Imunitatea preexistentă a celulelor T la SARS-CoV-2 în controale sănătoase neexpuse din Ecuador, așa cum a fost detectată cu un test de eliberare a interferonului-gama COVID-19

ABSTRACT

Context: Studiile răspunsurilor imune ale celulelor T împotriva SARS-CoV-2 sunt importante pentru înțelegerea stării imunitare a indivizilor sau populațiilor. Aici, folosim un test simplu, ieftin și rapid de stimulare a sângelui integral - un test de eliberare a interferonului gamma (IGRA) - pentru a studia imunitatea celulelor T la SARS-CoV-2 la pacienții convalescenți cu COVID-19 și contacte sănătoase neexpuse din Quito, Ecuador. Metode: Producția de interferon-gamma (INF-g) a fost măsurată în sângele heparinizat al subiecților convalescenți și neexpuși după stimularea timp de 24 de ore cu proteina Spike S1 SARS-CoV-2, proteina domeniului de legare la receptor (RBD) sau respectiv proteina Nucleocapsid (NP). Prezența anticorpilor proteici IgG-RBD în ambele grupuri de studiu a fost determinată cu un ELISA „in-house”. Rezultate: măsurat cu producția de INF-g, 80% dintre pacienții convalescenți COVID-19, toți IgG-RBD seropozitivi, au avut un răspuns puternic al celulelor T.

Cu toate acestea, în mod neașteptat, 44% dintre controalele sănătoase neexpuse, toate seronegative pentru IgG-RBD, au avut un răspuns puternic al celulelor T specifice virusului cu COVID-19 IGRA, probabil din cauza expunerii anterioare la coronavirusuri comune care cauzează răceala sau alte antigene virale sau microbiene. Concluzie și discuții: procentul ridicat de subiecți sănătoși neexpuși cu o imunitate preexistentă sugerează că o parte din populația ecuadoriană este probabil să aibă celule T reactive SARS-CoV-2. Având în vedere că tehnica IGRA este simplă și poate fi extinsă cu ușurință pentru investigațiile în care este nevoie de un număr mare de pacienți, acest COVID-19 IGRA poate servi pentru a determina dacă răspunsul exclusiv al celulelor T reprezintă imunitate protectoare la SARS-CoV -2 infecție într-un studiu bazat pe populație. © 2021 Autorii. Publicat de Elsevier Ltd în numele Societății Internaționale pentru Boli Infecțioase.

În același timp, atunci când imunitatea noastră este scăzută, există multe modalități de a îmbunătăți imunitatea, aportul de alimente care pot spori imunitatea, cum ar fi cistanche, polizaharidele, proteinele, aminoacizii și alte substanțe conținute în cistanche pot regla adesea organismul.isistemul imunitar.

Faceți clic pe produs pulbere cu extract de cistanche tubulosa

Introducere

Răspunsul imun la infecția cu SARS-CoV-2 implică nu numai producția de anticorpi, dar infecția declanșează și un răspuns al celulelor T la pacienți (Lipsitch și colab., 2020, Ni și colab., 2020). În general, determinarea prezenței și amplorii unui răspuns specific al celulelor T de memorie la această infecție cu coronavirus se realizează cu un test ELISPOT prin stabilirea numărului de limfocite care produc IFN-g după stimularea cu antigene sau peptide specifice bolii (Ni și colab., 2020, Pai și colab., 2014, Abate și colab., 2013, Braun și colab., 2020, Grifono și colab., 2020, LeBert și colab., 2020, Sekine și colab., 2020).

Pentru această tehnică, celulele mononucleare din sângele periferic (PBMC) sunt izolate din sânge proaspăt heparinizat prin centrifugare cu gradient de densitate; secreția de citokine de către celulele T individuale este cuantificată la microscop sau cu un aparat special – cititorul de plăci ELISPOT. Testul ELISPOT este o tehnică „doar pentru laboratoarele de cercetare”, care este extrem de laborioasă, solicitantă din punct de vedere tehnic, relativ costisitoare și nu poate fi utilizată cu ușurință într-un laborator clinic sau aplicată în studiile pe populație. Datorită costurilor, infrastructurii și cerințelor de laborator necesare pentru a efectua testul, utilizarea acestuia în setări cu resurse limitate, cum ar fi Ecuador, poate fi minimă.

