Efectele neuroprotectoare ale a patru glicozide feniletanoide asupra apoptozei induse de H2O2-la celulele PC12 prin calea Nrf2/ARE
Mar 04, 2022
Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Maiquan Li 1, Tao Xu 1, Fei Zhou 1, Mengmeng Wang 1, Huaxin Song 1, Xing Xiao și Baiyi Lu 1,*
1. Introducere
Stresul oxidativ, care este un dezechilibru al homeostaziei antioxidante, induce peroxidarea lipidelor, leziuni ale proteinelor și ADN-ului, îmbătrânirea celulară și moartea celulelor. Acest proces contribuie probabil la mai multe tulburări neurodegenerative, cum ar fi boala Alzheimer (AD), boala Parkinson (PD) și ischemia/reperfuzia [1]. Peroxidul de hidrogen (H2O2), care este una dintre principalele specii reactive de oxigen (ROS), este cunoscut că cauzează peroxidarea lipidelor și deteriorarea ADN-ului [2]. Mai mult, H2O2 este o sursă endogenă de radicali liberi hidroxil care contribuie la nivelul de fond al stresului oxidativ celular [3,4]. Prin urmare, strategiile terapeutice pentru prevenirea apoptozei induse de stresul oxidativ pot avea potențialul în tratamentul bolilor neurodegenerative.
Factorul 2 asociat 2-factorului nuclear eritroid (Nrf2) este un factor de transcripție care este puternic asociat cu stresul oxidativ. Activarea Nrf2 induce transcripția a numeroase gene antioxidante și de detoxifiere, inclusiv hemoxigenaza-1 (HO{-1), NAD(P)H chinona oxidoreductaza 1, antiinflamatoare [13] și imunomodulatoare [14 ] bioactivitati. Osmanthusfragrans este un ingredient comun în mai multe alimente asiatice și a fost consumat de mult timp. Am arătat anterior că extractele de flori O.fragrans au îmbunătățit învățarea și memoria spațială, au inhibat daunele oxidative și au prezentat activități neuroprotectoare în îmbătrânirea indusă de d-galactoză într-un model de șoarece ICR [15]. Salidrozida, acteozida și izoacteozida sunt răspunsul major al PhG pentru activitățile antioxidante ale extractelor de flori O.fragrans [16].
Studiile asupra efectului neuroprotector al PhG au obținut rezultate dezirabile. Salidrozidul a redus semnificativ apoptoza celulară a celulelor PC12 care au fost expuse în MPP plus [17,18]. Acteozidul a atenuat, de asemenea, apoptoza indusă de MPP plus și stresul oxidativ în celulele PC12 [19] și leziunea celulelor SH-SY5Y indusă de A p25-35-[20]. Echinacozidul a fost investigat asupra apoptozei induse de factorul de necroză tumorală-a (TNFa) în celulele SH-SY5Y [21], toxicitatea dopaminergică indusă de MPTP la șoareci [22], culturile primare lezate de glutamat de celule corticale de șobolan [23] și { {19}}Daune induse de OHDA în celulele PC12 [24]. Rezultatele au indicat că PhG-urile au prezentat un efect citoprotector și sunt agenți potențiali pentru tratarea bolilor neurodegenerative. Studiile au arătat că proprietățile antioxidante ale PhG-urilor stau la baza multor alte bioactivități pentru acești compuși [25]. Cu toate acestea, puține studii au investigat mecanismul molecular al PhG împotriva toxicității oxidative.
În studiul nostru, am selectat patru PhG tipice, după cum urmează: salidrozidă (monozaharide feniletanoide), actozidă ( dizaharide feniletanoide), izoacteozidă ( dizaharide feniletanoide) și echinacozidă (trizaharide feniletanoide). Am folosit un model de moarte neuronală folosind celule PC12 diferențiate [26] pentru a investiga efectul protector și mecanismul molecular al PhG asupra modelului de celule PC12 indus de H2O2-. Am demonstrat că PhG-urile au activat calea Nrf2/ARE prin legarea la proteina 1 asociată ECH-like Kelch (Keap1). Acest proces a suprareglat enzimele antioxidante și a crescut rezistența celulelor PC12 la stresul oxidativ.
