Efecte neuroprotective acute dependente de doză ale poli(pro-17 estradiolului) într-un model de șoarece de leziune contuzie spinală

Abstract

17 -Estradiolul (E2) conferă neuroprotecție în modelele preclinice de leziuni ale măduvei spinării atunci când este administrat sistemic. Scopul acestui studiu a fost aplicarea locală a E2 pe măduva spinării lezate pe o durată susținută folosind biomateriale de film poli(pro-E2).

Pe măsură ce oamenii învață mai multe despre leziunile măduvei spinării, începem să realizăm impactul pe care îl are asupra sănătății fizice și mentale a oamenilor. Deși leziunile măduvei spinării pot provoca multe efecte adverse, din fericire, impactul lor asupra memoriei poate fi controlat.

În primul rând, trebuie să clarificăm ce este leziunea măduvei spinării. Măduva spinării este un nerv protejat la nivelul coloanei vertebrale care este responsabil de transmiterea instrucțiunilor de la creier la diferite părți ale corpului. Dacă măduva spinării este rănită, unele părți ale corpului își vor pierde conexiunea bună cu creierul, ducând la mișcarea membrelor afectate, senzația și controlul autonom.

Leziunile măduvei spinării pot avea un anumit impact asupra memoriei oamenilor, mai ales în stadiile incipiente ale reabilitării pacienților cu leziuni ale măduvei spinării. Leziunile măduvei spinării pot duce la deteriorarea atenției, a memoriei de lucru și a capacității de procesare emoțională a unei persoane, ceea ce va afecta capacitatea de memorie a unei persoane.

Cu toate acestea, aceste efecte negative vor scădea treptat pe măsură ce pacienții urmează un tratament de reabilitare. Pacienții își pot îmbunătăți memoria participând la jocuri de memorie și alte antrenamente cognitive. În același timp, reabilitarea fizică este, de asemenea, favorabilă restabilirii funcțiilor motorii și senzoriale ale organismului, îmbunătățind astfel funcțiile emoționale și cognitive.

Ar trebui să încurajăm pacienții cu leziuni ale măduvei spinării să participe activ la tratamentul de reabilitare și să persistă în antrenamentul de reabilitare pentru a îmbunătăți sănătatea fizică și mentală. Vă rugăm să credeți că, cu ajutorul unei cunoștințe corecte și al tratamentului postoperator, pacienții pot depăși impactul leziunilor măduvei spinării asupra memoriei și pot continua să trăiască o viață activă. Se poate observa că trebuie să îmbunătățim memoria, iar Cistanche poate îmbunătăți semnificativ memoria deoarece Cistanche poate regla și echilibrul neurotransmițătorilor, cum ar fi creșterea nivelurilor de acetilcolină și a factorilor de creștere, care sunt foarte importanți pentru memorie și învățare. În plus, Cistanche poate, de asemenea, să îmbunătățească fluxul sanguin și să promoveze livrarea de oxigen, ceea ce poate asigura că creierul obține suficientă nutriție și energie, îmbunătățind astfel vitalitatea și rezistența creierului.

Faceți clic pe cunoașteți suplimentele pentru a îmbunătăți memoria

După leziuni contuzive ale măduvei spinării la șoareci masculi adulți, filmele poli(pro-E2) au fost implantate subdural, iar neuroprotecția a fost evaluată prin imunohistochimie la 7 zile după leziune și implantare. În aceste studii, filmele poli(pro-E2) au îmbunătățit modest neuroprotecția fără a afecta răspunsul inflamator. în comparație cu controalele rănite.

Pentru a crește doza de E2 eliberată, au fost fabricate filme de poli(pro-E2) cu eliberare în bolus prin încorporarea E2 nelegată în filmele de poli(proE2).

Cu toate acestea, în comparație cu martorii răniți, filmele poli(pro-E2) care eliberează bolus nu au îmbunătățit în mod semnificativ neuroprotecția și nici nu au limitat inflamația la 7 sau la 21 de zile după accident. Lucrările viitoare se vor concentra pe dezvoltarea de biomateriale poli(pro-E2) capabile să mai precis eliberând doze terapeutice de E2.

