Permeabilitatea intestinală și depresia la pacienții cu boală inflamatorie intestinalăⅠ
Dec 20, 2023
Rezumat: Depresia este o problemă de sănătate globală care necesită un diagnostic precoce și precis pentru a asigura accesul rapid la un tratament adecvat. Atenția recentă s-a concentrat pe analiza axei creier-intestin-microbiotă printre multiple căi psihopatologice. Bariera intestinală joacă un rol cheie, iar disfuncțiile care apar la acest nivel au implicații asupra sănătății mintale. Prezentul studiu și-a propus să investigheze rolul biomarkerilor de permeabilitate intestinală, adică calprotectina, zonulina, proteina de legare a lipopolizaharidelor (LBP) și proteina de legare a acizilor grași intestinali (I-FAB), în depresia la pacienții cu boală inflamatorie intestinală (IBD). ).
Acesta este primul studiu de acest gen care se desfășoară în România, Europa de Est, cu accent pe pacienții cu boala Crohn și colită ulceroasă. Corelațiile identificate între depresie și calprotectină și depresie și LBP au potențialul de a face lumină asupra procesului de diagnosticare rapidă a depresiei cu ajutorul biomarkerilor. Deoarece depresia este corelată cu o scădere a calității vieții pacienților internați cu IBD, necesitatea accesului la tratamente adecvate trebuie să fie urgentă.
1. Introducere
Depresia este o dizabilitate individuală, profesională și socială asociată cu morbidități somatice [1,2] și cu un risc ridicat de mortalitate prin sinucidere [3]. Cu toate acestea, accesul la specialiști, un diagnostic corect și o vindecare eficientă sunt limitate [4]. Un diagnostic precoce și precis [5,6], precum și o selecție personalizată a tratamentului [7], sunt necesare pentru diminuarea suferinței și a poverii financiare a bolii [3]. Conform criteriilor de diagnostic din Manualul de Diagnostic și Statistic al Tulburărilor Mintale. (DSM V) [8], depresia este o tulburare afectivă cu un grup eterogen de simptome. Pentru a fi diagnosticat, este necesară prezența a cinci din următoarele nouă simptome: dispoziție depresivă, lipsă de plăcere, dificultăți de somn și apetit, niveluri scăzute de energie, modificări cognitive, sentimente de vinovăție și vinovăție și idei suicidare. mecanismele fiziopatologice pentru a beneficia de un tratament eficient nu sunt cunoscute. Au fost puse sub semnul întrebării mai multe mecanisme, dar teoriile sunt încă în curs de dezvoltare.
Astfel, au fost investigate disfuncțiile pe axa hipotalamo-hipofizară, neurotransmițători, nervul vag, metaboliți ai acizilor grași cu lanț scurt, triptofan, factori inflamatori și axa creier-intestin-microbiotă [9-12]. S-a dovedit că tulburările legate de stres nu numai că aduc modificări în compoziția microbiotatului intestinal prin axa hipotalamo-hipofizo-suprarenal, ci și intestinul afectează
sistemul nervos central prin stimularea vagală, permeabilitatea intestinală și eliberarea de compuși inflamatori și antiinflamatori și modificări ale agenților circulanți în sânge [13]. În ultimele două decenii, studiul implicării axei creier-intestin-microbiotă în tulburările mintale a câștigat amploare [9,14]. În acest context, rolul sindromului leaky gutsyndrome a primit mai multă atenție [15,16].
