Mecanisme moleculare ale geduninei anti-melanogenice derivate din arborele de neem

Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Hwang-Ju Jeon 1, Kyeongnam Kim 1, Chaeeun Kim 2, Myoung-Jin Kim 1, Tae-Oh Kim 3,4,5,† și Sung-Eun Lee 1,2,*,†

Abstract:Melanogeneza reprezintă o serie de procese care produc melanina, un pigment protector al pielii (împotriva razelor ultraviolete) și determină culoarea pielii umane. Produsele chimice care reduc producția de melanină au fost întotdeauna solicitate pe piața cosmetică din cauza intereselor de îngrijire a pielii, cum ar fi albirea. Principalul mecanism de inhibare a producției de melanină este inhibarea tirozinazei (TYR), o enzimă cheie pentru melanogeneză. Aici, am evaluat genuine (Ged), un limonoid reprezentativ, pentru acțiunea sa anti-melanogeneză. Producția de melanină in vitro a fost stimulată de hormonul de stimulare a alfa-melanocitelor (-MSH) în celulele melanomului de șoarece B16F10. Ged a redus producția de melanină stimulată de MSH, inhibând activitatea TYR și cantitatea de proteine. Am confirmat acest rezultat in vivo într-un model de pește-zebră pentru melanogeneză. Nu a existat niciun semn de toxicitate și malformație a embrionilor de pește-zebră în timpul dezvoltării în toate concentrațiile tratate. Ged a redus numărul de puncte pigmentare ale embrionilor de pește zebră și conținutul de melanină al embrionilor. Concentrația foarte activă de Ged (100 pM) a fost mult mai mică decât martorul pozitiv, acid kojic (8 mM). Prin urmare, Ged ar putea fi un candidat fascinant pentru reactivi anti-melanogeneză.

Cuvinte cheie: MITF; factor de transcripție asociat microftalmiei; TYR; tirozinaza; DQ; dopachinonă;TRP-1; proteina 1 înrudită cu tirozinaza; TRP-2; proteina 2 înrudită cu tirozinaza; MC1R; receptorul melanocortinei 1; -MSH; -hormon de stimulare a melanocitelor; ACTH; hormon adrenocorticotrop; ASP; proteină agoutisemnalizatoare; tabără; adenozin monofosfat ciclic; CREB; element de răspuns cAMP

Cistanche: cistanche amway

1. Introducere

Melanina este sintetizată în melanozomii, organele asemănătoare lizozomului ale melanocitelor. În melanozom, melanina este produsă în doi pigmenți, eumelanina și feomelanina, reprezentând maro-negru și, respectiv, roșu-galben [1]. Sinteza acestor melaninpigmente pornește de la precursorul, L-tirozină, cu reacția de oxidare a L-tirozinei într-un compus numit dopachinonă (DQ) și L-DOPA [2]. În această etapă de oxidare, tirozinaza (TYR) acționează ca o enzimă limitatoare de viteză a căii generale de biosinteză a melaninei [2,3]. TRP-1și TRP-2, strâns legate de proteinele melanogenezei, catalizează calea de biosinteză a eumelaninei și stabilizează și induc activitatea TYR [1]. Procesul de producere a melaninpigmenților (numit melanogeneză) are loc în melanozomul melanocitelor, un loc de sinteză și depozitare a formelaninei [4]. În calea de semnalizare a melanogenezei, receptorul melanocortin1 (MC1R) este un membru al receptorilor cuplați cu proteina G. MCIR este un punct de plecare pentru semnalizarea melanogenezei și este activat de agoniştii MC1R, cum ar fi un hormon de stimulare a melanocitelor (-MSH), hormonul adrenocorticotrop (ACTH) și proteina de semnalizare agouti (ASP) [1,2]. Activarea căii de semnalizare -MSH-MC1R crește concentrația de adenozinmonofosfat ciclic (cAMP) și fosforilează elementul de răspuns cAMP (CREB). CREB fosforilat induce nivelul proteic al factorului de transcripție asociat microftalmiei (MITF), un factor de transcripție care reglează genii înrudiți cu sinteza melaninei, TYR, proteina înrudită cu tirozinaza-1 (TRP{-1) și proteina înrudită cu tirozinaza -2 (TRP{-2) prin legarea casetei M a acestor gene [1,5,6]. Dintre cei cinci receptori de melanocortină, MC1R are cele mai abundente melanocite. Reglează în primul rând producția de eumelanină (pigment negru-maro) prin activarea MC1R atunci când agoniştii acestui receptor, cum ar fi a-MSH și ACTH, sunt comutați la acest receptor [2,4,7].