INTRODUCERE

Leziunea traumatică a măduvei spinării (SCI) este o afecțiune debilitantă care afectează peste 18,000 persoane în fiecare an în Statele Unite1, în timp ce prevalența globală a SCI este estimată la între 236 și 1009 per milion.2

Pacienții afectați de SCI suferă deficiențe neurologice severe, inclusiv pierderea senzației, afectarea funcției intestinului/vezicii urinare și paralizie.3,4 Impactul principal asupra măduvei spinării are ca rezultat moartea neuronală la locul leziunii, care este exacerbată și mai mult de câteva cascade de leziuni secundare care implică astrocite și macrofage. .

În timp, aceste astrocite formează o cicatrice glială care împiedică extinderea axonilor dincolo de marginea leziunii.5 Până în prezent, nu există medicamente neuroprotectoare aprobate de FDA pentru tratarea SCI.

Cercetările de mai multe decenii s-au concentrat pe administrarea sistemică de biomolecule pentru a preveni pierderea neuronală din cauza leziunilor secundare și/sau pentru a promova regenerarea axonală, conducând în cele din urmă la restabilirea funcției pierdute.6 O biomoleculă care a demonstrat o promisiune semnificativă în modelele preclinice de SCI este femeia. hormon sexual, 17 -estradiol (E2).

Administrarea de E2 este în general benefică pentru sistemul nervos central prin reducerea inflamației7–9, atenuarea reactivității celulelor gliale10, limitarea stresului oxidativ11–14 și atenuarea morții neuronale excitotoxice induse de glutamat.15 E2 îmbunătățește recuperarea funcțională în diferite modele de rozătoare de SCI.10, 16,17 În mod interesant, administrarea sistemică cu doze multiple de E2 induce recuperarea funcțională mai rapid18,19 comparativ cu animalele care primesc doar o singură doză.17

Deoarece E2 promovează recuperarea funcțională mai eficient prin regimuri cu doze multiple, obiectivul nostru a fost să eliberăm local E2 în mod stabil la locul leziunii (pentru a preveni orice efecte în afara țintei) pentru a evita problemele care decurg din doze multiple/injecții sistemice de E2.

În acest scop, am folosit o strategie de biomaterial poli(promedicament) în care medicamentul nativ (E2) a fost mai întâi funcționalizat cu grupări alil reactive și apoi polimerizat prin adăugare de radicali fotoinițiați tiol-enă cu un oligo-(etilen glicol) ditiol flexibil, așa cum a fost descris anterior. .20 Am obținut lanțuri polimerice cu greutate moleculară mare, care constau dintr-un promedicament E2 ca unitate care se repetă în polimer.

La degradarea hidrolitică, polimerul eliberează treptat E2 în mediul înconjurător. Singurele alte produse secundare de la eliberare sunt dioxidul de carbon și oligo(etilen glicol) (oEG) (Figura 1). Lanțurile poli(pro-E2) fabricate în filme sau microfibre pot elibera E2 la concentrații nanomolare in vitro pe o scară de timp de la luni la ani. .20

E2 eliberat din aceste schele poli(pro-E2) este bioactiv, iar aceste schele promovează neurotrofismul și neuroprotecția in vitro prin protejarea neuronilor de stresul oxidativ indus de peroxid de hidrogen. Aici, am aplicat filmele poli(pro-E2) într-un model murin de contuzie SCI, imediat după leziune și am evaluat capacitatea lor neuroprotectoare in vivo.

Designul inițial al filmului poli(pro-E2) a crescut neuroprotecția în mod acut (7 zile după leziune) la locul leziunii, fără a afecta răspunsul inflamator. Deoarece filmele poli(pro-E2) lansează nanograme de E2 pe zi, am dezvoltat o altă strategie de eliberare în care unboundE2 a fost încorporat în matricea poli(pro-E2). Am emis ipoteza că eliberarea în bolus a E2 nelegat poate oferi beneficii neuroprotectoare suplimentare.

Filmele de poli(pro-E2) au eliberat E2 într-o manieră de explozie urmată de eliberare susținută de E2 din polimer la concentrații mai mici. Colorația imunohistologică a evaluat neuronii, astrocitele și macrofagele/microglia prezente la locul leziunii în mod acut (7 zile după leziune) și cronic (21 zile după leziune) după SCI în prezența acestor filme poli(pro-E2) care eliberează bolus.

