Rolurile emergente ale cloroplastelor epidermice mobile în imunitatea plantelor

Abstract:

Epiderma plantei conține cloroplaste mici atipice. Cu toate acestea, rolul fiziologic al acestui organel este neclar în comparație cu cel al cloroplastelor mezofile mari, a căror funcție binecunoscută este fotosinteza. Deși cunoștințele despre implicarea cloroplastelor în imunitatea plantelor au fost extinse până în prezent, diferențele dintre cloroplastele epidermice și cele mezofile depășesc scopul acestui studiu. Având în vedere rolul epidermei plantei ca o barieră în fața stresului de mediu, inclusiv atacurile patogenilor, și funcția legată de imunitate a cloroplastelor, cercetarea apărării plantelor asupra cloroplastelor epidermice este un domeniu în curs de dezvoltare. Studii recente au relevat mișcările dinamice ale cloroplastelor epidermice ca răspuns la agenții patogeni fungici și oomiceți. În plus, au fost raportate proteine ​​epidermice asociate cu cloroplaste și evenimente celulare care sunt strâns legate de rezistența epidermică împotriva agenților patogeni. În această recenzie, m-am concentrat asupra progresului recent în imunitatea plantelor mediată de cloroplaste epidermice.

Cuvinte cheie: cloroplast epidermic; mișcarea cloroplastului; stromule; agent patogen pentru plante; penetrare; rezistență non-gazdă; apărare preinvazivă; Arabidopsis thaliana; Nicotiana benthamiana; CHUP1.

Imunitatea plantelor și imunitatea umană sunt două mecanisme de apărare diferite și există diferențe evidente:

1. Diferiți agenți patogeni împotriva cărora să luptăm: plantele rezistă în principal agenților patogeni biologici, cum ar fi bacteriile, ciupercile și virușii, în timp ce imunitatea umană rezistă în principal bacteriilor și virușilor.

2. Diferite metode de răspuns imun: imunitatea plantelor se apără în principal împotriva agenților patogeni prin izolarea fizică, inhibarea chimică și reglarea genelor, în timp ce imunitatea umană rezistă în principal agenților patogeni prin macrofage, celule T și celule B.

3. Specificitate imună diferită: Imunitatea plantelor adoptă aceeași metodă de apărare împotriva tuturor agenților patogeni, adică imunitatea nespecifică, în timp ce imunitatea umană este specifică, capabilă să recunoască și să producă răspunsuri imune corespunzătoare împotriva agenților patogeni specifici.

4. Memorie imună diferită: Plantele nu au capacitatea de memorie imună, adică odată ce au rezistat unui anumit agent patogen, tot trebuie să repornească răspunsul imun data viitoare când se confruntă cu același agent patogen. Sistemul imunitar uman are capacitatea memoriei imune, adică după ce rezistă unui agent patogen, va avea o memorie imunitară pe termen lung pentru acest agent patogen, iar data viitoare când va întâlni din nou același agent patogen, poate genera rapid un răspuns imun. , controlând astfel eficient agentul patogen Infect. Deci, în comparație, imunitatea noastră umană este, de asemenea, foarte importantă. Trebuie să ne concentrăm pe îmbunătățirea imunității noastre. Cistanche deserticola o poate face. Polizaharidele din carne pot regla răspunsul imun al sistemului imunitar uman și pot îmbunătăți capacitatea de stres a celulelor imunitare. , Îmbunătățește efectul bactericid al celulelor imune.

Click cistanche deserticola supliment

1. Introducere

Epiderma organismelor multicelulare, inclusiv plantele, acționează ca o barieră pentru a proteja împotriva unei varietăți de stres, cum ar fi modificările mediului extern și atacurile patogenilor. Din perspectiva agenților patogeni, străpungerea celulelor epidermice ale plantei este un prim pas esențial în invazie; în special, agenții patogeni fungici și oomiceți trebuie să pătrundă direct în epiderma plantei și să dezvolte hife invazive în interior pentru o infecție cu succes. De exemplu, ciupercile antracnoze Colletotrichum și ciuperca de orez Pyricularia oryzae (sin. Magnaporthe oryzae) formează o celulă melanizată în formă de cupolă numită appressorium pe suprafața plantei pentru a dezvolta un șurub de penetrare în epiderma plantelor gazdă, urmat de invaziv. extensia hifelor și izbucnirea bolii distructive [1].

Cu toate acestea, dacă planta nu este gazdă, acești agenți patogeni fungici pot forma appressorium melanizat, dar nu pot pătrunde în celula epidermică din cauza rezistenței pre-invazive nongazdă (NHR) a plantelor, care oferă, în general, imunitate durabilă, robustă și cu spectru larg și previne eficient. invazia unui număr mare de ciuperci și oomicete neadaptate în interacțiuni incompatibile [2,3]. În modelul de plantă brassicacee Arabidopsis thaliana, s-a raportat că multe căi și componente imune susțin desfășurarea NHR epidermică într-o manieră multistratificată împotriva pătrunderii agenților patogeni fungici și oomiceți neadaptați, cum ar fi Blumeria graminis f. sp. hordei [4–12], Colletotrichum tropicale [13–16], P. oryzae [17–22] și Phytophthora infestans [6,7]. Cu toate acestea, o înțelegere completă a bazei moleculare a NHR preinvazive rămâne evazivă. Pentru a obține o înțelegere cuprinzătoare a NHR, este important să se identifice evenimente și componente necunoscute legate de imunitate din epiderma plantei.

În plantele superioare, cu excepția unor plante, cum ar fi tutunul, s-a crezut mult timp că nu există cloroplaste în celulele epidermice, altele decât celulele de gardă [23-26]. Cele mai multe studii asupra cloroplastelor se concentrează pe celulele mezofile, unde numeroase cloroplaste mari tipice sunt foarte diferențiate pentru fotosinteză [27-29]. Cu toate acestea, cloroplaste mici atipice care conțin clorofilă au fost observate și în celulele pavajului epidermic ale A. thaliana, deși tilacoizii, care sunt responsabili pentru reacțiile de fotosinteză dependente de lumină, sunt slab dezvoltați [30-36]. Prin urmare, rolul fiziologic al cloroplastelor epidermice este un subiect emergent în domeniul științei plantelor.

Se știe că cloroplastele funcționează ca senzori de mediu împotriva stresului biotic și abiotic multiple [37,38]. De exemplu, pentru răspunsurile imune ale plantelor împotriva agenților patogeni, mesagerii secundari, cum ar fi speciile reactive de oxigen (ROS) și calciul (Ca2 plus), și precursorii fitohormonilor, cum ar fi acidul salicilic (SA), acidul iasmonic și acidul abscisic, sunt toate derivate din cloroplaste [39–42]. Există multe recenzii excelente cu privire la rolul cloroplastelor în imunitatea plantelor. Trimit cititorii la recenzii recente, care vor oferi o privire de ansamblu asupra răspunsurilor de apărare a plantelor legate de cloroplaste [43–47].

