Ce poate face Acteoside în Cistanche cu hiperplazia benignă de prostată?
Mar 17, 2022
Cercetarea acteosidei asupra acțiunii a inhibat hiperplazia benignă de prostată la șobolani
CUVINTE CHEIE: Cistanche,acteosid, hiperplazie benignă de prostată,apoptoza.
Contact:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
ABSTRACT:
A fost stabilit modelul de șobolan de hiperplazie prostatică beg nin și a fost stabilit trei grupuri de doze deacteosidau fost administrate pe cale orală timp de 4 săptămâni, pentru a studia efectulacteosiddistilate dinCistanchetubulosa peapoptozași ultramicro structura prostatei la șobolani cuhiperplazie benignă de prostată. Schimbarea ultrastructurală a prostatei a fost observată prin microscopie electronică de transmisie. Rezultatele au arătat căApoptozade prostată șobolan normal nu a fost evident, a existat un nivel scăzut
rata de prostatăapoptozaîn grupul model, în doze mariacteosiddinCistanchetratamentul tubulozei, prostata șobolanuluiapoptozaa fost semnificativ mai mare decât cea a modelului.
În procesul de hiperplazie benignă de prostată, celuleapoptozaeste unul dintre mecanismele care atrag în prezent atenția. Codificarea genelor o determină și permite celulelor să controleze moartea celulară programată răspunzând la semnale specifice.
După ce prostata se dezvoltă la dimensiunea adultă, rata de proliferare a celulelor prostatei este menținută la 1% până la 2% prin echilibrul ratei medii deapoptoza. Odată ce echilibrul este rupt, acesta este considerat a fi cauzabenigne prostatice Hiperplazia. În condiții normale, nivelurile de estrogen și androgeni și circulația normală în prostată sunt un fel de stare de auto-echilibru care există în procesul de proliferare șiapoptoza. Când echilibrul dintre proliferare șiapoptozaeste în afara echilibrului, aceasta va duce la creșterea și extinderea în continuare a glandei, ceea ce determină în principal extinderea compartimentului celular epitelial [1].
În acest experiment, am stabilit un model de hiperplazie de prostată de șobolan pentru a observa și analiza efectulacteosid(glicozidă asemănătoare coacțiunii), una dintre componentele chimice aleCistanchepeapoptozași modificări ultrastructurale ale celulelor prostatei de șobolan, pentru a evalua efectulacteosidEfectul inhibării hiperplaziei prostatei oferă o bază științifică pentru dezvoltarea și utilizarea de noi utilizări ale medicinei chinezeCistanche.
Celacteosiddistilate dinCistanchepoate afectabenignProstaticHiperplazia.
Materiale și metode
Animale experimentale
Cincizeci de șobolani SD de sex masculin în vârstă de 6-7 săptămâni, grad curat, cântărind 80-100 g, sunt furnizate de Centrul de Medicină Comparată al Universității Yangzhou.
Reactivi și medicamente
Testosteronul propionat injecție este de la Shanghai General Pharmaceutical Co, Ltd., caietul de sarcini este 25 mg·mL-1, iar numărul lotului este 060708. Soluția de colorant PI este de la Centrul de testare al Universității Yangzhou. Conținutul de Aktiside este de 945 g·kg-1, pregătit de Departamentul de Analiză a Medicinei Chineze, Universitatea Farmaceutică din China.
Echipamente experimentale
Microscopul electronic cu transmisie Philips Tecnai 12 este de la Philips, Olanda; Citometrul de debit FACSAria este de la BD în Statele Unite ale Americii.
Grupări și modelare
După castrare conform metodei literaturii [3], șobolanii au fost injectați cu 5 mg· (kg·d)-1de propionat de testosteron pe partea din spate a șobolani pentru 4 săptămâni pentru a stabili un model de hiperplazie de prostată. Șobolanii model au fost împărțiți aleatoriu în grupuri de modele: model plusacteosidgrup cu doze mari, model plusacteosidgrup cu doză medie, model plusacteosidgrup de doze mici, zece șobolani în fiecare grup; alți zece șobolani normali erau ca grup de control.
Metoda de administrare
La o săptămână după modelare,acteosiddoze mari, medii și mici s-au administrat grupuri de 60, 30, 15 mg· (kg·d)-1de gavaj, respectiv. Grupul model și grupul de control au fost puse un volum egal de soluție salină normală o dată pe zi timp de patru săptămâni, cântărite o dată pe săptămână și ajustate doza în funcție de greutatea corporală.
