Efectul glutaminei intravenoase asupra expresiei caspazei-12 în apoptoza celulelor epiteliale glomerulare ale șobolanilor masculi expuși la cisplatină
Mar 17, 2022
A lua legatura:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Tamara Aulia Fakhrinnisal, Imam Susilo, Arifa Mustika, Miyayu Soneta Sofyan
Introducere
Prevalența bolilor metabolice în Indonezia, în special a bolilor de rinichi, prezintă o tendință ridicată. Pe baza datelor din 2017 de la Agenția de Administrare a Asigurărilor de Sănătate (BPJS), statul a acoperit cele 3.657.691 de cazuri înregistrate de proceduri de dializă a bolii renale cronice, cu un cost total pentru acoperirea de 3,1 trilioane IDR. Una dintre etiologiile insuficienței renale este deteriorarea permanentă a nefronilor de către toxine.
Cisplatina este un medicament puternic pentru chimioterapie, care este utilizat pe scară largă pentru terapia cu spectru larg pentru afecțiunile maligne, inclusiv cancerul capului și gâtului, esofagian, vezicii urinare, testiculare, ovariane, de sân și pulmonare fără celule mici (Fillipski et al., 2008; Reck). , şi colab., 2010). Cu toate acestea, aplicarea clinică a cisplatinei este limitată din cauza efectelor de toxicitate ridicată a organelor, cum ar fi efectele nefrotoxice, neurotoxice, ototoxice și hepatotoxice (Karasawa și Steyger, 2015; Guo și colab., 2018). Cisplatina provoacă apoptoză la doze mai mici (10-100uM) și moartea celulelor necrotice la doze mai mari (200-800 μM）（Hanigan și Devarajan, 2003) Peste 70% dintre pacienții pediatrici care au primit cisplatină prezintă disfuncție renală ( Skinner şi colab.1998). Mai mult, leziunea acută a rinichilor apare la 20-30 procente din toți pacienții cărora li se administrează (Miller și colab., 2010). Disfuncția renală începe de obicei la câteva zile după administrarea dozei standard de cisplatină (50-120 mg/m²) și este exprimată prin creșterea nivelurilor de creatinine serice și de azot ureic din sânge (Akcay et al.2010), tratamentul cu Cisplatin induce o dilatare tubulară masivă și formare de gips în mai mulți lumeni tubulari. Ocazional se observă, de asemenea, necroza tubulară focală, îngroșarea membranei de bază a tubilor renali și a capsulei Bowman și infiltrarea focală a celulelor mononucleare. De asemenea, apare afectarea tubulară renală, împreună cu vacuolizarea și descuamarea celulelor epiteliale. Unii glomeruli suferă de necroză, iar glomerulii reziduali normali prezintă adesea spații periglomerulare mărite.
acteozidul din cistanche au efecte bune asupra rinichilor
Unul dintre mecanismele nefrotoxice ale cisplatinei este apoptoza, care este o cale programată de moarte celulară activată de cisplatină prin unele mecanisme. Cisplatina scade expresia Bcl-2 în calea mitocondrială, ceea ce se presupune că inhibă dezvoltarea moleculelor pro-apoptotice (Oltvai și Korsmeyer, 1994). În căile receptorilor morții, cisplatina activează căile dependente de Fas și apoptoza, fie in vivo (Noga și colab., 1998), fie in vitro (Feldenberg și colab., 1999). Cisplatina activează, de asemenea, căile caspazelor. Rolul caspazei-3 este întâlnit pentru prima dată în celulele tubulare proximale cultivate, care răspund la cisplatină prin creșterea activității caspazei-3 într-o manieră dependentă de doză (Fukuoka și colab., 1998; Lau, 1999) . Următoarele studii au evidențiat activarea caspazei-9 și, într-o măsură mai mică, activarea caspazei-8 (Kaushal și colab.2001:Park și colab., 2001).