Tratamentul tulburărilor neurodegenerative:PhG din cistanche
2. Rezultate
2.1. PhGs a suprimat H2O2-Citotoxicitatea indusă în celulele PC12
Au fost testate efectele citotoxice ale H2O2 și PhG (0.1,1,5 și 10 卩g/mL) asupra celulelor PC12. Rezultatele au arătat că H2O2 a indus pierderea viabilității celulelor PC12 în moduri dependente de concentrație și dependente de timp (Figura 1A). Expunerea celulelor PC12 la 200 H2O2 timp de 2 ore a dus la o viabilitate celulară de 57,4%. Pretratarea celulelor cu PhG la 0.1,1, 5 și 10 昭/mL nu a avut niciun efect asupra viabilității celulare (Figura 1B) și a protejat semnificativ celulele PC12 de H2O2-daune induse prin îmbunătățirea viabilitatea celulară ca 9.549-22.141 la sută, 12.092-25.289 la sută, 1.470-9.289 la sută și, respectiv, 3.411-11.441 la sută ( Figura 1C). Cu toate acestea, pretratamentul cu salidrozidă (0,1 ^g/mL), izoacteozidă (0,1, 1, 5 și 10 ^g/ml), echinacozidă (0,1,1 și 5 ^g/mL) nu a arătat nicio diferență semnificativă asupra celulelor induse de HzOz rănire. Pretratarea celulelor cu PhG a ameliorat, de asemenea, caracteristica morfologică indusă de H2O2 (Figura 1D).
Figura 1.PhG-urile au suprimat citotoxicitatea indusă de H2O2-în celulele PC12. Viabilitatea celulară a fost detectată prin testul MTT. Efectul citotoxic al H2O2 (A) și PhGs (B) la diferite concentrații asupra celulelor PC12. (C) PhGs atenuat H2O2-a indus scăderea viabilității celulare. Celulele PC12 au fost incubate cu PhG (0.1 și 10 mg/mL) timp de 24 de ore și apoi incubate cu 200 pM H2O2 pentru încă 2 h după ce PhG-urile au fost îndepărtate. (D) Observație morfologică. Celulele după tratament au fost observate cu un microscop cu contrast de fază (x100), CK: grup normal, H2O2: grup tratat cu H2O2, HL: grup tratat cu doză mică de salidrozidă, HH: grup tratat cu doză mare de salidrozidă, ML: grup tratat cu doză mică de actozidă, MH: grup tratat cu doză mare de actozidă, IL: grup tratat cu izoacteozidă cu doză mică, IH: grup tratat cu izoacteozidă cu doză mare, SL: grup tratat cu doză mică de echinacozidă, SH: grup tratat cu doză mare de echinacozidă. ** p < 0,01="" față="" de="" grupul="" netratat;="" #="" p="">< 0,05,="" faţă="" de="" grupul="" tratat="" cu="" h2o2;="" ##="" p="">< 0,01,="" faţă="" de="" grupul="" tratat="" cu="">
2.2. PhG-urile au suprimat H2O2-acumularea intracelulară indusă de ROS, peroxidarea lipidelor (MDA) și activitățile crescute de superoxid dismutază (SOD) în celulele PC12
Expunerea celulelor PC12 la 200 pM H2O2 timp de 2 ore a crescut nivelurile de ROS, conținutul de MDA și a scăzut activitatea SOD (Figura 2). Pretratamentul cu PhG a atenuat nivelul ROS, salidrozidă și acteozidă, iar doza mare de izoacteozidă și pretratamentul echinacozid a atenuat semnificativ nivelul ROS (p < 0,01).="" pretratamentul="" cu="" salidrozidă="" nu="" a="" arătat="" niciun="" efect="" asupra="" conținutului="" de="" mda,="" dar="" pretratarea="" cu="" actozidă="" a="" atenuat="" semnificativ="" conținutul="" de="" mda="" (p="">< 0,05).="" pretratamentul="" cu="" izoacteozide="" și="" echinacozide="" a="" atenuat="" semnificativ="" conținutul="" de="" mda="" la="" un="" nivel="" mai="">
Figura 2.PhG au blocat acumularea de ROS și MDA și au crescut activitățile SOD în celulele PC12. Celulele PC12 au fost incubate cu PhGs (0.1 și 10 4g/mL) timp de 24 de ore și apoi incubate cu 200 |^M H2O2 pentru încă o dată La 2 ore după ce PhG-urile au fost îndepărtate. (A) PhG-urile au blocat acumularea de ROS și MDA. (B) PhG-urile au blocat acumularea de MDA. (C) PhG-urile au crescut activitățile SOD. CK: grup normal, Model: grup tratat cu H2O2, Salidrozidă: grup tratat cu salidrozidă, Acteozidă: grup tratat cu acteozidă, Isoacteozidă: grup tratat cu izoacteozidă, Echinacozidă: grup tratat cu echinacozidă. ** p < 0,01="" față="" de="" grupul="" netratat;="" #="" p="">< 0,05,="" față="" de="" grupul="" tratat="" cu="" h2o2,="" ##="" p="">< 0,01,="" față="" de="" grupul="" tratat="" cu="">