Bariera intestinală are rolul principal în digestia și absorbția nutrienților; secundar, controlează strict transportul antigenelor din lumen în submucoasă și menține echilibrul între toleranță și răspunsul imun care provoacă inflamație. Integritatea barierei intestinale poate fi afectată de dietă, disbioza microbiotei intestinale sau de alți factori. Acestea au potențialul de a provoca imunactivarea prin translocarea antigenelor microbiene și a metaboliților. În prezent, zonulina serică, proteina de legare a acizilor grași intestinali (IFABP/FABP2) și LBP, precum și albumina fecale, calprotectina și zonulina, au fost analizate ca permeabilitate intestinală. markeri [17].Calprotectina este o proteină care leagă calciul și zincul, inițial izolată din leucocite; este utilă în diferențierea bolii inflamatorii intestinale de sindromul colonului iritabil. Joacă un rol major în timpul inflamației și este considerată o proteină de fază acută [18]. ].
Valorile normale sunt între 10 și 50 sau 60 (ug/g). Valorile peste 200 (ug/g) pot indica o boală inflamatorie, iar valorile peste 500–600 (ug/g) indică cu siguranță existența unei boli intestinale [19]. Proteina de legare a lipopolizaharidelor (LBP) este o componentă lipidică esențială a membranei externe. de bacterii Gram-negative [20], care provoacă endotoxemie [21]. LBPis produs de hepatocite, țesut adipos și celule intestinale funcționează ca o proteină acută de fază I și joacă un rol important în răspunsul imun [22]. LBP este prezent în ser la concentrații de 5-15 mg/mL și crește de 10 până la 50 de ori în timpul reacției de fază acută. Funcția de barieră este menținută de zonulină, cunoscută ca singurul modulator fiziologic al joncțiunilor intracelulare apropiate (TJ) [15,23, 24]. Zonulina deschide reversibil TJ, acționând asupra receptorului 2 activat de protează situat în spațiul intracelular al complexului joncțional [25]. Valoarea mediană a zonulinei este de 34 ng/mL [26].
Proteina de legare a acizilor grași intestinali (I-FABP/FABP2) este una dintre cele nouă FABP diferite identificate, care aparțin unei superfamilii de proteine care leagă lipidele. Rolul principal este transportul intracelular și reglarea absorbției acizilor grași [27]. Când are loc deteriorarea barierei intestinale epiteliale, I-FABP este eliberat în circulație și concentrația plasmatică a acestuia crește [28]. Valoarea prag pentru I-FAPB este considerată 2 ng/mL. În acest context, ne-am propus să investigăm rolul biomarkerilor de permeabilitate intestinală în depresie la pacienții cu boală inflamatorie intestinală (IBD) prin (i) examinarea relației dintre calprotectină, zonulină, LBP. , IFABP/FABP2 și depresie și prin (ii) evaluarea influenței depresiei asupra calității vieții.
2. Materiale și metode
2.1. Grup de studiu
Grupul inițial a inclus 60 de pacienți din Clinica de Gastroenterologie a Spitalului Clinic Județean Constanța în perioada aprilie-iunie 2021. Criteriile de includere au fost diagnosticul de IBD, vârsta de 18 ani și peste, cunoștințe de citit și scris și acordul de participare la studiu. Criteriile de excludere au fost refuzul consimțământului, depresia severă sau alte tulburări mintale severe pentru care au fost direcționați către serviciul de psihiatrie specializat. După consimțământul informat, pacienții au fost contactați telefonic de către un cercetător pentru a aplica un chestionar socio-demografic privind depresia și un chestionar privind calitatea viata.In studiu au fost incluse 30 de pacienti care au trecut prin toate etapele studiului.
2.2. Chestionare utilizate
Chestionarul de sănătate a pacientului-9 (PHQ-9) [29] a fost aplicat participanților pentru a evalua nivelul de depresie de care au fost afectați. Acest chestionar standard conține nouă itemi la care trebuie răspuns pe baza simptomelor pe care pacientul le-a avut în ultimele 14 zile. Scorurile sunt clasificate după cum urmează: 1–4 depresie minimă, 5–9 depresie ușoară, 10–14 depresie moderată, 15–19 depresie moderat severă și 20–27 depresie severă În mod similar, am aplicat un chestionar pentru calitatea vieții (EQ{{{ 14}}D) [30,31] pentru a colecta date privind calitatea vieții. Elementele cuprinse în acest instrument sunt mobilitatea pacientului, autoîngrijirea, angajarea în activități obișnuite, durerea sau disconfortul și anxietatea sau depressione experimentată. La itemi se răspunde pe o scară de cinci niveluri.
