PARTEA A DOUA Glicozidele de feniletanol protejează hipertrofia miocardică indusă de constricția aortică abdominală prin inhibarea demetilării ECE 1 și îmbunătățirea căii ENOS PI3K PKB

Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Vă rugăm să faceți clic aici pentru partea întâi

Într-un studiu anterior, am descoperit că demetilarea ECE-1 a lucrat asupra hipertensiunii și ar putea avea efecte asupra producției de ET-1 [13]. În consecință, ne-am întrebat dacă CPhG(GLICOZID FENILETANOILD DIN CISTANCHE)ar afecta nivelul de demetilare al ECE-1. După cum se arată în Figura 7, în comparație cu grupul simulat, nivelul de metilare al ECE-1 în țesutul miocardic a fost crescut semnificativ în grupul AAC. În același timp, a fost redus semnificativ în grupurile cu AC 125, 250 și 500 mg/kg comparativ cu grupul AAC. -e nivelul de demetilare a genei ECE-1 în grupul AC 125 mg/kg a fost semnificativ mai mare decât în ​​grupul AV; nu a existat o diferență semnificativă în grupul AC 125 mg/kg, dar o scădere semnificativă a fost găsită în grupul AC 500 mg/kg în comparație cu grupul AV.

3.7. CPhG-uri(GLICOZID FENILETANOILD DIN CISTANCHE)Scăderea expresiei ECE-1 în țesutul miocardic al șobolanilor după AAC.

Pentru a înțelege mai bine efectul metilării ECE-1, am detectat expresia ARNm, proteinei și imunohistochimia ECE-1 în țesutul miocardic. După cum se arată în Figura 8, în comparație cu grupul simulat, nivelurile relative de expresie ale ARNm ECE-1, nivelurile relative de expresie ale proteinei și aria medie a imunohistochimiei miocardice au fost reduse semnificativ în grupul AAC. Figura 8(c) arată că, în comparație cu grupul AAC, nivelurile relative de expresie ale ARNm ECE-1 au fost reduse semnificativ în grupurile AC 250 și 500 mg/kg; în comparație cu grupul AV, acestea au fost semnificativ mai mari în grupurile cu AC 125 și 250 mg/kg, dar nu au fost semnificativ diferite în grupul cu AC 500 mg/kg. Între timp, după cum se poate observa în figurile 8(a) și 8(b), în comparație cu grupul AAC, nivelurile relative de expresie ale proteinei ECE-1 au fost semnificativ scăzute în grupul AC 250 și 500 mg/kg; cu toate acestea, nu au fost semnificativ diferite în grupul AC 250 și 500 mg/kg comparativ cu cei din grupul AV. Figurile 8(d) și 8(e) indică faptul că, în comparație cu grupul AAC, aria de expresie a ECE-1 în țesutul miocardic al șobolanilor a fost redusă semnificativ în grupul AC 125, 250 și 500 mg/kg ; cu toate acestea, în comparație cu grupul AV, a fost semnificativ mai mare în grupurile cu AC 125 și 250 mg/kg și nu a arătat nicio diferență semnificativă în grupurile AC500 mg/kg.