2.3. Apoptoza indusă de H2O2-PhGs inversat în celulele PC12
Tratamentul cu H2O2 (200 |1M) timp de 2 ore a crescut semnificativ apoptoza în celulele PC12, cu o rată apoptotică totală de până la 16,02% (Figura 3). Cu toate acestea, pretratamentul cu PhG (0,1 și 10 卩g/mL) timp de 24 de ore a scăzut rata apoptozei într-o manieră dependentă de concentrație (p < 0,01).="" salidrozida,="" acteozida,="" izoacteozida="" și="" echinacozida="" au="" scăzut="" semnificativ="" procentul="" de="" apoptoză="" celulară="" cu="" 4,750-6,627="" la="" sută,="" 4,413-5,800="" la="" sută,="" 6,593-10,047="" la="" sută="" și="" 1.530-7,510="" la="" sută,="">
Figura 3. PhG-urile au inversat apoptoza indusă de H2O2-în celulele PC12. Celulele PC12 au fost incubate cu PhG (0.1 și 10 卩g/mL) timp de 24 de ore și apoi incubate cu 2{00 pM H2O2 timp de încă 2 ore după PhG-urile au fost îndepărtate. Apoi, apoptoza a fost măsurată prin citometrie în flux utilizând o sondă fluorescentă PI/FITC. CK: grup normal, Model: grup tratat cu H2O2, Salidrozidă: grup tratat cu salidrozidă, Acteozidă: grup tratat cu acteozidă, Isoacteozidă: grup tratat cu izoacteozidă, Echinacozidă: grup tratat cu echinacozidă. ** p < 0,01="" față="" de="" grupul="" netratat;="" ##="" p="">< 0,01,="" faţă="" de="" grupul="" tratat="" cu="">
2.4. PhGs a inversat H2O2-reglarea negativă indusă a exprimării proteinei HO-1, NQO1, GCLC și GCLM
HO{{0}}, NQO1 și glutamat-cisteină ligaza (GCL) sunt enzime antioxidante celulare importante, iar HO-1, NQO1 și subunitățile catalitice sau modificatoare ale GCL (GCLC sau GCLM) sunt Nrf2-genele din aval reglate [27]. Expresia proteinei HO-1, NQO1, GCLC și GCLM a fost observată după tratament. S-a găsit o diferență evidentă între expresia proteinei HO-1 și NQO1 cu sau fără H2O2 (Figura 6A-C) (p <0.01). phgs="" (0.1="" și="" 10="" p^g/ml)="" au="" inversat="" reglarea="" în="" jos="" indusă="" de="" h2o2-a="" expresiei="" proteinei="" ho-1="" (cu="" excepția="" salidrozidei="" la="" {{32}="" },1="" pg/ml),="" nqo1="" (cu="" excepția="" actozidei="" la="" 0,1="" pg/ml)="" (p=""><{{40}}.01). h2o2="" a="" reglat,="" de="" asemenea,="" expresia="" proteinei="" gclc="" și="" gclm="" (p=""><{46}}.05) (figura="" 6a,d,e).="" phgs="" (0.1="" și="" 10="" pg/ml)="" au="" inversat="" h2o2-reglarea="" în="" jos="" a="" exprimării="" proteinei="" gclc="" (cu="" excepția="" echinacozidei="" la="" 0,1="" pg/ml)="" (p="">< 0,01)="" și="" gclm="" (cu="" excepția="" salidrozidei="" la="" 0,1="" pg/ml)="" (p="">< 0,01).="" apoi,="" inhibitorii="" chimici="" pentru="" ho-1="" au="" fost="" utilizați="" pentru="" a="" evalua="" în="" continuare="" rolurile="" enzimelor="" antioxidante="" în="" reglarea="" protecției="" phg="" împotriva="" citotoxicității="" induse="" de="" h2o2-.="" phgs="" (0,1="" și="" 10="" pg/ml)="" au="" prevenit="" citotoxicitatea="" indusă="" de="" h2o2-,="" dar="" un="" astfel="" de="" efect="" protector="" a="" fost="" inversat="" de="" inhibitorul="" de="" ho{-1="" znpp="" (p="">< 0,01)="" la="" 20="" pm="" (figura="" 6f,="" p="">< 0,01)="">
2.5. Expresia Keap1 și analiza de andocare moleculară
În condiții fiziologice, Keap1 acționează ca o proteină represoare a Nrf2 prin legarea de domeniul Neh2 al Nrf2 și țintirea Nrf2 la o ubiquitin ligază E3 bazată pe Cul3-pentru ubiquitinare și degradare ulterioară de către proteazomul 26S [28]. Capacitatea de legare la Keap1 a PhG a fost evaluată prin analiză de andocare moleculară pentru a investiga mecanismul sub efectul lor antioxidant.