intravenosGlutamina(Gln sau Q) este un -aminoacid utilizat în biosinteza proteinelor. Este unul dintre ingredientele pentru a produce glutation, care este un antioxidant puternic. O singură doză deglutamină intravenoasă(0.15-0.75 g/kg) poate crește expresia HSP, poate reduce leziunea organelor terminale și poate îmbunătăți rata de supraviețuire de la șoc septic la șoareci (Wischmeyer, 2002).intravenosGlutaminade asemenea, a crescut reactivitatea vasculară prin inducerea expresiei HSP și inhibarea eliberării de citokine inflamatorii și a biosintezei peroxidului la șoarecii cu șoc LPS (Jiang et al..2017).intravenosGlutaminapoate reduce, de asemenea, apoptoza prin inhibarea stresului oxidativ, așa cum s-a observat în rezultatele studiilor cu șoareci cu colită indusă de un acid a2,4,6-trinitrobenzen sulfonic (Crespoet al.2012)
Nivelurile de caspază-12 din epiteliul glomerular nu au fost studiate, chiar dacă timpul de expunere la toxina primită în glomerul este mare și celulele epiteliale sunt expuse mai întâi, apoi tubulii. Un studiu a arătat că capsulele lui Bowman au un rol în funcția fiziologică a glomerulului normal. Leziunea podocitelor stimulează activarea celulelor parietale capsulei Bowman, care se extind în fascicul glomerular, rezultând scleroză segmentară și globală prin producerea mai multor matrice și distrugerea lumenului capilarului glomerular (Al Hussain și colab., 2017).
Acest studiu își propune să analizeze efectul nefroprotector alglutamină intravenoasăasupra apoptozei celulelor epiteliale glomerulare prin examinarea expresiei caspazei-12, care este inițiatorul apoptozei în calea stresului reticulului endoplasmatic. Pro-caspaza-12 se găsește în reticulul endoplasmatic, în special în tubii proximali ai rinichiului. Theglutamină intravenoasăeste de așteptat să fie o soluție alternativă pentru insuficiența renală cauzată de modalitățile de chimioterapie cu cisplatină.
Materiale și metode Animale și tratament
Această cercetare a fost aprobată de Comitetul de etică a cercetării în sănătate al Școlii de Medicină Universitas Airlangga (Nr.25/C/KEPKFKUA/2020). În cadrul acestei cercetări, 30 de șobolani albi masculi (Rattus norvegicus), în vârstă de 2-3 luni, cu o greutate corporală de 150-200 grame, au fost obținuți de la unitatea de animale experimentale a Facultății de Medicină Veterinară, Universitas Airlangga. Fiecare dintre ele a fost ținut separat într-o cutie anaplastică, căptușită cu coji în partea de jos, iar apoi acoperită cu fire țesute deasupra. Cojile au fost înlocuite în fiecare zi.
Produse chimice
TheintravenosGlutaminaa fost obținut de la Serva (Germania). TheintravenosGlutaminasoluția a fost preparată în {{0}},9 la sută NaCl, cu o doză de lg de glutamina în 1{0 mL de 0,9 la sută NaCl. Doza de glutamină se injectează 100 mg/kg greutate corporală (BW) și se face o singură injecție cu maximum 0,2 ml IV. TheintravenosGlutaminaa fost injectat intravenos în coada șobolanului folosind o seringă de 1 ml 27-.
Materialul cisplatină a fost obținut de la Kalbe Farma (Indonezia), cu o doză de 20 mg/kg BW, administrată prin injecție intraperitoneală utilizând o seringă de 1 mL 27-. De asemenea, am folosit Primary AntibodiesCaspase-12 (Polyclonal Antibody PA5-27094 Thermo Scientific) și Apoptosis Detection Kit in Situ CellPOD(11684817910ROCHE).
Design experimental
În această cercetare, 30 de șobolani albi masculi Wistar au fost împărțiți aleatoriu în trei grupuri la începutul studiului. Grupul de control (PO) a fost sacrificat prin luxație cervicală după anestezie cu eter și apoi rinichii au fost prelevați pentru pregătirea imunohistochimică.
