Direcționarea căii de semnalizare ROS/NF‑κB prin polifenolii fără semințe Black Vitis Vinifera în rinichi, plămâni, creier și spline intoxicați cu CCl4 la șobolani
Mar 27, 2022
Pentru mai multe informatii. a lua legaturatina.xiang@wecistanche.com
Stresul oxidativeste definit ca un dezechilibru între toxicitatea speciilor reactive de oxigen (ROS) și toxicitatea fiziologică.antioxidantsistem de apărare care elimină ROS sau ameliorează daunele rezultate, ROS generat care distruge toate aspectele celulare poate produce efecte letale2 și joacă un rol vital în patogeneza numeroaselor organe umane, inclusiv creierul, plămânii, ficatul, splina și rinichi-5. În consecință, scăderea producției de ROS este critică pentru prevenirea mai multor daune oxidative și; pentru supraviețuirea celulară. Cu toate acestea, leziunile celulare masive determină îndepărtarea celulei deteriorate pentru a menține celulele sănătoase din jur6, diverse substanțe chimice toxice, cum ar fi metanolul, tetraclorura de carbon (CC1,). hidrocarburile aromatice și bromobenzenul pot induce leziuni sistemice de organ prin producerea ROS8. CCl a fost utilizat pe scară largă ca agent de curățare, solvent și degresant, atât pentru uz casnic, cât și pentru uz industrial. În plus, este utilizat pe scară largă ca model experimental pentru a studia efectele hepatotoxice ale extractelor de plante și medicamentelor, deoarece ficatul este principalul organ expus la toxicitate CCl. Alte organe pot fi, de asemenea, afectate de toxicitatea sa, cum ar firinichi, plămâni șisplină.
Numeroase remedii tradiționale au fost studiate pe modele de animale de laborator pentru capacitățile lor de protecție împotriva diferitelor boli cronice, toxine și substanțe chimice toxice-4. Vitis vinifera(VV) este una dintre plantele de remedii populare și alimentele funcționale, aparținând familiei Vitaceae. Este un fruct non-climacteric și cel mai cultivat și consumat fruct comestibil din lume. VV are diverse efecte benefice pentru sănătate, cum ar fi proprietățile sale de îmbunătățire a sistemului imunitar, antiinflamatorii, neuroprotectoare, antioxidante, anti-apoptotice și anti-carcinogene. Aceste efecte de promovare sunt legate de constituenții săi funcționali, care includ minerale, aminoacizi, proteine, zaharuri, acizi organici, vitamine și fitochimice (flavonoide, carotenoide, taninuri, antociani și proantociani).
Puterea de protecție a diferitelor tipuri și părți de VV, cum ar fi tulpinile, frunzele, semințele și sucul împotriva diferiților agenți hepatotoxici, inclusiv CCl, a fost examinată-5,17. În plus, munca noastră recent publicată a investigat, pentru prima dată, potențialul hipnoterapeutic și activitatea sinergică a polifenolilor VV negri (VVP) extrași fără semințe (atât pulpa, cât și piele) împotriva hepatotoxicității induse de CCl². Din fericire, niciun studiu anterior nu a încercat să investigheze eficacitatea terapeutică a VVP împotriva sistemului indus de CClA. toxicitatea (toxicitatea rinichilor, plămânilor, creierului și splinei) la șobolani, pentru a compara valorile lor terapeutice în aceste organe țintă.De aceea, studiul actual a fost realizat pentru a investiga acest punct pe lângă compararea potențialului terapeutic al acestor polifenoli izolați în cele patru au fost studiate organele utilizând diagramele clusterelor hărții termice. Au fost, de asemenea, evaluate efectele VVP negre asupra daunelor oxidative și necroinflamației prin care CCl a indus distrugerea sistemică. ted aici. Pentru o explicație a rezultatelor, au fost examinate conținutul fitochimic și activitățile antioxidante in vitro ale VVP.
Rezultate
Compoziția fenolică și potențialul antioxidant al VVPF.Studiul de față a constatat că conținutul total de fenolici al VVPF a fost de 58,387±0,755 mg acid galic echivalent. g-'VV PF. În plus, acest studiu a raportat prezența a 16,718±1,858 mg catechine echivalent de flavonoide, 1,098±0.342 mg Quercetin(QR) eq de flavanoli și 3,467±0,466 mg cianidin{{{ 17}}glucozid (Cy-3-GLC) echivalent de antociani în fiecare 1 g de VVPF.
