Studiul proteomic cantitativ dezactivează calea fibrinogenului în boala hepatică polichistică Ⅲ

4. Discutie

Boala polichistică a ficatului(PLD) este de obicei o manifestare extrarenală asociată cu autosomal dominantboala de rinichi cu chisturi multiple(ADPKD). PLD se caracterizează prin dilatarea progresivă a căilor biliare și progresia unor chisturi multiple, ocupând cel puțin jumătate din volumul parenchimului hepatic. Mai multe dintre strategiile terapeutice actuale se bazează pe proceduri chirurgicale și farmacologice pentru ameliorarea simptomelor bolii. Din acest motiv, tratamentul PLD a fost ineficient până acum, iar singura opțiune curativă este transplantul hepatic.45]. Acest lucru se datorează în principal faptului că mecanismul molecular intrinsec cheie al chistogenezei rămâne necunoscut. Principalele abordări se concentrează pe calea de semnalizare a cAMP și pe analogii somatostatinei și pe câteva ținte noi (de exemplu,histon deacetilaza 6,Fosfataza Cdc25A, PPAR- și metaloproteazele matriceale) au fost evaluate în studii preclinice, dar trebuie testate clinic.8]. Deci, un interes emergent pentru înțelegerea căilor moleculare și dezvoltarea de noi strategii terapeutice este în creștere.2,8]. Scopul prezentei și noi lucrări SWATH-MS a fost caracterizată de modificările proteomice în ficatul polichistic și de a oferi noi perspective și ținte terapeutice pentru PLD.

Faceți clic pentru a cistanche herba pentru boli de rinichi

În studiile anterioare, am identificat într-un model ortolog de ADPKD (Pkd1cond/cond; Tam-Cre) o fereastră de dezvoltare pentru cistogenia renală, sugerând că momentul evenimentelor secundare poate influența severitatea bolii renale chistice. Folosind aceeași strategie, am investigat dacă această fereastră de dezvoltare renală corespunde în timp cu o fereastră similară de dezvoltare hepatică. În mod interesant, am observat că fenotipul hepatic chistic nu urmează același timp, ceea ce sugerează că rinichiul și ficatul au mecanisme posibil diferite care suferă cistogenie. Studiile ulterioare ar trebui să se concentreze pe identificarea mecanismelor comune și diferite ale bolii în ambele organe și pe identificarea ferestrei necunoscute de dezvoltare a ficatului pentru cistogenie. Pentru o analiză ulterioară, am folosit o abordare proteomică cantitativă de generație următoare SWATH-MS pentru a efectua o analiză proteomică diferențială a bolii hepatice chistice într-un fenotip PLD ușor și mai sever în cadrul aceleiași ferestre de dezvoltare a rinichilor. Datele noastre sugerează că în stadiile avansate de progresie a bolii, numărul de căi dereglate este crescut, probabil din cauza efectelor secundare ale bolii. În același mod, aceste rezultate întăresc ideea că creșterea chistului trece cu două etape mari: inițierea chistului și progresia chistului [46]. Interesant este că atât analizele de proteome dintr-un status chistic ușor (grupul p14) cât și unul sever (grupul p12) au identificat complexe proteice de fibrinoliză direct legate de boala chistică hepatică. În stadiile mai ușoare ale bolii, am identificat ANXA2 ca una dintre proteinele interesante de validat ca o potențială țintă terapeutică pentru PLD. ANXA2 este o proteină de legare la membrană reglată de calciu produsă de o gamă largă de tipuri de celule, inclusiv celule epiteliale, dendritice, trofoblaste și tumorale, precum și monocite și macrofage. Rolul principal este de a menține activitatea proteolitică a suprafeței celulare, dar îndeplinește și o serie de funcții intracelulare, inclusiv exocitoza, endocitoza, repararea membranei [47] și menținerea joncțiunilor intercelulare asemănătoare aderente [48]. Numeroasele sale funcții contribuie la fibrinoliză, reglarea inflamației și activarea sistemului imunitar, precum și leziunile și repararea țesuturilor; ca urmare, disfuncția ANXA2 a fost implicată în mai multe boli umane, de exemplu, remodelarea matricei extracelulare și fibroza hepatică [49,50], care este o caracteristică comună în progresia bolii PLD [8]. Interesant este că, în stadiul sever al bolii hepatice, analiza noastră proteome a descoperit o serie de proteine ​​diferite legate de complexul de fibrinogen. În timpul leziunilor tisulare și vasculare, fibrinogenul este convertit enzimatic de către trombină în fibrină, iar în timpul fibrinolizei, fibrina este degradată de enzima principală plasmină (forma activă a plasminogenului). Fibrinogenii sunt asociați cu MAPK [51,52] și integrine [53], două căi care s-au dovedit a fi eficiente ca terapie potențială pentru ADPKD în studiile preclinice [54,55]. Chiar și modelul animal al unuia dintre fibrinogenii supraexprimați (FIBA) s-a dovedit a avea boală chistică [56]. Mai mult, activitatea crescută a clusterelor de fibrinogen în PLD oferă o nouă perspectivă pentru tratarea bolii în comparație cu medicamentele experimentale actuale [57]. În consecință, scăderea acestui cluster ar putea susține un nou mecanism de acțiune pentru medicamente în care proteinele din familia fibrinogenului ar fi ținte terapeutice. Un exemplu mai bun ar fi blocarea ERR (receptor legat de estrogen), un receptor nuclear orfan [58,59], care modulează nivelurile de fibrinogen în stările de hipofibrinogenemie cauzate de obezitate indusă de dietă, diabet zaharat tip 2, leziuni hepatice și alcool. -stresul oxidativ indus [60,61]. Mai exact, agoniştii inversi, cum ar fi GSK5182 (CAS: 877387-37-6) [60–66] și DN200434 [67,68], ar oferi o astfel de acțiune benefică prin scăderea nivelurilor de fibrinogen.