Deși există diferențe între mamifere și pești, peștii zebra au o extracopie a MC5R și MC3R, pe care peștele-puffer nu o posedă [7], iar această cale de semnalizare încă există la peștele zebra și funcționează exact ca și în melanocitele de mamifere [7]. numărul de studii privind inhibarea formării pigmentului de melanină a crescut datorită avantajelor sale de cercetare, cum ar fi dezvoltarea rapidă la embrioni în stadiu incipient și ușurința de observare [8-11]. În aceste fenomene, multe studii anterioare au descoperit că inhibarea acestei căi de semnalizare reduce producția de melanină și au găsit mai mulți inhibitori, inclusiv bisabolol-Angelone, 4-hidroxi-3-metoxicinamaldehida și difenil-metilen-hidrazină carbotiamină [12]. –14].

Gedunin (Ged), un bine-cunoscut inhibitor al proteinei de șoc termic 90, este un limonoid, găsit în genurile plantei Meliaceae. Acest limonoid este abundent în principal în epicarpul fructelor de arbore de neem din India (Azadirachta indica) și are diverse activități biologice, inclusiv anticancer, antimalaric, antiinflamator, antidiabetic, antialergic, insecticid, erbicid și antifungic [15-18]. Nu există niciun raport despre mecanismul efectului anti-melanogen al lui Ged.

Ca medicament medicinal sau agent cosmetic candidat pentru a trata bolile legate de melanină sau modificările de culoare a pielii, Ged ar putea avea avantaje datorită proprietăților sale sigure, care apar în mod natural [19]. Efectul anti-melanogenic al Ged a fost evaluat in vitro și in vivo folosind celule de melanom de șoarece B16F10 și, respectiv, embrioni de pește-zebra, pentru a găsi un agent candidat adecvat pentru merlan, una dintre cele mai mari părți ale pieței cosmetice comerciale. Simultan, prin pește-zebra, o toxicitate acută De asemenea, a fost efectuat un test pentru a arăta cum Ged poate afecta animalele.

2. Material și metode

2.1. Produse chimice și reactivi

Ged a fost achiziționat de la Microsource Discovery Systems, Inc. (Gayloardville, CT, SUA). Stimulator de melanogeneză, -MSH, compus anti-melanogenic și acid kojic au fost achiziționate de la Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SUA). Toți ceilalți reactivi au fost mai mari decât gradul de biologie moleculară.

extract de cistanche

2.2. Cultură de celule

Linia celulară de melanom-carcinom de șoarece, B16F10, a fost obținută de la American TypeCulture Collection (ATCC, Manassas, VA, SUA) și cultivată cu 10% ser fetal bovin (v/v) și mediu de Eagle modificat cu Dulbecco (GE) furnizat cu penicilină. Healthcare, Chicago, IL, SUA) într-o atmosferă umidificată cu 5% CO2. Celulele au fost cultivate până când confluența a atins 80 la sută și s-au împărțit de trei ori pe săptămână cu un raport de divizare de 1:8. Celulele au fost observate la fiecare 12 ore și au fost verificate modificările morfologice. Numărul de trecere al celulelor utilizate a fost menținut mic.

2.3. Test de viabilitate celulară

Pentru a evalua efectul proliferativ al Ged asupra liniei celulare de melanom de șoarece B16F10, testul MTS a fost efectuat conform protocolului raportat anterior [20] utilizând kitul CellTiter96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay (Promega, Madison, WI, SUA). Pe scurt, 1 × 103 celule au fost însămânțate în fiecare godeu al plăcii de godeuri 96-și incubate timp de 24 de ore pentru recuperare. După incubare, Ged a fost tratat cu diferite concentrații: 0, 3,12, 6,25, 12.5 25, 50 și 75 pM. După 48 de ore, s-au adăugat 20 µL de soluție de analiză MTS la fiecare godeu care conține 100-µL mediu cu Ged și fără Ged. După o incubare suplimentară timp de 4 ore, absorbanța a fost măsurată la 490 nm folosind un spectrofotometru Multiskan GO (ThermoScientific, Waltham, MA, SUA). Datele de absorbanță au fost normalizate cu controlul și reprezentate ca raport procentual de inhibiție.