VVPF a arătat o activitate antioxidantă puternică in vitro cu o valoare a capacității antioxidante totale (TAC) de 709,589±25,939 mg Hidroxitoluen butilat (BHT), de ex. g-1VVPE. Mai mult decât atât, avea o putere puternică de reducere a fericilor și a fost capabil să elimine radicalul acidului 2,2'-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-acid sulfonic (ABTS) (Fig. 1A, B). Rezultatele, de asemenea, a arătat că puterea de reducere ferică a VVPF a fost semnificativ (p<0.05)higher(lower ic50="" value="" "50%="" inhibitory="" concentration")="" than="" that="" of="" ascorbic="" acid="" (asc),="" while="" its="" abts="" scavenging="" power="" was="" lower="" (higher="" ic50="" value)="" than="" that="" of="">
Influența VVPF asupra toxicității sistemice induse de CCl.VVPF a prezentat un impact puternic de ameliorare asupra toxicității induse de CCl în rinichi, plămâni, creier și țesuturi splinei. Acest lucru a fost demonstrat de o îmbunătățire substanțială a sistemului sistemicstresul oxidativșineuroinflamație.
Rezultatele au arătat că raportul greutate/corp de organe pentru rinichi, plămâni șisplinățesuturile au avut o schimbare nesemnificativă între toate grupurile. Cu toate acestea, un semnificativ (p<0.05)decrease was="" detected="" in="" the="" brain="" wt/b.w.ratios="" of="" rats="" in="" ccl(39.891%)and="" v(45.355%)="" groups="" as="" compared="" to="" the="" control="" "c"="" group.="" however,="" there="" was="" an="" anon-significant="" change="" in="" these="" ratios="" in="" rats="" of="" the="" ccl,+vvpf="" group="" relative="" to="" the="" ccl="" group="" (fig.="">
Impactul de ameliorare al VVPF asupra stresului oxidativ renal indus de CCl.Datele acestui studiu au relevat că CCl a indus stres oxidativ în rinichi care s-a manifestat printr-un efect semnificativ (p.<0.05)elevation in="" the="" level="" of="" ros(203.169%)and="" no(545.833%).in="" addition,="" the="">substanțele reactive cu acid (TBARS, 321,790 la sută) și activitatea mieloperoxidazei (MPO, 321,579 la sută) au fost crescute în grupul CCl, în comparație cu grupul C (Fig, 2A-C). Aceste rezultate au fost însoțite de o scădere masivă a nivelului de TAC (53,121 la sută) și de glutation (GSH, 80,647 la sută) și de activitatea antioxidanților enzimatici (superoxid dismutază "SOD, 45,727 la sută" și glutation peroxidază "GPX, 50,909 la sută" "), așa cum se arată în Fig. 2A, C, D. Cu toate acestea, a existat o schimbare nesemnificativă a tuturor acestor markeri de stres oxidativ în rinichiul șobolanilor din grupul V "vehicul" (Fig. 2A-D).
![Te improving activity of VVPF to CCl4-induced renal oxidative stress and necroinfammation. (A) reactive oxygen species (ROS), total antioxidant capacity (TAC), and nitric oxide (NO) levels (B) thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level (C) myeloperoxidase (MPO) and superoxide dismutase (SOD) activities (D) glutathione peroxidase (GPX) activity and reduced glutathione (GSH) level. (E) gene expression fold change of the pro-infammatory mediators [nuclear factor-kappa (NF-κ)B, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2, and tumor necrosis factor (TNF)-α] in the kidney tissues. Results are expressed as mean±S.E of 7 animals. C Control untreated rats; CCl4 rats with systemic toxicity induced by CCl4 injection (1 mL/kg b.w., IP, 6 times); V olive oil (vehicle of CCl4)-injected rats (0.5 ml/kg b.w., IP, 6 times); CCl4+VVPF rats with systemic toxicity afer their gavage-fed VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. VVPF control rats gavage-fed only VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. Diferent letters indicate the signifcance at p<0.05; CCl4+VVPF group was compared with the CCl4 group, while V and VVPF groups were independently compared with the C group. BHT butylated hydroxytoluene](/Content/uploads/2022842169/20220324141803714ee4ff12da46fb85e3d4af180e6971.png "Te improving activity of VVPF to CCl4-induced renal oxidative stress and necroinfammation. (A) reactive oxygen species (ROS), total antioxidant capacity (TAC), and nitric oxide (NO) levels (B) thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level (C) myeloperoxidase (MPO) and superoxide dismutase (SOD) activities (D) glutathione peroxidase (GPX) activity and reduced glutathione (GSH) level. (E) gene expression fold change of the pro-infammatory mediators [nuclear factor-kappa (NF-κ)B, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2, and tumor necrosis factor (TNF)-α] in the kidney tissues. Results are expressed as mean±S.E of 7 animals. C Control untreated rats; CCl4 rats with systemic toxicity induced by CCl4 injection (1 mL/kg b.w., IP, 6 times); V olive oil (vehicle of CCl4)-injected rats (0.5 ml/kg b.w., IP, 6 times); CCl4+VVPF rats with systemic toxicity afer their gavage-fed VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. VVPF control rats gavage-fed only VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. Diferent letters indicate the signifcance at p<0.05; CCl4+VVPF group was compared with the CCl4 group, while V and VVPF groups were independently compared with the C group. BHT butylated hydroxytoluene")
