ADRIAN 13 săptămâni studiu de toxicitate subcronică de 2-(l-menthoxy)etanol în F344 șobolani rinichi

Pentru mai multe informații:emily.li@wecistanche.com

Takeshi Toyoda, Kohei Matsushita, Hirotoshi Akane, Tomomi Morikawa și Kumiko Ogawa

1 Divizia de Patologie, Institutul Național de Științe ale Sănătății, 3-25-26 Tonomachi, Kawasaki-Ku, Kawasaki 210-9501, Japonia

Abstract:

2-(-Menthoxy)etanol a fost frecvent angajat ca un agent aromatizant; cu toate acestea, datele privind toxicitatea etanolului 2-(I-menthoxy)rămân limitate. Am efectuat un studiu de toxicitate subcronică de 13 săptămâni de 2-(I-menthoxy)etanol la șobolani F344 de sex masculin și feminin, cu doze de0.15.d.sau 250 mg/ke greutate corporală (BWday administrat pe cale orală hw medie folosind ulei de porumb ca vehicul Nu au fost observate modificări toxicologice semnificative în starea generală, greutatea corporală, sau aportul de alimente au fost observate în orice grup. Evaluarea hematologică a arătat scăderea hemoglobinei, hematocritului, volumului corpuscular mediu și hemoglobinei corpusculare medii și creșterea numărului de trombocite la grupul masculin 250 mg/kg. Biochimia serică a relevat creșterea colesterolului total în grupul de șobolani de sex masculin și feminin de 250 mg/kg, trigliceride reduse la femelă 250 mg/kg grup și creșterea proteinelor totale în grupul masculin250 mg/kg, indicând efecte asupra metabolismului lipidelor și sinteza proteinelor. Pentru greutățile organelor, greutățile absolute și relative ale ficatului și glandelor suprarenale au fost crescute în grupul de 250 mg/kg de ambele sexe și, respectiv, în grupul masculin de 250 mg/kg. Analiza histopatologica a aratat nefropatie cronica la mascul 15 mg/kg sau grupuri superioare, cu crestere absoluta si relativa crescutarinichiGreutăţi, precum și creatinina serică crescută, la grupurile masculine de 60 și 250 mg/kg. Cu toate acestea, granulele eozinofilice care conțin o globulină au fost identificate în tubulii proximali, sugerând o nefropatie de a2-globulină specifică șobolanilor masculi și fără semnificație toxicologică. Aceste rezultate au indicat că nivelul de efect advers observat al etanolului 2-(-menthoxy)a fost de 60 mg/kg BW/zi pentru ambele sexe (DOI; 10.1293tox2020-0091:J Toxicol Patho1 2021;34:309-317)

Cuvinte cheie:2-(-menthoxy )etanol, 2-1-menthoxyethandl,hranăAditiv, agent aromatizant, șobolan Fischer, menthd

Cistanche este bun pentru rinichi

Introducere

Etanolul 2-(-Menthoxy)(nr. CAS 38618-23-4)este un lichid limpede și incolor, cu un miros caracteristic și este utilizat pe scară largă ca agent aromatizant. Comitetul mixt de experți FAO/OMS pentru aditivii alimentari (CMEAA) a evaluat etanolul 2-(1-metoxi)ca agent aromatizant clasificat ca substanță legată structural de mentol. Pe baza clasei structurale de agenți aromatizanți, etanolul 2-(-metoxi)a fost atribuit clasei I. În Statele Unite și Europa, nivelurile de admisie de2-(I-metoxi)etanol de către oameni au fost estimate a fi 12 ug/persoană/zi și, respectiv, 0,01 ug/persoană/zi, ambele sub pragul clasei I de 1.800 ug/persoană/zi. Pe baza acestor estimări, se consideră că etanolul 2-(1-metoxi)etanolul nu poate prezenta probleme de siguranță în timpul utilizării de rutină ca agent aromatizant.