Efect antioxidant: CistanchePhGs
3. Discuție
Am investigat neuroprotecția PhG asupra citotoxicității induse de H2O2 în celulele PC12. Rezultatele arată că pretratamentul cu PhG a suprimat semnificativ citotoxicitatea indusă de HzOz, a atenuat nivelul ROS intracelular, a îmbunătățit nivelul enzimelor antioxidante intracelulare și, în cele din urmă, a inversat citotoxicitatea indusă de H2O2- în celulele PC12. În plus, PhG-urile au crescut activarea transcripțională a Nrf2, au inversat reglarea în jos indusă de HzOz a expresiei proteinei HO-1, NQO1, GCLC și GCLM. În plus, PhG-urile au arătat o potențială interacțiune cu situsul de legare a Nrf2 din proteina Keap1.
În leziunea celulelor PC12 indusă de H2O2-peroxidarea lipidelor, care se referă la degradarea oxidativă a lipidelor, a crescut permeabilitatea membranelor, ducând la deteriorarea celulelor [29]. Formarea MDA este utilizată pe scară largă ca indice al peroxidării lipidelor [30]. H2O2 a îmbunătățit producția de ROS și a epuizat enzimele de apărare antioxidante, cum ar fi SOD, catalaza și GPx. Acest proces duce la stres oxidativ [31], care joacă un rol cheie în cauzalizarea și progresia majorității tulburărilor neurodegenerative. În conformitate cu studiile anterioare, am observat un nivel crescut de ROS, enzime antioxidante intracelulare reduse și apoptoză îmbunătățită a celulelor PC12 după tratamentul cu H2O2. Pretratamentul cu PhG a atenuat semnificativ creșterea ROS intracelulară indusă de HzOz, a îmbunătățit enzimele antioxidante intracelulare și, în cele din urmă, a inversat citotoxicitatea indusă de HzOz în celulele PC12.
Kuang şi colab. [32] au raportat că echinacozidul a arătat un efect neuroprotector semnificativ asupra citotoxicității induse de H2O2-în celulele PC12 prin calea apoptotică mitocondrială. În acest studiu, am descoperit că echinacozida, salidrozida, acteozida și izoacteozida au arătat efecte neuroprotectoare prin îmbunătățirea activității antioxidante a celulelor PC12, deoarece au crescut activarea transcripțională a Nrf2 și au reglat în sus expresia proteinei în aval a HO-1, NQO1, GCLC și GCLM. Numeroase studii au demonstrat în mod clar că activarea genelor țintă Nrf2, în special HO-1, în astrocite și neuroni protejează puternic împotriva inflamației, a leziunilor oxidative și a morții celulare. S-a raportat că sistemul HO-1 este foarte activ în sistemul nervos central, iar modularea sa joacă aparent un rol crucial în patogeneza tulburărilor neurodegenerative [33]. Studii recente au clarificat, de asemenea, rolul Nrf2 în progresia și riscul de PD [9] și Keap1 ca o țintă eficientă pentru reactivarea Nrf2 în AD [34]. Rezultatele susțin noi dovezi pentru Nrf2 ca țintă terapeutică în bolile neurodegenerative.
Analiza de andocare moleculară a arătat că PhG s-ar putea lega de Keap1, cu următoarele capacități de legare: echinacozidă > izoacteozidă > acteozidă > salidrozidă. În concordanță cu aceste rezultate, pretratarea cu PhG a condus la translocarea nucleară Nrf2, cu următoarea expresie a Nrf2 în nucleu: echinacozidă > izoacteozidă * acteozidă > salidrozidă. Am presupus că numărul de glicozide a afectat posibilul mod de legare a PhG și Keap1, iar modul de legare a provocat în continuare eliberarea Nrf2 din Keap1. Acest proces a dus la activarea Nrf2 și a genelor din aval și în cele din urmă protejează celulele PC12 de stresul oxidativ indus de H2O2 -.