Studiul de față a raportat o îmbunătățire bună a parametrilor de stres oxidativ după administrarea VVPF timp de zece zile (grupul CCl plus VVPF). Prin urmare, nivelurile de ROS, NO și TBARS și activitatea MPO au fost semnificative (p<0.05)reduced relative="" to="" that="" of="" the="" ccl,group="" by="" 44.747%,81.297%,67.439%,and="" 35.362%,="" respectively(fig.2a-c).in="" contrast,="" the="" level="" of="" tac(47.429%)="" and="" gsh(81.899%)and="" the="" activity="" of="" sod="" (57.936%)="" and="" gpx(91.769%)were=""><0.05) upregulated="" in="" the="" kidney="" of="" the="" rats="" in="" this="" group="" (fig.2a,="" c,="" d).="" while="" the="" intake="" of="" vvpf="" alone="" for="" ten="" days(vvpfgroup)had="" an="" anon-significant="" effect="" on="" all="" of="" the="" previous="" parameters,="" except="" for="" the="" mpo(decrease="" by="" 31.513%)and="" sod(elevated="" by="" 17.413%)="" activities,="" which="" were="" significantly=""><0.05) changed="" as="" related="" to="" the="" control="">
Impactul de ameliorare al VVPF asupra stresului oxidativ indus de CCl în plămân.În plămân, CCl, a indus și stresul oxidativ prin creșterea nivelurilor de ROS, NO. T-BARES. și activitatea MPO în mod semnificativ (p<0.05),by 131.883%,516.092%,332.458%,and="" 57.319%,respectively="" as="" compared="" to="" the="" control="" rats(fig.3a-c).="" moreover,="" the="" level="" of="" tac(65.779%),="" gsh(81.081%),="" as="" well="" as="" the="" activity="" of="" both="" sod="" (53.195%)and="" gpx="" (66.797%)were="" greatly="" depleted="" in="" the="" lung="" after="" ccl,="" injection(fig.3a,="" c,="" d).="" the="" results="" also="" found="" that="" the="" injection="" of="" rats="" with="" olive="" oil="" for="" 3="" weeks(v="" group)led="" to="" a="" significant=""><0.05)increase in="" the="" ros="" and="" tbars="" levels.="" moreover,="" it="" substantially="" diminished="" the="" tac="" and="" gsh="" contents="" in="" addition="" to="" the="" sod="" and="" gpx="" activities,="" relative="" to="" the="" control="" (fig.="" 3a-d).="" the="" percentages="" of="" these="" changes="" were="" 38.146%,="" 23.430%,34.877%,19.018%,41.998%,="" and="" 15.715%,="">
Administrarea VVPF timp de zece zile (CCl, plus grupul VVPF) a ameliorat considerabil perturbarea stării redox pulmonare care a fost indusă de CCl. Acest lucru a fost realizat printr-un<0.05) decrease="" in="" the="" ros,="" no,and="" tbars="" levels,="" and="" mpo="" activity="" by="" 65.510%,58.955%,75.435%,and="" 55.496%,respectively,="" as="" related="" to="" the="" ccl,="" group="" (fig.3a-c).="" however,="" the="" levels="" of="" tac="" (136.084%)="" and="" gsh(445.627%),as="" well="" as="" the="" activity="" of="" sod(137.817%)and="" gpx(166.154%)were="" significantly=""><0.05)upregulated (fig.3a,c,d).while="" the="" administration="" of="" vvpf="" alone="" for="" ten="" days(vvpf="" group)="" not="" only="" had="" no="" damaging="" effect="" on="" the="" lung="" but="" also="" enhanced="" the="" pulmonary="" redox="" state.="" this="" has="" clearly="" appeared="" from="" its="" ability="" to="" enormously="" decrease="" the="" mpo="" activity(53.951%)="" and="" increase="" the="" gsh="" level(5.854%)and="" gpx="" activity(54.323%),="" as="" compared="" to="" the="" control="" untreated="" rats="" (fig.="" 3c,="">
Impactul de ameliorare al VVPF asupra stresului oxidativ indus de CCl în creier. Figura 4 demonstrează capacitatea CCl de a induce dezechilibru în starea redox celulară a creierului de șobolan. Acest lucru a fost explicat prin creșterea masivă a conținutului celular de ROS (198,719 la sută), NO (140,580 la sută) și TBARS (461,917 la sută) și activitatea MPO (98,253 la sută), legată de grupul C (Fig. 4A-C). În schimb, TAC (66,333 la sută) și cantitățile de GSH (63,233 la sută), împreună cu activitatea SOD (37,463 la sută) și GPX (38,788 la sută), au fost reduse drastic în comparație cu șobolanii martor netrați (Fig. 4A, C, D). Datele au relevat și efectul toxic al uleiului de măsline atunci când a fost administrat timp de 3 săptămâni (grupul V). Această toxicitate a fost dictată de influența sa asupra creșterii nivelurilor de ROS (49,829 la sută) și TBARS (15,612 la sută) în timp ce scăderea nivelurilor TAC (44,444 la sută) și GSH (29,822 la sută), precum și a SOD (30,741 la sută) și GPX (13). activități în comparație cu grupul C (Fig.4A-D).
