Partea 3: Activarea unei axe hipocampale CREB-pCREB-miRNA MEF2 modulează variația individuală a capacității de învățare și memorie spațială

A lua legatura:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Plc faceți clic aici pentru partea 2

În mod unic, miR-466f{-3p pare a fi un regulator pozitiv al învățării spațiale șimemorie(Figurile 1 și 3). Acum este bine stabilit că biogeneza, activitatea și degradarea unor miARN-uri specifice sunt implicate în reglarea plasticității neuronale responsabile de învățare și pe termen lung.memorieformarea (McNeill și Van Vactor, 2012), iar exprimarea greșită a unora dintre ele sunt asociate cu tulburări neurologice (Issler și Chen, 2015; Salta și De Strooper, 2017). De exemplu, la nevertebrata Aplysia California, miR-124 reglează plasticitatea sinaptică mediată de serotonină prin reglarea CREB (Rajasethupathy et al., 2009). Un rol pentru miARN-uri în stres asociat, dependent de amigdală

Cistanche poate îmbunătăți memoria

Figura 6. Fosforilarea stocastică a CREB hipocampal și activarea transcripțională a clusterului miR-466-669

(A) Hărți genetice ale mSfmbt2 și clusterul miR-466-669. Secvențele care codifică precursorul miARN ale clusterului miR-466-669 situat în intronul 10 al genei mSfmbt2 sunt prezentate ca casete gri. Prima nucleotidă a celor mai 50 de precursori de miARN (pre-mir-466m) este notată plus 1. Locațiile diferitelor părți ale transcripției primare a clusterului miR{-466-669 (A–H) care prezintă pozitiv (plus ) Semnalele RT-qPCR sunt indicate prin bare gri. Partea I care nu prezintă semnal () RT-qPCR este indicată de bara goală. TSS, presupusul site de început transcripțional al clusterului miR-466-669.

(B) Niveluri relative de expresie hipocampală ale ARNm mSfmbt2 ale șoarecilor GLN, care prezintă niveluri ridicate de miR-466f{-3p, în comparație cu șoarecii PLN (n=7 per grup). Valorile Ct ale mSfmbt2 sunt ~29–32.

(C) Nivelurile relative de expresie hipocampală ale transcripției primare a clusterului miR-466-669 (părțile B și G) ale șoarecilor GLN în comparație cu șoarecii PLN (n=10 per grup).

(D) Analiza Western blotting a expresiei fosfo-CREB (pCREB), CREB total (tCREB) și b-actină în hipocampul șoarecilor GLN, PLN și HC. Petele reprezentative sunt afișate (stânga), iar histograma din dreapta arată raportul relativ pCREB/tCREB după normalizarea la b-actină (n=16 per grup). (E) Diagramele de împrăștiere a corelației Pearson arată corelații între nivelurile de expresie hipocampală ale transcriptului primar al clusterului miR-466-669 și proteina pCREB/tCREB a GLN individual (n=18, R=0.52, *p=0.02, puncte) și șoarecii PLN (n=9, R=0.71, *p {= 0.03, respectiv pătrate). Nivelul mediu pentru șoarecii HC (n=9) a fost setat la 1.

(F) Analiza Western blotting a expresiei pCREB, tCREB și b-actină în neuronii hipocampali primari DIV14 la LTP indus chimic (de forskolină) și fosforilarea CREB inhibată chimic (prin 666-15). Neuronii au fost tratați cu 1 nM sau 2 nM de 666-15 timp de 1 oră și apoi tratați cu forskolină timp de 2 ore. Histograma arată rapoarte relative pCREB/tCREB.

(G și H) Compararea nivelurilor de expresie ale transcriptului primar al clusterului miR{-466f{-3p (G) și miR{-466-669 (H) în neuronii hipocampali primari DIV14 sub {{4} } și tratamentul cu forskolină așa cum este descris în (F). ARNm Nurr1 și homer1a sunt martori pozitivi. Semnalele RT-qPCR ale părților B și G indicate în (A) de mai sus au fost utilizate pentru a reprezenta transcrierea primară a clusterului miR-466-669.

