Studiu asupra constituenților chimici ai Cistanche Deserticola, un medicament chinezesc din plante pentru hrănirea rinichilor și întărirea Yang-ului
Mar 09, 2022
Contact: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964audrey.hu@wecistanche.com
Introducere
Cistanche deserticolacare aparține familiei Orobanchaceae este tulpina cărnoasă uscată a Cistanche deserticola, care este dulce, sărată și caldă. Are efecte de tonifiere a rinichilor, de întărire a Yang, de umezire a intestinelor și de relaxare a intestinului. Este folosit în principal pentru a trata impotența, frigul și durerea în talie și genunchi, infertilitatea, uscăciunea intestinală și constipația. Au fost raportate de asemenea efectele farmacologice ale Cistanche deserticola.
Institutul de medicină tradițională chineză al Academiei Chineze de medicină tradițională chineză a efectuat studii chimice și farmacologice asupraCistanche deserticola. Este dovedit că extractul său de etanol afectează sistemul imunitar. Nouă compuși au fost separați și identificați ca D-Mannitol - Sitosterol, daucosterol, acid succinic, Triacontanol, 8-epibrucină glucozidă, betaină, glicolipidă a acidului cafeic și compuși polizaharidici. Pe lângă manitol și 8-epibrucină glucozidă, din Cistanche deserticola au fost obținute pentru prima dată și alte componente. Glicolipidul acidului cafeic, betaina, manitolul, acidul succinic și alți compuși au o varietate de activități fiziologice. Au efecte asupra sistemului imunitar, funcției sexuale, sistemului cardiovascular, ficatului, anti-îmbătrânire și așa mai departe.
Partea experimentală
Punctul de topire a fost măsurat cu microscopul Boetius PHMK, iar termometrul nu a fost reglat; Spectrometria de masă (EI) a fost determinată cu instrumentul MMH 70-70 (Marea Britanie), iar FD a fost determinată cu M-80 cromatografie în gaz-spectrometru de masă (Japonia); Rezonanța magnetică nucleară (spectrul hidrogenului) a fost determinată cu instrumentul de tip JEOL FX 90Q (Japonia); spectrul ultraviolet a fost determinat cu un instrument de tip UV-3000; Spectrul infraroșu a fost măsurat cu instrumentul de tip Hitachi 260-50, tabletarea KBr și gelurile de silice au fost fabricate din uzina chimică marine Qingdao, gelul LH-20 a fost fabricat în Suedia. Tulpinile de carne uscată de Cistanche deserticola au fost achiziționate de la compania de materiale medicinale din Beijing și identificate de Zhang Yanzhen.
1. Extracție și separare
Cistanche deserticola se zdrobește, se perculează cu etanol 95 la sută, se recuperează solventul, se dizolvă într-o cantitate mică de apă, se extrage cu eter, cromatografie pe coloană de silicagel, se eluează cu eter de petrol (6:4) pentru a obține cristalul alb ( I). Stratul de apă extras cu eter este evaporat, încălzit și dizolvat cu etanol, răcit pentru a obține o precipitare floculoasă (II). Cistanche deserticola este percolată cu 50 la sută etanol. S-a extras cu acetat de etil, cromatografie pe coloană cu silicagel, eluând cu acetat de etil, 20ml fiecare (la fel mai jos) Un total de 37 de probe au fost colectate și examinate prin cromatografie în strat subțire. Partea care conţine cristalul (III) iniţial scurs afară a fost combinată. 24 ~ 37 de probe au fost filtrate din floc alb (II) și evaporate la sec. Reziduul a fost supus cromatografiei pe coloană cu silicagel şi eluat cu butanonă-acetat de etil-benzen-apă (4:3:2:0,2). Au fost colectate 12 probe, dintre care 8 ~ 11 probe au fost separate din cristale portocalii; stratul de apă extras cu acetat de etil a fost extras prin cromatografie pe coloană de n-butanol, silicagel şi eluat cu cloroform-metanol-apă (6:4:1). A cincea probă a dizolvat o cristalizare subțire (IV), cealaltă parte a cromatografiei în strat subțire, combinată cu partea de fluorescență albastră, apoi a folosit cromatografia pe coloană cu silicagel, eluată cu cloroform-metanol-apă (7:3:2,5). ), a folosit aceeași metodă combinată cu partea de fluorescență albastră, a traversat coloana de gel LH-20, a eluat cu metanol-apă (1:1), A opta probă a dizolvat niște pulbere galbenă (V), continua să elueze la 37 de părți, combinate cu partea necesară de mai sus, cromatografie pe coloană cu silicagel, răspândită prin butanonă-acetat de etil-benzen-apă (4:3:2:0,2), tăiați segmentul fluorescent albastru și eluați cu metanol pentru a obține lumină pulbere brună (VI).
