Transportul echinacozidului și acteozidei sensibil la floridzină și traseul alterat de absorbție intestinală după aplicarea extractului de Cistanche Tubulosa

Pentru mai multe informații:ali.ma@wecistanche.com

Tadatoshi Tanino și colab

Obiective abstracte

Obiectivul acestui studiu a fost de a aborda efectele benefice aleExtract de Cistanche tubulosaprivind îmbunătățirea permeabilității intestinale scăzute a echinacozidei (ECH) și actozidei (ACT).

Metode

Absorbția ECH și ACT înExtract de Cistanche tubulosaa fost caracterizat folosind monostraturi de celule Caco-2 intestinale umane cu compuși intacți. Absorbția dependentă de transportor de glucoză a ECH și ACT a fost confirmată printr-o tehnică de perfuzie in situ intestinală.

Descoperiri cheie

Permeabilitatea aparentă (Papp) nu a fost semnificativ diferită între ECH intact și ACT intact. În prezența flloridzinei, Papp de ECH și ACT la o doză mare a fost redusă la 20% din non-tratamentul respectiv, dar nu a fost modificată de floretină și verapamil.Extract de Cistanche tubulosala doze mici și mari au crescut Papp de ECH și ACT (ambele de trei ori), ducând la participarea lor mare la absorbția independentă de transportor de glucoză dependent de sodiu. La o concentrație scăzută, nivelurile concomitente de ECH și ACT din sângele portal au fost suprimate semnificativ de flloridzin.

Concluzie

Cele alimentare și medicinaleExtract de Cistanche tubulosacreșterea absorbției intestinale a ECH și ACT poate servi la o mai bună gestionare a sănătății umane, deși implicarea transportului sensibil la floridzină ar trebui redusă.

Cuvinte cheieacteozid; Monostraturi de celule Caco-2;Extract de Cistanchetubulosa; echinacozid;transportator de glucoză sensibil la floridzină

Extract de Cistanche tubulosa

Faceți clic pe pulbere de Cistanche tubulosa

Introducere

Rădăcinile de Cistanche tubulosa au fost folosite în mod tradițional pentru medicamente și alimente.Extract de Cistanche tubulosaeste cunoscut că posedă efecte farmacologice în diferite boli ale creierului, funcții anti-îmbătrânire, metabolismul grăsimilor și creșterea părului.[1–4]Recent, iridoidele, monoterpenoidele, feniletanoidglicozidele și lignanii au fost izolate dinCistanche tubulosa.[5,6] Glicozidele feniletanoide, o clasă de compuși polifenolici, sunt principalele ingrediente chimice din speciile Cistanche,[7] deși cantitățile lor variază de la diferite specii. Echinacozidul (ECH; Figura 1) este una dintre glicozidele feniletanoide majore din HerbaCistanchis. Este hidrolizată la actozidă (ACT; numită și verbascozidă) de către enzimele de origine bacteriană din intestinul gros.[8,9] ECH și ACT posedă activitate benefică de hepatoprotecție[10] și antiinflamație[11] la animalele rozătoare. În mod surprinzător, ECH foarte solubil în apă îmbunătățește rezultatele comportamentale și neurochimice într-un model de șoarece al bolii Parkinson și a inhibat activarea caspazei-3 și a caspazei-8 în neuronii granulelor cerebeloase.[9] Este bine cunoscut faptul că bariera hemato-encefalică limitează strict intrarea și distribuirea xenobioticelor în creier din sânge. Wu și colab.[12] de asemenea, a arătat că ACT solubil în apă a fost distribuit rapid în țesuturile creierului de șobolani. Prin urmare, ECH și ACT pot fi transportate în creier, intestine și ficat de către sistemul (sistemele) specifice.