Efectele neuroprotectoare ale cistancheiPhGs
4. Materiale și Metode
4.1. Compuși și reactivi chimici
Salidrozidă (nr. CAS {{0}}), actozidă (nr. CAS 61276-17-3), izoacteozidă (nr. CAS 61303-13-7) și echinacozidă (nr. CAS {{3} }) au fost achiziționate de la YYuanye Biotechnology Company (Shanghai, China). PhG a fost dizolvat în PBS pentru a produce o soluție stoc de 10 mg/mL, care a fost depozitată la -20 grade. H2O2 a fost achiziționat de la Aladdin® (Shanghai, China). Mediul RPMI-1640 și serul fetal de bovine au fost achiziționate de la Hyclone (Logan, UT, SUA) și 0,5% tripsină EDTA, penicilină și streptomicina au fost achiziționate de la Keyi (Hangzhou, China). MDA, trusele de diagnostic SOD, MTT și DCFH-DA au fost achiziționate de la Institutul de Biotehnologie Beyotime (Nanjing, Jiangsu, China). Kitul de colorare dublă Annexin V-FITC/PI a fost achiziționat de la Solarbio Life Sciences (Beijing, China). Anticorpii la Nrf2, Histone H3, Keap1, HO-1, NQO1, GCLC, GCLM și p-actină, IgG anti-peroxid de hrean (HRP) anti-șoarece și IgG anti-HRP-Iepure au fost achiziționați de la Abcam (Londra, Marea Britanie). Inhibitorii HO-1 și ZnPP au fost achiziționați de la Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, SUA). RNAiso Plus, Kit de reactiv PrimeScript™RT cu gDNA Eraser și SYBR® Premix Ex Taq™ II au fost cumpărate de la Takara (Shiga, Japonia). Reactivul de transfecție Lipofectamine® RNAiMAX a fost achiziționat de la Thermo Fisher Scientific (Waltham, Marea Britanie). Secvențele siARN Nrf2 au fost după cum urmează: înainte, CCGAAUUACAGUGUCUUAA; iar invers, UUAAGACACCUGUAUUCGG. Între timp, secvențele siRNA de control au fost după cum urmează: înainte, UUCUCCGAACGUGUCACGU; iar invers, ACGUGACACGUUCGGAGAA.
4.2. Cultură de celule
Linia de feocromocitom suprarenal de șoarece (celule PC12) a fost obținută de la Institutul de Biochimie și Biologie Celulară, SIBS, (CAS, Shanghai, China). Celulele au fost menținute în RPMI-1640 (Hyclone) care conține 10 procente de ser fetal bovin (Hyclone), 100 U/ml penicilină și 0,1 mg/ml streptomicină la 37 de grade cu 5% CO2. Mediul a fost schimbat din două în două zile.
4.3. Test de viabilitate celulară
Celulele PC12 au fost însămânțate în plăci de 96-godeuri la 2 x 104 celule/godeu. După atașare, celulele au fost preincubate cu sau fără inhibitor timp de 20 de minute, incubate cu sau fără PhG-uri timp de 24 de ore și apoi incubate cu H2O2 pentru încă 2 ore după ce PhG-urile au fost îndepărtate. După incubare, celulele au fost tratate cu 5 mg/mL MTT timp de 4 ore la 37 grade, iar mediile au fost îndepărtate cu grijă. Cristalele de formazan care s-au format de celulele supraviețuitoare au fost dizolvate în 150 rL de DMSO pentru a genera o culoare albastră [35], iar absorbanța a fost măsurată la 570 nm pe un cititor de plăci. Martorii au utilizat aceeași concentrație de mediu cu DMSO singur. Viabilitatea celulară a fost normalizată ca procent de control.
Concentrațiile de PhG (0.1,1,5 și 10 Rg/mL) au fost alese în funcție de analiza de citotoxicitate a PhG și de efectul citoprotector raportat al echinacozidei [32]. Conform raportului, nu a existat niciun efect de citotoxicitate indicat sub 10 Rg/mL, iar echinacozidul a fost raportat că prezintă efect citoprotector în modelul de celule lezate cu HzOz.
