele T CD8 plus.

FIGURA 3|(A) cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)și celulele T CD8 plus în regiunile intraglomerulare. (B) co-localizarea cDC1 cu celulele T CD8 plus. (Bară=100 mm). * P < 0.05,="" **="" p=""><>

Asociere între cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)Cu caracteristici clinico-patologice și celule T CD8 plus Am analizat corelația dintre cDCl (Celulele dendritice de tip 1)și caracteristici clinicopatologice, precum și celulele T CD8 plus. Au fost 22 de cazuri de ATN (boală moderată n=12, boală severă n=10). Boala mai severă a fost asociată cu un număr mai mare de cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)(p=0.032), dar nu cDC2 (Figura 4A).cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)a crescut proporțional mai mult decât cDC2 (raportul cDC2/cDC1 2,5, p=0.019). Numărul de celule CD8 plus T a crescut semnificativ și în ATN (p{=0.005) (Tabelul 3, Figura 2D). Numărul de cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)nu s-a corelat cu numărul de celule T CD8* din ATN.

TABELUL 3|CD8 plus numărul de celule T și coeficientul de corelație între cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)și numărul de celule T CD8 plus în control și rinichi bolnavi.

Au fost analizate patruzeci și patru de cazuri de nefropatie IgA. Folosind scorul MEST de clasificare Oxford (hipercelularitate M mezangială, E hipercelularitate endocapilară, glomeruloscleroza segmentară S, atrofie tubulară T/fibroză interstițială), un număr mai mare de cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)a fost asociat cu un scor T mai mare (p{0}}.008), dar nu cu scoruri MES (Figura 4B). Au fost 7 cazuri cu semilune și numărul de cCD1 nu a fost asociat cu numărul de semilune. NumarulrinichiCelulele T CD8* au fost semnificativ mai mari în nefropatia IgA decât în ​​control (p<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (Celulele dendritice de tip 1) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>Reducere cu 20% a eGFR. Împărțirea pacienților în 2 grupe conform cDCl (Celulele dendritice de tip 1) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15), cDC1 mai mare (Celulele dendritice de tip 1)grupul de număr a fost asociat cu rezultate mai proaste (Figura 4E).

FIGURA 4|Corelația între cDC1 (Celulele dendritice de tip 1), cDC2 și CD8 plus numărul de celule T și severitatea bolii (A-D).

Curba Kaplan Meier a supraviețuirii nefropatiei IgA (E). Scorul T 0 se referă la procentul din zona care prezintă atrofie tubulară/fibroză interstițială <=25 procente="">

Scorul T 1 se referă la procentul din zona care prezintă atrofie tubulară/fibroză interstițială 26 - 50 procente, scorul T 2 se referă la procentul din zona care prezintă atrofie tubulară/fibroză interstițială > 50 la sută.

Supraviețuirea a fost definită ca o reducere > 20% a eGFR la sau înainte de 31 decembrie 2019. NS, nu este semnificativ.

Au fost 12 cazuri de nefrită lupică. Ca și în nefropatia IgA, un număr mai mare de cDCl a fost asociat cu o fibroză mai severă (p=0.020) (Figura 4C). În plus, numărul de celule CD8 plus T a crescut semnificativ (P).<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (Celulele dendritice de tip 1)și celulele T CD8t au fost găsite atât în ​​peri-glomerulare, cât și în intra-glomerulare, indicând că pot juca un rol în această afecțiune. (Celulele dendritice de tip 1)Numărul a fost corelat cu severitatea fibrozei, precum și cu prognosticul în nefropatia IgA, în timp ce nu a fost găsită o astfel de corelație în boala fibrotică non-mediată imun (nefropatia diabetică). În al treilea rând, a existat o corelație puternică între numărul de cDCl și formarea semilunii în GN pauci-imun, iar cDCl au fost prezente în număr mare în regiunile peri-glomerulare și intra-glomerulare, indicând posibilul lor rol într-o formare a semilună. În al patrulea rând, numărul de cDC1 s-a corelat cu numărul de celule CD8 plus T în nefrita lupică și GN pauci-imună, cu numeroase cDCl co-localizate cu celulele CD8 plus T sugerând posibila lor interacțiune. Acest lucru este în concordanță cu descoperirile noastre în modelele animale derinichiboalacare prezintă omologi murini ai cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)celulele activează de preferință celulele T CD8t. Luate împreună, aceste constatări sugerează că cDCl joacă un rol important într-o serie derinichiboliinclusiv ATN, fibroza interstițială în boala mediată de imun și formarea semilunii și că acestea pot acționa potențial prin activarea celulelor T CD8t.

cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)Numărul corelat cu severitatea bolii în ATN. În ATN non-septic, pentru prima dată, am arătat un număr semnificativ crescut de DC (Celulele dendritice), în special cDCl comparativ cu cDC2. Important, cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)numărul corelat cu severitatea bolii. În plus, numărul de celule T CD8 plus a fost de asemenea crescut. ATN este de obicei cauzată de leziuni de ischemie-reperfuzie (IRI), nefrotoxine sau sepsis. În mod tradițional, IRI și toxinele provoacă inflamație sterilă, iar imunitatea înnăscută, unde DC și celulele T sunt mai puțin importante, a fost considerată a juca un rol dominant. Cu toate acestea, dovezile din ce în ce mai mari din studiile pe animale au arătat că atât cDCl, cât și celulele CD8 plus T sunt jucători importanți. Studiile anterioare privind nefrotoxicitatea IRI la animale și cisplatină au constatat că numărul total de celule DC și T a crescut (13-17). Studiile noastre anterioare au arătat în nefropatia Adriamicină, numărul de cDCl a crescut semnificativ (5). În IRI, un subset de celule dendritice activate demonstrează o capacitate crescută la antigenul prezent încrucișat la celulele T CD8t (18). În nefropatia cu Adriamicină, am găsit, de asemenea, că CDCl a provocat un răspuns CD8 plus celulelor T care duce la leziuni (5). Lipsa unei corelații între cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)și celula T CD8* în ATN umană, spre deosebire de constatările din modelele animale, pot reflecta diferite căi non-imunologice de leziune în ATN uman, comparativ cu IRI la modelele de șoarece în care cDCl joacă un rol semnificativ prin celulele T CD8*. În plus, la rozătoare s-a demonstrat că cDCl este recrutat în țesut de către chimioatractantul XCLl produs de celulele ucigașe naturale (19). Prin urmare, ar putea merita să studiem acest lucru în continuarerinichiboala.

cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)Numărul corelat cu fibroza interstițială mediată imun. A doua constatare semnificativă din acest studiu este că numărul de cDCl este corelat cu severitatea fibrozei interstițiale asociate cu boala mediată imun (nefropatie IgA și nefrită lupică), dar nu și în boala fibrotică non-mediată imun (nefropatie diabetică), a arătat studiul anterior. un număr crescut de cDCl și cDC2 în fibroza interstițială (9). Noi, pentru prima dată, am arătat că acest lucru este adevărat numai în bolile mediate imun și cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)numărul a crescut proporțional mai mult decât cDC2. În plus, am demonstrat și cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)numărul corelat cu prognosticul și numărul de celule T CD8* a crescut, de asemenea, semnificativ în nefropatia IgA. Acest lucru este susținut de studiile pe animale care arată DC (Celulele dendritice)contribuie direct la fibroză. De exemplu, amfiregulina derivată din DC a promovat fibroza (20). De asemenea, este posibil ca CDCl să fi contribuit la fibroză prin celulele CD8 plus T, despre care se știe că contribuie la fibroză în alte organe (21-23). Deoarece fibroza interstițială este legată de progresia bolii cronicerinichiboala, nu este surprinzător că am găsit cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)numărul pentru a fi un marker de prognostic bun în nefropatia IgA. Alte studii au arătat că celulele T CD8t sunt corelate cu prognosticul nefropatiei IgA (24), care poate fi rezultatul prezentării încrucișate din cDCl. În nefrita lupică, am demonstrat o corelație între cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)numărul și fibroza interstițială precum și numărul de celule T CD8t. Studiile anterioare au arătat, de asemenea, o creștererinichicDC1 (Celulele dendritice de tip 1)numărul în nefrita lupică(25), în special în nefrita lupică de clasa III și VI, cu o reducere corespunzătoare a numărului lor circulant (26). Am extins aceste constatări arătând că ele se corelează și cu modificările cronice. Este bine stabilit că inflamația interstițială, care este compusă din celule T, celule B, celule dendritice și macrofage, are un rol dominant în progresia nefritei lupice (27).cDCls poate contribui la progresia nefritei lupice într-o varietate de moduri. În primul rând, activarea interferonului joacă un rol cheie în patogeneza nefritei lupice (28-30), iar cDCl sunt un producător proeminent de IFN-入. (31) În al doilea rând, cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)poate contribui la progresia nefritei lupice prin celulele T CD8t (32-37), iar descoperirea noastră a unei corelații între cDCl și CD8 plus T sprijină în continuare posibila lor interacțiune. Rolul celulelor CD8 plus T în nefrita lupică a fost demonstrat anterior. Celulele CD8 plus T controlează imunitatea autoreactivă prin eliberarea de molecule citotoxice. S-a descoperit că celulele CD8 plus T din nefrita lupică au atenuat funcția citotoxică, care poate declanșa autoimunitatea (38). În plus, aceste celule pot genera și autoantigene lupusului(39). Au existat dovezi abundente că celulele T CD8* în ambelerinichi(32,33)și urina(34-36)se corelează cu activitatea bolii și leziunile histologice în nefrita lupusă. În plus, epuizarea celulelor T CD8* sa dovedit a prezice un prognostic favorabil(37).

cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)Numărul corelat cu numărul de semilune în GN Pauci-Imune. În GN pauci-imun, am găsit cDCl agregate în regiunile peri-glomerulare și intra-glomerulare, iar numărul lor a fost corelat cu numărul de semilune și celule CD8 plus T. Studiile anterioare au arătat că DC (Celulele dendritice)sunt rareori prezente în interiorul glomerulului(3,4,9) sau doar în număr foarte mic(40). Pe de altă parte, celulele T au fost proeminente în regiunile interstițiului, periglomerulare și intraglomerulare({{6} }). Am descoperit că atât celulele CDCl, cât și celulele T CD8* sunt proeminente în regiunile peri-glomerulare și intra-glomerulare, multe dintre ele co-localizate. În plus, cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)numărul corelat cu semiluna și numărul celulelor CD8 plus T. Toate aceste descoperiri sugerează un rol pentru cDCl în formarea semilunii prin interacțiunea cu celulele T CD8*. Rolul patogen al celulelor T CD8t în formarea GN pauci-imunitară și a semilunii a fost deja demonstrat pe modele animale (45,46). În concordanță cu descoperirile noastre la oameni, în GN semilună animal, cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)și celulele T CD8* au fost găsite în special în regiunea periglomerulară (47,48). S-a demonstrat că capsula lui Bowman oferă o nișă imunologică protejată prin prevenirea accesului DC și al celulelor citotoxice CD8 plus T în spațiul lui Bowman și, prin urmare, podocite (45,47). Cu toate acestea, atunci când capsula lui Bowman a fost spartă, aceste celule inflamatorii au obținut acces și au distrus podocite, rezultând GN rapid progresiv(47).

O limitare a acestui studiu este că tehnica de colorare IF permite utilizarea doar a unui număr limitat de markeri. Ar fi benefic să ne extindem descoperirile utilizând tehnologii precum citometria în flux, care poate combina mai mulți markeri pentru a analiza în continuare fenotipul acestor DC. (Celulele dendritice)și profilurile lor relevante de citokine și chemokine. Cu toate acestea, informațiile despre locație se vor pierde. Alte tehnici precum imunohistochimia multiplex și Nanostring pot fi, de asemenea, luate în considerare în studiile viitoare pentru a examina în continuare aceste celule înrinichiboala. În plus, atunci când se colorează cDC2 folosind CD1c, HLA-DRB1 și CD1lc, poate exista un mic procent de celule B care exprimă și acești markeri, ceea ce nu a fost exclus.

