Evaluarea activității anti-oboseală a saponinelor totale din Radix Notoginseng

Xu Yong-xin și Zhang Jian-jun

Colegiul de Educație Fizică, Universitatea Zhengzhou, Zhengzhou, PR China

Pentru mai multe informații: ali.ma@wecistanche.com

Context și obiective:

Au fost raportate mai multe activități biologice ale saponinelor totale ale Radix notoginseng (TSRN), un medicament tradițional chinezesc. Prezentul studiu a fost realizat pentru a investigaactivitate anti-obosealaa TSRN la șoarecii masculi Kunming.

Metode:

Șoarecii au fost împărțiți în patru grupuri. Primul grup desemnat ca grup de control a fost administrat cu apă distilată prin gavaj în fiecare zi. Al doilea, al treilea și al patrulea grup desemnat ca grupuri de tratament TSRN au fost administrate cu TSRN de 20, 40 și, respectiv, 80 mg/kg greutate corporală/zi. Tratamentul a continuat timp de 28 de zile. S-a determinat timpul de înot exhaustiv, lactatul din sânge și conținutul de glicogen tisular al șoarecilor după înot.

Rezultate:

TSRN a prelungit timpul de înot exhaustiv al șoarecilor, a întârziat efectiv creșterea lactatului în sânge, precum și a crescut conținutul de glicogen din țesut.

Interpretare și concluzii:

TSRN s-a arătat promițătoractivitate anti-obosealaîntr-un model animal. Cu toate acestea, sunt necesare studii suplimentare pentru a elucida mecanismul efectului TSRN asupraoboseală.

Cuvinte cheie: Activitate anti-oboseală - lactat - înot - saponine totale ale Radix notoginseng

Panax notoginseng (Burk.) FH Chen este cultivat în toată China de sud-vest, Birmania și Nepal. Rădăcina, partea folosită în mod obișnuit a acestei plante numită Radix notoginseng sau Sanchi, are o istorie lungă ca remediu în medicina tradițională orientală1-3. În China, R. notoginseng este folosit pentru a promova circulația sângelui, pentru a elimina staza sângelui, pentru a induce coagularea sângelui, pentru a calma umflarea, întârziereaoboseală,și ameliorează durerea4,5. R. notoginseng este raportat a fi benefic pentru bolile coronariene, bolile vasculare cerebrale, cancerul, diabetul zaharat, precum și pentru îmbunătățirea învățării și a memoriei în studii experimentale6-8. Aceste efecte terapeutice sunt atribuite ingredientelor sale active, și anume saponine, flavonoide și polizaharide9-11. Saponinele totale de R. notoginseng (TSRN) sunt considerate a fi principalele ingrediente active și sunt un amestec de peste 20 de saponine de tip Dammarane, inclusiv ginsenozide Rg1, Rg2, Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rh, F2 şi notoginsenozid R1, R2, R3, R4, R6, Fab, Fc, Fe, etc12. Deși sunt cunoscute multe activități biologice și funcții farmacologice ale TSRN. Se știe că au existat studii limitate care investighează efectele acestuia asupraoboseala fizica. Prin urmare, studiul de față a fost conceput pentru a investigaactivitate antiobosealade saponine totale de R. notoginseng într-un model de șobolan.

Material și metode

Studiul a fost realizat în Laboratorul de Biochimie, Universitatea Zhengzhou (Zhengzhou, China). Materiale vegetale: Proba uscată de R. notoginseng a fost obținută de la Henan Chinese Herbal Medicine Company, (Zhengzhou, China) și a fost autentificată de Departamentul de Botanică, Universitatea Zhengzhou (Zhengzhou, China.). Proba a fost identificată prin caracteristici macro-morfologice și microscopice și cromatografie în strat subțire (TLC). Pe baza Farmacopeei Chineze, a fost identificat ca rădăcină a

Panax notoginseng (Burk.) FH Chen. Prepararea saponinelor totale de R. notoginseng (TSRN):

R. notoginseng uscat a fost măcinat în pulbere și trecut printr-o sită cu 40 ochiuri. TSRN a fost preparat prin metoda lui Sun et al13. Pe scurt, probele alimentate (1 kg) au fost extrase cu 70% etanol la 100 de grade (3 x 4 l) și concentrate în vid (40 de grade) pentru a evapora solventul pentru a da un volum mic. După extragerea cu eter (3 x 0,5 l), porţiunea de strat de apă a fost extrasă cu n-Butanol până când stratul de n-Butanol a devenit incolor. Soluţia de n-butanol a fost concentrată şi uscată în vid (60 de grade). Extractul uscat a fost supus cromatografiei pe coloană cu rășină D101, spălat cu H20 și eluat cu etanol pentru a da TSRN. TSRN a conținut 64,3 ± 1,15 procente de notoginsenozidă determinată prin cromatografie în strat subțire și metoda spectrofotometrică.