Cu toate acestea, există foarte puține studii de apărare a plantelor care se concentrează pe cloroplastele epidermice, iar diferențele funcționale dintre cloroplastele epidermice și cele mezofile din sistemul imunitar al plantelor nu au atras prea multă atenție. Recent, unele rapoarte au demonstrat implicarea cloroplastelor epidermice în imunitatea plantelor. În această revizuire, accentul principal este pus pe cloroplastele epidermice și au fost descrise progresele recente în imunitatea epidermică a plantelor.

2. Răspunsul epidermic la cloroplast controlează intrarea agenților patogeni fungici în A. thaliana

2.1. Mișcările intracelulare ale cloroplastelor epidermice ca răspuns la agenții patogeni fungici la A. thaliana

În starea de echilibru a A. thaliana, cloroplastele epidermice nu se observă în apropierea peretelui periclinal superior (suprafața) celulelor pavajului, deoarece acestea sunt de obicei poziționate la pereții periclinali inferiori (inferioare) și anticlinali. Într-un raport recent, am descoperit că cloroplastele epidermice au apărut pe suprafața celulelor pavajului ca răspuns la ciupercile Colletotrichum cu formare de appressorium melanizat și am numit acest fenomen răspunsul cloroplastului epidermic (ECR) (Figura 1) [48].

Interestingly, ECR occurs more strongly against nonadapted fungi such as the Japanese flowering cherry pathogen Colletotrichum nymphaea PL1-1-b, the cosmos pathogen Colletotrichum fioriniae CC1, and the apple pathogen Colletotrichum siamense MAF1, compared to the adapted Brassicaceae pathogen Colletotrichum higginsianum Abr1-5, which readily penetrates and infects wild-type plants of A. thaliana [48]. Furthermore, the frequency of ECR varies according to the nonadapted fungal strains; the order of ECR-inducing ability in the wild-type plant is as follows: C. nymphaea PL1-1-B > C. fioriniae CC1 > C. siamense MAF1, while two other nonadapted strains, hau tree pathogen C. siamense COC4, and cucurbit pathogen Colletotrichum orbiculare 104-T, do not trigger ECR in the wild-type plant [48]. Importantly, C. siamense COC4 and C. orbiculare 104-T sufficiently induce ECR in plants with a mutation in the PEN2 gene [48], which encodes an atypical myrosinase that works as a core preinvasive NHR contributor against many fungal and oomycete pathogens [6,9,13,17,48–50], although these two nonadapted pathogens cannot invade pen2 mutants. The frequencies of ECR in the pen2 mutant against C. fioriniae CC1 and C. siamense MAF1 are also higher than those in the wild-type plant, whereas other single mutants of immune-related genes such as EDR1, GSH1 EDS5, and CAS have little effect on ECR [48]. These results suggest that ECR is preferentially activated when PEN2-based antifungal preinvasive defense becomes ineffective in epidermal cells. Similarly, in penetration tests on multiple Arabidopsis mutants with many immune-related mutations, these five nonadapted Colletotrichum strains displayed the differential abilities to overcome preinvasive NHR in the same order as the ECR-inducing ability; C. nymphaea PL1-1-B and C. fioriniae CC1 can invade the epidermis of the wild-type plant to some degree and more of the pen2 mutant, whereas C. siamense MAF1, COC4, and C. orbiculare 104-T can break through the epidermal NHR only in the presence of pen2 mutation or with additional mutations such as edr1, gsh1, eds5, and cas (Figure 2, Redrawn from [51]) [48,51]. Thus, there is a tight link between ECR induction in plants and the invasion ability of the nonadapted Colletotrichum fungi, which implies the involvement of ECR in epidermal preinvasive NHR, because these fungal pathogens are incompatible with and definitely cannot infect A. thaliana. The contribution of ECR to preinvasive NHR is described in a later section. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, x FOR PEER REVIEW 3 of 17 readily penetrates and infects wild-type plants of A. thaliana [48]. Furthermore, the frequency of ECR varies according to the nonadapted fungal strains; the order of ECR-inducing ability in the wild-type plant is as follows: C. nymphaea PL1-1-B > C. fioriniae CC1 >C. siamense MAF1, în timp ce alte două tulpini neadaptate, patogenul arborelui hau C. siamense COC4 și patogenul cucurbițelor Colletotrichum orbiculare 104-T, nu declanșează ECR la planta de tip sălbatic [48].

Foarte important, C. siamense COC4 și C. orbiculare 104-T induc suficient ECR la plantele cu o mutație a genei PEN2 [48], care codifică o mirozinază atipică care funcționează ca un contributor preinvaziv NHR de bază împotriva multor ciuperci și oomicete. agenți patogeni [6,9,13,17,48–50], deși acești doi agenți patogeni neadaptați nu pot invada mutanții pen2. Frecvențele ECR în mutantul pen2 împotriva C. fioriniae CC1 și C. siamense MAF1 sunt, de asemenea, mai mari decât cele din planta de tip sălbatic, în timp ce alți mutanți unici ai genelor imuno-relative, cum ar fi EDR1, GSH1 EDS5 și CAS au puține. efect asupra ECR [48]. Aceste rezultate sugerează că ECR este activată de preferință atunci când apărarea preinvazivă antifungică bazată pe PEN devine ineficientă în celulele epidermice.

În mod similar, în testele de penetrare pe mai mulți mutanți Arabidopsis cu multe mutații legate de imunitate, aceste cinci tulpini de Colletotrichum neadaptate au afișat abilități diferențiale de a depăși NHR preinvaziv în aceeași ordine cu capacitatea de inducere a ECR; C. nymphaea PL1-1-B și C. fioriniae CC1 pot invada epiderma plantei de tip sălbatic într-o anumită măsură și mai mult a mutantului pen2, în timp ce C. siamense MAF1, COC4 și C. orbiculare {{8} }}T poate străpunge NHR epidermic numai în prezența mutației pen2 sau cu mutații suplimentare, cum ar fi edr1, gsh1, eds5 și cas (Figura 2, redesenată din [51]) [48,51]. Astfel, există o legătură strânsă între inducerea ECR în plante și capacitatea de invazie a ciupercilor Colletotrichum neadaptate, ceea ce implică implicarea ECR în NHR epidermic preinvaziv, deoarece acești agenți patogeni fungici sunt incompatibili și cu siguranță nu pot infecta A. thaliana. Contribuția ECR la NHR preinvaziv este mutanții Arabidopsis non-gazdă au fost evaluați pe baza ratelor de intrare mediată de appressorium (MAE) melanizat și clasificați. Rata MAE (procent) a fost calculată folosind următoarea formulă numerică: (numărul de appressorie melanizate cu formarea de hife invazive)/(numărul de appressorie melanizate). C. higginsianum Abr1-5 (MAFF305635) adaptat este prezentat ca martor. Procentul de teste de intrare fungică ca „-”, „plus /−”, „plus”, „plus plus”, „plus plus plus” și „plus plus plus plus” este de 0–2 la sută, 2–10 la sută, 10–20 la sută, 20–35 la sută, 35–60 la sută și, respectiv, 60–100 la sută. nd: nedeterminat. Adaptat după [51].

