Absorbția enterală a citratului feric este dependentă de proteina de transport a fierului, ferroportina

Abstract

Citratul feric este aprobat ca produs de înlocuire a fierului la pacienții cu boală renală cronică fără dializă și anemie cu deficit de fier. Fierul eliberat de citrat feric este absorbit enteral, dar mecanismele specifice implicate nu au fost evaluate, inclusiv posibilitățile convenționale de absorbție transcelulară mediată de feroportină și/sau absorbție paracelulară mediată de citrat. Aici, demonstrăm mai întâi eficacitatea citratului feric în modelele cu hepcidină ridicată, inclusiv șoarecii knockout Tmprss6 (caracterizati prin anemie cu deficit de fier refractar la fier) ​​cu și fără boală renală cronică indusă de dieta cu adenină. În continuare, pentru a evalua dacă absorbția enterală a citratului feric depinde sau nu de ferroportină, am evaluat efectele citratului feric într-un model murin knockout feroportin specific enterocite inductibil de tamoxifen (Villin-Cre-ERT2, Fpn flox/flox). În acest model, ștergerea feroportinei a fost eficientă, deoarece injecția cu tamoxifen a indus o scădere de 4000-ori a expresiei ARNm a feroportinei duodenale, cu proteină feroportină nedetectabilă pe un Western blot de enterocite duodenale, rezultând un fenotip sever de anemie cu deficit de fier. La șoarecii cu deficiență de feroportină, trei săptămâni de supliment alimentar cu citrat feric de 1%, o doză care a prevenit deficiența de fier la șoarecii de control, nu a îmbunătățit starea de fier și nu a salvat fenotipul anemiei cu deficit de fier. Am repetat experimentul knockout condiționat cu ferroportină în contextul uremiei, utilizând un model de nefropatie adeninică, în care trei săptămâni de supliment alimentar cu 1% citrat feric nu au reușit să îmbunătățească starea fierului sau să salveze fenotipul anemiei cu deficit de fier. Astfel, datele noastre sugerează că absorbția enterală a citratului feric este dependentă de transportul convențional de fier al enterocitelor de către feroportină și că, în aceste modele, nu are loc o absorbție paracelulară semnificativă.

Cuvinte cheie

citrat feric; feroportină; hepcidină; fier; anemie; boală cronică de rinichi.

Faceți clic aici pentru a afla care este efectul Cistanche asupra rinichilor

Introducere

Auryxia (citrat feric [FC]; Akebia Therapeutics, Inc., Cambridge, MA) este un compus nou care este aprobat pentru utilizare clinică ca liant enteral de fosfat la pacienții adulți cu boală renală cronică (IRC) dializați. În studiile randomizate, controlate cu placebo, efectuate la pacienți cu BRC nedependenți de dializă, FC a scăzut semnificativ concentrațiile de fosfat seric. .3,4

Auryxia este, de asemenea, aprobată în SUA pentru utilizare clinică ca produs de înlocuire a fierului la pacienții cu CKD fără dializă cu anemie feriprivă. În cele 4 studii randomizate controlate menționate mai sus, desfășurate atât în ​​cohorte CKD non-dependente de dializă, cât și dependente de dializă, FC a crescut semnificativ saturația transferinei serice (TSAT).1–4 Astfel, FC poate funcționa atât ca un liant enteral eficient de fosfat, cât și ca un sursă enterală de fier.

În mod remarcabil, FC corectează o deficiență de fier în cadrul BRC și chiar boala renală în stadiu terminal, deoarece acestea sunt stări cu niveluri ridicate de hepcidină. cunoscut exportator celular de fier.9 În stabilirea unor niveluri ridicate de hepcidină, activitatea feroportinei – situată pe suprafața bazală a enterocitelor – este scăzută, inhibând astfel absorbția fierului alimentar și medicinal din lumenul gastrointestinal 10.