2.3. Colectarea probelor și analiza de laborator
Probele serologice pentru zonulină, IFABP/FABP2, LBP și probe de fecale pentru calprotectină au fost colectate conform protocolului pentru colectarea și transportul probelor biologice potențial infecțioase. Probele de ser au fost colectate prin puncție venoasă, a jeun și în vacutainer cu o cârpă activatoare. Probele de fecale au fost colectate din scaune emise spontan în recipiente fără mediu purtător. Serul a fost testat pentru zonulină cu MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, SUA). și IFABP/FABP2 și LBP cu kitul Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. (Wuhan, China). Probele au fost testate pentru calprotectină cu kitul EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG. Toate testele au fost efectuate prin testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) pe un analizor ADALTIS GEN-4 și Victor X4 conform instrucțiunilor producătorului trusei.
Intervalul valorilor normale a fost definit de producătorul trusei numai pentru calprotectină după cum urmează: mai mic sau egal cu 50.0 mcg/g în mod normal, 50,1– 120,0 mcg/g ca valoare limită și Mai mare sau egal cu 120,1 mcg/g ca fiind pozitiv pentru boala intestinală. Pentru zonulină, producătorul trusei de reacție nu a specificat limite inferioare de detecție. Limita inferioară de detecție pentru trusa IFABP/FABP2 a fost 0,156 ng/mL, 3,125 ng/mL pentru LBP și 3,125 ng/mL pentru calprotectină. Pentru zonulină, I-FABP/FABP2 și LBS/LBP, producătorul kitului nu a comunicat un interval de valori normale, iar valorile utilizate de alți autori în studiile lor au fost utilizate. Serul a fost extras din fiecare probă de sânge prin centrifugare la 3000 × g. timp de 30 de minute folosind o centrifugă Thermo Scientific SL16R.
Toate serurile obținute au fost păstrate congelate la -200 ◦C până la efectuarea analizelor. Pentru IFABP/FABP2 și LBP, probele au fost diluate la 1/2 cu un tampon de diluare a probei înainte de testare. Probele de scaun au fost păstrate la -20 ◦C până în ziua testării. Extracția probei de scaun a fost efectuată folosind un tampon de extracție de 980 ui împreună cu 20 mg de scaun, s-a agitat timp de 30 de secunde și apoi s-a centrifugat la 2000 x g timp de 10 minute folosind centrifuga Thermo Scientific SL16R. Diluarea probelor sa efectuat apoi cu un tampon de probă de 980 ui și un supernatant de extracție de 20 ui.
Pentru cei patru markeri, au fost utilizate microplăci cu 96 de godeuri acoperite cu anticorpi de captură: anticorpi anti-calprotectină, anticorpi anti-IFABP/FABP2, anticorpi anti-LBP sau anticorpi anti-zonulină. Principiile testului au fost aceleași bazate pe tehnologia de testare imunologică legată de enzime (ELISA). Probele standard, probe de testare și anticorpi de detectare conjugați cu biotină au fost adăugate ulterior în godeuri. Substraturile TMB (3,30,5,50-tetrametilbenzidină) au fost utilizate pentru a vizualiza reacția enzimaticăHRP (peroxidază de hrean). HRP a catalizat TMB pentru a produce un produs albastru care s-a schimbat în galben după adăugarea unei soluții de stopare a acidului.
Densitatea punctului galben a fost proporțională cu cantitatea de probă capturată în placă. Intensitatea culorii a fost măsurată la 450 nm în cititorul de microplăci și apoi a fost calculată concentrația țintă.