3.8. CPhG-uri(GLICOZID FENILETANOILD DIN CISTANCHE)S-a redus nivelul ET-1 în plasmă la șobolani după AAC.

De asemenea, am măsurat nivelurile plasmatice de ET-1 la șobolani prin ELISA, așa cum se arată în Figura 9, în comparație cu grupul simulat, nivelurile plasmatice de ET-1 în grupul AAC au crescut semnificativ. Între timp, nivelurile plasmatice ale ET-1 au arătat o tendință ascendentă în grupul AC 125 mg/kg, dar nu au indicat o diferență semnificativă în grupurile AC 250 și 500 mg/kg în comparație cu cele din grupul AV. 3.9. CPhG-uri(GLICOZID FENILETANOILD DIN CISTANCHE)S-a crescut expresia căii PI3K/PKB/eNOS la șobolani după AAC. PI3K/PKB/eNOS este o cale importantă în procesul de hipertrofie miocardică și are o legătură importantă cu ET-1 [14–16]. Prin urmare, am detectat în continuare nivelurile de expresie a proteinelor căii PI3K/PKB/eNOS în țesutul miocardic de șobolan. După cum se arată în Figura 10, în comparație cu grupul simulator, rudanivelurile de expresie ale proteinelor p-PI3K, p-PKB și p-eNOS în grupul AAC au fost reduse semnificativ; totuși, în comparație cu grupul AAC, nivelurile relative de expresie ale p-PI3K au fost crescute semnificativ în grupurile cu AC 250 și 500 mg/kg. În același timp, nivelurile relative de expresie au arătat o tendință descendentă în grupul AC 125 mg/kg și nu au arătat nicio diferență semnificativă în grupurile AC 250 și 500 mg/kg comparativ cu cele din grupul AV. După cum se arată în Figura 10(b), în comparație cu grupul AAC, nivelurile relative de expresie ale p-PKB au fost crescute semnificativ în grupul AC 250 și 500 mg/kg. Între timp, acestea au fost semnificativ mai mici în grupul cu AC 125 mg/kg și nu au fost semnificativ diferite în grupurile cu AC 250 și 500 mg/kg comparativ cu cei din grupul AV. După cum se arată în Figura 10(c), în comparație cu grupul AAC, nivelurile relative de expresie ale p-eNOS au fost crescute semnificativ în grupurile AC 125, 250 și 500 mg/kg; totuși, în comparație cu grupul AV, nivelurile de expresie relative au prezentat o tendință semnificativ descendentă în grupurile cu AC 125 și 250 mg/kg, dar nu au arătat nicio diferență semnificativă în grupul AC 500 mg/kg.

BENEFICIA CISTANCHE

4. Discutie

În comparație cu pacienții cu hipertensiune arterială, cei cu hipertensiune arterială și hipertrofie cardiacă au o probabilitate de 6-8 ori mai mare de infarct miocardic acut, insuficiență cardiacă cronică și chiar moarte subită cardiacă, ceea ce afectează grav tratamentul și prognosticul hipertensiunii [23, 24] . În astfel de circumstanțe, tratamentul hipertensiunii nu trebuie limitat la controlul tensiunii arteriale. În consecință, inversarea hipertrofiei cardiace, ca factor cheie, merită, de asemenea, mare îngrijorare. La pacienții cu hipertrofie cardiacă, sinteza proteinelor cardiomiocitelor este crescută în număr, mărită în dimensiune, îngroșată în pereții celulari, împreună cu apariția mai multor sarcomere, proliferare interstițială a fifibroblastelor și proliferare a colagenului cardiac. În același timp, expresia markerilor de hipertrofie cardiacă, cum ar fi ANP, BNP și ARNm -MHC, este de asemenea crescută [25–27]. Ca un medicament tradițional chinezesc pentru tratamentul infertilității feminine și impotenței masculine, tulpina deCistanche tubulosaa fost înregistrată pentru prima dată în Materia Medica a lui Shen Nong în cca. 100 î.Hr. și în prezent este utilizat pe scară largă ca un fel de hrană sănătoasă în zona Asiei de Sud-Est [28]. În ultimii ani,Cistanche tubulosaa atras atenția comunității medicale datorită activității sale biologice semnificative. Ca plantă tradițională antioboseală, nu numaiCistanche tubulosaare funcția de protecție musculară, dar și extractul său poate îmbunătăți stocarea ATP și poate reduce afectarea musculară după exercițiu la șobolani [29]. Conform rezultatelor experimentelor ex vivo, Cistanche tubulosa are și un efect protector împotriva toxicității musculare induse de statine cu ajutorul căii caspazei [30]. În plus, cercetătorii au studiat efectele farmacologice ale Cistanche tubulosa în protejarea aspectelor cardiovasculare și a altor aspecte și au descoperit căCistanche tubulosaar putea inhiba creșterea glicemiei a jeun și a glicemiei postprandiale, a îmbunătăți rezistența la insulină și a ameliora dislipidemia, precum și a inhiba pierderea în greutate la șoarecii db/db [31].