Răspunsurile imune celulare pot fi determinate și cu un test mai simplu: un test de eliberare a interferonului gamma (IGRA). Acest test, un test de sânge in vitro, cuantifică citokinele secretate de celulele T (adică interferonul gamma (IFN-g); cu toate acestea, pot fi cuantificate și alte citokine precum TNF sau IL-2) la stimularea întregului sânge (nu doar limfocitele izolate) cu antigene specifice (Pai et al., 2014, Abate et al., 2013). Citokina secretată IFN-g este măsurată cu un test ELISA, o tehnică ușor disponibilă în majoritatea laboratoarelor, iar rezultatele sunt citite cu un cititor de plăci ELISA. IGRA-urile au găsit o aplicație în laboratorul clinic și sunt utilizate pentru a determina o infecție latentă cu Mycobacterium tuberculosis (MTB), precum și pentru a măsura imunitatea mediată celulară specifică citomegalovirusului (CMV) și pentru a prezice infecția cu CMV la primitorii de transplant (Pai și colab. , 2014, Abate et al., 2013). Aceste teste IGRA au fost evaluate pe larg și, în comparație cu testul ELISPOT, s-a dovedit că prezintă capacități similare pentru a prezice infecția cu MTB sau CMV. Mai mult, mai multe teste comerciale și marcate FDA sau CE pentru a detecta imunitatea împotriva TB sau CMV sunt disponibile și sunt efectuate pe scară largă.

În studiul de față, explorăm utilizarea unui IGRA COVID-19 și evaluăm magnitudinea eliberării de IFN-g la pacienții convalescenți cu COVID{-19 și la controale naive COVID-19 sănătoase ca răspuns la anumite antigene ale virusului SARS-CoV-2: proteina RBD; partea S1 a proteinei Spike; sau proteina Nucleocapsid (N). În plus, determinăm prezența anticorpilor IgG specifici SARS-CoV-2 la acei participanți cu un ELISA „intern” (Amanat și colab., 2020, Guevara și colab., 2021). Arătăm că un procent semnificativ de donatori neexpuși posedă celule T reactive SARS-CoV-2 și discutăm aceste rezultate.

Material si metode

Pacienți convalescenți cu COVID-19, controale sănătoase și setarea

Acest studiu a fost realizat în Quito, Ecuador, în septembrie 2020. Nu au fost utilizate metode statistice pentru a predetermina dimensiunea eșantionului. Tabelul 1 prezintă caracteristicile celor 32 de pacienți din acest studiu: treisprezece pacienți convalescenți COVID-19, toți cu simptome/semne COVID-19 non-severe și diagnostic pozitiv RT-PCR în iunie 2020; și 17 controale sănătoase neexpuse. Aceste controale sănătoase au fost extrem de precaute în timpul pandemiei, evitând contactul cu alte persoane și nu au raportat de sine niciunul dintre semnele și simptomele tipice ale COVID-19 pe durata pandemiei, cum ar fi febră, tuse persistentă, sau pierderea mirosului sau a gustului. De asemenea, doi purtători asimptomatici de SARS-CoV-2 au fost incluși în acest studiu. Acești doi subiecți nu au prezentat niciodată simptome sau semne ale bolii COVID-19; cu toate acestea, tehnica RT-PCR a fost efectuată asupra acestora ca o cerință pentru un permis de muncă în iunie 2020 și a dus la diagnostice pozitive.

Serologie

Serologia și IGRA-urile pentru toți pacienții și controalele au fost efectuate în ultimele două săptămâni din septembrie 2020, la trei luni de la diagnosticarea RT-PCR a pacienților convalescenți. Pentru a determina prezența anticorpilor IgG specifici coronavirusului în grupul nostru de studiu, a fost utilizat un ELISA IgG „in-house” SARS-CoV-2 Receptor Binding Domain (RBD) (9, 10).