În ziua 7, grupul P1 a fost administrat cu cisplatină într-o doză unică de 20 mg/kg BW prin injecție intraperitoneală și apoi observat timp de 72 de ore. Șobolanii au fost sacrificați în a 10-a zi prin dislocare cervicală după anestezie cu eter, iar apoi rinichii au fost prelevați pentru pregătirea imunohistochimică. Timpul de execuție se datorează faptului că apoptoza celulelor epiteliale glomerulare are loc după injectarea cu cisplatină în ziua 10 (Tsuruya et al..2003). Grupul P2 a fost administrat cuintravenosGlutaminala o doză de 100 mg/kg BW o dată pe zi prin injecție intravenoasă din ziua 1 până în ziua 7 (Zhang și colab. 2009). În ziua 7, șobolanii au fost administrați cu cisplatină într-o doză unică de 20 mg/kg BW prin injecție intraperitoneală. Ulterior, șobolanii au fost observați timp de 72 de ore și apoi sacrificați în a 10-a zi prin dislocare cervicală după anestezie cu eter. Ulterior, rinichii au fost prelevați și pentru pregătirea imunohistochimică.
Pregătirea histopatologică
Țesutul renal a fost fixat în formol 10% timp de 15-24 h. Deshidratarea a fost efectuată timp de 60 de minute folosind seria de alcool (30 la sută, 50 la sută, 70 la sută, 80 la sută, 96 la sută și concentrație absolută) pentru a preveni orice modificări ale morfologiei țesuturilor. Apoi, curățarea folosind xilol a fost efectuată de două ori (60 min fiecare). Ulterior, infiltrarea cu parafină fragedă a fost efectuată timp de 60 de minute la 48 de grade. Ulterior, parafina tare a fost blocată în matriță și păstrată timp de o zi. A doua zi, materialul întărit a fost așezat pe suport și tăiat în 4-5-secțiuni groase folosind un microtom rotativ. După aceea, montarea pe sticlă obiect a fost realizată cu stratul de poli-L-lizină. Țesutul montat a fost scufundat în xilol de două ori (5 minute fiecare). După aceea, rehidratarea s-a efectuat folosind seria de alcool (absolut, 96 la sută, 80 la sută, 70 la sută, 50 la sută și 30 la sută concentrație) timp de 5 minute, respectiv. Apoi, a fost clătit în dH, O timp de 5 minute.
Testul imunohistochimic al CSP12
Lamele au fost spălate o dată cu soluție salină tamponată cu fosfat (PBS) (Millipore 524650) la pH 7,4 timp de 5 minute de trei ori. Blocarea peroxidului endogen a fost efectuată folosind 3% H2O2 timp de 20 de minute. Apoi lamele au fost spălate din nou cu aceeași procedură înainte de tratamentul de blocare. Blocarea proteinei nespecifice a fost realizată folosind 5% PBS(Millipore 524650) care conține 0,25% TritonX-100 (Sigma-Aldrich T8787) și apoi repetați procedura de spălare. Incubarea anticorpilor primari caspaze-12(Policlonal Antibody PA{5-27094 Thermo Scientific) a fost efectuată peste noapte la 40 de grade . După aceea, lamele au fost spălate folosind PBS (Millipore 524650), pH 7,4, de trei ori timp de 5 minute fiecare. Incubarea utilizând anti-șoarece conjugat cu biotină a fost făcută timp de 1 oră la temperatura camerei, apoi procedura de spălare a fost repetată. Incubarea utilizând peroxidază de streptavidin-hrean (Thermo Fisher Scientific NI00) a fost efectuată timp de 40 de minute și apoi a fost spălată încă o dată. Lamelele au fost apoi adăugate cu picături cu diam în benzidină (DAB) (Thermo Fisher Scientific 3400) și incubate timp de 10 minute și apoi spălate cu o procedură similară. Contracolorarea s-a folosit de soluție de hematoxilină Mayer (Sigma-Aldrich MHS32) timp de 10 minute, apoi s-a spălat cu apă de la robinet, s-a clătit cu dH2O și s-a uscat la aer. Lamelele preparate au fost observate folosind un microscop cu lumină la o mărire de 400 x după montare și acoperite cu un capac de sticlă. Expresia moleculară pozitivă cu anticorpi primari ar părea maro când este observată. Celulele epiteliale glomerulare calculate au fost localizate în zona corpusculului renal marcată de un strat plat de celule epiteliale în partea parietală a spațiului Bowman.