Mecanismele prin care FC depășește blocul enteral de fier indus de hepcidină ridicată și niveluri scăzute de feroportină sunt neclare. O ipoteză este că fragmentul de citrat din FC chelați ionii de calciu, ducând la întreruperea joncțiunilor strânse intercelulare ale enterocitelor, permițând absorbția paracelulară a fierului care este independentă de calea hepcidină-ferroportină. Un punct interesant de remarcat este că s-a observat că compușii citrat facilitează absorbția enterală paracelulară a aluminiului11,12, crescând posibilitatea ca absorbția fierului să fie îmbunătățită prin același mecanism. Pentru a evalua dacă absorbția enterală a fierului asociată cu FC are loc printr-o cale transcelulară, dependentă de feroportină, comparativ cu o cale paracelulară, independentă de feroportină, am evaluat absorbția enterală de FC în modele murine, cu sau fără CKD, cu activitate feroportină a enterocitelor scăzută sau absentă.

Supliment Cistanche

METODE

1. Experimente cu șoarece

Experimentele au fost efectuate de ghidurile diviziei de medicină a animalelor de laborator ale Universității din California, Los Angeles (UCLA), iar protocoalele de studiu au fost aprobate de Oficiul UCLA de supraveghere a cercetării animalelor. Șoarecii au fost găzduiți la UCLA, în cuști standard cu așternut din așchii de lemn care a fost schimbat de două ori pe săptămână. Camerele pentru adăpostirea animalelor au fost controlate cu temperatură și umiditate, cu un ciclu de lumină de 12-oră. Am evaluat mai întâi efectele FC la șoarecii knockout serin proteazei transmembranare 6 (Tmprss6), un model caracterizat prin niveluri ridicate de hepcidină, activitate scăzută a feroportinei și anemie feriprivă refractară la fier rezultată,13 atât fără, cât și cu adaos de dietă cu adenină. CKD indusă, care crește și mai mult nivelurile de hepcidină.14 Pentru a inhiba complet activitatea feroportinei enterale, am evaluat apoi efectele FC într-un model de knockout inductibil de tamoxifen, feroportină specifică enterocitelor (FPN) (Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox). În cele din urmă, am evaluat efectele FC într-un model Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox cu CKD indusă de dieta cu adenină.

2. Șoareci knockout Tmprss6

Șoarecii knockout Tmprss6 pe un fundal genetic C57BL/6 au fost furnizați cu amabilitate de Dr. Jodie Babitt (Spitalul General Massachusetts). Am evaluat mai întâi efectele FC la șoarecii knockout Tmprss6 și la colegii de tip sălbatic (WT) fără CKD. Șoarecii cu vârsta cuprinsă între 4 și 7 săptămâni au fost hrăniți cu diete de fier cu 50 ppm fără adenină (Envigo, Hackensack, NJ), cu sau fără 0,1% FC (Akebia Therapeutics, Inc.), timp de 3 săptămâni și apoi au fost eutanasiați. Apoi am evaluat efectele FC la șoarecii knockout Tmprss6 și colegii de așternut WT cu CKD. Șoarecii cu vârsta cuprinsă între 8 și 12 săptămâni au fost hrăniți cu diete cu fier de 50 ppm cu 0,2% adenină (Envigo) pentru a induce CKD,15-17 timp de 6 săptămâni. În ultimele 3 săptămâni ale dietelor, 0,1% FC (Akebia Therapeutics, Inc.) a fost adăugat pentru un grup și nu pentru altul. Această doză de FC la șoareci corespunde unei doze de FC tipice pentru adulți; la un om adult, 2 comprimate Auryxia luate de trei ori pe zi (6000 mg FC) conțin o doză zilnică cumulată de fier feric de 1260 mg, o cantitate echivalentă cu aproximativ o treime din fierul total din organism. La șoareci, aproximativ o treime din fierul total din corp este echivalent cu ~ 0,8 mg de fier feric pe zi sau ~ 4 mg FC pe zi, ceea ce, având în vedere consumul zilnic de hrană murină de ~ 4 g, corespunde alimentelor care conțin 0,1% FC. În aceste experimente, fiecare grup conținea aproximativ jumătate de bărbați și jumătate de femei. După sacrificiu, am colectat sânge integral, ser, ficat și enterocite duodenale. Pentru a izola enterocitele duodenale, secțiunea proximală a duodenului (~2 cm) a fost tăiată pe lungime și transferată într-o soluție de acid etilendiamină tetraacetic rece cu gheață. Soluția a fost agitată în vortex pentru a facilita detașarea celulelor, iar celulele dispersate au fost colectate prin filtrare.