Testul de eliberare a interferonului gamma (IGRA)

Pentru IGRA, a fost prelevată o probă de sânge heparinizat (4 ml) și împărțită în alicote de 250 ml și stimulată cu respectiv 2 mg/ml de proteină RBD (procedura de izolare de la referința 9) sau 2 mg/ml de Nucleocapsid disponibilă comercial. (N) proteină sau proteină Spike (S1) (ViroGen, numere de catalog: 00,221-V și respectiv 00,226-V). O curbă concentrație-răspuns la doză cu sânge de la pacienți IGRA-pozitivi și IGRA-negativi a fost utilizată pentru a determina concentrația optimă a antigenelor pentru stimulare în IGRA. La 2 ug/mL, un răspuns maxim de IFN-g în sânge de la subiecții COVID-19 a fost găsit fără stimulare la martorii neinfectați. Pentru fiecare participant, a fost inclus un control nestimulat (NIL) și am testat o probă de sânge de 250 ml cu fitohemaglutinină mitogenă (PHA), un control pozitiv pentru a evalua rata de răspuns la citokine a probei de sânge. Stimularea a fost realizată într-o placă ELISA cu fund plat cu 96-godeuri la 37 C timp de 24 de ore. Plasma a fost recoltată şi producţia de IFN-g a fost determinată cu un ELISA de IFN-g uman (MaxTM Standard Set Biolegend nr. cat. 430.101).

Rezultate

RBD IgG ELISA a arătat că toți pacienții simptomatici COVID{{0}} (RT-PCR pozitivi) au fost pozitivi pentru anticorpi IgG împotriva proteinei RBD la trei luni după diagnosticul RT-PCR. Cei doi pacienți asimptomatici RT-PCR pozitivi și toți pacienții de control sănătoși neexpuși au fost seronegativi la acest ELISA (vezi Tabelul 1). Rezultatele stimulării sângelui integral în testul COVID-19 IGRA sunt prezentate în Figura 1. Inducerea puternică a producției de IFN-g a fost găsită la 80 la sută dintre pacienții simptomatici COVID{-19 cu toate cele trei antigene, dar proteina N și proteina S au fost cei mai puternici stimulatori ai unui răspuns IFN-g (Figura 1 A, B, C). Cei doi pacienți asimptomatici, dar pozitivi pentru RT-PCR (pacienții 14 și 15), ambii fără anticorpi specifici SAR-CoV-2, au prezentat, de asemenea, un răspuns puternic inductibil al imunității celulelor T. Dintre pacienții naivi cu COVID-19, 45% au prezentat imunitate inductibilă a celulelor T. Răspunsul la aceste controale sănătoase neexpuse cu un răspuns al celulelor T nu a fost statistic semnificativ diferit ca magnitudine față de pacienții convalescenți cu COVID-19 pentru oricare dintre antigenele stimulatoare (valoarea p=0.271, 0,437, și 0,719 pentru proteinele RBD, N și, respectiv, S1).

Figura 1. Producția de IFN-g după stimularea sângelui integral al pacienților convalescenți cu COVID-19 și a martorilor sănătoși neexpuși cu proteina RBD, N sau S1.

Rezultatele stimulării pacienților convalescenți și ale controlului cu, respectiv, proteina RBD, N sau S1 sunt prezentate în Fig. 1A, B și C. În Fig. 1D, răspunsurile INF-g ale fiecărui pacient și la cele trei antigenele sunt grupate. Pacienții cu infecție confirmată cu COVID-19 sunt numărați de la 1 la 15, dintre care pacienții 14 și 15 au fost asimptomatici. Subiecții 16-33 sunt pacienți naivi cu COVID-19.

