Activitate anti-nociceptivă și antiinflamatoare cauzată de Cistanche Deserticola la rozătoare

A lua legatura:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li-Wei Lin și colab

Abstract

În studiul de față, rizomii deCistanchedeserticola(Orobanchaceae, prescurtat ca CD) au fost extrase cu 50% etanol și izolate ordonat cu acetat de etil, n-butanol și apă. Analgezicul șianti-inflamatorefectele extractului de CD și trei straturi au fost evaluate pe mai multe modele animale. CD(Cistanchedeserticola)extractele au inhibat în mod eficient răspunsul de zbârcire indus de acid acetic 1% și răspunsurile bifazice de lins cauzate de 1% formol și, de asemenea, au redus edemul indus de 1% caragenan, dar nu și zymosan. În plus, straturile butanoic și apos de CD(Cistanchedeserticola)extractul nu numai că a redus durerea indusă de acidul acetic și formol, dar a scăzut și edemul indus de caragenan. Efectele stratului butanoic al CD(Cistanchedeserticola)extractele sunt mai bune decât cele ale stratului apos. În plus, efectul stratului butanoic de CD(Cistanchedeserticola)extractul nu a fost abolit de naloxonă. Aceste rezultate au relevat că are analgezice șianti-inflamatorefecte, iar straturile butanoic și apos sunt în principal constituenți activi. În plus, analgezicul șianti-inflamatorefectele stratului butanoic de CD(Cistanchedeserticola)extractul nu au avut legătură cu receptorii opioizi și cu sistemul imunitar.

Cuvinte cheie:Cistanche deserticola; Activitate analgezica; Activitate antiinflamatoare

1. Introducere

CistanchedeserticolaMa. (Orobanchaceae, prescurtat ca CD), o plantă nativă din China este utilizată pe scară largă în medicina tradițională pentru diferite tratamente terapeutice, inclusiv indicații sedative, analgezice și de îmbunătățire a sistemului imunitar (Lee, 1986). Studiile farmacologice moderne au evidențiat CD(Cistanchedeserticola)extractul a avut o îmbunătățire a imunității (Chin și Su, 1993), efect de captare a radicalilor liberi (Hsu și colab., 1995) și creșterea activității SOD (Chang și colab., 1995). Într-un studiu recent, reacția radicalilor liberi a jucat un rol semnificativ în procesele inflamatorii (Arrigoni-Martelli, 1985). Prin urmare, studiul de față a fost încercat să investigheze efectele analgezice presupuse ale CD(Cistanchedeserticola)extract la șoareci cu testul de contorsionare indus de acid acetic (Taber și colab., 1969) și test de linge indus de formalină (Shibata și colab., 1989). În al doilea rând, am studiat și posibilulanti-inflamatoractivitati de CD(Cistanchedeserticola)extract asupra procesului inflamator clasic cu testul edemului indus de caragenan (Winter et al., 1962) și al procesului inflamator alternativ cu testul edemului indus de zimosan (Tarayre și colab., 1989). În cele din urmă, am cercetat straturi active de extract de CD separate cu diferiți solvenți. '

2. Materiale și metode

2.1. Material vegetal și extracte

Rizomii CD(Cistanchedeserticola)au fost achiziționate de pe piața din Taiwan și confirmate de profesorul MT Hsieh. Un eșantion de voucher (nr. CMC-ICPS-000626) a fost păstrat în herbarul Institutului de Științe Farmaceutice Chineze, Colegiul Medical din China pentru referință ulterioară. Extragerea și izolarea CD-ului(Cistanchedeserticola)au fost urmate ca și rapoartele anterioare (Lu, 1998). CD(Cistanchedeserticola)extract (randament în 34,2 la sută) și trei straturi*/strat de acetat de etil, strat butanolic și strat apos (randamentele lor în 3,4, 10,2, 30,6 la sută) (abreviate ca CDE, CDB și, respectiv, CDW)*/au fost utilizate pentru prepararea extractelor.