3. Șoareci knockout de ferroportină non-CKD specifici enterocitelor

Șoarecii knockout de ferroportină specifică enterocitelor (FPN) inducibili de tamoxifen au fost generați prin reproducerea șoarecilor Villin-Cre-ERT2 cu șoareci Fpnflox/flox, ambii fiind pe fundal genetic C57BL/6. Șoarecii Villin-Cre-ERT2 au fost furnizați cu amabilitate de Dr. Peter Tontonoz (UCLA). Pentru a caracteriza acest model, am evaluat șoareci Fpnflox/flox, cu sau fără VillinCre-ERT2, cu sau fără inducție de tamoxifen (0.{075 mg/g greutate corporală, injectat ip o dată pe zi timp de 4 consecutiv zile; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Pentru a evalua efectele FC în acest model, am folosit șoareci Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox în vârstă de 6-8 săptămâni care au fost injectați ip fie cu vehicul ulei de floarea soarelui (grup neindus), fie cu tamoxifen (0,075 mg/g greutate corporală; grup indus) o dată pe zi timp de 4 zile consecutive. Șoarecii au fost menținuți pe diete de 50 ppm cu fier (Envigo) și apoi au fost eutanasiați la 7 săptămâni după injectare. Unii dintre șoarecii induși de tamoxifen au avut 1 la sută FC adăugat în dietele lor pentru cele 3 săptămâni imediat înainte de sacrificiu. În aceste experimente, 1 la sută FC - o doză suprafiziologică - a fost aleasă pentru a nu pierde un efect secundar unei dozări insuficiente de FC. Pentru a demonstra eficacitatea acestei doze, am efectuat un experiment separat de control pozitiv în care am evaluat dacă 3 săptămâni de supliment alimentar cu 1% FC poate salva fenotipul anemiei cu deficit de fier la șoareci Villin-Cre-ERT2 neindus, Fpnflox/flox hrăniți cu un dieta cu conținut scăzut de fier (4 ppm) (Envigo). În experimentele cu feroportină non-CKD specifice enterocitelor, fiecare grup a conținut atât bărbați, cât și femele. După sacrificiu, am colectat sânge integral, ser, ficat, enterocite duodenale și duoden întreg pentru colorarea cu fier. Enterocitele duodenale au fost izolate așa cum este descris mai sus. Pentru colorarea cu fier duodenal, probele duodenale proximale au fost fixate în formol, apoi încorporate în blocuri de parafină din care s-au creat lamele. Secțiunile deparafinate au fost colorate cu colorația Perls albastru prusac pentru fier nonhem și contracolorate cu roșu rapid nuclear. Gradul de colorare a fierului enterocitelor duodenale a fost evaluat pe o scară semi-cantitativă de către un evaluator orb (SN).

4. Șoareci knockout ferroportin specifici pentru enterocite CKD

Pentru a repeta experimentul de mai sus în contextul CKD, șoareci masculi Villin-Cre-ERT2, Fpnflox/flox în vârstă de 6 săptămâni au fost porniți cu diete cu 0,2% adenină (Envigo) pentru a induce CKD. Având în vedere diferențele de gen în modelul CKD la rozătoare indusă de dieta cu adenină (femele sunt mai rezistente la efectele adeninei alimentare),18 au fost utilizați numai șoareci masculi. La vârsta de 8 săptămâni, șoarecii au fost injectați ip, așa cum este descris mai sus, cu vehicul ulei de floarea-soarelui sau tamoxifen. La vârsta de 12 săptămâni, după 6 săptămâni de dietă cu adenină, șoarecii au fost trecuți la diete standard, fără adenină, cu 50 ppm de fier, cu sau fără 1% FC adăugat. Șoarecii au fost sacrificați la vârsta de 15 săptămâni, 7 săptămâni după injectare și după 3 săptămâni de tratament cu sau fără FC. Sângele integral, pentru măsurarea hemoglobinei și a globulelor roșii, a fost colectat când șoarecii aveau vârsta de 8 săptămâni (la momentul injectării), 12 săptămâni (la inițierea dietelor cu sau fără FC) și 15 săptămâni (la sacrificiu). Serul, pentru măsurarea azotului ureic și a fierului, a fost colectat când șoarecii aveau vârsta de 12 și 15 săptămâni. Enterocitele hepatice și duodenale au fost colectate, așa cum s-a descris mai sus, la sacrificiu.