4.4. Test de apoptoză
Apoptoza a fost detectată cu un kit de colorare dublă Annexin V-FITC/PI (Solarbio). Celulele PC12 au fost însămânțate în 6-plăci de godeuri la 2 x 105 celule/godeu. După atașare, celulele au fost tratate cu PhG (0,1 și 10 Rg/mL) timp de 24 de ore și incubate cu H2O2 timp de încă 2 ore după ce PhG-urile au fost îndepărtate. După incubare, celulele au fost spălate în PBS rece, centrifugate de două ori la 1500 rpm timp de 10 minute și resuspendate în 500 rL de tampon de legare. Anexa V marcată cu FITC (5 rL) și iodură de propidiu.
Abrevieri
GCLC glutamat-cisteină ligază-subunitate catalitică
GCLM subunitate modificator catalitic glutamat-cisteină ligază
H2O2 peroxid de hidrogen
HO-1 hem oxigenază 1
Proteina de asociere Keap1 Kelch ECH 1
NQO1 NAD(P)H chinona oxidoreductaza 1
Factorul nuclear Nrf2 eritroid 2-factorul 2 înrudit
PhG salidrozide, acteozide, izoacteozide și echinacozide
Specii reactive de oxigen ROS
ZnPP protoporfirina de zinc
Extract de Cistanche deserticola: PHG de cistanche
Referințe
1. Soare, AY; Chen, YM Stresul oxidativ și tulburările neurodegenerative. J. Biomed. Sci. 1998, 5, 401-414. [CrossRef] [PubMed]
2. Maheshwari, A.; Micro, MM; Aggarwal, A.; Sharma, RK; Nandan, D. Căi implicate în apoptoza celulelor germinale testiculare indusă de H2O2 in vitro. FEBS J. 2009,276, 870-881. [CrossRef] [PubMed]
3. Halliwell, B. Speciile reactive de oxigen și sistemul nervos central. J. Neurochem. 1992, 59,1609-1623. [CrossRef] [PubMed]
4. Richardson, JS; Subbarao, KV; Ang, LC Despre posibilul rol al peroxidării radicalilor liberi indus de fier în degenerarea neuronală în boala Alzheimer. Ann. NY Acad. Sci. 1992, 648, 326-327. [CrossRef] [PubMed]
5. Zhang, DD Studii mecanice ale căii de semnalizare Nrf2-Keap1. Drug Metab. Rev. 2006, 38, 769-789. [CrossRef] [PubMed]
6. Itoh, K.; Tong, KI; Yamamoto, M. Mecanismul molecular care activează calea Nrf2-Keap1 în reglarea răspunsului adaptiv la electrofili. Radic liber. Biol. Med. 2004, 36,1208-1213. [CrossRef] [PubMed]
7. Kong, AN; Owuor, E.; Yu, R.; Hebbar, V.; Chen, C.; Hu, R.; Mandlekar, S. Inducerea enzimelor xenobiotice prin calea map kinazei și elementul de răspuns antioxidant sau electrofil (ARE/EpRE). Drug Metab. Rev. 2001, 33, 255-271. [CrossRef] [PubMed]
8. Buendia, I.; Michalska, P.; Navarro, E.; Gameiro, I.; Egea, J.; Leon, R. Calea Nrf2-ARE: o țintă emergentă împotriva stresului oxidativ și a neuroinflamației în bolile neurodegenerative. Pharmacol. Acolo. 2016, 157, 84-104. [CrossRef] [PubMed]
9. Skibinski, G.; Hwang, V; Ando, DM; Daub, A.; Lee, Alaska; Ravisankar, A.; Modan, S.; Finucane, MM; Shabby, BA; Finkbeiner, S. Nrf2 atenuează neurodegenerarea indusă de LRRK2- și a-sinucleină prin modularea proteostazei. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 2016, 114, 1165-1170. [CrossRef] [PubMed]
10. Jimenez, C.; Riguera, R. Glicozide feniletanoide în plante: structură și activitate biologică. Nat. Prod. Rep. 1994, 11, 591-606. [CrossRef] [PubMed]
11. Georgiev, M.; Alipieva, K.; Orhan, I.; Abrașev, R.; Denev, P.; Angelova, M. Activități antioxidante și inhibitoare de colinesteraze ale Verbascum xanthophoeniceum Griseb. și glicozidele sale feniletanoide. Food Chim. 2011, 128, 100-105. [CrossRef] [PubMed]
