Abstract:Genul Salvia L. (Lamiaceae) este utilizat în mare măsură în industria farmaceutică și alimentară. Mai multe specii cu relevanță biologică sunt utilizate pe scară largă în medicina tradițională, printre care Salvia aurea L. (sin. S. africana-lutea L.), care este folosită ca dezinfectant tradițional pentru piele și în răni ca remediu de vindecare; cu toate acestea, aceste proprietăți nu au fost încă validate. Prezentul studiu își propune să caracterizeze uleiul esențial (EO) de S. aureus, dezvăluind compoziția sa chimică și validându-i proprietățile biologice. EO a fost obținut prin hidrodistilare și ulterior analizat prin GC-FID și GC-MS. Au fost evaluate diferite activități biologice: efectul antifungic asupra dermatofitelor și drojdiilor și potențialul antiinflamator prin evaluarea producției de oxid nitric (NO) și a nivelurilor de proteine ​​COX-2 și iNOS. Proprietățile de vindecare a rănilor au fost evaluate folosind testul de vindecare a zgârieturii, iar capacitatea anti-îmbătrânire a fost estimată prin activitatea beta-galactozidazei asociată senescenței. S. aurea EO se caracterizează în principal prin 1,8-cineol (16,7 la sută), -pinenă (11,9 la sută), cis-tuyonă (10,5 la sută), camfor (9,5 la sută) și (E)-cariofilenă (9,3 la sută). procente). Rezultatele au arătat o inhibare eficientă a creșterii dermatofitelor. Mai mult, a redus semnificativ nivelurile de proteine ​​ale iNOS/COX-2 și, simultan, eliberarea de NO. În plus, EO a prezentat potențial anti-senescență și vindecare îmbunătățită a rănilor. În general, acest studiu evidențiază proprietățile farmacologice remarcabile ale Salvia aurea EO, care ar trebui explorate în continuare pentru a dezvolta produse pentru piele inovatoare, durabile și prietenoase cu mediul.

Glicozidul cistanchei poate crește, de asemenea, activitatea SOD în țesuturile inimii și hepatice și poate reduce semnificativ conținutul de lipofuscină și MDA din fiecare țesut, eliminând eficient diferiți radicali reactivi de oxigen (OH-, H₂O₂ etc.) și protejând împotriva daunelor cauzate de ADN. prin radicalii OH. Glicozidele feniletanoide Cistanche au o capacitate puternică de captare a radicalilor liberi, o capacitate de reducere mai mare decât vitamina C, îmbunătățește activitatea SOD în suspensia de spermă, reduc conținutul de MDA și au un anumit efect protector asupra funcției membranei spermatozoizilor. Polizaharidele Cistanche pot spori activitatea SOD și GSH-Px în eritrocite și țesuturi pulmonare ale șoarecilor senescenți experimental cauzate de D-galactoză, precum și pot reduce conținutul de MDA și colagen în plămâni și plasmă și pot crește conținutul de elastină, au un bun efect de curățare asupra DPPH, prelungește timpul de hipoxie la șoarecii senescenți, îmbunătățește activitatea SOD în ser și întârzie degenerarea fiziologică a plămânilor la șoarecii senescenți experimental. Cu degenerarea morfologică celulară, experimentele au arătat că Cistanche are o bună capacitate antioxidantă. și are potențialul de a fi un medicament pentru prevenirea și tratarea bolilor de îmbătrânire a pielii. În același timp, echinacozidul din Cistanche are o capacitate semnificativă de a elimina radicalii liberi DPPH și are capacitatea de a elimina speciile reactive de oxigen și de a preveni degradarea colagenului indusă de radicalii liberi și, de asemenea, are un bun efect de reparare asupra daunelor anionice a radicalilor liberi de timină.

