Partea 2 Lipozomul glicozid de feniletanol inhibă activarea HSC indusă de PDGF prin reglarea căii de semnalizare FAKPI3KAkt
Mar 06, 2022
Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
4. Materiale și Metode
4.1. Materiale
CPhG (glicozide feniletanoid din cistanche)au fost achiziționate de la Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, China). Conținutulechinaceeaa fost mai mare de 35 la suta, iar cea a actozidei a fost mai mare de 16 la suta. Lecitina a fost achiziționată de la Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Shanghai, China). 1,2-Dipalmitoil-sn-glicerol-3-fosfocolină (DPPC) și colesterolul au fost furnizate de Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, SUA). O celulă stelata hepatică imortalizată de șobolan a fost furnizată de Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Shanghai, China). Mediul Eagle modificat de Dulbecco (DMEM) a fost cumpărat de la Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, SUA). Serul fetal bovin (FBS) a fost achiziționat de la Gibco Life Technologies (Waltham, MA, SUA). Penicilina (100 卩g/mL) și streptomicina (100 卩g/mL) au fost produse ale Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il){ {13}},5-bromură de difeniltetrazoliu] (5 mg/ml) a fost achiziționată de la Sigma (Oakville, ON, Canada). Activitatea LDH a fost evaluată prin utilizarea unui kit de analiză LDH de la Beijing Solar Science & Technology Co., Ltd. (Beijing, China). Kit-ul FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit I și tampon de colorare cu iodură de propidiu (PI)/RNază au fost toate achiziționate de la BD Biosciences (San Diego, CA, SUA) și rrPDGF-BB a fost furnizat de R&D Systems (Minneapolis, MN, SUA). Reactivul TRIzol a fost cumpărat de la Thermo Fisher Scientific, Inc. Kitul RevertAid First Strand cADN Synthesis a fost produsul Thermo Fisher Scientific, Inc. (Vilnius, Lituania). TB Green Premix Ex Taq TM II a fost achiziționat de la Takara (Dalian, China). Soluția de piroliză Ripa a fost furnizată de Thermo Fisher Scientific, Inc. Fluorura de fenilmetilsulfonil inhibitor de protează și amestecul de inhibitor de fosfatază cu spectru larg au fost cumpărate de la Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, China). Benzile de proteine au fost vizualizate de un substrat Pierce™ ECL Western Blotting, care a fost furnizat de Invitrogen (Carlsbad, CA, SUA). IgG anti-iepure de capră de etichetare cu enzima de hrean a fost achiziționată de la Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Shanghai, China). Setul de probă Super Signal West Femto a fost furnizat de Thermo Fisher Scientific, Inc. Anti-p-actină de iepure, a-SMA, colagen-1, FAK, PI3K, fosfo-PI3K, Akt și anticorpul fosfo-Akt toate au fost achiziționate de la Beijing Bioss Antibodies Biological Co., Ltd. (Beijing, China). X-3-FAK și X-3-NC au fost achiziționate de la Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Shanghai, China). Lipofectamine 2000 a fost furnizat de Invitrogen.
4.2. Prepararea lipozomilor CPhG
Lecitina, DPPC și colesterolul (1:2:2, m/m/m) au fost dizolvate într-un amestec de cloroform și metanol (2:1 v/v), rotite pentru a forma o peliculă la grade 49-50, șiCPhG-uri(glicozid feniletanoid din cistanche)(250 卩g/mL) au fost adăugate ulterior. Soluția reactivă a fost rotită și hidratată continuu, iar membrana fosfolipidă a fost transferată în apă pentru a forma lipozomi CPG. Procesul de lipozom încapsulat a fost repetat conform metodelor de mai sus. Pentru a obține un lipozom uniform, lipozomul încapsulat a fost extrudat de 5 ori cu o membrană microporoasă de 0,45 卩m și filtrat de 18-20 ori cu o membrană de 0,22 卩m. Lipozomii CPG au fost depozitați la 4 grade. Distribuția dimensiunii particulelor a fost măsurată cu un analizor laser de dimensiunea particulelor, forma particulelor a fost observată prin microscopie electronică cu transmisie, iar eficiența de încărcare a medicamentului și de încapsulare au fost determinate prin HPLC.