CONCLUZII

Chiar dacă cDC1 (Celulele dendritice de tip 1)cuprinde un subset minor de DC (Celulele dendritice)în condiții homeostatice, acest studiu demonstrează o corelație semnificativă între această populație de celule și caracteristicile clinicopatologice la omrinichiboala. Acest lucru reflectă importanța lor probabilă în procesele bolii, cum ar fi ATN, formarea semilunii în GN proliferativă și fibroza interstițială în GN mediată imun. În plus, co-localizarea și corelarea lor cu celulele T CD8t pot oferi o explicație pentru mecanismul lor de acțiune, coroborând datele de la modele animale. Aceste descoperiri oferă un impuls pentru a explora noi ținte terapeutice care manipulează aceste celule pentru tratamentulrinichiboli, așa cum am făcut în studiile pe animale (6), și să investigheze utilizarea lor ca marker de prognostic. Sunt necesare studii suplimentare atât la oameni, cât și la animale pentru a interoga rolul cDC1s (Celulele dendritice de tip 1), mecanismul lor de acțiune și cum să le țintim cel mai bine din punct de vedere terapeutic.

REFERINȚE

1. Pakalniskyte D, Schraml BU. Diversitatea specifică țesuturilor și funcțiile celulelor dendritice convenționale. Adv Immunol(2017)134:89-135.doi:10.1016/bs.ai.2017.01.003

2. Merad M, Sathe P, Helft J, Miller J, Mortha A. Linia celulară dendritică: Ontogenia și funcția celulelor dendritice și subseturile lor în starea de echilibru și setarea inflamată. Annu Rev Immunol (2013)31:563-604.doi:10.1146/annual immunol-020711-074950

3. Segerer S, Heller F, Lindenmeyer MT, Schmid H, Cohen CD, Draganovici D, et al. Expresia specifică de compartiment a markerilor de celule dendritice în glomerulonefrita umană.RinichiInt (2008)74(1):37-46.doi:10.1038/ki.2008.99

4. Woltman AM, de Fiter JW, Zuidwijk K, Vlug AG, Bajema IM, van der Kooij SW, et al. Cuantificarea subgrupurilor de celule dendritice în țesutul renal uman în condiții normale și patologice.RinichiInt (2007)71(10):1001-8. doi: 10.1038/sj.ki.5002187

5. Cao Q, Lu J, LiQ, Wang C Wang XM, Lee VW și colab. Celulele dendritice Cd103 plus provoacă răspunsuri ale celulelor T Cd8 plus pentru a acceleraRinichirănireîn nefropatia adriamicină. J Am Soc Nephrol (2016) 27(5):1344-60.doi: 10.1681/ASN.2015030229

6. Wang R, Chen T, Wang C, Zhang Z, Wang XM, Li Q și colab.Flt3 Inhibition AlleviatesCronicRinichiBoalaprin suprimarea CD103 plus activarea celulelor T mediată de celule dendritice. Nephrol Dial Transplant(2019)34(11):1853-63. DOI: 10.1093/gfy385

7. Evers BD, Engel DR, Bohner AM, Tittel AP, Krause TA, Heuser C și colab. Cd103 plusRinichiCelulele dendritice protejează împotriva GN Crescentic prin menținerea Il-10-producerea de celule T reglatoare. J Am Soc Nephrol (2016)27(11):3368-82. DOI: 10.1681/ASN.2015080873

8. Kitching AR, Ooi JD. Celulele dendritice renale: drumul lung și întortocheat. J Am Soc Nephrol (2018)29(1):4-7.doi: 10.1681/ASN.2017101145

9. Kassianos AJ, Wang X, Sampangi S, Muczynski K, Healy H, Wilkinson R. Creșterea recrutării tubulointerstițiale de CD141(hi)CLEC9A (plus) și CD1c(plus) mieloide în fibroza renală și B.RinichiB. Am J Physiol Renal Physiol (2013)305(10): F1391-401. doi:10.1152/adrenal.00318.2013

10. Guilliams M, Dutertre CA, Scott CL, McGovern N, Sichien D, Chakaro S, et al. Analiza dimensională nesupravegheată aliniază celulele dendritice în țesuturi și specii. Imunitate (2016)45(3):669-84.doi: 10.1016/j.immuni.2016.08.015

11. Villani AC, Satija R, Reynolds G, Sarkizova S, Shekhar K, Fletcher J, et al. ARN-seq-ul unicelular dezvăluie noi tipuri de celule dendritice din sângele uman, monocite și progenitori. Science(2017)356(6335):4-6. DOI: 10.1126/science.aah4573

12. Almaani S, Meara A, Rovin BH. Actualizare despre nefrita lupică. Clin I Am Soc Nephrol (2017)12(5):825-35.doi: 10.2215/CJIN.05780616

Notă:cele de mai sus nu sunt o listă completă de referință