Efectul ipotermii terapeutice împotriva leziunilor renale la un model de șobolan de stop cardiac asfixial: Α Focus pe rata de supraviețuire, fiziopatologie și enzime antioxidante
Mar 25, 2022
AȘA EUN KIM1*, HA-YOUNG SHIN2*, EUI‑YONG LEE2, YEO‑JIN YOO2, RYUN-HEE KIM2, ET AL
Abstract.
Deși disfuncția multi-organă este asociată cu rata de supraviețuire după stopul cardiac (ca), majoritatea studiilor până în prezent s-au concentrat pe inimi și creier și puține studii au luat în considerare insuficiența renală. Prin urmare, obiectivul prezentului studiu a fost de a examina efectele hipotermiei terapeutice asupra ratei de supraviețuire, fiziopatologiei și enzimelor antioxidante din rinichii de șobolan după CA asfixială. Șobolanii au fost sacrificați o zi după CA. Rata de supraviețuire, care a fost estimată folosind analiza Kaplan-Meier, a fost de 42,9 la sută la o zi după cca. Totuși, hipotermia, care a fost indusă în urma ca a crescut semnificativ rata de supraviețuire (71,4 la sută). la șobolanii normotermie cu ca, nivelul seric de azot ureic din sânge a crescut semnificativ la o zi după ca. în plus, nivelul creatininei serice a crescut semnificativ la o zi după CA. Cu toate acestea, la șobolanii CA expuși la hipotermie, nivelurile de azot ureic și creatinine au scăzut semnificativ după cca. Colorația histochimică a evidențiat o creștere temporală semnificativă a leziunii renale după ce grupul cu normotermie a fost supus la cca. Cu toate acestea, leziunea renală a fost semnificativ scăzută în grupul cu hipotermie. Analiza imunohistochimică a rinichiului a evidențiat o scădere semnificativă a enzimelor antioxidante (superoxid dismutază de cupru-zinc, superoxid dismutază de mangan, peroxidază de glutation și catalază) cu timpul în grupul normotermie. Cu toate acestea, în grupul cu hipotermie, aceste enzime au fost semnificativ crescute după cca. în mod colectiv, rezultatele au arătat că disfuncția renală după asfixie poate fi puternic asociată cu rata de supraviețuire timpurie, iar hipotermia terapeutică a redus leziunea renală prin mecanisme antioxidante eficiente.
Cuvinte cheie: stop cardiac asfixial, sindrom post stop cardiac, tratament cu hipotermie, rinichi, histopatologie, enzime antioxidante
A lua legatura:joanna.jia@wecistanche.com
Introducere
Stopul cardiac (ca), cunoscut și sub denumirea de stop cardiorespirator sau stop circulator, implică o oprire bruscă a circulației normale a sângelui din cauza incapacității inimii de a pompa sângele în mod adecvat (1). ca induce ischemia întregului corp, care provoacă leziuni la mai multe organe, inclusiv creierul, inima, rinichii și ficatul. Majoritatea studiilor de cercetare care au implicat ca în ultima jumătate de secol s-au concentrat pe îmbunătățirea ratei de revenire cu succes a circulației spontane (roSc), cu progrese semnificative (2-4). Deși resuscitarea imediată poate îmbunătăți roSc, rata de supraviețuire cu un prognostic prost este o îngrijorare (5-7). Sindromul de stop cardiac (PcaS) se referă la consecințele fiziopatologice ale roSc după o resuscitare cardiopulmonară cu succes (cPr) după ca (8). PcaS este principala cauză a scăderii supraviețuirii după roSc (9). Rata de supraviețuire a PcaS în perioada timpurie la pacienți este de numai 30 la sută (5). Nu există nicio îndoială că inima și creierul sunt organe importante în PcaS. Între timp, studiile au investigat rar insuficiența renală după ca (1,10,11). Insuficiența renală tranzitorie este frecventă la pacienții care au supraviețuit ca (12). Incidența și impactul disfuncției renale după ca nu sunt bine descrise (13). în plus, studiul nostru anterior a sugerat că rata scăzută de supraviețuire timpurie după roSc în studii experimentale (14) poate fi strâns legată de insuficiența renală, cum ar fi leziunea renală acută. una dintre cele mai frecvente cauze ale leziunii renale acute este ca (15). leziunea acută a rinichilor este un PcaS obișnuit care se dezvoltă la ~ 30 la sută dintre pacienții spitalizați cu ca (16).
