Partea 2: Transplantul de PBMC de iepure induse de extract de albuș de ou de pui ca tratament pentru leziuni de reperfuzie-ischemie renală la iepuri

Pentru mai multe informații contactează:tina.xiang@wecistanche.com

Faceți clic pe linkul de mai jos pentru a obține partea 1

https://www.xjcistanche.com/news/part-1-transplantation-of-chicken-egg-white-ex-54616513.html

Faceți clic pentru a afla mai multe informații. despre îmbunătățirea rinichilor

Rezultate

1. Etichetarea cu succes a PBMC-urilor cu CFSE

PBMC-urile marcate cu diacetat de carboxifluoresceină și ester succinimidilic (CFSE) au prezentat fluorescență galben-verde la microscop cu fluorescență, așa cum se arată în Eig 1B. După contracolorarea cu DAPI, toate celulele au prezentat fluorescență albastră, așa cum se arată în Fig 1A, iar o analiză a suprapunerii în colorarea cu fluorescență a arătat că celulele au fost marcate cu succes, așa cum se arată în Eig 1C.

2. Identificarea PBMC-urilor după inducție

2.1. Nivelurile relative de expresie ale genelor de celule somatice și legate de multipotență în PBMC neinduse și induse.Expresia NANOG, OCT4 și SOX2 a fost semnificativ crescută în PBMC stimulate cu extract de albuș de ou de găină, iar expresia genei de celule somatice LMNA a fost scăzută (Fig 1D), ceea ce a indicat că celulele s-au diferențiat în celule multipotente. Analiza statistică a arătat că cele două grupuri au fost semnificativ diferite (n=3, p=0,003). Celulele au fost induse de trei ori și trei replici biologice au fost incluse în studiu. Diferența în gena celulelor somatice LMNA între cele două grupuri nu a fost semnificativă statistic.

2.2. Factorul de pluripotență al PBMC-urilor induse a fost semnificativ mai mare decât cel al PBMC-urilor neinduse. Dintre celulele neinduse,{{0}}.{081% au fost pozitive pentru OCT4-PE, în timp ce 99,3% dintre celulele induse au fost pozitive pentru OCT4-PE . Procentajele de celule neinduse și induse SSEA-4-PE pozitive au fost de 1,08 la sută și, respectiv, 16,5 la sută. Mai mult, 0.495% dintre celulele neinduse au fost pozitive pentru NANOG-PE, în timp ce 95,8% dintre celulele induse s-au dovedit a fi NANOG-PE-pozitive (Fig 1E-1M). Procentele de celule de control izotip pozitive pentru OCT4-PE, SSEA{-4-PE și NANOG-PE au fost de 0,546 la sută, 0,401 la sută și, respectiv, 0,249 la sută.

2.3. Analizele imunohistochimice au dat rezultate pozitive pentru PBMC induse.Analizele imunohistochimice ale OCT4 și NANOG au arătat că PBMC-urile induse, dar nu și PBMC-urile neinduse, au exprimat acești markeri (Figura 2A-2D). Fig2A și 2C arată PBMC neinduse, iar Fig. 2B și 2D arată PBMC induse. În plus, expresia OCT4 este prezentată în Figurile 2A și 2B, iar Fig. 2Cand 2D arată expresia NANOG.

2.4. Analizele Western blot au dat rezultate pozitive pentru PBMC induse.Conform rezultatelor Western blot, OCT4 a fost exprimat în PBMC induse, dar nu și în PBMC neinduse (EFig 2E).

2.5. Lungimile relative ale telomerilor au fost semnificativ mai mari în PBMC induse.Pe baza rezultatelor PCR cantitative, telomerii PBMC-urilor induse (1,83807±0.84756) au fost semnificativ mai lungi decât cei ai PBMC-urilor neinduse (1±0,08307) (Eig 2E, înseamnă ± abateri standard). , n=5,p=0.013), ceea ce a indicat că celulele s-au diferențiat în celule stem tinere. Lungimile relative ale telomerilor au crescut de fapt după dediferențiere.