Herba Cistanche

5. Analize de sânge

Hemoleucograma completă a fost măsurată cu procesorul automat Hemavet 950 (Drew Scientific, Oxford, CT). Au fost utilizate metode colorimetrice pentru a determina azotul ureic seric (BioAssay Systems, Hayward, CA) și fierul seric (Genzyme, Cambridge, MA). Testele interne de imunosorbție legată de enzime (ELISA) au fost utilizate pentru a măsura nivelurile serice de hepcidină, așa cum a fost descris anterior.19 Un kit ELISA disponibil comercial a fost utilizat pentru a măsura eritropoietina serică (R&D Systems, Minneapolis, MN).

6. Concentrațiile cantitative ale fierului hepatic

Ficatii recoltați au fost congelați rapid în azot lichid și depozitați la -80 grade. Bucăți mici de ficat (~100 mg) au fost cântărite și omogenizate. S-a adăugat o soluție de precipitare a proteinelor (HCI 0,53 N și acid tricloracetic 5,3 procente în apă dublu distilată) și probele au fost fierte și centrifugate. Concentrațiile de fier din supernatanți au fost măsurate printr-un test colorimetric (Genzyme), apoi au fost normalizate la greutățile probelor originale pentru a produce concentrații de fier din țesut.

7. Reacția cantitativă a polimerazei în lanț (PCR) în timp real

Enterocitele duodenale au fost omogenizate în Trizol (Invitrogen, Waltham, MA), iar ARN a fost izolat conform protocolului producătorului. Am efectuat transcripție inversă cantitativă (RT)–PCR utilizând kitul iScript RT-PCR (Bio-Rad, Hercules, CA) și primeri specifici pentru Fpn de șoarece (înainte: 5'-ATGGGAACTGTGGCCTTCAC-3'; revers: 5' -TCCAGGCATGAATACGGAGA-3'). Am folosit următoarele condiții PCR: denaturare inițială la 95 de grade timp de 2 minute, urmată de 40 de cicluri de denaturare la 94 de grade timp de 30 de secunde, recoacere la 58 de grade timp de 30 de secunde, extensie la 72 de grade timp de 1 minut și extensie finală la 72 de grade. grad timp de 10 minute. Expresia genei a fost normalizată la cea a hipoxantin-guanin fosforiboziltransferazei (Hprt) (înainte: 5'-CTGGTTAAGCAGTACAGCCCCAA-3'; revers: 5'-CAGGAGGTCCTTTTCACCAGC{-3'), iar fiecare probă de ARN a fost analizată în duplicat . Expresia relativă a genei a fost calculată folosind metoda delta-delta Ct.

8. Western blot

Pentru detectarea proteinei feritinei pe Western blot, anticorpul primar utilizat a fost FTH1 anti-șoarece de iepure (D1D4; Cell Signaling Technology, Danvers, MA), la o concentrație de 1:10,000, iar anticorpul secundar utilizat a fost IgG anti-iepure de capră (Cell Signaling Technology), la o concentrație de 1:5000. Pentru detectarea feroportinei pe Western blot, anticorpul primar utilizat a fost FPN anti-șoarece de șobolan (1C7; Amgen, Thousand Oaks, CA), la o concentrație de 1:3300, iar anticorpul secundar utilizat a fost IgG anti-șobolan de iepure (ab102213; Abcam, Cambridge, MA), la o concentrație de 1:5000. Pentru controlul încărcării proteinei cu actină, a fost utilizat anticorp anti-actină de șoarece (A3854; Sigma-Aldrich), la o concentrație de 1:50.000. Un semnal chemiluminiscent a fost detectat folosind sistemul ChemiDoc XRS plus cu software Image Lab (Bio-Rad).

9. Analiză statistică

Crearea figurilor și analiza statistică au fost efectuate utilizând Graph-Pad Prism 9.2.0 (San Diego, CA). Datele de șoarece sunt prezentate ca medii ± SD, iar testele t au fost folosite pentru a compara mediile grupului. Pentru datele nedistribuite în mod normal, transformarea log a fost aplicată înainte de analiza statistică. Valorile p < 0.05 au fost considerate semnificative statistic.