Ca parte a evaluării riscurilor, s-a arătat că etanolul 2-(1-menthoxy)nu a fost mutagen în testul Ames, iar singurul studiu in vivo efectuat până în prezent a fost un studiu de toxicitate acută orală la șobolani de sex masculin și feminin (LD。 :>2.000 mg/kg greutate corporală [BW)1. În ciuda utilizării etanolului 2-(1-menthoxy)ca agent aromatizant. sunt disponibile date limitate privind toxicitatea la doze repetate a acestui compus. Laboratorul nostru a investigat toxicitatea mai multor aditivi alimentari, inclusiv a agenților aromatizanți reprezentativi din fiecare categorie, în modelele de rozătoare2-7. Pentru a clarifica profilul toxicologic și pentru a stabili un nivel de efecte adverse observate (NOAEL), am efectuat un studiu de toxicitate subcronică de 13 săptămâni al etanolului 2-(1-etoxi), care a fost administrat pe cale orală șobolanilor F344 prin gavaj.

Materiale și metode

Substanța chimică de testat

2-(I-Menthoxy)etanol (Lot nr.510002, puritate 99.9%)produs de Takasago Int. Corp. (Tokyo, Japonia)a fost furnizat de divizia de standarde și evaluare, Departamentul pentru Siguranța Alimentară, Ministerul Sănătății, Muncii și Bunăstării, Ja-pan, cu sprijinul Asociației Japoneze a Materialelor aromatizate și parfumate (Tokyo, Japonia). Deși substanța de testat a fost furnizată sub formă de amestec de izomeri optici (nr. CAS 38618-23-4), aceasta a fost confirmată ca 1-enantiomer (nr. CAS 75443-64-0) de către producător. Gavaj oral cu ulei de porumb (Wako Pure Chemical Industries, Osaka, Japonia), deoarece vehiculul a fost selectat ca cale de administrare din cauza insolubilității apoase și a volatilității etanolului 2-(1-menthoxy). Soluțiile de etanol 2-(1-menthoxy)au fost preparate dai-ly, imediat înainte de administrare. După depozitare timp de 2 ore la temperatura camerei, raporturile reziduale de 2-(-menthoxy)etanol în 4, 40,și 400 mg/ml soluție au fost confirmate ca 96.8%,99.8%, respectiv 96.5%, prin cromatografie în fază gazoasă (Asociația japoneză de inspecție a mediului alimentar și alimentar, Tokyo, Japonia).

Animale experimentale

În total, 40 de bărbați și 40 de șobolani fără agenți patogeni specifici femelei (F344/DuCrlCrlj, în vârstă de 5 săptămâni) au fost achiziționați de la Charles River Laboratories Japan (Yokohama, Japonia) și utilizați după aclimatizare timp de o săptămână. În timpul studiului, animalele au fost adăpostite în cuști din policarbonat cu așternut moale, menținute într-o cameră cu un sistem de barieră pentru a controla ciclul lumină/întuneric (12 ore), ventilație (rată de schimb a aerului de 18 ori/h), temperatură (24±1 °C) și umiditate relativă (55±5%). Cuștile și așternuturile cu cip au fost înlocuite de două ori pe săptămână. Fiecare animal avea acces liber la apa de la robinet și la o dietă bazală (CRF-1; Drojdie orientală, Tokyo, Japonia). La începutul experimentului, animalele au fost alocate aleatoriu la patru grupe de câte 10 șobolani masculi și femele fiecare, pe baza greutăților corporale măsurate imediat înainte de începerea tratamentului cu substanța chimică de testat.

Proiectarea studiului

Într-un studiu preliminar de 28 de zile de evaluare2-(1-menthoxy)etanol administrat la doze de 0.200.400, și 800 mg/kg BW/zi, greutățile hepatice absolute și relative au fost semnificativ crescute în toate grupurile tratate de ambele sexe (date nu au arătat). Pe baza acestor rezultate, Am selectat 2-(-menthoxy)etanol doze de 0,15,60 și 250 mg/kg BW/zi pentru ad-administrare la șobolani de sex masculin și feminin în prezentul studiu de toxicitate de 13 săptămâni.