speciile reactive de oxigen (roS) sunt compuse dintr-o serie de intermediari de oxigen, inclusiv anionul superoxid de radical liber (o2•‑), peroxidul de hidrogen neradical (H2o2), radicalul liber hidroxil foarte reactiv (OH•), peroxinitrit (onoo) , și oxigen singlet (1o2) (17). S-a demonstrat că roS joacă un rol esențial în mai multe afecțiuni renale experimentale, cum ar fi insuficiența renală ischemică acută, respingerea grefei renale, glomerulonefrita acută și bolile renale toxice (18). Există dovezi semnificative care susțin sinteza roS imediat după accidentul vascular cerebral ischemic acut (19) și infarctul miocardic acut (20). roS sunt cunoscute a fi importante în bolile ischemice, cum ar fi accidentul vascular cerebral și infarctul miocardic. De exemplu, Hackenhaar et al (21) au raportat că roS sunt generate în sângele pacienților cu PcaS; cu toate acestea, studiile au investigat rareori formarea roS în rinichi după ca în perioada timpurie post-PcaS (22,23).
Din acest motiv, s-a emis ipoteza că roS sunt importante în leziunile renale după ca și contribuie la rata scăzută de supraviețuire în stadiile incipiente ale PcaS. Pentru a examina această ipoteză, a fost indusă ca asfixială la șobolani și a fost observată rata de supraviețuire în primele etape ale PcaS. în plus, a fost efectuată hipotermie imediată și întârziată pentru a crește rata scăzută de supraviețuire asociată cu PcaS după roSc. În plus, disfuncția renală a fost analizată histopatologic și au fost evaluate modificările induse de roS, cum ar fi superoxid dismutaza cupru-zinc (Sod-1), superoxid dismutază de mangan (Sod-2), catalaza (caT) și glutation peroxidaza (GPX). prin analiză imuno-histochimică după roSc.
cistanche pharma special
Materiale și metode
Animale și grupuri experimentale.Un total de 62 de șobolani masculi Sprague-Dawley (Sd) (greutate, 270-300 g; vârstă, 10 săptămâni) au fost obținuți de la centrul experimental pentru animale al universității naționale Jeonbuk (iksan, republica Coreea). Acestea au fost găzduite la o temperatură de 23±2˚C și o umiditate de 60±10 la sută într-un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore. Li s-a oferit acces gratuit la hrană și apă. toate protocoalele experimentale au fost aprobate pe baza procedurilor etice și a îngrijirii științifice de către comitetul instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor al universității naționale Jeonbuk (aviz nr. JBnu 2020-084).
Animalele experimentale au fost stratificate în trei categorii [un grup de operație simulată, ca sub normotermie și tratament cu ca și hipotermie (HT)] după cum urmează: i) grupul I, un grup simulat (n=5) a fost menținut în condiții de normotermie fără ca; ii) grupul ii, un grup de normotermie fără hipotermie (33°C) tratament după CA (n=17); și iii) grupul iii (n=40), un grup care a suferit ca sub normotermie și a fost tratat cu HT după ca timp de 2 ore (n=17), 4 ore (n=13) și 6 ore (n=10) după roSc, în care toți șobolanii au fost reîncălziți la normotermie.
CA inducție și CPR.Ca și cPr au fost efectuate așa cum s-a descris anterior (24, 25) cu modificări minore (Fig. 1). Pe scurt, șobolanii au fost anesteziați cu 2-3% izofluran și ventilați mecanic pentru a menține respirația folosind un ventilator pentru rozătoare (aparatul Harvard). Pentru a monitoriza saturația periferică de oxigen (Spo2), la piciorul stâng a fost atașată o sondă de saturație cu oxigen pulsoximetrică (Nonin Medical, inc.). Temperatura corpului a fost menținută la 37±0,5˚C în timpul și după intervenția chirurgicală. Pentru a monitoriza modificările electrocardiogramei (ecG), au fost plasate sonde electrocardiografice (cytiva) pe membre pentru a furniza date cu trei derivații, care au fost monitorizate continuu. Artera femurală stângă și vena femurală dreaptă au fost canulate separat pentru a monitoriza presiunea arterială medie (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, ltd.) și injecția intravenoasă.
