roLimba
Acasă / Cunoştinţe / Conţinut

Cunoştinţe

Constituenții antioxidanti și anti-oboseli ai bame

Mar 21, 2022

Fangbo Xia, Yu Zhong, Mengqiu Li, Qi Chang, Yonghong Liao, Xinmin Liu * și Ruile Pan *


Institutul de Dezvoltare a Plantelor Medicinale, Colegiul Medical al Uniunii Peking, Academia Chineză de MedicinăSciences, nr. 151, North Road Malianwa, districtul Haidian, Beijing 100193


Pentru mai multe informatii:ali.ma@wecistanche.com



Abstract


Bame (Abelmoschus esculentus (L.) Moench), o legumă sănătoasă, este larg răspândită în zonele tropicale și subtropicale. Studiile anterioare au demonstrat că păstăile de bame posedăactivitate anti-oboseală,iar scopul acestei cercetări este de a clarificaanti obosealaconstituenți. Pentru a realiza acest lucru, am împărțit păstăile de bame (OPD) în semințe (OSD) și coji (OSK) și am comparat conținutul de polizaharide totale, polifenoli totali, flavonoide totale, izoquercitrină și quercetin-3-O-gentiobioză și antioxidantul activitate in vitro şiactivitate anti-obosealain vivo între OSD și OSK. Conținutul de polifenoli totali și polizaharide totale a fost de 29,5 la sută și 14,8 la sută în OSD și 1,25 la sută și, respectiv, 43,1 la sută în OSK. Flavonoidele totale, izoquercitrina și quercetina-3-O-gentiobioza (5,35 la sută, 2,067 la sută și, respectiv, 2,741 la sută) au fost detectate doar în OSD. Testele de antioxidanți, inclusiv captarea 1-difenil{-2-picrilhidrazil (DPPH), testul de reducere a puterii antioxidante ferice (FRAP) și de reducere a puterii și testul de înot cu greutate, au arătat că OSD poseda un antioxidant semnificativ șiefecte anti-oboseala. Mai mult, determinarea biochimică a relevat căactivitate anti-obosealaOSD este cauzată de reducerea nivelului de acid lactic din sânge (BLA) și azot ureic (BUN), îmbunătățind stocarea hepatică de glicogen și promovând capacitatea antioxidantă prin scăderea nivelului de malondialdehidă (MDA) și creșterea superoxid dismutază (SOD) și glutation peroxidază (GSH-). Px) niveluri. Aceste rezultate au dovedit că semințele de bame au fostanti obosealao parte din păstăile de bame și polifenolii și flavonoidele au fost constituenți activi.


Cuvinte cheie: bame; anti oboseala; antioxidant; polifenoli



Cistanche

1. Introducere


Oboseala este un fenomen fiziologic complex, care este definit ca dificultate în inițierea sau susținerea activităților voluntare [1]. Pe lângă faptul că crește odată cu vârsta și se manifestă la pacienții cu cancer, depresie, infecție cu HIV, scleroză multiplă și boala Parkinson, oboseala devine un simptom din ce în ce mai frecvent la oamenii normali, odată cu ritmul în creștere al vieții moderne [2–4]. Sondajele mari ale comunității au arătat că mai mult de jumătate din populația adultă se plânge de oboseală [5,6]. Oboseala acumulată sau cronică pe termen lung nu numai că scade calitatea vieții, dar duce și la sindromul de oboseală cronică și alte boli organice și chiar duce la karoshi (moartea anormală din boli cardiovasculare acute cauzate de surmenaj [7]). Există mai multe teorii despre cauzele oboselii, cum ar fi teoria epuizării, care afirmă că oboseala este cauzată de lipsa de ATP disponibil pentru cuplarea actină-miozină, pomparea Na`/K` și captarea de Ca2` de către reticulul sarcoplasmatic [8-11] ]; teoria perturbării homeostaziei, care indică oboseala cauzată de acumularea diverșilor subproduși metabolici [10,12]; și teoria catastrofei care indică faptul că oboseala se poate dezvolta din cauza defecțiunii la unul sau mai multe locuri de-a lungul căii de producere a forței [13]. Printre acestea, se crede că stresul oxidativ joacă un rol important în etiologia oboselii [10,13–16]. S-a demonstrat că antioxidanții din unele plante au efecte anti-oboseală considerabile, ceea ce indică faptul că tratamentul cu antioxidanti ar putea fi o abordare terapeutică anti-oboseală valoroasă [17-20]. Prin urmare, consumatorii caută mai multe componente antioxidante naturale în dieta lor pentru a reduce daunele oxidative și pentru a lupta împotriva oboselii. Bame (Abelmoschus esculentus (L.) Moench, Familia: Malvaceae), cunoscută și sub numele de degetul doamnei, bhindi și gumbo, este o plantă anuală originară din Africa și a fost cultivată în diferite țări din întreaga lume, în principal în zone tropicale, subtropicale, și regiunile temperate calde.


Păstăile de bame au fost de multă vreme folosite ca legumă și sursă de medicamente dietetice. În medicina tradițională asiatică și africană, păstăile de bame sunt folosite ca aliment mucilaginos pentru combaterea gastritei [21]. Studiile farmacologice au arătat că okra posedă activități antioxidante, neuroprotectoare, antidiabetice, antihiperlipidemice și anti-oboseală [22-26]. Deși activitatea anti-oboseală a păstăilor de bame a fost dovedită înainte [26], se știe puțin despre activitățile și constituenții ei anti-oboseală. Literatura anterioară a raportat că păstăile de bame conțin un conținut ridicat de polizaharide, polifenoli și flavonoide [27–34]. S-a demonstrat, de asemenea, că polifenolii și flavonoidele posedă puternice efecte antioxidante și anti-oboseală în studiile anterioare [15,18,20,35,36]. Mai mult, experimentul nostru calitativ preliminar, în care am folosit soluția ferică de clorură ca reactiv de dezvoltare a culorii, a arătat că extractul de semințe de bame a prezentat o reacție fenolică puternică; cu toate acestea, extractul său de piele a arătat cu greu o astfel de reacție (materiale suplimentare), ceea ce a demonstrat că semințele de bame conțin un conținut mai mare de polifenoli și flavonoide decât pielea de bame. Prin urmare, s-ar putea specula că semințele de bame pot fi partea anti-oboseală a păstăilor de bame, iar polifenolii și flavonoidele pot fi constituenții activi. Scopul studiului a fost de a clarifica constituenții anti-oboseală ai păstăilor de bame. Pentru a realiza acest lucru, am împărțit păstăile de bame proaspete în semințe și coji și am comparat conținutul chimic al polizaharidelor totale, polifenolilor totali, flavonoidelor totale, izoquercitrină și quercetin-3-O-gentiobioză și activitățile antioxidante in vitro și anti- activități de oboseală in vivo între semințele și pielea de bame. Toate aceste rezultate au arătat că semințele de bame au fost partea anti-oboseală a păstăilor de bame, iar polifenolii și flavonoizii au fost constituenți activi. Au fost studiate și mecanismele potențiale ale activităților anti-oboseală în bame.