Condițiile generale și mortalitatea au fost evaluate zilnic. Greutățile corporale, precum și cantitățile de dietă furnizată și reziduală, au fost măsurate o dată pe săptămână în timpul perioadei experimentale. Toți șobolanii au fost postiți peste noapte la finalizarea tratamentului, iar probele de sânge pentru hematologie și biochimie serică au fost colectate din aorta abdominală sub anestezie profundă prin inhalare folosind izofluran. Proiectul studiului a fost în conformitate cu Orientările pentru desemnarea aditivilor alimentari și revizuirea standardelor de utilizare a aditivilor alimentari din Japonia (1996) și a fost aprobat de Comitetul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor al Institutului Național de Științe ale Sănătății, Japonia.

Hematologie și biochimie serică

Următorii parametri hematologici au fost ana-lizați folosind analizoare automate de hematologie ProCyte Dx (Laboratoarele IDEXX, Westbrook, ME, SUA): numărul de celule albe din sânge (WBC), numărul de celule roșii din sânge (RBC), concentrația hemoglobinei (HGB), hematocritul (HCT), volumul corpuscular mediu (MCV), hemoglobina medie corpusculară (MCH),

concentrația medie a hemoglobinei corpusculare (MCHC), numărul de trombocite (PLT) și leucocitele diferențiale, inclusiv neutrofilele (Neut), limfocitele (limfatice), monocitele (Mono), eozinofilele (Eosino) și bazofilele (Baso). Analiza biochimică serică a fost efectuată de Oriental Yeast pentru următorii parametri: proteină totală (TP), albumină (Alb), raportul albumină/globulină (A/G), bilirubina totală(Bil). glucoză, colesterol total (T-Chol), trigliceride (TG), azot ureic (BUN), creatinină (Cre), calciu (Ca), fosfo-rus anorganic (IP), sodiu (Na), potasiu (K), clor (Cl), ca-partat aminotransferaza (AST), alanin aminotransferaza (ALT), fosfataza alcalina (ALP), și y-glutamyl trans-peptidaza (y-GTP).

Greutățile organelor și evaluarea histopatologică

O necropsie completă a fost efectuată pentru toate animalele. și creierul, timusul, plămânii, inima, splina,ficat,SuprarenaleGlandeleRinichi, testiculele și ovarele au fost cântărite. Aceste organe, precum și țesuturi din măduva spinării, nervul trigemen, glanda pituitară, cavitatea nazală, glandele salivare, limba, esofagul, traheea, aorta, glanda tiroidă, glanda paratiroidă, pancreasul, stomacul, intestinele mici și mari, ganglionii limfatici submandibulari și mezenterici, vaginul, uterul, vezica urinară, glanda prostatică, veziculele seminale, epididimul, femurul și sternul cu măduvă osoasă, vertebrele, mușchii scheletici, nervul sciatic, pielea și glanda mamară au fost fixate în formalină 10% tamponată neutru; apoi, secțiunile încorporate în parafină au fost pregătite și colorate cu hematoxilină și eozină pentru examinarea histopatologică. Testiculele și ochii cu glande harderiene au fost fixate în fixativul lui Bouin și, respectiv, în soluția lui Davidson. Țesuturile osoase, inclusiv cavitatea nazală, vertebrele, sternul și femurul, au fost decalcificate folosind un amestec de 10% acid formic și formalină tamponată 10% timp de până la 2 săptămâni. Evaluarea histopatologică a fost efectuată pentru toate țesuturile obținute de la animale din grupul de control și grupul a administrat cea mai mare doză, cu excepția cazului în care au fost observate leziuni legate de tratament.