După o perioadă de stabilizare de 5 minute, bromură de vecuronium (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.) a fost administrată intravenos, anestezia a fost oprită și ventilația mecanică a fost retrasă. o MaP sub 25 mm-Hg și activitatea electrică fără puls ulterioară a fost utilizată pentru a defini CA (25,26). CA a fost confirmată la 3-4 minute după injectarea cu bromură de vecuroniu. la 5 minute după ca, cPr a fost inițiată prin administrarea intravenoasă a unei injecții în bolus de epinefrină (0,005 mg/kg; Sigma-Aldrich;
Merck KGaa) și bicarbonat de sodiu (1 meq/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa) urmate de ventilație mecanică cu oxigen 100% și compresii toracice manuale la o rată de 300/min până când MaP a atins 60 mm-Hg și s-a observat activitate electrocardiografică . odată ce animalul a fost stabil hemodinamic și respira spontan (de obicei la 1 oră după roSc), cateterele au fost îndepărtate și animalul a fost extubat.
Managementul temperaturii între grupuri.Temperatura corporală a grupului de normotermie a fost menținută la 37±0,5˚C în timpul și după intervenția chirurgicală CA și menținută până când șobolanii au fost sacrificați conform programului de timp. în grupul cu hipotermie, ca a fost stabilit la temperatură normală; apoi, temperatura corpului a fost menținută cu pachete de gheață și ventilatoare la 33±0.5˚C imediat după RCP timp de 2, 4 și 6 ore și au fost încălzite rapid cu placa de încălzire până la temperatura dorită ( 37±0.5˚C) a fost atins. Șobolanii au fost apoi înapoiați în cuștile lor până când au fost sacrificați la o zi după CPR/roSc. Temperatura corpului a fost monitorizată cu ajutorul unui senzor de temperatură rectal (27).
Analiza biochimică a serului.Injecția intraperitoneală de 30 mg/kg pentobarbital sodiu (JW Pharm co., Ltd.) a fost utilizată pentru a anestezia toate animalele. S-a recoltat sânge din venele abdominale ale fiecărui animal din fiecare grup. Serul a fost colectat prin centrifugare a sângelui (2.774 xg, 15 min, 4°C) și a fost păstrat la -80°C până la analiză. Nivelurile de azot ureic din sânge (Bun) și creatinina din ser au fost determinate conform metodelor prezentate de Federația Internațională de Chimie Clinică (28) folosind un analizor chimic automat Hitachi 2070 (Hitachi, ltd.). toate testele au fost efectuate în trei exemplare folosind ser proaspăt.
Prelucrarea țesuturilor.Șobolanii au fost anesteziați profund printr-o injecție intraperitoneală de 200 mg/kg pentobarbital sodiu (JW Pharm co., Ltd.) și au fost perfuzați transcardial cu 0,1 M de soluție salină tamponată cu fosfat (PBS; pH 7,4), urmată de 4% paraformaldehidă în 0,1 M tampon fosfat (PB; pH 7,4). Rinichii au fost izolați de la fiecare animal și fixați cu 4% paraformaldehidă în 0,1 M PB (pH 7,4) la temperatura camerei în timpul unei săptămâni, apoi tăiați sagital, încorporați în parafină și secționați (6 um).
Hematoxilină și eozină (H&E), Acid-Schiff periodic (PAS) și colorarea tricrom Masson.Colorația H&e a fost efectuată pentru a examina modificările patologice ale rinichilor conform unei proceduri descrise anterior (29). Colorația PaS a fost efectuată pentru a examina modificările glomerulilor conform procedurilor descrise anterior (30-32). Metoda de colorare a tricromului lui Masson a fost utilizată pentru definirea leziunii tubulare, luând în considerare dilatația tubulară, atrofia tubulară, formarea gipsului tubular, vacuolizarea, degenerarea, fibroza interstițială și desprinderea celulelor epiteliale tubulare sau îngroșarea membranei bazale tubulare conform procedurilor descrise anterior (33). ,34).
un total de 2 patologi cu experiență au evaluat modificările histopatologice în mod dublu-orb. imagini de 10 secțiuni colorate/șobolan au fost capturate la măriri x400 folosind un microscop cu lumină Leica dM 2500 (Leica Microsystems GmbH). Un total de 10 câmpuri au fost analizate în fiecare secțiune. Analiza histopatologică a leziunilor renale a fost efectuată conform procedurilor descrise anterior (35,36). Pe scurt, leziunile au fost clasificate ca leziuni microscopice fără semnificație (nSMl), leziuni minime, ușoare, moderate sau marcate, respectiv, gradate folosind următoarea scală cu testul orb: normal, 0 puncte;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
Leziunile glomerulare au fost definite prin pierderea elementelor celulare, prăbușirea lumenului capilar, material hialin amorf cu sau fără aderențe la capsula lui Bowman (30-32) și marcate după următoarele scale numerice: fără deteriorare, { {7}} puncte; foarte uşoară, 1 punct; uşoară, 2 puncte; moderat, 3 puncte; si sever, 4 puncte. Leziunea tubulară a fost punctată prin următorul sistem de notare: fără leziune tubulară, 0 puncte; 1-9 la sută din tubuli răniți, 1 punct; 10-25 la sută din tubuli răniți, 2 puncte; 26-50 la sută din tubuli lezați, 3 puncte; 51-75 la sută din tubuli răniți, 4 puncte; și cel puțin 76 la sută din tubuli răniți, 5 puncte (33,34).