2. Sectiunea Experimentala


2.1. Material vegetal și extracție


Păstăile proaspete de bame au fost achiziționate de pe o piață (Sanya, provincia Hainan, China) în iulie 2013. Planta a fost autentificată de profesorul Bengang Zhang, Institutul de Plante Medicinale, Academia Chineză de Științe Medicale și Colegiul Medical al Uniunii Peking, Beijing, China, unde exemplarele voucher (Nr. 20130705) au fost depuse în Herbarul institutului. Au fost preparate două porții de păstăi de bame proaspete de 2,5 Kg. O porție a fost liofilizată direct pentru a obține păstăi de bame uscate (251,3 g). Cealaltă porție a fost împărțită în semințe de bame și coji de bame, liofilizate pentru a obține, respectiv, semințe de bame uscate (50,1 g) și coji de bame uscate (200,5 g). Păstăile, semințele și cojile de bame au fost bine măcinate și extrase separat cu 1500 ml apă clocotită fiecare timp de 1 oră (de 3 ori). Fiecare lichid filtrat a fost combinat și concentrat sub vid, pentru a produce reziduuri de păstăi de bame (OPD, 105,4 g), semințe de bame (OSD, 20,5 g) și, respectiv, piele de bame (OSK, 84,1 g). Prin urmare, raportul de extract de OPD:OSK:OSD este de aproximativ 5:4:1. Toate probele au fost păstrate la ´20 ˝C până la analizele chimice ulterioare și experimentele pe animale.


Acteoside of Cistanche

2.2. Produse chimice și reactivi


Izoquercitrina și quercetina-3-O-gentiobioza au fost izolate din păstăile de bame de către laboratorul nostru, la puritățile de peste 98%, prin analiză prin cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC). Standardele de rutină, acid galic și D-glucoză au fost achiziționate de la Institutul Național pentru Controlul Alimentelor și Medicamentelor (Beijing, China). Pentru determinarea fenolilor a fost utilizat reactivul fenol Folin–Ciocalteu (1N, Coolaber Science & Technology, Beijing, China). Un kit de reducere a puterii antioxidante ferice (FRAP) a fost achiziționat de la Beyotime Biotechnology (Beijing, China). 1,1-difenil{-2-picrilhidrazil (DPPH) și Trolox au fost achiziționate de la Sigma-Aldrich Inc. (St. Louis, MO, SUA). Tamponul fosfat (PBS, Gibco) a fost achiziționat de la Thermo Fisher (Waltham, MA, SUA). Solvenții, inclusiv acetonitril (Thermo Fisher, MA, SUA) și acidul formic (CNW, Dusseldorf, Germania), au fost de calitate HPLC, iar apa a fost obținută dintr-un sistem de purificare a apei Milli-Q (Millipore, MA, SUA). Trusele de analiză pentru determinarea lactatului din sânge (BLA), azotului ureic seric (BUN), glicogenului hepatic (HG), glutation peroxidază (GSH-Px), acid tiobarbituric (TBA) și superoxid dismutază (SOD) au fost achiziționate de la Nanjing Jiancheng Biotechnology Institutul (Nanjing, China). Toți ceilalți reactivi și substanțe chimice utilizate în acest studiu au fost de calitate analitică.


2.3. animale


Șoarecii masculi ICR (20-22 g) au fost achiziționați de la Vital River Laboratories (nr. calificat: SCXK 2012-0001, Beijing, China). Șoarecii au fost găzduiți în grupuri de 6 animale per cușcă la o temperatură constantă (23 ˝C ˘ 2 ˝C) și umiditate (50 la sută ˘ 10 la sută) pe un ciclu lumină/întuneric de 12/12-h (luminile aprinse de la 8:00 am până la 8:00 pm). Animalele au avut acces gratuit la o dietă standard de mâncare și apă de băut sterilizată în adăpostul pentru animale SPF (Specific Patogen Free). Toate procedurile experimentale au fost efectuate sub supravegherea și aprobarea Academiei Centrului pentru Animale Experimentale a Institutului de Dezvoltare a Plantelor Medicinale și în strictă conformitate cu Ghidul NIH pentru Îngrijirea și Utilizarea Animalelor de Laborator (ediția a VIII-a)[37].



2.4. Analiza chimică a OSD și OSK


2.4.1. Determinarea conținutului total de flavonoide (TF).


Conținutul de TF a fost măsurat prin test colorimetric NaNO{{0}}Al(NO)3 conform Standardelor tehnice pentru testarea și evaluarea alimentelor funcționale, care a fost emis de Comisia Națională de Sănătate și Planificare Familială din RPC. în 2{{20}}03, cu modificări minore. Pe scurt, proba de 50 mg a fost dizolvată în 40 ml apă distilată și soluția de probă a fost extrasă cu 50 ml cloroform de trei ori. Apoi, soluția de apă a fost diluată la 50 ml și 2 ml de soluție diluată a fost adsorbită de 5 g rășină poliamidă și eluată cu 20 ml etanol 70%. Eluţia cu 70% etanol a fost concentrată la 10 ml sub vid. Trei mililitri de eluție concentrată au fost plasați într-un balon cotat de 10 ml și apoi s-au adăugat 2 ml etanol 70 procente, 0,3 ml NaN02 (5 procente) și 0,3 ml Al(NO)3. După 5 minute, s-au adăugat 2 mL soluţie de NaOH (1,0 M) la soluţia de amestec şi s-au lăsat să stea timp de 6 minute. În cele din urmă, s-au adăugat 2,4 ml etanol 30 procente. Absorbanța a fost măsurată față de un martor la 510 nm cu un spectrofotometru UV-VIS UNICO-2012 (Shanghai, China). Conținutul total de flavonoide a fost calculat din curba de calibrare folosind rutina ca standard (20-100 mg/L). Rezultatele au fost raportate ca mg de echivalent rutină per mg de probe.


Echinacoside of Cistanche

2.4.2. Determinarea conținutului total de polifenoli (TP).


Conținutul de TP a fost determinat folosind metoda Folin-Ciocaiteu cu ușoare modificări [38]. Pe scurt, probă de 50 mg a fost amestecată cu 25 ml de soluție de metanol de 50 procente, apoi 0,5 ml de soluție de probă, 0,3 ml de reactiv Folin-Ciocaiteu și 10 ml de carbonat de sodiu (10 procente) au fost suficient amestecat, iar apoi volumul a fost ajustat la 25 ml cu apă distilată. Amestecul a fost lăsat să stea la 50 °C în întuneric timp de 1 oră. Absorbanța a fost măsurată la 765 nm. A fost pregătită o curbă de calibrare a acidului galic. Rezultatele au fost exprimate ca mg de echivalenți de acid galic per mg de probe.