Cistanche capsule

DISCUŢIE

În studiile clinice, s-a demonstrat că FC corectează deficitul de fier la pacienții cu CKD și boală renală în stadiu terminal, care sunt stări cu niveluri ridicate de hepcidină5–8. În cazul concentrațiilor circulante mari de hepcidină, activitatea feroportinei enterale este scăzută, generând un bloc al mucoasei mediat de hepcidină la absorbția enterală a fierului.9 Mecanismele prin care FC poate depăși acest bloc absorbtiv enteral sunt necunoscute. O ipoteză este că fragmentul de citrat slăbește joncțiunile strânse intercelulare, facilitând absorbția enterală a fierului paracelular, independent de feroportină. Am testat această ipoteză prin evaluarea eficacității FC în modele cu hepcidină ridicată/ferroportină scăzută - cu și fără CKD - ​​în care calea transcelulară de absorbție a fierului este aproape eliminată sau complet blocată.

În primul nostru model, șoarecii knockout Tmprss6 fără CKD, în care nivelurile de hepcidină sunt ușor crescute, FC a îmbunătățit starea de fier și a crescut concentrația de hemoglobină. În mod similar, în modelele noastre de knockout WT și Tmprss6 cu CKD, în care nivelurile de hepcidină sunt semnificativ crescute, FC a crescut numărul de celule roșii din sânge și hemoglobina. Aceste date demonstrează eficacitatea FC în statele cu niveluri ridicate de hepcidină și sunt în concordanță cu ceea ce a fost observat în studiile clinice FC; cu toate acestea, aceste modele nu sugerează care sunt mecanismele prin care FC depășește blocul hepcidinei mucoase.

În aceste modele, în care ferroportina rămâne intactă, FC poate fi absorbită printr-o cale paracelulară, ocolind axa hepcidină-ferroportină, sau poate fi absorbită printr-o cale transcelulară, utilizând ferroportina. Pentru a evalua dependența FC de feroportina enterală, am folosit un model murin knockout feroportină specific enterocitelor inductibil. Acest model este extrem de eficient la epuizarea aproape completă a proteinei feroportinei enterocitelor, rezultând o absorbție enterală de fier redusă drastic și o anemie severă cu deficit de fier, un fenotip care poate fi salvat prin administrarea parenterală a fierului.26 În acest model, orice ocolire substanțială a feroportinei canonice. -calea dependentă ar fi ușor detectabilă.

În modelul nostru non-CKD, în absența feroportinei enterocitelor, o doză de FC care a fost eficientă la șoarecii WT nu a îmbunătățit starea de fier și nu a salvat fenotipul anemiei cu deficit de fier. Creșteri mici ale numărului de celule roșii din sânge și ale hemoglobinei nu au fost semnificative din punct de vedere statistic, sugerând că absorbția enterală a FC este dependentă în principal de ferroportină și argumentând împotriva absorbției paracelulare extinse. În cazul CKD, factorii asociați cu uremie ar putea crește permeabilitatea intestinală24, posibil slăbirea joncțiunilor strânse intercelulare și facilitarea unui anumit grad de absorbție paracelulară a FC. Cu toate acestea, în modelul nostru CKD, FC a îmbunătățit semnificativ starea de fier în prezența feroportinei enterocitelor, dar nu în absența acesteia. Aceste date sugerează că, chiar și în cazul CKD, absorbția enterală a FC este mediată predominant de transportul feroportinei și nu de căile paracelulare posibile. La șoarecii CKD neinduși, tratamentul cu FC a crescut proteina feroportină duodenală, în ciuda expresiei mai scăzute a ARNm a feroportinei duodenale, în concordanță cu un mecanism stabilit prin care acumularea intracelulară de fier declanșează de-reprimarea translației feroportinei mediată de IRP,21–23 facilitând astfel absorbția celulară a fierului și livrarea in circulatie.