3. Nivelurile serice de azot ureic și creatinine au fost scăzute în grupul de tratament cu celule induse

Grupul de control model a avut un conținut de azot ureic de 22,1 mmol/l și un conținut de creatinină de 452 umol/l. După trei runde de transplant cu celule induse, conținutul de azot ureic a fost de 7 mmol/l, iar conținutul de creatinină a fost de 74 μmol/l; aceste valori au fost similare cu nivelurile normale. Nivelurile din grupul de tratament cu celule neinduse au rămas ridicate (Fig 2G). Analiza statistică a arătat diferențe semnificative statistic între rezultatele celor patru grupuri (p= 0.031).

4. Concentraţiile de proteine ​​urinare au fost scăzute în grupul indus

Concentrația proteinei urinare în grupul de control model a fost de 8,17 mg/ml. După cele trei tratamente, concentrația de proteine ​​urinare în grupul indus a fost de 4,35 mg/ml, ceea ce a fost similar cu nivelul normal. Cu toate acestea, conținutul de proteine ​​urinare al grupului neindus a rămas ridicat la 7,96 mg/ml (Fig 2H). Analiza statistică a arătat diferențe semnificative statistic între rezultatele obținute din cele patru grupuri (p=0.001).

5. Celulele marcate au fost detectate în grupul indus

După cum se arată în Fig3A-3D, multe celule fluorescente au fost distribuite în rinichii grupului de tratament cu celule induse, în timp cețesuturi renaledin celelalte trei grupuri nu au prezentat celule fluorescente. O posibilă explicație este că celulele induse sunt transportate la rinichiul lezat pentru a repara deteriorarea. Distribuția PBMC-urilor induse marcate fluorescent în secțiunile de rinichi înghețate a sugerat că aceste celule au fost implicate în repararea rinichiului lezat.

6. Structura rinichiului grupului indus a prezentat un fenotip normal

Pe baza rezultatelor colorării cu hematoxilină-eozină (HE), structura rinichilor iepurilor din grupul de control model a fost deteriorată. După tratamentul cu celule induse, celrenalstructura tisulară a prezentat un fenotip normal. În schimb, afectarea țesutului renal a persistat în grupul de tratament cu celule neinduse (Fig 3E-3H). Scorul de necroză tubulară acută (ATN) este prezentat în Fig 3I.

7. IOD-ul grupurilor de celule induse a fost redus semnificativ

Software-ul Image-Pro Plus 6.0(Media Cybernetics, Inc., Rockville, MD, SUA) a fost utilizat pentru a efectua o analiză imunohistochimică a densității optice cumulate (IOD). Pentru fiecare grup, cel puțin șase câmpuri de mărire 200× au fost selectate aleatoriu din fiecare secțiune și au fost capturate imagini. Am încercat să vedem întregul câmp vizual pentru a ne asigura că fiecare fotografie are același fundal. Software-ul Image-Pro Plus 6.0 a fost folosit pentru a selecta aceeași culoare maro ca standard uniform pentru a evalua colorarea pozitivă în toate imaginile. Fiecare imagine a fost analizată pentru a determina IOD al colorării pozitive. IOD a fost crescut semnificativ în grupul de control model, în timp ce IOD ale grupurilor de celule de control normal și induse au fost reduse și, respectiv, semnificativ reduse. IOD al grupului de tratament cu celule neinduse nu a fost redus semnificativ în comparație cu cel al grupului de control model (Fig3). Analiza statistică a arătat diferențe semnificative între rezultatele celor patru grupuri (p =0.001).

8. Fibroza a fost îmbunătățită în grupul indus

S-au observat depuneri substanțiale de fibre de colagen în grupul de control model și a apărut o fibroză gravă. Această fibroză a fost îmbunătățită sau eliminată în grupul de tratament cu celule induse, în timp ce fibroza severă a fost încă observată în grupul tratat cu celule neinduse (Eig 4A-4D).