12. Li, N.; Wang, J.; Ma, J.; Gu, Z.; Jiang, C.; Yu, L.; Fu, X. Efectele neuroprotective aleCistanches HerbaTerapia la pacientii cu boala Alzheimer moderata. Evid.-Complement bazat. Altern. Med. 2015, 2015,103985. [CrossRef] [PubMed]
13. Liu, YL; El, WJ; Mo, L.; Shi, MF; Zhu, YY; Pan, S.; Li, XR; Xu, QM; Yang, SL Activități antimicrobiene, antiinflamatorii și toxicologia glicozidelor feniletanoide din Monochasma savatieri Franch. ex Maxim. J. Etnofarmacol. 2013,149, 431-437. [CrossRef] [PubMed]
14. Dong, Q.; Yao, J.; Fang, JN; Ding, K. Caracterizarea structurală și activitatea imunologică a două polizaharide extractibile cu apă rece dinCistanche deserticola YC Ma. Glucide. Res. 2007, 342,1343-1349. [CrossRef] [PubMed]
15. Xiong, L.; Mao, S.; Lu, B.; Yang, J.; Zhou, F.; Hu, Y.; Jiang, Y.; Shen, C.; Zhao, Y. Extractul de flori Osmanthusfragrans și acteozidul protejează împotriva îmbătrânirii induse de d-galactoză într-un model de șoarece ICR. J. Med. Food 2016, 19, 54-61. [CrossRef] [PubMed]
16. Jiang, Y.; Mao, S.; Huang, W.; Lu, B.; Cai, Z.; Zhou, F.; Li, M.; Lou, T.; Zhao, Y. Profilurile glicozidelor feniletanoide și activitățile antioxidante ale Osmanthusfragrans Lour. Flori prin UPLC/PDA/MS și model de digestie simulată. J. Agric. Food Chim. 2016, 64, 2459-2466. [CrossRef] [PubMed]
17. Li, X.; Da, X.; Li, X.; Soare, X.; Liang, Q.; Tao, L.; Kang, X.; Chen, J. Salidroside protejează împotriva apoptozei induse de MPP plus în celulele PC12 prin inhibarea căii NO. Brain Res. 2011,1382, 9-18. [CrossRef] [PubMed]
18. Zhang, L.; Ding, W.; Soare, H.; Zhou, Q.; Huang, J.; Li, X.; Xie, Y.; Chen, J. Salidroside protejează celulele PC12 de apoptoza indusă de MPP plus prin activarea căii PI3K/Akt. Food Chim. Toxicol. 2012, 50, 2591-2597. [CrossRef] [PubMed]
19. Sheng, GQ; Zhang, JR; Pu, XP; Ma, J.; Li, CL Efectul protector al verbascozidei asupra neurotoxicității induse de ionul de 1-metil-4- fenilpiridiniu în celulele PC12. EURO. J. Pharmacol. 2002, 451,119-124. [CrossRef]
20. Wang, H.; Xu, Y.; Yan, J.; Zhao, X.; Soare, X.; Zhang, Y.; Guo, J.; Zhu, C. Acteoside protejează celulele neuroblastomului uman SH-SY5Y împotriva leziunilor celulare induse de beta-amiloid. Brain Res. 2009, 1283, 139-147. [CrossRef] [PubMed]
21. Min, D.; Jin, YZ; Yong, J.; Zheng, BL; Yao, HW Echinacoside salvează celulele neuronale SHSY5Y de apoptoza indusă de TNFa. Bărbie. Pharmacol. Taur. 2005, 505,11-18.
22. Zhao, Q.; Gao, JP; Li, WW; Cai, DF Efectele neurotrofice și de neurosalvare ale echinacozidei în modelul de șoarece MPTP subacut al bolii Parkinson. Brain Res. 2010,1346, 224-236. [CrossRef] [PubMed]
23. Koo, KA; Sung, SH; Park, JH; Kim, SH; Lee, KY; Kim, YC Activitățile neuroprotectoare in vitro ale glicozidelor feniletanoide din Callicarpa dichotoma. Planta Med. 2005, 71, 778-780. [CrossRef] [PubMed]
24. Liu, YG; Li, X.; Xiong, C.; Yu, B.; Pu, X.; Da, XS Derivați sintetici de glicozidă feniletanoid ca potențiali agenți neuroprotectori. EURO. J. Med. Chim. 2015, 95, 313-323. [CrossRef] [PubMed]
25. Fu, G.; Pang, H.; Wong, YH Glicozide feniletanoide care apar în mod natural: potențiale piste pentru noi terapii. Curr. Med. Chim. 2008, 15, 2592-2613. [CrossRef] [PubMed]
26. Greene, LA; Tischler, AS Stabilirea unei linii clonale noradrenergice de celule de feocromocitom suprarenal de șobolan care răspund la factorul de creștere a nervilor. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 1976, 73, 2424-2428. [CrossRef] [PubMed]
