O hartă a fenotipurilor metabolice la pacienții cu encefalomielită mialgică/sindrom de oboseală cronică Ⅱ

Lipidomii ME/CFS

O analiză cuprinzătoare a lipidelor complexe a fost efectuată în ser din aceeași cohortă de studiu. Dintreau inclus 892 de specii de lipide, 153 au prezentat concentrații serice semnificativ diferite în ME/CFSgrupul comparativ cu grupul HC, dintre care 34 au avut niveluri mai scăzute și 119 au avut niveluri mai mari (Figura 6A; SuplimentarSetul de date 2, foile 2 și 4). Concentrațiile sumei clasei de lipide au indicat o creștere a diacilglicerolilor(DAG), TAG și dihidroceramidă (DCER) și reducerea lizofosfatidilcolinelor (LPC) înGrupul ME/CFS comparativ cu grupul HC (Setul de date suplimentare 2, fișa 3). Cu toate acestea, diferențe distincteîn profilul lipidic au fost evidente la subgruparea în funcție de metabotipurile ME/CFS propuse.În general, a existat o coerență extinsă între efectele legate de lipide observate asupra metabolomicei globale.(HD4) și platforme lipidomice (complex lipidomics platform [CLP]). Următorul este un rezumat almodificări uniforme și specifice metabotipului ale lipidelor serice la pacienții cu ME/SFC în raport cu subiecții HC.Efecte uniforme ale lipidomului în grupul ME/CFS.Doar 16 din cele 892 de specii de lipide au prezentat efecte uniformeîn subseturile ME-M1 și ME-M2 în raport cu grupul HC (Setul de date suplimentare 2, fișa 5). Din acestea,13 compuși au avut concentrații serice mai scăzute la pacienții cu ME/CFS și toți aceștia erau derivați de fosfolipide.agenți de fosfatidilcolină (PC) și fosfatidiletanolamină (PE), inclusiv LPC și lizofosfatidylethanolamine (LPE). Aceasta a inclus mai mulți compuși plasmogen PE, care reprezintă o substanță chimicăși subclasa de fosfolipide unică biologic (49). Zece din cele 13 specii de fosfolipide uniform coborâtea conținut cel puțin un fragment acil 18:2, care reprezintă acid linoleic, un acid gras esențial și arahidonacid ic (20:4) precursor. În general, nivelul de acid linoleic tinde să fie scăzut în subclasele de fosfolipide(PC, PE, fosfatidilinozitol [PI], LPC și LPE; Figura 6B). Doar 3 specii unice de lipide au fost uniformcrescute - sfingolipidele, CER(18:1), SM(18:0) și SM(18:1) - totuși sfingolipidele suplimentare au arătattendințe similare. În ceea ce privește efectele asupra conținutului total de acizi grași din ser (adică, esterificați și neesterificati),singura modificare uniformă semnificativă în subseturile ME-M1 și ME-M2 a fost un nivel redus de 14:0 (Figura 6B).Metabotip ME-M1 lipidom.Acest subset a avut o concentrație seric semnificativ crescută de 23 din 892și nivelul scăzut de 227 din 892 de metaboliți lipidici în comparație cu grupul HC (Figura 6; SuplimentarSetul de date 2, fișa 6). Majoritatea metaboliților crescuti au fost NEFA (18 din cei 25 de acizi grași liberi măsurați;Figura 6A), contribuind la concentrația totală mai mare de NEFA. Restul de 5 compuși crescuti însubsetul ME-M1 au fost toate sfingolipidele care conțineau 18:0 sau 18:1 (CER[18:0], CER[18:1], DCER[18:0],SM[18:0], SM[18:1]). Cei 227 de metaboliți scazuți au inclus predominant specii de glicerolipide (138TAG, 5 DAG, 2 monoacilgliceroli [MAG]) și fosfolipide (79, inclusiv 16 lizofosfolipide),în plus față de SM(14:1), SM(22;1) și CE(14:1). Deși concentrația totală de TAG nu a fost semnificativăscăzute în raport cu grupul HC, nivelurile scăzute ale TAG multiple multiple sunt coerente cu