Faceți clic pe De unde pot cumpăra Cistanche

【Pentru mai multe informații: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Introducere

Plantele medicinale au mai multe caracteristici organoleptice care contribuie la valoarea lor ridicată în industria farmaceutică, nutraceutică, cosmetică și alimentară. Metaboliții lor secundari apar ca potențiali candidați pentru noi medicamente antiinflamatoare și antifungice [1-3]. Printre altele, speciile aromatice din familia Lamiaceae sunt bine cunoscute pentru bogăția lor în uleiuri esențiale, demonstrând o gamă largă de efecte biologice, inclusiv, în special, antiinflamatorii și antifungice [4–8]. Unul dintre cele mai mari și mai importante genuri ale acestei familii este genul Salvia L., care cuprinde aproape 1000 de specii [9]. Unele dintre acestea sunt cultivate în întreaga lume pentru uzul lor culinar, precum și în scopuri medicinale; de fapt, au fost de multă vreme angajați în medicina populară [10,11]. Multe specii prezintă proprietăți biologice importante, inclusiv efecte antibacteriene, antifungice, antioxidante, antiinflamatorii, anticancerigene, hipoglicemiante și antidemență [12,13].

Deși acest gen a fost studiat pe larg, există încă un mare interes pentru acele specii care pot fi cultivate (domesticate) și utilizate pentru proprietăți de promovare a sănătății. Este bine cunoscut faptul că metaboliții secundari sunt rezultatul interacțiunilor plante/mediu. Prin urmare, studiile asupra populației domestice pot oferi informații relevante despre dacă metaboliții secundari și proprietățile lor biologice aferente diferă de la populația nativă. Dintre acestea, Salvia aurea L. (sin. S. africana-lutea L.) este o specie aromatică importantă care este folosită în scopuri medicinale în Western Cape (Africa de Sud) și este cultivată în multe părți ale lumii ca aromatic/ planta medicinala cat si ornamentala (mobilier urban). Această specie este un arbust aromatic ramificat cenușiu-verzui care crește până la aproximativ 2 m, cu frunze pețiolate care își acumulează uleiul esențial în tricomii glandulari și prezintă flori caracteristice mari și aurii-brun [14]. Este originar din Africa de Sud, unde distribuția sa geografică se extinde spre vest de la Peninsula Cape spre Namaqualand, precum și spre est din Cap în direcția Port Alfred în provincia Eastern Cape. Este adesea numit fie „salvie de plajă, sandsalie”, care este tipic mediului de dună, fie „salvie maro de dună” pentru culoarea caracteristică a florilor sale [15,16].

S. aurea este cunoscută pentru numeroasele sale utilizări în medicina tradițională, în special ca spălare antiinflamatoare și medicinală pentru tratamentul rănilor și afecțiunilor pielii. În plus, această specie este folosită și pentru vindecarea bronșitei și a altor afecțiuni respiratorii, întărind proprietățile sale antimicrobiene [17,18].

Dermatofitele, în special cele de Trichophyton, Epidermophyton și Microsporum, sunt frecvent asociate cu micoze superficiale [19]; cu toate acestea, persoanele imunodeprimate pot fi afectate de infecții invazive [20].

În timpul acestor infecții, epitopii fungici [21,22] se leagă de receptorii Toll-like (TLR), declanșând activarea unei stări proinflamatorii. Una dintre cele mai semnificative căi asociate cu această afecțiune este calea factorului nuclear kappa B (NF-κB), care implică secreția de citokine inflamatorii și sinteza enzimelor proinflamatorii, de exemplu, sintaza de oxid nitric inductibil (iNOS) și ciclooxigenaza- 2 (COX-2) [23]. Aceste enzime sunt responsabile pentru producția de oxid nitric (NO) și respectiv de prostanoide [24,25].

În plus, dermatofitele conduc adesea la leziuni ale pielii [26]. Prin urmare, vindecarea rănilor este necesară pentru a regenera țesutul deteriorat; în caz contrar, rana devine cronică [27].

Infecțiile fungice sunt încă o nevoie clinică nesatisfăcută, deoarece agenții etiologici sunt adesea asociați cu rezistența la terapie și conduc la recăderi, în timp ce medicamentele convenționale sunt larg asociate cu efecte adverse [28]. Mai mult, se știe că mai multe tulpini fungice sunt rezistente la agenții antifungici actuali [29,30]. Medicamentele antiinflamatoare au fost, de asemenea, legate de mai multe efecte adverse [31]. Prin urmare, este crucial să se dezvolte noi strategii care, pe lângă tratarea infecțiilor fungice, pot inhiba și starea proinflamatoare care este evocată în timpul infecției.