2.2. Prepararea extractelor și a medicamentelor

CD(Cistanchedeserticola)extract ({{0}},1, 0,3, 1 g/kg) și trei straturi de CD(Cistanchedeserticola)extractele ({{0}}.03, 0.1, 0.3 g/kg) au fost dizolvate în carboximetilceluloză 0,5% și administrate oral cu 60 de minute înainte la injectarea unui inductor. Acidul acetilsalicilic (ASA) (100, 300 mg/kg) și indometacină (IN DOL) (10 mg/kg) au fost preparate sub formă de suspensie cu 0,5% carboximetilceluloză și administrate intraperitoneal înainte de injectarea unui inductor. Naloxona (1 mg/kg) a fost dizolvată cu soluție salină normală.

2.3. animale

S-au folosit șobolani masculi Sprague-Dawley (200-250 g) pentru studiulanti-inflamatorActivități. S-au folosit șoareci masculi ICR (20-25 g) pentru testarea efectelor analgezice. Toate animalele au fost utilizate în experimente conform principiilor directoare cu îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator. Acestea au fost găzduite cel puțin o săptămână înainte de a începe experimentul într-un mediu reglat cu o temperatură de 239/1 8C și 60% umiditate, cu acces gratuit la alimente standard în pelete (furnizate și proiectate de Fwusow Industry Co. LTD., Taiwan). ) și apă de la robinet, în care a fost menținut un ciclu de lumină/întuneric de 12-12 h (faza de lumină: 08:00-20:00 h). Apoi, s-au administrat medicamente și analgezicele șianti-inflamatortestele au fost operate prin metoda dublu-orb. După măsurarea comportamentului, toate animalele au fost ucise de dioxid de carbon.

2.4. Studiu antinociceptiv

2.4.1. Răspunsul la contorsionarea abdominală indusă de acid acetic la șoareci

Șoarecii au fost împărțiți aleatoriu în mai multe grupuri. Fiecărui şoarece i s-a administrat intraperitoneal 1% soluţie de acid acetic (10 ml/kg greutate corporală). Șoarecii au fost plasați în cutiile individuale de observare. Simptomele contorsionării abdominale induse de acid acetic au fost similare cu cele descrise de Taber și colab. (1969). Animalele de control au primit soluții vehicul în aceleași experimente. La cinci minute după injectarea acidului acetic, numărul de răspunsuri de contorsionare per șoarece a fost numărat timp de 10 minute în timpul contorsionării abdominale induse de acid acetic. În cele din urmă, numărul de răspunsuri contorsionate ne-a permis să exprimăm procentul de protecție utilizând următorul raport: (media de control tratată) /100/ medie de control.

2.4.2. Răspunsul de lins indus de formalină la șoareci

Această metodă a reprezentat o modificare a celei descrise de Shibata și colab. (1989). Fiecare șoarece a fost plasat în camera de observare pe o podea cu placă acrilică transparentă timp de 5 minute înainte de injectarea cu formol. Sub podea, o oglindă mare era înclinată la un unghi de 458 pentru a permite observarea clară a labelor animalului. Animalelor li s-au administrat 25 ml de formol 1% în subplantul drept. Apoi, fiecare animal a fost returnat în cameră și au fost observate cele două perioade distincte ale răspunsului de lins intensiv. Prima perioadă (faza timpurie) a fost înregistrată 0/5 min după injectarea cu formol, iar a doua perioadă (faza târzie) a fost înregistrată la 10/35 min după injectare. Timpul (timpurile) petrecut în răspunsurile de lins ale labei injectate a fost măsurat ca un indicator al răspunsului la durere.