2.4.3. Determinarea izoquercitrinei și a quercetinei-3-O-Gentiobioză


Cuantificarea izoquercitrinei și a quercetinei{{0}}O-gentiobioza a fost efectuată prin HPLC-UV utilizând o curbă de calibrare în cinci puncte (r{{{0}.999) în intervalul 5-5{{23 }}0 µg/mL. Izoquercitrină și quercetin-3-O-gentiobioză (5 mg, respectiv) și mostre (10 mg) au fost dizolvate în 10 ml metanol, respectiv. Toate soluțiile au fost filtrate prin fifiltre de politetrafluoretilenă de 0,45-µm înainte de analiza HPLC. Pompa HPLC Waters 600 cu un detector UV/Visible Waters 2489 a fost folosită pentru a separa compușii printr-o coloană cu fază inversă (Thermo synchronize aQ, 4,6 mm ˆ 250 mm, 5 µm) la o rată similară de 1 ml/min. Faza mobilă a constat din acetonitril (A) și 0,1 procente de acid acetic în apă (B). Programul de eluție cu gradient a fost următorul: 10% A la 0 min și liniar până la 40% în 40 min, 90% la 41 până la 50 min și 10% la 51-65 min. Lungimea de undă pentru detectarea UV a fost de 354 nm și temperatura coloanei a fost setată la 25 ˝C. Compușii au fost identificați prin compararea cu timpul de retenție al standardelor și cuantificați prin calcularea ariei de sub curbă cu standarde externe.


2.4.4. Determinarea conținutului de polizaharide totale (TPS).


Conținutul de TPS a fost determinat prin metoda fenol-acid sulfuric [39,40]. Pe scurt, o probă de 80 mg a fost dizolvată în 50 ml apă distilată, iar apoi proteina a fost îndepărtată prin metoda sălbatică (soluție de probă: cloroform: N-alcool butilic=20:4:1). Apoi, s-a adăugat o cantitate de patru ori de etanol la soluția vâscoasă rezultată pentru a precipita extractul de polizaharidă brută. Soluția de etanol a fost centrifugată la 617,4 ˆ g timp de 30 de minute pentru a obține precipitatul. Precipitatul a fost spălat succesiv cu etanol, acetonă şi eter şi dizolvat în 250 ml apă distilată. Apoi, 0,1 ml soluție de polizaharidă a fost amestecată cu 0,9 ml apă distilată, 1 ml soluție de fenol 5 procente și 5 ml acid sulfuric într-o eprubetă și s-au păstrat la temperatura camerei timp de 30 de minute. Absorbanța a fost măsurată la 490 nm cu un spectrofotometru UV-VIS UNICO-2012 (Shanghai, China). S-a stabilit o curbă de calibrare a glucozei, iar conținutul de TPS a fost determinat din ecuația de regresie a curbei de calibrare. Rezultatele au fost exprimate ca mg de echivalenți de glucoză per mg de probe.


2.5. Teste de antioxidanți in vitro


Capacitatea antioxidantă a OPD, OSK și OSD a fost detectată prin trei metode, inclusiv eliminarea {{{0}}}difenil-2-picrilhidrazil (DPPH), puterea antioxidantă reducătoare ferică (FRAP) și puterea de reducere, conform literaturii [19,41] cu ușoară modificare. Trolox a fost folosit ca martor pozitiv, iar rezultatele au fost exprimate ca capacitate antioxidantă echivalentă Trolox. Deoarece OPD a fost compus din OSK și OSD, pentru a ilumina constituenții activi ai păstăilor de bame, concentrația de OSK și OSD a fost utilizată ca echivalent OPD. Conform testelor preliminare, intervalele de concentrație pentru OPD, ODS, OSK au fost 0.0{{10}}4–0,8, {{17 }}.0{{20}}32–0,64 și 0.0008 –{{4{0}}.16 mg/mL pentru testul DPPH; 1.0–4.{0, 0.8–3.2 și {{5{0}}.2–0.8 mg/mL pentru testul FRAP; și 0,1–4, 0,08–3,2 și 0,02–0,8 mg/mL pentru testul de reducere a puterii, respectiv Pentru testul DPPH, soluție probă (50 µL) cu un interval proporțional (0,004–0,8 mg OPD/mL, 0,0032–0,64 mg OSK/ mL și 0,0008–0,16 mg OSD/mL) a fost amestecat cu soluție de DPPH (100 µL, 1,28 ˆ 10´4 mol/L) pentru măsurarea activității de captare a radicalilor liberi (A1) și etanol 95% (100 µL) pentru control (A2). Apa distilată (50 uL) a fost amestecată cu soluție de DPPH (100 uL) pentru martor (A0). Absorbanța a fost măsurată la 517 nm după ce soluțiile au fost amestecate și menținute la temperatura camerei timp de 30 de minute. Capacitatea de a elimina radicalul DPPH a fost calculată folosind următoarea ecuație:


Flavonoids of Cistanche

Activitate de eliminare ( procente ){{0}}[ 1-(A1-A2/{A0]* 100 la sută . (1)


FRAP a trei soluții de probă (1,0–4,0 mg OPD/mL, 0,8–3,2 mg OSK/mL și 0},2– {{10}}.8 mg OSD/mL) au fost detectate conform instrucțiunilor Institutului de Biotehnologie Beyotime. Soluția de probă diluată (5 µL) a fost amestecată cu soluția de lucru FRAP (180 µL) și s-a menținut timp de 5 minute la 37 ˝C. Absorbanţa amestecului de reacţie a fost apoi înregistrată la 593 nm. Curba standard a fost pregătită folosind FeSO4, variind de la 0,15 până la 1,5 mm. În determinarea puterii de reducere, soluția de probă (0,5 ml pentru 0,1–4 mg OPD/mL, 0.08–3,2 mg OSK/mL și 0.02–{{5{0}},8 mg OSD/mL) a fost amestecat cu același volum de PBS ({0,2 mol/L) , pH 6,6) și soluție de fericianură de potasiu (1 procente, gr/v), iar incubarea a fost efectuată timp de 20 min la 50 °C. Acidul tricloracetic (0,5 ml, 10 procente, gr/v) a fost adăugat la amestec, care a fost centrifugat la 201,6 ˆ g timp de 10 min. După aceasta, stratul superior al soluției (0,5 ml) a fost diluat cu apă distilată (0,5 ml) și apoi a fost adăugată clorură ferică (0,1 ml, 0,1 procente, gr/v). Absorbanța a fost măsurată la 700 nm.