Deși există dovezi puternice care sugerează că consumul deExtract de Cistanche tubulosaeste benefică pentru sănătatea umană, permeabilitatea ECH pure în monostraturile de celule Caco{{{0}} la o concentrație apicală de 8,4 ± 1,6 ug/ml este egală cu sau sub cea a markerului de transport paracelular manitol.[13] Când ECH pur este administrat oral la șobolani (doză, 1{{10}}{0 mg/kg), absorbția este extrem de rapidă (Tmax, 15 min), iar concentrația maximă în ser este foarte scăzută. (Cmax, 0,61 ± 0,32 ug/ml).[14] Biodisponibilitatea absolută a ECH este de numai 0,83 la sută. În mod similar, atunci când celulele Caco-2 sunt incubate cu o fracție fenolică parțial purificată din apa reziduală de la mori de măsline, absorbția ACT pură este rapidă, acumularea maximă care are loc după 30 min și o eficiență totală de acumulare de 0,1%, oferind niveluri intracelulare de 130 pmol/mg proteină celulară.[15] La șobolani, concentrația maximă (0,13 ± 0,03 ug/ml) de ACT pur a fost atinsă în 30 de minute după administrarea orală cu 100 mg/kg,[12] implicând o absorbție intestinală rapidă. Biodisponibilitatea orală a ACT, precum și a ECH, este destul de scăzută (0,12 ± 0,04 la sută), sugerând posibilitatea unor efecte de primă trecere în tractul intestinal și ficat. În bila de șobolan, conjugații de metilare și glucuronidare ai ECH sunt metaboliți majori,[16], deși amploarea metabolismului hepatic rămâne neclară. Am descoperit preliminar că ECH și ACT au fost destul de stabile în omogenații mucoasei intestinale de șobolan și acid gastrica artificial (datele nu sunt prezentate). Najar și colab.[17] a demonstrat că ACT inhibă activitatea P-glicoproteinei (P-gp)-ATPazei într-o manieră similară cu verapamilul (un inhibitor reprezentativ de P-gp), implicând un modulator P-gp; cu toate acestea, este incert dacă ACT este disponibil ca substrat P-gp. În mod interesant, descoperirile recente ale flavonoid-D-glucozidelor din dietă au arătat că proteina cu rezistență la mai multe medicamente (MRP2) a mascat absorbția mediată de transportor de glucoză dependent de sodiu (SGLT)1-de quercetin 4′-O- -glucoză,[18 ,19] care este responsabil pentru o absorbție foarte slabă. Cu toate acestea, se cunoaște foarte puțin despre sensibilitatea glucozidelor polifenolice la transportorii de absorbție, inclusiv transportatorii de glucoză. Informațiile despre caracteristicile de absorbție ale quercetinei 4′-glucozide și ECH rapid permeabil la bariera hematoencefalică ne-au determinat să investigăm absorbția sensibilă la transportor a feniletanoidului C glicozidei dietetice. .tubulosa.

În acest studiu, am investigat absorbția mediată de transportor de glucoză a ECH și ACT intacte utilizând monostraturi de celule Caco-2 intestinale umane. Simultan, transportul de absorbție a ECH și ACT alimentară concomitentăExtract de Cistanche tubulosaa fost caracterizat printr-un sistem de perfuzie intestinală in-vitromodel și in situ cu prelevare de sânge portal, care poate distinge cu ușurință între gradul de absorbție și evitarea primei dispoziții hepatice.

Materiale și metode

Materiale

Intact ECH și ACT au fost cadouri generoase de la EishinTrading Co., Ltd (Osaka, Japonia). Floridzina și floretina au fost achiziționate de la Tokyo Kasei Co., Ltd. (Tokyo, Japonia). Verapamil și acidul p-cumaric, utilizate ca standarde interne pentru testul de cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC), au fost obținute de la Sigma-Aldrich (St Louis, MO). ,STATELE UNITE ALE AMERICII). Toate celelalte substanțe chimice utilizate au fost de calitate analitică și disponibile comercial.

Material vegetal și prepararea extractului metanolic

C. tubulosa (SCHRENK) R. WIGHT (Orobanchaceae) este o plantă parazită perenă care crește pe rădăcinile speciilor Salvadora sau Calotropis și este distribuită în țările nord-africane, arabe și asiatice. Tulpinile uscate ale C. tubulosa au fost pulverizate și extrase de trei ori cu reflux de metanolunder timp de 3 ore. Evaporarea solventului sub presiunea redusă a furnizat extractul metanolic. Extractul metanolic (grad comercial, lot nr. 20070130; denumire comercială înregistrată, Sabaku Ninnjinn Kanka) a fost un cadou generos de la Eishin Trading Co., Ltd prin Muraoka și Morikawa (Universitatea Kinki, Japonia), iar identificarea botanică a fost efectuată de profesorul Jia Xiaoguang în Institutul de Medicină Tradițională Chineză și Etnologică din Xinjiang.

Analiza extractului de plante: cromatografie

Am determinat conținutul ECH și ACT înExtract de Cistanche tubulosa(Lotul nr. 20070130) printr-o analiză HPLC descrisă mai jos. Datele obținute sunt prezentate în Tabelul 1.

Cultură de celule

Celulele Caco{{0}}, achiziționate de la American Type CultureCollection (ATCC, Rockville, MD, SUA), au fost utilizate la pasajele 38-53. Au fost cultivate într-un mediu de cultură constând din mediu Eagle modificat de Dulbecco (DMEM, Nacalai Tesque Co., Kyoto, Japonia) suplimentat cu 0,1 mM aminoacizi neesențiali, 10% ser fetal bovin inactivat termic, 100 U/ml penicilină G și 0,1 mg/ml sulfat de streptomicină.