95% extract de etanol, îndepărtarea eterului de petrol și diclormetanului, dizolvarea în metanol, cromatografie pe coloană de silicagel la presiune joasă, eluarea cu metanol-cloroform (9:l), 20 ml fiecare, a 18-a ~ a 28-a părți au dizolvat câteva cristale incolore (VII) ; a extras cu apă reziduul de Cistanche deserticola după extracția cu etanol, apoi a concentrat reziduul, răcind, a dizolvat un număr mare de cristale albe (VIII), îndepărtarea soluției de apă cristalizată și apoi a tratat cu de 4 ori mai multă cantitate de etanol pentru a produce mai multe precipitații (IX).
2. Identificare
Compusul I: cristalul ac alb a fost obținut prin recristalizare cu acetonă, mp136 ~ 137 grade. Reactivul acid sulfuric concentrat în anhidridă acetică a prezentat o reacție pozitivă (verde). EIMS m/z: 414 (M plus). Cromatografia în strat subțire Valoarea Rf și spectrul infraroșu au fost în concordanță cu standardul - Sitosterol, deci se confirmă ca - Sitosterol.
Compusul II a fost recristalizat prin încălzire şi reflux cu etanol de două ori pentru a obţine o precipitare floculentă albă, mp290 ~ 291 grade. Reactivul acid sulfuric concentrat în anhidridă acetică a prezentat o reacție pozitivă (verde), - Reactivul naftol a prezentat o reacție pozitivă. EIMS m/z:396 (pic de bază), 382, 255, 213, 81, 57, 43. Cromatografia în strat subțire a fost în concordanță cu produsul cunoscut de daucosterol, iar punctul de topire al amestecului nu a scăzut. A fost confirmat ca daucosterol.
Compusul III metanolul a recristalizat în niște cristale alungite, mpl87 ~ 189 grade, pH 2. EIMS m/z: 119 (M plus 1), 118 (M plus), 101, 100, 74, 73, 55 (vârf de bază), 45, 28, 27. IR (KBr) cm-1: 3100 ~ 2500 (lățime, OH), 1690 (C{{=O), 1420, 1310, 1200, 920, 800. Valoarea RF cromatografia în strat subțire este aceeași cu cea a acidului succinic standard. În plus, este în concordanță cu spectrul de masă standard și spectrul infraroșu standard al acidului succinic, iar punctul de topire al amestecului nu scade. Este confirmat ca acid succinic
Compusul IV este recristalizat cu etanol ca un solid alb lucios, mp83 ~ 84 grade. EIMS m/z: 420 (M plus -H20), 57 (vârf de bază). Valoarea Rf a cromatografiei în strat subțire este aceeași cu cea a Triacontanolului cunoscut, iar punctul de topire al amestecului nu scade. Datele de mai sus sunt în concordanță cu Triacontanol raportat în literatură.