9. Îngroșarea membranei bazale nu a fost observată în grupul indus

Grosimile membranei bazale glomerulare, ale membranei bazilare a capsulei renale și ale membranei tubulointerstițiale au fost semnificativ crescute în grupul de control model. În grupul de tratament cu celule induse, membrana bazală nu a prezentat nicio îngroșare semnificativă, în timp ce membrane bazale mai groase au fost încă observate în grupul de tratament cu celule neinduse (Fig 4E-4H). Scorurile grosimii membranei bazale sunt prezentate în Fig 4I.

10. Celule transplantate diferențiate în celule epiteliale tubulare

Rezultatele imunofluorescenței au arătat că celulele transplantate au prezentat fluorescență verde și roșie în același timp, ceea ce a indicat că celulele transplantate au fost diferențiate în celule epiteliale tubulare (TEC) (Fig 4J).

11. Substanțele identificate au fost crescute în grupul model și au scăzut după tratament

În modul ion negativ, cele două substanțe care au afișat niveluri semnificativ crescute în grupul de control model au fost 2’-deoxi-D-riboză și N-acetilglucozamină 1-fosfat (Fig 5A). Nivelurile ambilor compuși au fost reduse semnificativ după terapia celulară indusă în comparație cu nivelurile găsite în grupul de control model (Fig5A). În modul ion pozitiv, nivelurile a trei substanțe (D-pinitol, lisil-glicină și glutamil). -asparagina) au fost crescute semnificativ în grupul de control model (Fig 5B), iar nivelurile acestor trei substanțe au fost semnificativ reduse după terapia celulară indusă în comparație cu cele găsite în grupul de control model (Fig 5B)

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244160.g005

În modul ion negativ, nivelurile celor două substanțe identificate au fost crescute în grupul model și au scăzut după tratament, ceea ce a indicat o corelație semnificativă între nivelurile celor două substanțe.

În modul ion pozitiv, nivelurile celor trei substanțe identificate au fost crescute în grupul de control model și au scăzut după tratament, ceea ce a indicat corelații semnificative între nivelurile acestor trei substanțe.

12. S-au observat modificări semnificative în metabolismul pirimidinei și în căile de biosinteză ale fenilalaninei, tirozinei și triptofanului

În modul ion negativ, a fost detectată o schimbare semnificativă în calea metabolismului pirimidinei între grupul de control model și grupul de control normal (Eig6A). În plus,

modificări semnificative în această cale au fost observate în grupul de tratament cu celule induse în comparație cu grupul de control model (Fig 6B), ceea ce a indicat că calea de metabolizare a pirimidinei este o cale modificată semnificativ. În analiza modului de ioni pozitivi, căile de biosinteză a fenilalaninei, tirozinei și triptofanului au fost modificate semnificativ în grupul de control model în comparație cu grupul de control normal (Fig 6C), iar aceste căi au fost modificate semnificativ în grupul de tratament cu celule induse în comparație cu grupul de control. grup de control model (Eig 6D), care a indicat că căile de biosinteză a fenilalaninei, tirozinei și triptofanului sunt căi semnificative. În Fig6, o culoare mai închisă a bulei și un volum mai mare indică o diferență mai semnificativă. După cum arată săgețile din Fig. 6A și 6B, diferența în calea metabolismului pirimidinei este semnificativă și, așa cum este indicat de săgețile din Fig. 6C și 6D, diferențele în căile de biosinteză a fenilalaninei, tirozinei și triptofanului sunt semnificative.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244160.g006

Discuţie

Acutrinichileziunea cauzată de ischemie-reperfuzie este o boală clinică frecventă, iar rata mortalității pacienților cu leziuni renale acute este de aproximativ 30% până la 50% din cauza măsurilor limitate de tratament[14]. În timpul ischemiei, activarea enzimelor induce distrugerea citoscheletului, deteriorarea membranei celulare și degradarea ADN-ului, ceea ce duce în cele din urmă la necroză celulară și apoptoză [15]. Ischemia-reperfuzia activează, de asemenea, proteinele complementului, citokinele și chemokinele, printre alte molecule, iar mecanismele care stau la baza leziunii ischemie-reperfuzie sunt de o importanță substanțială [16]. În plus, celulele stem transplantate promovează migrarea și recrutarea celulelor stem renale reziduale la locul leziunii și induc diferențierea acestora în TEC, dar mecanismul exact este neclar [17].