Studii de transport

Celulele Caco-2 au fost placate la o densitate de 6,4 × 103 celule/cm2 pe filtre de policarbonat. Monostraturile au fost utilizate pentru experimente de transport la 21-25 de zile după însămânțare. ECH și ACT intacte care erau echivalente cu conținutul lor înExtract de Cistanche tubulosa (4.5 and 13.5 mg/ml) were mixed with DMEM medium containing 0.5% dimethylsulfoxide to maintain the integrity of the cell monolayer over the periods of the experiments. Intact ACT equivalent to ECH content in the extract was also dosed in the incubation medium. The extract was suspended in a DMEM medium and was centrifuged to remove insoluble components. Supernatants were loaded to the apical side. At the indicated times, an aliquot of the incubation medium was withdrawn from the basolateral side and was mixed with acetonitrile containing an internal standard for the assay. In separate experiments, phloridzin (final concentration, 1 mM) and verapamil (final concentration, 0.2 mM) was added to the apical side of the monolayer; however, phloretin (final concentration, 0.3 mM) was treated on both sides of the monolayer. The integrity of monolayers was monitored by transepithelial electrical resistance (TEER) using Millicell-ERS (Millipore, Bedford, MA, USA) before and after transport experiments. TEER values of monolayers used were >300 Ω·cm2.

Echinacozidul înExtract de Cistanche tubulosa

Perfuzie intestinală in situ

Șobolani masculi Wistar (230-250 g) au fost obținuți de la SLCJapan (Hamamatsu, Japonia). Animalele au fost găzduite într-o cameră cu aer condiționat sub un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore timp de 1 săptămână înainte de utilizare. Șobolanii au fost hrăniți cu hrană standard de laborator (Oriental Yeast Co., Ltd., Tokyo, Japonia) cu apă ad libitum și au fost ținuți peste noapte înainte de test. Studiul de perfuzie cu circulație in situ a fost efectuat conform procedurii modificate descrise de Mihara și colab.[20] Pe scurt, șobolanii au fost anesteziați cu soluție de uretan 25% (1 mg/kg) pentru a evita scăderea tensiunii arteriale. S-a făcut o incizie abdominală mediană și intestinul subțire a fost expus. Canalul biliar a fost ligat pentru a evita secreția biliară în perfuzat. Întregul intestin subțire ca un segment (de la duoden la ileon) a fost clătit cu soluție salină normală la 37 de grade timp de 10 minute până când spălarea a apărut limpede. Tuburile de sticlă conectate la tuburile de silicon au fost apoi canulate în ambele capete ale intestinului subțire și fixate cu fir de sutură. Apoi, intestinul subțire a fost înlocuit în abdomen, iar canulele au fost conectate la o pompă peristaltică. Vena portă a fost canulată cu tub de polietilenă (PE10).Extract de Cistanche tubulosadisponibil comercial a fost suspendat în tampon bicarbonat Krebs-Henseleit (pH 7,4) pentru a se obține o concentrație finală de 4,5 mg/ml și a fost centrifugat timp de 10 min la 8000 rpm pentru a îndepărta componentele insolubile. Supernatantul în absența sau prezența flloridzinei (1 mM) a fost colectat într-un rezervor, care a fost menținut la o temperatură de 37 ± 0,5 grade pe tot parcursul experimentului. La orele indicate s-a prelevat sânge prin canula venei portă. După centrifugarea probelor de sânge, plasma rezultată a fost deproteinată cu acetonitril care conține standardul intern și a fost centrifugata la 3000 rpm. Supernatanții au fost evaporați și reziduul a fost dizolvat cu o fază mobilă constând în facetonitril și acid acetic 0,5%. Soluţia amestecată a fost încărcată pe o coloană HPLC. Șobolanii au fost utilizați în conformitate cu procedurile etice, urmând Ghidurile pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator emise de guvernul japonez și Universitatea Kinki.

Analiza HPLC

Analiza HPLC a fost efectuată pe un sistem echipat cu aShimadzu SPD{{0}}A, detector UV, pompă Shimadzu LC-10A și integrator cromatopac Shimadzu C-R4A (Kyoto, Japonia). ECH și ACT au fost separate folosind o coloană Inertsil ODS (5 μm, 4,6 × 150 mm, GL Sciences Inc., Osaka, Japonia). O fază mobilă de acetonitril și acid acetic 0,5 procente într-un raport de 15:85 (v/v) a fost utilizată la un debit de 1,0 ml/min. Detectarea a fost efectuată la 334 nm

Analiza cinetică

Coeficienții de permeabilitate aparentă (Papp) au fost estimați din panta porțiunii liniare a cursului de timp al transportului compusului prin monostraturi de celule Caco-2, după cum urmează: P dQ dt AC app=( ) ( )

unde dQ/dt este rata de permeabilitate, C0 este concentrația inițială a substanței dizolvate în camera donatoare și A este aria suprafeței membranei (4,7 cm2).

În studiul de perfuzie intestinală in situ la șobolan, aria de sub curba concentrației plasmatice-timp (AUC0–90) în vena portală de la momentul zero până la ultima măsurată a fost calculată conform regulii trapezoidale liniare.