2.4. Determinarea conținutului de melanină

Conținutul de melanină extracelular și intracelular a fost determinat după o metodă modificată raportată anterior [21]. Celulele de melanom pretratate -MSH (200 nM) au fost incubate timp de 72 de ore cu și fără acid kojic (200 uM) și Ged (25 și 50 uM). După incubare, mediul de cultură fără roșu fenol a fost colectat și celulele cultivate au fost recoltate cu tampon de liză RIPA. Celulele recoltate au fost centrifugate la 4 °C, 13, 000 rpm timp de 15 min și granule au fost dizolvate în soluție 1 M NaOH, 10% DMSO la 95 °C timp de 2 ore. Absorbanța mediului colectat și a melaninei dizolvate a fost măsurată la 470 nm folosind un spectrofotometru. Toate probele au fost normalizate cu concentrația lor de proteine ​​determinată prin metoda BCA.

2.5. Analiza activității tirozinazei intracelulare

Activitatea tirozinazei celulare a fost determinată prin măsurarea vitezei de oxidare a L-dihidroxifenilalaninei (L-DOPA) așa cum s-a raportat anterior, cu modificări ușoare [22]. Celulele de melanom de șoarece B16F10 au fost pretratate cu 200 nM de -MSH timp de 1 oră, urmată de un tratament cu 200 µM. acid kojic, cu și fără Ged (25 și 50 uM) și incubat timp de 72 ore. După incubare, celulele au fost recoltate cu tampon de liză care conține inhibitor de proteinază și proba a fost centrifugată la 13,000×g, 4 ◦C timp de 15 minute. Supernatantul a fost transferat într-un tub nou. Fiecare probă (20 µL) și 80 µL de 40 mM L-DOPA au fost amestecate într-o placă 96-godeuri și incubate la 37 ◦C timp de 2 ore. Absorbanța la 475 nm de L-DOPA oxidată a fost determinată utilizând un cititor de microplăci. Valoarea absorbanței a fost normalizată cu concentrația de proteine ​​din fiecare probă.

Beneficiul extractului de Cistanche: inhibă exprimarea tirozinazei.

2.6. Izolarea ARN și qRT-PCR

Izolarea ARN total și qRT-PCR au fost realizate conform unei metode descrise anterior de [18]. ARN total a fost extras pe scurt din fiecare probă folosind reactiv Trizol (Ambion, Austin, TX, SUA). Concentrația totală de ARN extras a fost determinată prin absorbanță la 260 nm, iar calitatea ARN total a fost verificată cu un raport de absorbanță de 260:280 și 260:230 nm folosind un cititor de microplăci Multiskan GO (Thermo Scientific). ARN total (5 ug) a fost sintetizat în ADNc cu kit-ul de sinteză a ADNc de primă catenă Maxima (Thermo Scientific) și ADNc a fost sintetizat. Nivelurile de expresie ARNm ale Mitf, Tyr, Trp-1 și Trp-2 au fost determinate folosind Luna Universal qPCR Master Mix (New England Biolabs, Ipswich, MA, SUA) și instrumentul QuantStudio 3 Real-Time PCR ( Applied Biosystems, Foster City, CA, SUA) conform protocolului instructorului. Nivelul de expresie al genelor a fost normalizat cu gliceraldehidă 3-fosfat dehidrogenază (GAPDH).

2.7. Analiza imunoblot

Analiza imunoblot a fost efectuată conform metodelor descrise anterior [23].Proteinele celulelor B16f10 au fost colectate folosind tampon de liză Ceti (Translab, Daejeon, Korea), iar concentrația a fost determinată cu un kit de analiză a proteinei Pierce BCA (Thermo Scientific). O cantitate egală de proteine ​​(30 pg) din fiecare probă a fost încărcată pe un gel de poliacrilamidă-dodecil sulfat de sodiu și electroforezată. După separare, proteinele au fost transferate pe o membrană de nitroceluloză, iar membrana a fost blocată în soluție de lapte degresat 10% timp de 2 ore. Membranele blocate au fost incubate cu anticorp primar peste noapte la 4 ◦ C, urmată de o altă incubare cu anticorp secundar la 26 ◦ C timp de 2 ore. Anticorpii primari și secundari au fost diluați într-un raport de 1:1000 și, respectiv, 1:3000. În cele din urmă, membranele blotate au fost documentate folosind ChemiDoc (Bio-Rad, Hercules, CA, SUA) cu reactiv ECL (SuperSignal, Thermo Scientific). Anticorpii primari și secundari au fost achiziționați de la Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, SUA).