2.6. Efectele anti-oboseală ale OPD, OSK și OSD și analiză biochimică


Pe baza aceluiași motiv ca și testele de antioxidanți in vitro, dozele de anti-oboseală de OPD, OSK și OSD au fost concepute ca grupuri OPD (0.75, 1.50 și 3.{{. 6}} g/kg greutate corporală), grupuri OSK (0,60, 1,20 și 2,40 g/kg greutate corporală) și grupuri OSD (0,15, 0,30 și 0,60 g/kg greutate corporală). Șoarecii au fost hrăniți cu dietă de bază în mediul experimental înainte de experimente. După 3 zile de adaptare, 120 de șoareci au fost împărțiți aleatoriu în zece grupuri: grup de control (CG), 3 grupuri OPD, OSK și OSD fiecare. Fiecare grup a avut 12 șoareci. Grupul martor (CG) a fost tratat cu apă sterilă, în timp ce celelalte grupuri au fost tratate cu extractul corespunzător. Apa/extrasele au fost administrate pe cale orală (8:00 dimineața) șoarecilor o dată pe zi, timp de 21 de zile, iar testul în câmp deschis și testul de înot cu greutate (WLST) au fost efectuate în a 20-a și, respectiv, în a 21-a zi. După WLST, șoarecii au fost scoși din piscină, uscați cu prosoape de hârtie și plasați înapoi în cuștile lor originale. Experimentatorii WLST și testul în câmp deschis au fost orbiți de condițiile experimentale și animalele au fost randomizate înainte de a participa la experimente. Pentru a elucida efectul anti-oboseală al OSD în timpul recuperării, șoarecii au fost anesteziați cu eter și au fost colectate probe de sânge de la fiecare grup după WLST 24 de ore. Probele de ser au fost obținute prin centrifugare (896 ˆ g, 15 min, 4 ˝C). Ficatii au fost disecati rapid si spalati in solutie salina rece ca gheata. Toate probele au fost congelate în azot lichid și păstrate la ´80 ˝C pentru analize ulterioare.


2.6.1. Test în câmp deschis


Pentru a verifica efectele OPD, OSK și OSD asupra activităților locomotorii, șoarecii au fost evaluați automat utilizând un sistem de control asistat de computer în câmp deschis dezvoltat de noi [42,43]. Aparatul este format din patru rezervoare metalice (30 cm diametru, 40 cm înălțime) cu o cameră video fixată în partea de sus. Experimentele au fost efectuate într-o cameră liniștită, iar aparatul a fost iluminat de o sursă de lumină de 120 Lux pe tavan. La o oră după dozare, fiecare șoarece a fost plasat în centrul rezervorului metalic și a fost lăsat să exploreze liber timp de 2 minute, iar distanța parcursă în 4 minute, care este un indice al activității locomotorii, a fost calculată folosind software-ul. Patru șoareci au fost testați simultan.


Cistanche can relieve chronic fatigue syndrome symptoms

2.6.2. Test de înot cu greutate (WLST)


WLST a fost efectuat pentru a induce oboseala conform metodologiei descrise anterior cu ușoare modificări [19,44,45]. La o oră după dozare, șoarecii au fost încărcați cu foi de plumb care au fost atașate la aceeași poziție a cozilor și au cântărit aproximativ 3 la sută din greutatea lor corporală. Apoi, șoarecii încărcați cu greutate au fost forțați individual să înoate în recipiente cilindrice (diametru 40 cm), care au fost umplute cu apă (25 ˘ 1 ˝ C) la o adâncime de 30 cm. Epuizarea a fost clasificată ca pierderea mișcărilor coordonate și eșecul de a ridica la suprafață în 10 s, iar timpul de înot a fost înregistrat imediat. Apa din piscina a fost inlocuita dupa fiecare sedinta.



2.6.3. Analiza parametrilor biochimici legați de oboseală


Serul a fost preparat pentru determinarea azotului ureic din sânge (BUN) și a acidului lactic din sânge (BLA). Ficatii au fost pregătiți pentru determinarea echivalenților de malondialdehidă (MDA), superoxid dismutază totală (SOD), glutation peroxidază (GSH-Px) și glicogen hepatic (HG). Toți parametrii biochimici au fost determinați folosind kituri disponibile comercial și toate procedurile au respectat instrucțiunile producătorului. Pe scurt, conținutul de HG a fost determinat utilizând reactiv antron la 620 nm, în timp ce BLA a fost determinat folosind reactiv clorură de albastru de nitrotetrazolium la 530 nm. BUN a fost evaluat prin urază cu metoda enzimei cuplate cu glutamat dehidrogenază la 640 nm. Activitatea GSH-PX a fost măsurată într-un sistem cuplat prin măsurarea scăderii nucleotidei trifosfopiridină (NADPH) la 340 nm. Testul pentru activitatea SOD s-a bazat pe capacitatea sa de a inhiba oxidarea cu O2 produs din sistemul xantin-xantin oxidază. O unitate de activitate SOD a fost definită ca cantitatea care a redus absorbanța la 450 nm cu 50 %. Conținutul de echivalenți MDA a fost determinat la 532 nm prin reacția cu TBA pentru a forma un produs cromofor stabil.


2.7. Analize statistice


Determinările chimice au fost efectuate în trei exemplare, iar rezultatele sunt exprimate ca valori medii. Testele antioxidante au fost efectuate în trei exemplare, iar rezultatele au fost exprimate ca valori medii ˘ abateri standard. Comportamentul și datele biochimice au fost analizate de software-ul statistic SPSS (SPSS 19.0 Inc., Chicago, IL, SUA). O analiză unidirecțională a varianței (ANOVA unidirecțională) cu testul Diferenței cele mai puțin semnificative (LSD) a fost utilizată pentru compararea între grupuri. Valorile p mai mici de 0.05 au fost considerate semnificative statistic. Rezultatele au fost exprimate ca medie ˘ eroarea standard a mediei (SEM).


3. Rezultate


3.1. Analiza chimică a OSK și OSD


După cum se arată în Tabelul 1, conținutul de TF și TP în OSD a fost mult mai mare decât cel din OSK, între timp, conținutul de TPS în OSD a fost mult mai mic decât cel din OSK. Compușii izoquercitrinei și quercetin-3-O-gentiobioză au fost detectați numai în OSD folosind HPLC (prezentat în Figura 1).


image

image

3.2. Activitatea antioxidantă in vitro a OPD, OSK și OSD


După cum se arată în Tabelul 2, activitatea antioxidantă a OPD și OSD a fost dovedită prin teste DPPH, FRAP și de reducere a puterii, iar OSD a arătat o activitate antioxidantă mult mai bună decât OPD. Cu toate acestea, OSK a arătat un efect slab în analiza puterii de reducere și niciun efect în testele DPPH și FRAP. Prin urmare, OSD a fost partea activă a păstăilor de bame pentru activitatea antioxidantă



image


3.3. Efecte asupra activității locomotorii a OPD, OSK și OSD


Activitățile locomotorii ale șoarecilor au fost testate în a 20zi după ce au fost tratați cu OSD. După cum se arată în Figura 2, o doză mare de grupuri OSD (0.6 g/kg) a redus semnificativ distanța totală a șoarecilor în noul mediu în comparație cu grupul de control (p=0. 04). Cu toate acestea, nu au fost observate efecte semnificative pentru alte grupuri asupra distanței totale. Aceste rezultate au arătat că păstăile și semințele de bame nu au avut niciun efect excitator asupra sistemului nervos central. Mai mult, s-ar putea deduce că OSD ar putea avea un ușor efect sedativ la o doză mare (0,6 g/kg).