Acteoside înExtract de Cistanche tubulosa

Proprietăți fizico-chimice

Suprafața polară și suprafața nepolară a compușilor au fost calculate utilizând programul SAS (versiunea 0.8,Olsson, T.; Sherbukhin, V., Synthesis and Structure Administration, 1997–2001, AstraZeneca, Cary , NC, SUA). Valorile log P și pKa determinate experimental au fost obținute din literatură.

analize statistice

Datele au fost analizate prin analiza unidirecțională a varianței, urmată de testul post-hoc al lui Tukey. Valorile probabilității mai mici de 5 la sută au fost considerate semnificative.

Rezultate

Transportul absorbtiv al echinacozidei și al actozidei prin monostraturi de celule Caco-2

La șoareci și șobolani, ECH[10,14] și ACT[12,21] intacte sunt administrate oral în doze de 100-1000 mg/kg. TheExtract de Cistanche tubulosautilizat conținea aproximativ 30 procente ECH și 15% ACT per doză. Deoarece extractul a modificat presiunea osmotică și pH-ul în mediul de incubare, concentrațiile de 4,5 și 13,5 mg/ml au fost determinate pe baza dozei orale (compuși intacți: 2–20 mg/2{{2{{31} }}} g greutate corporală) la șoareci. Extractul la doze mici (4,5 mg/ml) și mari (13,5 mg/ml) a conținut 2,0 și 6,1 mg pentru ECH și 1.0 și, respectiv, 3,0 mg pentru ACT. Am aplicat cantități de extract de C. tubulosa care au fost mult mai mici decât doza orală de ECH și ACT raportată la om (aport alimentar recomandat de extract: 150 mg care conține aproximativ 45 mg pentru ECH și 22,5 mg pentru ACT). La doze mici și mari de compuși intacți, profilele de absorbție (Figura 2) și Papp nu au fost semnificativ diferite între ECH și ACT ca echivalent ECH (Tabelul 2). Când extractul de C. tubulosa la o doză mare de 13,5 mg/ml a fost încărcat în mediu, valorile Papp (1,27 ± 0,13 și respectiv 0,34 ± 0,03 × 10−6 cm/s) concomitenții ECH și ACT au fost de trei ori mai mari decât cele (0,38 ± 0,09 și, respectiv, 0,10 ± 0,03 × 10−6 cm/s) ale ECH și ACT intacte (Tabelul 2). Extractul, spre deosebire de compușii intacți, a îmbunătățit semnificativ transportul de absorbție al ECH și ACT.

Efectul inhibitor al phloridzin, phloretin și verapamil

To characterize the intestinal absorption of ECH and ACT, Caco-2 cell monolayers were incubated with representative inhibitors. Apical glucose transporter 1-sensitive phloridzin dramatically reduced the Papp of intact ECH and ACT to 20% of non-treatment at the high dose (Table 2). Basolateral glucose transporter (GLUT) 2-sensitive phloretin did not decrease the transport of intact ECH and ACT (Figure 3). In this study, higher concentrations (>0,3 mM) de floretină nu a putut fi utilizată din cauza toxicității celulare vizibile. În plus, P-gp a fost identificat ca un jucător important responsabil pentru interacțiunea dintre medicamentele pe bază de plante și substraturile P-gp importante din punct de vedere clinic. Verapamilul nu a îmbunătățit transportul absorbtiv al compușilor intacți (Figura 3).

Transportul absorbtiv al ECH și ACT în extract (doză mică) a fost inhibat semnificativ de către flloridzin (Tabelul 2 și Figura 4). Extractul în doză mare a suprimat inhibarea sensibilă la floridzină, deși transportul ECH și ACT intacte a fost mai sensibil la floridzină (Tabelul 2).

Studiul de perfuzie intestinală in situ

Într-un studiu in situ, am testat dacă ECH și ACT intrăExtract de Cistanche tubulosaau fost transportate de SGLT1 situat pe partea apicală a intestinului subțire. Când extractul dietetic în doză mică (4,5 mg/ml) a fost perfuzat, ECH și ACT au apărut rapid în sângele portal (Figura 5). AUC a fost determinată ca 2702,8 ± 384,1 μm·min pentru ECH și 698,3 ± 197,2 μm·min pentru ACT. După ce AUC a fost normalizat cu conținut de laExtract de Cistanche tubulosa, cantitatea absorbită nu a fost semnificativ diferită între ECH și ACT. Floridzina sensibilă la SGLT1-, spre deosebire de floretină, a suprimat semnificativ transportul absorbtiv al ECH concomitent (AUC, 649,4 ± 248,2 μm·min) și ACT (nedetectat).

Discuţie

Unele ingrediente din plante sunt substraturi ale P-gp foarte exprimate în ficat, intestin, creier și rinichi. P-gp este un factor determinant pentru biodisponibilitatea in vivo, dispunerea și distribuția remediilor pe bază de plante, inclusiv sunătoare, curcumină, echinacea, ginseng, ginkgo și ghimbir.[22,23]Biodisponibilitatea genisteinei{{5} }glucozidul, un derivat flavonoid, a fost, de asemenea, limitat de transportorul intestinal MRP2.[24] Prin urmare, acest studiu a fost conceput pentru a investiga proprietățile de absorbție ale ECH și ACT dietetice și medicinale concomitente.Extract de Cistanche tubulosa.