ECR nu este specific pentru Colletotrichum. Cloroplastele epidermice apar și la suprafață după inocularea cu patogenul neadaptat P. oryzae, care prezintă o invazie a plantelor de tip APpressorium-mediated Entry (MAE) melanizată, dar este filogenetic înrudit îndepărtat cu Colletotrichum [48]. Frecvența ECR indusă de P. oryzae crește, de asemenea, la mutantul pen2. Astfel, ECR poate fi un răspuns epidermic cu spectru larg la o mare varietate de agenți patogeni fungici. Această idee este în concordanță cu noua descoperire conform căreia ciuperca neadaptată Alternaria alternata, care nu este un agent patogen de tip MAE și formează conidii melanizate, induce, de asemenea, ECR în non-gazdă A. thaliana, în special în prezența mutației pen2 (Figura 3) .

2.2. Declanșarea răspunsului cloroplastului epidermic

Deși modul în care epiderma plantei recunoaște agenții patogeni fungici și induce ECR rămâne o întrebare deschisă, unele date indică o corelație fascinantă între caracteristicile legate de studiul de intrare a ciupercilor și inducerea ECR [48]. Unele dintre moleculele derivate din patogeni bine studiate sunt modele moleculare asociate cu patogeni/microbi (PAMP/MAMP), care sunt foarte conservate printre agenții patogeni cu spectru larg și contribuie la viabilitatea lor [52]. Modelele moleculare asociate daunelor (DAMP), molecule derivate de gazdă, cum ar fi Pep1 eliberate extracelular în timpul invaziei patogenului, sunt, de asemenea, indicii pentru răspunsurile imune înnăscute [53]. PAMP-urile/DAMP-urile sunt recunoscute de receptorii de recunoaștere a modelelor de plante (PRR), iar imunitatea declanșată de PAMP/DAMP este inițiată prin intermediul proteinelor asociate PRR, cum ar fi RLP 23 și RLP30, proteine ​​asemănătoare receptorului încorporat în membrană (RLP), FLS2 și BAK1 , kinaze asemănătoare receptorilor încorporate în membrană (RLK) și BIK1 și PBL1, kinaze citoplasmatice asemănătoare receptorului (RLCK) [54-61].

Recenzii excepționale privind semnalizarea PRR în imunitatea plantelor au fost publicate de mai mulți cercetători [62–65]. În mod intrigant, ECR nu depinde de BAK1, BIK1, PBL1, RLK de detectare a Pep1-, PEPR1 și PEPR2; prin urmare, evenimentele de semnalizare PAMP și/sau DAMP, cel puțin cele mediate de aceste RLK-uri și RLCK-uri, nu sunt implicate în inducerea ECR [48]. Mai mult, cuantificarea ECR în planta mutantă pen2 împotriva mai multor mutanți orbiculari C. deficienți în diferite etape ale morfogenezei legate de invazie a relevat faptul că formarea cuibului de penetrare, o structură fungică asemănătoare unui ac care iese din appressorium pentru intrarea cu succes în plantă. epiderma, este esențială pentru inducerea ECR [48].

Ciupercile și oomicetele patogene ale plantelor secretă un arsenal de proteine ​​de virulență, numite efectori, pentru a manipula procesele celulare ale plantelor și pentru a induce supresia imunității. Au fost publicate numeroase recenzii despre efectorii agenților patogeni ai plantelor [66–70]. În Colletotrichum, proteinele efectoare marcate fluorescent se acumulează de preferință la porul inferior al apesoriului pentru secreție prin pilonul de penetrare [71,72]. Această secreție efectoră depinde de traseul de trafic intracelular mediat de v-SNARE SEC22-în ciupercă [72] și, în mod interesant, se corelează cu inducerea ECR [48]. Aceste observații sugerează următorii potențiali candidați ca declanșatori ai ECR: (i) moleculele derivate din patogen secretate de peg-ul de penetrare în timpul testelor de intrare a ciupercilor și (ii) semnale derivate din plante generate ca răspuns la gradul de progresie fungică în încercarea de a pătrunde. ECR este un eveniment universal împotriva multor tipuri de agenți patogeni fungici, inclusiv speciile Colletotrichum, P. oryzae și A. alternata (Figura 3) [48]. Prin urmare, efectorii tipici care sunt limitați la o gamă restrânsă de agenți patogeni fungici pentru specificitatea gazdei lor ar putea să nu fie un indiciu al ECR; mai degrabă, enzimele comune de degradare a peretelui celular sau efectorii centrali foarte conservați ai unei game largi de ciuperci patogene sau semnale de deteriorare a plantelor care nu sunt asociate cu Pep1 ar putea declanșa ECR în epiderma plantei.

2.3. Regulatorii răspunsului epidermic la cloroplast și rezistența preinvazivă non-gazdă a Arabidopsis

Cloroplastele mezofile mari prezinta miscari intracelulare bazate pe intensitatea luminii pentru o fotosinteza sigura si eficienta; ei scapă de lumina puternică și migrează către pereții anticlinali ai celulei pentru a preveni fotodeteriorarea (răspuns de evitare) și se deplasează către lumina slabă și se așează pe pereții periclinali pentru a crește eficiența fotosintetică (răspunsul de acumulare). Multe proteine ​​reglatoare ale acestui fenomen adaptativ, numite mișcări de fotorelocare a cloroplastului, au fost identificate în celulele mezofile [73]. Cu toate acestea, există puține rapoarte și se știe puțin despre componentele care controlează mișcarea intracelulară a cloroplastelor epidermice [74,75]. În acest context, am demonstrat recent că ECR în celulele epidermice împărtășește proteine ​​​​regulatoare comune cu mișcările de fotorelocare a cloroplastului mezofil [48]. Proteina care leagă actina CHUP1 generează o forță motrice pe bază de cloroplast-actină și este esențială atât pentru răspunsurile de acumulare, cât și pentru evitarea [76–78], în timp ce proteina din domeniul J asemănătoare auxilinei JAC1 reglează apariția și dispariția filamentelor de cloroplast-actină. și este necesar pentru răspunsul de acumulare [79]. A. thaliana modificată genetic arată că supraexprimarea proteinelor CHUP1 cauzează o suprimare puternică a ECR.