Malondialdehida (MDA).Concentrația de Mda în cortexul renal a fost evaluată conform unui protocol descris anterior (23,37,38). pe scurt, omogenizarea și centrifugarea țesuturilor renale au fost efectuate la 8.832 xg timp de 10 min la 4˚C, iar supernatantul a fost colectat și depozitat la -80˚C pentru analiza MDA. Conținutul de MDA a fost determinat conform instrucțiunilor trusei de analiză TBarS (cat. nr. 10009055; Cayman chemical company).
Imunohistochimie (IHC) pentru enzimele antioxidante. iHc a fost efectuat cu Sod-1, Sod-2, caT și GPX pentru a studia modificările imunoreactivităților antioxidante în rinichi. iHc a fost efectuat conform metodei noastre descrise anterior (22). Pe scurt, secțiunile (6 µm) au fost incubate cu anti-Sod1 primar de capră (1:500; nr. cat. SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), anti-Sod2 de capră (1:1) ,000; cat. nr. SaB2501676; Sigma‑Aldrich; Merck KGaa), iepure anti-caT (1:1,000; cat. nr. ab16731; Abcam) și iepure anti-GPX ( 1:1,000; cat. nr. ab22604; Abcam) peste noapte la 4˚C, urmat de anti-iepurele biotinilat-conjugat (1:250; cat. nr. Ba-1000-1.5; Vector laboratories) , inc.) și anticorpii secundari anti-capră biotinilat-conjugați (1:250; cat. nr. Ba-5000-1.5; Vector Laboratories, Inc.) timp de 2 ore la 24˚C și dezvoltați folosind Vectastain aBc (laboratoarele Vector). , inc.). Apoi, au fost vizualizate cu o soluție de 3,3'-diaminobenzidină (în tampon Tris-HCl 0,1 M).
Microscopul Leica dM 2500 a fost folosit pentru a vizualiza secțiunile la o mărire de x400. Au fost selectate un total de 10 secțiuni/șobolani și au fost capturate 10 zone. Software-ul de analiză a pragului de imagine versiunea 1.52a (Institutul Național de Sănătate) a fost utilizat pentru a măsura procentul (procentul) din densitatea optică relativă (tijă).
Analize statistice.Toate experimentele au fost repetate în trei exemplare. Graph Pad Prism versiunea 5.0 (GraphPad Software, inc.) a fost utilizată pentru a analiza datele, care au fost exprimate ca medii ± eroare standard a valorilor medii (SeM). Supraviețuirea a fost analizată folosind statisticile Kaplan-Meier și testul log-rank. MaP și oxigenul periferic au fost comparate utilizând măsuri repetate uni și bidirecționale de analiză a varianței pentru a evalua efectul timpului. Pentru a determina semnificația diferențelor, analizele post-hoc au fost efectuate folosind testul Tukey pentru toate comparațiile multiple pe perechi. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Rezultate
Modificări fiziologice, rata de supraviețuire și variabile biochimice serice. Nu a existat nicio diferență semnificativă statistic între grupuri în ceea ce privește caracteristicile inițiale, inclusiv greutatea corporală, MaP și Spo2 (Tabelul i și Fig. 2). Inducerea de ca a avut loc la 3-4 minute după injectarea intravenoasă de bromură de vecuroniu (2 mg/kg). CA a fost confirmată cu un ecG izoelectric, Spo2 și MaP, iar acestea s-au schimbat conform așteptărilor conform protocolului experimental (Fig. 2a-c). după cum s-a dezvăluit în Fig. 2d, temperatura corpului a fost diferită între toate grupurile după roSc, după cum a arătat în Fig. 3, rata de supraviețuire a fiecărui grup a fost evaluată la o zi după ca. Rata Grupului II a fost de 42,9 la sută.