Monostraturile de celule Caco{{0}} polarizate, precum și intestinul,[25], exprimă transportatori intestinali majori de eflux de medicamente, cum ar fi P-gp, MRP și proteina rezistentă la cancerul de sân.[26]Flavonoidele dietetice. a quercetinei[27] și miricetinei[28] s-a dovedit că inhibă efluxul mediat de P-gp atât în ​​liniile celulare, cât și în modelele animale. Verapamil, un inhibitor P-gp, nu a modificat permeabilitatea ACT și ECH în monostraturile de celule Caco-2(Figura 3), indicând că ECH și ACT intacte nu au fost limitate de pompa de eflux P-gp. Studiile noastre anterioare au arătat că proteinele MRP2 nu au fost exprimate în monostraturi de celule Caco-2.[29] Efluxul mediat de P-gp și MRP2-ar putea fi exclus în transportul ECH și ACT. Unele glicozide ale quercetinei cu lipofilitate scăzută au fost absorbite mai eficient decât quercetina însăși.[30] De asemenea, este important de reținut că ACT cu o porțiune de zahăr este distribuită rapid în țesuturile creierului. Atenția noastră s-a concentrat asupra acțiunii combinate a doi transportatori de glucoză în enterocite: SGLT în membrana de la marginea periei și transportul facilitat de difuzie a glucozei (GLUT) în membrana bazolaterală. Cultura de celule Caco-2 poate fi folosită ca model pentru studierea transportatorilor GLUT2 sensibili la floretină, SGLT1 și 2 sensibili la flloridzină.[31–34]Glucoza este transportată de la nivelul apical la partea bazolaterală a monostraturilor Caco-2. la o rată mare cu un Pappof 36,8 ± 1,1×10−6 cm/s.[35] Posedă un Papp mai mare decât markerul de transport transcelular propranolol (23,4 ± 2,8 × 10-6 cm/s). După cum se arată în tabelul 2, ECH și ACT intact au avut Papp mult mai scăzut decât cel raportat în glucoză și propranolol pasiv. Am calculat logaritmul coeficientului de partiție (octanol-apă), log P, a fost calculat a fi -2,32 și 0,077 pentru ECH și, respectiv, ACT. Compușii hidrofili polar se crede că sunt transportați pe o cale paracelulară (prin joncțiuni strânse). Cele două glicozide feniletanoide, precum manitolul, par să fie transportate pe o cale paracelulară. Cu toate acestea, flloridzin a redus dramatic permeabilitatea absorbtivă a ECH și ACT intacte (Tabelul 2), sugerând că apicalSGLT1 joacă un rol major în absorbția intestinală a ECH și ACT intacte. La o doză echivalentă, permeabilitatea ACT hidrofobă mai mare a fost aproape de permeabilitatea ECH (Figura 2 și Tabelul 2). Yoshikawa și colab.[36] au demonstrat că transportorii facilitatori (GLUT 1 și 2), precum și SGLT1 sensibil la floridzină, sunt intens exprimați în intestinul subțire. Deoarece cantitățile absorbite de compuși se bazează pe echilibrul de masă dintre absorbție și eliminare, am evaluat participarea GLUT2. Glucoza traversează membranele apicale ale enterocitelor prin SGLT1 cu afinitate mare și capacitate scăzută și iese prin membrana bazolaterală prin GLUT2 cu afinitate scăzută și capacitate mare. Floretina (un inhibitor specific al GLUT2) nu a abolit transportul ECH și ACT intacte (Figura 3). Funes și colab.[37] a demonstrat că ACT a interacționat puternic cu grupările fosfat ale membranelor fosfolipide. Deoarece grupările hidroxil sunt abundente în structura ACT, legăturile de hidrogen dintre aceste grupări și capetele polare de glicerol sau grupările fosfat ale fosfolipidelor sunt cele mai probabile interacțiuni care au loc. Când ECH intact și ACT echivalentul său au fost incubate cu monostraturi Caco-2 timp de 11 ore, acumularea celulară de ACT (0,24 ± 0,04 nmol/cm2) a fost de trei ori mai mare decât cea a ECH (0,07 ± 0,01 nmol/cm2). Ne-am gândit că ECH1-sensibile la SGLT și ACT au fost mutate încet de la enterocite în fluxul sanguin, ceea ce poate duce la nivelul scăzut de Papp observat. În comparație cu ECH foarte hidrofilă, permeabilitatea scăzută a ACT se poate datora intercalării în membranele celulare.