Administrarea VVPF timp de zece zile (CCl, plus grupul VVPF) a fost suficientă pentru a îmbunătăți starea de stres oxidativ cerebral cauzată de infecția cu CCl. După VVPFintre, nivelurile de ROS (37,175 la sută). NO(47,879 la sută).TBARS (69,551 la sută), precum și activitatea MPO (66,516 la sută), au fost dramatic diminuate atunci când sunt raportate la grupul CCl (Fig.4A-C). În plus, nivelurile de TAC și GSH, precum și activitățile SOD și GPX au fost semnificativ (p<0.05)elevated when="" compared="" to="" the="" rats="" in="" the="" ccl,="" group="" (fig.4a,="" c,="" d).the="" percentages="" of="" increase="" were="" 95.544%,105.136%,71.815%,and="" 41.951%,respectively.on="" the="" other="" hand,="" the="" intake="" of="" vvpf="" alone="" (vvpf="" group)="" had="" no="" toxic="" effects="" on="" the="" brain.="" in="" addition,="" vvpf="" was="" able="" to=""><0.05)increase the="" gsh="" level(22.809%)="" and="" the="" gpx="" activity(14.292%),="" relative="" to="" the="" control="" group="" as="" shown="" in="">
Impactul de ameliorare al VVPF asupra stresului oxidativ splenic indus de CCl.Figura 5 elucidează efectul injectării CCl4 asupra stării redox celulare a splinei. În comparație cu grupul de control, nivelurile de ROS (270,080 la sută), NO (182,979 la sută) și TBARS (395,516 la sută) și activitatea MPO (165,852 la sută) au fost semnificativ crescute în splina șobolanilor după 3 săptămâni de injectare. cu CCl (Fig.5A-C). În plus, TAC-ul splenic și nivelul antioxidantului neenzimatic (GSH), precum și activitățile antioxidantului enzimatic (SOD și GPX) au fost semnificativ (p<0.05) decreased="" as="" compared="" to="" the="" c="" group="" (fig.="" 5a,="" c,="" d).the="" percentages="" of="" this="" decrease="" were="" 64.035%,74.867%,35.894%,and="" 77.092%,respectively.="" however,="" no="" dramatic="" changes="" were="" observed="" in="" the="" spleens="" of="" rats="" after="" injection="" with="" olive="" oil="" (v="">
Datele noastre au constatat că tratamentul cu VVPF timp de zece zile după injectarea CCl (CCl, plus grupul VVPF) a arătat efecte mari asupra stresului oxidativ splenic. Acest lucru a fost dedus în mod clar din capacitatea VVPF de a normaliza majoritatea parametrilor de stare redox celulari. În acest grup, nivelurile de ROS, NO, TBARS și activitatea MPO au fost semnificativ (p<0.05)reduced relative="" to="" the="" ccl="" (fig.5a-c)by="" 58.276%,52.519%,68.816%,and="" 62.098%,="" respectively.="" in="" contrast,the="" levels="" of="" tac="" and="" gsh="" and="" the="" activities="" of="" sod="" and="" gpx="" were="" significantly=""><0.05)increased(fig.5a,c,d)by 185.366%,278.584%,48.936%,and="" 332.962%,respectively.concerning="" the="" vvpf="" group,="" the="" tac="" and="" gshlevels,="" along="" with="" the="" sod="" and="" gpx="" activities,="" were="" substantially="" enhanced="" in="" the="" spleens="" of="" rats="" that="" were="" gavage-fed="" vvpf="" for="" ten="" days="" (fig.5a,="" c,="" d)by="" 78.947%,14.803%.32.784%.and="" 14.872%,="" respectively.="" however,="" all="" other="" examined="" oxidative="" stress="" parameters(ros,="" no,="" tbars,="" and="" mpo)were="" non-significantly="" (p'0.05)affected="" in="" the="" spleen="" of="" these="" rats="" by="" 6.274%,6.808%,15.306%,="" and="" 21.574%,="">
Influența antiinflamatoare a VVPF în țesuturile renale și pulmonare.Graficele din Fig. 2E, 3E elucidează creșterea masivă a mediatorilor proinflamatori în țesuturile renale și pulmonare după injectarea CCl. Prin urmare, expresia de pliere a factorului nuclear-kappa (NF-K)B, a oxidului nitric sintetaza inductibilă (iNOS), a ciclooxigenazei (COX)-2 și a factorului de necroză tumorală (TNF)-a a fost reglată la nivelul rinichilor de către 505,605 la sută, 960,088 la sută, 2399,110 la sută, și 219,150 la sută, respectiv. În mod similar, expresia de ori a acestor mediatori a crescut dramatic în țesutul pulmonar cu 628,041 la sută, 755,107 la sută, 4066,674 la sută și, respectiv, 351,253 la sută. Mai mult decât atât, expresia pliului a interleukinei (IL)-1 și IL{-8 în