Figura 6. Prezentare generală a claselor de lipide.Setul de date pentru lipidomul seric a fost analizat pentru a compara în general grupul ME/CFS (ME/All) și cele 3 subseturi de metabotip(M1–M3) în raport cu grupul HC. (A) Graficele vulcanilor oferă o imagine generală a tuturor moleculelor de lipide dintr-o clasă dată, cu –log10alValoarea Ppey axă și jurnal2 ori schimbare pexaxă. Fiecare punct reprezintă un metabolit și este colorat în funcție de direcția schimbării și nivelul de semnificație în raport cu HC caindicat (P < 0.05,="" 2-tailed="" welch's="" test;="">q < 0.05,="" adjusted="">Pvaloare). Numărul din fiecare cadran oferă numărul respectiv deq-metaboliti semnificativi, și suplimentarp-metabolitii semnificativi sunt indicati in paranteze. (B) Cantitatea relativă de acizi grași specifici (FA, prima coloană) din diferitele lipideclase (titlul coloanei) în grupul total ME/CFS (eticheta de jos, A) și în funcție de subseturile de metabotip (M1–M3). Culoarea celulelor hărții termice afișeazăButuruga2 modificarea pliului față de HC, așa cum este indicat. *P< 0.05,="" 2-testul="" lui="" welch="" cu="" coada;="">q< 0.05, ajustatValoarea P. Total, suma totală de acizi grași din toate clasele de lipide;CE, ester de colesterol; CER, ceramidă; DAG, diacilglicerol; DCER, dihidroceramidă; FFA, acid gras liber (sinonim cu acidul gras neesterificat, NEFA); HCER,hexosilceramidă; LCER, lactosilceramidă; LPC, lizofosfatidilcolină; LPE, lizofosfatidiletanolamină; LPL, lizofosfolipidă; MAG, monoacilglicerol;PC, fosfatidilcolină; PE, fosfatidiletanolamină; PI, fosfatidilinozitol; PL, fosfolipide, SM, sfingomielină; SP, sfingolipide; TAG, triacilglicerol.

concentrația totală de TAG seric relativ scăzută a fost observată în măsurătorile de laborator (Figura 3D). În plus, a existat o scădere semnificativă sau în tendință a concentrațiilor totale de fosfolipide (PC, PI, tendințăpentru PE) și lizofosfolipide (LPC, LPE) (Setul de date suplimentare 2, fișa 3). Nu a fost semnificativefect asupra nivelurilor totale ale subclaselor de sfingolipide, dar a existat o tendință pentru un nivel total de DCER mai scăzut. ÎnNEFA, a existat o îmbogățire relativă specială (procent mol) a grăsimilor 16:1, 18:1 și 18:2acizi, în timp ce fracția TAG a avut un conținut semnificativ mai mic de acizi grași C12 și C14 (suplimentarSetul de date 2, fișa 10).

Descoperirile sunt compatibile cu mobilizarea și oxidarea crescută a grăsimiloracizi, așa cum sugerează concentrațiile crescute de acizi grași liberi, glicerol și corpi cetonici. Cel observatmodificările din subgrupul ME-M1 pot imita adaptările metabolice despre care se știe că apar ca răspuns la energieîncordare declanșată de foame sau exerciții fizice (50, 51). Teoretic, un astfel de răspuns ar putea fi cauzat de aberantereglarea catabolismului glucozei, o cerere cronică mare de ATP sau decuplarea respirației mitocondrialeconducând la flux oxidativ excesiv și producție ineficientă de ATP.Lipidomul metabotip ME-M2.Acest subset a avut concentrații mai mari de 538 din 892 de compuși lipidici șiconcentrații mai mici de 27 din 892, în comparație cu grupul HC (Figura 6; Setul de date suplimentare 2, foaie7). Marea majoritate a compușilor crescuti erau specii diferite fie de TAG (454 de specii) fie de DAG(43 de specii; Figura 6); în consecință, au existat concentrații serice totale semnificativ mai mari ale acestor 2 lipideclase. Au existat, de asemenea, niveluri mai ridicate ale unor specii individuale - și concentrația totală de clasă - de colesterolesteri. Fosfolipide multiple multiple (25 de specii de PC, PE și PI) și sfingolipide (8 specii de SM,CER, DCER și HCER) au fost crescute, dar concentrațiile totale ale acestor clase de compuși au fost în principalneafectat, în afară de faptul că clasa PI prezintă o creștere semnificativă în comparație cu grupul HC (suplimentarSetul de date 2, fișa 3).