Extract de Cistanche tubulosa

Compușii polifenolici sunt consumați în amestecuri de plante în timpul aplicării lor clinice și sunt disponibili comercial ca suplimente alimentare. Într-un studiu in vitro, sa arătat că absorbția epicatechinei fenolice nu a fost influențată de compoziția ingredientelor din materialele alimentare pentru băuturi.[38] În schimb, Hypericum perforatumL. Matricele de produs afectează transportul quercetinglucozidelor (rutină și izoquercitrină) și hiperozidei în celulele Caco-2 datorită diferențelor în compoziția fitochimică a matricei și caracteristicile de transport, adică transferul paracelular și transportul mediat sau activ.[39] În acest studiu, C. tubulosa a oferit un transport transepitelial de trei ori mai mare decât ECH și ACT intacte (Figura 2 și Tabelul 2). Speculăm că componentele dinExtract de Cistanche tubulosaactivează transportorul sensibil la floridzină și/sau accelerează eliminarea ECH și ACT intracelular.Extract de Cistanche tubulosala doza mare părea să mascheze în mare măsură potența transportului sensibil la flloridzin (Tabelul 2). Carbohidrații din dietă[40] și proteinele[41]interacționează cu unii polifenoli din tractul gastrointestinal.Morikawa și colab.[10] au demonstrat că cinci iridoizi, kancanozide AD și kankanol, o glicozidă monoterpenă, kancanozide E, două oligoglicozide feniletanoide, kancanozide F și G și un oligo zahăr acilat, kancanoză, ar putea fi izolate dinExtract de Cistanche tubulosa

utilizat în prezent. Alte ingrediente, inclusiv proteinele dinExtract de Cistanche tubulosa, rămâne neclar. Împreună cu speculațiile de mai sus, suntem proiectați să examinăm dacă alte componente interacționează cu SGLT1 și inhibă absorbția ECH și ACT.

Experimentele in vivo nu pot distinge cu ușurință între gradul de absorbție și evitarea primului pasaj prin ficat. Modelul de perfuzie intestinală in situ are un avantaj față de modelele in vivo și in vitro, datorită controlului ușor al parametrilor experimentului și excluderii impactului altor organe și menținerii unei aporturi intestinale intacte.[22] Implicarea transportorului de glucoză sensibil la floridzină a fost evaluată în sistemul de perfuzie intestinală anin situ. După cum se arată în Figura 5, cantitățile absorbite de concomitenți ECH și ACT înExtract de Cistanche tubulosa (low dose) were greatly abolished by phloridzin, which agrees with our in-vitro data (Figure 4). Using peptides and 20 drugs passively absorbed, a good correlation is obtained between in-vivo drug absorption and the drug permeability of Caco-2 monolayers.[42] Drugs with a Papp of >1 × 10−6 cm/s sunt complet absorbite la om, în timp ce medicamentele și peptidele sunt slab absorbite (<1% of="" dose)="" have="" papp="" values="" of=""><1 ×="" 10−7="" cm/s.="" surprisingly,="" the="" papp="" of="" the="" ech="" concomitant="" (high="" dose)="" was="">1 × 10−6 cm/s (Tabelul 2), sugerând o biodisponibilitate orală ridicată la animale și la oameni. Crespy și colab.[43] a demonstrat că efluxul într-un studiu de perfuzie intestinală in-situ nu a fost semnificativ diferit între flloridzină și floretină. Ei[44] au arătat, de asemenea, că biodisponibilitatea orală a phloridzinei cu sensibilitate ridicată la SGLT1 a fost de numai 10% la șobolani. Studiile viitoare trebuie să evalueze biodisponibilitatea și efectul hepatic de prim pasaj al ECH concomitent după administrarea orală a extractului dietetic în doze mari. Rezultatele in situ implică faptul că aportul deExtract de Cistanche tubulosapoate îmbunătăți absorbția orală scăzută a ECH și ACT intacte.

Concluzie

Cele alimentare și medicinaleExtract de Cistanche tubulosacreșterea absorbției intestinale a ECH și ACT poate servi la o mai bună gestionare a sănătății umane, deși implicarea transportului sensibil la floridzină ar trebui redusă.

Declarații

Conflict de interese

Autorul(ii) declară(i) că nu au conflicte de interese de dezvăluit

Finanțarea

Această lucrare a fost susținută parțial de High-Tech ResearchCenter de la Universitatea Kinki.

Mulțumiri

Autorii doresc să mulțumească lui Osamu Muraoka (Universitatea Kinki, Osaka, Japonia) și Toshio Morikawa (Universitatea Kinki, Osaka, Japonia) pentru furnizarea deExtract de Cistanche tubulosași constituenți puri. Suntem foarte recunoscători lui Masahiro Iwaki (Universitatea Kinki) pentru sprijinul acordat studiului.