4.3. Eliberare in vitro din lipozomii CPG și CPhG(glicozid feniletanoid din cistanche)
Profilul de eliberare in vitro al lipozomilor CPG șiCPhG-uri(glicozid feniletanoid din cistanche) a fost efectuat folosind metoda membranei de dializă. Un total de 5 ml din fiecare probă au fost transferați într-o pungă de dializă cu o greutate moleculară de 14,000 Da. Punga de dializă a fost scufundată în 20{{10 }} mL de soluție tampon PBS (pH=6,0) a vibrat la 37 de grade. Mediul de eliberare (3 mL) a fost retras și înlocuit cu o soluție tampon izopicnică PBS (pH=6,0) la intervale de timp programate (0,5, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 24 și 48). h). Concentrațiile echinacozidei în lipozomii CPG șiCPhG-uriîn mediul de eliberare au fost determinate de
HPLC. Eliberarea cumulativă (%) a lipozomilor CPG șiCPhG-uri(glicozid feniletanoid din cistanche) a fost calculat folosind următoarea ecuație (1):
unde Cn este concentrația medicamentului în mediul de eliberare la al n-lea punct de prelevare, V este volumul mediului eliberat și W este doza totală.
Pentru a înțelege mai bine caracteristica eliberării vitro aCPhG(glicozid feniletanoid din cistanche) lipozomi șiCPhG-uri, au fost aplicate trei modele diferite pentru a se potrivi cu datele de eliberare obținute: (a) modelul cinetică de ordinul zero, (b) modelul cinetică de ordinul întâi și (c) modelul Higuchi dat în ecuațiile (2)-(4) :
unde Mt/Mo este fracția de curcumină eliberată din probă la momentul t și k este constanta de eliberare a diferitelor modele. Coeficientul de corelație este calculat pentru a ilustra gradul de potrivire dintre modelul de eliberare și date.
4.4. Citotoxicitate
Pentru HSC, o densitate de 1 x 105 celule/mL a fost plasată pe plăci de 96-godeuri și lăsată să crească peste noapte la 37 de grade într-un incubator cu 5% CO2. Vitalitatea celulară a fost testată pe o gamă largă deCPhGconcentrații de lipozomi (117,79,58,90, 29,45, 14,72, 7,36, 3,68,1,84, 0,92 și 0,46 卩g/mL) pentru a detecta vitalitatea celulelor de testat și a calcula valorile IC50. Apoi, celulele au fost incubate la 37 de grade timp de 4 ore cu 20 µL de MTT (5 mg/mL în soluție de PBS). Produsul violet MTT-Product a fost dizolvat într-un DMSO de 150 µL și a fost utilizat un cititor de absorbție cu spectru Multiskan (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, SUA) pentru a măsura absorbantul la 490 nm. Următoarea formulă (Ecuația (5)) a fost utilizată pentru a calcula procentul de viabilitate celulară:
4.5. Toxicitatea celulară a lipozomilor CPhG pe HSC
Celulele au fost însămânțate în 6-plăci de godeuri, iar toxicitatea HSC-urilor a fost măsurată folosind un kit de detectare a LDH. Celulele au fost placate la o densitate de 2 x 105 celule/godeu în plăci de 6-godeuri la 37 de grade într-un incubator cu 5% CO2. După creșterea peste noapte, celulele au fost tratate cuCPhGlipozomi (29,45, 14,72 și 7,36 pg/mL). Un control gol (media DEME) a fost menținut simultan. După 24 de ore, celulele au fost colectate prin tripsină și centrifugare. Fiecare grup de celule a fost administrat strict în conformitate cu instrucțiunile trusei. S-a calculat apoi rata de scurgere a LDH a fluidului de cultură celulară.