Având în vedere utilizările sale tradiționale, este probabil ca S. aurea să aibă activități antifungice și antiinflamatorii concomitente. Cu toate acestea, aceste proprietăți au fost testate de un număr limitat de studii pe o gamă restrânsă de microorganisme [32–34]. În plus, din câte știm, nici un studiu nu a raportat până acum proprietățile de vindecare a rănilor ale S. aureus. Prin urmare, această lucrare își propune să caracterizeze uleiul esențial de S. aureus (sandsalie) atunci când este domesticit într-o zonă de coastă a insulei Sardinia. Având în vedere variația petrolului în sezon și localitate, acest teritoriu a fost ales pentru asemănările sale cu ecoregiunea sud-africană Fynbos, teritoriu nativ S. aurea [35,36]. În plus, am validat unele dintre utilizările tradiționale atribuite acestei specii, în special cele legate de utilizări antimicrobiene, antiinflamatorii și de vindecare a rănilor. Efectele anti-senescență au fost, de asemenea, dezvăluite pentru a promova în continuare interesul pentru această plantă.

2. Rezultate

2.1. Compoziția chimică a uleiului esențial de S. aurea

Frunzele de S. aurea au fost supuse hidrodistilării, obținându-se uleiul esențial (EO) cu randament de 0,54 la sută (g/g). În Tabelul 1, compușii identificați cu EO și procentele lor relative sunt listate în ordinea lor de eluare. Au fost identificați treizeci și șase de compuși, pentru un total de 98,8 la sută.

Mai mult, 47,4% dintre compuși sunt monoterpene oxigenate, 28,8% monoterpene hidrocarburi, 19,8% sesquiterpene hidrocarburi și 2,8% sesquiterpene oxigenate.

Analiza chimică a arătat că componentele cele mai reprezentative ale uleiului de S. aurea au fost 1,8 cineol (16,7 la sută), -pinen (11,9 la sută), cis-tuyonă (10,5 la sută), camfor (9,5 la sută), ( E)-cariofilenă (9,3 la sută), trans-tuyonă (6,9 la sută), -pinenă (4,7 la sută), camfenă (3,9 la sută) și -humulenă (3,0 la sută).

2.2. Efectul antifungic al Salvia aurea

Metoda bulionului de microdiluție a fost utilizată pentru a evalua activitatea antifungică, așa cum este raportat în Tabelul 2. Trichophyton mentagrophytes, T. rubrum și Epidermophyton floccosum sunt tulpinile cele mai sensibile la activitatea EO. Mai exact, EO a arătat un efect fungicid pentru T. mentagrophytes și E. floccosum.

2.3. Potenţialul antiinflamator al S. aurea

Pentru a evalua potențialul antiinflamator al S. aurea, am recurs la modelul de macrofage stimulate de lipopolizaharide (LPS). După cum era de așteptat, în prezența LPS, macrofagele au eliberat NO în mediu, unde a fost detectat ca un nitrat ([NO]=43.03 ± 7,74 pM). Interesant, S. aurea EO a redus eliberarea de NO evocată de LPS în funcție de doză (Figura 1A, IC50=1.07 µL/mL). Doza de 1,25 µL/mL a fost selectată pentru a dezvălui mecanismele de bază, deoarece a inhibat producția de NO cu mai mult de 50%, a fost lipsită de toxicitate (Figura 1B) și a fost o doză care a inhibat creșterea dermatofitelor.

Legarea LPS la receptorul Toll-like 4 (TLR4) declanșează translocarea nucleară NF-kB, care, în consecință, determină exprimarea sintetazei de oxid nitric inductibil (Nos2) și ciclooxigenazei-2 (Ptgs2) [39]. Apoi, am evaluat dacă EO ar putea regla nivelul acestor proteine. După cum era de așteptat, la macrofagele tratate cu LPS, a fost observată o creștere a nivelurilor de proteine ​​atât ale iNOS, cât și ale COX-2 (Figura 2A-C). Prezența uleiului esențial de S. aurea în doza de 1,25 µL/mL ar putea duce la o scădere semnificativă a nivelurilor de proteine ​​ale ambelor proteine, în special iNOS. Aceste rezultate sugerează că uleiul esențial ar putea modula calea NF-kB.