În grupul iii, rata după 2 h-HT a fost de 42,9 la sută, rata după 4 h-HT a fost de 57,1 la sută și rata după 6 h-HT a fost de 71,4 la sută. în acest experiment, nu a existat nicio diferență între șobolanii din grupul ii și șobolanii cu 2 h-HT din grupul iii.
după cum se demonstrează în Fig. 4B, nivelul seric Bun în grupul i a fost de 13,8 mg/dl la o zi după ca. în grupul ii, nivelul Bunului a fost semnificativ crescut la 35,3 mg/dl. în grupa iii, nivelul Bunului a fost de 3{{10}},7 mg/dl după 2 h‑HT, 25,0 mg/dl după 4 h‑HT și 22,7 mg/ dl după 6 h‑HT. în plus, după cum se dezvăluie în Fig. 4c, nivelul creatininei serice din grupul I a fost de {{20}},23 mg/dl. în grupul ii, nivelul creatininei a fost semnificativ crescut la 0,43 mg/dl. în grupul iii, nivelurile de creatinine au fost mai mici decât cele observate în grupul ii după cum urmează: 0,39 mg/dl după 2 h-HT, 0,37 mg/dl după 4 h-HT și 0,36 mg/dl după 6 h-HT.
Constatări histopatologice. în grupul I (fals), structurile histologice intacte au fost dezvăluite prin colorarea H&e, PaS și tricrom Masson (Fig. 5A). Fibroza interstițială nu a fost detectată în toate grupurile, între timp, în grupul ii, histopatologia renală indusă de ca a fost examinată la o zi după roSc folosind H&e, PaS și colorarea tricrom Masson. Leziunea renală severă indusă de CA a fost semnificativ crescută în tubii proximali și glomeruli; în special, marginile periei ale celulelor epiteliale tubulare renale au fost serios erodate (Fig. 5a și B). în plus, în acest grup, capilarele glomerulare au fost dilatate cu celule inflamatorii, iar edemul interstițial și necroza tubulară renală acută au fost grave în comparație cu cele observate în grupul I (Fig. 5a).
în grupul iii, leziunea renală a fost atenuată la o zi după roSc (Fig. 5a și B). în special, leziunea indusă de ca în tubii proximali a fost semnificativ scăzută după 6 h-HT în comparație cu cea observată în grupul ii. în plus, expansiunea locală a tubilor proximali a fost scăzută în comparație cu cea dezvăluită în grupul ii (Fig. 5A). Pentru glomeruli, 6 h-HT a atenuat semnificativ leziunea glomerulară în comparație cu cea dezvăluită în grupul ii (Fig. 5a și B).
Nivelul MDA. după cum este dezvăluit în Fig. 4a, nivelul de Mda în cortexul renal a fost semnificativ crescut la o zi după ca în grupul ii comparativ cu grupul i. Cu toate acestea, în grupul III, nivelul MDA a scăzut semnificativ după 4 h- și 6 h-HT. a fost, de asemenea, scăzut în 2 h-HT, dar nu a existat nicio diferență semnificativă statistic comparativ cu grupul ii.
Constatări ale imunoreactivităților enzimelor antioxidante.
În grupul I, au fost evaluate imunoreactivitățile normale Sod-1, Sod-2, GPX și caT, dezvăluind că acestea au fost localizate în principal în tubuli (Fig. 6a). în grupul ii, imunoreactivitățile Sod-1, Sod-2, GPX și CAT au fost reduse semnificativ la o zi după roSc, în comparație cu cele dezvăluite în grupul i (Fig. 6a și B).
în grupul iii, imunoreactivitățile Sod-1, Sod-2, GPX și caT după 2 h-HT nu au fost semnificativ diferite de cele observate în grupul ii (Fig. 6a și B). în cazul 4 h-HT, cele patru imunoreactivități au fost semnificativ mai mari decât cele dezvăluite în Grupa ii (Fig. 6a și B), demonstrând că, în special, imunoreactivitatea GPX a fost semnificativ mai mare în comparație cu celelalte imunoreactivități. în cazul 6 h-HT, toate imunoreactivitățile au fost mai mari decât cele identificate la șobolanii care au primit 4 h-HT, dezvăluind că tija fiecărei imunoreactivitate Sod-1, Sod-2, GPX și caT a fost 78,4, 67,4, 86.5 și, respectiv, 79,5 la sută, în comparație cu grupa i (Fig. 6a și B).