Compusul VI: după dizolvarea cu acetonă, s-a efectuat cromatografia pe coloană de silicagel și s-a eluat cu 60% metanol pentru a obține cristale amorfe subțiri de culoare galben deschis, care sunt ușor solubile în apă și solubile în metanol, etanol și acetonă, reactivul - Naftol a prezentat o reacție pozitivă. . IR (KBr) cm-1: 3700 ~ 3000 (OH), 2900 (CH2, CH3), 1690 (C=O), 1600520 (C{=C), 1440, 1350 , 1280, 1260 (COC), 1156, 1110, 1050 (CO), 807. UV A nm (log e): 218 (sh, 4,30), 249 (3,91), 291 (4,08), 330 (4,15). H-RMN (CD3COD3) 5 ppm: 1,18 (3H, D, J=6, CH3 pe ramnoză), 2,75 (2h, t, J=7.2, 2H pe poziţia C), 4,75 ( 1H, D, J=8, C{1-H pe glucoză), 5,17 (1H, D, J {= 1,8, C{1-H pe ramnoză), 4,20 ~ 3,30 (12H, m, 2H pe poziția C, 6H pe glucoză, 4H pe ramnoză), 6,27 (1H, D, J=16, 1H pe poziția C), 7,52 (1H, a, J {{76} } Poziția C (1H), 6,60 (1H, a, J=8, C5 "'- H), 6,90 (1H, DD, J=8 / 2, C6"' - H), 7,10 (1H, D, J=2, C2 "' - H), 6,70 (1H, D, J=2, C{2-H), 6,65 (1H, D, J {{ 105}}, C5-H), 6,52 (1H, DD, J=8/2, C6-H), H-RMN (DMOS) 5 ppm: 7,43 (1H. s, OH), 8,07 (1H, s, OH), 850 (2H, s, 2 * OH), a dispărut după agravarea schimbului de apă. [a] 22D: - 68.37 grade (C {{126} },67MeOH).FDMS m/z:647(M plus plus Na), 625 (M plus plus 1), 624 (M plus ), 479 (M plus 1-ramnosil), 478 (M plus -ramnosil) ), care corespunde formulei moleculare C29H36O15. După hidroliza acidă a compusului VI, pe cromat de hârtie sunt afișate două pete maro. grafica. Valoarea Rf este complet în concordanță cu ramnoza și glucoza, iar punctul de topire nu scade atunci când este amestecat cu actozidul cunoscut. Datele de mai sus sunt în concordanță cu grupa 3,4-dihidroxi descrisă în literatură - Fenetoxi-o- - L-ramnosil (1 → 3) - 4-grupa acidului o-cafeic - D- glucopiranozidul este practic cancerigen.
Compusul VII este un cristal alb obținut prin recristalizarea acetonei metanol, peste mp299 grad (descompunere), extrem de solubil în apă, ușor delicvescent și solubil în etanol și metanol. Reactivul alcaloid prezintă o reacție pozitivă. Valori experimentale ( procente ) ale analizei elementare: C47,29, H9,16, N10,54; valori teoretice ( procente ): C47.54,H9.52,N11.11. Se conformează formulei moleculare C5H11NO2.1/2H2O. IR (KBr) cm-1: 3360 (asociat NH, OH), 2940, 1620 (C{=O), 1470, 1390, 1330, 1240, 1125, 980, 930, 890. H- RMN (D20) 5 ppm: 3,28 (9 H, s, 3*CH3), 3,88 (2 H, s, CH2), 4,68 (D20). EIMS m/z:117(M plus), 100, 85, 73, 59, 58 (vârf de bază), 44, 42. Cromatografia în strat subțire este complet în concordanță cu valoarea Rf a standardului de betaină și cu punctul de topire al amestecul nu scade. Spectrul de rezonanță magnetică nucleară, spectrul infraroșu și spectrul de masă sunt în concordanță cu spectrul standard al betainei, astfel încât betaina este recunoscută.
Compusul IX: dizolvat în apă, extras cu n-butanol-cloroform (l:4), iar impuritățile au fost îndepărtate. Stratul de apă a fost tratat cu o cantitate de 4 ori mai mare de etanol, precipitatul a fost dizolvat în apă, decolorat cu peroxid de hidrogen, iar compușii moleculari mici au fost îndepărtați prin dializă. Membrana a fost tratată cu o cantitate de 5 ori mai mare de etanol pentru a obţine un precipitat galben deschis. Reacția lui Fehling a fost negativă înainte de hidroliza precipitatului și s-a produs un precipitat roșu maroniu după hidroliză. După hidroliza acidă, hidrolizatul a fost supus cromatografiei pe hârtie. În comparație cu zahărul standard, s-a detectat doar glucoză, astfel că s-a confirmat că au fost detectate polizaharide, care sunt compuse în principal din glucoză.
