Leziuni de exercițiu——ischemie renală indusă——reperfuzie și efectul protector al cistancilor combinate cu vitamina C la șobolani

Leziuni ale ischemiei-reperfuziei renale induse de efort și efectul protector al herba Cistanches combinată cu vitamina C la șobolani

pentru mai multe informații:ali.ma@wecistanche.com

Abstract:Obiectiv: Studiul Herba Cistanches combinat cu efectul protector al vitaminei C și mecanismul de mișcare la șobolani ischemie renală-leziune de reperfuzie. ,12), grup de antrenament general (grupul M,1 2), grup de supraantrenament (grupul OM,24), grupul de cistanche plus grup de supraantrenament (grupul COM,16), grup de vitamina C plus grup de supraantrenament (grupul VCOM,16), și cistanche plus vitamina C plus grup de supraantrenament (grup CVCOM,1 6), luați 56 de zile de antrenament exhaustiv de înot. Grupul COM, grupul CVCOM cu gavaj profesional pentru lavaj gastric (ig), o dată pe zi, doza de 6．0 lg．kg-, volum Ig 5 mL．kg-; grup VCOM, grup CVCOM IP ia o injecție intraperitoneală, 100 mg． kg-, o dată pe zi, volumul injectării este de 0．5 ml; alte grupuri, cum ar fi soluția salină normală. Detectează parametrii biochimici ai azotului ureic seric și creatininei serice 24 de ore mai târziu după ultimul antrenament. Rezultate: 1) În cele 8 săptămâni de supraantrenament, șobolanii au dus la mișcarea „ischemie-reperfuzie renală”, ultrastructura rinichiului a fost grav afectată. , modificările histopatologice evident, funcția renală a fost grav afectată.2)Creșterea creatininei serice și a azotului ureic din sânge.<0．01), com=""><0．o1), vcom=""><0．01), cvcom=""><0．05) higher="" than="" in="" group="" c;="" com=""><0．05), vcom=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" vcom="" group．3)sod="" activity="" decreased．om=""><0．01), com=""><0．01), of="" vcom=""><0．01), cvcom=""><0．05)lower than="" in="" group="" c;="" m=""><0．05), com=""><0．05), vcom=""><0．05), cvcom=""><0．01)higher than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cvcom=""><0．01)higher than="" the="" vcom="" group．4)the="" content="" of="" mda="" increased,="" om=""><0．01), com=""><0．01), vcom="">< 0．o1),="" cvcom=""><0．05)higher than="" in="" group="" c;="" com=""><0．05), vcom="" group=""><0．05), cvcom=""><0．01)lower than="" the="" om="" group;="" com=""><0．05), cv—="" com=""><0．01)lower than="" the="" vcom="" group．conclusion：1)overtraining="" can="" induce="" renal="" ischemia-reperfusion="" in="" rats．2)cistanche="" deserticola="" y．c．ma="" and="" vitamin="" c="" can="" enhance="" the="" activity="" of="" sod,="" scavenging="" oxygen="" free="" radicals,="" reduce="" lipid="" peroxidation,="" they="" have="" a="" protective="" effect="" on="" exercise-induced="" ischemia-reperfusion="" kidney．3)cistanche="" is="" better="" than="" vitamin="" c,="" but="" they="" worked="" even="" better="" when="" taken="">

Cuvinte cheie:herba Cistanches; vitamina C; ischemie-reperfuzie indusă de efort

Click pentru produse Cistanche herba

Odată cu dezvoltarea teoriei medicinei chineze moderne, a teoriei farmacologiei moderne și a biotehnologiei moderne, mai mulți agenți individuali sau formule sunt aplicate practicii sportive. Medicina tradițională chineză își arată avantajele unice datorită efectului său multi-țintă, multicanal și aproape fără componente interzise. A făcut unele realizări în îmbunătățirea funcției fizice a sportivilor și atenuarea oboselii. Când organismul este într-o stare stabilă, fluxul sanguin renal poate fi menținut relativ constant prin mecanismul său de reglare. În timpul exercițiilor fizice intense, fluxul sanguin renal se modifică sub influența factorilor nervoși și umorali. Datorită redistribuirii fluxului sanguin al diferitelor organe, fluxul sanguin al organelor active, în special al mușchilor, crește, iar fluxul sanguin renal scade brusc, ceea ce este mai evident odată cu intensitatea continuă și în creștere a procesului de efort. Această stare ischemică incompletă a rinichilor formează „ischemie renală indusă de efort”. După oprirea efortului, aportul sanguin renal se reface, formând „reperfuzie” după ischemia renală indusă de efort. Creșterea anormală a producției de radicali liberi joacă un rol important în procesul de leziune ischemie-reperfuzie. Rezultatele arată că Cistanche deserticola are efecte farmacologice de creștere a activității peroxid dismutazei și reducerea peroxidului lipidic și poate elimina daunele excesive ale radicalilor liberi asupra celulelor corpului; Vitamina C, ca un antioxidant important în organism, poate elimina eficient radicalii liberi. Această lucrare studiază efectele Cistanche deserticola combinată cu vitamina C asupra leziunilor de ischemie-reperfuzie renală de șobolan și discută efectele și mecanismele acestora în leziunile de ischemie-reperfuzie, pentru a oferi o bază teoretică pentru aplicarea lor clinică.

