Efectele diabetului zaharat asupra funcției sexuale, a histomorfologiei și a expresiei actinei musculare mușchi în corpul cavernos al penisului la șobolani
Mar 05, 2025
Abstract:
Obiectiv:Să observeFuncția sexuală a diabetuluiModelează șobolani și explorează posibilul mecanism de disfuncție sexuală secundară cauzată de hiperglicemie.
MetodeȘobolanii experimentali au fost împărțiți aleatoriu în grupul gol (n =5) șiGrupul de diabet(n =15). După ce modelul animal de diabet a fost construit cu succes, a fost evaluată funcția sexuală a două grupuri. Au fost observate caracteristicile histologice ale testiculelor în două grupuri. S -a măsurat expresia actinei musculare mușchi (-sma) în țesutul penisului din două grupuri. Rezultate Nivelurile de hormoni sexuali serici au fost scăzute semnificativ (P<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
ConcluzieScăderea nivelului de hormoni sexuali, scăderea numărului de celule musculare netede în corpul cavernos al penisului, a scăderii expresiei -sma în corpul cavernos al penisului, structura dezordonată a țesutului interstițial al testiculelor, modificările morfologice ale celulelor musculare netede și a agravării fibrozei la șobolanii diabetului sunt caracteristici fenotipice importante ale acestei boli. Explorarea diagnosticului și tratamentului acestei boli cu această caracteristică fenotipică va avea o semnificație mare.
Cuvinte cheie:Diabet zaharat;disfuncție erectilă; Funcția sexuală; hormon sexual; - Expresie netedă a actinei musculare
Suplimente de cistanie din plante pentru disfuncții erectile cauzate de diabet
Diabet zaharat (DM)a fost mult timp un punct focal de atenție atât pe plan intern, cât și internațional, datorită incidenței și prevalenței sale ridicate [1]. Diferitele complicații induse de DM au impact semnificativ asupra calității vieții pacienților. Printre acestea, incidențadisfuncție erectilă (ed)la masculinPacienți cu DMeste semnificativ ridicat. În prezent, DM a devenit un grup cu risc ridicat pentru ED [2–3]. Prin urmare, efectuarea de studii aprofundate asupraED indusă de DM (DMED)are o semnificație mare. Acest studiu își propune să observe efectele DM asupra funcției erectile, a hormonilor sexuali, a nivelurilor de expresie ale actinei musculare mușchi ( -SMA) în corpul cavernos al penisului și morfologia interstițialului testicular șiMușchiul neted cavernos penisțesuturi la șobolani, care explorează preliminar baza potențială patologică a ED indusă de DM.
1 materiale și metode
1.1 Animale și reactivi experimentali
Au fost selectați douăzeci de șobolani masculi SPF adulți cu greutate corporală uniformă. Principalii reactivi experimentali au inclus streptozotocină (STZ) și apomorfină (APO), precum și anticorpi necesari pentru detectarea expresiei -SMA. Acest studiu a fost aprobat de Comitetul pentru bunăstare și etică a animalelor din Spitalul Dongzhimen, Universitatea din Beijing din Medicina Chineză (nr. 17-04).
1.2 Metode experimentale
1.2.1 Stabilirea unui model de șobolan diabetic
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16,7 mmol/L în orice moment după 5 zile de injecție intraperitoneală STZ au fost considerate standardul pentru stabilirea de succes a modelului DM [4].
1.2.2 Test de funcții erectile la șobolani
După confirmarea modelării de succes a DM, șobolanii au fost cântăriți și plasați într -o cutie de sticlă transparentă. Solventul APO (100 ug/kg) a fost injectat subcutanat în spatele gâtului pe baza greutății corporale. Mediul înconjurător a fost liniștit, iar iluminatul interior a fost ajustat la un nivel suficient pentru observarea erecției penisului la șobolani. Numărul de erecții de penis în termen de 30 de minute de la injecția subcutanată a fost observat și înregistrat. Criterii pentru erecția penisului: mărirea penisului, retragerea preputului, expunerea glandurilor însoțite de hiperemie și roșeață și vizibilitatea segmentelor mijlocii și inferioare ale penisului.
1.2.3 Măsurarea hormonilor sexuali la șobolani
Nivelurile de hormoni sexuali serici ai celor două grupuri au fost măsurate folosind metoda radioimuno -test, urmând procedurile specifice prezentate în instrucțiunile kitului radioimuno -test.
1.2.4 Observarea histopatologică a țesutului interstițial testicular
După colectarea sângelui din aorta abdominală a șobolanilor, testiculul drept a fost extras uniform. Testiculul a fost spălat cu tampon PBS și complet fixat în paraformaldehidă timp de 72 de ore. Țesutul a fost încorporat în parafină, secționat, colorat cu hematoxilină-eozină (H&E) și observat pentru caracteristici histologice.
1.2.5 Observarea fibrozei cavernoase a penisului la șobolani
După colectarea sângelui din aorta abdominală, țesutul penisului a fost excizat și spălat cu tampon PBS. Țesutul a fost complet fixat în paraformaldehidă timp de 72 de ore, încorporat în parafină, secționat și colorat cu tricromul lui Masson. Conținutul relativ al fibrelor netede de mușchi/colagen din țesutul cavernos penis al fiecărui grup a fost observat la microscop.