2.4. Proprietățile de vindecare a rănilor ale uleiului esențial de S. aurea

Având în vedere utilizările S. aurea pentru tratamentul rănilor [18], am emis ipoteza că uleiul esențial ar putea îmbunătăți vindecarea rănilor. Într-adevăr, rezultatele noastre arată că EO a promovat migrarea celulelor (Figura 3A, B) fără a afecta viabilitatea celulei (Figura 3C).

2.5. Potentialul anti-senescenta al uleiului esential de S. aurea

Ținând cont de faptul că utilizările tradiționale atribuite S. aurea sunt asociate cu tratamentul bolilor legate de vârstă [40], am evaluat efectul asupra senescenței celulare. Recurgând la senescența celulară indusă de etoposide, am observat activitatea galactozidazei asociată senescenței (Figura 4A, B). Interesant este că atunci când uleiul esențial a fost adăugat în faza de recuperare, această caracteristică a fost redusă, sugerând că uleiul esențial părea să prevină senescența celulară.

3. Discuție

Acest studiu oferă profilul uleiului esențial al S. aurea domesticit pe insula Sardinia. Am raportat că EO sa a fost caracterizat de 47,4% monoterpene oxigenate, în principal 1,8-cineol, cis/trans-tuyonă și camfor, 28,8% monoterpene de hidrocarburi, în principal -pinen, și 19,8% din sesquiterpene cu hidrocarburi, cu (E)-cariofilenă și -humulenă, în timp ce doar 2,8 la sută din sesquiterpenele oxigenate.

În comparație cu literatura de specialitate, apare o diferență clară calitativă și cantitativă în compoziția OE-urilor native de S. aurea. În special, componentele majore raportate au fost -pinen, mircen, o-cimen, spathulenol și -eudesmol [32]. Mai mult, aceste modificări se reflectă în procentele relative ale principalelor clase de compuși. Aici, am găsit o scădere substanțială a sesquiterpenelor oxigenate (2,8 la sută), în timp ce acestea au reprezentat 18,9 la sută și 41,7 la sută în două studii diferite din regiunea Western Cape[33,41].

Cu toate acestea, această diferență chimică nu a fost neașteptată, deoarece, potrivit unor autori, această diferență chimică nu a fost însă neașteptată deoarece, potrivit unor autori, depinde nu numai de caracteristicile genetice, ci și de ciclul de viață al unei plante, sezonul de creștere, sezonul de recoltare. , proprietățile solului și agenții de stres[32, 41]

În special, despre S. aurea, a fost găsită o diversitate chimică consistentă în funcție de sezonalitate și teritoriul de recoltare [32,41]. Lim Ah Tock et al., 2020, au considerat populații din zona Western Cape și au evidențiat un grad ridicat de variabilitate intraspecifică, reprezentând 47,8 la sută [32,33,41]. Mai mult, au analizat dendrograma HCA a acestor populații, unde a apărut o separare clară a clusterelor în S. aurea, ca fiind responsabilă pentru variația chimică substanțială [41].

Pe lângă factorii menționați care influențează compoziția chimică a OE, se știe că tratamentul post-recoltare, condițiile de depozitare și metodele de extracție contribuie și ele la variabilitatea chimică [42,43]. Având în vedere acest lucru, diferențele care au fost observate aici ar putea fi atribuite oricăruia dintre acești factori.

Activitățile biologice raportate confirmă atributele de utilizări tradiționale ale S. aurea, în special cele asociate cu infecții inflamatorii și microbiene.

Raportăm că EO a inhibat creșterea dermatofitelor, validând astfel utilizarea atribuită pentru tratamentul afecțiunilor pielii [18]. Se știe că uleiul esențial de S. aurea este eficient împotriva Brevibacterium [44], Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Bacillus cereus și Escherichia coli [32,33]. Alte studii au raportat activități antimicrobiene pentru extractele nevolatile [14,45,46]. În ceea ce privește compușii majori găsiți în S. aurea EO, sa raportat că 1,8-cineolul a prezentat activitate slabă împotriva dermatofitelor testate [47]. Inhibarea agenților patogeni ai plantelor a fost raportată și pentru 1,8-cineol [48–51]. Potențialul antimicrobian al -pinenei a fost, de asemenea, raportat pe scară largă împotriva mai multor drojdii și ciuperci filamentoase, inclusiv Trichophyton spp. [52–56]. Cis-tuyona, un compus relevant din acest ulei esențial, a exercitat și activitate antimicrobiană [57,58]. Pe de altă parte, a fost raportată activitate antimicrobiană slabă pentru camfor [59-61]. Sesquiterpen-cariofilena a exercitat activitate antimicrobiană împotriva diferitelor ciuperci și bacterii [3,62–64]. Aceste rezultate sugerează că -pinena, cis-tujona și -cariofilena ar putea contribui major la activitatea raportată pentru S. aurea.