image


3.4. Efecte asupra timpului exhaustiv de înot al OPD, OSK și OSD (WLST)


După cum se arată în Figura 3, după suplimentarea cu OPD, OSK și OSD timp de 21 de zile, tratamentul cu OPD (3 g/kg) și OSD (0,3 și 0,6 g/kg) ar putea prelungește semnificativ timpul de înot al șoarecilor, care s-a întins până la 57,84 ˘ 12,37, 46,51 ˘ 5,82 și 70.{05 ˘ 12.07 min (p < 0="" .05,="" p="">< 0.{05="" și,="" respectiv,="" p="">< 0.{{7{0}}1),="" mult="" mai="" lung="" decât="" atât="" în="" grupul="" de="" control="" (15,20="" ˘="" 1,49="" min).="" între="" timp,="" tratamentul="" cu="" opd="" (0,75="" și="" 1,5="" g/kg),="" osd="" (0,15="" g/kg)="" și="" osk="" (0,6,="" 1,2="" și="" 2,4="" g/kg)="" nu="" a="" arătat="" o="" creștere="" semnificativă="" a="" timpului="" de="" înot="" la="" șoareci="" (="" 14,73="" ˘="" 1,28,="" 23,96="" ˘="" 3,70="" și,="" respectiv,="" 27,34="" ˘="" 5,72="" min)="" în="" comparație="" cu="" grupul="" de="" control="" (p="0,897," p="0,398" și,="" respectiv,="" p="0,268" ),="" dar="" osd="" (0,15="" g/kg)="" a="" arătat="" o="" tendință="" de="" creștere="" a="" timpului="" de="" înot,="" dar="" nu="" a="" relevat="" o="" diferență="" semnificativă="" (p="0.225)." mai="" mult,="" anova="" unidirecțional="" au="" afișat="" diferențe="" semnificative="" în="" ceea="" ce="" privește="" timpul="" complet="" de="" înot="" al="" șoarecilor="" între="" grupuri="" (f="" (3,="" 40)="12.839," p="">< 0,001).="" timpul="" de="" înot="" al="" grupului="" cu="" doză="" mare="" de="" osd="" (0,6="" g/kg)="" a="" arătat="" o="" diferență="" marcată="" în="" comparație="" cu="" grupul="" cu="" doză="" medie="" (0,3="" g/kg)="" (p="0" 0,019)="" și="" s-a="" observat="" același="" rezultat="" între="" grupuri="" de="" 0,3-g/kg="" și="" 0,15-g/kg="" (p="0,034)," demonstrând="" că="" osd="" ar="" putea="" prelungi="" timpul="" de="" înot="" exhaustiv="" într-o="" manieră="" dependentă="" de="">

image

3.5. Efectul OSD asupra parametrilor biochimici la șoareci după testul de înot cu greutate


După cum a arătat rezultatul testului de înot cu greutate, OSD ar putea prelungi semnificativ timpul de înot exhaustiv al șoarecilor; cu toate acestea, tratamentul OSK nu a arătat o creștere semnificativă a timpului de înot la șoareci. Prin urmare, parametrii biochimici au fost determinați numai pe șoarecii tratați cu OSD.


3.5.1. Efectul OSD asupra BLA, BUN și HG


Diferența de conținut BLA, BUN și HG între grupuri a fost semnificativă (BLA: F (3, 40)=8.257, p <{{1{0}}.{{ 20}}01;="" bun:="" f="" (3,="" 4{0)="8,596," p="">< 0.{{3{{32="" }}}}01;="" hg:="" f="" (3,="" 36)="6,960," p="">< 0.{{4{0}}="" 01).="" după="" cum="" se="" arată="" în="" tabelul="" 3,="" nivelurile="" de="" bla="" și="" bun="" în="" grupurile="" osd="" au="" fost="" semnificativ="" mai="" mici="" decât="" cele="" din="" grupul="" de="" control="" la="" 24="" de="" ore="" după="" testul="" de="" înot="" cu="" greutate="" (bla:="" p="">< 0.05,="" p.="">< 0.05="" și="" p="">< 0,01="" pentru="" 0,15,="" 0,3="" și,="" respectiv,="" 0,6="" g/kg;="" bun:="" p="">< 0,01="" pentru="" 0,15,="" 0,3="" și="" 0,6="" g/kg).="" nivelurile="" de="" hg="" în="" grupurile="" osd="" au="" fost="" semnificativ="" mai="" mari="" în="" comparație="" cu="" grupul="" de="" control="" (p="">< 0,05,="" p="">< 0,01="" și="" p="">< 0,01="" pentru="" 0,15,="" 0,3="" și,="" respectiv,="" 0,6="">


image


3.5.2. Efectul OSD asupra GSH-PX, MDA și SOD


Diferențele dintre SOD, activitățile GSH-PX și echivalentul MDA între grupuri au fost semnificative (MDA: F (3, 40)=8,355, p <0.{{18} }01;="" sod:="" f="" (3,="" 42)="9,876," p="">< 0.0{01;="" gsh-px:="" f="" (="" 3,="" 40)="7.959," p="">< 0.001).="" după="" cum="" se="" arată="" în="" tabelul="" 4,="" echivalentul="" mda="" în="" grupurile="" osd="" a="" fost="" semnificativ="" mai="" mic="" decât="" cel="" al="" grupului="" de="" control="" după="" testul="" de="" înot="" cu="" greutate="" (p="">< 0.01,="" p="">< 0.{="" {45}}1="" și="" p="">< 0.01="" pentru="" 0.15,="" 0,3="" și,="" respectiv,="" 0,6="" g/kg).="" în="" plus,="" nivelurile="" de="" sod="" și="" gsh-px="" în="" grupurile="" osd="" au="" fost="" semnificativ="" mai="" mari="" în="" comparație="" cu="" grupul="" de="" control="" (sod:="" p="">< 0,01,="" p="">< 0,01="" și="" p="">< 0,01;="" gsh-px:="" p="">< 0,05,="" p="">< 0,01="" și="" p="">< 0,01).="" 0,01="" pentru="" 0,15,="" 0,3="" și,="" respectiv,="" 0,6="">