REZULTATE ȘI DISCUȚII

Filmele poli(pro-E2) eliberează E2 la concentrații nanomolare, promovează creșterea neuronală din ganglionul rădăcinii dorsale și protejează neuronii de stresul oxidativ indus de peroxid de hidrogen in vitro.20 Studiul prezentat aici urmărește să determine capacitatea poli(pro-E2) filme pentru a oferi neuroprotecție in vivo folosind un model murin de contuzie SCI.

SCI contuzie moderată a fost indusă la șoarecii masculi adulți și imediat după leziune, filme poli(pro-E2) au fost plasate direct deasupra rănii (Figura 2A). Pentru a se asigura că filmele poli(pro-E2) au rămas pe loc după implantare, au fost implantate filme de poli(pro-E2) încărcate cu rodamină B în măduva spinării animalelor rănite. La șapte zile după implantare, măduva spinării au fost colectate și fotografiate folosind un microscop cu lumină (Figura 2B). La toate animalele, filmele poli(pro-E2) încărcate cu rodamină B au rămas pe loc validând protocolul de implantare.

Pentru a testa capacitatea filmelor poli(pro-E2) de a oferi neuroprotecție și de a atenua inflamația, au fost implantate filme de poli(pro-E2) (fără rodamină B) în urma unei leziuni de contuzie spinală, iar măduva spinării au fost colectate la 7 zile după leziune și implantare. Secțiunile longitudinale (10 μm grosime) au fost tăiate, centrate în jurul epicentrului leziunii și imunomarcate pentru a vizualiza neuronii și macrofagele din măduva spinării (Figura 3).

Secțiunile au fost etichetate pentru NeuN pentru a evalua prezența neuronelor, iar analiza cantitativă a colorării a dezvăluit că filmele poli(pro-E2) au crescut semnificativ zona pozitivă NeuN din jurul epicentrului leziunii în comparație cu martorii răniți care nu au primit implanturi de film (Figura 3A; p.=0.0002). Colorația suplimentară pentru axoni folosind NFH (lanț greu de neurofilament) a dezvăluit, de asemenea, efectul neuroprotector acut al filmelor poli(pro-E2) implantate (Figura 3B; p=0.0017).

Am observat că această schimbare a neuroprotecției nu s-a datorat modificării apoptozei (caspaza 3) la locul leziunii (Figura S1; p=0.9966). De asemenea, colorarea pentru macrofagele activate (CD68) nu a evidențiat niciun fel. diferențe semnificative între animalele tratate cu film poli(pro-E2) și animalele netratate (Figura 3C; p= 0.7207).

Luate împreună, filmele poli(pro-E2) cresc în mod modest neuroprotecția acut, fără a modifica răspunsul inflamator. Filmele poli(pro-E2) au crescut densitatea neuronală acut cu aproape 20%, dar filmele nu au avut efecte antiinflamatorii evidente (pe baza cuantificării zona ocupată de macrofagele activate) (Figura 3).

Această lipsă a unei reduceri a inflamației poate indica faptul că dozele antiinflamatorii și neuroprotectoare de E2 sunt distincte și că ambele nu au fost atinse cu formularea actuală a filmului.20 Am emis ipoteza că creșterea eliberării de E2 din filmele poli(pro-E2) poate reduce inflamația în mod acut. și să permită un răspuns neuroprotector mai robust.

Pentru a crește doza de E2 eliberată în mod acut, filmele de poli(pro-E2) au fost modificate astfel încât eliberarea în bolus de E2 să aibă loc imediat după implantare. După eliberarea în bolus de E2, va urma degradarea polimerului pentru a elibera E2 la aceeași concentrație ca înainte. Experimentul descris mai sus a fost repetat utilizând aceste filme poli(pro-E2) cu eliberare de bolus, iar neuroprotecția și inflamația au fost evaluate la 7 zile după leziune (dpi).

Cu toate acestea, în loc de un beneficiu suplimentar, filmele poli(pro-E2) cu eliberare în bolus nu au crescut semnificativ zona pozitivă NeuN în comparație cu controalele rănite, netratate (Figura 4A; p=0.6770). Filmele poli(proE2) care eliberează bolus au crescut expresia CD68, dar creșterea nu a fost diferită statistic (p= 0.1780).