țesutul pulmonar a fost substanțial crescută (Fig. 3E) cu 4207,250 la sută și, respectiv, 3307,650 la sută. În ceea ce privește, șobolanii care au fost hrăniți cu ulei de măsline pentru3 săptămâni (grupul V), expresia pliului NF-KB, iNOS, COX-2 și TNF-a în rinichi a fost modificată în mod nesemnificativ în comparație cu grupul de control (Fig.2E). De asemenea, expresia pliului IL-1 și IL-8 în țesutul pulmonar a fost crescută nesemnificativ în raport cu grupul C (Fig. 3E). În schimb, expresia pliuluide NF-KB (390,183 la sută), iNOS (329,548 la sută), COX-2 (286,581 la sută) și TNF- (148,410 la sută) în țesutul pulmonar a fost reglat în sus în urma administrării uleiului de măsline (Fig. 3E).
![Te improving activity of VVPF to CCl4-induced pulmonary oxidative stress and necroinfammation. (A) reactive oxygen species (ROS), total antioxidant capacity (TAC), and nitric oxide (NO) levels (B) thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level (C) myeloperoxidase (MPO) and superoxide dismutase (SOD) activities (D) glutathione peroxidase (GPX) activity and reduced glutathione (GSH) level. (E) gene expression fold change of the pro-infammatory mediators [nuclear factor-kappa (NF-κ)B, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2, tumor necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL)-1β, and IL-8] in the lung tissues. Results are expressed as mean±S.E of 7 animals. C, Control untreated rats; CCl4, rats with systemic toxicity induced by CCl4 injection (1 mL/kg b.w., IP, 6 times); V, olive oil (vehicle of CCl4)-injected rats (0.5 ml/kg b.w., IP, 6 times); CCl4+VVPF, rats with systemic toxicity afer their gavage-fed VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. VVPF, control rats gavage-fed only VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. Diferent letters indicate the signifcance at p<0.05; CCl4+VVPF group was compared with the CCl4 group, while V and VVPF groups were independently compared with the C group. BHT butylated hydroxytoluene](/Content/uploads/2022842169/202203241419113e7b7193a6ea4a74bcf5a1bb106c1d5b.png "Te improving activity of VVPF to CCl4-induced pulmonary oxidative stress and necroinfammation. (A) reactive oxygen species (ROS), total antioxidant capacity (TAC), and nitric oxide (NO) levels (B) thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level (C) myeloperoxidase (MPO) and superoxide dismutase (SOD) activities (D) glutathione peroxidase (GPX) activity and reduced glutathione (GSH) level. (E) gene expression fold change of the pro-infammatory mediators [nuclear factor-kappa (NF-κ)B, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2, tumor necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL)-1β, and IL-8] in the lung tissues. Results are expressed as mean±S.E of 7 animals. C, Control untreated rats; CCl4, rats with systemic toxicity induced by CCl4 injection (1 mL/kg b.w., IP, 6 times); V, olive oil (vehicle of CCl4)-injected rats (0.5 ml/kg b.w., IP, 6 times); CCl4+VVPF, rats with systemic toxicity afer their gavage-fed VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. VVPF, control rats gavage-fed only VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. Diferent letters indicate the signifcance at p<0.05; CCl4+VVPF group was compared with the CCl4 group, while V and VVPF groups were independently compared with the C group. BHT butylated hydroxytoluene")
![Te improving activity of VVPF to CCl4-induced brain oxidative stress and necroinfammation. (A) reactive oxygen species (ROS), total antioxidant capacity (TAC), and nitric oxide (NO) levels (B) thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level (C) myeloperoxidase (MPO) and superoxide dismutase (SOD) activities (D) glutathione peroxidase (GPX) activity and reduced glutathione (GSH) level. (E) gene expression fold change of the pro-infammatory mediators [nuclear factor-kappa (NF-κ)B, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2, and tumor necrosis factor (TNF)-α] in the brain tissues. Results are expressed as mean±S.E of 7 animals. C, Control