După 24 de ore de stimulare, concentrațiile de IFN-g în plasmă au fost determinate utilizând un kit bazat pe testul imunoabsorbant legat de enzime IFN-g uman disponibil comercial (Biolegend cat. nr. 430,101). Mărimea stimulării a fost exprimată ca densitate optică la 450 nm (OD450) pentru sângele stimulat cu antigen minus OD450 pentru sângele fără stimulare cu antigen. O DO de 1,0 a corespuns cu aproximativ 400 pg/mL IFN-g. Fitohemaglutinina (PHA) a fost utilizată ca mitogen la o concentrație finală de 5 mg/mL în IGRA pentru a evalua calitatea și capacitatea de răspuns a sângelui. Toți pacienții și controalele au arătat o producție maximă de citokină cu acest mitogen cu o densitate optică medie (OD450) de 2,54 (SD=0,13), reprezentând aproximativ 1000 pg/mL de IFN-g. Nu a existat nicio diferență în nivelul median de IFN-g în sângele nestimulat al pacienților convalescenți și al martorilor sănătoși (OD450=0.38, SD=0.14 față de OD{450=0.32. SD=0.16). Aceste rezultate nu sunt afișate. În fiecare grafic a fost trasată o linie orizontală pentru a reprezenta valoarea limită pentru stimulare. Această valoare a fost determinată prin calcularea mediei plus două abateri standard ale răspunsului a nouă subiecți (pacienții 16, 18, 19, 22, 27-31) din grupul de control cu ​​cea mai mică producție de INF-g după stimulare.

discutii si concluzii

Folosind un test de sânge integral ușor de efectuat, care evaluează răspunsurile celulelor T, am descoperit că majoritatea pacienților convalescenți și o proporție semnificativă de indivizi sănătoși neexpuși au avut un răspuns specific și puternic al celulelor T determinat de producerea de INF-g după stimulare. cu antigene specifice SARS-CoV-2 (Figura 1). Mai multe studii, toate folosind testul ELISPOT, au raportat prezența unui răspuns cu celule T la majoritatea sau la toți pacienții convalescenți cu COVID-19 (Braun și colab., 2020, Grifono și colab., 2020, LeBert și colab. , 2020, Sekine și colab., 2020, Moderbacher și colab., 2020, Mateus și colab., 2020, Peng și colab., 2020).

Cu toate acestea, în ceea ce privește răspunsul celulelor T la controalele sănătoase neexpuse, au fost raportate rate de răspuns între 28 și 50% (Doshi, 2020, de Vries, 2020, Lipsitch și colab., 2020, Sagar și colab., 2020) și mai multe studiile nu raportează niciun răspuns la celulele T la pacienții control naivi cu COVID-19 (de Vries, 2020, Moderbacher și colab., 2020, Schwarzkopf și colab., 2021). Cele mai multe dintre aceste studii au fost efectuate cu testul ELISPOT, dar în Italia și SUA, un IGRA a fost folosit și pentru a detecta răspunsul celulelor T SARS-CoV-2 (Petrone și colab., 2020, Murugesan și colab. ., 2020). În ambele studii, un răspuns specific al celulelor T a fost detectat la pacienții convalescenți; cu toate acestea, IGRA nu a detectat un răspuns INF-g la subiecții sănătoși neexpuși.

Imunitatea preexistentă a celulelor T la SARS-CoV-2 la subiecții naivi COVID{-19 a fost revizuită în mai multe publicații (Altmann și Boyton, 2020, Dosho și colab., 2020, de Vries, 2020, Sette și Crotty, 2020). Motivul pentru care un anumit răspuns al celulelor T COVID-19 poate fi detectat la un subiect sănătos neexpus rămâne neclar și face obiectul speculațiilor. Majoritatea studiilor ELISPOT cu subiecți naivi cu COVID-19 au folosit probe de sânge uman obținute înainte ca virusul SARS-CoV-2 să fie descoperit în 2019, deci înainte de orice șansă de expunere. Din acest motiv, aceste studii ELISPOT au concluzionat că răspunsul celulelor T la subiecții sănătoși neexpuși provine probabil din contactul anterior cu coronavirusurile circulante „răceală” (Grifoni et al., 2020, Matheus et al., 2020) sau din expunerea anterioară la gripă. și/sau virusuri CMV (Mahajan și colab., 2020) sau alți antigeni virali sau microbieni (Tan și colab., 2020). Studiul nostru a folosit sânge prelevat în timpul pandemiei de la voluntari care nu au raportat nicio contact, a fost seronegativ pentru antigenul COVID-19 RBD și nu au prezentat niciodată semne sau simptome de COVID-19.