Similar cu subsetul ME-M1, nu a existat niciun efect semnificativ asupra nivelurilor totale de sfinsubclase de golipide. Mai multe NEFA unice (10 specii) au avut concentrații serice mai mici în subsetul ME-M2comparativ cu grupul HC, contribuind la nivelul NEFA total mai scăzut. În ceea ce priveşte fosfolipidele prezentândniveluri inferioare, efectele au fost în esență coerente cu modificările deja descrise ca uniforme în ME/grupul CFS. Concentrația seric crescută de TAG și concentrația scăzută de NEFA în subgrupul ME-M2comparativ cu grupul HC au fost confirmate în analize suplimentare de laborator (Tabelul 2 și Figura 3D).În acord cu nivelurile mai mari de TAG și DAG, a existat o creștere generală a acizilor grași esterificați înaceste glicerolipide, de-a lungul spectrului acizilor grași (Figura 6B). În rezumat, fenotipul metabolic al acestuiasubgrupul a fost caracterizat în special printr-o concentrație seric ridicată de TAG (femei) și NEFA scăzut (ambelesexe). Creșterea traficului de TAG și DAG în sânge este adesea asociată cu dezechilibru metabolic, excesivacumularea periferică de lipide și inducerea răspunsurilor la stres celular și mitocondrial. Astfel de efecte auau fost descrise drept consecințe ale diferitelor boli cronice, implicând și contexte de inflamație (34).Metabotip ME-M3 lipidom.Acest subset mic a avut concentrații mai mari de 22 din 892 de lipide și scăzuteer concentrații de 5 din 892 de lipide, în comparație cu grupul HC (Figura 6A; Set de date suplimentare2, fila 8). Creșterea a fost observată în principal pentru anumiți esteri de colesterol (7 specii) și fosfolipide (12specie). În special, nivelul seric al 6 plasmalogeni PE a fost mai mare în acest subset, ceea ce a contrastat cuefecte asupra acestei subclase de fosfolipide în celelalte 2 subseturi ME/CFS. Cele câteva lipide care prezintă ser inferiorconcentrația din subsetul ME-M3 comparativ cu grupul HC a inclus 2 specii NEFA (FFA[14:0],FFA[20:4]) și 3 derivate PC (LPC[20:2], PC[16:0/22:4], PC[18:1/20:2]). Acest subset a fost afișat mai susnivelul total de SM și tendințele de ester al colesterolului total și niveluri de PE mai ridicate, în comparație cu grupul HC.S-au găsit relativ puține efecte în ceea ce privește compoziția acizilor grași a diferitelor clase de lipide (Figura 6B).Se pare că mai multe dintre trăsăturile individuale afectate erau unice pentru acest subset în comparație cu celelalte,dar posibilele implicaţii sunt greu de evaluat din cauza numărului redus de subiecţi. Vizualizarea generalătendințe, subsetul ME-M3 părea a fi mai asemănător cu subsetul ME-M2 decât subsetul ME-M1,așa cum este indicat de o cotă de tendință a TAG.Semnăturile hormonale ale stresului metabolicAm investigat nivelurile circulante ale hormonilor selectați care controlează homeostazia energetică în contexte detulpină fiziologică, inflamație și patogeneză (Figura 7). Comparativ cu grupul HC, ME/Grupul CFS a avut niveluri medii ușor crescute de insulină și leptină serice, precum și o greutate moleculară mare mai mică(HMW) adiponectină (Figura 7, A–C). Cu toate acestea, acest lucru a fost determinat în principal de subsetul ME-M2, deoarece nu este semnificativsau efect de tendință a fost observat pentru ceilalți. În conformitate cu creșterea insulinei, subsetul ME-M2 a avut și unconcentrație medie crescută a peptidei C (Figura 7D). Aceste efecte specifice asupra nivelurilor hormonale susțin diferitecontextele de reglementare în subseturile ME-M1 și ME-M2, iar constatările sunt coerente cu cele observate.fenotipuri metabolice care indică o utilizare redusă a glucozei (ME-M1) și acumulare excesivă de lipide (MEM2). În plus, au existat concentrații serice crescute de FABP4 și FGF21 în grupul ME/CFScomparativ cu grupul HC (Figura 7, E și F). Acești factori sunt priviți ca semnale ale tensiunii energetice șiau fost legate de boli metabolice, precum și de exerciții fizice (52, 53). Doar subsetul ME-M2 a prezentat o valoare semnificativăcreșterea FGF21. A existat un grup mic de pacienți cu un nivel deosebit de ridicat de FGF21 înSubsetul ME-M2 și bănuim că acest lucru poate indica o povară excesivă a stresului metabolic hepatic. Altitudineaconcentrația serică de FABP4 a fost similară în subseturile ME-M1 și ME-M2. Endocrinul observatsemnăturile sunt în concordanță cu metabolismul dereglat și tensiunea energetică crescută la pacienții cu ME/SFC,și cu legături către rețele de reglementare care pot explica răspunsurile dependente de context.