image



4. Discutie


Pastaia imatură de bame este o legumă sănătoasă care este consumată în majoritatea zonelor lumii. Studiile anterioare au raportat că păstăile imature de bame au avut efecte antioxidante și anti-oboseală [25,46], dar constituenții săi activi și mecanismele potențiale nu erau clare. Pentru a investiga activitățile antioxidante și anti-oboseală ale păstăilor de bame, am împărțit păstăile de bame proaspete în semințe și coji și am obținut OSD, OSK și OPD printr-un proces de extracție, apoi activitatea antioxidantă in vitro a OSD, OSK și OPD a fost detectat cu DPPH, FRAP și puterea de reducere, iar efectul anti-oboseală in vivo al OSD, OSK și OPD a fost studiat folosind testul de înot cu greutate. Rezultatele noastre au arătat că OSD nu numai că a avut o activitate antioxidantă bună in vitro, dar a prelungit semnificativ timpul de înot al șoarecilor în comparație cu grupul de control, în timp ce OSK nu a arătat niciun efect în ambele. Timpul exhaustiv de înot este o măsurare directă care reflectă în mod obiectiv rezistența la efort a corpului [47], iar promovarea rezistenței la efort este corelată cu timpi mai lungi de înot. Prin urmare, partea antioxidantă și anti-oboseală a OPD ar trebui dedusă ca semințe. Mai mult, în acest studiu, OSD (0,3{{{10}}, 0,60 g/kg) ar putea prelungi semnificativ timpul de înot la șoareci, iar dozele echivalente umane de semințe de bame ar putea fi de 0,9 ~1,8 g/kg (4,5~8,9 g/kg pentru păstăile de bame) în funcție de suprafața corpului [48]. Aceste doze pot fi atinse printr-o porție umană de legume. Cu toate acestea, constituenții activi ai bamelor sunt încă neclari. Rezultatele analizei chimice din prezentul studiu au arătat că conținutul de polifenoli din OSD este de aproximativ 24 de ori mai mare decât cel din OSK, dar conținutul de polizaharide din OSD este mult mai mic decât cel din OSK (Tabelul 1).


Moreover, total flavonoids content and two compounds of isoquercitrin and quercetin-3-O-gentiobiose were only detected in OSD and were not detected in OSK (Table 1). It has been proven that okra seeds contained epigallocatechin oligomers, catechin, and its oligomers, isoquercitrin, quercetin-3-O-gentiobiose, and other catechin and quercetin derivatives [27–29]. Furthermore, previous studies have reported that polyphenols like catechin and flavonoids like quercetin possess anti-fatigue activity due to their antioxidant activity [35,36,49–51]. Therefore, we deduced that polyphenols and flavonoids of OSD might be the antioxidant and anti-fatigue constituents. As for the reason that the effect of OPD was less than the effect of OSD, it might be that the high content of mucilaginous polysaccharides can affect the assimilation of polyphenols and flavonoids in OPD, which needs to be researched in the future. When it comes to the anti-fatigue mechanism of OSD, an open-field test showed that OSD had no central nerve stimulation in mice, which proved that the anti-fatigue of OSD was not through central excitation. Apart from this, it was likely that OSD possessed a slight sedative effect in high doses (>0.6 g/kg). Sunt necesare mai multe date pentru a demonstra acest lucru, deoarece mica reducere a locomoției ar putea fi, de asemenea, rezultatul unei motivații reduse de a explora sau al unui posibil efect anxiogen. Cu toate acestea, în această cercetare, testul în câmp deschis a fost folosit pentru a exclude posibilitatea ca OSD să desfășoare activitate anti-oboseală printr-un efect excitator asupra sistemului nervos central și nu au fost prezentate mai multe date pentru a demonstra efectul sedativ al OSD. Mai mult, s-a dovedit că speciile de oxid reactiv excesive (ROS) produse în timpul exercițiilor fizice sunt componenta majoră a oboselii fizice. ROS excesiv poate afecta diferitele procese metabolice și enzimatice atacând acizii grași polinesaturați pentru a produce MDA și pentru a duce la disfuncția biofilmelor [13,52].


Din acest motiv, ROS nu numai că afectează activitatea enzimatică în timpul proceselor de alimentare cu energie și de cuplare excitație-contracție în mod direct, dar accelerează și acumularea de deșeuri, inclusiv BLA și BUN. Mai mult, creșterea nivelului de BLA este o cauză importantă a oboselii din cauza scăderii pH-ului în țesuturi, iar un conținut mai mare de BUN indică o rezistență mai mică la efort. Prin urmare, ar putea nu numai să îmbunătățească rezistența la efort, ci și să atenueze oboseala fizică și să promoveze recuperarea prin promovarea activității sistemelor antioxidante enzimatice, inclusiv SOD și GSH-PX, sau să suplimenteze direct antioxidanții. În studiul de față, determinarea parametrilor biochimici care a fost efectuată la 24 de ore după testul de înot indică că tratamentul OSD a scăzut semnificativ nivelurile de BLA și BUN în sânge, MDA în ficat și a crescut nivelurile de HG, SOD și GSH în ficat în timpul recuperării oboselii, ceea ce a demonstrat că OSD ar putea atenua oboseala fizică și ar putea promova recuperarea. Având în vedere rezultatele testelor antioxidante in vitro în cercetările noastre, s-ar putea deduce că OSD a jucat efectul anti-oboseală nu numai prin eliminarea radicalilor liberi în mod direct, ci și prin promovarea activităților enzimelor antioxidante, inclusiv SOD și GSH-PX.


23

Faceți clic pe imagine pentru Cistanche Uk pentru anti-oboseală

5. Concluzii


În concluzie, studiul de față a indicat că OSD este partea anti-oboseală a bame, iar polifenolii și flavonoidele ar putea fi constituenții activi ai OSD datorită activității lor antioxidante. Totuși, oboseala este un fenomen complex, iar studiul de față asupra mecanismelor anti-oboseală ale bamelor este foarte preliminar. Mai multe detalii trebuie să fie clarificate în viitor.



Referințe


1. Chaudhuri, A.; Behan, PO Oboseala în tulburările neurologice. Lancet 2004, 363, 978–988. [CrossRef]

2. Belluardo, N.; Westerblad, H.; Mudó, G.; Casabona, A.; Bruton, J.; Caniglia, G.; Pastoris, O.; Grassi, F.; Ibáñez, CF Dezasamblarea joncțiunii neuromusculare și oboseala musculară la șoarecii lipsiți de neurotrofină-4. Mol. Celulă. Neurosci. 2001, 18, 56–67. [CrossRef] [PubMed]

3. Tharakan, B.; Dhanasekaran, M.; Brown-Borg, HM; Manyam, BV Trichopus zeylanicus combate oboseala fără activitate amfetamino-mimetică. Phytother. Res. PTR 2006, 20, 165–168. [CrossRef] [PubMed]

4. Huang, L.-Z.; Huang, B.-K.; Da, Q.; Qin, L.-P. Fracționare ghidată de bioactivitate pentru proprietatea anti-oboseală a acanthopanax senticosus. J. Etnofarmacol. 2011, 133, 213–219. [CrossRef] [PubMed]

5. Pawlikowska, T.; Chalder, T.; Hirsch, SR; Wallace, P.; Wright, DJ; Wessely, SC Studiu bazat pe populație al oboselii și stresului psihologic. BMJ 1994, 308, 763–766. [CrossRef] [PubMed]

6. Li, G. The Fatigue Situation of 2823 Healthy People to Check-up and its Corelation with Physical Indicators; Universitatea de Medicină Chineză din Beijing: Beijing, China, 2013.

