Parametrii de extracție și metodele de uscare a Cistanche Deserticola

Cistanche este Cistanche deserticola YC Ma orCistanche tubulosa (Schenk) Wighttulpină cărnoasă uscată cu frunze solzoase ale plantei OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. Principalul ingredient activ al Cistanche deserticola este glicozidele de feniletanol [2-4]. Studiile farmacologice au arătat că are funcțiile deafrodisiac, îmbunătățirea imunității, șisporirea memoriei[4-9].

În ultimii ani, metodologia suprafeței de răspuns a fost utilizată pe scară largă în extragerea medicinei tradiționale chineze [{{0}}]. Metoda suprafeței de răspuns are avantajele inerente ale acurateței de detecție ridicate, un număr mai mic de experimente necesare, predicția precisă a modelelor funcționale și capacitatea de a reflecta relația dintre factori și valorile prezise [15-17]. Prin urmare, acest experiment folosește scorul cuprinzător al conținutului celor cinci glicozide de feniletanol ca valoare de răspuns și utilizează software-ul Design-Expert 8.0.6.1 pentru a proiecta experimentul, a optimiza procesul de extracție a Cistanche deserticola și a furniza informații pentru identificarea și stabilirea standardelor de calitate aleCistanche deșert.

În prezent, indexulcomponente echinaceaside și verbascosidesunt subiecte fierbinți de cercetare în tehnologia de extracție și prelucrare aCistanche deșert. Ediția din 2015 a Farmacopeei Chineze stipulează că metoda de procesare a Cistanche deserticola este „înlăturarea impurităților, spălarea, umezirea, tăierea în felii groase și uscarea”. [1], nu există reglementări clare cu privire la metoda de uscare. Prin urmare, acest experiment a folosit opt ​​metode diferite de uscare, inclusiv uscare la soare, uscare la umbră, uscare în cuptor (40, 60, 80, 100, 120 de grade) și uscare prin congelare, pentru a procesa Cistanche deserticola [18], care a furnizat baza teoretică pentru procesul de uscare a Cistanche deserticola.

Despre îndrumare.

EXTRACT DE CISTANCHE CU 30% ECHINCAOSID

1 Materiale și instrumente

Cistanche deserticola proaspătă a fost recoltată în octombrie 2018. Locul de origine este localitatea Mitan, județul Minqin, Baiyin, provincia Gansu. Profesorul asociat Guo Yehong de la Universitatea de Agricultură Gansu a identificat-o drept Cistanche deserticola YC Ma, o tulpină cărnoasă cu frunze de solz. Substanțe de referință echinaceaside (număr de lot 82854-37-3, fracție de masă mai mare sau egală cu 98%), cistancheaside A (număr de lot 93236-42-1, fracție de masă mai mare sau egală cu 95%), verbascozidă (număr de lot { {5}}, fracție de masă mai mare sau egală cu 98%), izomurabazin (număr lot 61303-13-7, fracție de masă mai mare sau egală cu 98%), 2′-acetil verbascozidă (număr lot 94492-24-7 , fracția de masă Mai mare sau egală cu 95%) au fost achiziționate de la Chengdu Pu. Feide Biotechnology Co., Ltd.; acidul formic și metanolul sunt de calitate cromatografică, Compania Merck din Germania; apa este apă purificată, iar alți reactivi sunt de calitate analitică.

Cromatograf lichid Waters Acquity, detector PDA, stație de lucru pentru cromatografie Empower și sistem de management al solvenților cuaternari; KQ-100E curățător cu ultrasunete, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Companie; Balanță analitică AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; Liofilizator LyoQuest-85, Telstar, Spania.

2 Metode și rezultate

2.1 Prepararea soluției de referință

Cântăriți cu precizie cantitățile adecvate deechinaceaside, cistancheoside A, verbascozid, isorbascozid, și 2'-acetil verbascozide standarde de referință și adăugați 70% metanol pentru a obține concentrațiile de masă 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 și 0,48 mg/mL soluție mixtă de referință.