4.6. Analiza apoptozei
Celulele au fost cultivate în plăci de 6-godeuri cu o densitate de 2 x 105 celule/godeu la 37 de grade într-un incubator cu 5% CO2. După creșterea peste noapte, celulele au fost tratate cuCPhGlipozomii (29,45, 14,72 și 7,36 µg/mL), iar apoi apoptoza HSC-urilor a fost măsurată folosind kitul de detectare a apoptozei FITC Annexin V. Concentrațiile s-au bazat pe IC50 determinată din testul de citotoxicitate. Un control gol (media DEME) a fost menținut simultan. După 24 de ore, celulele au fost colectate prin tripsină și centrifugare și spălate cu PBS și suspendate într-un tampon de legare de 500 µl. Apoi, celulele au fost colorate cu 5 µl de anexină V-FITC și 5 µl PE. Celulele au fost incubate la temperatura camerei timp de 30 de minute în întuneric, iar viteza de apoptoză a fost măsurată folosind un citometru FACSCalibur (Becton Dickinson, San Jose, CA, SUA).
4.7. Analiza opririi ciclului celular
HSC-urile (2 X 105 celule/2 ml/godeu) au fost tratate timp de 24 de ore cuCPhGlipozomi la 29,45, 14,72 și 7,36 ^g/mL în 6-plăci de godeuri. Un control gol (media DEME) a fost menținut simultan. Celulele au fost recoltate şi spălate cu 1 mL de PBS şi fixate cu 75% etanol peste noapte la 4 grade. Celulele au fost apoi centrifugate și resuspendate în 500 soluții de tampon de colorare cu iodură de propidiu (PI)/RNază la 37 de grade timp de 30 de minute la întuneric. În cele din urmă, celulele au fost măsurate folosind un citometru FACSCalibur (Becton Dickinson). Proporțiile celulelor în fazele G0/G1, S și G2/M ale ciclului celular au fost analizate de software-ul FACS Diva (Becton Dickinson).
4.8. EfectulCPhG(glicozid feniletanoid din cistanche) Lipozomi pe calea de semnalizare FAK mediată PDGF și PI3K/Akt
4.8.1. Test de proliferare
Liniile HSC (1 X 105 celule/mL) au fost placate în plăci de 96-godeuri și lăsate să crească peste noapte la 37 de grade într-un incubator cu 5% CO2. După 24 de ore de cultură celulară, celulele au fost împărțite aleatoriu în următoarele cinci grupuri: Un martor martor (cultivat în DMEM care conține doar 10% FBS), PDGF-BB (cultivat în DMEM care conține 50 卩g/L PDGF-BB), ACPhGintervenția lipozomilor (stimulat cu mediu care conține 50 昭/mL PDGF-BB 24 h). Apoi, celulele au fost tratate cu 29,45, 14,72 și 7,36 Rg/mL de lipozomi CPhG. Celulele au fost cultivate continuu timp de 24 de ore, 48 de ore și 72 de ore în incubator la 37 de grade timp de 4 ore cu 20 rL de MTT (5 mg/mL în soluție de PBS). Produsul violet MTT-formazan a fost dizolvat în 150 rL de DMSO și estimat prin măsurarea absorbanței la 490 nm într-un cititor de absorbție cu spectru Multiskan (Thermo Fisher Scientific, Inc.) și s-a calculat IC50. Probele cvadruplicate au fost efectuate pentru fiecare concentrație în patru experimente independente. Următoarea formulă (Ecuația (6)) a calculat procentul de viabilitate celulară:
4.8.2. Reacție cantitativă în lanț a polimerazei în timp real (qRT-PCR)
Celulele au fost însămânțate în plăci de {{{0}}godeuri cu o densitate de 1 X 105 celule/mL. Această metodă de grupare este aceeași cu cea anterioară. După 24 de ore, ARN-ul total a fost extras din celulele cultivate cu un reactiv TRIzol. Concentrația și puritatea ARN au fost măsurate la 260/280 nm folosind un spectrofotometru ultraviolet conform raportului standard OD260/OD280 de 1.8-2.0. Reacțiile de transcripție inversă au fost transcrise invers din ARN utilizând kitul de sinteză RevertAid First Strand cADN. Un TB Green Premix Ex TaqTM II a fost utilizat pentru a măsura expresia genelor. qRT-PCR a fost efectuat folosind un sistem ABI QuantStudio™6 Flex Real-Time PCR (Applied Biosystems, Foster City, CA, SUA). Secvențele de primer au fost sintetizate de Sangon Biotech (Shanghai, China) (Tabelul 4).