Am efectuat 2 experimente CKD. Concentrațiile terminale medii ale azotului ureic și al hemoglobinei au fost similare între grupul cu dietă de control WT CKD din primul experiment și grupul CKD neindus, netratat din al doilea experiment. Cu toate acestea, în primul experiment CKD, șoarecii WT tratați cu FC au avut o creștere semnificativă a hemoglobinei, dar în al doilea experiment CKD, șoarecii neinduși tratați cu FC nu au avut o creștere semnificativă a hemoglobinei. Motivul pentru care FC nu a crescut semnificativ hemoglobina la șoarecii neinduși, în ciuda îmbunătățirii clare a stării de fier, este neclar; cu toate acestea, factorii contributivi posibili includ etiologia multifactorială a anemiei CKD, dimensiunile mici ale eșantionului de șoareci neinduși și flebotomia repetată în acest experiment. O limitare suplimentară a studiului este că am folosit modele de șoarece a căror translație la om nu este sigură. De asemenea, deși robuste, dovezile pentru lipsa unei absorbții paracelulare semnificative a FC sunt indirecte.

Cistanche tubulosa

În rezumat, în modelele noastre cu nivel ridicat de hepcidină, am observat efecte benefice ale FC asupra parametrilor de fier și eritrocitari, sugerând o absorbție enterală eficientă a fierului, în ciuda nivelurilor ridicate de hepcidină. Pentru a evalua dacă FC poate ocoli blocul hepcidinei mucoasei printr-o potențială absorbție paracelulară facilitată de citrat, am evaluat un model de knockout de feroportină specific enterocitelor inductibil, în prezența sau absența funcției renale afectate. În aceste modele, FC nu a salvat fenotipul anemiei cu deficit de fier, demonstrând că absorbția enterală a FC este dependentă în principal de ferroportină și sugerând că căile paracelulare probabil nu constituie căi majore de absorbție fiziologică a FC.

REFERINȚE

1. Block GA, Fishbane S, Rodriguez M, et al. Un studiu de 12-săptămână, dublu-orb, controlat cu placebo, al citratului feric pentru tratamentul anemiei cu deficit de fier și reducerea fosfatului seric la pacienții cu stadii CKD 3-5. Am J Rinichi Dis. 2015;65:728–736. [PubMed: 25468387]

2. Yokoyama K, Hirakata H, Akiba T, et al. Citrat feric hidrat pentru tratamentul hiperfosfatemiei în CKD non-dializă dependentă. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:543–552. [PubMed: 24408120]

3. Lewis JB, Sika M, Koury MJ, et al. Citratul feric controlează fosforul și furnizează fier la pacienții aflați în dializă. J Am Soc Nephrol. 2015;26:493–503. [PubMed: 25060056]

4. Yokoyama K, Akiba T, Fukagawa M, et al. Un studiu randomizat de JTT-751 versus clorhidrat de sevelamer la pacienții aflați în hemodializă. Transplant Nephrol Dial. 2014;29:1053–1060. [PubMed: 24376274]

5. Zaritsky J, Young B, Wang HJ și colab. Hepcidin - un potențial biomarker nou pentru statusul fierului în boala cronică de rinichi. Clin J Am Soc Nephrol. 2009;4:1051–1056. [PubMed: 19406957]

6. Ashby DR, Gale DP, Busbridge M, et al. Nivelurile plasmatice de hepcidină sunt crescute, dar răspund la terapia cu eritropoietină în boala renală. Rinichi Int. 2009;75:976–981. [PubMed: 19212416]

7. Zaritsky J, Young B, Gales B, et al. Reducerea hepcidinei serice prin hemodializă la copii și adulți. Clin J Am Soc Nephrol. 2010;5:1010–1014. [PubMed: 20299375]

8. Troutt JS, Butterfield AM, Konrad RJ. Concentrațiile de hepcidin-25 sunt semnificativ crescute la pacienții cu boală cronică de rinichi și sunt invers corelate cu ratele estimate de filtrare glomerulară. J Clin Lab Anal. 2013;27:504–510. [PubMed: 24218134]

9. Nemeth E, Tuttle MS, Powelson J, et al. Hepcidina reglează efluxul de fier celular prin legarea feroportinei și inducerea internalizării acesteia. Ştiinţă. 2004;306:2090–2093. [PubMed: 15514116]

10. Ganz T, Bino A, Salusky IB. Mecanismul de acțiune și atributele clinice ale Auryxia ® (citrat feric). Droguri. 2019;79:957–968. [PubMed: 31134521]