7. Uehata, T. Karoshi, moartea prin surmenaj. Nippon Rinsho Jpn. J. Clin. Med. 2005, 63, 1249–1253.

8. Layzer, RB Metabolismul muscular în timpul oboselii și muncii. Bailliere's Clin. Endocrinol. Metab. 1990, 4, 441–459. [CrossRef]

9. Hultman, E.; Bergstrom, M.; Spriet, LL; Söderlund, K. Energy Metabolism and Fatigue; Cinetica umană: Champaign, IL, SUA, 1990.

10. Glaister, M. Munca de sprint multiplu: răspunsuri fiziologice, mecanisme de oboseală și influența fitnessului aerobic. Sports Med. 2005, 35, 757–777. [CrossRef] [PubMed]

11. Nozaki, S.; Mizuma, H.; Tanaka, M.; Jin, G.; Tahara, T.; Mizuno, K.; Yamato, M.; Okuyama, K.; Eguchi, A.; Akimoto, K.; et al. Disulfura de tiamină tetrahidrofuran îmbunătățește metabolismul energetic și performanța fizică în timpul încărcării de oboseală fizică la șobolani. Nutr. Res. 2009, 29, 867–872. [CrossRef] [PubMed]

12. McCully, KK; Authier, B.; Olive, J.; Clark, BJ, al 3-lea. Oboseala musculara: Rolul metabolismului. Poate sa. J. Apl. Physiol. 2002, 27, 70–82. [CrossRef] [PubMed]

13. Carter, GT Oboseală. În Encyclopedia of the Neurological Sciences, ed. a II-a; Aminoff, MJ, Daroff, RB, Eds.; Academic Press: Oxford, Marea Britanie, 2014; p. 276–280.

14. Filler, K.; Lyon, D.; Bennett, J.; McCain, N.; Elswick, R.; Lukkahatai, N.; Saligan, Asociația LN de disfuncție și oboseală mitocondrială: o revizuire a literaturii. BBA Clin. 2014, 1, 12–23. [CrossRef] [PubMed]

15. Lin, Y.; Liu, H.-L.; Fang, J.; Yu, C.-H.; Xiong, Y.-K.; Yuan, K. Efectele anti-oboseală și vasoprotectoare ale quercetinei-3-O-gentiobiozei asupra stresului oxidativ și a disfuncției endoteliale vasculare induse de înotul de rezistență la șobolani. Food Chim. Toxicol. 2014, 68, 290–296. [CrossRef] [PubMed]

16. Edwards, RH Funcția musculară umană și oboseala. Ciba Găsit. Symp. 1981, 82, 1–18. [PubMed]

17. Gupta, A.; Vij, G.; Sharma, S.; Tirkey, N.; Rishi, P.; Chopra, K. Curcumin, un antioxidant polifenolic, atenuează sindromul de oboseală cronică în modelul de stres murin prin imersie în apă. Imunobiologie 2009, 214, 33–39. [CrossRef] [PubMed]

18. Wu, CY; Chen, R.; Wang, XS; Shen, B.; Yue, W.; Wu, Q. Activități antioxidante și anti-oboseală ale extractului fenolic din învelișul semințelor de Euryale Ferox salisb. Și identificarea a trei compuși fenolici prin lc-esi-ms/ms. Molecule 2013, 18, 11003–11021. [CrossRef] [PubMed]

19. Jiang, D.-Q.; Guo, Y.; Xu, D.-H.; Huang, Y.-S.; Yuan, K.; Lv, Z.-Q. Efectele antioxidante și anti-oboseală ale antocianilor de purificare a sucului de dud (MJP) și purificarea tescovinului de dud (MMP) din diferite soiuri de fructe de dud din China. Food Chim. Toxicol. 2013, 59, 1–7. [CrossRef] [PubMed]

20. Swamy, MSL; Naveen, S.; Singsit, D.; Naika, M.; Khanum, F. Efectele anti-oboseală ale polifenolilor extrași din coaja de rodie. Int. J. Integr. Biol. 2011, 11, 69–72.

21. Messing, J.; Thole, C.; Niehues, M.; Shevtsova, A.; Glocker, E.; Boren, T.; Hensel, A. Proprietăți antiadezive ale extractului de fructe imature de Abelmoschus esculentus (Okra) împotriva aderenței Helicobacter pylori. PLoS ONE 2014, 9, e84836. [CrossRef] [PubMed]

22. Tongjaroenbuangam, W.; Ruksee, N.; Chantiratikul, P.; Pakdeenarong, N.; Kongbuntad, W.; Govitrapong, P. Efectele neuroprotective ale quercetinei, rutinei și bame (Abelmoschus esculentus Linn.) la șoarecii tratați cu dexametazonă. Neurochema. Int. 2011, 59, 677–685. [CrossRef] [PubMed]

23. Fan, S.; Zhang, Y.; Soare, Q.; Yu, L.; Li, M.; Zheng, B.; Wu, X.; Yang, B.; Li, Y.; Huang, C. Extract of Okra scade glicemia și lipidele serice la șoarecii obezi C57Bl/6 induși de dieta bogată în grăsimi. J. Nutr. Biochim. 2014, 25, 702–709. [CrossRef] [PubMed]

24. Wang, H.; Chen, G.; Ren, D.; Yang, ST Activitatea hipopolipidemică a bamelor este mediată prin inhibarea lipogenezei și reglarea în creștere a degradării colesterolului. Phytother. Res. PTR 2014, 28, 268–273. [CrossRef] [PubMed]

25. Hu, L.; Yu, W.; Li, Y.; Prasad, N.; Tang, Z. Activitatea antioxidantă a extractului și a constituenților săi majori din semințe de bame pe hepatocite de șobolan rănite de tetraclorura de carbon. BioMed Res. Int. 2014, 2014, 341291. [CrossRef] [PubMed]

26. Yang, Y.; Jin, Z.; Mao, P.; Jin, J.; Huang, J.; Yang, M. Studiu asupra efectului anti-oboseală al extractelor de bame. Bărbie. J. Mod. apli. Farmacia. 2012, 29, 4. [CrossRef]

27. Arapitsas, P. Identificarea și cuantificarea compușilor polifenolici din semințe și coji de bame. Food Chim. 2008, 110, 1041–1045. [CrossRef] [PubMed].