herba epimedium sagittatum
Discuţie
În studiile pe animale, inima și creierul sunt organele cele mai afectate după leziuni de ischemie/reperfuzie (i/r) după circa (39,40). cu toate acestea, anumite studii au raportat că leziunea renală acută are un impact asupra recuperării neurologice (41,42). Prin urmare, este important să se investigheze leziunea renală acută după ca și cPr. în studiul de față, șobolanii masculi adulți Sd au fost utilizați pentru ca asfixială prin injectarea de bromură de vecuroniu. CA a fost confirmată la 3-4 minute după inducerea asfixiei și cPr a fost efectuat la 5 minute după cca. MaP, ecG și Spo2 au fost modificate așa cum era de așteptat în timpul ca și după roSc. în studiul nostru de față, rata de supraviețuire în grupul iii a fost de 42,9 la sută la o zi după roSc la șobolanii expuși la 2 h-HT, 57,1 la sută la șobolanii tratați cu 4 h-HT și 71,4 la sută la șobolanii supuși la 6 h-HT. che et al (26) au raportat că rata de supraviețuire a fost de 40 la sută la două zile după roSc într-un model de șobolan de ca asfixială. în plus, Wang și colab. (43) au raportat că la șobolani, combinația de hipotermie și levosimendan (un sensibilizator de calciu și un deschizător de canale de potasiu) după roSc a crescut semnificativ supraviețuirea. Pe baza acestor constatări, HT la șobolani cu ca poate crește rata de supraviețuire la câteva zile după roSc. Cu toate acestea, la om, HT după ca cu greu crește rata de supraviețuire după roSc (44).
disfuncția renală a fost raportată la 12-28% dintre pacienții cu ca după resuscitarea cu succes (13). în plus, leziunea acută a rinichilor s-a dezvoltat la 43 la sută dintre pacienții resuscitați după ca și mai mult de 75 la sută dintre aceste episoade au avut loc în decurs de trei zile după ca (45). la modelele animale, leziunea acută renală indusă de i/R (adică ROSC după CA) a fost atenuată semnificativ de HT (43,46,47). De exemplu, Tissier et al (47) au raportat o atenuare semnificativă a leziunilor renale prin HT într-un model de iepure de ca, bazat pe histopatologie și microscopie electronică, în comparație cu grupul de control. în studiul nostru de față, scorurile histopatologice ale leziunilor glomerulare și tubulare ale rinichilor din grupul ii au fost aparent îmbunătățite la o zi după roSc. în acest grup, nivelurile serice de Bun și creatinine au fost semnificativ crescute după ROSC în comparație cu grupul simulat (Grupa i). Aceste rezultate au fost similare cu cele ale studiilor anterioare care au implicat modele ca canin, iepure și purcel (47-49). Astfel, leziunile renale au crescut sever în faza incipientă după ca la animalele de experiment. în studiul nostru de față, leziunile glomerulare și tubulare renale și scorurile histopatologice din grupul iii au fost reduse semnificativ după 4 h- și 6 h-HT la o zi după roSc, comparativ cu grupul ii. Ribeiro și colab. (46) și Souza și colab. (50) au raportat că HT a fost eficientă în modelele animale de leziuni renale i/r. Islam și colab. (23) și Jawad și colab. (22) au determinat că HT a redus severitatea leziunii renale și a crescut rata de supraviețuire într-un model ca asfixial. Descoperirile au sugerat că HT are un efect semnificativ de protecție renală, care a fost asociat cu o rată de supraviețuire crescută.
Enzimele antioxidante endogene includ în principal Sods, CAT și GPX. Aceste enzime oferă o primă linie de apărare împotriva o2•‑ și OH•. SOD-1 și SOD-2 oferă o apărare împotriva stresului oxidativ prin catalizarea dismutării o2•- în o2 și H2o2 (51). Stresul oxidativ este un factor crucial în leziunile de organ și disfuncția hemodinamică în timpul PcaS și generarea de roS în timpul leziunii i/r. Activitatea enzimelor antioxidante este alterată de leziuni i/r în urma ca (21). Studiul nostru a dezvăluit că nivelurile de Sod-1, Sod-2, GPX și caT au scăzut după roSc în grupul ii, comparativ cu grupul i. Nivelurile acestor enzime antioxidante sunt reduse în urma i/r, ceea ce provoacă deteriorarea celulelor și moartea datorită consumului de antioxidanți endogeni ca urmare a eliberării roS (52).