1 material

1.1 Animale

100 de șobolani Wistar masculi de grad curat, în vârstă de 42 de zile, greutate medie (201,8 ± 14,1) g, furnizați de Departamentul de științe experimentale pe animale, Departamentul de Medicină, Universitatea Peking, licență nr. scxk2006-0008. Pe parcursul întregului test, temperatura în laborator este menținută la 22 ± 2 grade, umiditatea relativă este de 55 la sută ~ 75 la sută, iar timpul de iluminare se modifică cu natura. Toți șobolanii experimentali au fost hrăniți cu hrană de bază (furnizată de Departamentul de știință a animalelor experimentale, Departamentul de Medicină, Universitatea Peking) și apă distilată. Timpul experimental a fost de 63 de zile, iar timpul de antrenament formal a fost de 56 de zile.

1.2 Medicație experimentală

Cistanche deserticola, produsă în Mongolia Interioară, a fost achiziționată de la farmacia Tongrentang din Beijing, lot nr.: 120224536

Injecție cu vitamina C (nr. lot: 20120406), furnizată de Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.

1.3 Reactivi

Creatinina serică (SCR) a fost determinată prin metoda acidului picric Jaffe, azotul ureic din sânge (BUN) prin metoda diacetil MONOOXIME și malondialdehida (MDA) prin colorimetrie; Superoxid dismutaza (SOD) a fost determinată prin metoda xantin oxidazei, folosind kitul furnizat de Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, kit nr. 2012051

1.4 Instrumente

Balanță analitică electronică Bs224s (Sartorius, Germania), microscop optic (Olympus, Japonia), analizor biochimic automat alcyon300 (Abbott, SUA), spectrofotometru ultraviolet-vizibil de 756 mc (Shanghai Precision Instrument Factory) și gl-20g centrifuga de congelare rapida.

2 Metode

2.1 Gruparea animalelor

După 4 zile de hrănire adaptivă, șobolanii experimentali au fost examinați timp de 3 zile cu 20 minute de exercițiu zilnic, iar înotătorii individuali nepotriviți au fost eliminați. Sobolanii rămași au fost împărțiți aleatoriu în 6 grupuri: 12 în grupul de control (Grupa C), 12 în grupul de antrenament general (grupul M), 24 în grupul de supraantrenament (grupul OM), 16 în grupul Cistanche deserticola plus supraantrenament ( grupul COM) și 16 din grupul de vitamina C plus supraantrenament (grupul VCOM) 16 șobolani din grupul Cistanche deserticola plus vitamina C plus grupul de supraantrenament (grupul cv com) au fost dresați timp de 56 de zile. În perioada de antrenament, grupul com și grupul cv com au fost gavage cu un aparat de gavaj profesional o dată pe zi, cu o doză de 6,01 g/kg și un volum de 5 ml/kg; Grupul VCOM și grupul cv com au fost injectate intraperitoneal la o doză de 100 mg/kg o dată pe zi, cu un volum de injecție de 0,5 ml și aceeași cantitate de soluție salină normală în alte grupuri.

2.2 metoda experimentală

2.2.1 schema de instruire și testare

Grupul C a fost hrănit în mod obișnuit, fără nicio intervenție și nu a făcut exerciții fizice la ore obișnuite. Grupul M a primit antrenament de înot de intensitate moderată și antrenament formal de înot timp de 8 săptămâni. Antrenați-vă 6 zile pe săptămână, o dată pe zi, înotați 20 ture pentru prima dată, apoi creșteți treptat. Înotați 60 de minute de fiecare dată în primul weekend, 90 de minute pe zi în al doilea weekend și 120 de minute pe zi în al treilea weekend. Mențineți această cantitate de exerciții pentru următoarele 5 săptămâni. Aranjamentul de antrenament al celorlalte grupe în primele 3 săptămâni este același cu cel al grupei M, iar antrenamentele de mare intensitate se vor aranja încă din a patra săptămână. Sobolanii au fost antrenati pana la epuizare de fiecare data. Standardul de epuizare a fost că șobolanii nu au ieșit de la suprafața apei timp de 10 secunde după scufundare. Creșteți greutatea cu 0,5% în primele trei săptămâni, cu 1% în a patra săptămână și cu 2% în a cincea săptămână. Antrenează-te o dată pe zi. În a 6-a săptămână, s-au antrenat o dată pe zi dimineața și după-amiaza, iar în a 7-a-8săptămâna, s-au antrenat o dată pe zi dimineața, după-amiaza și noaptea, toate acestea crescând greutatea cu 5 la sută. Până la sfârșitul săptămânii a 8-a, șobolanii din grupurile C și M au crescut în mod normal, fără moarte accidentală. Mortalitatea șobolanilor din alte grupuri a fost mai mare din cauza greutății crescute, a eșecului de a recupera după oboseală și a morții accidentale după antrenament. Au fost 14, 13, 11 și 13 șobolani în grupul OM, grupul com, grupul VCOM și, respectiv, grupul CVCOM. 10 șobolani din fiecare grup au fost selectați pentru experiment, iar ceilalți au fost excluși aleatoriu.