Datele prezentate în (B)–(D) sunt prezentate ca medie ± SEM, iar datele din trei seturi independente de experimente (n {{0}} per grup) prezentate în (F) și (G) sunt prezentate ca medie ± SD. Semnificația statistică a fost evaluată prin testul t nepereche (B și C), one-ANOVA cu testul post hoc al lui Tukey (D, F și G) sau două-ANOVA cu testul post hoc al lui Tukey (H). Diferențe statistice: *p < 0.05,="" **p="">< 0,01,="" ***p="">< 0,001="" și="" ****p=""><>

învățarea și extincția fricii au fost clar demonstrate (Ronovsky și colab., 2019; Sillivan și colab., 2020). De asemenea, testul NOR crește expresia miR-183/96/182 în hipocamp (Woldemichael și colab., 2016). La fel ca miR-124, miR-134 specific creierului reglează negativ fricamemorieformarea și inducerea LTP în regiunea CA1 a hipocampului rozătoarelor prin reprimarea translațională a ARNm LimK1 (Gao și colab., 2010). În ceea ce privește recunoașterea spațiului și a obiectelormemorie, miR-132 este inductibil prin modularea dependentă de activitatea neuronală a CREB (Hansen și colab., 2016). Similar cu miR-132, am descoperit că activitatea neuronală induce miR-466f{-3p prin activarea transcripțională a CREB (Figurile 6F-6H). Cu toate acestea, spre deosebire de miR-466f{-3p, miR-132 este indus la șoareci cu performanțe mai bune sau slabe în MWMtask (Figurile 1BandS1A), probabil din cauza miR-132 fiind de asemenea inductibile de stres (Shaltiel et al., 2013), așa cum ar fi cazul în timpul sarcinii MWM de lungă durată și stresantă. Un alt motiv posibil pentru care rapoartele detectate nu se pot distinge în grupurile GLN și PLN este o limitare a metodei de detectare pe care am folosit-o, cu niveluri bazale ridicate de miR-132, precum și de ERK, împiedicându-ne capacitatea de a detecta modificări ale pliurilor în engramele rare ale lizatelor hipocampale. Deși miARN-urile din clusterul miR-466-669 prezintă grade mari de asemănare a secvenței, doar unii membri sunt induși în timpul antrenamentului MWM (Figura 1B), posibil datorită reglării transcripționale diferențiale și/sau reglării post-transcripționale în timpul biogenezei miARN (Michlewski și Ca ´ ceres, 2019; Siomi și Siomi, 2010).

Spre deosebire de aceste alte miARN, miR-466f{-3p a apărut în studiul nostru ca un regulator pozitiv al plasticității neuronale prin intermediul unui CREB-pCREB-miR-466f-3p - Axa MEF2A (Figurile 5 și 6). Sarcina MWM este cunoscută pentru a stimula fosforilarea CREB (Porte și colab., 2008). pCREB reglează pozitiv plasticitatea neuronală, precum șimemoriealocare și consolidare, în principal prin activarea transcripțională a diverșilor loci/gene genomice (Lisman et al., 2018). Datele noastre in vitro arată că activarea CREB prin fosforilare este necesară pentru expresia miR-466f{-3p (Figurile 6F și 6G). În mod semnificativ, paralel cu nivelurile crescute ale hipocampului miR-466f{{-3p (Figura 1B), am constatat că CREB a fost activat prin fosforilarea șoarecilor GLN, dar nu PLN (Figura 6D; vezi mai jos). Mai mult, abordarea noastră combinatorie de utilizare a supraexpresiei mediate de lentivirali și a inhibării cu bureți demonstrează că inducerea miR466-3p este o cauză principală a unei mai bune învățări spațiale șimemoriecapacitatea (Figura 3C). Corelați cu rezultatele sarcinii MWM, șoarecii care supraexprimă miR-466f{- 3p în hipocampul lor au prezentat LTP mai puternic, așa cum demonstrează creșterea fEPSP-urilor în raport cu virusul de control sau miR-sponge-virus- șoareci infectați (Figura 4B).