28. Sengkhamparn, N.; Sagis, LMC; de Vries, R.; Schols, HA; Sajjaanantakul, T.; Voragen, AGJ Proprietăți fizico-chimice ale pectinelor din bame (Abelmoschus esculentus (L.) Moench). Hydrocoll alimentar. 2010, 24, 35–41. [CrossRef]

29. Karakoltsidis, PA; Constantinides, SM Semințe de bame: O nouă sursă de proteine. J. Agric. Food Chim. 1975, 23, 1204–1207. [CrossRef] [PubMed]

30. Zhou, Y.; Jia, X.; Shi, J.; Xu, Y.; Jing, L.; Jia, L. Două noi triterpene pentaciclice din Abelmoschus esculentus. Helv. Chim. Acta 2013, 96, 533–537. [CrossRef]

31. Jia, L.; Zhong, LJ; Li, HF; Jing, LL Constituenți chimici din fracția de apă a Abelmoschus esculentus. Bărbie. Tradit. Iarbă. Droguri 2011, 42, 2186–2188.

32. Jia, L.; Guo, M.; Li, D.; Jing, L. Constituenți chimici din porțiunea de eter de petrol din Abelmoschus esculentus II. Zhongguo Zhong Yao Zazhi 2011, 36, 891–895. [CrossRef] [PubMed]

33. Jia, L.; Li, HF; Jing, LL Constituenți chimici din extractul de N-butanol din Abelmoschus esculentus L. Chin. Tradit. Iarbă. Droguri 2010, 41, 1771–1773.

34. Jia, L.; Li, D.; Jing, LL; Guo, MM Studii asupra constituenților chimici din porțiunea de eter de petrol din Abelmoschus esculentus. J. Chin. Med. Mater. 2010, 33, 1262–1265.

35. Kobori, M.; Takahashi, Y.; Akimoto, Y.; Sakurai, M.; Matsunaga, I.; Nishimura, H.; Ippoushi, K.; Oike, H.; Ohnishi-Kameyama, M. Aportul cronic mare de quercetină reduce stresul oxidativ și induce expresia enzimelor antioxidante în ficat și țesuturile adipoase viscerale la șoareci. J. Funct. Alimente 2015, 15, 551–560. [CrossRef]

36. Nogueira, L.; Ramirez-Sanchez, I.; Perkins, GA; Murphy, A.; Taub, PR; Ceballos, G.; Villarreal, FJ; Hogan, MC; Malek, MH (-)-epicatechina îmbunătățește rezistența la oboseală și capacitatea oxidativă a mușchilor de șoarece. J. Physiol. 2011, 589, 4615–4631. [CrossRef] [PubMed] .

37. Comitetul de actualizare a Ghidului pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator. Ghid pentru îngrijirea și folosirea animalelor de laborator, ed. a VIII-a; The National Academies Press: Washington, DC, SUA, 2011.

38. Liao, H.; Dong, W.; Shi, X.; Liu, H.; Yuan, K. Analiza și compararea componentelor active și a activităților antioxidante ale extractelor din Abelmoschus esculentus L. Pharmacogn. Mag. 2012, 8, 156–161. [PubMed]

39. Zhu, Z.; Li, N. Studiu privind metoda de determinare a conținutului polizaharidei de bame. Jiangsu Agric. Sci. 2012, 40, 2. [CrossRef]

40. DuBois, M.; Gilles, KA; Hamilton, JK; Rebers, PA; Smith, F. Metoda colorimetrică pentru determinarea zaharurilor și a substanțelor înrudite. Anal. Chim. 1956, 28, 350–356. [CrossRef]

41. Luo, J.; Li, L.; Kong, L. Separarea preparativă a gliceridelor fenilpropanoide din bulbii de Lilium lancifolium prin cromatografie în contracurent de mare viteză și evaluarea activităților lor antioxidante. Food Chim. 2012, 131, 1056–1062. [CrossRef]

42. Dang, H.; Chen, Y.; Liu, X.; Wang, Q.; Wang, L.; Jia, W.; Wang, Y. Nucleul de pat al striei terminale: anatomie, fiziologie, funcții nucleu de pat. Prog. Neuro-Psihofarmacol. Biol. Psihiatrie 2009, 33, 1417–1424. [CrossRef] [PubMed]

43. Wang, Q.; Mai, WL; Li, YH; Chen, SG; Wang, LW; Feng, ZQ; Zhu, YF; Liu, XM Înființarea unui sistem de procesare a imaginilor bazat pe computer pentru activitatea locomotorie a animalelor și verificarea sedativă prin pulbere de kaixin. Bărbie. Tradit. Iarbă. Droguri 2009, 40, 1773–1779.

44. Qi, B.; Liu, L.; Zhang, H.; Zhou, G.-X.; Wang, S.; Duan, X.-Z.; Bai, X.-Y.; Wang, S.-M.; Zhao, D.-Q. Efectele anti-oboseală ale proteinelor izolate din Panax quinquefolium. J. Etnofarmacol. 2014, 153, 430–434. [CrossRef] [PubMed]

45. Tan, W.; Yu, KQ; Liu, YY; Ouyang, MZ; Yan, MH; Luo, R.; Zhao, XS Activitatea anti-oboseală a polizaharidelor extrase din radix Rehmannia preparata. Int. J. Biol. Macromol. 2012, 50, 59–62. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Wang, J.; Zhou, J.; Tang, G. Un studiu asupra efectului anti-oboselii de bame. Bărbie. J. Mod. apli. Farmacia. 2003, 20, 2. [CrossRef]

47. Contarteze, RV; Manchado Fde, B.; Gobatto, CA; de Mello, MA Biomarkeri de stres la șobolani supuși la exerciții de înot și alergare pe bandă de alergare. Comp. Biochim. Physiol. A Mol. Integr. Physiol. 2008, 151, 415–422. [CrossRef] [PubMed]

48. Xu, SY Metodologia experimentală a farmacologiei; Editura Medicală Populară: Beijing, China, 2002.

49. Zanwar, AA; Badole, SL; Shende, PS; Hegde, MV; Bodhankar, SL Rolul antioxidant al catechinei în sănătate și boală. În polifenoli în sănătatea umană și boli; Watson, RR, Preedy, VR, Eds.; Presa academică: San Diego, CA, SUA, 2014; p. 267–271.

50. Jadhav, SB; Singhal, conjugat RS Laccază-gumă arabică pentru prepararea oligomerului de catechine solubil în apă cu activitate antioxidantă îmbunătățită. Food Chim. 2014, 150, 9–16. [CrossRef] [PubMed]

51. Liudong, F.; Feng, Z.; Daoxing, S.; Xiufang, Q.; Xiaolong, F.; Haipeng, L. Evaluarea proprietăților antioxidante și a efectului anti-oboseală al polifenolilor din ceaiul verde. Sci. Res. Eseuri 2011, 6, 2624–2629.

52. Tu, L.; Zhao, M.; Regenstein, JM; Ren, J. Activitatea antioxidantă in vitro și efectul anti-oboseală in vivo al peptidelor loach (misgurnus anguillicaudatus) preparate prin digestia cu papaină. Food Chim. 2011, 124, 188–194. [CrossRef]


S-ar putea sa-ti placa si