11. Froment DP, Molitoris BA, Buddington B, et al. Locul și mecanismul de absorbție gastrointestinală îmbunătățită a aluminiului de către citrat. Rinichi Int. 1989;36:978–984. [PubMed: 2601265]

12. Gupta A Citrat feric hidrat ca liant de fosfat și risc de toxicitate pentru aluminiu. Farmaceutice (Basel). 2014;7:990–998. [PubMed: 25341358]

13. Folgueras AR, de Lara FM, Pendás AM, et al. Serin protează matriptaza legată de membrană-2 (Tmprss6) este un regulator esențial al homeostaziei fierului. Sânge. 2008;112:2539–2545. [PubMed: 18523150]

14. Hanudel MR, Rappaport M, Gabayan V, et al. Creșterea hepcidinei serice contribuie la anemiei bolii cronice de rinichi într-un model murin. hematologică. 2017;102:e85–e88. [PubMed: 27884972]

15. Jia T, Olauson H, Lindberg K, et al. Un model nou de nefropatie tubulointerstițială indusă de adenină la șoareci. BMC Nephrol. 2013;14:116. [PubMed: 23718816]

16. Tamura M, Aizawa R, Hori M, et al. Disfuncția renală progresivă și infiltrarea macrofagelor în fibroza interstițială într-un model de șoarece cu nefrită tubulointerstițială indusă de adenină. Histochem Cell Biol. 2009;131: 483–490. [PubMed: 19159945]

17. Klinkhammer BM, Djudjaj S, Kunter U, et al. Mecanisme celulare și moleculare ale leziunii renale în nefropatia 2,8-dihidroxiadeninică. J Am Soc Nephrol. 2020;31:799–816. [PubMed: 32086278]

18. Diwan V, Small D, Kauter K, et al. Diferențele de gen în boala renală cronică indusă de adenină și complicațiile cardiovasculare la șobolani. Am J Physiol Renal Physiol. 2014;307:F1169–F1178. [PubMed: 25209863]

19. Kim A, Fung E, Parikh SG și colab. Un model de șoarece de anemie a inflamației: patogeneză complexă cu dependență parțială de hepcidină. Sânge. 2014;123:1129–1136. [PubMed: 24357728]

20. Finberg KE, Whittlesey RL, Fleming MD, et al. Reglarea în jos a semnalizării Bmp/Smad de către Tmprss6 este necesară pentru menținerea homeostaziei sistemice a fierului. Sânge. 2010;115:3817–3826. [PubMed: 20200349]

21. Darshan D, Wilkins SJ, Frazer DM, et al. Expresia redusă a ferroportinei-1 mediază hiposensibilitatea șobolanilor care alăptează la stimuli care reduc absorbția fierului. Gastroenterologie. 2011;141:300–309. [PubMed: 21570398]

22. Galy B, Ferring-Appel D, Becker C și colab. Proteinele reglatoare ale fierului controlează blocarea mucoasei la absorbția intestinală a fierului. Cell Rep. 2013;3:844–857. [PubMed: 23523353]

23. Wilkinson N, Pantopoulos K. Sistemul IRP/IRE in vivo: perspective din modelele de șoarece. Front Pharmacol. 2014;5:176. [PubMed: 25120486]

24. Meijers B, Farré R, Dejongh S și colab. Funcția de barieră intestinală în boala cronică de rinichi. Toxine (Basel). 2018;10:298.

25. Schiavi SC, Tang W, Bracken C, et al. Deleția Npt2b atenuează hiperfosfatemia asociată cu CKD. J Am Soc Nephrol. 2012;23:1691–1700. [PubMed: 22859851]

26. Donovan A, Lima CA, Pinkus JL, et al. Exportatorul de fier ferroportin/Slc40a1 este esențial pentru homeostazia fierului. Cell Metab. 2005;1:191–200. [PubMed: 16054062]

Mark R. Hanudel1, Brian Czaya2, Shirley Wong2, Maxime Rappaport1, Shweta Namjoshi1, Kristine Chua2, Grace Jung2, Victoria Gabayan2, Bo Qiao2, Elizabeta Nemeth2, Tomas Ganz2

1. Departamentul de Pediatrie, David Geffen School of Medicine din UCLA, Los Angeles, California, SUA

2. Departamentul de Medicină, David Geffen School of Medicine din UCLA, Los Angeles, California, SUA