Mortalitatea pacienților cu leziuni de ischemie-reperfuzie este mare din cauza lipsei unui tratament clinic eficient [18]. Afecțiunea necesită terapie de substituție renală pe termen lung sau pe tot parcursul vieții sautransplant renal[19]. Mecanismul patofiziologic al leziunii ischemie-reperfuzie este foarte complicat și rezultă din numeroase interacțiuni între celulele inflamatorii, celulele endoteliale vasculare și citokine[20]. În ultimii ani, celulele stem mezenchimale au devenit centrul cercetării privind leziunile ischemie-reperfuzie [21] și s-a dovedit că îmbunătățesc ischemia-reperfuzie indusă.leziuni renale. După cum se arată în studiile care utilizează modele de ischemie-reperfuzie, celulele stem mezenchimale joacă un rol important în reglarea imunității, participând la reconstrucția vasculară [22] și repararea micromediului renal prin secretarea de factori antiapoptotici paracrini, factori mitogeni și factori angiogeni. Un studiu recent folosind celule stem de diferite origini a arătat că celulele stem pluripotente induse alte tipuri de celule stem [22]. Credem că celulele induse sunt mai probabil să fie celule stem mezenchimale, deoarece sunt mai mature decât celulele stem pluripotente induse.

După transplantul de celule stem pluripotente induse, moleculele exprimate pe suprafața celulelor stem pluripotente induse interacționează cu celulele T pentru a regla activitatea lor biologică. Celulele T pot evita sistemul imunitar în urma deteriorării și pot reduce intensitatea răspunsului imun în țesutul înconjurător, iar aceste celule joacă astfel un rol în protejarea funcției țesutului deteriorat într-o oarecare măsură [23]. Am stabilit cu succes un model de iepure de fibroză interstițială renală și am demonstrat că transplantul de celule stem autologe induse poate repara afectarea rinichilor în decurs de 8 săptămâni [24]. Celulele stem oferă un micromediu avantajos pentru repararea leziunilor epiteliale tubulare renale [24]. În acest experiment, după administrarea a trei tratamente săptămânale consecutive, nivelurile de creatinine serice și de azot ureic din grupul de tratament cu celule induse au fost restabilite la același nivel observat în grupul de control normal, în timp ce nivelurile din tratamentul cu celule neinduse și modelul de control grupurile au fost semnificativ crescute.

După cum arată Haynesworth și colab. [25], celulele stem mezenchimale secretă o varietate de factori de creștere, factori de stimulare a coloniilor, molecule de adeziune și interleukine (IL-6, IL-7, IL-8, I{{5} }}, IL-14 și IL-15), care promovează mitoza TEC renale și repararea țesuturilor și, prin urmare, inhibă creșterea concentrațiilor de creatinine și azot ureic.