2.2.2 determinarea indicelui

La 24 de ore după ultimul antrenament de înot, șobolanii din fiecare grup au fost moderat anesteziați cu eter. S-a prelevat sânge din artera carotidă comună, s-a anticoagulat cu soluție de citrat de sodiu, s-a pus în apă la 37 de grade timp de 30 minute, s-a centrifugat la 4 grade 3000 rpm timp de 10 minute, s-a separat și s-a preparat ser și s-a păstrat la frigider la minus 20 de grade pentru referințe viitoare. Îndepărtați rapid ambii rinichi, îndepărtați fascia, puneți-i în soluție salină normală pre-răcită pentru a spăla petele de sânge și observați vizual dimensiunea, culoarea și textura rinichilor. Separați rinichiul stâng, luați 0,5 g de țesut renal de la polul superior, măcinați-l cu 1,5 ml de soluție salină normală la 12000 rpm la 1 grad pentru a face 10% omogenizare a țesutului renal; Probele de țesut renal au fost fixate cu formaldehidă 10%, învelite în parafină, făcute în secțiuni groase de 4 um, colorate cu HE și s-au observat modificările histopatologice.

3. Rezultate

3.1 modificări patologice ale efortului, Cistanche deserticola și vitamina C pe rinichi de șobolan

După determinarea SCR și bun, țesuturile renale ale fiecărui grup au fost făcute în secțiuni de parafină, colorate cu HE, iar modificările histomorfologice au fost observate la microscop cu lumină. La microscopul luminos, structura țesutului renal al șobolanilor din grupul de control static și grupul de antrenament general a fost normală, fără congestie, degenerare și edem și nu a existat niciun tip tubular în lumenul tubilor renali. În grupul de supraantrenament, a existat congestie în glomerul, edem, degenerescență vacuolară și extinderea lumenului celulelor epiteliale tubulare și un număr mic de vilozități și celule epiteliale exfoliate în lumen. Modificările histopatologice la alte loturi au fost mai ușoare decât cele din grupul de supraantrenament, cu edem ușor, degenerare vacuolară, extinderea lumenului celulelor epiteliale tubulare și fără tip de tub proteic și tip de tub celular. Nu a existat o diferență semnificativă în scorul Paller al tubilor renali între grupul de control static și grupul de antrenament general (P > {{0}}.{05), grupul de control static a fost semnificativ mai scăzut decât cel al altor grupuri (P < 0,01),="" iar="" grupul="" de="" tratament="" a="" fost="" semnificativ="" mai="" mic="" decât="" cel="" al="" grupului="" cu="" supraantrenament="" (p=""><>

3.2 Efectele exercițiilor fizice, Cistanche deserticola și vitamina C asupra BUN și SCR seric la șobolani

Azotul ureic din sânge și creatinina serică au crescut semnificativ în fiecare grup în comparație cu grupul de control și au scăzut semnificativ în grupul com, grupul VCOM și grupul CVCOM comparativ cu grupul OM (P <{{0}}.{{4} }5,="" p="">< 0.05="" și="" respectiv="" p="">< 0,01);="" comparativ="" cu="" grupul="" vcom,="" grupul="" com="" și="" grupul="" cvcom="" au="" scăzut="" semnificativ="" (p=""><0,05, respectiv="" p=""><>

3.3 efectele exercițiului fizic, Cistanche deserticola și vitamina C asupra activității SOD și conținutului de MDA în omogenatul renal de șobolan.