untreated rats; CCl4, rats with systemic toxicity induced by CCl4 injection (1 mL/kg b.w., IP, 6 times); V, olive oil (vehicle of CCl4)-injected rats (0.5 ml/kg b.w., IP, 6 times); CCl4+VVPF, rats with systemic toxicity afer their gavage-fed VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. VVPF, control rats gavage-fed only VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. Diferent letters indicate the signifcance at p<0.05; CCl4+VVPF group was compared with the CCl4 group, while V and VVPF groups were independently compared with the C group. BHT butylated hydroxytoluene.](/Content/uploads/2022842169/20220324141950426e8d41388b49fbaaa87d6eaf118a73.png "Te improving activity of VVPF to CCl4-induced brain oxidative stress and necroinfammation. (A) reactive oxygen species (ROS), total antioxidant capacity (TAC), and nitric oxide (NO) levels (B) thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level (C) myeloperoxidase (MPO) and superoxide dismutase (SOD) activities (D) glutathione peroxidase (GPX) activity and reduced glutathione (GSH) level. (E) gene expression fold change of the pro-infammatory mediators [nuclear factor-kappa (NF-κ)B, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2, and tumor necrosis factor (TNF)-α] in the brain tissues. Results are expressed as mean±S.E of 7 animals. C, Control untreated rats; CCl4, rats with systemic toxicity induced by CCl4 injection (1 mL/kg b.w., IP, 6 times); V, olive oil (vehicle of CCl4)-injected rats (0.5 ml/kg b.w., IP, 6 times); CCl4+VVPF, rats with systemic toxicity afer their gavage-fed VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. VVPF, control rats gavage-fed only VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. Diferent letters indicate the signifcance at p<0.05; CCl4+VVPF group was compared with the CCl4 group, while V and VVPF groups were independently compared with the C group. BHT butylated hydroxytoluene.")
![Te improving activity of VVPF to CCl4-induced spleen oxidative stress and necroinfammation. (A) reactive oxygen species (ROS), total antioxidant capacity (TAC), and nitric oxide (NO) levels (B) thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level (C) myeloperoxidase (MPO) and superoxide dismutase (SOD) activities (D) glutathione peroxidase (GPX) activity and reduced glutathione (GSH) level. (E) gene expression fold change of the pro-infammatory mediators [nuclear factor-kappa (NF-κ)B, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2, and tumor necrosis factor (TNF)-α] in the spleen tissues. Results are expressed as mean±S.E of 7 animals. C, Control untreated rats; CCl4, rats with systemic toxicity induced by CCl4 injection (1 mL/kg b.w., IP, 6 times); V, olive oil (vehicle of CCl4)-injected rats (0.5 ml/kg b.w., IP, 6 times); CCl4+VVPF, rats with systemic toxicity afer their gavage-fed VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. VVPF, control rats gavage-fed only VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. Diferent letters indicate the signifcance at p<0.05; CCl4+VVPF group was compared with the CCl4 group, while V and VVPF groups were independently compared with the C group. BHT butylated hydroxytoluene](/Content/uploads/2022842169/202203241420338bff525bfd98453ba4ab30953eeed168.png "Te improving activity of VVPF to CCl4-induced spleen oxidative stress and necroinfammation. (A) reactive oxygen species (ROS), total antioxidant capacity (TAC), and nitric oxide (NO) levels (B) thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level (C) myeloperoxidase (MPO) and superoxide dismutase (SOD) activities (D) glutathione peroxidase (GPX) activity and reduced glutathione (GSH) level. (E) gene expression fold change of the pro-infammatory mediators [nuclear factor-kappa (NF-κ)B, inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-2, and tumor necrosis factor (TNF)-α] in the spleen tissues. Results are expressed as mean±S.E of 7 animals. C, Control untreated rats; CCl4, rats with systemic toxicity induced by CCl4 injection (1 mL/kg b.w., IP, 6 times); V, olive oil (vehicle of CCl4)-injected rats (0.5 ml/kg b.w., IP, 6 times); CCl4+VVPF, rats with systemic toxicity afer their gavage-fed VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. VVPF, control rats gavage-fed only VVPF (1.5 g/kg b.w.) for 10 days. Diferent letters indicate the signifcance at p<0.05; CCl4+VVPF group was compared with the CCl4 group, while V and VVPF groups were independently compared with the C group. BHT butylated hydroxytoluene")