În studiul de față, nivelurile de expresie ale factorilor de pluripotență SSEA-4, NANOG și OCT4 în PBMC induse au fost detectate prin citometrie în flux, iar rezultatele au arătat că PBMC-urile s-au dediferențiat în celule multipotente. Analiza PCR cantitativă a demonstrat că telomerii din PBMC-urile induse au fost semnificativ mai lungi decât cei din PBMC-urile neinduse. Pe baza dovezilor noastre, PBMC-urile obținute din sângele periferic de iepure se dediferențiază în celule stem multipotente în urma tratamentului cu extracte de albuș de găină și prezintă caracteristicile tulpinii mezenchimale. celule [9], ceea ce permite eventuala lor participare la repararea leziunii renale. Studiile au arătat că celulele de ou de mamifere și extractele de celule de ou de Xenopus pot reprograma celulele somatice [6,7]. Cercetările noastre anterioare au arătat că extractul de ouă de găină poate, de asemenea, reprograma celulele somatice [5,9]. Oul de găină este cel mai mare ovul, iar capacitatea sa de a reprograma celulele somatice va avansa astfel cercetarea biologică celulară. Etapele de reprogramare induse de celule de ou de mamifer și de extract de celule de ou de Xenopus sunt greoaie, iar extractele sunt dificil de obținut; cu toate acestea, ouăle de găină sunt cele mai mari celule de ou și se poate obține astfel o cantitate mare de extract de albuș de găină. Dacă procedura este efectuată într-o manieră sterilă, extractul obținut nu trebuie să fie filtrat și sterilizat. Activitatea extractului poate fi menținută bine. Am repetat experimentul de inducție folosind concentrații finale de extract de albuș de pui de 10 la sută, 20 la sută, 30 la sută, 40 la sută și 50 la sută pentru a induce PBMC (vezi Figurile Sl la S3). Pe măsură ce concentrația de extract de albuș de pui a crescut, rata pozitivă a factorului de pluripotență a crescut treptat, iar cea mai mare rată pozitivă a fost obținută cu o concentrație finală de 50 la sută. Cu toate acestea, o concentrație de extract de albuș de găină mai mare de 50 la sută va afecta creșterea celulelor. Am folosit protează, DNază și RNază pentru a liza proteina, ADN-ul și respectiv ARN-ul din extractul de albuș de ou, apoi am efectuat experimentul nostru de inducție. Am constatat că extractul de albuș de ou obținut după liza proteinelor nu mai are capacitatea de a reprograma celulele, iar extractul de proteine ​​​​de pui obținut după liza ADN și ARN are încă capacitatea de a reprograma celule. Prin urmare, aceste constatări au confirmat că rolul principal al extractului este jucat de componenta proteică (rezultatele nu sunt afișate).

De asemenea, am analizat probe de sânge de animale după o săptămână de tratament. Cu toate acestea, diferența dintre cele patru grupuri nu a fost semnificativă; astfel, arătăm rezultatele obținute pentru cele patru loturi doar după trei tratamente. Distribuția PBMC-urilor induse marcate fluorescent în secțiunile de rinichi înghețate a sugerat că aceste celule au fost implicate în repararea rinichiului lezat. Colorația HE a arătat leziuni ale structurii rinichilor în grupul de control model. După tratamentul cu celule induse, rinichiul a prezentat o structură normală, în timp ce deteriorarea structurii rinichilor a fost observată în grupul de tratament cu celule neinduse. După trei tratamente, colorarea tricrom a lui Masson a secțiunilor de rinichi din cele patru grupuri a evidențiat depuneri substanțiale de fibre de colagen și fibroză gravă în grupul de control model. Această fibroză a fost îmbunătățită sau eliminată prin tratamentul cu celule induse, în timp ce fibroza severă a fost încă observată în grupul de tratament cu celule neinduse. O analiză metabonomică renală a celor patru grupuri efectuată în modul ion negativ a evidențiat niveluri semnificativ crescute de 2'- deoxi-D-riboză și N-acetilglucozamină 1-fosfat în grupul de control model în comparație cu grupul de control normal, iar nivelurile acestor substanțe au fost reduse semnificativ în grupul de tratament cu celule induse în comparație cu grupul de control model. În modul ion pozitiv, nivelurile a cinci substanțe au fost semnificativ crescute în grupul de control model comparativ cu grupul de control normal, iar nivelurile a trei dintre aceste cinci substanțe au fost semnificativ reduse în grupul de tratament cu celule induse în comparație cu grupul de control model. .

Principalele mecanisme postulate care stau la baza reparării observate a rinichilor și a reducerii însoțitoare a răspunsului inflamator sunt enumerate mai jos. ① PBMC induse se diferențiază în TEC sau fuzionează cu celulele supraviețuitoare pentru a promova direct repararea țesutului renal. ②Efectele sinergice ale diferitelor citokine oferă un micromediu bun pentru repararea țesuturilor renale [26]. După trei transplanturi de PBMC induse, funcția renală și indicii patologici au revenit la nivelurile normale, iar aceste niveluri normale au persistat până la sfârșitul experimentului, ceea ce a sugerat că celulele stem multipotente transplantate au promovat eficient repararea structurii și funcției țesutului renal.