Animale:

Șoarecii Kunming masculi, cântărind între 18- 22 g, au fost obținuți de la Centrul pentru animale de laborator, Colegiul Medical al Universității Zhengzhou (Zhengzhou, China) și au fost hrăniți cu o dietă comercială și apă ad libitum. Dieta comercială a constat din 12% grăsimi, 60% carbohidrați și 28% proteine. Animalele au fost găzduite sub un ciclu lumină/întuneric de 12-h la o temperatură de 22 ± 1 grad și o umiditate de 50 ± 5 la sută. Șoarecii au fost lăsați să se aclimatizeze la mediul de laborator timp de cel puțin 1 săptămână înainte de experimente. Autorizația etică pentru efectuarea experimentelor pe animale a fost obținută de la Comitetul Instituțional de Etică a Animalelor.

Gruparea animalelor:

Nouăzeci și șase de șoareci au fost împărțiți aleatoriu în patru grupuri, fiecare constând din 24 de șoareci. Primul grup desemnat ca grup de control (Martor) a fost administrat cu apă distilată prin gavaj în fiecare zi. Al doilea, al treilea și al patrulea grup desemnat ca grupuri de tratament TSRN au fost administrate cu TSRN de 20, 40 și, respectiv, 80 mg/kg corp/greutate zi. Administrarea de apă distilată sau TSRN a fost continuată timp de 28 de zile. Dozele de TSRN și 28 de zile de timp de tratament utilizate în acest studiu au fost confirmate a fi adecvate și eficiente la șoarecii testați, conform experimentelor preliminare.

Test de înot exhaustiv:

După tratamentul final cu TSRN sau apă distilată, șoarecii au fost lăsați să se odihnească timp de 30 de minute. Apoi, opt șoareci au fost scoși din fiecare grup pentru un test de înot exhaustiv. Animalele au fost plasate în rezervorul de înot (50 × 50 × 40 cm) la 30 cm adâncime cu apă menținută la 25 ± 2 grade. Coada fiecărui șoarece a fost încărcată cu un mănunchi de bucăți de plumb, care reprezenta 10 la sută din greutatea corporală. Epuizarea a fost determinată prin observarea pierderii mișcărilor coordonate și nerevenirea la suprafață în 10 sec14. Timpul de înot a fost imediat înregistrat.

Măsurarea parametrilor biochimici legați de oboseală:

După tratamentul final cu TSRN sau apă distilată, șoarecii au fost lăsați să se odihnească timp de 30 de minute. Apoi, opt șoareci au fost scoși din fiecare grup pentru analize ale lactatului din sânge. Șoarecii au fost forțați să înoate timp de 30 de minute după încărcarea greutății (2 procente din greutatea corporală), iar sângele a fost colectat din vena cozii înainte și după înot. Conținutul de lactat din sânge a fost măsurat conform procedurilor recomandate furnizate de trusa de diagnosticare comercială (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Jiangsu, China). Restul de opt șoareci au fost scoși din fiecare grup pentru analize de glicogen tisular. Șoarecii au fost forțați să înoate timp de 90 de minute fără încărcături. După odihnă timp de o oră, șoarecii au fost uciși prin luxație cervicală sub anestezie. Au fost recoltați ficatul și mușchii gastrocnemius15. Conținutul de glicogen din țesut a fost testat conform procedurilor recomandate furnizate de trusa de diagnosticare comercială (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Jiangsu, China).

analize statistice

: Toate testele au fost efectuate în trei exemplare. Datele experimentale au fost exprimate ca medie ± abatere standard. Analiza unidirecțională a varianței (ANOVA), LSD și testele Dunnett T3 au fost efectuate pentru a determina diferența semnificativă între eșantioane în intervalul de încredere de 95%, utilizând software-ul SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, STATELE UNITE ALE AMERICII).

Rezultate

Efectele TSRN asupra timpului de înot exhaustiv al șoarecilor:

Timpul de înot exhaustiv al grupului al treilea și al patrulea a crescut semnificativ (P<0.05) when="" compared="" with="" the="" control="" group.="" however,="" the="" exhaustive="" swimming="" time="" of="" the="" second="" group="" showed="" no="" significant="" changes="" compared="" with="" the="" control="" group="" (fig.="" 1).="" the="" swimming="" time="" of="" the="" second,="" third,="" and="" fourth="" groups="" increased="" by="" 21.15,="" 27.41,="" and="" 34.01="" percent,="" respectively.="">

Efectele TSRN asupra conținutului de lactat din sânge la șoareci după înot:

Nu a existat nicio diferență semnificativă în conținutul de lactat din sânge între grupurile de tratament cu TSRN și grupul de control înainte de înot. După înot, conținutul de lactat din sânge al fiecărui grup de tratament cu TSRN a scăzut semnificativ (P<0.05) when="" compared="" to="" the="" control="" group="" (fig.="" 2).="" the="" results="" indicated="" that="" the="" blood="" lactate="" contents="" of="" the="" second,="" third="" and="" fourth="" groups="" decreased="" by="" 47.14,="" 57.59,="" and="" 61.96="" percent,="">

Efectele TSRN asupra conținutului de glicogen tisular al șoarecilor după înot:

După înot, conținutul de glicogen hepatic și muscular al fiecărui grup de tratament cu TSRN a crescut semnificativ (P<0.05) when="" compared="" with="" that="" of="" the="" control="" group="" (fig.="" 3).="" the="" liver="" glycogen="" contents="" of="" tsrn="" treatment="" groups="" increased="" by="" 58.12,="" 115.84,="" and="" 153.58="" percent,="" respectively.="" the="" muscle="" glycogen="" contents="" of="" treatment="" groups="" increased="" by="" 58.54,="" 83.74,="" and="" 73.98="" percent,="">

Discuţie

Prezentul studiu a fost conceput pentru a investiga activitatea anti-oboseală a saponinelor totale ale R. notoginseng (TSRN). Înotul forțat al animalelor a fost folosit ca criteriu al capacității lor fizice de muncă. Multe studii au subliniat că înotul are avantaje față de alte forme de exerciții, inclusiv banda de alergare16-19. Pentru a standardiza volumul de muncă și a reduce timpul de înot, s-au adăugat greutăți la anumite procente de greutate corporală pe pieptul sau coada animalului17,20. Studiul de față a arătat că TSRN a prelungit timpul de înot exhaustiv al șoarecilor, ceea ce a indicat că TSRN a avut activitate anti-oboseală și ar putea crește toleranța la efort. Pentru a explora mecanismele, unii parametri biochimici au fost determinați la șoareci după înot. Lactatul din sânge este produsul de glicoliză al carbohidraților în condiții anaerobe, iar glicoliza este principala sursă de energie pentru exerciții fizice intense într-un timp scurt21,22. Astfel, lactatul din sânge este unul dintre indicatorii importanți pentru aprecierea gradului de oboseală atletică. În studiul de față, TSRN a întârziat efectiv creșterea lactatului în sânge și apariția oboselii. Energia pentru exercițiu este derivată inițial din descompunerea glicogenului, după efortul intens, glicogenul muscular va fi epuizat, iar mai târziu, energia va veni din glucoza circulantă eliberată de ficat. Astfel, conținutul de glicogen hepatic și muscular sunt parametri sensibili legați de oboseală23-25. În studiul de față, TSRN a crescut semnificativ conținutul de glicogen tisular al șoarecilor după înot. În concluzie, rezultatele au sugerat că TSRN a avut activitate anti-oboseală, care a prelungit timpul de înot exhaustiv al șoarecilor, a întârziat efectiv creșterea lactatului în sânge, precum și a crescut conținutul de glicogen din țesut. Sunt necesare studii suplimentare pentru a elucida mecanismul exact al efectului TSRN asupra oboselii.

Acesta este produsul nostru anti-oboseală! Faceți clic pe imagine pentru doza de cistanche tubulosa

Referințe

1. Wang CZ, Xie JT, Zhang B, Ni M, Fishbein A, Aung HH și colab. Efectele chimiopreventive ale Panax notoginseng și ale constituenților săi majori asupra celulelor cancerului colorectal uman SW480. Int J Oncol 2007; 31: 1149-56.

2. Gupta YK, Briyal S, Gulati A. Potențialul terapeutic al medicamentelor pe bază de plante în ischemia cerebrală. Indian J Physiol Pharmacol 2010; 54: 99-122.

3. Sungnoon R, Chattipakorn N. Efectele anti-aritmice ale medicinei pe bază de plante. Indian Heart J 2005; 57: 109-13.

4. Choi RC, Jiang Z, Xie HQ, Cheung AW, Lau DT, Fu Q și colab. Efectele antioxidante ale florii bienale de Panax notoginseng împotriva citotoxicității induse de H2O2-în celulele PC12 cultivate. Chin Med 2010; 5:38.

5. Lei XL, Chiou GC. Farmacologia cardiovasculară a lui Panax notoginseng (Burk) FH Chen și Salvia miltiorrhiza. Am J Chin Med 1986; 14: 145-52.

6. Chan P, Thomas GN, Tomlinson B. Efectele protectoare ale trioleinei extrase din Panax notoginseng împotriva bolilor cardiovasculare. Planta Med 2002; 68: 1024-8.