Un mare efect de îmbunătățire a fost observat pentru VVPF (grupul CCl, plus VVPF) asupra mediatorilor proinflamatori testați induși atât în rinichi, cât și în plămâni după injectarea CCl. Expresia pliului NF-KB și TNF-inambele țesuturi împreună cu iNOS, COX-2, IL-1 și IL{-8 au fost normalizate (Figurile 2E, 3E). Procentul modificări în expresia pliului în rinichi în raport cu grupul CCl, au fost 78,928 la sută, 64,111 la sută, 66,921 la sută, 69,514 la sută, respectiv. În timp ce aceste procente în țesutul pulmonar au fost de 79,9158 la sută, 72,199 la sută, 88,049 la sută, 98,082 la sută, 88,860 la sută și, respectiv, 97,049 la sută. Mai mult decât atât, expresia pliului a iNOS și COX-2 în rinichi a fost semnificativ (p<0.05)reduced when="" compared="" to="" that="" of="" the="" ccl,="" rats(fig.2e)by="" 66.921%="" and="" 69.514%,="" respectively.="" the="" rats="" in="" the="" vvpf="" group="" showed="" a="" significant=""><0.05) ability="" to="" reduce="" the="" fold="" expression="" of="" the="" pro-inflammatory="" mediators="" in="" the="" kidney="" and="" lung="" tissues="" relative="" to="" the="" control="" group,="" especially="" for="" nf-kb,inos,="" and="" tnf-a.the="" percentages="" of="" reduction="" in="" the="" kidney="" were="" 45.702%,99.993%,and="" 18.134%,respectively,while="" these="" values="" in="" the="" lung="" were="" 90.817%,96.590%,and="" 96.438%,respectively.="" however,="" all="" other="" examined="" pro-inflammatory="" mediators="" either="" in="" the="" kidney(cox-2)="" or="" lung="" (cox-2,il-1β,il-8)were="" non-significantly(p="">0,05)s-a schimbat (6,109 la sută, 13,468 la sută, 4,691 la sută și, respectiv, 9,194 la sută).
Influența antiinflamatoare a WVPF în creier și țesuturile splinei.Ca și în țesuturile renale și pulmonare, injecția cu CCl a provocat reglarea în creștere a expresiei mediatorilor proinflamatori în creierul și țesuturile splinei de șobolan (Figurile 4E, 5E). Expresia de pliuri a NF-kB, iNOS, COX-2 și TNF-a a fost puternic reglată în creier cu 979,924 la sută, 522,286 la sută, 355,513 la sută și 71,140 la sută, respectiv, și în splină până în 975007. la sută, 1937,934 la sută, 549,203 la sută, și 22,784 la sută, respectiv. Cu toate acestea, șobolanii care au fost hrăniți cu ulei de măsline doar timp de 3 săptămâni au prezentat niveluri normale de expresie a pliului pentru toți parametrii proinflamatori din splină în comparație cu șobolanii de control (Fig. 5E). Aceleași rezultate au fost arătate în țesutul cerebral, cu excepția expresiei pliului COX-2 care a fost reglată semnificativ (p.<0.05), relative="" to="" the="" c="" group="" (fig.="" 4e)by="">
În ceea ce privește șobolanii cărora li s-a administrat VVPF timp de zece zile după CCl, injectarea (grupul CCl plus VVPF), o scădere dramatică a expresiei ori a NF-RB, iNOS, COX-2 și TNF-a în creier și splină , raportat la șobolanii intoxicați cu CCl. Procentele acestei reduceri în țesutul cerebral au fost de 29,574 la sută, 64,299 la sută, 85,069 la sută și 34,672 la sută, respectiv. În timp ce aceste valori la nivelul splinei au fost de 90,772 la sută, 94,888 la sută, 84,069 la sută, respectiv 84,006 la sută, respectiv 84,002 la sută. În mod similar, expresia ori a NF-KB, iNOS și TNF-a în creier (99,376 la sută 95,678 la sută și, respectiv, 89,976 la sută) și splină (69,646 la sută, 92,194 la sută și, respectiv, 79,936 la sută la șobolani) grupul VVPF au fost semnificativ scăzute în comparație cu grupul de control. În timp ce expresia pliului COX-2 în ambele țesuturi nu s-a schimbat, în raport cu controlul, după administrarea VVPF timp de zece zile.