S-au observat tendințe de creștere a reactivității gliale și a inflamației microgliale, de asemenea, în prezența filmelor poli(pro-E2) care eliberează bolus datorită creșterii exprimării GFAP (astrocite) și Iba1 (microglia); cu toate acestea, aceste creșteri nu au fost mai mari din punct de vedere statistic decât ceea ce a fost observat la martorii răniți, netratați (p=0.3233 și, respectiv, p=0.3053). Luate împreună, filmele poli(pro-E2) care eliberează bolus nu au îmbunătățit neuroprotecția, iar reactivitatea astrocitelor și prezența macrofagelor/microgliei nu au fost reduse așa cum sa ipotezat inițial.

Deoarece diferențele dintre animalele rănite, netratate și animalele rănite, tratate cu film poli(proE2) cu eliberare de bolus nu au fost observate la punctul de timp acut, de 7 dpi, a fost selectat un punct de timp cronic pentru investigații suplimentare, deoarece filmele poli(pro-E2) poate elibera E2 pe termen lung.20 Experimentul descris mai sus a fost repetat cu filmele de poli (pro-E2) cu eliberare în bolus, dar animalele au fost evaluate cronic la 21 dpi (Figura 5).

Măduvele spinării au fost etichetate pentru aceleași tipuri de celule menționate mai devreme. În urma analizei, a existat o tendință spre o creștere a fracției de suprafață a NeuN la animalele implantate cu film poli(pro-E2) cu eliberare de bolus în comparație cu animalele rănite, netratate (Figura 5A; p=0.0897) În plus, s-au observat tendințe în cazul în care filmele poli(pro-E2) cu eliberare în bolus au scăzut fracția de zonă a expresiei CD68 și GFAP în comparație cu datele de la martori animale rănite netratate (Figura 5B, C; p=0.0859 și p.=0.2780).

Cu toate acestea, niciuna dintre tendințe nu a fost diferită din punct de vedere statistic. Pe de altă parte, secțiunile de țesut marcate cu Iba1 de la animalele tratate cu poli(pro-E2) care eliberează bolus au prezentat o expresie crescută în comparație cu datele de la martori netratate, răniți (p < 0.0001). Lucrările noastre anterioare arată că poli(pro) -E2) filmele turnate pe lamele de 15 mm × 15 mm eliberează aproximativ 266 ng de E2 pe zi,20 ceea ce se traduce la aproximativ 2 ng de E2 pe zi din filmele (1 mm × 1,8 mm) folosite aici. Filmele poli(pro-E2) care eliberează bolus eliberează în mod acut 40 ug suplimentar de E2 nelegat după implantare.

Cercetările care se concentrează pe utilizarea E2 în modelele SCI de rozătoare arată că estrogenul în doză mică (10 ug/kg) administrat intravenos atenuează glioza reactivă și oferă neuroprotecție în timp ce atenuează evenimentele inflamatorii, inhibă apoptoza și crește angiogeneza.21 În schimb, dozele mari, sistemice de estrogen au efecte adverse care includ rate crescute de tromboză venoasă profundă și cancer22,23 și dezvoltarea trăsăturilor fizice feminine la bărbați. Acest lucru este de remarcat, deoarece majoritatea cercetărilor E2 s-au concentrat pe administrarea sistemică a E2, fie intravenoasă, fie intraperitoneală.

Având în vedere problemele de siguranță legate de utilizarea sistemică a dozelor mari de E2, este important să se optimizeze concentrația de E2 pentru livrarea locală în măduva spinării lezată pentru a preveni efectele secundare. Până în prezent, doar un studiu a furnizat E2 dintr-un biomaterial utilizând nanoparticule pentru a furniza focal E2 (2,5 ug sau 25 ug). Eliberarea din nanoparticule a scăzut rapid inflamația într-un model de contuzie SCI la șobolan. toomuch E2 (40 ug) este eliberat acut în timp ce foarte puțin (2 ng) este eliberat cronic.

Deși ceea ce observăm din aceste date sunt tendințe modeste, acest studiu subliniază importanța dozării E2 pentru a promova neuroprotecția in vivo. Reducerea dozei inițiale de E2 și ajustarea cineticii de degradare a biomaterialului poli(pro-E2) ar putea ajuta la atenuarea acestei probleme și ar putea oferi rezultate neuroprotective mai bune.