Xia și colab. (53) au raportat o activitate antioxidantă crescută în țesuturile renale ale șoarecilor expuși la HT în leziuni renale i/r. Hackenhaar și colab. (21) au observat o creștere semnificativă a activității Sod-1, Sod-2, GPX și caT după 6, 12, 36 și 72 de ore de HT la oameni după roSc. în studiile anterioare folosind un model de ca asfixială la șobolan, Islam și colab. (23) au raportat că HT după ca reduce stresul oxidativ în rinichi, iar Jawad și colab (22) au raportat că HT după ca protejează rinichiul împotriva leziunilor induse de ca, demonstrând că nrf2/Ho-1 a fost crescut în rinichi. în studiul nostru de față, imunoreactivitățile Sod-1, Sod-2, GPX și caT au fost semnificativ crescute după 4 h-HT și 6 h-HT în grupul iii în comparație cu grupul ii, sugerând că HT a activat enzimele antioxidante și a redus stresul oxidativ.
Pe baza rezultatelor de supraviețuire, histopatologie, biochimice și imunohistochimice ale acestui studiu, s-a determinat că disfuncția renală este frecventă și asociată cu mortalitatea în stadiile incipiente ale PcaS după roSc, în modelul nostru de șobolan de ca asfixială. Cu toate acestea, 4 h- sau 6 h-HT după ROSC au redus semnificativ leziunile renale, sugerând că HT induce activarea enzimelor antioxidante, cum ar fi Sod-1, Sod-2, GPX și caT, ducând la reducerea stresului oxidativ în rinichi. ca urmare, s-a emis ipoteza că HT reduce leziunea renală printr-un mecanism antioxidant și crește rata de supraviețuire timpurie. Cu toate acestea, este necesară analiza Western blot pentru a elucida mecanismul leziunii renale și HT în ca după roSc. Aceasta este o limitare potențială a studiului de față și subliniază necesitatea unor studii ulterioare.
miricetina
1departamentul de Medicină de Urgență, un institut de cercetare de medicină clinică al universității naționale Jeonbuk, Jeonju, Jeollabuk-do 54907;
2Colegiul de Medicină Veterinară și Institutul de Cercetare în Biosecuritate, Universitatea Națională Jeonbuk, San, Jeollabuk-do 54596;
3departamentul de Științe Biomedicale și institut de cercetare pentru Bioștiințe și Biotehnologie, Universitatea Hallym, chuncheon, Gangwon-do 24252;
4 Departamentul de Chirurgie, Spitalul Universitar Național Kangwon,
Școala de Medicină, Universitatea Națională Kangwon, Chuncheon, Gangwon-do 24289; 5departamentul de Neurobiologie, Școala de Medicină, Universitatea Națională Kangwon, Chuncheon, Gangwon-do 24341, Republica Coreea
Mulțumiri
Nu se aplică.
Finanțarea
Prezentul studiu a fost susținut de Programul de cercetare în știință de bază prin Fundația națională de cercetare din Coreea finanțată de Ministerul Educației (grant nrF-2019r1c1c1002564, nrF-2019r1F1a1062696 și nrF-2021r1F1a1059992).
Disponibilitatea datelor și materialelor
Seturile de date utilizate și/sau analizate în timpul studiului curent sunt disponibile de la autorul corespunzător, la cerere rezonabilă.
Contribuții ale autorilor
SeK, HYS, MHW și HJT au fost responsabili pentru proiectarea experimentală, achiziția datelor, analiza datelor și scrierea manuscrisului. eYl, YJY, rHK, JHc și TKl au efectuat experimentele și analiza datelor. dca, BYP, JcY, SKH și iSK au efectuat analiza datelor și au făcut comentarii critice asupra întregului proces al studiului. toți autorii au citit și au aprobat manuscrisul final. HYS și HJT confirmă autenticitatea tuturor datelor brute.
Aprobarea etică și acordul de participare
toate protocoalele experimentale au fost aprobate pe baza procedurilor etice și a îngrijirii științifice de către Comitetul instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor al universității naționale Jeonbuk (aprobare nr. JBnu 2020-084; Jeonju, Coreea de Sud).
Consimțământul pacientului pentru publicare
Nu se aplică.
Interese concurente
Autorii declară că nu au interese concurente.
Referințe
1. Girotra S, chan PS și Bradley SM: îngrijire post-resuscitare după stop cardiac în afara spitalului și în spital. Inima 101: 1943-1949, 2015.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS și Cha KC: Un interval mai scurt de defibrilare promovează rezultatele reușite la defibrilare și resuscitare. resuscitare 143: 100-105, 2019.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a și Papadimitriou l: albumina modificată prin ischemie prezice rezultatul resuscitarii cardiopulmonare: un studiu experimental. resuscitare 81: 591-595, 2010.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se și Angelos MG: necesarul de oxigen în timpul resuscitarii cardiopulmonare (cPr) pentru a efectua revenirea circulației spontane. resuscitare 80: 951-955, 2009.