În rezumat, am identificat câteva ținte și căi noi implicate în fiziopatologia PLD prin tehnologia proteomică cantitativă SWATH-MS. Am subliniat noua oportunitate terapeutică prezentată de fibrinogeni și fibrinoliză (și celelalte proteine ​​identificate asociate), în principal datorită faptului că toate validările cu diferențe semnificative efectuate sunt legate de complexul de fibrinogen. Cu toate acestea, există potențialul de a confirma acest lucru în studii preclinice viitoare, precum și în studii mai funcționale pentru a caracteriza rolul exact al candidaților noștri țintă în PLD. În concluzie, această lucrare a creat un nou mecanism și o oportunitate pentru cercetări viitoare în fiziopatologia PLD, conducând la posibile noi abordări terapeutice ale bolii.

5. Rezumat

Am raportat un nou studiu cantitativ proteomic bazat pe tehnologia SWATH-MS care compară proteomii ficatului de tip sălbatic și polichistic. Au fost identificate mai multe căi și ținte noi, extinzând cunoștințele despre mecanismele moleculare în domeniul PLD și evidențiind complexul de fibrinogen ca o posibilă nouă țintă terapeutică.

Materiale suplimentare: Următoarele informații justificative pot fi descărcate de la: https: //www.mdpi.com/article/10.3390/biomedicines10020290/s1, Figura S1: Analiza calitativă prin spectrometrie de masă DDA în diferitele grupuri ale studiului, Figura S2: TAS (Total Area Sums) diagrame de normalizare grupul p14, Figura S3: TAS (Total Area Sums) diagrame de normalizare ale grupului p12, Figura S4: Figura S4: Figura Heatmap a analizei cluster nesupravegheate a proteinelor cu diferențe semnificative conform analizei SWATH-MS, Figura S5: Nesupravegheată Analiza grupului de hărți termice a tuturor proteinelor detectate de SWATH-MS, Figura S6: PCA nesupravegheate din datele SWATH-MS, Figura S7: Îmbogățirea GO și analiza căii de proteine ​​​​regulate semnificativ în cistogeneza hepatică conform String și respectiv Reactome, Figura S8: Complet Harta interacțiunii proteină-proteină conform String, Figura S9: Box-plot ale datelor SWATH-MS proteomice cantitative ale țintelor selectate pentru validare, Tabelul S1: ID Probele analizate, distribuția în fiecare grup și punerea în comun a probelor pentru achiziționarea tirurilor de pușcă pentru a construi Biblioteca spectrală, Tabelul S2: Lista de secvențe de primeri utilizate pentru analiza RT-qPCR, Tabelul