Deși acest studiu a fost efectuat numai la bărbați, este crucial să se evalueze efectul acestor filme poli(pro-E2) la ambele sexe pentru a stabili un potențial de translație valid pentru acest biomaterial. Cercetările au arătat că în urma SCI, nivelurile crescute de estrogen la femei pot fi parțial responsabilă pentru rezultatele funcționale îmbunătățite în comparație cu bărbații.24Deoarece există o prezență crescută de estrogen la femei, orice strategie de biomaterial care utilizează estrogen trebuie să țină cont de acest nivel crescut și să modifice materialul. cinetica de eliberare în consecință pentru a se asigura că doza administrată rămâne aceeași pentru bărbați și femei.

METODE

Fabricare de filme Poly(pro-E2).

Polimerul poli(pro-E2) P1 a fost sintetizat și caracterizat așa cum s-a descris în detaliu anterior.20 Polimerul are o greutate moleculară medie în greutate de MW ~ 80 kDa și o dispersitate de ± 3, conform cromatografiei de permeare a gelului (GPC). Filmele de poli(pro-E2) au fost fabricate prin dizolvarea polimerului în cloroform (5 % în greutate/greutate; polimer/cloroform), turnarea prin picătură a soluției pe lamele de sticlă de 15 mm × 15 mm (soluție de 100 μL per lamelă) și lăsându-le. să se usuce peste noapte sub vid (<100 mTorr) at room temperature (RT). In a subset of experiments, the polymer solution was supplemented with rhodamine B (0.005 wt %/wt; rhodamine B/chloroform) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) to verify the presence of the poly(pro-E2) films in animals post-implantation.
Pentru a crea filme de poli(pro-E2) cu E2 nelegat, filmele au fost fabricate prin adăugarea de E2 nelegat (Abcam, Cambridge, MA) la soluția de polimer (0,0625 % în greutate/greutate; E2/cloroform) înainte de turnare în picătură. soluția pe lamele. Înainte de implantare, lamelele cu folii au fost sterilizate folosind radiații ultraviolete (UV) timp de 30 de minute, iar filmele au fost decojite de pe lamele într-un dulap steril de biosecuritate. Filmele poli(pro-E2) au fost apoi tăiate în bucăți de 1 mm x 1,8 mm, potrivite pentru implantare într-un șoarece adult, așa cum este descris mai jos.

Contuzie Leziuni ale măduvei spinării și implantare de filme poli(pro-E2).

Toate procedurile de îngrijire chirurgicală și postoperatorie au fost aprobate de Institutul Politehnic Rensselaer și comitetele instituționale de îngrijire și utilizare a animalelor de la Universitatea de Stat din Ohio (IACUC). Pentru a induce o contuzie SCI, șoarecii adulți masculi C57BL/6 (de 10- până la 12-săptămâni), achiziționați de la Jackson Laboratory (nr. stoc 000664; Bar Harbor, ME), au fost anesteziați cu o injecție intraperitoneală de ketamina (80 mg/kg) și xilazină (10 mg/kg). Spatele animalelor a fost ras și preparat aseptic folosind 70% etanol și betadină.

După plasarea animalului pe o pernă de încălzire menținută la 37 de grade, straturile de piele și mușchi au fost deschise pentru a expune coloana vertebrală și a fost efectuată o laminectomie dorsală pe vertebrea a noua toracică (T9) pentru a expune măduva spinării. O contuzie moderată (75 kdyn) SCI a fost indusă la acest nivel folosind un impactor Infinite Horizons (Precision Systems and Instrumentation, Lexington, KY).

După realizarea hemostazei, dura a fost deschisă (Figura 2) și a fost plasată un film de poli(pro-E2) sau un film de poli(pro-E2) care eliberează bolus (1 mm × 1,8 mm) sub dura și deasupra măduvei spinării, acoperind locul leziunii. La animalele martor, dura a fost deschisă, dar filmele de poli(pro-E2) nu au fost implantate. Straturile musculare au fost apoi închise folosind suturi sterile, iar pielea a fost închisă utilizând cleme metalice sterile pentru plăgi.