Colectarea și prelucrarea eșantioanelor
Material și prepararea probei: la 24 de ore după ultima administrare, se cântăresc șobolanii de post și se sacrifică șobolanii prin dislocare cervicală. Deschideți imediat abdomenul inferior, îndepărtați țesuturile din jurul prostatei, eliberați prostata și luați o parte din prostată pentru a fi utilizată într-o baie de gheață. Omogenizator de țesuturi omogenizat, suspensie de prostată preparată cu o singură celulă și colorat cu iodură de propidiu într-o singură etapă [4]; o altă parte a țesutului prostatic a fost fixată în 25 g· L-1glutaraldehidă pentru a pregăti secțiuni ultra-subțiri.
Pregătiți o suspensie cu o singură celulă: În condiții aseptice, îndepărtați complet prostata șobolanului și mutați-o într-un vas petri, spălați sângele și cheagurile de sânge de pe suprafața țesutului prostatic cu PBS și îndepărtați grăsimea din jur, fibrele în exces și membranele celulare. Din aceeași prostată de șobolan, țesutul prostatic proaspăt cu dimensiunea de aproximativ 0,5 cm3 a fost luat și tăiat în bucăți pentru a pregăti o suspensie de celule de prostată [5]. Așezați blocul de țesut de prostată într-un vas petri și adăugați o cantitate mică de PBS; utilizați foarfece oftalmologice pentru a tăia țesutul într-o baie de gheață, măcinați omogenizatorul la o suspensie, adăugați 10 ml PBS, pipetați omogenatul de țesut și utilizați plasa de nailon de dimensiune a porilor de 0,074 mm a fost filtrată în eprubetă, centrifugată la 1 500 r min-1timp de 3 minute, iar precipitatul a fost spălat de trei ori cu PBS, de fiecare dată la 500 r min-1centrifugare pe termen scurt de viteză mică pentru a elimina resturile celulare, la 0.037 mm dimensiunea porilor nailon plasă filtru pentru a elimina aglomerări celulare. Numărați celulele și ajustați concentrația celulară la 2×109 celule· L-1. Patați cu soluție de colorare 1 ml PI, protejați-vă de lumină la 4 °C timp de 10 minute.
Pregătirea secțiunii ultrathin: Pentru pregătirea secțiunii țesutului ultrathin, a se vedea literatura de specialitate [6].
Rezultate și analize
Efectulacteosidprivind apoptoza prostatei șobolanului
Figura 1 prezintă vârfulapoptozadetectate prin citometrie de flux, care arată căacteosidare un efect pro-apoptotic. Analiza statistică a celuleiapoptozarezultatele au arătat că celula de șobolanapoptozarata a fost crescută semnificativ (24,7±1,85)% și (16,1±1,04)% după tratamentul cu doze mari, medii și mici deacteosid. , (14,5±0,68)%, iar grupul normal (1,1±0,06)%, grupul model (9,5±0,5)%, grupul pozitiv (9,83±0,76) Diferența de comparație% este semnificativă (P<0.01), indicating="" that="" aktidine="" can="" induce="" cell="">apoptoza, efectul este mai puternic decât cel al medicamentului martor pozitiv Qianliekang (Figura 2).
Efectulacteosidpe ultrastructura celulelor hiperplaziei prostatice.
Observațiile microscopiei electronice arată că prostata normală a șobolanului are nuclee complete, evident nucleoli, și o distribuție uniformă a cromatinei nucleare; reticulul endoplasmatic dur are aceeași dimensiune, este aranjat frumos și nu are vacuolare. Nu există microvilli asemănătoare degetelor pe suprafața epiteliului, nici o umflare a mitocondriilor și puține secreții în cavitate. Nucleele celulelor prostatei din grupul model au fost deformate și micșorate, iar citoplasma a fost abundentă. Reticulul endoplasmatic dur a fost extins într-o formă asemănătoare chistului, iar chistul a fost umplut cu particule de proteine de înaltă densitate. Mitocondriile au fost ușor umflate (au existat, de asemenea, vacuole), Există secreții de densitate medie în cavitatea, și granule de secreție rotundă densă au fost găsite în unele celule. La șobolanii tratați cuacteosid, nucleul era intact în comparație cu grupul model. Nucleul a fost concentrat, densitatea nucleară a fost crescută, heterocromatina s-a acumulat, citoplasma a avut vacuole, iar vacuolele reticulului endoplasmatic dur au fost reduse. Doza micăacteosidgrupul a avut nuclee ușor încrețite Contracție, citoplasmă neregulată, mai bogată și reticul endoplasmatic dur redus (Figura 3).