Examinarea apoptozei
Deparafinizarea țesuturilor a fost efectuată prin spălarea țesutului de trei ori cu xilen (Supelco 108297) timp de 5 minute. Țesutul a fost înmuiat de două ori în etanol absolut timp de 5 minute fiecare și apoi transferat la 95% etanol și 70% etanol timp de 3 minute fiecare. Țesutul a fost spălat cu PBS (Millipore 524650) timp de 5 minute.
Absorbția antigenului a fost realizată prin administrarea de proteinază K (Sigma-Aldrich 70663) timp de 15 minute la probă. Apoi, țesutul a fost spălat de două ori cu H O într-un tub Coplin timp de 2 minute. Peroxidaza endogenă a fost îndepărtată prin picurare de 3% H, O, PBS și lăsată timp de 5 minute la temperatura camerei. Apoi, țesutul a fost spălat de două ori cu PBS (Millipore 524650) timp de 2 minute fiecare într-un tub Coplin. Excesul de lichid a fost uscat folosind hârtie. Aproximativ 75 ul de tampon de echilibrare au fost picurați pe țesut și apoi incubați timp de 10 minute la temperatura camerei. Lichidul din jurul șervețelului a fost apoi uscat folosind hârtie. Activitatea enzimei a fost redusă cu 55 ul/5 cm în țesutul de TdT (Sigma-Aldrich SAB5600268). și apoi țesutul a fost incubat la 37 de grade într-un recipient umed timp de 1 h. Preparatele au fost plasate într-un borcan Coplin care conține un tampon puternic/lucru de curățare și apoi incubate timp de 10 minute la temperatura camerei. Preparatele au fost spălate de patru ori cu PBS (Millipore 524650) timp de 2 minute într-un borcan Coplin la temperatura camerei. Excesul de lichid din jurul șervețelului a fost uscat folosind hârtie. Conjugatul anti-digoxigenină (Roche 11333089001), care a fost îndepărtat anterior din depozit și încălzit la temperatura camerei, a fost picurat pe o suprafață de țesut de 65 ul/5 cm² și apoi incubat timp de 30 de minute la temperatura camerei. Preparatul a fost spălat de patru ori cu PBS (Millipore 524650) într-un borcan Coplin timp de 2 minute la temperatura camerei. Apoi, excesul de lichid din jurul șervețelului a fost uscat folosind hârtie. Culoarea a fost expusă după picături de substrat de peroxidază (Sigma-Aldrich CPS160) de 75ul/5cm2 pe suprafața țesutului și lăsată timp de 10 minute la temperatura camerei. Preparatele au fost spălate de trei ori cu DH, O timp de 1 min în borcane Coplin și apoi incubate. cu DH, borcane cu Oin Coplin timp de 5 min la temperatura camerei Contracolorarea cu verde de metil (Sigma-Aldrich M8884) a fost efectuată timp de 30 de secunde la temperatura camerei. Apoi, preparatul a fost spălat de trei ori cu dH.O timp de 1 min într-un Coplin ar Preparatele au fost curățate cu xilen (Supelco 108297), iar excesul de lichid din jurul țesutului a fost uscat cu hârtie.Preparatele au fost observate cu un microscop cu lumină la o mărire de 400× și au fost numărate celulele epiteliale brune din epiteliul renal glomerular. în fiecare câmp vizual.
Analize statistice
Raportul a fost scala de date utilizată pentru celulele care exprimă caspaza-12 și celulele apoptotice, așa că a fost necesar să se efectueze un test de normalitate folosind testul Shapiro-Wilk (=0.05) și testul de omogenitate folosind Leaven. test (=0.05). Dacă rezultatele au fost în distribuția normală și omogene, atunci a fost efectuat un test diferit folosind ANOVA unidirecțional (= 0.05). Dacă rezultatele au fost normale, dar eterogene, atunci testul efectuat a fost Kruskal-Wallis (=0.05). Dacă ar exista o diferență în datele obținute. apoi analiza a fost urmată de testul Mann-Whitney U (= 0.05). În cele din urmă, a fost efectuat testul de corelație al lui Pearson pentru a afla corelația dintre celulele care exprimă caspaza-12 și celulele apoptotice.