Imunohistochimie pentru α,-globulina

La șobolanii de sex masculin, acumularea de a.globulină în kid-ney a fost examinată prin analiza imunohistochimică a secțiunilor încorporate în parafină. Pentru recuperarea antigenului, secțiunile obținute de la 5 șobolani din fiecare grupă au fost incubate cu proteinază K(DAKO, Glostrup, Danemarca)timp de 1 min la temperatura camerei. Toate secțiunile au fost scufundate în soluție de 3% H, O./metanol timp de 10 minute la temperatura camerei pentru inactivarea activității peroxidazei endogene. După blocarea reacțiilor nespecifice cu ser de iepure normal 10%, secțiunile au fost incubate cu un anticorp primar pentru α-globulină (diluat 1:400; anti-șobolan α., anticorp globulină; R&D Systems, Minneapolis, MN, SUA)peste noapte la 4°Cs Vizualizarea legării anticorpilor a fost efectuată cu ajutorul unui kit ABC Vecta-Stain Elite (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) și 3,3'-diaminobenzidină. Toate secțiunile au fost contracolorate cu hematoxilină.

Analiza statistică

Variațiile valorilor datelor pentru greutatea corporală în timpul perioadei experimentale, precum și pentru hematologie, biochimie serică și greutățile organelor au fost evaluate pentru omogenitate folosind testul lui Bartlett. Analiza unidirecțională a varianței și, respectiv, testul Kruskal-Wallis au fost utilizate pentru date omogene și eterogene. La determinarea diferențelor semnificative din punct de vedere statistic, testul de comparație multiplu dunnett a fost utilizat pentru a compara grupurile de control și tratament. Comparațiile dintre incidențele și notele histopatologice au fost analizate prin utilizarea testului de probabilitate exactă a lui Fisher și, respectiv, a testului U/ al lui Mann-W Whitney. Valorile P ale<0.05 were="" considered="" statistically="">

Rezultatele

Parametrii interni, hematologia și biochimia serică Nu s-au observat semne clinice semnificative pe parcursul perioadei experimentale și toate animalele au supraviețuit până la necropsia programată. În plus, nu s-au observat diferențe semnificative în ceea ce privește greutatea corporală și aportul zilnic de alimente la șobolanii de sex masculin și feminin (Fig. 1A și B).

Datele privind hematologia și biochimia serică sunt prezentate în tabelele I și, respectiv, 2. Analizele hematologice au relevat scăderea semnificativă a HGB, HCT, MCV și MCH și creșterea PLT la șobolanii de sex masculin administrat 250 mg/kg BW/ay 2-(1-menthoxy)etanol(Tabelul 1). În biochimia serică, s-au observat creșteri semnificative ale TP, T-Chol și Ca și scăderi ale Bil și ALP la bărbații din grupul de 250 mg/kg (tabelul 2). O creștere semnificativă a Cre și o scădere a A/G au fost observate la bărbații din grupele 60 și 250 mg/kg. La femei, o creștere semnificativă a Ca și o scădere a ALP au fost înregistrate în grupurile de 60 și 250 mg/kg, în timp ce T-Chol crescute și a redus A / G, Bil, TG. AST și ALT au fost detectate în grupul de 250 mg/kg.

Deși s-a observat o creștere semnificativă a TG și o scădere a cl la bărbații cărora li s-a administrat 60 mg/kg, lipsa oricărei relații de doză a sugerat că aceste diferențe nu au fost asociate cu expunerea la substanța de testat.

Greutăți de organe

Datele privind greutățile organelor sunt rezumate în tabelul 3. Greutățile hepatice absolute și relative au fost crescute semnificativ la ambele sexe din grupa de 250 mg/kg (tabelul 3). O creștere semnificativă a greutăților hepatice relative a fost observată la bărbații din grupul 60 mg/kg, La bărbați, absolută și relativărinichigreutățile au fost crescute semnificativ în grupele de 60 și 250 mg/kg. La grupul masculin 250 mg/kg, s-au observat creșteri semnificative ale greutăților absolute și relative ale glandelor suprarenale și greutăți relative ale splinei și testiculelor.