Discuție
Apoptozaeste un proces de moarte celulară programată în organismele multicelulare care reglează dezvoltarea organismului și menține stabilitatea mediului intern, iar codurile genetice îl determină.
Celulele apoptotice au caracteristicile lor morfologice și biologice unice: contracția cromatinei nucleare, degradarea și fragmentarea extensivă a ADN-ului, contracția la scară largă a celulelor, contracția membranelor celulare și proeminențele exterioare care acoperă organitele (cum ar fi mitocondriile și ribozomii) și formarea fragmentelor nucleare caracteristice Corpuri apoptotice, celulele apoptotice nu numai că păstrează o structură și o funcție completă a membranei celulare, dar au, de asemenea, o structură completă a organitelor, care este diferită de necroza celulară.
Mecanismul molecular al celuleiapoptozanu a fost pe deplin elucidat până în prezent. Studiile [7] au arătat că există multe gene implicate în reglarea genelor celulelorapoptoza.
Apoptozaeste procesul debenignProstaticHiperplaziaacest lucru atrage în prezent mai multă atenție. Acesta este determinat prin codificarea genelor și permite celulelor să controleze moartea celulelor răspunzând la semnale specifice [1]. După ce prostata se dezvoltă la dimensiunea adultă, rata de proliferare a celulelor prostatei este menținută la 1% până la 2% prin echilibrulapoptozarată. Distrugerea acestui echilibru a fost întotdeauna considerată cauzabenignProstaticHiperplazia[8]. În condiții normale, nivelul de estrogen și androgeni și circulația regulată în prostată sunt un fel de stare de auto-echilibru care există în procesul de proliferare șiapoptoza. Când proliferarea șiapoptozasunt în afara echilibrului, aceasta va determina glandele să crească și să se extindă în continuare, în principal datorită extinderii compartimentului celular epitelial [9]. Întreruperea acestui echilibru se poate datora modificări ale nivelului de androgeni sau funcții; de asemenea, se poate datora oricărui răspuns produs de stimularea AR a DHT sau modificărilor nivelurilor factorilor de creștere mediați de DHT [2]. În acest studiu, FCM detectat celulăapoptozași a constatat căapoptozarata de celule de prostată la șobolani dat doze mari deacteosida crescut semnificativ. Rezultatele microscopiei electronice au arătat că nucleele celulelor prostatei din grupul model au fost deformate, reticulul endoplasmatic dur a fost foarte extins într-o formă asemănătoare chistului, iar chistul a fost umplut cu particule proteice de înaltă densitate și a fost găsită vacuolarea. Mitocondriile au fost ușor umflate, iar studiile conexe[ 10-11 ] Raportul este consecvent.
Dupăacteosidintervenție, gradul de hiperplazie a prostatei la șobolani a fost mai mic. Grupul cu doze mari a arătat, de asemenea, semne timpurii deapoptoza: nucleul celulelor prostatei a rămas intact, iar vacuolele reticulului endoplasmatic au fost semnificativ mai mici. Condensarea nucleelor, creșterea densității nucleare, acumularea de heterocromatină, similară cu caracterizarea celulelor țesutului prostatic la șobolani după castrare [12-13]. Arată căacteosidde lacistanchepoate induce celuleapoptozala șobolanii cu hiperplazie de prostată, reglează și restabilește echilibrul celulelor prostateiapoptozași proliferarea, și să joace un rol în inhibarea proliferării celulelor prostatei. Rezultatele acestui studiu și studiile anterioare [14] indică faptul că efectul inhibitor alacteosid, o componentă chimică aCistanchetubuloza, pe hiperplazia prostatei poate fi legată de promovarea celulelorapoptoza, reducerea supraexpreției AR și TGF-UR1. Mecanismul detaliat de acțiune trebuie încă studiat în continuare.
Referinţe:
Sursa este de la autorii: Sun Weidong1, Chen fei2, Sun Yun2(1. Yangzhou Spitalul de Medicina Traditionala Chineza, Yangzhou 225009, Jiangsu; 2. Școala de Medicină, Universitatea Yangzhou, yangzhou 225001, Jiangsu)