De obicei, cloroplastele epidermice sunt greu detectate la suprafață, chiar și după inocularea cu agenți patogeni fungici neadaptați [48]. Cu toate acestea, supraexprimarea JAC1 sau deleția CHUP1 duce la poziționarea constitutivă a cloroplastelor epidermice la suprafață, indiferent de inocularea fungică [48]. Astfel, CHUP1 și JAC1 reglează negativ și, respectiv, pozitiv, poziționarea cloroplastelor epidermice la suprafața celulelor pavajului (Figura 4). Este de remarcat faptul că inocularea mutantului chup1 cu concentrații mari de ciuperci neadaptate a crescut doar puțin populația de cloroplaste de suprafață, sugerând astfel afectarea ECR prin epuizarea proteinei CHUP1. În schimb, fototropina 1 și 2, care sunt receptori de lumină albastră responsabili pentru mișcările de fotorelocare a cloroplastelor [80-82], sunt dispensabile pentru activarea ECR [48]. Prin urmare, locația foto a cloroplastului și ECR au sisteme diferite de recunoaștere a stimulului pentru lumină și, respectiv, agenți patogeni, dar au cel puțin unele componente de reglementare în aval. Din punctul de vedere al diferențelor dintre mezofilă și cloroplastele epidermice, versatilitatea sistemelor adaptative împotriva diferitelor stresuri de mediu ar putea reflecta strategia de supraviețuire elaborată a plantei.

Dacă ECR contribuie la imunitatea plantelor în celulele epidermice ale A. thaliana este o întrebare fascinantă. Pentru a clarifica implicarea ECR în NHR preinvazivă, au fost investigate efectele tulburărilor ECR prin supraexprimarea sau epuizarea proteinelor CHUP1 asupra ratei MAE a ciupercilor multiple neadaptate din epiderma plantei [48]. C. nymphaea PL1-1-B, care a prezentat o incompatibilitate relativ mai mică cu A. thaliana în comparație cu alte ciuperci neadaptate, a arătat o rată crescută de MAE la plantele afectate de ECR (Figura 2) [48]. Mai mult, la plantele cu pen2 sau alte mutații suplimentare, cum ar fi edr1, gsh1, eds5 și cas, o creștere sau scădere a nivelurilor de proteine ​​CHUP1 a promovat rata MAE a C. fioriniae CC1, C. siamense MAF1, COC4 și C. . orbiculare 104-T (Figura 2) [48]. Rezultate similare au fost obținute pentru rata MAE a P. oryzae. În consecință, ECR este un răspuns la stres al plantei, prin care NHR-ul preinvaziv este îmbunătățit în celulele epidermice atunci când agenții patogeni fungici încearcă invazia prin pilonul de penetrare.

După cum este descris, ECR este activat de preferință în absența unei căi de apărare legate de PEN{0}}. În mod similar, inocularea C. fioriniae CC1 neadaptată a indus, de asemenea, expresia multor gene legate de apărare, cum ar fi PAD3, CYP79B2, CYP71A13, PDF1.2a, MYB51, PR1, FRK1 și NHL10, numai în cazul mutației pen2, deși pragul pentru ECR a fost mai mic decât cel pentru expresia acestor gene [48]. Pe baza structurii stratificate a plantei NHR, ECR este unul dintre răspunsurile de apărare care este programat pentru a susține NHR preinvaziv atunci când căile implicate în apărarea preinvazivă de nivel superior, inclusiv căile legate de PEN2-, sunt ineficiente [ 48,51].

Acest lucru este în concordanță cu relația dintre A. thaliana și patogenul inferior incompatibil neadaptat C. nymphaea PL1-1-B, care depășește parțial apărarea preinvazivă de strat înalt [51]; C. nymphaea PL1-1-B declanșează puternic ECR și, de asemenea, induce gene legate de apărare la planta de tip sălbatic [48]. Se presupune că există în natură mai multe ciuperci fitopatogeni, cum ar fi C. nymphaea PL1-1-B, care depășesc parțial apărarea preinvazivă a stratului superior al A. thaliana. Prin urmare, plantele au evoluat ECR ca unul dintre mecanismele NHR epidermice împotriva acestor tipuri de agenți patogeni fungici (Figura 4).

3. Componentele imune epidermice localizate în cloroplast contribuie la rezistența preinvazivă antifungică non-gazdă a Arabidopsis

3.1. Localizarea preferențială a componentelor imune legate de cloroplastele epidermice mobile la A. thaliana

Modul în care ECR contribuie la NHR preinvaziv împotriva agenților patogeni fungici neadaptați rămâne complet elucidat. Imagistica cu celule vii prin fluorescență a dezvăluit că componentele legate de imunitate, cum ar fi -glutamilcisteină sintetaza GSH1, receptorul sensibil Ca2 plus CAS, transportorul familiei MATE EDS5, izochorismat sintaza ICS1/SID2 și aminotransferaza ALD1, au fost localizate în cloroplastele mici epidermale (Figura 4). [15,48,83–86]. Interesant este că semnalele fluorescente ale acestor componente în cloroplastele epidermice sunt mult mai puternice decât cele din cloroplastele mezofile mari [48,83,85,86]. În celulele de pavaj activate de ECR, după inocularea cu C. fioriniae CC1 neadaptat, s-a descoperit că proteinele GSH1, EDS5 și CAS se localizează pe suprafața împreună cu cloroplastele epidermice mobile, sugerând o legătură strânsă între ECR și poziționarea intracelulară a acestora. componente ale sistemului imunitar [48]. Aceste observații ar putea întări importanța cloroplastelor epidermice în imunitatea plantelor

3.2. Componente imune epidermice localizate pe cloroplast și apărare preinvazivă la A. thaliana

GSH1 contribuie la apărarea plantelor prin biosinteza glutationului atât în ​​interacțiunile A. thaliana-patogen compatibile cât și incompatibile [15,87]. CAS este implicat în semnalizarea tranzitorie de Ca2 plus în cloroplaste în timpul imunității plantei [88], iar efectorul fungic vizat de CAS al Sclerotinia sclerotiorum interferează cu semnalizarea SA în planta gazdă [89]. ICS1/SID2 și EDS5 sunt necesare pentru biosinteza și transportul precursorilor SA, respectiv, în timpul răspunsului imun al plantei [85,90,91]. Legătura strânsă dintre aceste componente imunitare și cloroplastele epidermice implică implicarea lor în NHR epidermic împotriva agenților patogeni fungici care declanșează ECR. Au fost demonstrate contribuțiile GSH1, CAS, EDS5 și ICS1/SID2 la NHR preinvaziv împotriva ciupercilor neadaptate; C. nymphaea PL1-1-B a arătat o creștere a MAE în epiderma mutanților unici gsh1, cas și eds5 în comparație cu cea din planta de tip sălbatic [51], în timp ce efecte similare ale acestor mutații asupra MAE ale C. fioriniae CC1, C. siamense MAF1 și P. oryzae au fost observate la fiecare mutant dublu cu mutație pen2 (Figura 2) [48].