În comparație cu grupul OM, activitatea SOD în grupul COM, grupul VCOM și grupul CVCOM a crescut semnificativ (P <{{0}}.05, p=""><0.{{9} }5="" și="" respectiv="" p="">< 0.o1);="" în="" comparație="" cu="" grupul="" vcom,="" grupul="" com="" și="" grupul="" cvcom="" au="" crescut="" semnificativ="" (p="">< o.05,="" p=""><0.o1, respectiv).="" conținutul="" de="" mda="" din="" fiecare="" grup="" a="" fost="" semnificativ="" mai="" mare="" decât="" cel="" din="" grupul="" de="" control="" și="" a="" scăzut="" semnificativ="" în="" grupul="" com,="" grupul="" vcom="" și="" grupul="" cvcom="" în="" comparație="" cu="" grupul="" om="" (p="">< 0.05,="" p="">< 0,05="" și="" p="">< 0,01="" respectiv);="" comparativ="" cu="" grupul="" vcom,="" grupul="" com="" și="" grupul="" cvcom="" au="" scăzut="" semnificativ="" (p="">< 0,05="" și,="" respectiv,="" p=""><>

4. Discutie

Leziunea de ischemie-reperfuzie renală (R/R) este un proces fiziopatologic complex, iar mecanismul său specific nu a fost pe deplin clarificat. Cu toate acestea, radicalii liberi de oxigen (OFR) joacă un rol important în apariția și dezvoltarea I/R. În circumstanțe normale, un număr mic de radicali liberi pot fi produși în organism, dar datorită inactivării enzimei radicalilor liberi. sistem din organism, radicalii liberi sunt îndepărtați rapid fără deteriorare. În timpul exercițiului, I/R crește producția de radicali liberi, ceea ce poate duce la peroxidarea lipidelor membranei, ducând la modificări ale fluidității, fluidității și permeabilității membranei și apoi provoacă disfuncția membranei, în special distrugerea membranei mitocondriale, care va afecta metabolismul și funcția celulelor și interferează cu funcția fiziologică a întregului organ. Enzimele antioxidante sunt principalele substanțe din organism pentru a elimina radicalii liberi și pentru a reduce daunele acestora. Gazonul este singura enzimă cu un radical liber de oxigen ca substrat printre miile de enzime din organismele aerobe. Îndepărtează anionul superoxid prin catalizarea anionului superoxid pentru a forma peroxid de hidrogen și protejează organismul de daune. În același timp, într-un anumit interval, SOD va crește în mod compensabil atunci când metabolismul radicalilor liberi este îmbunătățit. Prin urmare, nivelul activității SOD este un semn al puterii capacității antioxidante. MDA este principalul produs al peroxidării lipidelor celulare. Conținutul de MDA din mitocondrii este recunoscut ca un indice sensibil pentru măsurarea metabolismului radicalilor liberi. Creatinina și azotul ureic sunt produse catabolice ale mușchilor și respectiv proteinelor. Sunt excluse în principal din rinichi prin circulația sângelui. Concentrația lor în sânge depinde de capacitatea de filtrare glomerulară. Când esența renală este deteriorată și rata de filtrare glomerulară scade la punctul critic, concentrația lor va crește semnificativ.

Rezultatele au arătat că supraantrenamentul timp de 8 săptămâni a dus la modificări semnificative ale histopatologiei renale. Rezultatele experimentale arată că Cistanche deserticola și vitamina C pot elimina eficient radicalii liberi, pot reduce ischemia renală și hipoxia, pot inhiba peroxidarea lipidelor și pot îmbunătăți activitatea SOD. Poate reduce eficient afectarea ischemiei-reperfuzie renală și poate juca un rol protector. Mecanismele posibile sunt următoarele: 1) Cistanche deserticola poate îmbunătăți activitatea enzimelor antioxidante și poate accelera eliminarea radicalilor liberi. În același timp, o varietate de polifenoli, glicozide și flavonoide joacă un rol pozitiv în captarea radicalilor liberi, reducând daunele radicalilor liberi asupra membranei mitocondriale și membranei reticulului sarcoplasmatic și reducând daunele oxidative la proteinele enzimelor. 2) Vitamina C este o vitamină antioxidantă importantă. Ca un antioxidant puternic, poate elimina eficient radicalii liberi de oxigen, poate inhiba inițierea cascadei apoptozei și poate reduce leziunile de ischemie-reperfuzie ale celulelor și organelor. În plus, rezultatele a trei grupuri de tratament sugerează că Cistanche deserticola poate fi mai bună decât vitamina C în tratamentul ischemiei-reperfuziei renale induse de efort; Combinația celor două poate fi mai propice pentru protecția rinichilor de leziuni de ischemie-reperfuzie.

În concluzie, antrenamentul de înot cu sarcină grea a provocat rinichileziune de ischemie-reperfuziela sobolani.Cistanche deserticolași vitamina C au evidentefecte protectoare asupra leziunilor renale de ischemie-reperfuzie,care poate fi decreșterea activității superoxid dismutazei,eliminarea radicalilor liberi,reducerea peroxidării lipidelor, șiîmbunătățirea funcției renale. În ceea ce privește efectul curativ, combinația dintre cele două este mai bună decât cele două singure, iar Cistanche deserticola este mai bună decât vitamina C, dar poate fi legată și de doza celor două din aplicare. Relația dintre doză și efectul curativ trebuie studiată în continuare.