4.8.3. Analiza Western Blot
Proteinele totale extrase din HSC-uri în diferite grupuri au fost preparate așa cum s-a descris anterior. Pe scurt, proteinele similare au fost separate prin electroforeză în gel de dodecil sulfat de sodiu-poliacrilamidă 10% (SDS-PAGE) și apoi transferate pe membrane de fluorură de poliviniliden (PVDF) (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Baden-Wuerttemberg, Germania). Apoi, membranele PVDF au fost blocate în 3% BSA și incubate peste noapte la 4 ◦ C cu anticorpii primari. A doua zi, a fost adăugată IgG anti-iepure de capră marcată cu HRP (diluție 1:25,000; 1 oră). Benzile de proteine au fost vizualizate printr-un substrat Pierce™ ECL Western Blotting și au fost fotografiate folosind sistemul de imagistică FluorChem E (Protein Simple, San Francisco, CA, SUA), care au fost normalizate cu -actină ca control intern.
4.8.4. Experimentele de supraexpresie FAK
Celulele au fost împărțite în grupul de control mediu normal, grupul de stimulare PDGF-BB, grupul de stimulare PDGF-BB plus grupul X-3-FAK, grupul de stimulare PDGF-BB plus grupul X-3-NC, grupul PDGF -stimulare BB plus X-3-FAK plusCPhGgrupul de lipozomi și stimularea rrPDGF-BB plus X-3-NC plusCPhGgrupul de lipozomi. Liniile HSC (1 × 105 celule/mL) au fost placate în plăci 6-godeuri și lăsate să crească peste noapte la 37 ◦C într-un incubator cu 5% CO2. În ziua următoare, celulele PDGF-BB (cultivate în DMEM conţinând 50 pg/L PDGF-BB) au fost adăugate şi cultivate. În a treia zi, pEX-3-FAK și X-3-NC au fost diluate într-un mediu fără antibiotice, amestecate bine cu lipofectamină 2000 și lăsate să stea la 37 ◦ C timp de 20 de minute, înainte de a fi adăugate. la fiecare godeu al celulelor la 37 ◦C. După ce a fost incubat timp de 5 ore, mediul care conține 10 procente de ser a fost înlocuit timp de 48 de ore, iar în a cincea zi, mediul a fost înlocuit cu o concentrație de 29,45 pg/mL lipozom CPhG timp de 24 de ore. Apoi, fiecare godeu a fost colectat în a doua, a treia, a cincea și a șasea zi și au fost detectate expresiile proteinelor genei FAK, PI3K, Akt, p-PI3K și p-Akt.
4.9. Analize statistice
Datele au fost exprimate ca medie ± abaterea standard (SD). Pentru analizele statistice a fost utilizat software-ul SPSS 16.0 (IBM, New York, NY, SUA). Semnificația diferenței a fost calculată printr-un test ANOVA unidirecțional și urmat de un test LSD. Ecuația de dizolvare a medicamentului a fost ajustată de Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, SUA).