Prin urmare, nu putem exclude că răspunsul celulelor T în unele dintre controalele noastre sănătoase „naive” COVID-19 provine din infecții asimptomatice cu virusul SARS-CoV-2. Pacienții 14 și 15 din studiul nostru sunt un exemplu în acest sens. Acești indivizi au fost clasificați ca pacienți cu COVID-19 din cauza unei RT-PCR pozitive; cu toate acestea, au fost asimptomatici și nu au dezvoltat un răspuns de anticorpi împotriva proteinei RBD, dar ambele au prezentat un răspuns puternic al celulelor T.

Este posibil ca, după colonizarea SARS-CoV-2 a nazofaringelui, sistemul imunitar al acestor doi pacienți asimptomatici le-a lăsat cu un răspuns exclusiv cu celule T cu memorie și nu au fost anticorpi specifici SARS-CoV-2. induse. O altă explicație este că răspunsul celulelor T provine dintr-o infecție anterioară asemănătoare corona, iar răspunsul imun preexistent al celulelor T i-a protejat pe acești doi pacienți împotriva dezvoltării unui model de boală mai invaziv. Celulele T reactive încrucișate preexistente ar putea fi semnificative în explicarea unora dintre diferențele dintre ratele de infecție sau patologie (Le Bert și colab., 2020, Sagar și colab., 2020). În ceea ce privește cohorta de controale naive, am exclus faptul că acest grup conține un număr considerabil de indivizi infectați cu SARSCoV-2 cu infecție asimptomatică nedetectată, practic pentru că toți integranții grupului de control sunt IgG seronegativi pentru antigenul RBD.

Un alt motiv este că prevalența infecției în Ecuador este relativ scăzută. La momentul efectuării acestui studiu, în septembrie 2020, Ecuador raportase aproximativ 200 de cazuri000 confirmate de COVID{-19 (aproximativ 1,1% din populație). Desigur, prevalența reală a infecției ar fi putut fi de câteva ori mai mare, dar chiar și așa, este improbabil ca 45% din acest grup de control să fi fost infectat și, prin urmare, ne uităm la un răspuns al celulelor T specific pentru un SARS-CoV{ {9}} infecție.

În concluzie, descoperirea unui procent ridicat de subiecți sănătoși neexpuși cu imunitate preexistentă în Quito, Ecuador, ridică așteptările că o parte semnificativă a populației noastre este probabil să aibă celule T reactive SARS-CoV-2, deoarece de expunere anterioară la gripă, virusuri CMV sau coronavirusuri comune care cauzează răceala. Investigațiile viitoare ar trebui să urmărească să determine dacă răspunsul imun preexistent este protector și/sau poate depăși o boală COVID-19 mai gravă sau contribuie la o recuperare mai rapidă.

Importanța și limitarea acestui studiu

Studiul nostru a arătat că COVID-19 IGRA este un instrument nou util și sensibil care poate evalua expunerea la coronavirus sau reactivitatea încrucișată la viruși similari prin determinarea eliberării de IFN-g după stimularea cu antigeni specifici virusului. Tehnica este simplă, relativ ieftină și poate fi utilizată într-un laborator clinic. Acest lucru cu siguranță nu este cazul testului ELISPOT. Mai mult, testul IGRA poate fi extins cu ușurință pentru studii și investigații bazate pe populație în care este necesar un număr mare de pacienți. Împreună cu serologia, IGRA poate fi utilizată pentru a verifica atât răspunsurile anticorpilor, cât și ale celulelor T ale pacienților individuali, pentru a înțelege mai bine imunitatea la nivel de populație și pentru a determina imunitatea preexistentă la indivizii seronegativi.