5. lópez‑Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez‑calvo a , cecchetti c , rodríguez‑núnez a și carrillo Á; Rețeaua iberoamericană de studiu asupra stopului cardiac pediatric riBePci: După revenirea factorilor de circulație spontană asociați cu mortalitatea în stopul cardiac pediatric în spital: un studiu observațional multicentric prospectiv. crit care 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, devenit S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F și cariou a: Sindromul de stop cardiac: de la resuscitarea imediată la rezultatul pe termen lung. ann terapie intensivă 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC și colab: Post-cardiac stop syndrome: epidemiologie, fiziopatologie, tratament și prognostic. o declarație de consens din partea comitetului internațional de legătură pentru resuscitare (Asociația Americană a Inimii, Consiliul Australian și Noua Zeelandă pentru resuscitare, Consiliul european de resuscitare, Fundația Heart and Stroke din Canada, Fundația Interamericană a Inimii, Consiliul de resuscitare din Asia și Consiliul de resuscitare din Africa de Sud ); comitetul de îngrijire cardiovasculară de urgență al Asociației Americane de Inimă; consiliul pentru chirurgie cardiovasculară și anestezie; consiliul pentru îngrijiri cardiorespiratorii, perioperatorii și critice; consiliul de cardiologie clinică; și Consiliul Stroke. tiraj 118: 2452‑2483, 2008.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG și colab: Sindromul de stop cardiac: epidemiologie, fiziopatologie, tratament și prognostic. O declarație științifică a Comitetului internațional de legătură privind resuscitarea; comitetul de îngrijire cardiovasculară de urgență al Asociației Americane de Inimă; consiliul pentru chirurgie cardiovasculară și anestezie; consiliul pentru îngrijiri cardiorespiratorii, perioperatorii și critice; consiliul de cardiologie clinică; consiliul de pe Stroke. resuscitare 79: 350‑79, 2008. DOI: 10.1016/j.resuscitation.2008.09.017
9. Jentzer Jc, schimbare Md și dezfulian c: Disfuncție miocardică și șoc după stop cardiac. BioMed res int 2015: 314796, 2015.
10. Madl c și Holzer M: Funcția creierului după resuscitarea din stop cardiac. curropin crit care 10: 213‑217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je și Trzeciak S: Multiple organ dysfunction after the return of spontaneous circulation in postcardiac stop syndrome. crit care Med 41: 1492‑1501, 2013.
12. Zeiner a, Sunder-Plassmann G, Sterz F, Holzer M, losers H, laggier an și Müllner M: The effect of mild therapeutic hypothermia on renal function after cardiopulmonary resuscitation in men. resuscitare 60: 253-261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW și Rittenberg Jc; Serviciul post stop cardiac: disfuncția renală este frecventă după resuscitarea din stop cardiac în afara spitalului. resuscitare 84: 1371‑1374, 2013.
14. lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB și colab.: modificări în histopatologie și niveluri de factor de necroză tumorală în inimile șobolanilor în urma stop cardiac asfixial. Clin Exp Emerg Med 4: 160-167, 2017.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e, et al; Începutul și sfârșitul terapiei de susținere pentru rinichi (BeST Kidney) anchetatori: insuficiență renală acută la pacienții în stare critică: un studiu multinațional, multicentric. JAMA 294: 813‑818, 2005.
16. Mattana J și Singhal Pc: Prevalența și determinanții insuficienței renale acute după resuscitarea cardiopulmonară. arh intern Med 153: 235‑239, 1993.
17. Sachse a și Wolf G: specii reactive de oxigen induse de angiotensină ii și rinichi. J am Soc Nephrol 18: 2439-2446, 2007.
18. Baud l și ardaillou r: specii reactive de oxigen: producție și rol în rinichi. am J Physiol 251: F765-F776, 1986.
19. rodrigo r , Fernández-Gajardo r , Gutiérrez r , Matamala JM, carrasco r , Miranda-Merchak a și Feuerhake W: stresul oxidativ și patofiziologia accidentului vascular cerebral ischemic: noi oportunități terapeutice. SNC Neurol Disord Drug Targets 12: 698-714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n și Moin S: leziuni crescute ale ADN-ului, stres oxidativ și sistem de apărare afectat de răspuns la pacienții cu infarct miocardic. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780-789, 2018.