Figura 7. Modificările factorilor de semnalizare serici sunt legate de metabolismul energetic. 

Hormoni selectați potențial asociați cu tulpina energetică și dereglațimetabolismul a fost măsurat în ser de la pacienții cu subiecți ME/CFS și HC folosind metode bazate pe imun. (A–F) Concentraţia serică a fostmăsurată la 83 de pacienți cu ME/SFC și 30 de subiecți cu HC pentru insulină (pg/mL) (A), leptina (ng/ml) (B), adiponectină HMW (μg/ml) (C), C-peptidă (pM) (D),  FGF-21 (pg/mL) (E) și FABP4 (ng/mL) (F). Este indicată mediana grupului ± IQR. Cea arătatăPvalorile (dreapta sus) sunt pentru o 4-comparație de grup a HC, M1,M2 și M3 folosind 1-modul Kruskal-Wallis ANOVA. *P <0.05, mann-whitney="">UTest; **q < 0.05,="" adjusted="">Valoarea P

Discuţie

Acest studiu metabolomic explorator a dezvăluit o hartă a fenotipurilor metabolice comune și variabile ale ME/CFS. Modificările metabolice observate se încadrează în principal în paradigma efectelor directe și indirecte ale energieiîncordare. Relevanța fiziologică a fost susținută de asocieri cu caracteristici endocrine și clinice.Prin următoarea discuție, sugerăm că tensiunea energetică poate rezulta din hipoxia tisulară sensibilă la efortși duce la modelele sistemice de adaptare și compensare metabolică.Modificările metabolice comune în grupul ME/CFS au fost dominate de un număr relativ mic decăi cu un impact credibil asupra homeostaziei energetice. Glicerol circulant crescut sugerează că lipoliza esteindus, iar acest lucru se observă în mod normal în timpul postului și exercițiului (35, 48). În plus, mai multe dintre constatăride acord cu utilizarea modificată a aminoacizilor la pacienții cu ME/SFC, inclusiv BCAA, triptofan,si altii. Creșterea produselor de degradare a nucleotidelor purinice, cum ar fi adenozina și xantozinaa apărut, de asemenea, ca o posibilă semnătură a tulpinii energetice, care reflectă în mod normal cererile crescute de ATP șimetabolismul alterat al aminoacizilor în mușchi (36). Stresul metabolic sistemic a fost susținut de FABP4 crescutși FGF21, care pot semnala programe compensatorii, precum și răspunsuri specifice țesutului (54, 55). Corticosteroizii nu păreau să fie implicați, deoarece depind de vârstă și IMC în loc de scorurile funcției fizice(Date suplimentare 3) și nu am găsit modificări ale cortizolului de dimineață și ACTH în ME/CFS comparativcu HC. A existat o pierdere deosebită a unor fosfolipide care conțin acid linoleic (18:2). Acest acid gras esteun precursor esențial pentru acidul arahidonic, o moleculă mesager central legată de inflamație și vaso.dilatare. Scăderea derivaților acidului arahidonic, cum ar fi 12-HETE și 12-HHTrE, indică în continuarecă procesele auto- și paracrine pot fi afectate. După cum se discută mai jos, unele dintre aceste efecte pot fiasociat cu mecanisme susceptibile de a fi implicate în simptomele ME/SFC.