O limitare importantă a studiului nostru este că eșantionul studiat nu este reprezentativ pentru populație. Nu au fost utilizate metode statistice pentru a predetermina dimensiunea eșantionului. Mai mult, testul nostru nu a făcut diferența între producția de IFN-g a celulelor CD4 plus sau CD8 plus, dar poate fi luată în considerare stimularea cu peptide CD8(plus) și CD4(plus) definite (Grifoni și colab., 2020, Peng și colab. , 2020) și a fost utilizat în IGRA-urile descrise în Petrone și colab., 2020 și Murugesan și colab., 2020). De asemenea, inducerea altor citokine poate fi măsurată cu acest IGRA (Petrone și colab., 2020). De asemenea, IGRA poate fi folosit pentru monitorizarea vaccinării pentru a determina dezvoltarea răspunsului celulelor T la indivizii vaccinați sau poate fi utilizat pentru a determina dacă prezența celulelor T cu memorie reactivă încrucișată este asociată cu imunitatea protectoare și poate diminuează manifestările bolii din infecția cu SARS-CoV-2 (Sagar și colab., 2020).

Aprobare etică și consimțământ de participare

Sângele a fost recoltat în urma acordului informat în scris. Comitetul de etică al Ministerului Sănătății din Ecuador a aprobat protocolul de studiu 004–2020.

Conflict de interese

Autorii declară că nu au interese concurente.

Contribuții ale autorului

Design de studiu; JHW și GE; Colectarea datelor și experimente de laborator: GE, AG, JC, AMR și MMV; Analiza datelor; JHW, GE și ET; Scriere: JHW, GE și ET.

Mulțumiri

Ne exprimăm recunoștința tuturor donatorilor și personalului medical implicat în această activitate, în special Sandrei Vivero și Sandra Fonseca, pentru asistență în colectarea probelor. Acest studiu a fost susținut de un fond de cercetare de la Universidad de las Américas. Institutul de Științe Durabile din San Francisco, California, SUA și Fundația „Por Todos” din Ecuador au furnizat proteina RBD și ELISA „in-house”. Mulțumim lui Howard E. Takiff și Flor Pujol (IVIC, Venezuela), Paulinei E. Andrade (USFQ, Ecuador) și Lilly Verhagen (UMC, Țările de Jos) pentru discuțiile lor fructuoase.

Referințe

Abate D, Saldan A, Mengoli C, Fiscon M, Silvestre C, Fallico L, et al. Comparația dintre testele de eliberare a interferonului gamma legate de spotul imunosorbant legat de citomegalovirus (CMV) și cuantificatorul CMV în evaluarea riscului de infecție cu CMV la primitorii de transplant de rinichi. J Clin Microbiol 2013;51(8):2501–7.

Altmann DM, Boyton RJ. Imunitatea celulelor T SARS-CoV-2: specificitate, funcție, durabilitate și rol în protecție. Sci Immunol 2020;5(49)eabd6160.

Amanat F, Stadlbauer D, Strohmeier S, Nguyen THO, Chromikova V, McMahon M, et al. Un test serologic pentru a detecta seroconversia SARS-CoV-2 la oameni. Nat Med 2020;26:1033–6.

Braun J, Loyal L, Frentsch M, Wendisch D, Georg P, Kurth F și colab. Celulele T reactive SARS-CoV-2- la donatori sănătoși și la pacienți cu COVID-19. Nature 2020;587:270–4.

de Vries RD. Celulele T specifice SARS-CoV-2-la oameni neexpuși: prezența celulelor cu memorie reactive încrucișate nu este egală cu imunitatea protectoare. Sig Transduct Target Ther 2020;5:224.

Doshi P. Covid-19: mulți oameni au imunitate preexistentă? BMJ 2020;370: m3563.

Grifoni A, Weiskopf D, Ramirez SI, Mateus J, Dan JM, Moderbacher CR, et al. Țintele răspunsurilor celulelor T la coronavirusul SARS-CoV-2 la oamenii cu boala COVID{-19 și la persoane neexpuse. Cell 2020;181(7)1489–501.

Guevara A, Vivero S, Nipaz V, Guaraca V, Coloma J. A low-cost SARS-CoV-2 rRBD ELISA to detect serostatus in ecuadorian population with COVID-19. Am J Trop Med Hyg [39_TD$DIFF]2021.