2.5. Studiu antiinflamator la șobolani

Theanti-inflamatoractivitatea a fost determinată la șobolani prin măsurarea creșterii medii a volumului labei posterioare după injectarea sub plantară a agenților inflamatori cum ar fi caragenanul (Winter și colab., 1962) sau zimosanul (Tarayre și colab., 1989). Animalele au fost injectate cu 0,1 ml 1% caragenan sau 2% zimosan în piciorul posterior drept sub aponevroza plantară. Inflamația a fost cuantificată în mililitri folosind un pletismometru (7150 Ugo Basile), care a înregistrat mici diferențe de nivel al apei cauzate de deplasarea volumului. Înainte de orice tratament, a fost determinat volumul mediu al labelor din spate ale fiecărui animal (Vo) cu trei măsurători care nu diferă de mai mult de 4 procente (precizia aparatului). Apoi, la 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 min după injectarea agenților inflamatori, s-a determinat volumul mediu al labelor din spate ale fiecărui animal (Vt) cu trei măsurători care nu diferă de la mai mult de 4 la sută.

Procentele de edem la fiecare înregistrare au fost calculate prin compararea volumului mediu al labelor din spate ale fiecărui animal (Vt) după injectarea agenților inflamatori cu volumul mediu al labelor din spate ale fiecărui animal (Vo) înainte de orice tratament (Palanichamy). și Nagarajan, 1990). S-au obținut procente de inhibiție pentru fiecare grup utilizând următorul raport: [(Vt-Vo)control /(Vt-Vo)tratat]-100/(Vt-Vo)control.

2.6. analize statistice

Toate datele obţinute în timpul analgezicului şianti-inflamatoractivitatea a fost exprimată în termeni de erori medii și standard și analizată în continuare prin utilizarea analizei ANOVA unidirecționale a varianței, urmată de testul lui Scheff. Când probabilitatea (P) a fost mai mică de 0,05, diferența a fost considerată semnificativă.

3. Rezultate si discutii

Animalele de pretratament cu doze orale de CD(Cistanchedeserticola)extractul (0.1-1 g/kg) a dus la o inhibare semnificativă și dependentă de doză a răspunsului de contorsionare indus de acid acetic (Tabelul 1) și a fazelor bifazice ale răspunsurilor de lins induse de formol la șoareci ( Fig. 1(A)). Inhibarea cauzată de CD(Cistanchedeserticola)extractul la 1 g/kg la răspunsul la contorsionare indus de acid acetic și răspunsurile la linge induse de formalină au fost de aproximativ 54 și, respectiv, 45%. Acidul acetilsalicilic martor pozitiv la 0.1-0,3 g/kg a scăzut, de asemenea, răspunsul la contorsionare indus de acid acetic cu inhibarea de 45-64 procente (Tabelul 1). Cu toate acestea, celălalt martor pozitiv indometacin la 10 mg/kg a inhibat doar faza târzie, dar nu incipientă, a răspunsului de lins indus de formalină la șoareci, cu o inhibare maximă de 32% (Fig. 1 (A)). În plus, doar straturi butanolice și apoase între trei straturi de CD(Cistanchedeserticola)extractul la 0.1-0.3 g/kg a produs, de asemenea, antinocicepție semnificativă, iar aceste efecte analgezice ale stratului butanolic au fost mai bune decât cele ale stratului apos (Tabelul 1 și Fig. 1(B)) . În al doilea rând, am evaluatanti-inflamatoractivitatea CD-ului(Cistanchedeserticola)extract și trei straturi împotriva formării edemului clasic (indus de caragenan) și alternativ (indus de zimosan). Am găsit acel CD(Cistanchedeserticola)extractul la 0.1-1g/kg a inhibat, de asemenea, în mod semnificativ formarea de edem indusă de caragenan într-o manieră legată de doză, iar indometacina la 10 mg/kg a inhibat eficient formarea de edem indusă de caragenan la șobolani (Fig. 2). Cu toate acestea, formarea edemului indusă de zimosan nu a fost inhibată de CD(Cistanchedeserticola)extrage la 0.1-1 g/kg la șobolani (datele nu sunt afișate). În plus, doar stratul butanolic dintre trei straturi de CD(Cistanchedeserticola)extractul la 0.1-0.3 g/kg a inhibat semnificativ, de asemenea, formarea edemului indus de caragenan la șobolani (Fig. 2). Conform rapoartelor fitochimice, actozidul și acidul succinic, aparținând ingredientelor stratului butanolic al CD(Cistanchedeserticola)extract (Hsu și colab., 1994, 1995), posedaanti-inflamatoractivitate asupra formării edemului indus de substanțe chimice (Murai și colab., 1995; Kabachnyi și colab., 1987). Din datele noastre actuale și din alte rapoarte anterioare, am sugerat rizomi de CD(Cistanchedeserticola)poseda analgezic sianti-inflamatoractivitate la rozătoare, iar constituenții activi ies în principal în stratul butanolic al CD(Cistanchedeserticola)extrage. Dacă acteozidul și acidul succinic sunt ingrediente active ale CD(Cistanchedeserticola), vom izola și evalua analgezicele șianti-inflamatoractivitate în viitor.