2.8. Testul embrionului pește-zebră

Wild-type zebrafish were thankfully obtained from Professor Tae-Lin Huh, the School of Life Science and Biotechnology, Kyungpook National University, Daegu, Republic of Korea. The strain was kept for more than eight generations in a laboratory condition of 26 ◦C ± 1 ◦C, and a day-to-night ratio of 8:16. General fish care and breeding conditions, as previously described, were followed [24]. Ten groups of zebrafish were mated to obtain embryos with a mating ratio (male: female, 1:2), and among obtained embryos, healthy embryos had >Rata de fertilizare de 80% și au fost selectate și utilizate pentru experiment. Doisprezece embrioni sănătoși din fiecare grup tratat au fost localizați în fiecare godeu al unei plăci 96-godeuri cu și fără Ged (25, 50, 75 și 100 µM) și acid kojic (8 mM) în mediu E3 în stadiul de scut. La 24 de ore post-fertilizare (h/pf), embrionii au fost dechorioonați, iar anomalia a fost verificată la fiecare 24 de ore până la 72 h/pf. Fenotipul embrionilor a fost fotografiat într-o vedere laterală și dorsală pentru a compara diferențele dintre grupuri folosind un microscop vertical BX53 cu DP80CCD (Olympus Life Science Solutions, Waltham, MA, SUA). După imagine, embrionii au fost omogenizați cu tampon de liză Ceti (TransLab) și s-a efectuat determinarea concentrației de melanină, care a fost egală cu determinarea conținutului de melanină din celulele B16F10.

2.9. Analize statistice

Toate analizele statistice prezentate în acest studiu au fost efectuate folosind GraphPad Prismv.8.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, SUA). ANOVA unidirecțional cu testul Tukey a fost utilizat pentru comparații multiple. Toate datele sunt reprezentate ca medie ± abaterile standard. Diferențele semnificative au fost considerate semnificative statistic la p <>

3. Rezultate

3.1. Efectul citotoxic al piperlonguminei în celulele B16F10

Înainte de a investiga efectul anti-melanogenic al Ged, am efectuat un test de viabilitate în linia celulară B16F10 pentru a seta intervalul de doză în acest studiu. În intervalul de concentrație de la 3,12 la 50 pM, celulele nu au prezentat niciun efect inhibitor asupra creșterii, iar proliferarea lor relativă a fost de la 91,0 la sută la 118,7 la sută (Figura 1). În schimb, deși nu a existat o semnificație statistică, grupurile tratate cu 75 pM au avut creșterea ușor inhibată (89,3 la sută; Figura 1). Prin urmare, cea mai mare concentrație a fost stabilită la 50 pM în experimentele rămase pe linia celulară.

Figura 1. Citotoxicitatea geduninei (Ged) în celulele B16F10

3.2. Gedunina inhibă producția de melanină și activitatea tirozinazei intracelulare în celulele de melanom de șoarece B16F10

Am evaluat efectul anti-melanogenic al Ged în celulele melanomului de șoarece B16F10. Agonistul MC1R, -MSH, a indus eficient producția de melanină intracelulară și extracelulară (Figura 2a-c). Culoarea mediilor colectate a fost închisă cu -MSH (Figura 2a). Culoarea a fost estompată odată cu adăugarea de Ged, iar efectul a fost dependent de doză (Figura 2a). În rezultatul conținutului total de melanină, -MSH a crescut producția de melanină în melanocite de aproximativ șapte ori mai mare decât grupul de control și a stimulat scăderea melaninei prin adăugarea de acid kojic, un control pozitiv bine-cunoscut în melanogeneză (Figura 2d). Ged a scurtat, de asemenea, producția de melanină care induc stimuli în melanocite la toate concentrațiile testate în acest studiu (Figura 2d). Mai mult, în testul de activitate a tirozinazei, Ged a arătat un efect inhibitor puternic asupra enzimei de limitare a vitezei, tirozinaza, în melanogeneză (Figura 2e). Activitatea relativă a tirozinazei într-un grup tratat cu 50 pM Ged a scăzut cu 20 la sută și cu 12,24 la sută în comparație cu grupul de control și, respectiv, stimulat cu a-MSH.