Efectele care au fost eterogene în grupul ME/CFS au exprimat fenotipuri specifice de dereglaremetabolismul energetic la subgrupuri de pacienți. Cele mai distincte 2 metabotipuri ME/CFS, ME-M1 și ME-M2,aliniat cu fenotipurile binecunoscute ale bolilor cronice cu proiecții imuno-metabolice (34, 37, 38). Aceastatrebuie reținut că niciunul dintre pacienții studiului nostru nu a avut un diagnostic clinic prediabetic sau diabetic. TheSubsetul ME-M1 a prezentat niveluri serice crescute de acizi grași liberi (adică NEFA) și corpi cetonici, în ciuda normaluluiglucoză și insulină. Acest lucru poate semăna cu un context cu corelații fiziologice cu lipsa de glucoză și efortcise (33, 35). În subgrupul ME-M2, un profil metabolic diferit a fost exprimat prin TAG seric crescut șinivelurile medii de insulină, dar glicemia nu a fost afectată. Acest lucru poate reflecta semne de grad scăzut de insu indusă de lipiderezistența lin asociată cu acumularea ectopică de lipide periferice și răspunsurile inflamatorii (56). Amandouaautoreglarea fluxului sanguin a fost găsită la persoanele cu intoleranță inexplicabilă la efort, posibil prinmecanismele efectelor disfuncției endoteliale și microcirculatorii asupra endoteliului vascular (66, 76, 77, 79,80). În rezumat, constatăm că modificările metabolice la pacienții cu ME/CFS sunt compatibile cu perturbateenergetică forțată de hipoxia tisulară la efort. Ar trebui efectuate investigații suplimentare pentru a urmări acest lucruteorie și să identifice posibile strategii de sprijin pentru îmbunătățirea îngrijirii clinice.Posibilele limitări ale studiului au inclus stabilitatea metaboliților și acuratețea limitată a global nețintitămetabolomica (81). Limitările selecției univariate de caracteristici în scopul grupării și identificăriiIntroducerea subtipurilor de pacienți în seturi de date cu dimensiuni mari sunt probleme bine-cunoscute în comunitatea statistică (82, 83)(Date suplimentare 1). Evaluarea noastră cuprinzătoare a posibilelor factori de confuzie, cum ar fi sexul, IMC, vârsta, dieta saumedicația nu a indicat că aceștia au fost principalii factori ai fenotipurilor ME/CFS, dar pot contribuila variația individuală (Date suplimentare 1). Un punct forte al studiului a fost faptul că analizele statistice au fost puternicesusținute în mod independent și în mod independent de mai multe straturi de descoperiri biochimice și justificare.În rezumat, studiul oferă o hartă a modificărilor metabolice care apar la pacienții cu ME/SFC.Găsim că modificările observate sunt compatibile cu tensiunea energetică crescută, de exemplu, cauzată de țesuthipoxie la efort. Rolurile potențiale ale căilor specifice vor trebui validate și explorate în continuarestudii țintite.