27. Liang, QN; Sheng, YC; Jiang, P.; Ji, LL; Xia, YY; Min, Y.; Wang, ZT Diferența sistemului antioxidant de glutation în ficatul de șoareci nou înțărcat și tineri și implicarea sa în hepatotoxicitatea indusă de izolină. Arc. Toxicol. 2011, 85, 1267-1279. [CrossRef] [PubMed]
28. Kobayashi, A.; Kang, M.; Okawa, H.; Ohtsuji, M.; Zenke, Y; Chiba, T.; Igarashi, K.; Yamamoto, M. Senzorul de stres oxidativ Keap1 funcționează ca un adaptor pentru ligaza E3 bazată pe Cul3-pentru a regla degradarea proteazomală a Nrf2. Mol. Celulă. Biol. 2004, 24, 7130-7139. [CrossRef] [PubMed]
29. Cornelius, C.; Crupi, R.; Calabrese, V; Graziano, A.; Milone, P.; Pennisi, G.; Radak, Z.; Calabrese, EJ; Cuzzocrea, S. Traumatic brain injury: Oxidative stress and neuroprotection. Antioxid. Semnal redox. 2013, 19, 836-853. [CrossRef] [PubMed]
30. Hou, Z.; Luo, W.; Soare, X.; Hao, S.; Zhang, Y.; Xu, F.; Wang, Z.; Liu, B. Salina bogată în hidrogen protejează împotriva daunelor oxidative și a deficitelor cognitive după leziuni cerebrale traumatice ușoare. Brain Res. Taur. 2012, 88, 560-565. [CrossRef] [PubMed]
31. Ansari, MA; Roberts, KN; Scheff, SW Un curs în timp de stres oxidativ indus de contuzie și proteine sinaptice în cortex într-un model de TBI la șobolan. J. Neurotrauma 2008, 25, 513-526. [CrossRef] [PubMed]
32. Kuang, R.; Soare, Y.; Yuan, W.; Lei, L.; Zheng, X. Efectele protectoare ale echinacozidei, una dintre glicozidele feniletanoide, asupra citotoxicității induse de H2O2-în celulele PC12. Planta Med. 2009, 75, 1499-1504. [CrossRef] [PubMed]
33. Scapagnini, G.; Vasto, S.; Avraam, NG; Caruso, C.; Zella, D.; Fabio, G. Modularea căii Nrf2/ARE prin polifenoli alimentari: o strategie neuroprotectivă nutrițională pentru tulburările cognitive și neurodegenerative. Mol. Neurobiol. 2011, 44, 192-201. [CrossRef] [PubMed]
34. Kerr, F.; Sofolaadesakin, O.; Ivanov, DK; Gatliff, J.; Gomez, PB; Bertrand, HC; Martinez, P.; Callard, R.; Snoeren, I.; Cochem, HM Direct Keap1-Perturbarea Nrf2 ca o potențială țintă terapeutică pentru boala Alzheimer. PLoS Genet. 2017, 13, e1006593. [CrossRef] [PubMed]
35. Hansen, MB; Nielsen, SE; Berg, K. Reexaminarea și dezvoltarea ulterioară a unei metode de colorare precise și rapide pentru măsurarea creșterii celulare/uciderea celulelor. J. Immunol. Metode 1989, 119, 203-210. [CrossRef]
36. Press, C. Virtual Screening in Drug Discovery; Crc Press: Boca Raton, FL, SUA, 2005.
37. Muegge, I.; Martin, YC; Hajduk, PJ; Fesik, SW Evaluarea punctajului PMF în legarea liganzilor slabi la proteina de legare FK506. J. Med. Chim. 1999, 42, 2498—2503. [CrossRef] [PubMed]
38. Kuntz, ID; Blaney, JM; Oatley, SJ; Langridge, R.; Ferin, TE O abordare geometrică a interacțiunilor macromoleculă-ligand. J. Mol. Biol. 1982,161, 269-288. [CrossRef]
39. MD, E.; Murray, CW; Auton, TR; Paolini, GV; Mee, RP Funcții de scor empiric: I. Dezvoltarea unei funcții de scor empiric rapid pentru a estima afinitatea de legare a liganzilor în complexele receptorilor. J. Comput.-Aided Mol. Des. 1997,11,425-445.
© 2018 de către autori. Licențiat MDPI, Basel, Elveția. Acest articol este un articol cu acces deschis distribuit în conformitate cu termenii și condițiile licenței Creative Commons Attribution (CC BY) (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