2.4. Analize statistice
Analiza statistică a fost efectuată utilizând software-ul de statistică IBM SPSS versiunea 23 (Armonk, NY, SUA: IBM Corp.). Datele sunt prezentate ca mediană și IQR (interquartilintervalul P75–P25) pentru variabile continue în cazul distribuțiilor asimetrice sau sub formă de procente pentru variabilele categoriale.
Întrucât testul de normalitate Shapiro–Wilk a indicat, în cazul variabilelor continue analizate, valori statistice ale testului a căror probabilitate (p) a fost mai mică decât nivelul de semnificație {{0}}.05, condiția de normalitatea nu a fost îndeplinită, cu excepția variabilelor LBP și PHQ 9, pentru care p >=0.05. Am considerat că abordarea anonparametrică a studiului corelației dintre variabilele în cauză, cu prezentarea coeficientului de corelație rho Spearman (ρ) și probabilitatea (p) asociată acestuia, a fost mai adecvată. Nivelul de semnificație a fost stabilit la 0,05.
Medicament natural din plante pentru ameliorarea constipatiei-Cistanche
Cistanche este un gen de plante parazite care aparține familiei Orobanchaceae. Aceste plante sunt cunoscute pentru proprietățile lor medicinale și au fost folosite în Medicina Tradițională Chineză (MTC) de secole. Speciile de Cistanche se găsesc predominant în regiunile aride și deșertice din China, Mongolia și alte părți ale Asiei Centrale. Plantele de Cistanche se caracterizează prin tulpinile lor cărnoase, gălbui și sunt foarte apreciate pentru potențialele lor beneficii pentru sănătate. În MTC, se crede că Cistanche are proprietăți tonice și este folosit în mod obișnuit pentru a hrăni rinichii, a spori vitalitatea și a susține funcția sexuală. De asemenea, este folosit pentru a aborda probleme legate de îmbătrânire, oboseală și bunăstare generală. În timp ce Cistanche are o istorie lungă de utilizare în medicina tradițională, cercetările științifice asupra eficacității și siguranței sale sunt în desfășurare și limitate. Cu toate acestea, se știe că conține diverși compuși bioactivi, cum ar fi glicozide feniletanoide, iridoide, lignani și polizaharide, care pot contribui la efectele sale medicinale.
ale lui Wecistanchepulbere cistanche, tablete cistanche, capsule cistanche, iar alte produse sunt dezvoltate folosinddeşertcistancheca materii prime, toate având un efect bun asupra ameliorării constipației. Mecanismul specific este următorul: se crede că Cistanche are potențiale beneficii pentru ameliorarea constipației pe baza utilizării sale tradiționale și a anumitor compuși pe care îi conține. În timp ce cercetarea științifică în special asupra efectului Cistanche asupra constipației este limitată, se crede că are multiple mecanisme care pot contribui la potențialul său de a ameliora constipația. Efect laxativ:Cistanchea fost folosit de mult în medicina tradițională chineză ca remediu pentru constipație. Se crede că are un efect laxativ ușor, care poate ajuta la promovarea mișcărilor intestinale și la inducerea constipației. Acest efect poate fi atribuit diverșilor compuși din Cistanche, cum ar fi glicozidele feniletanoide și polizaharidele. Umidificarea intestinelor: Pe baza utilizării tradiționale, Cistanche este considerată a avea proprietăți de hidratare, vizând în mod specific intestinele. Promovarea hidratării și lubrifierii intestinelor poate ajuta la înmuierea instrumentelor și facilitează trecerea mai ușoară, ameliorând astfel constipația. Efect antiinflamator: Constipația poate fi uneori asociată cu inflamația tractului digestiv. Cistanche conține anumiți compuși, inclusiv glicozide feniletanoide și lignani, despre care se crede că au proprietăți antiinflamatorii. Prin reducerea inflamației din intestine, poate ajuta la îmbunătățirea regularității mișcărilor intestinale și la ameliorarea constipației.