Contribuții ale autorului:Conceptualizare, MAG-G. și AC; metodologie, AC, MV-G., LN-G., AM-V., MdPC-V. și SBB; analiza formală, AC; resurse: MAG-G. și SBB; curatarea datelor, AC; scris — pregătire originală a proiectului, AC; scriere—revizuire și editare, MAG-G., SBB și LN-G.; vizualizare, MAG-G. și AC; supraveghere, MAG-G.; administrare proiect, MAG- G.; achiziție de finanțare, MAG-G. Toți autorii au citit și au fost de acord cu versiunea publicată a manuscrisului.

Finanțarea: Această cercetare a fost finanțată de Instituto de Salud Carlos III prin fondurile FIS/FEDER PI15/01467 și PI18/00378 (către MAG-G.) și de către Xunta de Galicia premiul IN607B 2016/020 (către MAG-G.). Sprijinul salarial a fost oferit de o bursă predoctorală Xunta de Galicia în 2016 pentru AC și o bursă predoctorală Xunta de Galicia în 2017 pentru MV-G.

Referințe

1. Cnossen, WR; Drenth, JPH Boala polichistică a ficatului: o privire de ansamblu asupra patogenezei, manifestărilor clinice și managementului. Orphanet J. Rare Dis. 2014, 9, 1–13. [CrossRef] [PubMed]

2. Santos-Laso, A.; Izquierdo-Sánchez, L.; Lee-Law, PY; Perugorria, MJ; Marzioni, M.; Marin, JJG; Bujanda, L.; Banales, JM Noi progrese în bolile hepatice polichistice. Semin. Ficat Dis. 2017, 37, 45–55. [CrossRef] [PubMed]

3. Suwabe, T.; Shukoor, S.; Chamberlain, AM; Killian, JM; Regele, BF; Edwards, M.; Senum, SR; Madsen, CD; Chebib, FT; Hogan, MC; et al. Epidemiologia bolii polichistice renale autosomal dominante în județul Olmsted. Clin. J. Am. Soc. Nefrol. 2020, 15, 69–79. [CrossRef] [PubMed]

4. Cordido, A.; Besada-Cerecedo, L.; García-González, MA Baza genetică și celulară a bolii polichistice de rinichi autosomal dominante - Un primer pentru clinicieni. Față. Pediatr. 2017, 5, 279. [CrossRef] [PubMed]

5. Bergmann, C.; Guay-Woodford, LM; Harris, PC; Horie, S.; Peters, DJM; Torres, VE Boala polichistică de rinichi. Nat. Rev. Dis. Prim. 2018, 4, 1–24. [CrossRef]

6. Cordido, A.; Vizoso-Gonzalez, M.; Garcia-Gonzalez, MA Fiziopatologia moleculară a bolii renale polichistice autosomale recesive. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 6523. [CrossRef]

7. Van Aerts, RMM; van de Laarschot, LFM; Banales, JM; Drenth, JPH Managementul clinic al bolii hepatice polichistice. J. Hepatol. 2018, 68, 827–837. [CrossRef]

8. Perugorria, MJ; Masyuk, TV; Marin, JJ; Marzioni, M.; Bujanda, L.; Larusso, NF; Banales, JM Boli polichistice hepatice: Perspective avansate asupra mecanismelor moleculare. Nat. Rev. Gastroenterol. Hepatol. 2014, 11, 750–761. [CrossRef]

9. Banales, JM; Masyuk, TV; Gradilone, SA; Masyuk, AI; Medina, JF; LaRusso, NF Efectorii cAMP Epac și protein kinaza a (PKA) sunt implicați în cistogenia hepatică a unui model animal de boală polichistică renală autosomal recesiv (ARPKD). Hepatologie 2009, 49, 160–174. [CrossRef]

Serviciul de asistență al Wecistanche-Cel mai mare exportator de cistanche din China:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Cumpărați pentru mai multe detalii despre specificații:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

OBȚINEȚI EXTRACT NATURAL ORGANIC DE CISTANCHE CU 25% ECHINACOSIDE ȘI 9% ACTEOSIDE PENTRU INFECȚIA RINCHILOR