1.2.6 Măsurarea nivelului de expresie -SMA în țesutul cavernos penis
Țesutul cavernos penis a fost supus unei deparafinizări de rutină la apă, spălată cu tampon PBS timp de 5 minute și supusă reparației căldurii cu microunde în tampon de citrat (pH 6. 0) timp de 20 de minute. După răcirea la temperatura camerei, țesutul a fost spălat de trei ori cu PBS, 3 minute de fiecare dată. O soluție de peroxid de hidrogen de 3% a fost aplicată într -o cameră întunecată la temperatura camerei timp de 15 minute, urmată de spălarea PBS. -A fost adăugat apoi anticorpul SMA, iar țesutul a fost incubat peste noapte la 4 grade. După revenirea la temperatura camerei, țesutul a fost spălat cu PBS, incubat cu un anticorp secundar la 37 de grade timp de 30 de minute și spălat din nou cu PBS. DAB a fost aplicat pentru dezvoltarea culorilor în întuneric, iar reacția a fost încheiată cu apă. PBS a fost utilizat ca înlocuitor pentru anticorpul primar ca un control negativ, iar analiza cantitativă a fost realizată cu un analizor de imagini.
1.3 Metode statistice
Datele colectate în acest studiu au fost organizate folosind Microsoft Excel și apoi analizate folosind SPSS 25. 0 pentru testarea statistică. Datele fiecărui grup sunt exprimate ca medie ± abatere standard (X̄ ± S). O valoare p mai mică de 0. 0 5 (p <0.05) a fost considerată semnificativă statistic.
2 rezultate
2.1 Comparația greutății corporale și a modificărilor glicemiei între cele două grupuri
Consultați tabelul 1.
2.2 Comparația ratelor de erecție a penisului între cele două grupuri
Consultați tabelul 2.
2.3 Comparația nivelurilor de hormoni sexuali serici între cele două grupuri
Consultați tabelul 3.
2.4 Observarea patologică a țesutului interstițial testicular între cele două grupuri
Țesutul interstițial testicular al grupului de control a apărut normal. Celulele interstițiale aveau o formă rotundă sau ovală, cu morfologie regulată, distanțare intercelulară normală, aranjament ordonat și nici o reducere semnificativă a numărului de celule. În schimb, grupul diabetic a arătat edem interstițial testicular, morfologie neregulată a celulelor, spații intercelulare libere, aranjament dezordonat, structuri intracelulare perturbate și semne de dediferențiere în unele celule, pierzând caracteristici structurale. Consultați figura 1.
| Grup | Mărimea eșantionului (N) | Greutatea corporală de bază (G) | Greutate corporală la 5 zile după modelare (G) | Glicemie la 5 zile după modelare (MMOL/L) | Greutate corporală înainte de sacrificiu (G) | Glicemie înainte de sacrificiu (Mmol/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Grupul de diabet | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Grup de control | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Nota: În comparație cu grupul de control,P <0. 01.
Tabelul 2: Comparația ratelor de erecție a penisului între două grupuri
| Grup | Mărimea eșantionului (N) | Cazuri pozitive în testul de erecție (N) | Rata de erecție (%) |
|---|---|---|---|
| Grupul de diabet | 15 | 5 | 33.3** |
| Grup de control | 5 | 4 | 80.0 |
Nota: În comparație cu grupul de control,P <0. 01.
Tabelul 3: Comparația nivelurilor de hormoni sexuali serici între două grupuri (X̄ ± S)
| Grup | Mărimea eșantionului (N) | T (nmol-l⁻¹) | Fsh (iu · l⁻¹) | Lh (ng · l⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Grupul de diabet | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Grup de control | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Nota: În comparație cu grupul de control,P <0. 01.
2.4 Observarea patologică a țesutului interstițial testicular între două grupuri
În grupul de control, țesutul interstițial testicular a apărut normal, celulele interstițiale fiind în formă rotundă sau ovală, prezentând morfologie regulată, spații intercelulare normale și aranjament ordonat. Numărul de celule nu a arătat nicio reducere semnificativă. În comparație cu grupul de control, grupul diabetic a prezentat edem interstițial testicular, celule în formă neregulată, spații intercelulare libere, aranjament dezordonat, structuri intracelulare perturbate și semne de dediferențiere în unele celule, pierzându -și caracteristicile structurale. Consultați figura 1.
2.5 Observarea fibrozei cavernoase a penisului între două grupuri
Colorarea lui Masson a fost folosită pentru a observa diferențele în gradul de fibroză în țesutul cavernos penis dintre cele două grupuri. În grupul diabetic, proporția de fibre de colagen a fost semnificativ mai mare, cu o creștere a conținutului relativ, în timp ce proporția de celule musculare netede a fost mai mică, cu o scădere a conținutului relativ. Consultați figura 2.
Figura 1 El colorarea rezultatelor testiculelor în două grupuri (× 10, n=3)
Figura 2 Rezultatele colorației Masson ale Corpora cavernosa în două grupuri (× 4, n=3)
2.6 Expresia -sma în celulele musculare netede Corpus cavernosum în două grupuri
Imunohistochimia a fost utilizată pentru a detecta expresia -sma în cele două grupuri. În comparație cu grupul gol, partea colorată de galben -maro în grupul diabetic a fost redusă semnificativ, adică expresia celulară pozitivă a -sma în grupul diabetic a fost semnificativ redusă. Vezi Figura 3.
Fig. 3 Rezultatele imunohistochimiei Corpus Cavernosum în două grupuri (× 10, n=3)