5. Concluzii
În concluzie, rezultatele noastre demonstrează acest lucruCPhG(glicozid feniletanoid din cistanche) lipozomii inhibă semnificativ activarea HSC, atenuând semnificativ dezvoltarea fibrozei hepatice prin creșterea apoptozei și reglarea ciclului celular în HSC. Inhibarea activării căilor de semnalizare FAK/PI3K/Akt poate fi mecanismul de bază prin careCPhGlipozomii protejează împotriva bolilor hepatice cronice asociate cu fibroză. Aceste descoperiri oferă noi perspective asupra mecanismelor acestei noi formulări de medicament ca candidat antifibrogen pentru viitorul tratament al fibrozei hepatice. Cu toate acestea, mecanismele de bază sunt mai complexe decât cele descrise aici, iar rezultatele noastre nu exclud posibila implicare a altor dispozitive cauzate deCPhGlipozomi pentru tratarea fibrozei hepatice.
Contribuții ale autorului:TL, JZ, S.-PY, LM și S.-LZ au conceput și proiectat experimentele. S.-LZ, S.-PY, TL, JZ, X.-TM și X.-YY au analizat datele. S.-LZ și JZ au scris manuscrisul. TL, LM și JZ au revizuit manuscrisul. Toți autorii au citit și au aprobat manuscrisul final.
Finanțarea:Această cercetare a fost finanțată de Fundația Națională de Științe Naturale din China, cu numărul de grant 81560628.
Mulțumiri:Această lucrare a fost susținută financiar de Fundația Națională de Științe Naturale din China (nr. 8156140127). Autorii ar dori să-și exprime sincere mulțumiri lui Jun Zhao și Xin Wang pentru îmbunătățirea redactării acestei lucrări.
Conflicte de interes:Autorii nu raportează nicio declarație de interes.
Referințe
1. Zhang, H.; Soare, D.; Wang, G.; Cui, S.; Câmp, RA; Li, J.; Zang, Y. Alogliptin ameliorează fibroza hepatică prin suprimarea celulelor stelate hepatice activate. Biochim. Biophys. Res. comun. 2019.511, 387-393. [CrossRef]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Fibroza ficatului: Fiziopatologie, ținte patogenetice și probleme clinice. Mol. Aspecte Med. 2019, 65, 37-55. [CrossRef] [PubMed]
3. Wu, YJ; Wu, YC; Chen, IF; Wu, YL; Chuang, CW; Huang, HH; Kuo, SM Efectele reparatorii ale nanoagregatelor de astaxantina-hialuronan împotriva fibrozei și necrozei hepatice induse de retrorsină-CCl(4). Molecules 2018,23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Soare, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla promovează activarea celulelor stelate hepatice induse de glucoză ridicată și PDGF prin inducerea autofagiei prin calea de semnalizare CaMKKp/ERK. Toxicol. Lett. 2019, 300,1-9. [CrossRef] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, JE Rolul citokinelor derivate din celulele stelate hepatice (HSC) în inflamația hepatică și imunitatea. Cytokine 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Aspiră, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, J.Cistanche tubulosaglicozidele feniletanoide induc apoptoza în celulele Eca-109 prin calea dependentă de mitocondrii. Oncol. Lett. 17, 2019, 303-313. [CrossRef] [PubMed]
7. Tu, SP; Ma, L.; Zhao, J.; Zhang, SL; Liu, T. Feniletanol Glicozide de laCistanche tubulosaSuprimă activarea celulelor stelate hepatice și blochează conducerea căilor de semnalizare în TGF-beta1/smad ca potențiali agenți anti-fibroză hepatică. Molecule 2016,21,102. [CrossRef] [PubMed]
8. Tu, SP; Zhao, J.; Ma, L.; Tudimat, M.; Zhang, SL; Liu, T. Efectele preventive ale glicozidelor feniletanoide dinCistanche tubulosaasupra fibrozei hepatice induse de albumina serică bovină la șobolani. DARU J. Pharm. Sci. 2015, 23, 52. [CrossRef] [PubMed]
9. Gao, XL; Wang, M.; Liu, L. Eficiența capcanei și absorbția a patru tipuri de prolipozomi. J. Xin Jiang Med. Univ. 2007, 8, 787-790.