Deși mecanismul specific prin care PBMC induse promovează repararea structurală și funcțională a rinichilor nu a fost încă pe deplin înțeles, rezultatele acestui studiu sugerează că transplantul intravenos de PBMC induse promovează repararea după leziunea acută a rinichilor. Aceste rezultate oferă o referință valoroasă pentru cercetătorii care investighează funcția celulelor stem multipotente în regenerarea rinichilor deteriorați și pentru tratamentul clinic al bolilor renale acute și cronice.

În rezumat, transplantul indus de celule stem multipotente are o semnificație substanțială pentru repararea celulelor parenchimatoase în modelele animale de insuficiență renală și alte boli de rinichi.

Concluzii

Tratamentul PBMC cu extract de albuș de ou de găină a crescut semnificativ expresia genelor și proteinelor legate de pluripotență, ceea ce a indicat că celulele s-au dediferențiat în celule stem multipotente. Astfel, PBMC induse se dediferențiază în celule stem multipotente și pot fi potențial utilizate pentru a trataleziuni renale. Sunt necesare cercetări viitoare pentru a identifica moleculele cheie din extractul de albuș de ou de pui și, astfel, pentru a îmbunătăți eficiența inducției.

Referințe

1. Yuan X, Li D, Chen X, Han C, Xu L, Huang T și colab. Veziculele extracelulare din celulele stromale mezenchimale derivate din celule stem pluripotente induse de om (hiPSC-MSC) protejează împotriva ischemiei renale/leziunilor de reperfuzie prin eliberarea proteinei cu specificitate (SP1) și activarea transcripțională a sfingozin kinazei 1 și inhibarea necroptozei. Moartea celulară Dis. 2017; 8(12):3200. Epub 2017/12/14. https://doi.org/10. 1038/s41419-017-0041-4 [pii]. PMID: 29233979; PubMed Central PMCID: PMC5870585.

2. Fahmy SR, Soliman AM, El Ansary M, Elhamid SA, Mohsen H. Eficacitatea terapeutică a transplantului de celule stem mezenchimale a cordonului ombilical uman împotriva ischemiei renale/leziunilor de reperfuzie la șobolani. Celulă de țesut. 2017; 49(3):369–75. Epub 2017/05/10. S0040-8166(16)30171-9 [pii] https://doi.org/10.1016/j.tice. 2017.04.006 PMID: 28476205.

3. Hu H, Zou C. Celulele stem mezenchimale în lezarea ischemiei-reperfuziei renale: perspective biologice și terapeutice. Curr Stem Cell Res Ther. 2017; 12(3):183–7. Epub 2016/10/27. https://doi.org/10. 2174/1574888X11666161024143640 [pii]. PMID: 27781940.

4. Zhou L, Song Q, Shen J, Xu L, Xu Z, Wu R și colab. Comparația fracției vasculare stromale adipoase umane și a celulelor stem mezenchimale derivate din adipos pentru atenuarea ischemiei/leziunilor de reperfuzie renală acută. Sci Rep. 2017; 7:44058. Epub 2017/03/10. https://doi.org/10.1038/srep44058 [pii]. PMID: 28276451; PubMed Central PMCID: PMC5343423.

5. Ruan GP, ​​Wang JX, Pang RQ, Yao X, Cai XM, Wang Q și colab. Tratamentul cu extracte de albuș de pui sau de ou întreg menține și îmbunătățește supraviețuirea și diferențierea celulelor splinei. Citotehnologie. 2012; 64(5):541–51. Epub 22/02/2012. https://doi.org/10.1007/s10616-012-9431-8 PMID: 22350684; PubMed Central PMCID: PMC3432533.