Ratele crescute de MAE ale C. siamense COC4 și C. orbiculare 104-T mai incompatibile au fost confirmate la plantele mutante pen2 cu mutații multiple ale genelor legate de imun (Figura 2) [48]. Prin urmare, efectele2-dependente de stilou ale acestor gene mutante, care codifică proteine ​​epidermice localizate în cloroplast, se corelează cu ECR declanșat de fiecare agent patogen fungic. Acest studiu propune că celulele epidermice Arabidopsis desfășoară un răspuns imun centrat pe ECR, în care repoziționarea intracelulară a proteinelor legate de imun ar putea îmbunătăți NHR antifungic (Figura 4) [48]. Proteina epidermică specifică cloroplastului, ALD1, este esențială pentru rezistența locală la boli și rezistența sistemică dobândită împotriva agenților patogeni bacterieni virulenți și avirulenți și își exercită efectul prin controlul acumulării de SA [86, 92-94]. În viitor, ar trebui elucidat dacă ALD1 funcționează și în NHR preinvaziv împotriva agenților patogeni fungici.

4. Cloroplastele epidermice se acumulează la interfața cu patogenul Oomycete și CHUP1 este necesar pentru rezistența la penetrare în Nicotiana benthamiana

4.1. Acumularea focală de cloroplaste epidermice la interfața cu patogenul oomicet în N. benthamiana

Rolul cloroplastelor epidermice ca răspuns la patogenul oomicet P. infestans a fost studiat și în planta solanacee model N. benthamiana [95–97]. În această secțiune, menționez cercetări recente privind dinamica mișcărilor cloroplastelor epidermice și implicarea CHUP1 în imunitatea actinomicetelor, deși există o ambiguitate în ceea ce privește caracteristicile adaptative sau neadaptative ale P. infestans la N. benthamiana, care prezintă rezistență ambiguă legată de vârstă. la P. infestans; plantele mature sunt rezistente, în timp ce plantele tinere sunt susceptibile [98].

În timpul răspunsului N. benthamiana la P. infestans, cloroplastele epidermice prezintă mișcări intracelulare și se acumulează la interfața cu patogenul haustorium, hife specializate legate de infecție, într-o manieră BAK1-independentă (Figura 5) [96] . Astfel, imunitatea focală mediată de cloroplastele epidermice a fost propusă în N. benthamiana-P. patosistemul infestans. Un fenomen similar a fost observat în celulele activate de ECR ale A. thaliana în timpul răspunsului antifungic; totuși, majoritatea cloroplastelor de suprafață au fost împrăștiate în cazul ECR și, cel puțin la microscop, nu s-au asociat cu interfața patogenului [48]. Având în vedere că cloroplastul epidermic de N. benthamiana este de obicei detectat la suprafața celulelor pavajului, indiferent de inocularea agentului patogen, mecanismele de lucru ale cloroplastelor epidermice ca răspuns la atacurile patogenilor nu au fost în întregime aceleași între A. thaliana și N. benthamiana.

În plus, ECR asociată CHUP1-și acumularea focală a cloroplastelor epidermice la locurile de penetrare a fungilor pot fi evenimente independente la A. thaliana, deoarece acumularea specifică interfeței patogenului de cloroplaste epidermice în N. benthamiana este CHUP{{2} }independent (Figura 5) [97]. În acest context, rămâne de elucidat dacă o parte din cloroplastele epidermice ale A. thaliana, care se acumulează focal la locurile de penetrare a fungilor, are un rol(e) distinct(e) față de cloroplastele epidermice asociate ECR, precum și cel din N. .benthamiana.

4.2. CHUP1-Depunerea de calloză dependentă la locul de penetrare a oomicetului în timpul rezistenței epidermice a N. benthamiana

Savage şi colab. au raportat că poziționarea cloroplastelor epidermice la interfața dintre N. benthamiana și haustoria lui P. infestans a avut loc independent de CHUP1 [97], care a fost ușor diferită de Arabidopsis ECR [48]. Cu toate acestea, ei au demonstrat că CHUP1 este necesar pentru rezistența la penetrare în celulele epidermice ale N. benthamiana împotriva P. infestans [97]. Reducerea la tăcere sau eliminarea a două alele CHUP1 din N. benthamiana crește susceptibilitatea la P. infestans, în timp ce acumularea de cloroplaste epidermice în jurul haustoria nu este afectată la mutantul knockout CHUP1 (chup1) [97]. Mutantul Arabidopsis chup1 a arătat, de asemenea, o scădere a NHR preinvazivă împotriva MAE a agenților patogeni fungici neadaptați [48], sugerând importanța proteinei CHUP1 asociată cu cloroplaste în imunitatea plantelor epidermice atât împotriva oomicetelor, cât și a agenților patogeni fungici.

În mod interesant, depunerea focală de caloză la haustoria P. infestans, care este unul dintre răspunsurile de apărare ale plantei, este dependentă de CHUP1-, sugerând că proteina CHUP1 asociată cu cloroplaste contribuie la imunitatea epidermică împotriva patogenului oomicet prin îmbunătățirea rezistența la penetrare prin depunere de caloză (Figura 5) [97]. Întrebarea cheie este cum există legătura dintre această depunere de caloză și acumularea focală a cloroplastelor epidermice la interfața cu patogenul, deoarece CHUP1 este o proteină asociată cu cloroplaste. În acest sens, Savage et al. nu a arătat nicio corelație între depunerea de caloză și prezența cloroplastelor în jurul haustoriului [97]. În conformitate cu această constatare, în A. thaliana-C. interacțiunea orbiculară incompatibilă, depunerea de caloză nu se corelează cu activarea ECR; caloza este suficient depusă la locurile încercărilor de pătrundere a patogenului în planta de tip sălbatic, unde ECR este cu greu activat din cauza unei funcții prealabile de apărare(e) preinvazivă(e) de strat înalt [48]. Knockout-ul genei CHUP1 în N. benthamiana nu afectează alte procese imune de bază, cum ar fi fosforilarea MAPK declanșată de PAMP, moartea celulelor HR indusă de răspunsul hipersensibil (HR) indus de MEK2DD constitutiv activ și moartea celulelor HR declanșată de efector [97].