Figura 2. Efectul anti-melanogenic al genuinelor (Ged) asupra producției de melanină stimulată de hormonul de stimulare a melanocitelor alfa (-MSH) în celulele B16F10.

3.3. Gedunin reduce expresia genetică legată de melanogeneză indusă de MSH

- MSH (200nM) a indus nivelul mARN de Mitf; un factor de transcripție al melanogenezei; și genele țintă Tyr, Trp-1 și Trp-2 (Figura 3). Tratamentul cu Ged a redus nivelul ARNm al tuturor genelor într-o manieră dependentă de doză la concentrația de 25 și 50 µM (Figura 3). În comparație cu controlul pozitiv, acidul kojic (200 µM), Ged a fost mai eficient în reducerea ARNm. nivelul de gene legate de melanogeneză în celulele B16F10. În plus, nivelul de Mitfand Tyr a scăzut cu 0,10- și de 0,26-ori mai mic decât celulele induse de -MSH, respectiv, la o concentrație de 50 µM (Figura 3a,b). Nivelurile de ARNm reglate în jos ale acestor gene au scăzut nivelul de Tyr și au redus cantitatea de producție de melanină TYR mai puțin decât grupul de control.

Figura 3. Efectul reducerii asupra genelor legate de melanogeneză.

3.4. Gedunin TYR și TYR-1 reduse

TYR joacă un rol crucial în melanogeneză, iar nivelul de proteine ​​al acestei enzime afectează în mod direct melanogeneza. Am încercat să confirmăm modificarea cantității de proteină, TYR, cauzată de nivelul redus de ARNm prin analiza imunoblot. TYR a fost semnificativ scăzut în comparație cu controlul, iar -MSH a fost tratat în funcție de doză (Figura 4a). În plus, TRP-1, un factor de transcripție esențial al TYR, a fost ușor redus (Figura 4a). Rezultatele au fost mai evidente atunci când fiecare bandă a proteinei a fost normalizată de proteina de întreținere, GAPDH (Figura 4b, c).

Figura 4. Western blotting a celulelor B16F10 induse de hormonul alfa-melanocitelor (-MSH) cu tratament autentic.

3.5. Toxicitatea Geduninei împotriva peștilor zebră în stadiu incipient de dezvoltare

Evaluarea toxicologică a Ged pe stadiul incipient al dezvoltării peștilor zebra a fost efectuată înainte de evaluarea unui test anti-melanogenic al Ged in vivo. Anormalitatea morfologică a embrionilor de pește zebră nu a fost observată în nicio concentrație de Ged tratată (Figura 5a). Concentrațiile testate de Ged, 25, 50, 75 și 100 µM, rata de supraviețuire a grupurilor tratate cu Ged nu a avut diferențe semnificative la 72 de ore din perioada tratată chimic (Figura 5b).

Figura 5. Toxicitatea genuinelor (Ged) asupra peștilor zebra în stadiu incipient de dezvoltare.

3.6. Conținutul redus de melanină cu Gedunin în embrionii de pește-zebră

Deoarece Ged nu are toxicitate pentru dezvoltare la embrionii de pește-zebră, am examinat efectul anti-melanogenic la o serie de concentrații de Ged, 25, 50, 75 și 100 µM. În observația teoptică, am verificat punctele de pește-zebră pigment; Vederea laterală de sus a embrionilor de pește zebră este prezentată în Figura 5a. Acidul kojic are un efect de inhibiție asupra producției de pigment a embrionilor de pește-zebră. De asemenea, embrionii de pește zebra tratați cu Ged au avut mai puține puncte pigmentare pe cap (Figura 6a). În plus, conținutul total de melanină extras din întreg corpul embrionilor de pește zebra a scăzut după expunerea la Ged timp de 72 de ore atât în ​​grupele cu acid kojic, control pozitiv, cât și în grupurile tratate cu Ged (Figura 6b, c)

Figura 6. Efectul genuinei asupra producției de melanină in vivo.