Șoarecii au primit 2 ml de soluție salină sterilă injectată subcutanat și au fost înapoiați în cuștile lor și așezați pe un încălzitor de lame setat la 37 de grade peste noapte. Pentru a asigura o hidratare adecvată și pentru a preveni infecțiile, șoarecii au fost injectați subcutanat cu 1-2 ml de soluție salină sterilă și Gentocină (1 mg/kg) pe zi, în primele 5 zile post-rănire (dpi). Vezicile au fost exprimate manual de două ori pe zi pe durata experimentelor. Toate animalele au fost adăpostite în condiții convenționale, pe un ciclu de 12-oră lumină-întuneric, cu acces ad libitum la hrană și apă.

Recoltarea țesuturilor.

La momentele de timp terminale desemnate de 7 sau 21 dpi, șoarecii au fost injectați cu o doză letală de ketamina/xilazină (1,5x doză chirurgicală) și perfuzați transcardial cu soluție salină tamponată cu 0.1 Mfosfat (PBS; pH 7,4) urmată de paraformaldehidă 4% (PFA; pH 7,4). Măduvele spinării au fost îndepărtate, post-fixate timp de 2 ore în PFA 4% și apoi transferate în tampon fosfat 0.2M (PB; pH 7,4) peste noapte.

Măduvele spinării au fost crioprotejate în zaharoză 30% timp de 48 de ore la 4 grade și apoi blocate în segmente de 10 mm centrate în jurul locului leziunii, cu coloanele dorsale în sus. Aceste secțiuni au fost încorporate într-un mediu de temperatură de tăiere optim Tissue-Tek (VWR International, Radnor, PA) și congelate rapid pe gheață carbonică. Waltham, MA), și apoi depozitat la -20 de grade până când este utilizat pentru imunocolorare.

Imunohistochimie și cuantificare.

Lamele au fost dezghețate pe un dispozitiv de încălzire pentru lame timp de 1 oră și apoi clătite de 3 ori în 0,1 MPBS. Activitatea peroxidazei endogene a fost stinsă prin incubarea lamelor în H2O2 6% diluat în metanol timp de 15 minute la RT. După spălare de 3 ori în 0,1 M PBS, secțiunile au fost incubate cu 4% BSA și 0,1% Triton X{-100 în 0,1 M PBS timp de 1 h urmată de incubarea peste noapte a anticorpilor primari la 4 grade sau RT (Tabelul 1).

Lamelele au fost incubate cu anticorpi secundari biotinilați corespunzători (1:1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA) la RT timp de 1 oră. Pentru a vizualiza anticorpul legat, lamele au fost incubate cu Vectastain Elite-ABC (Vector Laboratories) timp de 1 oră și dezvoltate cu ImmPACT3,3′-diaminobenzidină (DAB) sau substrat Vector SG (Vector Laboratories) timp de 10 minute.

Aceste secțiuni au fost deshidratate prin incubații secvențiale de 2 × 2 minute în etanol 70% și 90%, 2 × 3 min în etanol 100%, urmate de 3 × 3 min în Histoclear și, în final, acoperite cu Permount (ThermoFisher Scientific). Pentru analiza de cuantificare au fost utilizate șase secțiuni per animal, distanțate la 100 μm între măduva spinării lezate.

Secțiunile imunomarcate au fost fotografiate folosind un microscop de imagistică Axioplan 2 echipat cu o cameră AxioCamdigital și software-ul AxioVision versiunea 4.8.2 (Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germania) și un obiectiv 5×.

Numărul de pixeli pozitivi din fiecare dintre secțiuni a fost numărat utilizând software-ul de analiză a imaginii MIPAR (MIPAR, Worthington, OH) pentru a calcula procentul de fracțiune de suprafață pozitivă pe secțiune. Suprafața medie procentuală pozitivă a celor șase secțiuni per animal a fost calculată pentru fiecare dintre pete și raportată.

Analiza Statistică.

Toate datele sunt raportate ca medie ± abatere standard. Analiza statistică a fost efectuată utilizând software-ul statistic GraphPad Prism 9 (GraphPad Software, San Diego, CA). În toate experimentele, au fost utilizate 5-6 animale per grup, provenind din cel puțin două loturi diferite de animale. Pentru a testa diferențele dintre grupurile de film de control și poli(pro-E2), a fost folosit testul t Student (Figurile 3, 4 și 5). Semnificația a fost stabilită la p Mai mică sau egală cu 0.05.