Extract de Cistanche tubulosa

Studiile anterioare au arătat că CPhG(GLICOZID FENILETANOILD DIN CISTANCHE)poate reduce deteriorarea radicalilor liberi asupra membranei mitocondriale miocardice și a omentului plasmatic, reduce conținutul de malondialdehidă, reduce daunele ultrastructurale miocardice, crește activitatea enzimei antioxidante mitocondriale miocardice, reduce dimensiunea infarctului miocardic, îmbunătățește activitatea fosfocreatinei în țesutul miocardic și are un efect protector. efect asupra miocardului ischemic [9, 10, 32]. Ne-am propus să explorăm efectele CPhG asupra hipertrofiei cardiace induse de suprasolicitarea presiunii. În acest studiu, s-a descoperit că CPhG-urile au scăzut nivelurile genelor LVPWT, LVED, HWI, AMC și hipertrofia cardiacă (adică, ANP, BNP și -MHC), au crescut EF și FS, au inhibat hipertrofia cardiacă și au îmbunătățit funcția cardiacă la șobolani. . În plus, inflamația este unul dintre fenotipurile cheie în patogeneza hipertrofiei cardiace [33]. Unii cercetători au descoperit că deleția IL-6 ar putea atenua hipertrofia și disfuncția ventriculară stângă induse de suprasolicitarea presiunii [34]. Și am descoperit că CPhG-urile nu numai că ar putea scădea nivelul IL-6 în plasmă la șobolani după AAC, ci și alte substanțe proinflamatorii, cum ar fi COX{-1, IL{-1 și TNF-. În plus, CPhG pot reduce, de asemenea, proteinele COX-2 și HMGB{-1 legate de inflamație. -e efectele CPhG au fost dependente de doză odată cu creșterea dozelor de medicament. Mai mult, este de menționat că doza mare de grupul CPhG a avut un efect protector semnificativ asupra șobolanilor hipertrofici, similar efectului grupului pozitiv cu valsartan. - prin urmare, CPhG ar putea fi un potențial agent farmacologic pentru a inhiba hipertrofia cardiacă indusă de supraîncărcare de presiune. Metilarea ADN se referă la un proces de modificare a metilării ADN-ului molecular în care S-adenosil-L-metionina acționează ca un donator de metil pentru a obține o grupare metil prin legături covalente sub cataliza metiltransferazelor ADN [35]. Este bine cunoscut faptul că ET-1 este cel mai puternic vasoconstrictor și poate contracta puternic arterele medulare și medulare, ducând la scăderea natriurezei și creșterea tensiunii arteriale [36–38]. Fiind enzima cheie în etapa finală a producției de endoteline, ECE- 1 nu numai că coexistă cu ET-1 în bolile cardiovasculare, dar poate și regla producția de ET-1. - noi, ECE-1 poate fi mai degrabă esențială pentru dezvoltarea și progresia bolii [39]. În experimentele in vitro pe celule endoteliale vasculare, metilarea insulei CpG în regiunea promotor ECE-1c scade activitatea sa transcripțională, ducând la scăderea expresiei ECE{-1c, conducând în continuare la scăderea producției de ET. -1 și scăderea tensiunii arteriale in vivo, iar această linie de modificări sugerează că metilarea ECE-1 poate fi implicată în patologia hipertensiunii [40, 41]. În studiul nostru anterior, am găsit, de asemenea, o demetilare crescută a ECE-1 la pacienții hipertensivi [35]. Rezultatele prezentului studiu au arătat că CPhG au redus semnificativ demetilarea ECE-1, au scăzut expresia ARNm-1 ECE-1 și proteinelor și au redus nivelurile plasmatice de ET{-1 în miocardul șobolanilor cu suprasolicitare de presiune -hipertrofie cardiacă indusă după AAC. Nu a fost clarificat dacă CPhG afectează nivelurile de demetilare ECE-1 și dacă protejează împotriva hipertrofiei cardiace la șobolani. PI3K este calea finală pentru hipertrofia cardiomiocitelor de la tipul contractil la cel hipertrofic [42]. Ambele izoforme ale PI3K pot fi implicate în hipertrofia cardiomiocitelor, în care Pll0 este implicat în hipertrofia fiziologică, în timp ce p110c este implicat în hipertrofia patologică. P110, atunci când este eliminat la șoareci, poate proteja împotriva stimulilor patologici cardiomiopatici și joacă un rol crucial în dezvoltarea și progresia hipertrofiei cardiomiocitelor [43]. PKB este esențial pentru această cale de semnalizare. Activarea sa poate modula funcția moleculară prin activarea sau inhibarea efectelor din aval sau a moleculelor prin fosforilare [44]. PI3K/PKB este, de asemenea, o cale de semnalizare cheie în spatele ET-1, iar studiile au arătat că ET{-1 poate induce în mod independent rezistența fifibroblastelor la apoptoză prin activarea semnalizării PI3K/PKB [45].