Prin urmare, Savage et al. a speculat că în CHUP1-knockout N. benthamiana, reducerea producției de molecule epidermice derivate din cloroplaste, cum ar fi precursorii ROS și SA, ar putea cauza în mod plauzibil afectarea acumulării de caloză în jurul haustoriului. De asemenea, nu au exclus posibilitatea ca imagistica instantanee să nu reflecte cu acuratețe implicarea mobilizării cloroplastelor epidermice la haustoria în depunerea focală de caloză, deoarece cloroplastele s-ar fi putut îndepărta de haustoria după depunerea de caloză [97]. Mă aștept ca cercetările viitoare să clarifice mecanismul de reglementare al depunerii calozei la interfața cu patogenul prin CHUP1 asociat cloroplastelor în N. benthamiana și să-l compare cu răspunsurile imune legate de cloroplast epidermic la A. thaliana.

5. Morfologia dinamică a cloroplastelor epidermice și a interacțiunilor inter-organice în imunitatea plantelor

5.1. Formarea stromulelor, mărirea și formarea cavității

Mezofila și cloroplastele epidermice cresc extensii tubulare dinamice numite stromule, care sunt umplute cu stromă [99]. În celulele epidermice ale N. benthamiana, stromulele cresc în timpul imunităților antivirale și antibacteriene, unde are loc moartea celulelor HR declanșate de efectori [95]. N. benthamiana induce, de asemenea, formarea de stromule în timpul imunității declanșate de PAMP împotriva oomicetului INF1 în plus față de flg22 bacterian și chitina fungică într-o manieră dependentă de BAK1-[95,96]. Interesant este că inducerea stromulelor este suprimată de efectorul P. infestans AVR3a [96]. Inducerea stromulelor în cloroplastele epidermice a fost observată și în timpul imunității antibacteriene la A. thaliana [95]. În total, aceste observații implică posibila implicare a stromulilor în răspunsurile de apărare a plantelor. Important este că mișcările cloroplastelor și conexiunile cu alte organite, cum ar fi nucleele, sunt mediate de stromule în timpul răspunsului imun al plantelor [95,100]. Mai mult, stromulele pot transporta molecula de semnalizare legată de apărare ROS și proteina de apărare a cloroplastului NRIP1 la nucleul din N. benthamiana [95,101]. NRIP1 este necesar pentru rezistența antivirală la N. benthamiana [102]. Proteinele legate de imunitatea GSH1, EDS5 și CAS sunt, de asemenea, localizate în stromulele care se extind din cloroplastele epidermice din A. thaliana, deși semnalul de localizare al proteinei tilacoide CAS din stromuli este mai slab decât cel al celorlalte două proteine ​​și poate fi un artefact. de supraexpresie [48].

Astfel, în celulele epidermice, componentele legate de imunitate își pot modifica în mod dinamic poziționarea prin mișcările cloroplastelor și își pot extinde în continuare locația către exteriorul cloroplastelor prin intermediul stromulelor în timpul răspunsurilor imune. Cu toate acestea, este, de asemenea, foarte controversat dacă stromulele crescute au efecte pozitive asupra rezistenței antimicrobiene. Caplan şi colab. au raportat că mutanții N. benthamiana și Arabidopsis chup1 cu tăcere genetică CHUP1 au prezentat stromule crescute, care au fost vizualizate cu proteina de fuziune NRIP1-GFP, în absența agenților patogeni și au promovat moartea celulelor HR declanșate de efectori în timpul răspunsului imun antiviral și antibacterian. [95]. În contrast, Savage et al. a demonstrat că mutanții chup1 atât ai N. benthamiana cât și ai A. thaliana au prezentat stromule scăzute, care au fost vizualizate cu GFP, în absența agenților patogeni [97].

Mai mult, mutantul chup1 al N. benthamiana poate induce suficient formarea de stromule atunci când este provocat cu P. infestans, în ciuda susceptibilității sale crescute la acest agent patogen [97]. Scăderea NHR preinvazivă în Arabidopsis cu o mutație chup1 împotriva agenților patogeni fungici de tip MAE a fost, de asemenea, raportată [48]. Aceste discrepanțe pot fi explicate în studiile viitoare. Este de remarcat faptul că, în imunitatea plantelor, inducția stromulelor și mișcările cloroplastelor, cum ar fi ECR și acumularea focală la interfața cu patogenul, sunt evenimente mai legate, dar diferite, deoarece primul depinde de kinaza de semnalizare PAMP BAK1, în timp ce cel de-al doilea nu. Prin urmare, semnale distincte derivate din patogeni pot fi integrate printr-un sistem epidermic centrat pe cloroplaste pentru a armoniza răspunsurile de apărare.

Cloroplastele epidermice sunt considerabil mai mici decât cloroplastele mezofile. Cu toate acestea, în mod intrigant, au putut fi observate cloroplaste epidermice mărite în celulele activate de ECR, iar populația de cloroplaste mărite a crescut treptat în timpul incubării cu agenți patogeni fungici neadaptați (Figura 6). Cloroplastele mărite nu au fost observate în stadiul incipient al ECR. Formarea de cavități în interiorul cloroplastelor epidermice mărite a fost confirmată (Figura 6). Semnificația fiziologică a acestor modificări în morfologia cloroplastelor epidermice în timpul ECR este în prezent neclară, dar cloroplastele epidermice pot spori NHR preinvaziv prin aceste evenimente suplimentare în stadiul târziu al ECR. Alternativ, morfologia organelară a plantei ar putea fi afectată de efectorii patogeni, deoarece s-a raportat că expresia tranzitorie a proteinelor efectoare Colletotrichum duce la mărirea nucleilor în celulele epidermice ale N. benthamiana [103]. Dacă astfel de expansiuni organelare se numără printre strategiile de infecție cu agenți patogeni prin efectori, este în concordanță cu faptul că mulți efectori patogeni intră în cloroplaste și țintesc proteinele localizate în cloroplaste [46,47].