Din punct de vedere mecanic, miR-466f{-3p reprimă translația ARNm Mef2a, reducând astfel nivelurile proteinei MEF2A, un regulator negativ al creșterii coloanei dendritice induse de învățare și al creșterii spațiale.memorieformarea (Cole și colab., 2012; Flavell și colab., 2006), în hipocampul șoarecilor GLN (Figurile 5D, 5F și 5G). S-a raportat că MEF2A/2D inhibă inducerea sinapselor dendritice excitatorii (Flavell et al., 2006). Deși ambele studii anterioare, reflectând studiul nostru de aici folosind supraexpresia miR-466f{{-3p sau abordări de inhibare pe bază de burete miR (Figura 2A), au examinat arborizarea dendritică și nu au raportat diferențe între tip și MEF2 supraexpresie sau subiecți knockdown, niciunul dintre studii nu a analizat efectul asupra lungimii dendritice. Trebuie menționat aici că, deși 30 UTR al ARNm Mef2d adăpostește, de asemenea, un site de legare predictiv pentru miR-466f{-3p, supraexpresia miR{{{-466-f{{-3p nu a afectează activitatea reporterului unei plasmide purtate de Mef2d 30 UTR (datele nu sunt prezentate). În special, Cole și colab. (2012) au arătat că nivelurile de proteine ​​MEF2A/D sunt reglate în jos în hipocampul șoarecilor antrenați în labirintul de apă. În plus, deoarece șoarecii lor dresați cu supraexpresie MEF2 ulterioară au prezentat un spațiu spațial normalmemorie, ei au ajuns la concluzia că supraexpresia MEF2 a perturbat în mod specific formarea memoriei spațiale, dar nu existentă. Cu toate acestea, manipularea lor a memoriei a fost limitată temporal, deoarece vectorul virusului herpes simplex (HSV) utilizat pentru expresia transgenei a atins de obicei vârful la 2-4 zile după microinjecție și s-a disipat la 8-12 zile după microinjecție (Cole și colab., 2012). Pe de altă parte, am folosit lentivirus, al cărui ADN ar fi integrat în cromozomii gazdei, conferind infecție permanentă, permițând o manipulare de lungă durată a învățării/memorie(Figura 3). În cele din urmă, o mică proporție (25 la sută) de șoareci GLN nu au prezentat inducție miR-466f{{-3p în timpul sarcinii MWM (Figura 1C), sugerând că alți factori și/sau căi pot contribui la învăţarea spaţială şimemoriecapacitatea acestor șoareci GLN. Am evaluat ARNm miR-335-5p și Sgk, ambele exprimate diferențial în timpul învățării spațiale și al formării memoriei (Capitano și colab., 2017; Tsai și colab., 2002). Cu toate acestea, spre deosebire de șobolani sau șoareci CD1, nu am observat nicio diferență în nivelurile hipocampale ale ARNm miR-335-5p sau Sgk ale șoarecilor GLN în raport cu șoarecii PLN (Figurile S1A și S5). Astfel, activarea stocastică a axei CREB-pCREB-miR-466f{-3p-MEF2A pare a fi cauza majoră care stă la baza variației individuale a învățării spațiale șimemoriecapacitatea șoarecilor noștri C57BL/6J consangviniți.

Expresia stochastică a genelor printre celulele identice genetic, care operează la nivelul transcripției, traducerii sau modificării post-traducționale, a fost studiată intens (Eling și colab., 2019; Reinius și Sandberg, 2015). Această stocasticitate stă la baza variabilității de la celulă la celulă a funcțiilor celulare și diversitatea ulterioară a caracteristicilor fenotipice manifestate în același micromediu ca răspuns la stimulii de mediu în timpul diferențierii/dezvoltării (Eling et al., 2019). Două exemple bine studiate de astfel de stocasticitate în expresia genelor la nivel celular sunt promotorul receptorului olfactiv și alegerea specifică a promotorului Pcdh în grupul de gene olfactive ale neuronilor senzoriali olfactivi individuali de la mamifere, care sunt ambii activați la comutarea epigenetică (Magklara și Lomvardas, 2013). ). Decizia stocastică și ireversibilă privind utilizarea promotorului Pcdh rezultă dintr-o combinație de variație a numărului de copii, modificări în metilarea ADN-ului și transcripția ARN necodificatoare (Canzio et al., 2019). În paralel, stocasticitatea expresiei genelor și remodelarea transducției semnalului în țesuturi specifice, inclusiv în hipocamp, printre rozătoarele identice genetic au fost observate anterior (Alfonso și colab., 2002; I GH și colab., 2014V). Studiul nostru prezintă o dovadă care arată că variația fenotipică a diferiților indivizi, în special variația în învățarea lor spațială șimemoriecapacitatea, este modulată de stocasticitatea activării CREB în hipocamp și de activarea transcripțională consecventă a clusterului miR- 466-669, ceea ce duce la niveluri crescute ale unui miARN specific (miR{-466f{-3p) inhibarea expresiei unui regulator negativ al memoriei (MEF2A). Cu toate acestea, nu este încă clar dacă alți miARN codificați de clusterul miR-466-669 contribuie, de asemenea, la o mai bună învățare șimemoriecapacitatea. Această eterogenitate fenotipică s-ar putea datora eterogenității celulare din hipocamp, care poate duce la variații ale expresiei genei engrame induse de activitate (Jaeger și colab., 2018; Rao-Ruiz și colab., 2019).