Supliment de Cistanche tubulosa

Alte studii au arătat că ET-1 poate regla activitatea eNOS și eliberarea de NO prin receptorul de endotelină B1 [46]. Ca un vasodilatator important, NO poate antagoniza efectele vasoconstrictoare ale ET-1 de la mai multe niveluri și poate menține funcția cardiovasculară normală [47]. În acest studiu, dozele medii și mari CPhG(GLICOZID FENILETANOILD DIN CISTANCHE)grupurile au arătat o creștere semnificativă a p-PI3K, p-PKB și p-ENOS. Cu toate acestea, grupul cu doze mari de CPhG a avut același efect ca și grupul AV, ceea ce a demonstrat în continuare că CPhG-urile ar putea inhiba hipertrofia cardiacă la șobolani după AAC prin activarea căii de semnalizare PI3K/PKB/eNOS. Alte studii au găsit, de asemenea, o legătură între calea PI3K/PKB și răspunsurile inflamatorii [48, 49]. Zou și alți cercetători au raportat că în astm, genele legate de Brahman joacă un rol esențial în menținerea inflamației căilor respiratorii și în afectarea căii PI3K/Akt/mTOR [50]. În plus, CPhG au scăzut, de asemenea, expresia genelor legate de inflamație în țesutul miocardic. Prin urmare, am speculat că CPhG-urile pot atenua răspunsul inflamator la șobolanii supraîncărcați de stres prin creșterea căii de semnalizare PI3K/PKB/eNOS. În general, studiul nostru este primul care demonstrează efectul protector al CPhG asupra hipertrofiei cardiace induse de supraîncărcare de presiune la șobolani după AAC, care poate fi legat de rolul pe care îl joacă CPhG-urile în reducerea eficientă a nivelului de demetilare al ECE-1 și creșterea calea PI3K/PKB. - descoperirea oferă o nouă idee pentru cercetarea clinică a hipertrofiei hipertensiunii arteriale și dezvoltarea de noi medicamente terapeutice pentru prevenirea, controlul și inversarea hipertrofiei hipertensiunii arteriale. Deși există încă multe întrebări cheie care așteaptă să fie abordate, o înțelegere suplimentară a mecanismelor prin care CPhG și PI3K/PKB mediază răspunsurile inflamatorii poate arunca o lumină nouă asupra explorării tratamentului hipertrofiei cardiace în viitor.