Metode

Pacienți cu ME/CFSși HC. În total, 83 de pacienți cu ME/CFSși 35 HC au fost incluse în acest studiu.Toți pacienții au îndeplinit criteriile de consens canadian pentru ME/SFC (1). Au fost recoltate probe de sângeînainte de intervenție (de referință) în 2 studii clinice separate conduse de Spitalul Universitar Haukeland, „Rituxstudiul ME” (ClinicalTrials.gov NCT02229942, 2014–2017; ref. 45) și studiul „CycloME” (ClinicalTrials.govNCT02444091, 2015–2020; ref. 12). Probele de HC au fost colectate (din 2015 până în 2017) de la subiecți cunici o boală cronică sau medicamente cronice - în principal din partea personalului de la Departamentul de Oncologie, HaukelandSpitalul Universitar și Departamentul de Biomedicină, Universitatea din Bergen. A fost selectat grupul HCpentru a se potrivi aproximativ cu distribuția de vârstă și sex a grupului ME/CFS. Caracteristici biometrice pentru HCsubiecții și pacienții cu ME/SFC sunt rezumați în Tabelul 1, care conține, de asemenea, datele pentru subgrupurile depacienții cu ME/SFC adnotați la cele 3 metabotipuri diferite dezvoltate în acest studiu.Probele de sânge au fost recoltate prin puncție venoasă, procesate conform unei proceduri standardizate de biobancăașa cum este descris în protocoalele de încercare și stocat la –80 de grade (12, 45). Toți subiecții HC și 71 de pacienți cu ME/SFC,nu posteau la recoltarea probei. Restul de 12 probe ME/CFS au fost colectate după postul de peste noapteși au fost incluse pentru a facilita evaluarea posibilului impact al stării postprandiale. Sânge și ser clinicanalizele au fost efectuate conform rutinelor standard de laborator din spital.Metabolomica și lipidomica globală.Pentru analizele metaboliților, am inclus probe de ser din toate cele 83pacienţi şi 35 de subiecţi HC. Analizele au fost efectuate de Metabolon Inc. folosind metodele lor standard. Datele au fost obținute aplicând 2 platforme analitice bazate pe spectrometrie de masă, un metabolit globalplatformă (HD4) care oferă măsurarea și identificarea a 882 de compuși care acoperă un spectru larg de moleculeși un CLP care a evaluat 1005 specii moleculare diferite din 14 clase de lipide. Mostrele au fostanalizate în blocuri zilnice, cu mai multe niveluri de control al calității eșantionului și datelor, cum ar fi variația între zilecorectare înainte de normalizarea datelor.Analiza hormonilor metabolici.Pentru analizele hormonilor metabolici, am inclus aceleași probe, cu excepția 5 HC,unde a existat o cantitate insuficientă de ser. Probele de ser au fost diluate și au fost efectuate testeconform instrucțiunilor producătorului. Truse bazate pe tehnologia de analiză imunologică Luminex multiplex bead(Instrument Luminex 100, Luminex Corp.) au fost utilizate pentru a detecta FABP4, insulina, adiponectina HMW și leptina(catalog LXSAMH, R&D Sisteme). ELISA a fost folosit pentru a măsura FGF21 (catalog DF2100, R&D Sisteme) șiC-peptidă (catalog DICP00, R&D Sisteme). Măsurătorile au fost efectuate folosind cititorul de microplăci Spark(Tecan Trading AG). Analiza datelor a fost efectuată în Excel, GraphPad Prism și R.Statistici.Toate analizele datelor au fost efectuate în mediul R studio (84), folosind programarea Rlimba (85). Mai întâi am eliminat xenobioticele și metaboliții cu peste 25 la sută valori lipsă din dateset, iar modelul valorilor lipsă a fost evaluat deχ2 și testul exact Fisher pentru comparații în funcție de grup și sex. Valorile lipsă au fost imputate utilizând metoda semiminimei (86). Datele imputate au fost normalizate cuantile, Buturuga2 transformată și autoscalată. Îndoiți modificările,Pvalori (2-testul lui Welch cu coadă) și ajustatePvalorile(ajustarea Benjamin-Hochberg) au fost calculate folosind funcțiile de bază în R. Datele autoscalate au fost filtratepe baza metaboliților semnificativi neajustați (P< 0.05)="" pentru="" a="" reduce="" dimensionalitatea="" datelor.="" rând="" și="">k-means au fost efectuate pe caracteristici semnificative pentru gruparea metaboliților și a probelor și am selectat partițiide clustere ghidate de suma pătratului din cadrul clusterului (wss), statistica decalajului și metoda siluetei. Acest lucru a fost vizualizatîntr-o hartă termică folosind pachetul ComplexHeatmaps (87), iar clusterele rezultate au fost extrase șiHC organizat într-un cluster HC separat. Aceste clustere au fost folosite ca o suprapunere de vizualizare pe o unitate independentăPCA și o diagramă de încărcare a fost utilizată pentru a vizualiza încărcările de la PC1 și PC2 folosind ggplot2 (88).