4. Discutie

În acest studiu, au fost evaluate proprietățile de inhibare ale Ged împotriva producției de melanină. Pe baza constatărilor noastre, capacitatea de inhibare a Ged a fost de aproximativ 11,98-ori mai mare decât cea a acidului kojic (Figura 2) și concentrația de Ged ( 50 uM) a fost mai mică decât cea a acidului kojic (200 uM), martor pozitiv. A fost asociată cu o activitate intracelulartirozinazei slăbită, o enzimă care transformă L-Dopa în DQ, precursorul principal al eumelaninei și feomelaninei. Scăderea activității Tyr implică încetinirea proceselor de producție a întregiimelaninei și lipsa ambelor produse finite, eumelanina și feomelanina [1–3]. Nivelurile de transcriere și TYR au fost reglementate de o serie de factori de transcripție: Mitf, Trp-1 și Trp{-2 [1,2]. O cantitate redusă de proteine ​​​​și nivel de ARNm înseamnă MC1R activat prin axa de semnalizare -MSH-MC1R-PKA-CREB de către -MSH a fost reglată în jos cu tratamentul Ged la o concentrație de 25 și 50 µM, în funcție de doză atât în ​​PCR cantitativă, cât și în Western blot. După cum s-a descris anterior, scăderea cantității de MITF duce la o penurie de Tyr, Trp-1 și Trp{-2 printr-o legare mai mică la regiunea promotoare a acestor gene [25-27]. Reducerea acestor factori de transcripție duce TYR la un nivel mai scăzut și inhibă producția de pigment de melanină în celulele B16F10. În plus, rezultatele actuale demonstrează efectul inhibitor TYR al Ged, un alt punct critic al producției de melanină în melanocit. Ged a arătat, de asemenea, un efect de inhibiție asupra producției de pigment în timpul dezvoltării în stadiu incipient al peștilor zebra în modelele in vitro și in vivo. Rezultatele noastre au arătat că tratamentul cu Ged timp de 72 de ore a redus semnificativ embriopigmentarea peștelui zebra. Conținutul total de melanină și nivelurile de ARNm ale genelor înrudite au fost reduse cu prezența Ged, iar tendința acestor rezultate a susținut puternic proprietatea anti-melanogeneză in vitro a Ged.

Mai mult, capacitatea de inhibare a lui Ged a fost mult mai puternică decât acidul kojic, unul dintre cei mai cunoscuți compuși ca reactiv de albire în industria cosmetică [6,28]. Concentrația la care a acționat Ged a fost relativ mai mică decât acidul kojic. În plus, un raport anterior a arătat că un alt reactiv de albire comun, arbutina, a avut un efect anti melanogenic similar cu acidul kojic [2]. Prin urmare, Ged ar trebui considerat ca un reactiv de albire în înlocuirea arbutinei sau acidului kojic utilizat în prezent și ca un medicament anti-melanoma în ceea ce privește proprietățile sale promițătoare.

Proprietățile anti-melanogenice ale Ged au fost sugerate înainte [29,30], dar aceste studii nu s-au concentrat pe mecanismele specifice ale efectului și pur și simplu au observat alterarea efectelor citotoxice și a cantității de producție de melanină in vitro, în timp ce activitatea anti-proliferativă și efectele inhibitoare asupra Expresia HSP 90 a fost evidențiată [31–33]. A fost raportată posibilitatea Ged ca agent anti-melanogenetic; cu toate acestea, aceste studii nu s-au concentrat pe mecanismele specifice ale efectului și au observat pur și simplu modificarea efectelor citotoxice și a cantității de producție de melanină in vitro. Am încercat să determinăm mecanismul la nivel celular prin confirmarea nivelului de ARNm și a cantității de proteine ​​a genelor legate de producția de melanină. Împreună cu rapoartele anterioare, acest studiu a arătat o nouă perspectivă a Gedas, o componentă a ingredientelor cosmetice pentru două beneficii, anticancer și anti-melanogeneză remarcabile, care ar putea fi aplicate atât melanomului indus de UV, cât și acumulării de pigment, în special, în același timp.

Pudră de extract de cistanche: radicali liberi limpezi

5. Concluzii

În concluzie, toate aceste rezultate au arătat că un nou compus, Ged, poate fi utilizat ca reactiv de adepigmentare pentru biosinteza melaninei, care a scurtat proteinele din aval TYR, TRP-1 și TRP-2 cu o cantitate redusă în comparație cu masterul. proteina de reglare, MITF, atât în ​​sistemele in vitro, cât și in vivo ale modelului de pește-zebra.

tablete cistanche