Rezultate
Morfologia celulelor epiteliale glomerulare
Înainte de a observa celulele care exprimă caspaza-12 și celulele apoptotice, morfologia epiteliului renal al capsulei Bowman a fost observată pentru prima dată cu colorare cu hematoxilină-eozină (HE) la o mărire de 400×. Obiectul observat a fost ales aleatoriu pentru a reprezenta tabloul histologic al fiecărui grup. Cisplatina a fost găsită ocazional în necroza tubulară focală, îngroșarea membranei de bază în tubii renali și capsulele Bowman și infiltrarea celulelor mononucleare focale în glomerul. Unii glomeruli suferă de necroză, iar glomerulii reziduali normali prezintă adesea spații periglomerulare mărite.
Exprimarea proteinei caspazei-12 și celulele apoptotice în celulele epiteliale glomerulare
Rezultatele țesutului renal colorat imunohistochimic au prezentat modificări în expresia caspazei-12 în fiecare grup. Administrarea injectării cu cisplatină în grupul P1 a prezentat o expresie medie mai mare a caspazei-12 după 72 de ore (4,1±0.86) în comparație cu grupul de control (P{{9} }). Administrarea de injecție cu glutamină și injecție cu cisplatină (P2) a prezentat o expresie medie mai mică a caspazei-12 după 72 de ore (2,54± 0,72) în comparație cu P1 (Tabelul 1).
În plus, injecția cu cisplatină în grupul PI a prezentat o rată mai mare de apoptoză celulară după 72 de ore (52,7±17.06) în comparație cu grupul de control (P0). Administrarea de injecție cu glutamină și injectare cu cisplatină în P2 a prezentat o expresie medie mai scăzută a caspazei-12 după 72 de ore (31,5±6,73) în comparație cu PI (Tabelul 1). Testul Kruskal-Wallis a indicat diferențele în numărul de celule epiteliale glomerulare care exprimă caspaza-12 și în numărul de celule apoptotice din cele trei grupuri de tratament. Ulterior, testul Mann-Whitney U a concluzionat că au existat diferențe în numărul de celule epiteliale parietale care exprimă proteina caspază-12 și în numărul de celule apoptotice între grupurile P1 și P2 cu grupul martor și între Pl și Grupele P2. Au existat, de asemenea, diferențe în ceea ce privește numărul de celule epiteliale parietale care exprimă proteina caspază-12 și numărul de apoptoză celulară (Tabelul 2).
Corelația dintre celulele cu expresie Capase-12 și celulele apoptotice
Rezultatele testului de corelare Pearson au indicat că există o corelație semnificativă între celulele epiteliale glomerulare care exprimă caspaza{{{0}} și numărul de celule supuse apoptoză cu coeficientul de corelație de 0,707, care este puternic și pozitiv. Astfel, se poate concluziona că dacă numărul de celule de exprimare a proteinei scade, scade și numărul de celule apoptotice și invers.
Tabelul 1. Statistica descriptivă a expresiei caspazei-12 și a celulelor apoptotice. P0: grup de control. P1:cisplatinăinjectare în a 7-a zi. P2 a fost tratat cuintravenosglutaminainjectare cu 7 zile la rând înainte de a fi injectatcisplatinăîn a 7-a zi. | Tabelul 2. Rezultatele testului Mann–Whitney U |
 |  |
Discuţie
În acest studiu, tratamentul a fost efectuat la animalele experimentale care au fost împărțite în trei grupe: grupul de control (PO); grupul PI, care a primit injecție intraperitoneală cu cisplatină; și grupul P2, care a primit injecție intraperitoneală cu cisplatină șiglutamină intravenoasăinjecţie. Răspunsul la tratament a fost observat timp de 72 de ore după tratament deoarece apoptoza a fost evidentă după 72 de ore de injectare cu cisplatină (Tsuruya et al..2003). Locul observat în acest studiu a fost epiteliul glomerular. Până în prezent, nu au existat încă cercetări privind nefrotoxicitatea cisplatinei în epiteliul glomerular. Glomerulul este mai proximal decât tubulii și, prin urmare, se crede că este afectat de nefrotoxicitatea cisplatinei mai devreme decât tubulii.