Fig. 1. Efectul CD(Cistanchedeserticola)extract ({{0}},1, 0,3 și 1 g/kg), acetat de etil, butanolic și straturi apoase de CD(Cistanchedeserticola)extract (CDE, CDB și CDW) ({{0}}.03, 0,1 și 0,3 g/kg) și indometacin (INDOL, 10 mg/kg) în faza timpurie (0/5 min) și târzie (10/35 min) a răspunsului de linge indus de formalină la șoareci. Fiecare valoare este reprezentată ca medie9/SE (N/7). *PB/0,05, *** PB/0,001, în comparație cu grupul VEH.

Fig. 2. Efectul CD(Cistanchedeserticola)extract ({{0}},1, 0,3 și 1 g/kg), acetat de etil, butanolic și straturi apoase de CD(Cistanchedeserticola)extract (CDE, CDB și CDW) ({{0}}.03, {{{0}},1 și 0,3 g/kg) și indometacin (INDOL, 10 mg/kg) asupra edemului labei indus de caragenan la șobolani. Fiecare valoare este reprezentată ca medie9/SE (N/6). *PB/0,05, ** PB/0,01, în comparație cu grupul VEH

Mai mult, Shibata et al. (1989) sugerează că faza timpurie a răspunsului de linge indus de formalină a fost legată de bradikinină și substanța P, iar faza târzie a fost legată de bradikinină, autocrină și prostaglandine. Datele noastre actuale au arătat că naloxona nu a desființatanti-inflamatoractivitatea stratului de butanol al CD(Cistanchedeserticola)extract în ambele faze ale răspunsului de lins indus de formalină (Fig. 3) și efectul analgezic asupra răspunsului de contorsionare indus de acid acetic (Tabelul 1). Prin urmare, analgezicul șianti-inflamatorefectele stratului de butanol al extractului de CD ar putea să nu fie legate de receptorii opioizi. Mai mult, CD(Cistanchedeserticola)extractul și stratul său butanolic au inhibat doar formarea edemului indus de caragenan la șobolani. Edemul indus de caragenan prin infiltrarea leucocitelor polimorfonucleare și sistemul de kinină activat, în special bradikinina, este diferit de edemul indus de zimosan prin afluxul de monocite și sistemul imunitar activat (Damas și colab., 1990; Dawson și colab., 1991). Acidul succinic, un ingredient al stratului butanolic al extractului de CD, a inhibat funcția leucocitelor polimorfonucleare (Rotstein și colab., 1985). Aceste rezultate au relevat că analgezicul șianti-inflamatorefectele stratului de butanol al CD(Cistanchedeserticola)extractul ar putea avea legătură cu sistemul kininului, dar nu cu receptorii opioizi și cu sistemul imunitar, deși CD(Cistanchedeserticola)poseda efectul de imunointensificare (Chin și Su, 1993). Pentru detaliat mecanismul analgezic șianti-inflamatoractivitatea, vom investiga în continuare cu straturi active sau ingrediente ale extractului de CD.