Histopatologie și imunohistochimie

Datele pentru constatările histopatologice și imunohistochimice sunt rezumate în tabelele 4 și, respectiv, 5. Constatările histopatologice au arătat că frecvența acumulării de granule eozinofilice (Fig.2A-D), tubuli bazofile și turnate hialine, precum și inflamația interstițială focală înrinichi, au fost semnificativ crescute în toate grupurile de tratament masculin în comparație cu grupul de control (tabelul 4). Pe baza analizelor imunohistochimice, șobolanii masculi tratați cu substanța de testat au prezentat o creștere a imunoreactivității α.globulinei în celulele epiteliale ale tubilor proximali, demonstrând o dependență clară de doză (Fig.2E-H)(Tabelul 5).

La necropsie, un șobolan de sex masculin din grupul de 250 mg/kg a arătat o extindere severă a drepteirinichidatorită unui nefroblastom caracteristic din punct de vedere histologic. Deși nefroblastomul este mai puțin frecvente în majoritatea tulpinilor de șobolan9, acest caz a fost considerat accidental, deoarece niciun alt animal nu a prezentat leziuni similare. În plus, în studiile de carcinogenitate orală, incidența nefroblastom spontan la șobolani de sex masculin F344/DuCrlCrlj relatărilor a variat între 0-2.0%10. Deși mai multe leziuni au fost detectate sporadic în alte organe, nu au fost evidente modificări semnificative dependente de tratament în incidența acestor leziuni.

Discuție

Până în prezent, 24 de agenți favorizanți, inclusiv etanolul 2-(-menthoxy), au fost evaluați de CMEAA ca substanțe legate structural de mentol și toți sunt enumerați ca "fără probleme de siguranță" la nivelurile actuale estimate de admisie,.2-(1-Menthoxy)etanolul este clasificat într-un subgrup de alcooli aliclici sau eteri și este considerat a fi conjugat în principal cu acidul glucuronic, urmată de excreția urinară!. Deși LD oral。 valorile acestor substanțe la rozătoare sunt relativ ridicate, datele din studiile de toxicitate la doze repetate rămân limitate. Un studiu de toxicitate la doze repetate de 13 săptămâni a arătat că carboxilatul de mentil pirolidonă (nr. CAS 68127-22-0), un compus legat structural de mentol, poate fi asociat cu creșterea ficatului relativ șirinichigreutăți la șobolani Wistar de sex masculin și feminin. Acumularea de α.-globulina în tubulii proximali de șobolani masculi a fost, de asemenea, observată la o doză de 1,1ll mg/kg BW/zi, iar NOAEL a fost determinată ca 109 mg/kg BW/zi.

În prezentul studiu de toxicitate subcronică de 13 săptămâni de etanol 2-(1-menthoxy), nu s-au observat modificări toxicologice ale stării generale, greutății corporale și aportului alimentar. În urma evaluării hematologice, s-a observat o scădere a HGB (96,6% la valorile medii de control), HCT(96,3%), MCV(98,4%), și MCH(98,2%) și o creștere a PLT (1l1%) la grupul masculin de 250 mg/kg, care au fost considerate influențe toxicologice ale tratamentului cu etanol 2-(1-menthoxy)etanol Atât absolut (115% la ambele sexe), cât și relativ (119% la bărbați și 111% la femei)greutățile hepatice au fost semnificativ crescute la ambele sexe la 250 mg/ kg grupe. Deși nu au existat modificări histopatologice în ficat, nivelurile crescute de T-Chol seric (l10% la bărbați și 121% la femei) și TP(105% la bărbați) și o reducere a TG(60,1% la femei)în grupurile de 250 mg/kg indică modificări toxice asociate metabolismului lipidelor și sintezei proteinelor în ficat. De asemenea, au fost detectate doze reduse de HGB și MCH și PLT, T-Chol și TP crescute la bărbați și scăderea TG și creșterea greutăților hepatice absolute și relative la ambele sexe, cu semnificație statistică în studiul preliminar de 28 de zile (date care nu au fost prezentate), confirmând că acești parametri hematologici și serici biochimici modificați, precum și greutăți hepatice, nu au fost efecte incidentale, ci legate de substanța de testat. În schimb, creșterea semnificativă a greutăților hepatice relative detectate la grupul masculin de 60 mg/kg în prezentul studiu nu a fost însoțită de o creștere a greutății absolute sau de modificări ale parametrilor biochimici asociați, sugerând că această creștere a fost o schimbare adaptivă.