Extract de Cistanche tubulosaproduse

De la: „Transportul sensibil la floridzină al echinacozidei și actozidei și calea alterată de absorbție intestinală după aplicareaExtract de Cistanche tubulosa' deTadatoshi Tanino și colab

---© 2015 Royal Pharmaceutical Society, Journal of Pharmacy and Pharmacology, 67, pp. 1457–1465,Glucozide feniletanoide transportate de SGLT1

Referințe

1. Tanaka J și colab. EfectulExtract de Cistanche tubulosaasupra diferitelor boli ale creierului. Stil alimentar 21 2008; 12: 24–26.

2. Tanaka J și colab. Funcții anti-îmbătrânire aleExtract de Cistanche tubulosa. Stil alimentar 21 2008; 12: 27–29.
3. Tanaka J și colab. Frumusete si functii de crestere a paruluiExtract de Cistanche tubulosa. Stil alimentar 21 2008; 12: 29–32.
4. Tanaka J și colab. Efect de metabolizare a grăsimilorExtract de Cistanche tubulosa. Stil alimentar 21 2008; 12: 30–33.
5. Yoshizawa F și colab. Constituenții Cistanche tubulosa Schrenk (Cârlig) f.II. izolarea și structura unei noi glicozide feniletanoid și a unei noi glicozide neolignane. Chem Pharm Bull 1990; 38: 1927–1930.
6. Yoshikawa M și colab. Oligoglicozide feniletanoide și oligozaharuri acilate cu activitate vasorelaxantă din Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2006; 14: 7468–7475.
7. Tu PF și colab. Analiza glicozidelor feniletanoide ale Herba cistances prin RP-HPLC. Yao Xue Xue Bao 1997; 32: 294–300.
8. Lei L et al. Reglarea metabolică a glicozidelor feniletanoide din Herba cistanches în tractul gastrointestinal al câinelui. Yao Xue Xue Bao 2001; 36: 432–435.
9. Geng X și colab. Efectele neuroprotectoare ale echinacozidei în modelul MPTP de șoarece al bolii Parkinson. Eur J Pharmacol 2007; 564: 66–74.
10. Morikawa T și colab. Oligoglicozide feniletanoide acilate cu activitate hepatoprotectoare de la planta de deșert Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2010; 18: 1882–1890.
11. Paola RD și colab. Efectele verbascozidei, purificate biotehnologic prin culturi de celule vegetale Syringa Vulgaris, într-un model de rozătoare de parodontită. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 707–717.
12. Wu YT și colab. Determinarea actozidei în Cistanche deserticola și Boschniakia rossica și farmacocinetica acesteia la șobolani care se mișcă liber folosind LC-MS/MS. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2006; 844: 89–95.
13. Matthias A și colab. Studii de permeabilitate ale alchilamidelor și conjugaților de acid cafeic din echinaceea utilizând un model monostrat cu celule caco-2. J Clin Pharm Therapeut 2004; 29: 7–13.
14. Jia C și colab. Determinarea echinacozidei în serul de șobolan prin cromatografie lichidă de înaltă performanță în fază inversă cu detecție ultravioletă și aplicarea acesteia la farmacocinetică și biodisponibilitate. J Chromatogr 2006; 844: 308–313.
15. Cardinali A et al. Verbascozide din apa de moară de măsline: evaluarea bioaccesibilității și a absorbției intestinale a acestora folosind un sistem model de digestie/caco-2 in vitro. J Food Sci 2011; 176: H48–H54.
16. Jia C și colab. Metabolismul echinacozidei, un bun antioxidant, la șobolani: izolarea și identificarea metaboliților săi biliari. Drug Metab Dispos 2009; 37: 431–438.
17. Najar IA și colab. Modularea activității ATPazei glicoproteinei P de către unii fitoconstituenți. Phytother Res 2009; 24: 454–458.
18. Walgren RA și colab. Eflux de flavonoid alimentar quercetină 4′-beta-glucozidă prin monostraturile de celule caco-2 intestinale umane de către proteina asociată rezistenței multiple la medicamente apicale-2. J Pharmacol Exp Ther 2000a; 294: 830–836.
19. Walgren RA și colab. Absorbția celulară a quercetinei flavonoide alimentare 4′-beta-glucozidazei de către transportorul de glucoză dependent de sodiu SGLT1. J Pharmacol Exp Ther 2000b; 294: 837–843.
20. Mihaira K et al. Metabolizarea intestinală de primă trecere a eperizonei la șobolan. Pharm Res 2001; 18: 1131–1137.
21. Isacchi B și colab. Activitatea antihiperalgezică a verbascozidei în două modele de durere neuropatică. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 594–601.

22. Cook TJ și colab. Permeabilitatea intestinală a clorpirifosului folosind metoda de perfuzie intestinală cu o singură trecere la șobolan. Toxicologie 2003; 184: 125–133.