10. Li, PY; Du, SY; Lu, Y.; Chen, XN Sistemul de administrare a medicamentelor bio-adeziv și aplicarea acestuia în medicina tradițională chineză. Bărbie. J. Mater. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Long, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Derivatul de nitroimidazol a încorporat lipozomi pentru livrarea medicamentelor declanșate de hipoxie și a îmbunătățit eficacitatea terapeutică în xenogrefele tumorale derivate de la pacient. Acta Biomater. 2019, 83, 334-348. [CrossRef] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, H.-S.; Zhang, Y.-S. Sistemul de administrare a medicamentelor lipozomilor care vizează ficatul și progresul său în cercetare în bolile hepatice. World Chin. J. Digest. 2016, 24.4238. [CrossRef]
13. Zhou, BH; Tan, PP; Jia, LS; Zhao, WP; Wang, JC; Wang, implicarea căii de semnalizare HW PI3K/AKT în apoptoza indusă de fluor în celulele C2C12. Chemosphere 2018,199, 297-302. [CrossRef] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Guo, Y.; Du, C. Echinacoside stimulează proliferarea celulară și previne apoptoza celulară în celulele MODE-K epiteliale intestinale prin reglarea în sus a expresiei factorului de creștere transformator-p1. J. Pharm. Sci. 2012, 118, 99-108. [CrossRef]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, M.-T.; Tsai, F.-H.; Wang, W.-H.; Wu, C.-R. Activitate anti-nociceptiva si antiinflamatoare cauzata deCistanche deserticolala rozătoare. J. Etnofarmacol. 2002, 83, 177-182. [CrossRef]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Su, C.-M.; Ho, T.-Y.; Wu, C.-M.; Chen, W.-C.; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Cistanche deserticolaextractul crește formarea osoasă în osteoblaste. J. Pharm. Pharmacol. 2012, 64, 897-907. [CrossRef] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. Efectul deCistanches HerbaExtract apos asupra pierderii osoase la șobolanul ovariectomizat. Int. J. Mol. Sci. 2011, 12, 5060-5069. [CrossRef]
18. Lu, M.-C. Studii privind efectul sedativ alCistanche deserticola.J. Etnofarmacol. 1998, 59, 161-165. [CrossRef]
19. Cai, R.-L.; Yang, M.-H.; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, Y. Activitatea antioboseală a extractului bogat în feniletanoizi dinCistanche deserticola. Phytother. Res. 24, 2010 313-315. [CrossRef]
20. Geng, X.; Tian, X.; Tu, P.; Pu, X. Efectele neuroprotective ale echinacozidei în modelul MPTP de șoarece al bolii Parkinson. EURO. J. Pharmacol. 2007, 564, 66-74. [CrossRef]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Aminoglicozide feniletanoide acilate cu activitate hepatoprotectoare de la planta de deșert Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Chim. 2010, 18, 1882-1890. [CrossRef] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, J.-S.; Meng, L. Prevenirea extractului de salsa de Cistanche asupra fibrozei hepatice induse de tetraclorura de carbon la șobolani. Bărbie. plante medicinale Med. 2013, 5.199—204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. Prepararea glicozidelor feniletanoide Cistanche prolipo somes lichide: formularea optimizată, caracterizarea și evaluarea prolipo unor pastile de picurare in vitro și in vivo. EURO. J. Pharm. Sci. 2016, 93, 224-232. [CrossRef] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, PM; Heymann, F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola, R.; van Bloois, L.; Storm, G.; Kiessling, F.; Trautwein, C.; et al. Fibroza hepatică afectează proprietățile de direcționare ale sistemelor de administrare a medicamentelor către subseturile de macrofage in vivo. Biomateriale 2019, 206, 49-60. [CrossRef] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Soare, H.; Li, S.; Da.; Galloni, H. Designul compoziției și aplicarea medicală a lipozomilor. EURO. J. Med. Chim. 2019,164, 640-653. [CrossRef]