În acest moment, nu se cunoaște când și cum este determinată stocasticitatea activării hipocampului CREB la stimuli neuronali specifici. Este probabil să existe un mecanism specific de locus care să permită CREB fosforilat stocastic să activeze promotorul clusterului miR-466-669. Cu toate acestea, în prezent, nu există o bază de date publică disponibilă pe site-ul de început transcripțional (TSS) al acestui cluster miARN și există doar un motiv potențial de legare a CREB situat la 5 kb în amonte de presupusul TSS al clusterului miR-466-669 . Dacă pCREB activează acest grup de miARN direct sau indirect, nu se știe momentan, la fel și mecanismele care stau la baza. În special, clusterul miR-466-669 există doar la rozătoare. Cu toate acestea, miARN-urile umane has-miR-466 și hsa-miR-3941 au secvențe de semințe similare cu mmu-miR-466f{-3p de șoarece și sunt capabile să pară bazele cu 30 UTR al ARNm MEF2A uman, așa cum este prezis de miRWalk 2.0 (Sticht și colab., 2018). În plus, s-a demonstrat că un alt miARN uman cunoscut (hsa-miR-1) reglează negativ expresia MEF2A (Ikeda și colab., 2009). Astfel, activarea stocastică a axei CREB-pCREB-miR{-466f{{-3p-MEF2A descoperită în acest studiu reprezintă un mecanism general pentru generarea variației în interiorul speciilor a învățării spațiale șimemoriecapacitatea între diferiți indivizi care ar putea fi benefică din punct de vedere evolutiv pentru selecția naturală.

STEA plus METODE

Metodele detaliate sunt furnizate în versiunea online a acestei lucrări și includ următoarele:

d TABEL RESURSE CHEIE

d DISPONIBILITATEA RESURSELOR

B Contact principal

B Disponibilitatea materialelor

B Disponibilitatea datelor și codului

d MODEL EXPERIMENTAL ȘI DETALII SUBIECTULUI

B Animale

Culturi de celule B

d DETALII METODĂ

B Morris sarcină labirint de apă

B Test de recunoaștere a obiectelor noi (NOR)

B Sarcină labirint Barnes (BM).

Hibridarea cu microarray miARN B și analiza RT-qPCR

B Construcție plasmidă

Transfectarea celulelor B și tratamentul chimic Hibridarea in situ a miARN-ului B (ISH)

B Prepararea lizatului de proteine, western blot, colorare prin imuno-fluorescență și analiză imagistică

B Colorarea Golgi

B Infecția cu lentivirus recombinant a neuronilor hipocampali primari de șoarece

B Injecție de lentivirus recombinant în hipocampul șoarecelui

B Înregistrare cu patch-clamp pentru întreaga celulă

B Electrofiziologie

B Testul luciferazei reporter d CANTIFICARE ȘI ANALIZA STATISTICĂ

INFORMATII SUPLIMENTARE

Informații suplimentare pot fi găsite online la https://doi.org/10.1016/j. celrep.2021.109477.

MULȚUMIRI

Mulțumim Facilității Naționale RNAi Core de la Academia Sinica pentru prepararea lentivirusului recombinant, Facilității de bază Neuroscience Core de la Academia Sinica (AS- CFII-108-106) pentru tehnicile de înregistrare fEPSP și înregistrarea celulelor întregi în neuronii cultivați și Institutului de Moleculare Biology Imaging Core și Bioinformatics Core pentru asistență tehnică. De asemenea, mulțumim Dr. Hsien-Sung Huang (Universitatea Națională din Taiwan) pentru furnizarea vectorului lentiviral pFUGW-dsRed. Această cercetare a fost susținută de Universitatea de Medicină din Taipei, Premiul Frontier of Science (MOST 107-2321-B{-001-016); granturi de la Ministerul Științei și Tehnologiei (MOST), Taipei, Taiwan (MOST 108- 2320-B{-038-066 și MOST 109-2320-B{{-038-071); și un Senior Investigator Award de la Academia Sinica, Taipei, Taiwan.

CONTRIBUȚIILE AUTORILOR

I.-FW, K.-JT și C.-KJS au conceput experimentele. G.-JH a făcut colorarea Golgi. I.-FW, cu ajutorul lui YW și Y.-HY, a efectuat toate celelalte experimente. I.-FW a făcut analiza datelor. I.-FW și C.-KJS au scris manuscrisul.

DECLARAȚIE DE INTERESE

Autorii nu declară interese concurente.

INCLUZIUNEA ȘI DIVERSITATEA

Am lucrat pentru a asigura echilibrul sexual în selecția subiecților non-umani. Am lucrat pentru a asigura diversitatea probelor experimentale prin selectarea liniilor celulare. În timp ce cităm referințe relevante din punct de vedere științific pentru această lucrare, am lucrat activ și pentru a promova echilibrul de gen în lista noastră de referințe.

Primit: 27 aprilie 2020

Revizuit: 7 iunie 2021

Acceptat: 13 iulie 2021

Publicat: 3 august 2021

REFERINȚE

Abraham, WC, Jones, OD și Glanzman, DL (2019). Este plasticitatea sinapselor mecanismul pe termen lungmemoriedepozitare? NPJ Sci. Learn.4, 9. Alfonso, J., Pollevick, GD, Castensson, A., Jazin, E. și Frasch, ACC (2002). Analiza expresiei genelor în hipocampul de șobolan folosind PCR în timp real dezvăluie o variație inter-individuală ridicată a nivelurilor de expresie a ARNm. J. Neurosci. Res. 67, 225–234.