5.2. Clustering perinuclear de cloroplaste epidermice și mișcări nucleare

Se știe că cloroplastele se grupează în jurul nucleului pentru comunicarea între organe, unde transmiterea semnalelor retrograde are loc ca răspuns la diferite stresuri de mediu (37,38,104-106). În răspunsurile de apărare ale N. benthamiana, a fost raportată semnalizarea ROS retrogradă de la cloroplastele de grupare perinucleară la nucleu prin stromuli (95); acelaşi lucru a fost propus şi la A. thaliana (88,107,108). În mod interesant, pierderea genei CHUP1 duce la creșterea grupării perinucleare a cloroplastelor epidermice atât în ​​N. bnethamiana, cât și în A. thaliana (97. Agruparea perinucleară a cloroplastelor epidermice a fost observată și în timpul Arabidopsis ECR după inocularea agentului patogen sau în CHUP1- condiții epuizate fără agent patogen [48].Astfel, aceste două specii de plante au mecanisme de reglare similare pentru a controla gruparea perinucleară a cloroplastelor epidermice, în care CHUP1 prezintă efecte negative Având în vedere afectarea ECR și NHR preinvazivă prin poziționarea suprafeței constitutive a cloroplastele epidermice în mutantul chup1 al A. thaliana [48], gruparea perinucleară mai mare a cloroplastelor epidermice s-ar putea deteriora funcțional. În conformitate cu această idee, CHUP1-knockout N. benthamiana este mai susceptibil la P. infestans [97] .

Mișcarea nucleară indusă de lumină în mezofila Arabidopsis și celulele pavajului epidermic este dependentă de CHUP1-[74,78]. CHUP1 se localizează în mod specific în învelișul cloroplastelor, dar nu nucleelor ​​și reglează mișcările cloroplastelor; prin urmare, mișcarea intracelulară mediată de CHUP1-a cloroplastelor epidermice este o forță motrice pentru mișcarea nucleară ca răspuns la lumina puternică [74,78]. În mod similar, nucleele, împreună cu cloroplastele de grupare perinucleare, migrează către suprafața în timpul ECR în A. thaliana, care este strâns legată de cantitatea de proteine ​​CHUP1 [48]. De asemenea, reticulul endoplasmatic perinuclear se repoziţionează pe suprafaţa epidermică în timpul ECR [48]. În N. benthamiana, nucleul se deplasează în locurile de penetrare ale oomicetului P. infestans [96,109]. Acest lucru este observat și în alte patosisteme ale plantelor care utilizează agenți patogeni fungici și oomiceți [110–112]. Acumularea focală a nucleului nu a fost influențată de gruparea perinucleară crescută a cloroplastelor epidermice în CHUP1-knockout N. benthamiana [97]. Având în vedere că supraexprimarea și epuizarea proteinelor CHUP1 au efecte opuse asupra mișcărilor cloroplastelor epidermice în timpul Arabidopsis ECR, ar fi interesant să se determine dacă gruparea perinucleară a cloroplastelor epidermice este suprimată de supraexprimarea CHUP1 în N. benthamiana și, prin urmare, dacă acumularea focală a nucleul de la interfața P. infestans este perturbat.

6. Concluzii

Importanța funcției cloroplastelor în imunitatea plantelor este larg recunoscută. Cercetările care se concentrează pe tipurile de cloroplaste au apărut acum în domeniul răspunsurilor antimicrobiene. Având în vedere funcția epidermei plantei ca fortăreață primară pentru a respinge inamicul, cum ar fi agenții patogeni fungici și oomiceți cu capacitate de penetrare directă, cloroplastele epidermice atipice sunt un subiect de cercetare ideal datorită cantității lor mici de informații în comparație cu bine-cunoscutele cloroplaste tipice mezofilelor. .

În special, studii recente au dezvăluit o legătură între dinamica intracelulară a cloroplastelor epidermice și imunitatea epidermală a plantelor, în care ECR, acumularea focală a cloroplastelor epidermice la interfața cu patogenul, formarea stromulelor, comunicarea inter-organele și alte procese pot fi orchestrate pentru a sporește rezistența antimicrobiană [48,95–97,113]. CHUP1 localizat pe cloroplast, care a fost identificat inițial ca un regulator al mișcărilor de fotorelocare a cloroplastelor în celulele mezofile [76], are o funcție cheie în evenimentele epidermice legate de cloroplast ca răspuns la agenții patogeni. JAC1, un regulator al răspunsului de acumulare fotoindus al cloroplastelor, este, de asemenea, implicat în poziționarea intracelulară a cloroplastelor epidermice în timpul ECR [48]. Pentru a înțelege mecanismul care stă la baza imunității epidermice prin răspunsuri centrate pe cloroplaste mobile, este necesară o analiză suplimentară asupra cărora și cum componentele folosite în sistemul de relocare foto a cloroplastelor contribuie la răspunsurile de apărare în epiderma plantei.

Finanțarea:

Această cercetare a fost finanțată de JSPS KAKENHI Grant Numbers 15K18648, 18K05643 și 21H02194 și de programul Leading Initiative for Excellent Young Researchers (LEADER) al MEXT.

Mulțumiri:

Îi mulțumesc lui Yoshitaka Takano pentru asistență și discuții utile.

Conflicte de interes:

Autorul nu declară conflict de interese.

Referințe

1. Kubo, Y.; Furusawa, I. Biosinteza melaninei: o condiție prealabilă pentru invazia cu succes a plantei gazdă de către appressoria Colle-totrichum și Pyricularia. In The Fungal Spore and Disease Initiation in Plants and Animals; Cole, GT, Hoch, HC, Eds.; Editura Plenum: New York, NY, SUA, 1991; pp. 205–217.

2. Heath, MC Rezistența non-gazdă și apărarea nespecifică a plantelor. Curr. Opinează. Plant Biol. 2000, 3, 315–319. [CrossRef]

3. Lee, H.-A.; Lee, H.-Y.; Seo, E.; Lee, J.; Kim, S.-B.; O, S.; Choi, E.; Choi, E.; Lee, SE; Choi, D. Înțelegerea curentă a rezistenței plantelor non-gazdă. Mol. Interacțiune plantă-microb. 2017, 30, 5–15. [CrossRef] [PubMed]

4. Collins, NC; Thordal-Christensen, H.; Lipka, V.; Bau, S.; Kombrink, E.; Qiu, J.-L.; Hückelhoven, R.; Stein, M.; Freialdenhoven, A.; Somerville, SC; et al. Rezistența la boli mediată de proteine ​​SNARE la peretele celular al plantei. Natura 2003, 425, 973–977. [CrossRef] [PubMed]

5. Jacobs, AK; Lipka, V.; Burton, R.; Panstruga, R.; Strizhov, N.; Schulze-Lefert, P.; Fincher, GB O sintază de calloză Arabidopsis, GSL5, este necesară pentru formarea rănii și a calozei papilare. Plant Cell 2003, 15, 2503–2513. [CrossRef]

6. Lipka, V.; Dittgen, J.; Bednarek, P.; Bhat, R.; Wiermer, M.; Stein, M.; Landtag, J.; Brandt, W.; Rosahl, S.; Scheel, D.; et al. Apărările pre și postinvazie contribuie ambele la rezistența non-gazdă în Arabidopsis. Science 2005, 310, 1180–1183. [CrossRef] [PubMed]