Creșterea semnificativă absolută (120%) și relativă (118%) greutăți ale glandelor suprarenale la grupul masculin 250 mg/kg au fost considerate a fi asociate cu substanța chimică de testat. În plus, creșterea ponderilor absolute și relative ale glandelor suprarenale la ambele sexe a arătat o dependență clară de doză în studiul preliminar de 28 de zile (date neprezentate), indicând asocierea cu tratamentul chimic de testat. Deși hipertrofia suprarenală ar putea rezulta din stres, nu au existat constatări sugestive pentru stres, cum ar fi creșterea în greutate corporală redusă sau atrofia timusului și a altor organe limfoide, atât în studiile prezente, cât și în studiile preliminare. Deoarece nu pot exista modificări histopatologice ale glandei suprarenale chiar și cu afectarea producției de glucocorticoizi în cazurile de inhibare a enzimelor legate de steroidogeneză2, posibilitatea ca greutatea crescută a glandei suprarenale să fie o constatare toxică nu poate fi exclusă. În schimb, greutățile relative crescute ale splinei și testiculelor în grupul masculin250 mg/kg, care nu au fost observate în studiul preliminar, au fost considerate nesemnificative din punct de vedere toxicologic din cauza absenței leziunilor histopatologice sau a creșterii semnificative a greutăților absolute. În mod similar, biochimia serică a evidențiat o scădere a A /G și o creștere a Ca la ambele sexe, care a fost considerată a nu avea nici o semnificație toxicologică, având în vedere că nu au fost detectate anomalii în parametrii aferenți. În plus, nivelurile scăzute de Bil și ALP la ambele sexe și scăderea AST și ALT la femei au fost în contrast cu efectele toxice așteptate și au fost considerate nesemnificative.

Nefropatie cronică caracterizată prin tubuli bazofile, exprimate hialine, și inflamație interstițială focală a fost observat cu semnificație statistică la bărbați din toate grupurile tratate. În plus, creșterea cre serului și absolută și relativărinichigreutățile au fost detectate în grupele male60 și250 mg/kg; aceste modificări nu au fost observate în grupurile de tratament feminin. În aceste cazuri, gradul de acumulare a granulelor eozinofilice în celulele epiteliale tubulare proximale a fost crescut într-o manieră aparent dependentă de doză. Aceste granule au fost confirmate ca α2uglobulină prin imunohistochimie, indicând apariția nefropatiei αx-globuline. α-globulinele legate de anumite substanțe chimice, cum ar fi d-limonenul, se acumulează în lizozomi și sunt observate în tubulii proximali sub formă de granule eozinofilice sau hialine9. Această acumulare poate deteriora celulele epiteliale, ceea ce duce la nefropatie cronică progresivă și formarea tumorii în consecință. Astfel, deși NOAEL pentru 2-(1-men-thoxy)etanol asociate cu α., globulină nefropatie la șobolan de sex masculinRinichinu a fost identificat, acest tip de nefropatie este relatărilor specifice pentru șobolani de sex masculin și, prin urmare, nu sunt relevante pentru evaluarea riscului uman. Un risc crescut de insuficiență renală mediat prin mecanisme legate de acumularea de α,-globulină este foarte improbabil, deoarece această proteină este absentă în hu-mansl4. Prin urmare, s-a considerat rezonabil să se excludă modificările asociate nefropatiei cronice observate la bărbați de la determinarea NOAEL.

În concluzie, prezentul studiu de toxicitate subcronică de 13 săptămâni a demonstrat că 250 mg/kg BW/zi 2-(/-menthoxy)etanol tratament cauzat modificări toxice în hematologie, biochimie serică, și greutățile de organe la bărbați și femei șobolani F344. Pe baza rezultatelor observate, NOAEL de 2-(1-menthoxyetanol a fost evaluat ca 60 mg/kg BW/zi pentru ambele sexe.