Datorită utilizării tradiționale a S. aurea în tratamentul afecțiunilor legate de inflamație [18], ne-am propus să validăm aceste efecte. Într-adevăr, rezultatele noastre arată că EO a inhibat producția de NO în macrofagele stimulate de LPS și a redus concomitent nivelurile de proteine ​​ale iNOS și COX-2: două enzime proinflamatorii relevante pentru răspunsul inflamator. Din câte cunoștințele noastre, doar un studiu a abordat potențialul antiinflamator al S. aurea, arătând capacitatea de inhibiție a activității lipoxigenazei-5 [33]. În ceea ce privește compușii izolați, mai multe studii au raportat activitatea antiinflamatoare a 1,8-cineolului [65–70], inclusiv studiile clinice [71]. Mai mult, se știe că acest compus inhibă activitatea COX-2 [66] și previne translocarea nucleară a NF-kB [65,72]. -pinenul a scăzut semnificativ producția de NO atât în ​​macrofagele stimulate cu LPS [73], cât și în condrocitele activate IL-1 -[74]. De asemenea, a arătat o inhibare a chimiotaxiei la neutrofile [75]. Potențialul antiinflamator al camforului este raportat pe scară largă folosind atât modele in vivo, cât și in vitro [76–78]. -Cariofilena a exercitat, de asemenea, efecte antiinflamatorii în colită [79], excizia rănilor cutanate [80] și sepsis [81] la modelele animale. Alte abordări in vitro și in vivo evidențiază acțiunea antiinflamatoare a acestei sesquiterpene [82,83]. Rezultatele sugerează că activitatea observată la S. aurea s-ar putea datora prezenței acestor compuși, care ar putea acționa sinergic.

Am raportat că uleiul esențial din S. aurea a promovat vindecarea rănilor, ceea ce a validat utilizările sale pentru tratamentul rănilor deschise. Din câte știm, niciun studiu nu a raportat proprietățile de vindecare a rănilor ale S. aurea. În ceea ce privește compușii izolați, 1,8-cineolul promovează migrarea celulelor în modelele de răni atât in vivo, cât și in vitro [70,84,85]. Mai mult, s-a raportat că uleiul esențial din Teucrium polium subsp. capitalism, bogat în -pinen, vindecare crescută a rănilor [86]. Sesquiterpen-cariofilena a promovat, de asemenea, vindecarea rănilor într-un model de excizie a rănilor cutanate [80]. Cu toate acestea, alți compuși găsiți în cantități mai mici ar putea contribui la activitatea raportată. Într-adevăr, -pinenul promovează vindecarea rănilor în modelul animal al unei răni deschise [84]. Având în vedere că uleiurile esențiale sunt amestecuri complexe, este de imaginat că proprietățile raportate de vindecare a rănilor ar putea fi atribuite efectelor sinergice ale mai multor compuși.

Raportăm, în premieră, un efect anti-senescență pentru uleiul esențial de S. aurea. Într-adevăr, celulele tratate cu ulei esențial au prezentat un număr redus de celule pozitive -galactozidaze asociate senescenței. În ceea ce privește compușii izolați, numărul de studii care raportează efectul lor a fost limitat. Într-adevăr, camforul previne creșterea activității -galactozidazei asociate senescenței [87]. Pe de altă parte, 1,8-cineol, compusul principal al acestui ulei esențial, a indus senescența celulară [88]. Având în vedere deficitul de studii, putem doar să facem ipoteza că activitatea raportată s-ar putea datora în principal compusului camfor; cu toate acestea, efectul compușilor minori nu poate fi eliminat.

【Pentru mai multe informații: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】