Asok, A., Leroy, F., Rayman, JB și Kandel, ER (2019). Mecanisme moleculare ale urmei de memorie. Tendințe Neurosci. 42, 14–22.

Attar, A., Liu, T., Chan, WT, Hayes, J., Nejad, M., Lei, K. și Bitan, G. (2013). Un protocol de labirint Barnes scurtat dezvăluiememoriedeficite la vârsta de 4-luni în modelul de șoarece triplu transgenic al bolii Alzheimer. PLoS ONE8, e80355. Bale, TL (2015). Reprogramarea epigenetică și transgenerațională a dezvoltării creierului. Nat. Pr. Neurosci. 16, 332–344. Belfield, JL, Whittaker, C., Cader, MZ și Chawla, S. (2006). Efecte diferențiate ale Ca2 plus și cAMP asupra transcripției mediate de MEF2D și proteina de legare a elementului de răspuns la cAMP în neuronii hipocampali. J. Biol. Chim. 281, 27724–27732.

Humeau, Y. și Choquet, D. (2019). Următoarea generație de abordări pentru a investiga legătura dintre plasticitatea sinaptică și învățare. Nat. Neurosci.

Bendesky, A. și Bargmann, CI (2011). Contribuții genetice la diversitatea comportamentală la interfața genă-mediu. Nat. Pr. Genet. 12, 809–820.

Bridi, MS, Hawk, JD, Chatterjee, S., Safe, S. și Abel, T. (2017). Activatorii farmacologici ai receptorilor nucleari NR4A îmbunătățesc LTP într-o manieră dependentă de CREB/CBP. Neuropsihofarmacologie 42, 1243–1253.

Canzio, D., Nwakeze, CL, Horta, A., Rajkumar, SM, Coffey, EL, Duffy, EE, Duffie´, R., Monahan, K., O'Keeffe, S., Simon, MD și colab. . (2019). Transcripția lncRNA antisens mediază demetilarea ADN-ului pentru a determina protocadherina stocastică o alegere promotoare. Celula 177, 639–653.e15.

Capitano, F., Camon, J., Licursi, V., Ferretti, V., Maggi, L., Scianni, M., Del Vecchio, G., Rinaldi, A., Mannironi, C., Limatola, C., şi colab. (2017). MicroARN-335- 5p modulează spațialmemorieși plasticitatea sinaptică a hipocampului. Neurobiol. Învăța. Mem. 139, 63–68.

Casellas, J. (2011). Tulpinile de șoarece consangvinizate și stabilitatea genetică: o revizuire. Animalul 5, 1–7.

Chen, YK și Hsueh, YP (2012). Proteina 2 care leagă Cortactina modulează mobilitatea cortactinei și reglează formarea și întreținerea coloanei dendritice. J. Neurosci. 32, 1043–1055.

Chen, YL și Shen, CK (2013). Modularea traducerii MAP1B dependentă de mGluR și a endocitozei receptorului AMPA prin microARN miR-146a-5p. J. Neurosci. 33, 9013–9020.

Chu, JF, Majumder, P., Chatterjee, B., Huang, SL și Shen, CJ (2019). TDP-43 reglementează procesele de transport-traducere a ARNm dendritic cuplat în cooperare cu FMRP și Staufen1. Cell Rep. 29, 3118–3133.e6.

Cohen, JE, Lee, PR, Chen, S., Li, W. și Fields, RD (2011). Reglarea microARN a plasticității sinaptice homeostatice. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 108, 11650–11655.

Cole, CJ, Mercaldo, V., Restivo, L., Yiu, AP, Sekeres, MJ, Han, JH, Vetere, G., Pekar, T., Ross, PJ, Neve, RL și colab. (2012). MEF2 reglează negativ plasticitatea structurală indusă de învățare șimemorieformare. Nat. Neu- rosci. 15, 1255–1264.

Danchin, E´ ., Charmantier, A., Champagne, FA, Mesoudi, A., Pujol, B. și Blanchet, S. (2011). Dincolo de ADN: integrarea moștenirii incluzive într-o teorie extinsă a evoluției. Nat. Pr. Genet. 12, 475–486.

Daugaard, I. și Hansen, TB (2017). Biogeneza și funcția ARN-urilor asociate Ago. Trends Genet. 33, 208–219.

Ekstrom, AD, Arnold, AE și Iaria, G. (2014). O revizuire critică a reprezentării spațiale alocentrice și a bazelor sale neuronale: către o perspectivă bazată pe rețea. Față. Zumzet. Neurosci. 8, 803.