Le Bert N, Tan AT, Kunasegaran K, Tham CYL, Hafezi M, Chia A, et al. Imunitatea specifică celulelor T SARS-CoV-2- în cazurile de COVID-19 și SARS și controale neinfectate. Nature 2020;584(7821):457–62.

Lipsitch M, Grad YH, Sette A, Crotty S. Celulele T cu memorie încrucișată și imunitate de turmă la SARS-CoV-2. Nat Rev Immunol 2020.

Mahajan S, Kode V, Bhojak K, Magdalene CM, Lee K, Manoharan M, et al. Epitopii celulelor T imunodominanți din antigenul spike SARS-CoV-2 dezvăluie imunitate preexistentă robustă a celulelor T la indivizii neexpuși. bioRxiv 2020.

Mateus J, Grifoni A, Tarke A, Sidney J, Ramirez SI, Dan JM, et al. Epitopi selectivi și reactivi încrucișați ale celulelor T SARS-CoV-2 la oameni neexpuși. Science 2020;370 (6512):89–94.

Moderbacher RC, Ramirez SI, Dan JM, Grifoni A, Hastie KM, Weiskopf D, et al. Imunitatea adaptativă specifică antigenului la SARS-CoV-2 în COVID-19 acut și asocieri cu vârsta și severitatea bolii. Celula 2020; S0092-8674(20):31235–6.

Murugesan K, Jagannathan P, Pham TD, Pandey S, Bonilla HF, Jacobson K și colab. Test de eliberare a interferonului gamma pentru detectarea precisă a răspunsului celulelor T SARS-CoV-2. Clin Infect Dis 2020;ciaa1537.

Ni L, Ye F, Cheng ML, Feng Y, Deng YQ, Zhao H și colab. Detectarea imunității umorale și celulare specifice SARS-CoV-2- la persoanele convalescente COVID-19. Imunitatea 2020;52(6)971–7.

Pai M, Denkinger CM, Kik SV, Rangaka MX, Zwerling A, Oxlade O, et al. Teste de eliberare a interferonului gamma pentru detectarea infecției cu Mycobacterium tuberculosis. Clin Microbiol Rev 2014;27(1):3–20.

Peng Y, Mentzer AJ, Liu G, Yao X, Yin Z, Dong D și colab. Celulele CD4 plus și CD8 plus cu memorie largă și puternică induse de SARS-CoV-2 la persoanele convalescente din Marea Britanie după COVID-19. NatImmunol 2020.

Petrone L, Petruccioli E, Vanini V, Cuzzi G, Fard SN, Alonzi T, et al. Un test de sânge integral pentru a măsura răspunsul specific SARS-CoV-2-la pacienții cu COVID-19. Clin Microbiol Infect 2020.

Sagar M, Reifler K, Rossi M, Miller NS, Sinha P, White L și colab. Infecția cu coronavirus endemică recentă este asociată cu COVID mai puțin sever-19. J Clin Invest 2020.

Schwarzkopf S, Krawczyk A, Knop D, Klump H, Heinold A, Heinemann FM și colab. Imunitatea celulară la COVID-19 convalescenți cu infecție confirmată prin PCR, dar cu SARS-CoV-2-IgG specifice nedetectabile. Emerg Infect Dis. 2021;27(1).

Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, Strålin K, Gorin JB, Olsson A, et al. Imunitate robustă a celulelor T la persoanele convalescente cu COVID asimptomatică sau ușoară-19. Cell 2020;183(1)158–68.

Sette A, Crotty S. Imunitatea preexistentă la SARS-CoV-2: cunoscute și necunoscute. Nat Rev Immunol. 2020;20(8)457–8.

Tan CCS, Owen CJ, Tham CYL, Bertoletti A, van Dorp L, Balloux F. Reactivitatea încrucișată preexistentă mediată de celule T la SARS-CoV-2 nu poate fi explicată numai prin expunerea anterioară la coronavirusuri umane endemice. bioRxiv 2020;2020.

For more information:1950477648nn@gmail.com