Referinţe

1 JEFF. Seria de aditivi alimentari OMS: 60. Evaluarea siguranței anumitor aditivi alimentari. 579–593. 2009.

2. Evaluarea toxicității a lui Akagi J, Cho YM, Mizuta Y, Toyoda T și Ogawa K. Evaluarea toxicității subcronice a izotiocianatului de 5 hexenil, o substanță aromatizantă identică naturii de la Wasabia japonica, la șobolaniI F344/DuCrj. Alimente Chem Toxicol. 122: 80–86. 2018. [Medline] [CrossRef]

3. Matsushita K, Toyoda T, Morikawa T, și Ogawa K. Un studiu de toxicitate subcronică de 13 săptămâni de vanilină propilen glicol acetal la șobolani F344. Alimente Chem Toxicol. 132: 110643. 2019. [Medline] [CrossRef]

4. Matsushita K, Toyoda T, Morikawa T, Takahashi M, Inoue K, și Ogawa K. Un studiu de toxicitate subcronică de 13 săptămâni de 2-etilbutanal la șobolani F344. Regul Toxicol Pharmacol. 100: 118–126. 2018. [Medline] [CrossRef]

5. Toyoda T, Cho YM, Matsushita K, Tachibana S, Senuma M, Akagi J, și Ogawa K. Un studiu de toxicitate subcronică de 13 săptămâni de acetat de hexil la șobolani SD. J Toxicol Pathol. 32: 205–212. 2019. [Medline] [CrossRef]

6. Akagi J, Cho YM, Mizuta Y, Tatebe C, Sato K, și Ogawa K. Evaluarea toxicității subcronice de eter metil izoeugenol în F344/DuCrj șobolani de 13 săptămâni de administrare orală. Regul Toxicol Pharmacol. 102: 34–39. 2019. [Medline] [CrossRef]

7. Ide T, Mizuta Y, Akagi J, Masumoto N, Sugimoto N, Sato K, Ogawa K, și Cho YM. Un studiu de toxicitate la doze orale repetate de 90 de zile a patru stereoizomeri de 2,4-dimetil- 4-feniletetrahidrofuran, o substanță aromatizantă sintetică, la șobolaniI F344. Regul Toxicol Pharmacol. 114: 104664. 2020. [Medline] [CrossRef]

8. Furukawa S, Nagaike M și Ozaki K. Baze de date pentru aspecte tehnice ale imunohistochimiei. J Toxicol Pathol. 30: 79–107. 2017. [Medline] [CrossRef]

9. Seely JC, Hard GC, și Blankenship B. Rinichi. În: Patologia lui Boorman a șobolanului, a 2-a ediție AW Suttie (ed). Academic Press, Londra. 125–166. 2018.

10. Takanobu K, Aiso S, Umeda Y, Senoh H, Saito M, Katagiri T, Ikawa N, Ishikawa H, Mina T, Ia M, Haresaku M, Matsumoto M, și Fukushima S. [Date de fond de tumori spontane în F344/DuCrlCrlj șobolani]. Sangyo Eiseigaku Zasshi. 57: 85–96. 2015 (în japoneză). [Medline] [CrossRef]

11. JEFF. Seria de rapoarte tehnice a OMS: 891. Evaluarea anumitor aditivi alimentari (Cincizeci și unu raport al Comitetului mixt de experți FAO/OMS pentru aditivii alimentari). 111–118. 2000.

12. Wallig MA. Sistemul endocrin. În: Bazele patologiei toxicologice, ed. a 3-a MA Wallig, WM Haschek, CG Rousseaux, B Bolon și BW Mahler (eds). Academic Press, Londra. 565–624. 2018.

13. Swenberg JA. α nefropatie 2u-globulină: o revizuire a mecanismelor celulare și moleculare implicate și implicațiile acestora pentru evaluarea riscului uman. Environ Sănătate Perspect. 101(Suppl 6): 39–44. 1993. [Medline] [CrossRef]

14. Jumări P. Tractul urinar. În: Histopatologia studiilor de toxicitate preclinică, ed. a 4-a Academic Press, Londra. 537–614. 2012.