23. Kumar YS și colab. Interacțiunea medicamentoasă pe bază de plante mediată de glicoproteina P și citocromul P-450-. Drug Metabol Drug Interact 2010; 25: 3–16.
24. Walle UK și colab. Transportul genisteinei-7-glucozidei de către celulele CACO-2 intestinale umane: un rol potențial pentru MRP2. Res Commun Mol Pathol Pharmacol 1999; 103: 45–56.
25. Ito K și colab. Expresia de suprafață apicală/bazolaterală a transportatorilor de medicamente și rolul acesteia în transportul vectorial de droguri. Pharm Res 2005; 22: 1559–1577.
26. Laitinen L et al. Culturi de celule caco-2 în evaluarea absorbției intestinale: efectele unor medicamente coadministrate și compuși naturali în matricele biologice. (Universitatea din Helsinki, Finlanda, 2006) Teză academică, pp. 1–66.
27. Scambia G et al. Quercetina potențează efectul adriamicinei într-o linie celulară de cancer de sân uman MCF-7 rezistentă la mai multe medicamente: glicoproteina P ca o posibilă țintă. Cancer Chemother Pharmacol 1994; 34: 459–464.
28. Choi DH et al. Efectul miricetinei, un antioxidant, asupra farmacocineticii losartanului și metabolitului său activ, EXP-3174, la șobolani: posibil rol al citocromului P450 3A4, citocromului P{450 2C9 și P- inhibarea glicoproteinei de către miricetină. J Pharm Pharmacol 2010; 62: 908–914.
29. Tanino T și colab. Promedicamentul paclitaxel-2′-etilcarbonat poate eluda efluxul celular mediat de glicoproteina P pentru a crește citotoxicitatea medicamentului. Pharm Res 2007; 24: 555–565.
30. Hollman PC și colab. Absorbția glicozidelor dietetice de quercetină și a quercetinei la voluntari sănătoși pentru ileostomie. Am J Clin Nutr 1995; 62: 1276–1282.
31. Kellett GL și colab. Componenta difuzivă a absorbției intestinale a glucozei este mediată de recrutarea indusă de glucoză a GLUT2 pe membrana plăcii periei. Biochem J 2000; 350: 155–162.
32. Matter K și colab. Sortarea proteinelor endogene ale membranei plasmatice are loc din două situsuri în celulele epiteliale intestinale umane cultivate (Caco-2). Cell 1990; 60: 429–437.
33. Mahraoui L et al. Prezența și expresia diferențială a ARNm-ului transportor de hexoză SGLT1, GLUT1, GLUT2, GLUT3 și GLUT5 în clonele de celule Caco-2 în relație cu creșterea celulară și consumul de glucoză. Biochem J 1994; 298: 629–633.

34. Mesonero J și colab. Expresia dependentă de zahăr a transportorului de fructoză GLUT 5 în celulele Cac-2. Biochem J 1995; 312: 757–762.

35. Walgren RA și colab. Transportul quercetinei și al glucozidelor sale prin celulele Caco-2 epiteliale intestinale umane. Biochem Pharmacol 1998; 55: 1721–1727.
36. Yoshikawa T și colab. Expresia comparativă a transportatorilor de hexoză (SGLT1, GLUT1, GLUT2 și GLUT5) în tractul gastrointestinal de șoarece. Histochem Cell Biol 2011; 135: 183–194.
37. Funes L et al. Efectele verbascozidei, un glicozid fenilpropanoid din verbena de lămâie, asupra membranelor modelului de fosfolipide. Chem Phys Lipids 2010; 163: 190–199.
38. Neilson AP și colab. Influența compoziției matricei de ciocolată asupra bioaccesibilității flavan-3-olului de cacao in vitro și a biodisponibilității la om. J Agric Food Chem 2009; 57: 9418–9426.
39. Gao S și colab. Conținuturile foarte variabile de substanțe fenolice din produsele din sunătoare afectează transportul acestora în modelul celular Caco-2 intestinal uman: justificarea farmaceutică și biofarmaceutică pentru standardizarea produsului. J Agric Food Chem 2010; 58: 6650–6659.
40. Schramm DD și colab. Efectele alimentelor asupra absorbției și farmacocineticii flavanolilor din cacao. Life Sci 2003; 73: 857–869.
41. Laurent C și colab. Etanolul și matricea de vin fără polifenolici stimulează diferențierea celulelor Caco-2 intestinale umane. Influența asocierii lor cu un extract de semințe de struguri bogat în procianidină. J Agric Food Chem 2005; 53: 5541–5548.
42. Artursson P et al. Corelația dintre absorbția orală a medicamentelor la om și coeficienții de permeabilitate aparentă a medicamentului în celulele epiteliale interne umane (Caco-2). Biochem Biophys Res Commun 1991; 175: 880–885.
43. Crespy V și colab. Comparație a absorbției intestinale a quercetinei, floretinei și glucozidelor acestora la șobolani. J Nutr 2001a; 131: 2109–2114.
44. Crespy V și colab. Biodisponibilitatea floretinei și a floridzinei la șobolani. J Nutr 2001b; 131: 3227–3230.