7. Kim HC, Shin EJ, Jang CG, Lee MK, Eun JS, Hong JT și colab. Acțiunea farmacologică a Panax ginseng asupra toxicităților comportamentale induse de agenții psihotropi. Arch Pharm Res 2005; 28: 995-1001.

8. Chuang CM, Hsieh CL, Lin HY, Lin JG. Panax notoginseng Burk atenuează afectarea funcțiilor de învățare și memorie și crește celulele imunoreactive ED1, BDNF și beta-secretază la șobolanii răniți în stadiul cronic de ischemie-reperfuzie. Am J Chin Med 2008; 36 : 685-93.

9. Wu W, Zhang XM, Liu PM, Li JM, Wang JF. Efectele saponinei Panax notoginseng Rg1 asupra proprietăților electrofiziologice cardiace și a pragului de fibrilație ventriculară la câini. Acta Pharm Sin 1995; 16: 459-63.

10. Chen JC, Chen LD, Tsauer W, Tsai CC, Chen BC, Chen YJ. Efectele Ginsenoside Rb2 și Rc asupra motilității inferioare a spermei umane in vitro. Am J Chin Med 2001; 29: 155-60.

11. Wei JX, Wang JF, Chang LY, Du YC. Studii chimice ale Sanchi Panax notoginseng I: Studii asupra constituenților firelor de păr de rădăcină Sanchi. Acta Pharm Sin 1980; 15: 359-64.

12. Li X, Wang G, Sun J, Hao H, Xiong Y, Yan B și colab. Studiu de farmacocinetică și biodisponibilitate absolută a Panax notoginsenoside total, un medicament tradițional chinezesc (TCM) cu mai mulți constituenți tipic la șobolani. Biol Pharm Bull 2007;

13. Sun HX, Pan HJ, Pan YJ. Activitățile hemolitice și efectul imunologic adjuvant al Panax nu saponinele de ginseng. Acta Pharmacol Sin 2003; 24: 1150-4.

14. Wu JL, Wu QP, Huang JM, Chen R, Cai M, Tan JB. Efectele L-malatului asupra rezistenței fizice și activităților enzimelor legate de naveta malat-aspartat în ficatul șoarecilor. Physiol Res 2007; 56: 213-20.

15. Feng H, Ma HB, Lin HY. Activitatea antioboseală a extractelor de apă din frunza Toona sinensis Roemer și modificările legate de exerciții fizice ale peroxidării lipidelor la exercițiile de anduranță. J Med Plants Res 2009; 3: 949-54.

16. Matsumoto K, Ishihara K, Tanaka K, Inoue K, Fushiki T. O piscină cu curent reglabil pentru evaluarea capacității de rezistență a șoarecilor. J Appl Physiol 1996; 81: 1843-9.

17. Mizunoya W, Oyaizu S, Ishihara K, Fushiki T. Protocol pentru măsurarea capacității de rezistență a șoarecilor într-o piscină cu curent reglabil. Biosci Biotechnol Biochem 2002; 66: 1133-6.

18. Kamakura M, Mitani N, Fukuda T, Fukushima M. Efectul antifatigue al laptisorului de matca proaspat la soareci. J Nutr Sci Vitaminol 2001; 47: 394-401.

19. Jung KA, Han D, Kwon EK, Lee CH, Kim YE. Efectul antioboseală al extractului de Rubus coreanus Miquel la șoareci. J Med Food 2007; 10: 689-93.

20. Ascensão A, Magalhães J, Soares J, Ferreira R, Neuparth M, Marques F, et al. Antrenamentul de anduranță atenuează daunele oxidative cardiace induse de doxorubicină la șoareci. Int J Cardiol 2005; 100 : 451-60.

21. Yu B, Lu ZX, Bie XM, Lu FX, Huang XQ. Activitatea de captare și antioboseală a peptidelor de soia degresate fermentate. Eur Food Res Technol 2008; 226: 415-21.

22. Tang KJ, Nie RX, Jing LJ, Chen QS. Activitatea anti-oboseală atletică a saponinelor (Ginsenozide) din ginsengul american (Panax quinquefolium L.). Afr J Pharm Pharmacol 2009; 3: 301-6.

23. Suh SH, Paik IY, Jacobs K. Reglarea homeostaziei glicemiei în timpul exercițiului prelungit. Mol Cells 2007; 23 : 272-9.

24. Wei W, Zheng LY, Yu MY, Jiang N, Yang ZR, Luo X. Activitatea anti-oboseală a extractului din fermentația submersă a Ganoderma lucidum folosind Radix astragali ca substrat. J Anim Plant Sci 2010; 6: 677-84.

25. Shang HP, Cao SH, Wang JH, Putheti R. Glabridin din lemn dulce din plante chinezești inhibă oboseala la șoareci. Afr J Trad CAM 2010; 7: 17-23.