7. Stein, M.; Dittgen, J.; Sánchez-Rodríguez, C.; Hou, B.-H.; Molina, A.; Schulze-Lefert, P.; Lipka, V.; Somerville, S. Arabidopsis PEN3/PDR8, un transportator de casete de legare ATP, contribuie la rezistența non-gazdă la agenții patogeni inadecvați care intră prin penetrare directă. Plant Cell 2006, 18, 731–746. [CrossRef] [PubMed]

8. Jensen, MK; Hagedorn, PH; de Torres-Zabala, M.; Grant, domnule; Rung, JH; Collinge, DB; Lyngkjaer, MF Reglarea transcripțională de către un factor de transcripție NAC (NAM-ATAF1,2-CUC2) atenuează semnalizarea ABA pentru apărarea bazală eficientă față de Blumeria graminis f. sp. hordei in Arabidopsis. Plant J. 2008, 56, 867–880. [CrossRef] [PubMed]

9. Bednarek, P.; Pi´slewska-Bednarek, M.; Svatoš, A.; Schneider, B.; Doubský, J.; Mansurova, M.; Humphry, M.; Consonni, C.; Panstruga, R.; Sanchez-Vallet, A.; et al. O cale de metabolizare a glucozinolatului în celulele vegetale vii mediază apărarea antifungică cu spectru larg. Știință 2009, 323, 101–106. [CrossRef]

10. Pinosa, F.; Buhot, N.; Kwaaitaal, M.; Fahlberg, P.; Thordal-Christensen, H.; Ellerström, M.; Andersson, MX Arabidopsis Phospholipase Dδ este implicată în apărarea bazală și rezistența non-gazdă la ciuperci de mucegai. Fiziol vegetal. 2013, 163, 896–906. [CrossRef]

11. Campe, R.; Langenbach, C.; Leissing, F.; Popescu, G.; Popescu, SC; Goellner, K.; Beckers, GJM; Conrath, U. Transportorul ABC PEN 3/PDR 8/ABCG 36 interacționează cu calmodulina care, la fel ca PEN 3, este necesară pentru rezistența Arabidopsis non-gazdă. Phytol nou. 2015, 209, 294–306. [CrossRef]

12. Nielsen, ME; Jürgens, G.; Thordal-Christensen, H. VPS9a activează Rab5 GTPase ARA7 pentru a conferi o imunitate înnăscută distinctă a plantelor pre și postinvazive. Plant Cell 2017, 29, 1927–1937. [CrossRef] [PubMed]

13. Hiruma, K.; Onozawa-Komori, M.; Takahashi, F.; Asakura, M.; Bednarek, P.; Okuno, T.; Schulze-Lefert, P.; Takano, Y. Modul de intrare – Funcția dependentă a unei căi de glucozinolat de indol în Arabidopsis pentru rezistența nongazdă împotriva agenților patogeni de antracnoză. Plant Cell 2010, 22, 2429–2443. [CrossRef]

14. Hiruma, K.; Nishiuchi, T.; Kato, T.; Bednarek, P.; Okuno, T.; Schulze-Lefert, P.; Takano, Y. Arabidopsis REZISTENȚA ÎMBUNĂTĂȚĂ LA BOALA 1 este necesară pentru expresia indusă de patogen a defensinelor plantelor în rezistența non-gazdă și acționează prin interferența funcției represoare mediate de MYC2-. Plant J. 2011, 67, 980–992. [CrossRef] 15. Hiruma, K.; Fukunaga, S.; Bednarek, P.; Pi´slewska-Bednarek, M.; Watanabe, S.; Narusaka, Y.; Shirasu, K.; Takano, Y. Glutationul și metabolismul triptofanului sunt necesare pentru imunitatea Arabidopsis în timpul răspunsului hipersensibil la hemibiotrofic. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 2013, 110, 9589–9594. [CrossRef] [PubMed]

16. Irieda, H.; Inoue, Y.; Mori, M.; Yamada, K.; Oshikawa, Y.; Saitoh, H.; Uemura, A.; Terauchi, R.; Kitakura, S.; Kosaka, A.; et al. Efectorul fungic conservat suprimă imunitatea declanșată de PAMP prin țintirea kinazelor imune ale plantelor. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 2018, 116, 496–505. [CrossRef] [PubMed]

17. Maeda, K.; Houjyou, Y.; Komatsu, T.; Hori, H.; Kodaira, T.; Ishikawa, A. AGB1 și PMR5 contribuie la rezistența preinvazie mediată de PEN2-la Magnaporthe oryzae la Arabidopsis thaliana. Mol. Interacțiune plantă-microb. 2009, 22, 1331–1340. [CrossRef]

18. Nakao, M.; Nakamura, R.; Kita, K.; Inukai, R.; Ishikawa, A. Rezistența non-gazdă la penetrare și creșterea hifală a Magnaporthe oryzae în Arabidopsis. Sci. Rep. 2011, 1, 171. [CrossRef] [PubMed]

19. Okawa, C.; Ishikawa, A. MPK6 contribuie la rezistența non-gazdă la Magnaporthe oryzae la Arabidopsis thaliana. Biosci. Biotehnologia. Biochim. 2013, 77, 1320–1322. [CrossRef]

20. Takahashi, T.; Shibuya, H.; Ishikawa, A. SOBIR1 contribuie la rezistența non-gazdă la Magnaporthe oryzae în Arabidopsis. Biosci. Biotehnologia. Biochim. 2016, 80, 1577–1579. [CrossRef]

21. Takahashi, T.; Shibuya, H.; Ishikawa, A. ERECTA contribuie la rezistența non-gazdă la Magnaporthe oryzae la Arabidopsis. Biosci. Biotehnologia. Biochim. 2016, 80, 1390–1392. [CrossRef]

22. Takahashi, T.; Murano, T.; Ishikawa, A. SOBIR1 și AGB1 contribuie în mod independent la rezistența nongazdei la Pyricularia oryzae (sin. Magnaporthe oryzae) la Arabidopsis thaliana. Biosci. Biotehnologia. Biochim. 2018, 82, 1922–1930. [CrossRef] [PubMed]

23. DuPree, P.; Pwee, K.-H.; Gray, JC Expresia fuziunilor promotoare de gene a fotosintezei în celulele epidermice ale frunzelor plantelor transgenice de tutun. Plant J. 1991, 1, 115–120. [CrossRef]

24. Bowes, BG; Mauseth, JD Structura plantelor—Un ghid de culoare, ed. a 2-a; Manson Publishing, Ltd.: Londra, Marea Britanie, 2008. 25. Vaughan, K. Immunocytochemistry of Plant Cells; Springer: Dordrecht, Țările de Jos, 2013.

For more information:1950477648nn@gmail.com