Eling, N., Morgan, MD și Marioni, JC (2019). Provocări în măsurarea și înțelegerea zgomotului biologic. Nat. Pr. Genet. 20, 536–548.

Flavell, SW, Cowan, CW, Kim, TK, Greer, PL, Lin, Y., Paradis, S., Griffith, EC, Hu, LS, Chen, C. și Greenberg, ME (2006). Reglarea dependentă de activitate a factorilor de transcripție MEF2 suprimă numărul sinapselor excitatorii. Știința 311, 1008–1012.

Gao, J., Wang, WY, Mao, YW, Grff, J., Guan, JS, Pan, L., Mak, G., Kim, D., Su, SC și Tsai, LH (2010). O cale nouă regleazămemorieși plasticitate prin SIRT1 și miR-134. Natura 466, 1105–1109.

Hansen, KF, Sakamoto, K., Aten, S., Snider, KH, Loeser, J., Hesse, AM, Page, CE, Pelz, C., Arthur, JS, Impey, S. și Obrietan, K. (2016). Ștergerea direcționată a miR-132/-212 afecteazămemorieși modifică transcriptomul hipocampic. Învăța. Mem. 23, 61–71.

Holmes, JR și Berkowitz, A. (2014). Orientarea dendritică și ramificarea disting o clasă de interneuroni spinali multifuncționali de broasca testoasă. Față. Circuite neuronale 8, 136.

Huang, GJ, Ben-David, E., Tort Piella, A., Edwards, A., Flint, J. și Shifman, S. (2012). Dovezi neurogenomice pentru un mecanism comun al efectelor antidepresive ale exercițiilor fizice și fluoxetinei cronice la șoareci. PLoS ONE 7, e35901.

Ikeda, S., He, A., Kong, SW, Lu, J., Bejar, R., Bodyak, N., Lee, KH, Ma, Q., Kang, PM, Golub, TR și Pu, WT (2009). MicroARN-1 reglează negativ expresia calmodulinei și genelor Mef2a asociate hipertrofiei. Mol. Celulă. Biol. 29, 2193–2204.

Inoue, K., Hirose, M., Inoue, H., Hatanaka, Y., Honda, A., Hasegawa, A., Mochida, K. și Ogura, A. (2017). Clusterul MicroARN specific rozătoarelor din gena Sfmbt2 este imprimat și esențial pentru dezvoltarea placentară. Cell Rep. 19, 949–956.

Issler, O. și Chen, A. (2015). Determinarea rolului microARN-urilor în tulburările psihiatrice. Nat. Pr. Neurosci. 16, 201–212.

Jaeger, BN, Linker, SB, Parylak, SL, Barron, JJ, Gallina, IS, Saavedra, CD, Fitzpatrick, C., Lim, CK, Schafer, ST, Lacar, B. și colab. (2018). O nouă semnătură transcripțională evocată de mediu prezice reactivitatea neuronilor cu granule dentate unice. Nat. comun. 9, 3084.

Jensen, P., Myhre, CL, Lassen, PS, Metaxas, A., Khan, AM, Lambertsen, KL, Babcock, AA, Finsen, B., Larsen, MR și Kempf, SJ (2017). TNFa afectează căile de semnalizare neuroprotectoare mediate de CREB ale plasticității sinaptice în neuroni, așa cum sunt relevate de proteomică și fosfo-proteomică. Odată- ținta 8, 60223–60242.

Kandel, ER (2012). Biologia moleculară amemorie: cAMP, PKA, CRE, CREB-1, CREB-2 și CPEB. Mol. Creierul 5, 14.

Kluiver, J., Gibcus, JH, Hettinga, C., Adema, A., Richter, MK, Halsema, N., Slezak-Prochazka, I., Ding, Y., Kroesen, BJ și van den Berg, A. (2012). Generarea rapidă de bureți microARN pentru inhibarea microARN. PLoS ONE 7, e29275.

Lee, MC, Yu, WC, Shih, YH, Chen, CY, Guo, ZH, Huang, SJ, Chan, JCC și Chen, YR (2018). Ionul de zinc induce rapid oligomeri amiloid-b toxici, în afara căii, diferiți de liganzii difuzibili derivați de amiloid-b în boala Alzheimer. Sci. Rep. 8, 4772.

Leger, M., Quiedeville, A., Bouet, V., Haelewyn, B., Boulouard, M., Schumann- Bard, P. și Freret, T. (2013). Test de recunoaștere a obiectelor la șoareci. Nat. Protoc.8, 2531–2537.