Diferențele în nivelul de expresie a caspazei-12 au fost direct proporționale cu nivelul de administrare de glutamină în fiecare tratament. Aceste rezultate sunt susținute de un studiu care a afirmat că glutamina poate induce niveluri ridicate de exprimare a HSP în toate organele, inclusiv rinichii (Zhang și colab., 2009). O singură doză deglutamină intravenoasăpoate crește expresia HSP, reduce leziunile organelor terminale și poate îmbunătăți supraviețuirea de la șoc septic la șoareci întregi (Wischmeyer, 2002). Proprietățile citoprotectoare și antioxidante ale glutaminei pot fi cruciale în situații cu catabolism ridicat, în care activitatea și expresia căilor inflamatorii mediate de NF-kB sunt modulate (Cruzat și colab., 2014). S-a raportat că scăderea disponibilității glutaminei plasmatice cauzează reducerea proliferării limfocitelor, afectează expresia proteinelor de activare de suprafață și producția de citokine și induce apoptoza în celule (Roth. 2008). Acesta este motivul pentru care glutamina poate preveni apoptoza celulelor în acest studiu.
După cum sa menționat în rezultate, administrarea de glutamină a scăzut apoptoza celulelor tratate cu cisplatină. Acest lucru a fost dovedit contrariul într-un studiu al lui Kadri et al. (2017) unde suprimarea metabolismului glutaminei poate crește potențialul citotoxic al unor medicamente terapeutice, cum ar fi cisplatina, permițând astfel o scădere a dozei de compuși chimioterapici pentru a minimiza toxicitatea și reacțiile adverse.
Mecanismele morții celulare depind de doza de administrare de cisplatină, fie prin necroză, fie prin apoptoză (Lieberthal și colab., 1996). În experimentele in vitro, concentrațiile scăzute de cisplatină determină celulele să sufere apoptoză, în timp ce necroza la concentrații mari (Megyesi și colab. 1998: Ramesh și Reeves.2003). În această cercetare, doza a fost suficientă pentru a determina celulele epiteliale să sufere apoptoză.
În studiul de față, injectarea de cisplatină în P1 a prezentat o rată mai mare de apoptoză celulară după 72 de ore în comparație cu controlul (PO). De asemenea, am constatat că injecția cu glutamina și cisplatină în P2 a exprimat o expresie mai mică a caspazei-12 după 72 de ore în comparație cu P1.
Apoptoza după tratamentul cu cisplatină poate implica, de asemenea, calea ER-stres. Inițiatorul caspazei în calea ER este caspaza-12, care este localizată pe fața citosolică a ER și activată de presiunea ER (Boyce și Yuan, 2006). Caspaza-12 este activată în timpul tratamentului cu cisplatină în celulele LLC-PK1 (Liu și Baliga, 2005). Observațiile in vitro au fost recent extinse la modelele de șoarece de nefrotoxicitate cu cisplatină, unde ER subliniază și semnalizarea asociată, cum ar fi clivajul de caspază-12, au fost observate (Peyrou et al., 2007).
Se poate concluziona că apoptoza datorată administrării de cisplatină apare din cauza exprimării crescute a caspazei{0}}, care induce apoptoza în celulele epiteliale glomerulare renale. La 72 h de observatie dupaglutamină intravenoasăadministrare, incidența apoptozei în celulele epiteliale glomerulare renale a fost semnificativ inhibată (p<0.0001)between the="" groups="" and="" was="" directly="" proportional="" to="" the="" effect="" of="" glutamine,="" which="" inhibited="" the="" expression="" of="">
În concluzie, pe baza rezultatelor, există o scădere a expresiei caspazei-12 și a celulelor apoptotice în celulele epiteliale glomerulare ale șobolanilor albi masculi expuși la cisplatină dupăglutamină intravenoasăadministrare. Expresia scăzută a caspazei-/2 inglutamină intravenoasăadministrarea este urmată de scăderea apoptozei în epiteliul glomerular. Astfel, se presupune că examenul imunohistochimic asupra epiteliului glomerular renal poate fi utilizat ca marker pentru efectul nefrotoxic al cisplatinei.