2.2 Condiții cromatografice ale Cistanche deserticola

Simetria apelor C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm); temperatura coloanei 30 grade, debit volumic 1,0 ml/min; faza mobilă este metanol-0.1% soluție apoasă de acid formic, gradient de eluare: 0~12 min, 29%~34% metanol; 12-40 min, 34%-40% metanol; 30-35 min, 40%-35% metanol; 35-40 min, 30% metanol;

1-echinacozidă 2-cistanche A 3-verbascozidă 4-izoacteozidă 5-2′-acetilacteozidă

Fig. 1 HPLC a probei mixte de referință (A) și C. deserticola (B)

2.3 Prepararea soluției de testare

Se cântărește cu precizie 1 g de pulbere uscată de Cistanche deserticola într-un balon Erlenmeyer (trecut printr-o sită cu plasă), se adaugă 50 ml de metanol 50%, se cântărește masa, ultrasonic la 40 kHz la 150 W, se răcește la temperatura camerei și alcătuiți masa pentru a o obține.

2.4 Investigarea relației liniare

Luați {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4 și 8 ml din soluția de referință amestecată de mai sus într-un 10 ml balon cotat și adăugați 70% metanol la semn. Extrageți cu precizie 10 μL și măsurați în conformitate cu condițiile cromatografice de „2.2”. Concentrația de masă este abscisa (X), iar aria vârfului este ordonata (Y). Efectuați regresia liniară și ecuațiile de regresie sunt: ​​Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.{999 5, interval liniar 10,4~832,0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, interval liniar 6.3-504,0 ug/mL; Izomurabazin Y＝92 831 Glicozidă Y{=79 207 X{-304 428, r=0.{999 4, interval liniar 4,8~384,0 ug/mL.

2.5 Revizuirea metodologică

2.5.1 Inspecție de precizie

Luați 20 μL din soluția mixtă de referință din punctul "2.1" și injectați de 6 ori continuu pentru a măsura zonele de vârf ale echinaceasidei, cistancheaside A, verbascozidei, izorebascozidei și 2'-acetilverbascozidei. RSD-urile sunt de 0,23% respectiv. , {{10}},71%, 0,59%, 0,41%, 0,29%, indicând faptul că instrumentul are o precizie bună.

2.5.2 Test de repetabilitate

Se iau 6 porții din aceeași probă de Cistanche deserticola, se prepară soluția de testare conform punctului „2.3”, se injectează proba în condițiile cromatografice ale articolului „2.2” și se măsoară aria vârfului. Rezultate Fracțiile de masă medii de echinaceaside, cistancheozidă A, verbascozidă, izorebascozidă și 2′-acetil verbascozidă au fost de 1,83%, 0,21%, 2,34%, 0,13% și {{15} }},68%, respectiv, iar RSD-urile au fost de 1,32. %, 0,83%, 1,24%, 2,19%,

0,78%, ceea ce indică faptul că metoda are o repetabilitate bună.

2.5.3 Test de stabilitate

Determinați stabilitatea aceleiași soluții de testare (preparată conform „2.3”) la 0, 2, 4, 8, 12, 24 și 48 de ore pentru a obține echinaceaside, cistancheozidă A, verbascozidă și izolebascozidă. , aria vârfului 2′-acetil verbascozid, RSD au fost 0,58%, 0,21%, 1,58%, 1,46%, respectiv 2,19%, indicând că soluția de testat a fost stabilă în 48 de ore.

2.5.4 Test de recuperare a probei

Luați 1 g din 6 mostre de Cistanche deserticola cu conținut cunoscut și adăugați cu precizie o anumită cantitate de soluție mixtă de referință (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.{86 mg. /mL, Verbascozidă 2,17 mg/mL, Isolebascozidă 0,79 mg /mL, 2′-acetil verbascozidă {0,91 mg/mL), se adaugă 70% metanol până la 50 mL și injectați probe în conformitate cu condițiile cromatografice din „2.2”. Recuperările medii măsurate sunt de 101,52%, 99,21% și, respectiv, 102,62%. , 98,62%, 97,36%, RSD sunt 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, respectiv 1,13%, iar rata de recuperare a probei este bună.

Cistanche este o planta tonica binecunoscuta care poate hrani si proteja rinichii. În teoria medicinei tradiționale chineze, Cistanche este cea mai bună plantă pentru rinichi. Cistanche este bogat în echinacozide, acteozide și flavonoide. Aceste ingrediente eficiente din Cistanche pot reduce apoptoza celulelor renale și pot crește proliferarea celulelor renale. Prin urmare, Cistanche este un supliment natural pentru rinichi.