5. Concluzii

Rezultatele noastre au arătat că CPhG(GLICOZID FENILETANOILD DIN CISTANCHE)ameliorată hipertrofia miocardică la șobolani de către AAC, care poate fi legată de inhibarea demetilării ECE-1 și de îmbunătățirea PI3K/PKB/eNOS

Supliment de Cistanche tubulosa

Disponibilitatea datelor

Toate datele incluse în acest studiu sunt disponibile la cerere prin contact cu autorul corespunzător. Conflicte de interese - autorii nu declară conflicte de interese.

Contribuțiile autorilor

Shu-Ping You, Tao Liu, Jun Zhao și Qiong-Ling Fan au conceput și conceput experimentele. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang și Shi-Lei Zhang au lucrat pentru metodologie. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang, Shi-Lei Zhang și Shu Ping You au analizat datele. Qiong-Ling Fan, Jia-Wei Wang și Shi-Lei Zhang au scris manuscrisul. Shu-Ping You, Tao Liu și Jun Zhao au revizuit manuscrisul. Toți autorii au citit și au aprobat manuscrisul final.

Mulțumiri

-Această activitate a fost finanțată de un proiect major al National Key Laboratory, înființat în comun de către provincie și minister din regiunea autonomă uigură Xinjiang (SKLHIDCA-2018-3), Fundația Națională de Științe Naturale din China (nr. 8156140127) și un proiect pentru tineret de cercetare în științe naturale în instituția de învățământ superior din regiunea autonomă uigură Xinjiang (XJEDU2019Y027).

Referințe

[1] RE Katholi și DM Couri, „Hipertrofia ventriculară stângă: un factor de risc major la pacienții cu hipertensiune arterială: actualizare și aplicații clinice practice”, Jurnalul Internațional de Hipertensiune, voi. 2011, ID articol 495349, 10 pagini, 2011.

[2] ED Frohlich, „Hipertrofia ventriculară stângă: un factor major de risc la pacienții hipertensivi de culoare”, American Journal of Hypertension, voi. 27, nr. 1, pp. 1-2, 2014.

[3] TM Okwuosa, EZ Soliman, F. Lopez, KA Williams, A. Alonso și KC Ferdinand, „Left ventricular hypertrophy and cardiovascular disease risk prediction and reclasifification in blacks and whites: the atherosclerosis risk in community study”, American Heart Jurnal, voi. 169, nr. 1, p. 155–161 e5, 2015.

[4] PM Okin, RB Devereux, KE Harris și colab., „Rezoluția în timpul tratamentului sau absența hipertrofiei ventriculare stângi electrocardiografice este asociată cu o incidență scăzută a diabetului zaharat nou debut la pacienții hipertensivi: intervenția losartan pentru reducerea finală a hipertensiunii. Studiu (LIFE),” Hypertension, voi. 50, nr. 5, p. 984–990, 2007.

[5] M. Salvetti, A. Paini, F. Bertacchini, și colab., „Schimbări în geometria ventriculului stâng în timpul tratamentului antihipertensiv”, Pharmacological Research, voi. 134, p. 193–199, 2018.

[6] Y. Ye, H. Gong, X. Wang, et al., „Tratamentul combinat cu agenți antihipertensivi îmbunătățește efectul qiliqiangxin-ului asupra hipertrofiei și remodelării cardiace induse de suprasolicitarea presiunii cronice la șoarecii de sex masculin,” Journal of Cardiovascular Pharmacology, vol. 65, nr. 6, p. 628–639, 2015.

[7] C. Fu, J. Li, A. Aspire, și colab., „Glicozidele feniletanoide de Cistanche tubulosa induc apoptoza în celulele Eca-109 prin calea dependentă de mitocondrii,” Oncology Letters, voi. 17, nr. 1, p. 303–313, 2018.

[8] SP You, L. Ma, J. Zhao, SL Zhang și T. Liu, „Glicozidele de feniletanol din Cistanche tubulosa suprimă activarea celulelor stelate hepatice și blochează conducerea căilor de semnalizare în TGF- 11/smad as potențiali agenți anti-fibroză hepatică”, Molecules, voi. 21, nr. 1, p. 102, 2016.