Material suplimentar

Consultați versiunea web de pe PubMed Central pentru materiale suplimentare.

MULȚUMIRI

Autorii îi mulțumesc lui Wenmin Lai pentru asistența ei cu operațiile la șoarece.

Finanțare

Această lucrare a primit sprijin de la Craig H. Neilsen Foundation Fellowship (grant 468116) și Paralyzed Veteransof America Research Foundation Fellowship (grant 3171) către MKG și de la NIH R01 (Grant NS092754) și New York State Spinal Cord Injury Review Board Institutional Support Grant C32RJ45GG Toate lucrările cu animale au fost efectuate cu asistență din partea Departamentului de neuroștiință al Universității de Stat din Ohio, sprijinit de NINDS Grant P30NS104177.

REFERINȚE

(1). Centrul național de statistică a leziunilor măduvei spinării. (2020) Fapte și cifre privind leziunile măduvei spinării pe scurt, Universitatea din Alabama din Birmingham, Birmingham, AL.

(2). Cripps RA, Lee BB, Wing P, Weerts E, MacKay J și Brown D (2011) O hartă globală pentru epidemiologia traumatismului măduvei spinării traumatice: către un depozit de date viu pentru prevenirea leziunilor. Măduva spinării. 49, 493–501. [PubMed: 21102572]

(3). Donovan WH (2007) Leziunea măduvei spinării - trecut, prezent și viitor. Journal of Spinal CordMedicine 30, 85–100.

(4). Pickelsimer E, Shiroma EJ și Wilson DA (2010) Investigația la nivel de stat a stărilor de sănătate adverse asistate medical ale persoanelor cu leziuni ale măduvei spinării. J. Măduva spinării Med. 33 (3),221–231. [PubMed: 20737795]

(5). Silver J și Miller JH (2004) Regenerarea dincolo de cicatricea glială. Nat. Pr. Neurosci. 5 (2),146–156. [PubMed: 14735117]

(6). Varma AK, Das A, Wallace G, Barry J, Vertegel AA, Ray SK și Banik NL (2013) Spinal Cord Injury: A Review of Current Therapy, Future Treatments, and Basic Science Frontiers.Neurochem. Res. 38, 895–905. [PubMed: 23462880]

(7). Zendedel A, Mönnink F, Hassanzadeh G, Zaminy A, Ansar MM, Habib P, Slowik A, Kipp M și Beyer C (2018) Estrogen Attenuates Local Inflammasome Expression and Activation after Spinal Cord Injury. Mol. Neurobiol. 55 (2), 1364–1375. [PubMed: 28127698]

(8). Lee JY, Choi HY, Ju BG și Yune TY (2018) Estrogenul atenuează durerea neuropatică indusă după leziunea măduvei spinării prin inhibarea activării microgliei și astrocitelor. Biochim. Biophys. Acta,Mol. Baza Dis. 1864 (7), 2472–2480. [PubMed: 29653184]

(9). Cox A, Varma A, Barry J, Vertegel A și Banik N (2015) Nanoparticule Estrogen in Rat Spinal Cord Injury Elicits Rapid Anti-Inflammatory Effects in Plasma, Cerebrospinal Liquid, and Tissue.J. Neurotrauma 32 (18), 1413–1421. [PubMed: 25845398]

(10). Sribnick EA, Samantaray S, Das A, Smith J, Matzelle DD, Ray SK și Banik NL (2010) Tratamentul cu estrogen după leziune a leziunilor cronice ale măduvei spinării îmbunătățește funcția locomotorie la șobolani. J. Neurosci. Res. 88 (8), 1738–1750. [PubMed: 20091771]

(11). Honda K, Shimohama S, Sawada H, Kihara T, Nakamizo T, Shibasaki H și Akaike A (2001) Nongenomic Antiapoptotic Signal Transduction by Estrogen in Cultured Cortical Neurons. J.Neurosci. Res. 64 (5), 466–475. [PubMed: 11391701]

(12). Sribnick EA, Wingrave JM, Matzelle DD, Ray SK și Banik NL (2003) Estrogen ca agent neuroprotector în tratamentul leziunilor măduvei spinării. Ann. NY Acad. Sci. 993.125–133. [PubMed: 12853305]

For more information:1950477648nn@gmail.com