Cistanchetubulosaare multe efecte, click aici pentru a afla mai multe

Referințe

Arrigoni-Martelli, E., 1985. Farmacology of free radical scavenging in inflammation. International Journal of Tissue Reactions 7, 513/ 519.
Chang, Y., Wu, H., Wang, SN, Cheng, HC, 1995. Studiu asupra efectelor puternice aleCistanchedeserticolaMa., Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck și Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. China Journal of Chinese Materials and Medicine 26, 143/146.
Chin, HL, Su, YC, 1993. Studiu asupra efectelor farmacologice aleCistanchedeserticolaMa. China Journal of Chinese Materials and Medicine 19, 143/146.
Damas, J., Bourdon, V., Remacle-Volon, G., Adam, A., 1990. Kinine și exsudate peritoneale induse de caragenină și zimosan la șobolani. British Journal of Pharmacology 101, 418/422.

Dawson, J., Sedgwick, AD, Edwards, JC, Lees, P., 1991. Un studiu comparativ al răspunsurilor celulare, exudative și histologice la caragenan, dextran și zimosan la șoarece. International Journal of Tissue Reactions 13, 171/185.

Hsu, WH, Chu, SH, Chao, CH, Hsu, Y., Yuan, KW, Yen, CH, Chi, CY, Chan, C., 1994. Studiu asupra constituenților chimici aiCistanchedeserticolaMa. China Journal of Chinese Materials and Medicine 25, 509/513.
Hsu, WH, Chu, SH, Sheng, LC, Yuan, KW, Mao, CN, 1995. Studiu privind constituenții chimici și efectele farmacologice aleCistanchedeserticolaMa. și Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. Medicamente din plante tradiționale chinezești 26, 143/146.
Kabachnyi, VI, Chernykh, VP, Drogovoz, SM, Golubenko, Iu.A., Bogutskaia, EE, 1987. Căutațianti-inflamatorpreparate dintre derivaţii heterolamidelor acidului succinic. Farmakologiia i Toksikologiia 50, 94/97.
Lee, SL, 1986. Pen-Tsao-Kun-Mu. Institutul Național de Cercetare al Publicațiilor de Medicină Chineză, Taipei, p. 20.
Lu, MC, 1998. Studii asupra efectului sedativ alCistanchedeserticola. Jurnalul de etnofarmacologie 59, 161/165.
Murai, M., Tamayama, Y., Nishibe, S., 1995. Feniletanoizi în planta Plantago lanceolata și efect inhibitor asupra edemului urechii de șoarece indus de acidul arahidonic. Planta Medica 61, 479/480.
Palanichamy, S., Nagarajan, S., 1990. Activitatea analgezică a extractului de leat de Cassia alata și a kemp Eerol 3-0-Sophorosid. Jurnalul de Etnofarmacologie 29, 73/78.
Rotstein, OD, Pruett, TL, Fiegel, VD, Nelson, RD, Simmons, RL, 1985. Acidul succinic, un produs secundar metabolic al speciilor Bacteroides, inhibă funcția leucocitelor polimorfonucleare. Infecție și imunitate 48, 402/408.
Shibata, M., Ohkubo, T., Takahashi, H., Inoki, R., 1989. Testul cu formalină modificat: răspunsul caracteristic al durerii bifazice. Durerea 38, 347/ 352.
Taber, RI, Greenhouse, DD, Rendell, JK, Irwin, S., 1969. Interacțiunile agoniste și antagoniste ale opioidelor asupra întinderii abdominale induse de acid acetic la șoareci. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 169, 29/38.
Tarayre, JP, Delhon, A., Aliaga, M., Barbara, M., Bruniquel, F., Caillol, V., Puech, L., Consul, N., Tisne-Versailles, J., 1989.
Studii farmacologice privind inflamația zimosanului la șobolani și șoareci. 1: Edem labei indus de Zymosan la șobolani și șoareci. Cercetări farmacologice 21, 375/384.
Winter, CA, Risley, EA, Nuss, GW, 1962. Edemul indus de caragenan în laba posterioară a șobolanului ca analiză pentruanti-inflamatordroguri. Proceedings Society of Experimental Biology and Medicine 111, 544/547.