Constatări histopatologice. Fotomicrografiile pieselor fixate cu formol manipulate ale țesuturilor examinate au arătat toxicitatea sistemică a CCl și influența îmbunătățită a VVPF asupra diferitelor organe studiate (Fig.6). Secțiunile de control ale rinichiului au demonstrat cortexul renal cu tubuli și glomeruli renali normali. Totuși, injectarea cu CCl, timp de 3 săptămâni, a prezentat toxicitate severă care s-a manifestat prin vena renală congestionată (CRV (cu infiltrarea leucocitelor și a tubilor renali au devenit degenerate și și-au pierdut celulele epiteliale de căptușeală și aspectul lor tipic. Aceste modificări au evidențiat caracteristicile necroinflamatorii). a acestui țesut.Administrarea de VVPF(CCl, plus VVPF) a păstrat morfologia tipică a rinichiului cu doar o ușoară degenerare a tubulilor(SDT).În mod similar, injecția cu ulei de măsline (grup V) a demonstrat un SDT, cu toate acestea, nu modificări morfologice au fost găsite în țesuturile renale ale grupului de șobolani VVPF.
În ceea ce privește țesutul pulmonar, șobolanii martor au prezentat o morfologie normală a sacilor alveolari (AS) și a pereților alveolari. S-au observat leziuni severe în arhitectura sa după injectarea CCl, care se caracterizează prin pierderea arhitecturii alveolare regulate, îngroșarea dezorganizată predominantă a septului alveolar și colapsul spațiului alveolar. Administrarea de VVPF (CCl, plus VVPF) timp de zece zile a restabilit morfologia plămânilor. Grosimea AS cu îngustarea spațiilor de aer alveolare a fost observată în bucățile de țesut pulmonar ale șobolanilor din grupul V, în timp ce morfologia țesutului pulmonar la șobolanii din grupul VVPF nu a prezentat caracteristici anormale.
Țesutul cerebral la șobolanii de control a demonstrat o structură normală cu neuroni și celule gliale normale.După injectarea cu CCl, această arhitectură tipică a fost modificată la degenerarea severă a neuronilor cu vacuole și nuclee picnotice în celulele neuronale. VVPF alimentat prin gavaj timp de zece zile a ameliorat CCl, toxicitatea și a păstrat morfologia creierului. Mai mult, șobolanii din grupele V și VVPF au prezentat morfologie normală a creierului.
Țesutul splinei al șobolanilor martor a prezentat morfologie normală, cu secțiuni de pulpă roșie și albă bine distincte. Cu toate acestea, splina șobolanilor intoxicați cu CCl a evidențiat leziuni masive în aceste regiuni cu infiltrare extremă a celulelor inflamatorii. Această daune a fost atenuată după administrarea de VVPF (CCl, plus VVPF). cu excepţia afluxului minor de celule inflamatorii. Pe de altă parte, șobolanii cărora li s-a injectat numai ulei de măsline (grupul V) au avut regiuni de pulpă albă moderat neorganizate, cu regiuni ambigue și recrutare ușoară de celule inflamatorii. În schimb, administrarea de VVPF timp de zece zile (grupul VVPF) nu a avut niciun efect advers asupra țesuturilor splinei animalelor, iar țesutul a prezentat compartimente pulpei albe și roșii bine definite, ca în grupul martor.
Impactul efectelor terapeutice CCl, daune și VVPF în cele patru organe examinate.Influențele CCl, efectul nociv și efectul terapeutic VVPF în cele patru organe testate au fost evaluate prin graficele hărții termice (Fig. 7). Graficele din Fig.7 grupează parametrii de stres oxidativ și de necroinflamație studiați la șobolanii tratați cu CCl (CCl, grup) și VVPF (CCl, plus grup VVPF) în diferitele organe studiate. Creșterea procentuală a acestor parametri în comparație cu grupul de control (Fig. 7A, B) sau, respectiv, CCl4 (Fig. 7C, D), a fost incriminată de culoarea hărții termice. Culoarea roșie se referea la o cantitate mai mare a parametrului, iar culoarea albastră se referă la una mai mică. Figura 7A, B demonstrează că CCl poate induce mai mult stres oxidativ și tulburări ale stării redox în splină (ROS mai mare și TAC mai scăzut), urmate de rinichi, creier și, în final, țesutul pulmonar. Mai mult, așa cum se arată în Fig, 7B, splina și țesuturile creierului au avut cea mai mare expresie de pliere a NF-KB, în timp ce ceilalți mediatori din organele țintă au avut grade diferite de expresii de pliere.
Pe de altă parte, Fig.7C, D arată cea mai mare capacitate a VVPF de a îmbunătăți nivelul de TAC și GSH în plus față de activitatea SOD și GPX în plămân, urmată de splină, rinichi și creier (Fig.7C). În plus, această fracțiune de struguri a reușit să epuizeze nivelurile mediatorilor pro-inflamatori, precum și ROS, NO, TBARS și MPO în plămân, urmat de splină, rinichi și apoi creier (Fig. 7D). În consecință, hărțile termice au arătat că plămânul a fost țesutul cel mai puțin afectat cu CCl, deteriorare și cel mai receptiv țesut cu valorile terapeutice ale VVPF.