6. Miyamoto K, Tsukiyama T, Yang Y, Li N, Minami N, Yamada M și colab. Extractele fără celule din ovocite de mamifere induc parțial reprogramarea nucleară în celulele somatice. Biol Reprod. 2009; 80(5):935–43. Epub 2009/01/24. https://doi.org/10.1095/biolreprod.108.073676 [pii]. PMID: 19164171.

7. Alberio R, Johnson AD, Stick R, Campbell KH. Remodelarea nucleară diferențială a celulelor somatice de mamifere de către ovocitul Xenopus laevis și citoplasma oului. Exp Cell Res. 2005; 307(1):131–41. Epub 2005/06/ 01. S0014-4827(05)00088-1 [pii] https://doi.org/10.1016/j.yexcr.2005.02.028 PMID: 15922733.

8. Hansis C, Barreto G, Malory N, Niehrs C. Reprogramarea nucleară a celulelor somatice umane prin extractul de ou de Xenopus necesită BRG1. Curr Biol. 2004; 14(16):1475–80. Epub 2004/08/25. https://doi.org/10. 1016/j.cub.2004.08.031 [pii]. PMID: 15324664.

9. Ruan GP, ​​Yao X, Shu J, Liu JF, Pang RQ, Pan XH. Extractele de albuș de ou de pui promovează expresia OCT4 și NANOG și creșterea telomerilor în celulele 293T. Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 2017; 63(7):59– 65. Epub 2017/08/26. https://doi.org/10.14715/cmb/2017.63.7.10 PMID: 28838341.

10. Alzahrani FA. Melatonina îmbunătățește potențialul terapeutic al exozomilor derivați de celule stem mezenchimale împotriva leziunilor de reperfuzie-ischemie renală la șobolani. Am J Transl Res. 2019; 11(5):2887–907. Epub 2019/06/21. PMID: 31217862; PubMed Central PMCID: PMC6556638.

11. Lee KW, Kim TM, Kim KS, Lee S, Cho J, Park JB și colab. Leziunea de ischemie-reperfuzie renală la un model de maimuță diabetică și testarea terapeutică a celulelor stem mezenchimale derivate din măduva osoasă umane. J Diabet Res. 2018; 2018:5182606. Epub 2018/08/30. https://doi.org/10.1155/2018/5182606 PMID: 30155487; PubMed Central PMCID: PMC6092988.

12. Xie LB, Chen X, Chen B, Wang XD, Jiang R, Lu YP. Efectul protector al celulelor stem mezenchimale ale măduvei osoase modificate cu klotho asupra leziunii de ischemie-reperfuzie renală. Ren Fail. 2019; 41(1):175–82. Epub 2019/04/04. https://doi.org/10.1080/0886022X.2019.1588131 PMID: 30942135; PubMed Central PMCID: PMC6450585.

13. Zhu G, Pei L, Lin F, Yin H, Li X, He W și colab. Exozomii din celulele stem mezenchimale derivate din măduva osoasă umană protejează împotriva ischemiei/leziunilor de reperfuzie renală prin transferul miR-199a-3p. J Cell Physiol. 2019; 234(12):23736–49. Epub 2019/06/11. https://doi.org/10.1002/jcp.28941 PMID: 31180587.

14. Shen B, Liu J, Zhang F, Wang Y, Qin Y, Zhou Z și colab. Exozomul pozitiv CCR2 eliberat de celulele stem mezenchimale suprimă funcțiile macrofagelor și atenuează leziunile renale induse de ischemie/reperfuzie. Celulele Stem Int. 2016; 2016:1240301. Epub 2016/11/16. https://doi.org/10.1155/2016/ 1240301 PMID: 27843457; PubMed Central PMCID: PMC5098097.

15. Ying MK, Chen ZM, Wang YC, Feng S, Lin C, Chen FF și colab. [Efectul celulelor stem mezenchimale metanefrice după leziunea renală de ischemie-reperfuzie la șoareci]. Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 2016; 96(20):1573– 7. Epub 2016/06/09. https://doi.org/10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2016.20.006 PMID: 27266685