Un univariatanaliza a fost efectuată pe clusterele extrase din analiza multivariată. S-au organizat metabolițiiîn căi conform adnotărilor furnizate de Metabolon Inc. Pliul se schimbă,Pvalori și ajustateP valorile metaboliților din fiecare cale respectivă au fost vizualizate folosind ggplot2. Datele biometrice selectate au fostcorelat cu metaboliții care au afișat modificări uniforme între grupuri folosind metoda Spearman șiP<0.05 a fost setat ca limită. Acest lucru a fost vizualizat folosind pachetul ggplot.Datele de pe platforma CLP au fost preprocesate prin eliminarea variabilelor cu mai mult de 10% din lipsă.valorile din setul de date și au fost imputate utilizând valoarea minimă observată pentru fiecare metabolit. Mostreleau fost organizate în grupurile respective obținute din analiza anterioară a HD4 și modificările pliilor,P valori (testul lui Welch) și ajustatePvalorile (FDR) au fost calculate folosind funcții de bază din R. Asociatmetadatele referitoare la clasele de lipide au fost obținute de la Metabolon Inc. și pachetul R Lipidr (89).

Thedatele rezultate au fost vizualizate folosind ggplot2. Statisticile descriptive au fost efectuate folosind 2-coada WelchTestează pentru date distribuite normal, Mann-WhitneyUteste pentru variabile cu distribuții distorsionate șiχ2 șiTestele exacte ale lui Fisher pentru variabile categorice (GraphPad Prism). S-a efectuat o comparație a 3 sau mai multe grupuriutilizând 1-testul ANOVA mod.Aprobarea studiului.Studiile clinice din care au fost obținute probele de biobancă, inclusiv probe de lacontroale sănătoase, au fost aprobate de Comitetul Regional de Etică (Tromsø, Norvegia; nr. 2010/1318-4, nr.2014/365, și nr. 2014/1672). Toți pacienții au furnizat consimțământul informat în scris.

GĂSIȚI CEA MAI BUNĂ ÎNGRIJIRI BOTANICĂ HOLISTICĂ PENTRU RECUPERAREA OBOSOILOR LEGATE DE BOLI

Formula noastră Neuro Regen, realizată manual cu grijă, include cele mai bine cercetate plante medicinale. Fiecare prezintă un potențial uimitor pentru gestionarea durerii nervoase, plus sprijin general pentru nervi și neuroni.

Include:

Cistanche- 

Cistanche este cea mai des folosită plantă în rețetele medicinei tradiționale chineze pentruameliorarea oboselii fizice. De fapt, Cistanche este un fel de material alimentar. Pe baza teoretică a medicinei tradiționale, medicina modernă a efectuat și o mulțime de cercetări asupraefect anti-obosealădeCistanche. Experimentele au demonstrat căefect anti-obosealăde Cistanche se datorează îmbunătățirii organelor corpului deCistanche. Cistanchepoate îmbunătăți funcțiile rinichilor și ficatului, realizând astfel oefect anti-oboseală. Următoarea este o prezentare generală a modului în care Cistanche poateameliorează oboseala.

4 Caracteristicile glicozidelor Cistanche

Odată cu dezvoltarea societății, viața oamenilor devine din ce în ce mai rapidă. Din momentul în care soarele răsare, ca parte a „mașinii vii”, fiecare trebuie să se grăbească la posturile lor. Fie că ești un tehnician care stă în atelier, un comerciant de acțiuni care stă în fața unui computer sau chiar un student care se joacă pe terenul de joacă... trebuie să faci față nenumărate presiuni. Slujbele oamenilor sunt diferite, dar toți au o singură problemă comună: oboseala. Oboseala este ca un gândac care se ascunde în colțul bucătăriei. Nu are niciun rău substanțial, dar a afectat întotdeauna oamenii.

Dacă ai ceva ce nu înțelegi, nu ezita să-mi spui:wallence.suen@wecistanche.com