Lisman, J., Cooper, K., Sehgal, M. și Silva, AJ (2018).Memorieformarea depinde atât de modificările specifice sinapselor ale forței sinaptice, cât și de creșterile specifice celulei ale excitabilității. Nat. Neurosci. 21, 309–314.

Locke, ME, Milojevic, M., Eitutis, ST, Patel, N., Wishart, AE, Daley, M. și Hill, KA (2015). Variația numărului de copii genomice în Mus musculus. BMC Genomics 16, 497.

Lois, C., Hong, EJ, Pease, S., Brown, EJ și Baltimore, D. (2002). Transmiterea liniei germinale și expresia specifică țesuturilor a transgenelor eliberate de vectori lentivirali. Știința 295, 868–872.

Loos, M., Koopmans, B., Aarts, E., Maroteaux, G., van der Sluis, S., Verhage, M. și Smit, AB; Neuro-BSIK Mouse Phenomics Consortium (2015). Variația în cadrul tulpinii a comportamentului diferă în mod constant între tulpinile comune de șoareci consangvinizate. Mamm. Genomul 26, 348–354.

Lorsch, ZS, Hamilton, PJ, Ramakrishnan, A., Parise, EM, Salery, M., Wright, WJ, Lepack, AE, Mews, P., Issler, O., McKenzie, A. și colab. (2019). Reziliența la stres este promovată de o rețea transcripțională condusă de Zfp189-în cortexul prefrontal. Nat. Neurosci. 22, 1413–1423.

Magklara, A. și Lomvardas, S. (2013). Expresia stohastică a genelor la mamifere: lecții din olfactiv. Trends Cell Biol. 23, 449–456.

Malhotra, SS, Suman, P. și Gupta, SK (2015). Degradarea gonadotropinei corionice alfa sau beta-umană scad fuziunea celulelor BeWo prin reglarea în jos a activării PKA și CREB. Sci. Rep. 5, 11210.

McNeill, E. și Van Vactor, D. (2012). MicroARN-urile modelează peisajul neuronal. Neuron 75, 363–379.

Michlewski, G. și Ca´ceres, JF (2019). Controlul post-transcripțional al biogenezei miARN. ARN 25, 1–16.

Oey, H., Isbel, L., Hickey, P., Ebaid, B. și Whitelaw, E. (2015). Variația genetică și epigenetică între tovarășii de șoarece consangviniți: identificarea regiunilor inter-individuale metilate diferențial. Epigenetică Cromatina8, 54.

Siegel, G., Obernosterer, G., Fiore, R., Oehmen, M., Bicker, S., Christensen, M., Khudayberdiev, S., Leuschner, PF, Busch, CJ, Kane, C. și colab. . (2009). Un ecran funcțional implică reglarea dependentă de microARN-138-a de-

Pavlicev, M., Cheverud, JM și Wagner, GP (2011). Evoluția tiparelor de variație fenotipică adaptivă prin selecție directă pentru evoluție. Proc. Biol.

Sci. 278, 1903–1912. Pedersen, CA, Vadlamudi, S., Boccia, ML și Moy, SS (2011). Variații în comportamentul mamei la șoareci C57BL/6J: comparații comportamentale între descendenții adulți ai mamelor care lingă puii înalți și mici. Față. Psihiatrie2,42. Pitts, MW (2018). Procedura labirintului Barnes pentru învățarea spațială șiMemorieîn Şoareci. Biol. Protoc. 8, e2774. Porte, Y., Buhot, MC și Mons, NE (2008). Spațialmemorieîn labirintul de apă Morris și activarea proteinei de legare a elementului de răspuns ciclic AMP (CREB) în hipocampul șoarecelui. Învăța. Mem. 15, 885–894. Rajasethupathy, P., Fiumara, F., Sheridan, R., Betel, D., Puthanveettil, SV, Russo, JJ, Sander, C., Tuschl, T. și Kandel, E. (2009). Caracterizarea ARN-urilor mici în Aplysia dezvăluie un rol pentru miR-124 în constrângerea plasticității sinaptice prin CREB. Neuron 63, 803–817. Rao-Ruiz, P., Couey, JJ, Marcelo, IM, Bouwkamp, ​​CG, Slump, DE, Matos, MR, van der Loo, RJ, Martins, GJ, van den Hout, M., van IJcken, WF , şi colab. (2019). Profilarea transcriptomului specific engramei a consolidării memoriei contextuale. Nat. comun. 10, 2232. Reinius, B. și Sandberg, R. (2015). Expresia monoalelică aleatorie a genelor autosomale: transcripție stocastică și reglare la nivel de alele. Nat. Pr. Genet. 16, 653–664. Rogerson, T., Cai, DJ, Frank, A., Sano, Y., Shobe, J., Lopez-Aranda, MF și Silva, AJ (2014). Etichetarea sinaptică în timpul alocării memoriei. Nat. Pr. Neurosci. 15, 157–169. Ronovsky, M., Zambon, A., Cicvaric, A., Boehm, V., Hoesel, B., Moser, BA, Yang, J., Schmid, JA, Haubensak, WE, Monje, FJ și Pollak, DD (2019). Un rol pentru miR-132 în siguranța învățată. Sci. Rep. 9, 528. Salta, E. și De Strooper, B. (2017). ARN necodificatori în neurodegenerare. Nat. Pr. Neurosci. 18, 627–640. Sastry, L., Johnson, T., Hobson, MJ, Smucker, B. și Cornetta, K. (2002). Titrarea vectorilor lentivirali: compararea metodelor de exprimare a ADN, ARN și marker. Gene Ther. 9, 1155–1162. Schneider, A., Hommel, G. și Blettner, M. (2010). Analiza de regresie liniară: partea 14 a unei serii de evaluare a publicațiilor științifice. Dtsch. Arztebl. Int. 107, 776–782. Schneider, CA, Rasband, WS și Eliceiri, KW (2012). NIH Image to ImageJ: 25 de ani de analiză a imaginii. Nat. Metodele 9, 671–675. Shaltiel, G., Hanan, M., Wolf, Y., Barbash, S., Kovalev, E., Shoham, S. și Soreq, H. (2013). MicroARN hipocampal-132 mediază deficiențe cognitive induse de stres prin ținta sa de acetilcolinesterază. Structura creierului. Funct. 218, 59–72.