26. Paliwal, S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, KR; Sadhu, V. particule de lipozom etanolic încărcate cu flurbiprofen pentru aplicații biomedicale. J. Microbiol. Metode 2019,161, 18-27. [CrossRef] [PubMed]
27. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. Efectul sarcinii de suprafață asupra internalizării celulare dependente de dimensiune a lipozomilor. Chim. Fiz. Lipide 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, Q.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Soare, C.; Wei, Q.; Deng, W.; Yu, J.; et al. Lipozomi încărcați cu galangin, care vizează ficatul: optimizare și eficacitate hepatoprotectoare. J. Drug Deliv. Sci. Tehnol. 2018, 46, 339-347. [CrossRef]
29. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Fibroza hepatică: Este timpul să mergem cu ținte terapeutice specifice celulelor stelate hepatice. Dis. pancreatică hepatobiliară. Int. 2018,17,192-197. [CrossRef]
30. Moehrle, BM; Nattamai, K.; Brown, A.; Florian, MC; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller, K.; Prows, DR; Abdollahi, A. Mecanismele specifice celulelor stem asigură fidelitatea genomică în cadrul HSC-urilor și la îmbătrânirea HSC-urilor. Cell Rep. 2015,13, 2412-2424. [CrossRef]
31. Brea, R.; Mișcare, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 induce apoptoza celulelor stelate hepatice și atenuează fibroza hepatică la șoareci prin reglarea în jos a miR-23a-5p și miR{-28a-5p. Biochim. Biophys. Acta Biophys. Incl. Fotosynth. 2018,1864, 325-337. [CrossRef] [PubMed]
32. Lauridsen, FKB; Jensen, TL; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, AS; Pundhir, S.; Rehn, M.; Paul, F.; Giladi, A.; Hasemann, MS; et al. Diferențele în starea ciclului celular stau la baza eterogenității transcripționale în compartimentul HSC. Cell Rep. 2018, 24, 766-780. [CrossRef] [PubMed]
33. El-Lakkany, NM; El-Maadawy, WH; Seif El-Din, SH; Hammam, OA; Mohamed, SH; Ezzat, SM; Safar, MM; Saleh, S. Acidul rosmarinic atenuează fibrogeneza hepatică prin suprimarea activării/proliferării celulelor stelate hepatice și inducerea apoptozei. Pac asiatic. J. Trop. Med. 2017,10, 444-453. [CrossRef] [PubMed]
34. Chen, XX; Zhang, XY; Ding, YZ; Li, X.; Guan, XM; Li, H.; Cheng, M.; Cui, XD Efectele celulelor progenitoare endoteliale asupra proliferării și funcției biologice a celulelor stelate hepatice sub stres de forfecare. Bărbie. J. Apl. Physiol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, XH; Liu, HH; Ma, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gao, DM; Cui, JF; Chen, RX Celulele stelate hepatice activate promovează progresia carcinomului hepatocelular rezidual post-încălzire de la supraviețuirea autofagică la proliferare. Int. J. Hyperthermia 2019, 36, 253-263. [CrossRef] [PubMed]
36. Park, SY; Le, CT; Sung, KY; Choi, DH; Cho, EH Succinate induce fibrogeneza hepatică prin promovarea activării, proliferării și migrației și inhibând apoptoza celulelor stelate hepatice. Biochim. Biophys. Res. comun. 2018, 496, 673-678. [CrossRef] [PubMed]
37. Tsukada, S.; Parsons, CJ; Rippe, RA Mecanismele fibrozei hepatice. Clin. Chim. Acta 2006, 364, 33-60. [CrossRef]
38. Copple, BL; Roth, K. 2.16一Mecanismele fibrozei hepatice. În Comprehensive Toxicology, ed. a 3-a; McQueen, CA, Ed.; Elsevier: Oxford, Marea Britanie, 2018; p. 397^08.
39. Breitkopf, K.; Roeyen, CV; Sawitza, I.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, AM Modele de expresie ale PDGF-A, -B, -C și -D și a receptorilor PDGF a și |3 în celulele stelate hepatice activate de șobolan (HSC). Cytokine 2005, 31, 349-357. [CrossRef]