Limitarea acestui studiu este că nu au fost observate diferite variabile. Cercetătorul nu a făcut observații executorului caspaza(caspaza-3), deoarece cercetătorul a dorit să vadă semnificația tratamentului efectuat în caspaza inițiatoare. De asemenea, acest studiu nu a observat incidența apoptozei prin două sau mai multe căi. În acest caz, cercetătorul dorește să încerce să parcurgă mai întâi o rută și nu este nevoie să studieze mai mult de o rută dacă rezultatele sunt semnificative. De asemenea, se sugerează să se facă cercetări suplimentare cu privire la aplicareaglutamină intravenoasăintravenos la oameni care primesc chimioterapie cu cisplatină și, de asemenea, în tratamentul animalului cu cancer, astfel încât efectul glutaminei în grupul de cancer și non-cancer poate fi observat.
Figura 1. Morfologia celulelor epiteliale glomerulare după anticorpul CSP-12. P0:grup de control. P1: injectare cu cisplatină în ziua de 7". P2 tratat cuglutamină intravenoasăinjectare timp de 7 zile la rând înainte de a fi infectat cu cisplatină în ziua de 7" h. Rezultatul pozitiv indicat cu citoplasmă maro. | Figura 2. Morfologia celulelor epiteliale glomerulare după trusa de detectare a apoptozei. PO: grup de control. P1: injectare cu cisplatină în ziua de 7". P2 tratat cuglutamină intravenoasăinjectare timp de 7 zile la rând înainte de a fi injectat cu cisplatină în cele 7 zile. Rezultatul pozitiv este indicat cu citoplasmă maro. |
 |  |
Referințe
AkcayA, Turkmen K, Lee D, Edelstein CL(2010). Actualizare privind diagnosticul și managementul leziunii renale acute.Int J Nephrol Renovasc Dis, 3,129-40
Al Hussain T, Al Mana H, Hussein M, Akhtar M (2017). Interacțiunile podocitelor și celulelor epiteliale parietale în sănătate și boală. Ady Anat Pathol, 24 de ani,24-34.
Bovce M. Yuan J(2006). Răspunsul celular la stresul reticulului endoplasmatic; o chestiune de viață sau de moarte. CellDeathDiffer, 13,363-73
Crespo I, San-Miguel B, Prause C.et al (2012). Tratamentul cu glutamina atenuează stresul reticulului endoplasmatic și apoptoza în colita indusă de TNBS.PLoS One,7,50407 Cruzat VF,BittencourtA,Scomazzon SP, et al (2014) .Formele orale libere și dipeptidice de suplimentare cu glutamină atenuează stresul oxidativ și ionul de inflamație indus de endotoxemie. Nutriție, 30,602-11
Feldenberg LR, Thevananther S, Del Rio M, De Leon M, Devarajan P(1999). Depleția parțială de ATP induce apoptoza mediată de Fas și caspază în celulele MDCK.Am.J/ Physiol (Renal Physiol),276.837-46.
Fillipski KK, Loos WJ, Verweij J, Sparreboom A (2008). Interacțiunea cisplatinei cu transportorul de cationi organici umani 2. Clin Cancer Res, 15,3875-80
Fukuoka K, Takeda M, Kobayashi M și colab. (1998). Proteazele diferite ale familiei de enzime de conversie a interleukinei-1 -mediază apoptoza indusă de cisplatină și staurosporină a celulelor tubului proximal de șoarece. Life Sei,62.1125-38.
Guo Y, Wang M,MouJ,etal(2018).Pretratamentul extractului de huaiqihuang protejează împotriva nefrotoxicității induse de cisplatină. Sci Rep, 8, 7333
Hanigan MH. Devarajan P(2003). Nefrotoxicitate cu cisplatină: mecanisme moleculare. Cancer Ther,1,47-61
Jing L, Wu O, Wang F (2017). Glutamina induce proteinele de șoc termic și protejează împotriva Escherichia coli
Notă:cele de mai sus nu sunt o listă completă de referință