Sillivan, SE, Jamieson, S., de Nijs, L., Jones, M., Snijders, C., Klengel, T., Joseph, NF, Krauskopf, J., Kleinjans, J., Vinkers, CH, et al. (2020). Reglarea microARN a memoriei persistente îmbunătățite de stres. Mol. Psihiatrie25, 965–976.

Siomi, H. și Siomi, MC (2010). Reglarea posttranscripțională a biogenezei microARN la animale. Mol. Celula 38, 323–332.

Sticht, C., De La Torre, C., Parveen, A. și Gretz, N. (2018). miRWalk: O resursă online pentru predicția site-urilor de legare a microARN. PLoS ONE13, e0206239.

Thomas, KT, Anderson, BR, Shah, N., Zimmer, SE, Hawkins, D., Valdez, AN, Gu, Q. și Bassell, GJ (2017). Inhibarea microARN miR-137 asociată schizofreniei perturbă transducția semnalului neurodezvoltării Nrg1a. Cell Rep. 20, 1–12.

Tsai, KJ, Chen, SK, Ma, YL, Hsu, WL și Lee, EH (2002). sgk, o genă primară indusă de glucocorticoizi, faciliteazămemorieconsolidarea învățării spațiale la șobolani. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 99, 3990–3995.

Vedell, PT, Svenson, KL și Churchill, GA (2011). Variația stocastică a abundenței transcriptului la șoarecii C57BL/6J. BMC Genomics 12, 167.

e´gh, MJ, Rausell, A., Loos, M., Heldring, CM, Jurkowski, W., van Nierop,V P., Paliukhovich, I., Li, KW, del Sol, A., Smit, AB , şi colab. (2014). Nivelurile matricei extracelulare hipocampale și stochasticitatea expresiei proteinei sinaptice cresc odată cu vârsta și sunt asociate cu declinul cognitiv dependent de vârstă. Mol. Celulă. Proteomics 13, 2975–2985.

Vorhees, CV și Williams, MT (2014). Evaluarea învățării și memoriei spațiale la rozătoare. ILAR J. 55, 310–332.

Wang, IF, Guo, BS, Liu, YC, Wu, CC, Yang, CH, Tsai, KJ și Shen, CK (2012a). Activatorii autofagiei salvează și atenuează patogeneza unui model de șoarece cu proteinopatii ale proteinei de legare a ADN-ului TAR 43. Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 109, 15024–15029.

Wang, W., Kwon, EJ și Tsai, LH (2012b). MicroARN în învățare, memorie și boli neurologice. Învăța. Mem. 19, 359–368.

Woldemichael, BT, Jawaid, A., Kremer, EA, Gaur, N., Krol, J., Marchais, A. și Mansuy, IM (2016). Clusterul de microARN miR-183/96/182 contribuie la memoria pe termen lung într-un mod dependent de proteina fosfatază 1-. Nat. comun. 7, 12594.

Xie, F., Li, BX, Kassenbrock, A., Xue, C., Wang, X., Qian, DZ, Sears, RC și Xiao, X. (2015). Identificarea unui inhibitor puternic al transcripției genelor mediate de CREB cu activitate anticanceroasă eficientă in vivo. J. Med. Chim. 58, 5075–5087.